1. hujayralarni kullanish

Qattiq muhitda etishtirish usullari


Qattiq yuzada ommaviy madaniyat

Qattiq sirtda koloniyalarni o'stirish orqali maksimal hujayra zichligiga erishiladi , chunki bu holda suyuqlik faqat oraliq (hujayralararo) bo'shliqda bo'ladi va umumiy hajmning 20 dan 30% gacha (zich o'ralgan jismlarning 27%), hajmidan qat'i nazar). Agar inokulum juda suyultirilgan bo'lsa, har bir hujayra alohida koloniyaga bo'linadi. Bu ommaviy madaniyat uchun foydali bo'lishi mumkin, agar koloniyani tanlash biron bir xususiyatga ko'ra amalga oshirilsa (masalan, faqat "silliq" koloniyalarni tashkil etuvchi variantni etishtirish kerak bo'lsa ). Ko'pincha , emlash suyultirilmaydi va u muhitning butun yuzasiga teng ravishda taqsimlanadi. Bunday holda, mikroorganizmlar doimiy maysazor shaklida o'sadi. Qattiq sirt odatda muhitga agar yoki boshqa sertleştirici qo'shgandan keyin olinadi . Idishdagi suyuq muhit yuzasiga joylashtirilgan membranada koloniyalar o'sishining bir qancha usullari ham ma'lum. Qattiq muhitda bakteriyalarning ommaviy kulturasi suyuq muhitda yetishtirilgan kulturaga nisbatan bir qator afzalliklarga ega.

1. Qattiq muhitda o'stirilgan kulturalarda hujayralarni yig'ish uchun sentrifuga yoki boshqa vositalardan foydalanishning hojati yo'q, chunki bu kulturalarda hujayralar allaqachon konsentrlangan holatda bo'ladi. Ayniqsa , ko'p miqdorda patogen yoki boshqa zararli mikroorganizmlar olinganda santrifüjdan qochish kerak , chunki aerozollar hosil bo'ladi. Hujayralarni qalinlashtirish va biomassani yig'ish uchun , agar muhitining yuzasiga pipetka bilan oz miqdorda steril tuz yoki tampon qo'llaniladi va steril shisha spatula yordamida o'sib chiqqan koloniyalar to'xtatiladi . Petri idishlaridagi agar muhiti yuzasidan, katta yassi kulturali gilamchalarda va Pyrex qopqoqlari bilan qoplangan katta yassi idishlarda katta miqdordagi hujayralarni shu tarzda olish mumkin .
2. Qattiq kulturalar makromolekulyar komponentlardan nisbatan xoli va ozuqa muhitining zarrachalaridan butunlay xoli bo‘ladi, chunki ular odatda agar jeli ichida bo‘ladi. Bundan tashqari, qattiq kulturalar past molekulyar og'irlikdagi ozuqa moddalari va mikroorganizmlarning metabolik mahsulotlaridan nisbatan ozoddir , chunki ularning erishi uchun juda katta hajmdagi muhit talab qilinadi. Shuning uchun qattiq muhitda o'stirilgan madaniyatlar, ayniqsa, hujayra suspenziyasining tozaligi muhim bo'lgan tajribalar uchun (antijenlarni tayyorlash yoki boshqa maqsadlarda ) foydalidir .
3. Qattiq muhitda boshqa yo'l bilan erishib bo'lmaydigan natijalarga erishish mumkin. Masalan, miksobakteriyalarning meva tanalari va ayrim Bacillus turlarining endosporalari faqat kulturalar qattiq muhitda o'sganda hosil bo'ladi. Bu faqat shu sharoitda bakteriyalar o'zaro jismoniy aloqalarni saqlab qolishlari, shuningdek, bu holda hujayralarga atmosfera kislorodining maksimal darajada etkazib berilishi va metabolik mahsulotlarning (masalan, kislotalar) yuvilishi bilan izohlanadi. hujayra muhitidan ta'minlanadi. Agar bu sodir bo'lmasa, madaniyatning o'sishi bostirilishi mumkin.
, qattiq muhitda mikroorganizmlarni etishtirish suyuq muhitda etishtirish bilan solishtirganda ma'lum kamchiliklarga ega .
1. Qattiq madaniyat katta miqdordagi biomassani o'stirishda cheklovlarga ega. Bu hujayralarning grammini osongina olish imkonini beradi ; allaqachon o'nlab gramm o'stirish qiyin va laboratoriyada qattiq muhitda yuzlab gramm yoki kilogramm hujayralarni etishtirish mumkin emas.
2. Qattiq kulturalar hujayra populyatsiyasining bir xilligini ta'minlamaydi , ya'ni madaniyat fiziologik jihatdan heterojendir. Masalan , qattiq aerob muhitning yuqori qismidagi hujayralar (qatlam chuqurligi 1000 hujayragacha ) ozuqa moddalari kam, ammo kislorod miqdori yuqori, muhitning pastki qatlamlarida esa aksincha bo'lishi mumkin. Madaniyat texnik ma'noda ham heterojendir, chunki mikroorganizmlarning hujayralari va ozuqa muhiti notekis taqsimlangan .
3. Qattiq kulturalar muhitning ma'lum miqdori bo'yicha kam sonli hujayralar bilan tavsiflanadi.