9-bob. Hujayra yadrosining nonribozomal mahsulotlari

9-bob. Hujayra yadrosining nonribozomal mahsulotlari
Ribosmik bo'lmagan genlarning transkripsiyasi RNKlari RNK polimeraza II ishtirokida hosil bo'ladi, transkripsiya birligining boshlang'ich nuqtasidan sintezni boshlash va tugatish nuqtasida tugaydi. Bunday holda, bitta RNK molekulasi hosil bo'ladi, transkript - xabarchi RNKning kashfiyotchisi. Hajmi turli genlarning transkripsiyaviy birliklari sezilarli darajada farq qilishi mumkin 6 mingdan 200 minggacha nukleotidlar. Shuning uchun RNKning umumiy qismi, turli xil genlarda sintez qilingan turli uzunlikdagi molekulalarni o'z ichiga oladi. Bu birinchi navbatda sintez qilingan RNK yoki shunday deb ataladi heterojen yadroviy RNK (hnRNA), faqat yadroda uchraydi va sitoplazmada topilmaydi. Sitoplazma ichiga allaqachon o'zgarishlar natijasida hosil bo'lgan axborot RNKini oladi birlamchi RNK transkriptlarining (hnRNA) yadrosi. HnRNA qiymati talab qilinganidan bir necha baravar katta oqsil sintezi: 400 dan iborat bo'lgan "o'rtacha protein" sintezi uchun aminokislotalar, 1200 nukleotiddan iborat xabarchi RNK talab qilinadi. Aslida sintez qiluvchi oqsillar tarkibidagi xabarchi RNKlarning qiymati polisoma birlamchi transkriptlardan bir necha marta qisqaroq. Bu qisqartirish hnRNA-ning "pishib etish", qayta ishlash natijasidir, ammo boshqa tabiatga ega, ribosomal RNKni qayta ishlashga qaraganda. Eukaryot genining tuzilishi bo'lib chiqdi deb nomlangan nukleotidlarning o'zgaruvchan ketma-ketliklaridan iborat. Exons va intronlar. Eksonlar - bu DNKning kodlash bo'limlari ma'lumotlar va RNKning tarkibiy qismidir va intronlar o'z ichiga oladi messenjer RNK-ga kiritilmagan ketma-ketliklar. Birlamchi RNK transkripti genning to'liq nusxasini o'z ichiga oladi, hamma narsani o'z ichiga oladi ketma-ketliklar va ekzonlar va intronlar. Keyinchalik intronlar birlamchi transkriptdan, RNK fragmentlarining uchlaridan kesilgan kovalent ravishda o'zaro bog'lanadi, natijada umuman qisqaradi hosil bo'lgan xabarchi RNK molekulasi. Ushbu jarayon qabul qilindi biriktiruvchi ism. Ko'pgina sutemizuvchilar genlari o'z ichiga olganligi sababli ekzonlarga qaraganda ko'proq intronlar, RNK birikish jarayoni olib keladi juda uzun hnRNK molekulalari (birlamchi transkriptlar, tarkibida 50000 dan ortiq nukleotidlar) uzunlikka qisqartiriladi sitoplazmatik mRNK (odatda 500 dan 3000 gacha nukleotidlar) (rasm 97). HnRNK sintezlanib, o'stirilgach, u bir qator yadro oqsillari bilan bog'lanadi, hnRNP zarralarini hosil qilish (heterojen yadro ribonukleoprotein zarrachalar). Bunday holda, yadrolarda yuqori molekulyar og'irlikdagi hnRNK yaralanadi global oqsil zarralari, informatorlar. Har bir ma'lumot uchun uzunligi 500-600 nukleotid bo'lgan RNK segmenti mavjud. Bunday kompleks informofer va RNK monomer yoki 30S zarrachasini hosil qiladi. Har biri informofer tarkibiga informatinning 30 dan ortiq oqsil molekulalari kiradi. Shunday qilib mas'ul bo'lgan struktur genining asosiy transkripsiyasi xabarchi RNKning shakllanishi ulkan hnRNK molekulasi ko'plab oqsil zarralari bilan bog'langan, informofer.Informatorlar orasida hnRNK bo'limlari bo'lishi mumkin deb ishoniladi maxsus oqsil komplekslari yordamida biriktirish uchun ishlatiladi - splitseozomalar bo'yicha. Splitseozomada 5-7 ta kichik yadro mavjud ribonukleoproteinlar (snRNP) Ushbu maxsus kichik yadroli RNPlar (snRNPlar) doimiy bo'lgan RNP zarralari (U1, U2, U5, U4, U6 snRNP) cho'kindi jinsi taxminan 10S. Har bir zarrada bitta kichik molekula mavjud RNK (90-400 nukleotid) va taxminan etti oqsil molekulasi. Shunday qilib splitseozoma katta ribonukleoprotein kompleksi, ribosoma bilan solishtirish mumkin (sedimentatsiya konstantasi taxminan 60S). HnRNK sintezi paytida va undan keyin splikosomalar RNK zanjiri bilan bog'lanadi ekzonlar va intronlar orasidagi chegarada joylashgan joylar, ularni aniq tan olish joylar, intron tsikli tagida bo'sh joy hosil qiling, bepul tikib qo'ying tugaydi (98-rasm). Shu tarzda, intron sekanslari bo'limlari birlamchi transkriptdan ajratiladi, so'ngra tezda yadroda pasayish. Ushbu jarayon natijasida natijaning uzunligi RNK molekulalarini bir necha marta qisqartirish mumkin. Masalan, hajmi tiroglobulin oqsili geni mRNK kattaligidagi 300 ming nukleotitni o'z ichiga oladi chunki bu oqsil atigi 8,7 ming nukleotidni tashkil qiladi, chunki gen 36 intron ketma-ketlikni o'z ichiga oladi, ya'ni. sodir bo'ladiRNK molekulalarining 30 martadan ko'proq qisqarishi. Katalaz genining hajmi 34 ga teng kb, mRNK hajmi esa 1,6 kb ni tashkil qiladi. Qushlardagi ovalbumin genining hajmi 7,5 kbp ni tashkil qiladi va ushbu genga mos keladigan etuk mRNK atigi 1,8 ga teng
va hokazo Odatda mRNK birlamchi transkriptga, hnRNA ga nisbatan 2,5-10 baravar qisqa. MRNK pishib yetilgandan so'ng, u yadrodan unga o'tganda ishoniladi sitoplazma informoferni tashkil qiluvchi oqsillarni yo'qotadi, "kiyimlarini o'zgartiradi" yadro teshigida, informofer oqsillari esa yadroda qoladi. MRNK sitoplazmasida yana yangi oqsillar bilan kiyinib, "informosomalar" ni shakllantiradi mRNKni harakatsiz holatda saqlash yoki oqsillar bilan bog'lanish, eshittirish uchun zarur. Yadroda RNP komponentlarining morfologiyasi RRNK va mRNA transkriptlarining morfologiyasi to'g'risida olingan barcha ma'lumotlar, Informerlar va splitsozomalarda izolyatsiya qilinganlarni o'rganish natijasida olingan ostida, ushbu komponentlarning yadrolari uchun maxsus qayta ishlangan ularni elektron mikroskopga tayyorlashga tarqatish. RNP mahsulotlarining joyida, buzilmagan hajmdagi morfologiyasiga kelsak yadrolari, bu erda ma'lumotlar to'liq emas va qarama-qarshi. Yaxshi aniqlangan yadrodan tashqari, yadroviyning boshqa mahsulotlari ultratovush bo'limlarda hujayralarni o'rganishdagi faoliyat shoshilmang ko'zlar: ularni turli xil fibrillalardan (DNP, matritsa) va ba'zilaridan ajratish qiyinaftidan biron bir tartibsiz, granulalar yadroga tarqalgan. Shunga qaramay, tuzilmalarning uran tuzlari bilan selektiv qarama-qarshi usulini qo'llagan holda, tarkibida RNK mavjud bo'lgan bir qator tarkibiy qismlarni ajratish mumkin nukleolyar bo'lmagan transkripsiya mahsulotlariga tegishli. Bu - perikromatin fibrillalari, perikromatin granulalari va interkromatin granulalari (rasm 99b, 100). Saytlarning periferiyasi atrofida perikromatin fibrillalari uchraydi quyultirilgan xromatin (membranaga yaqin yoki boshqa har qanday narsa). Ular qalinligi taxminan 3-5 nm ga teng, ko'pincha bo'shashgan tartibsiz tarmoq hosil qiladi. Ma'lum bo'lishicha, yadroning ushbu komponenti stimulyatsiya paytida juda o'zgaradi RNK sintezi. Shunday qilib, kalamush jigar hujayralarida RNK sintezining ko'payishi bilan ro'za tutish va undan keyin ovqatlantirish yoki kortizon yuborilgandan keyin adrenalektomizatsiya qilingan hayvonlar perikromatin fibrillalari zonalari sezilarli darajada ko'payadi. Ushbu zonalar jihatidan eng faol bo'lib chiqdi ko'rsatilgan RNKga etiketli prekursorlarni kiritish elektron mikroskop yordamida radioavtografik. Bunday fibrillalar yangi sintez qilingan hnRNKni ifodalashi mumkin. Interfaza yadrosining RNK tarkibidagi tuzilmalarining yana bir turi perikromatin granulalari. Ularning diametri taxminan 45 nm va ular bilan o'ralgan engil halo. Ushbu granulalar faqat atrofda joylashgan. quyultirilgan xromatin, ular diffuz xromatinda yo'q. Bunga ishonishadi bu granulalar va perikromlangan fibrillalar orasidagi narsa tizimli aloqa mavjud. Granulalar ichida yuqori kattalashtirishda qalinligi 3-5 nm bo'lgan ingichka konvolutli fibrillalarni ko'rish mumkin. Perikromatin tipidagi yirik granulalar o'ziga xos tarzda topilgan polenit xromosomalarining RNK sinteziga nisbatan faol mintaqalari, yilda pufaklar (pastga qarang). Shu kabi granulalar yon ilmoqlarda topilgan ishlaydigan meiotik xromosomalar. Shunga asoslanib, ba'zilari tadqiqotchilar bunday ribonukleoproteinni taklif qilishadi granulalar bir nechta etuk komplekslar bo'lishi mumkin informofer, ribonukleoprotein zarralarini o'z ichiga oladi xabarchi RNK. Biroq, bu taxminni tasdiqlash kerak. Interkromatin granulalari RNK tarkibidagi tuzilmalarning uchinchi turi. Ularning kattaligi 20-25 nm va har doim klasterlar shaklida birlashtirilgan. xromatin sohalari orasida. Ushbu granulalar hajmi bo'yicha standart emas va ingichka fibrillalar bilan birlashtirilgan. So'nggi paytlarda snRNP ga qarshi antikorlar olingan. Bu chiqdi ular orasida har xil splitseozomalar, hajmi 20-30 nm bo'lgan donachalar mavjud. Bular snRNP kondensatlangan xromatin va bo'sh zonalarda joylashgan ularning lokalizatsiyasida klasterlar joylashgan zonalarga to'g'ri keldi interkromatin granulalari. Ular tirband bo'lishi mumkin hnRNK kamolotining so'nggi bosqichida qatnashadigan splikozomalar. Bunday holda, hnRNA sintezi dinamikasining butun rasmini taqdim etish mumkin o'zingizni quyidagicha. Xromatinning dekondensatsiyalangan mintaqalari (euxromatin) xromatinning quyuqlashgan zonalari periferiyasi bo'ylab bog'lanib RNK polimeraza II bilan hnRNK boshlang'ich shaklida transkripsiyalanadi informofer oqsillari bilan bog'lanadigan perikromlangan fibrillalar,
keyinchalik splitseozomalar ishtirokida kamolotga uchraydi (interkromatin granulalari), mRNKning etuk shakllarini keltirib chiqaradi - Informofer komplekslari yoki perikromatin granulalari. Ehtimol yo'q barcha etuk mRNKlar katta (45-60 nm) perikromatinga aylanishi mumkin granulalar va ikkinchisi, ehtimol yuqori bo'lgan RNKga xosdir
molekulyar og'irlik. RNP mahsulotlari interfaza yadrolarida boshqa topografiyaga ega o'simlik hujayralari. Shunday qilib, xromonemali tashkilotga ega bo'lgan yadrolarda interfaazali xromatin, RNP yirik granulalar shaklida (20-30 nm) va ingichka fibrillalar (6-8 nm) shunday kondensatsiyalangan periferiyada joylashgan xromatin va interkromatin zonalarida; hamma narsa ko'rinadi xromatinning xromonemal mintaqalari atrofi RNK sintezida ishtirok etadi (2-rasm).
100b).
Transkripsiya morfologiyasini o'rganishga urinishlar qilingan umumiy planar preparatlardagi nonribosomal genlar. Buning uchun yadrolarning gomogenatlari diffuz xromatinning bir qismini boyitganbelgilangan RNK prekursorlari. Faol xromatin yoqilgan bunday preparatlar kamdan-kam uchraydigan tipik nukleosomal fibrillalarning ko'rinishiga ega edi
RNK polimerazning bitta boncuklari o'tirgan Turli uzunlik va konfiguratsiyadagi RNK transkriptlari (101-rasm). Odatda bu qiyshiq fibrillalar bo'lib, ba'zan bo'sh uchida joylashgan global shakllanishlar. Ko'pincha, bitta o'rtasidagi masofa
RNK polimeraza granulalari 0,1-0,3 mkm ga yetdi, shuning uchun aksincha gendan faqat bitta nusxa ko'chirilgandek tuyuldir RNA genlaridan olingan bir nechta nusxalar. Biroq, kamdan-kam hollarda holatlar, yaqin joylashgan RNK bilan xromatin sohalari polimerazalar, turli uzunlikdagi stenogrammalar yon tomonga siljigan, "balıksırtı" ga o'xshash tuzilmalarni shakllantirish.
Maxsus genlarda transkripsiya morfologiyasini kuzatishga urinishlar turli xil narsalarda, shu jumladan politen xromosomalarida yaratilgan dipteranlar va meyotik profaza xromosomalari. Politen xromosomalari pufaklarida RNK sintezi Sintez va shakllanish morfologiyasini to'liqroq tushunish ba'zi gen mintaqalari transkripsiyasining yakuniy mahsulotlari politeni o'rganishda fazalararo xromosomalar olingan xromosomalar. Dipteradagi politen xromosomalarining tuzilishini nurli-optik o'rganish disklar va disklararo maydonlardan tashqari yana mavjudligini aniqladi xromosomalarning mahalliy kengayishi, deyiladi. puflar. Ushbu DNK mintaqalarida yo'q disklar shaklida joylashgan bo'lib, ular ko'pincha amorf tuzilishga ega tarkibida RNK, bazofil. Puflarda 3H- ning asosiy yoqilishi
uridin, bu ularning faolligini aniq ko'rsatib beradi ushbu o'ziga xos interfaza xromosomalarining bo'laklari.
Puflarning soni va ularning lokalizatsiyasi doimiy emas ma'lum bir politen xromosomasiga xos xususiyat. Bundan tashqari, rasm puflash (ya'ni xromosomalarda puflarning joylashishi) bitta va bo'yicha farq qiladi lichinkaning rivojlanish bosqichiga yoki turiga qarab bir xil xromosoma tadqiqot uchun olingan hujayralar. Puflarning paydo bo'lishi to'g'ridan-to'g'ri sintezning faollashishi bilan bog'liq bo'lganligi sababli RNK, ma'lum bir pufakning rivojlanishi aks etishi ko'rsatildi shaxsni yoki aniqlaydigan genlar guruhini faollashtirish ushbu bosqichda hujayralarning funktsional va metabolik xususiyatlari rivojlanish. Shuning uchun har xil tabaqalashgan hujayralarda rasm puflash bir xil bo'lmasligi kerak, bu aslida kuzatiladi (rasm 102).
RNK sintezi yemirilganda, puf susayib, pasayib bora boshlaydi hajmi, bazofiliyani yo'qotish va oxir-oqibat uning o'rnida siz ko'rishingiz mumkin u rivojlangan disk. Buni, ayniqsa, namoyishkorona ko'rish mumkin Chironomusning 4-xromosomasining katta puflari, ular halqalar deb ataladi Balbiani (KB). Demak, lichinka bosqichida uni 4-xromosomada ko'rish mumkin nukleus yaqinida KB1 va KB2 doimiy ikkita bazofil pufagi mavjud. Elektron mikroskopda bu kattalik zonasi ekanligi aniqlandi pufaklar tarkibida ko'plab ribonukleoprotein granulalari mavjud 50-60 nm hajmdagi tabiat. Ehtimol, bu granulalar mavjud xabarchi RNK va ringdagi tegishli informosomalar Balbiani 2 (KB2), maxsus tarzda joylashgan. Ultra yupqa bo'laklarda ular eksenel elementlar bo'ylab qatorlarga joylashtirilganligi kuzatilishi mumkin.
Har bir granulalar oyoq yordamida eksenel tuzilishga ulangan bo'lib chiqdi 14-16 nm qalinlikdagi fibrillalar (103-rasm). Ushbu rasm mos keladi 50-60 nm granulalar RNP mahsulotidir degan taxmin sintez jarayonida bo'lgan ma'lum bir xromosoma lokusi. Ustida Millerning so'zlariga ko'ra, KB2 ning bunday maydonlari namoyish etildi ekseneldan tashkil topgan ko'p sonli suyakka o'xshash tuzilmalar tarkibiy qismlar va ulardan chiqarilgan ko'plab ulkan transkriptlar,
uzunligi 7,7 mikrongacha bo'lgan. Bu holda transkriptsiya saytidan komplekslar bilan bog'liq bo'lgan o'rtacha 123 ta yirik transkriptni yuboradi RNK polimeraza.Ushbu morfologik kuzatuvlarni echish qachon mumkin edi
KB2 dan ajratilgan alohida RNKni tahlil qilish. Buning uchun mikromanipulyator, yadrolar ajratib olindi, so'ngra 4-chi tomonidan boshqalardan ajratildi xromosoma va mikrodissektsiya yordamida zonalar qazib olingan va to'plangan,
KB2 ni o'z ichiga oladi. Keyin, bu puflardan RNK ajratildi, bu gel elektroforezi yordamida tekshirildi. Izolyatsiya qilingan RNK bo'lib chiqdi katta o'lchamda, u pristavka bor edi. og'irligi 15-35 x 106 D, va koeffitsient cho'kindi jinsi 75S. Shunga ko'ra, ushbu 75S RNK genlarida 37 kb, chunki intronlar yo'q, chunki 75S RNK qayta ishlanmaydi va sekretor oqsillarning ulkan molekulalarini sintez qilish uchun matritsa bo'lib xizmat qiladi. Genlar 75S RNK sun'iy yo'ldosh DNKsi kabi qurilgan bo'lib chiqdi: ular tarkibiga kiradi ichki takrorlashlar ierarxiyasi mavjud.
75S RNK sintezi tugagandan so'ng uning molekulalari yirik (50-60) shaklida bo'ladi nm) RNP granulalari sitoplazma ichiga tashiladi. Biroq, muhim ba'zilari yo'q qilinadi: sitoplazmada ushbu RNKning atigi 4-7% topiladi.
Sitoplazmadagi ushbu ulkan RNK molekulalari ayniqsa katta bo'ladi 55-65 ribosomani o'z ichiga olgan polisomalar (700S), ular ustida tuprik bezlari hujayralari glikoproteidlarining uzun zanjirlari sintezlanadi qon qurtlari. (Aslida, bu bez hazm qilishda ishtirok etmaydi, bunday emas fermentlarni o'z ichiga oladi; uning vazifasi zarur proteinni sintez qilishdir
uy qurish va to'rlarni ushlash uchun lichinka). Meyotik xromosomalar bo'yicha transkripsiyasi
"Chiroq cho'tkasi" turidagi meiotik xromosomalar paydo bo'ladi (pastga qarang) asosan erkak va ayollarda meyozning diplomen bosqichida. Mitotik xromosomalar bilan solishtirganda, meiotik xromosomalar chiroq cho'tkalarining turi ancha uzunroq va nurda aniq ko'rinadi mikroskop ikki sababga ko'ra: ular juftlashgan va to'rt baravar uzunlikni o'z ichiga olishi uchun ikki barobar xromatidlar subbirliklar. Ammo bu xromosomalarning o'ziga xos xususiyati shundaki
lateral mavjudligiAmmo bu xromosomalarning o'ziga xos xususiyati shundaki bir nechta xromomeradan, juft bo'lib cho'zilgan yon ilmoqlarning mavjudligi nosimmetrik ravishda har bir gomolog bo'ylab joylashgan (104-rasm). To'liq
chiroq cho'tkalari, RNK sintezi kabi xromosomalarning halqalari uzoq muddatli meiotik profaza.
Binobarin, chiroq cho'tkasi xromosomalari, go'yo faol bo'lmagan maksimal o'rtasidagi oraliq holat quyuqlashgan xromosomalar va faol interfaza xromosomalar: xromomeralarning quyuqlashgan kesimlari mos keladi mitotik xromosomalarning joylari va lateral halqalar - faol joylar fazalararo xromosoma mintaqalari. Yon chiziqlar soni deb ishoniladi xromomerlar soniga to'g'ri keladi, faqat xromomerlar, tsentromerik maydonlarni ifodalovchi ilmoqlar o'tkazilmaydi. Shunday qilib, taroqda lampochka xromosomalari alohida o'rganilgan tritt, haploid to'plamiga 5000 ga yaqin xromomeralar mavjud mos ravishda diplomatik mitoz uchun 20000 lateral ilmoq xromosoma (mayozning profazasida hujayralarda tetraploid borligini eslang xromatidlar soni).
Chiroq cho'tkalari kabi xromosomalardagi lateral yoki lateral tsikllar tuzilishi bo'yicha bir jinsli emas. Oddiy yoki normal ustunlik qiladi uzunlik taxminan 10 um. Ular qalinligi bo'yicha assimetrik: in yorug'lik mikroskopi shuni ko'rsatadiki, tsiklning uchlaridan biri ingichka, ikkinchisi esa yog '; ochilmagan halqa takoz shaklida bo'ladi. Qismi sifatida yorug'lik mikroskopidagi oddiy tsikllar, har bir ilmoq yopilganligini ko'rish mumkin qopqoq yoki matritsa kabi noaniq donachaga ega fibrillar tuzilishi.
DNK halqalarning eksenel elementining bir qismidir va asosiy xromosoma DNK. Buni yonma-yon o'ralgan holda,
shuning uchun qayta ishlash jarayonida diplomatik xromosomalarning eksenel tarkibiy qismlari yirtilib ketadi
DNase. Yanal ilmoqlar RNK sinteziga qodir: 3H-uridin qo'shilishi butun uzunligi bo'ylab deyarli barcha tsikllarda uchraydi. Ilmoqlarda yangi sintez qilingan RNK oldindan, tezda oqsillar bilan birikadi sitoplazmada sintez qilinadi.
Oddiy halqalarni ultratovushli kesmalarda o'rganayotganda u topilgan ularning tarkibi 25-40 nm o'lchamdagi juda ko'p miqdordagi granulalardir interfaaza yadrosining inter-va perikromatin granulalari va ichida granulalar mavjud politen xromosomalarining puflari.
Yon ilmoqlarning tuzilishi elektron shaklda batafsil o'rganilgan tarqaladigan diplomatiya xromosomalarini tayyorlash bo'yicha mikroskop. Yon ko'chadan transkripsiyaning umumiy morfologiyasi aniqlandi lampochka tipidagi xromosomalar ularnikiga juda o'xshaydi ribosomal tsistronlar (104-rasm). Ko'pgina oddiy menteşeler bitta transkripsiya birligini anglatadi, transkripsiyaning boshlanishi u tsiklning bir uchida joylashgan va terminal qismi esa do'stim. Shunday qilib, bunday transkripsiya birligi ham shaklga ega "Herringbone", faqat halqa shaklida egilgan. Bu erda ham kuzatiladi transkriptlarning chiziqli gradienti: boshida qisqa va maksimal transkripsiya birliklarining uchlarida uzun (bir necha o'n nmgacha).
Transkriptlar bu erda ribonukleoproteinlar shaklida taqdim etilgan. IN past ionli kuchlarga ta'sir qilish natijasida ular 25-40 gacha bo'lgan globulalardan nm ko'pincha oxirida cho'zilgan, kavisli fibrillalarga aylanadi qalinlashuvga ega. Turli ko'chadan transkriptlarning morfologiyasi tengsiz. To'g'ri, chiziqli fibrillalar ham bor o'zlari ustiga o'ralgan buta fibrillalari, ehtimol ichida dupleksli RNK tuzilmalarining shakllanishi natijasida.
Ba'zi ilmoqlarda bir nechta transkripsiya bo'lishi mumkin bir xil va qarama-qarshi bo'lishi mumkin bo'lgan turli uzunlikdagi birliklar transkripsiyaning yo'nalishi (105-rasm). Transkripsiya intensivligi ham turli xil ko'chadanlarda bir xil emas: har birida 30 ta transkriptdan iborat ko'chadanlar mavjud 1 mikron va 3-5.
Vivo jonli transkripsiya faolligining pasayishi bilan yoki RNK sintezini eksperimental ravishda bostirish bilan ilmoqlar uzunligi kamayadi, ular nukleosomal tuzilishga ega bo'ladilar. Ayrim genlarning transkripsiya morfologiyasi
Yaqinda tadqiqot uchun yanada progressiv yondashuv taklif qilindi individual strukturaviy (kodlash) transkripsiyasining morfologiyasi polipeptid zanjirlari) genlari. Buning uchun X. laevisning oositlari, yadrolarida har qanday
molekulalar, shu jumladan DNK. Agar bunday kirish uchun biz olsak klonlangan genlar, keyin Millerga ko'ra giyohvand moddalarni olish, siz topishingiz mumkin DNK molekulalari nukleoli va xromosomalardan ajralib turadi, ular sharoitda
oosit yadrolarida yuqori transkripsiya faolligi, o'z navbatida transkripsiya jarayonida qatnashadilar. Bu kuzatishga imkon beradi individual genning transkripsiyaviy faoliyati.
Shunday qilib, ootsitlar yadrosiga kichik tsiklik hujayralar kiritildi. klonlangan tovuq ovalbumin genlarining molekulalari. Katta in'ektsiya ushbu genlarning soni (har bir yadro uchun 2-5 ng) yadroda bo'lishiga olib keldi bir necha yuz tsiklik molekulalarning klasterlari hosil bo'ldi oositlarning o'z xromatin elementlaridan farq qiladi. Bu chiqdi AOK qilingan materialning 80-90% inaktiv ekanligi. Ushbu holatda individual tsiklik gen molekulalari to'liq qoplandi
nukleosomalar va tarkibida transkripsiya komplekslari (RNK- polimeraza sintez qilingan RNK zanjiri bilan birgalikda).
AOK qilingan genlarning ozgina qismi odatiy edi transkripsiya komplekslari. Bunday faollashtirilgan genlar orasida
kamida uchta morfologik sinf mavjud. Birinchi holda bular zaif transkripsiyaga ega dumaloq molekulalar edi (3-10
1 mm xromatin uzunligiga transkriptlar), transkriptlar har xil uzunlikda bo'lgan va chiziqli gradientga ega emas edi. Boshqa holatda, kuzatilgan intensiv transkripsiyalangan tsiklik xromatinli mintaqalar DNK molekulasining butun uzunligi bo'ylab transkripsiya komplekslari (30-501 mkm xromatin uchun transkriptlar). Bu erda stenogrammalargacha bo'lgan 1,2 mikron. RNK intensiv transkripsiya qilingan hududlarda doimo bo'lgan uzunlik gradyenti bo'ylab joylashgan bo'lib, "ringa suyaklari" ga o'xshash maydonlarni hosil qiladi. nukleolyar DNKning transkripsiyaviy birliklarida. Birlamchi transcript klonlangan tovuq ovalbumin genida mintaqalarni kodlash mavjud ketma-ketliklar (ekzonlar) va intronlar. Yaqinda shunga o'xshash tayyorgarlik to'g'risida filamentli transkriptlar bilan birlashmalar, globular splitseozomalar.
Shunday qilib, har qanday shaxsning ishini kuzatish mumkin genlar.