9-laboratoriya ishi Mavzu: Dorivor o’simliklardan olinadigan biologik faol moddalar va ularni aniqlash usullari

9-laboratoriya ishi
Mavzu: Dorivor o’simliklardan olinadigan biologik faol moddalar va ularni aniqlash usullari
α, β, Нейроспорин каротиноидларни миқдорий аниқлаш.
Physalis баргларидаги каротиноидларни миқдорий аниқлаш учун обейктннг аналитик намунаси диаметри 0.5 мм тешиклари бўлган элакдан ўтадиган кукун ҳажмига қадар майдала болдик. Тахминан 1 г майдаланган хомашё 100 мл ли колбага солинадик ва 10 мл хлороформ қўшиладик. Олинган аралшмани сув ҳаммомида 15 дақиқа қайнатиладиб олдик. Аралашмани совутгандан сўнг, экстракт ПОР-40 шиша фильтри орқали 50 мл ҳажмли ўлчов колбасига фильтрланади. Чиқиб кетган хомашё юқоридаги усул билан яна учтака маювчи қисм (15, 10 ва 5 мл) билан экстракция қилинди. Барча экстрактлар бир хил фильтрдан бир хил ўлчов колбасига фильтрланди ва экстракт ҳажми хлороформ билан белгига мослаштирилди. Олинган каротиноидлар эритмасининг оптик зичлиги қатлам қалинлиги 5 мм бўлган кюветларда 485 нм тўлқин узунлигидаги спектрофотометрда ўлчанди. Назорат сифатида хлороформ ишлатик. Умумий каротиноидларнинг нейроспорин-каротинга нисбатан мг% (Х) даги таркиби қуйидаги формула бўйича ҳисобланади:

буерда: D – текширилувчи эритманинг оптик зичлиги;
m – хомашёнинг массаси, граммда;
W- хомашёни қуритиш пайтида вазн йўқотиш, фоизларда;
2000 - хлороформ б-каротиннинг ўзига хос ютилиш даражаси.
Юқорида келтирлган кетма кетлик асосида каратиноиднинг α турини ҳам миқдорий анализ қилдик. Бунда ҳам дастлаб хомашёдан 1 г миқдорда электрон тарозида ўлчаб олдик ва кукун холига келгунча майдаладик. Кукун холига келган хомашёни 10мл хлорофоримда эритиб олдик ва 15 дақиқа сув хамомида қайнатдик. Аралашмани совутгандан сўнг, экстракт ПОР-40 шиша фильтри орқали 50 мл ҳажмли ўлчов колбасига фильтрланади. Чиқиб кетган хомашё юқоридаги усул билан яна учта камаювчи қисм (15, 10 ва 5 мл) билан экстракция қилинди. Барча экстрактлар бир хил фильтрданбир хил ўлчов колбасига фильтрланди ва экстракт ҳажми хлороформ билан белгига мослаштирилди. Олинган каротиноидлар эритмасининг оптик зичлиги қатлам қалинлиги 5 мм бўлган кюветларда 440 нм тўлқин узунлигидаги спектрофотометрда ўлчанди. Назорат сифатида хлороформ ишлатик. Умумий каротиноидларнинг β-каротинга нисбатан мг% (Х) даги таркиби қуйидаги формула бўйича ҳисобланади:

Кейинги тажрибамизда physalis баригларидаги β-каротиноидни миқдорий анализ қилдик. Бу тажрибамиз юқорида амалга оширга тажрибамиз кетма кетлигида қилинади. Спектофотометр тўлқин узнлиги 425 нм қилиб белгилаб олдик ва назорот кюветкасига хлорофорим эритмасидан солдик. Олинган натижаларни миқдор (мг%) аниқлаш формиласига қўйиб β-каратиноид миқдорини аниқладик.