Editor: M. Orth Thrombocytopathy: an update

---

Hemostaseology
Editor: M. Orth
Thrombocytopathy: an update
#
Tim Drogies
1,
*, Leanthe Braunert
2
, Joachim Thiery
1
and Mathias Brügel
1
1
Institut für Laboratoriumsmedizin, Klinische Chemie und
Molekulare Diagnostik, Universitätsklinikum Leipzig,
Leipzig, Germany
2
Department für Innere Medizin, Dermatologie und
Neurologie, Selbstständige Abteilung für Hämatologie,
Internistische Onkologie und Hämostaseologie
Universitätsklinikum Leipzig, Leipzig, Germany
Keywords: Platelet function; bleeding clarification; throm-
bocytopathy.
Introduction
The regulation of blood coagulation represents a central me-
chanism in the integrity of the blood-vascular system. On the
one hand it supports wound closure following an injury and
thereby prevents major blood loss. On the other hand the fi-
nely regulated mechanisms of thrombolysis and fibrinolysis
maintain continuous blood flow and thereby ensures ade-
quate blood circulation. This balance is maintained through
the interplay of thrombocytic, plasmatic, fibrinolytic and vas-
cular factors. The clinical picture of the congenital or the ac-
quired disorders of these processes ranges from hemorrhagic
diatheses to microangiopathic disorders and on to severe
thrombotic manifestations.
This study focuses on the importance of platelets in he-
mostasis and discusses essential aspects of the clinical and
laboratory diagnostic classification of thrombocytic disorders
in the diagnostic confirmation of hemorrhagic diatheses.
The physiologic importance of platelets
in hemostasis
Primary platelet adhesion
When an injury exposes sub-endothelial structures in a
healthy individual, platelets predominantly adhere via a bond
of the glycoprotein (GP) lb-V-IX-receptor complex to the
collagen associated von Willebrand factor (vWF). As in the
arterial system, this mediation through vWF is needed espe-
cially with high shearing rates. With lower shearing rates the
primary contact may also occur directly via alternative recep-
tors like the collagen receptor GP VI. This primary interac-
tion slows the flow of platelets and induces a rolling process
during which the stable adhesion to the sub-endothelial layer
is made possible. The thrombocytic collagen receptors GPVI
and GPIa/IIa are particularly important in this process. The
further stabilization of the interaction between platelet and
vascular wall is ensured mainly by the GP IIb/IIIa receptor.
This induces a further activation as well as a shape change of
the platelet, which
– through the formation of pseudopodia –
makes an effective closure of the vascular lesion possible.
Thrombocytic signal transduction and amplification
The early bond to sub-endothelial structures induces signal
transduction processes within the platelet, that in turn cause
an increased expression and activation of adhesion molecules
on the cell surface (inside-out signaling). Adherent and
activated platelets secrete, for example, adenosindiphosphate
(ADP), serotonin or through cyclooxygenase (COX) or throm-
boxane synthesis (TXS) produced thromboxane (TX) A
2
,
which, G protein-mediated among others, provide autocrine
and paracrine strengthening of the activation process after
binding to specific receptors and thereby recruit additional
platelets in the direct vicinity of the lesion (amplification).
Additionally, immediate vascular effects of these mediators
support the procoagulatory process.
Thrombocytic aggregation
To a quite substantial degree the continued activation of the
GPIIb/IIIa receptor on the thrombocytic surface is induced
and maintained through an increase of the intracellular cal-
cium concentration induced within the framework of the ad-
hesion and activation processes and the ADP effect mediated
through P2Y
1
and P2Y
12
receptors. Further aggregation oc-
curs via GPIIb/IIIa, i.e. the spreading of thrombus through
the fibrinogen-mediated binding of the platelets with each
other, and the stabilization of the primary cell contacts.
#
Original German online version at: http://www.reference-global.
com/toc/labm/35/2. The German article was translated by Compusc-
ript Ltd. and authorized by the authors.
*Correspondence:
Dr. Tim Drogies
Institut für Laboratoriumsmedizin, Klinische Chemie und Molekula-
re Diagnostik
Universitätsklinikum Leipzig, AöR
Paul-List-Str. 13
–15
04103 Leipzig, Germany
Telefon:
[phone]
FAX:
[phone]
E-mail: [e-mail]
J Lab Med 2011;35(2):1
–7 © 2011 by Walter de Gruyter
•
Berlin
•
New York. DOI 10.1515/JLM.2011.014_et

---

Platelets as mediators between cellular
and plasmatic coagulation
Thrombocytic hemostasis is substantially influenced by the
plasmatic processes that are occurring in parallel. For exam-
ple, the thrombin produced in plasmatic hemostasis has a
pronounced platelet-activating effect. On the other hand, pla-
telets have activating and modulating effects at the level of
plasmatic coagulation. Platelets have the capability of short-
term creation and release of tissue factor and in this way can
directly induce plasmatic coagulation processes. The forma-
tion of platelet aggregates within the framework of primary
hemostasis is also of critical importance for the course of plas-
matic coagulation, since through the exposure of phospholi-
pids they act as procoagulatory surface for the complexation
of coagulation factors. Platelets can modulate central plas-
matic processes through the secretion of procoagulatory and
anticoagulatory factors (e.g. factor V, factor VII, vWF, TFPI)
from their
α-granules. However, the physiologic importance
of these processes is as yet largely unclear.
Thrombocytopathy
– classification and clinical
background (Figure 1)
Platelet function disorders (thrombocytopathies) are among
the most frequent causes of increased hemorrhagic diathesis
and the heterogeneity of the functional defects and the vari-
able clinical expressions represent a challenge for the clinic
and the laboratory. Thrombocytopathies can be acquired or
hereditary and involve different functional levels of thrombo-
cytic coagulation (adhesion, activation and signal transduc-
tion, amplification and aggregation).
Acquired disorders of the platelet function
More frequent than hereditary disorders of platelet function
are acquired disorders, that can be attributed in particular to
medications, primary underlying diseases or immunologic
phenomina.
Medicamentous influence on platelet function
About 85% of thrombocytopathies are medication-induced.
Therapeutic affection of platelet function is especially impor-
tant in the prophylaxis and treatment of cardiovascular
events. Inhibitors of cyclooxygenase (ASS), ADP antago-
nists (e.g. clopidogrel, prasugrel) or glycoprotein IIb/IIIa an-
tagonists affect the central signaling pathways or mechan-
isms of the platelet. Particularly when used in combination,
e.g. within the scope of stent implantations or together with
anticoagulants, they are associated with an increased risk of
bleeding. Medicamentous side effects on a thrombocytic level
must be differentiated from these typical antithrombocytic
medications. Antibiotics, NSAR, cytostatica and psycho-
active drugs can significantly influence platelet metabolism
and can induce hemorrhagic diathesis.
Affection on platelet function within the framework
of underlying diseases
With secondary thrombocytopathies, the focus is on disor-
ders associated with hepatic and uremic factors. Pathophysio-
logic discussions range across various mechanisms, such as
reduced intrathrombocytic adenine nucleotides or an im-
paired interaction between glycoprotein receptors and ligands
[1, 2]. Platelet function disorders are also frequently asso-
Figure 1
Layers of thrombocytopathic defects.
2
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update

---

ciated with underlying hematologic diseases, such as mono-
clonal gammopathies or myeloproliferative neoplasias. Here,
immunologic effects, impaired receptor-ligand interaction as
well as intrinsic dysfunctions appear to be of importance.
Occasionally idiopathic or with auto-immune diseases asso-
ciated auto-antibodies against glycoproteins can induce an
acquired hemorrhagic diathesis on the platelet surface.
Congenital disorders of platelet function (Table 1)
Apart from classic disorders like Bernard-Soulier syndrome
(BSS) or Glanzmann
’s thrombasthenia (GT) the prevalence of
congenital platelet dysfunctions is largely unclear. On the one
hand this is caused by the clinical and inter-individual varia-
bility with frequently inapparent developments with absent
provocation and on the other by a lack of standardization of
the available laboratory diagnostic methods. The various
thrombocytopathies are primarily based on disorders in the
area of defined functional levels (Figure 1). However, because
of the complex and parallel processes within the framework
of thrombocytic coagulation these can manifest themselves
on various levels. For example, an impaired adhesion can also
result in an impairment of the signal transduction [3, 4].
Impairments of thrombocytic adhesion
BSS is the best known adhesion defect and is caused by a
reduced or absent expression of the GPIb-V-IX complex on
the thrombocytic surface. With a homozygous or a double
heterozygous hereditary transmission (prevalence 1 : 1 mil-
lion) a thrombocytopenia of variable intensity with evidence
of macroplatelets is typically found in addition to impaired
platelet function. Other disorders involve the receptor-
mediated adhesion of platelets to collagen (e.g. GP Ia/IIa- or
GP VI defect), fibrinogen (GP IIb/IIIa defect) or the vWF.
The subtype 2B of the von Willebrand syndrome, for exam-
ple, is caused by a mutation in the area of the GP Ib
α and
results in an increased interaction between platelets and vWF
with a reduction of the large vWF multimers and develop-
ment of thrombocytopenia [5].
Disorders of the thrombocytic signal transduction-
and amplification
This group contains various functional disorders in the area
of G protein mediated signal transduction, of enzymatic sys-
tems such as cyclooxygenase or thromboxane synthetase (as-
pirin-like defect), of the cytoskeleton (e.g. Wiskott-Aldrich
syndrome (WAS), MYH9-associated forms) and the ADP re-
ceptor-mediated signal amplification (e.g. ADP receptor lack
or defect). At present the prevalence of disorders of the sig-
nal transduction and enzymatic systems is most probably as-
sumed to be distinctly too low [6].
Disorders of thrombocytic secretion
These thrombocytopathies called
“storage pool diseases” are
marked by disorders in the synthesis or the secretion of the
constituents of thrombocytic granula.
δ granula, called dense
bodies because of their electron-dense structure, contain, for
example, calcium, ADP and serotonin.
α-granula contain var-
ious constituents such as platelet factor 4, vWF, fibrinogen
or coagulation factors. Pathophysiologically it is the amplifi-
cation phase of thrombocytic coagulation in particular that is
impaired by these secretion disorders. Furthermore, plasmatic
disorders caused by a reduced factor release (e.g. factor V)
or an increased release of fibrinolytic factors (Quebec throm-
bocytopathy) have been described as well [4, 5, 7]. Numeri-
cally secretion disorders represent the probably most impor-
tant group of thrombocytopathic disorders, however, because
of great inter-individual variability and diagnostic limitations
their prevalence is as yet largely unclear.
Disorders of thrombocytic aggregation
Glanzmann
’s thrombasthenia (GT) is the best known throm-
bocytopathy where platelets have a restricted ability to aggre-
gate. It is caused by qualitative or quantitative defects of the
GPIIb/IIIa receptors. These receptors are of critical impor-
tance for the interaction among platelets and the complexa-
tion via fibrinogen [8].
Disorders of the procoagulatory surface
The characteristic shape change of the platelets is followed
by a change in the composition of the membrane and favors
the processes of plasmatic coagulation as procoagulatory
surface. With qualitative or quantitative defects of this phos-
pholipid surface (particularly phosphatidylserine) the throm-
bocytic strengthening function can be impaired within the
framework of plasmatic thrombin formation (Scott syn-
drome) [9].
Table 1
An overview of congenital thrombocytopathies.
Group
Disorder
Example
Adhesion defects
Impaired adhesion of von Willebrand factor or
collagen on thrombocytic receptors
Bernard-Soulier syndrome
Aggregation defects
Impaired fibrinogen bond on thrombocytic receptors
Glanzmann
‘s thrombasthenia
Signal transduction defects
Defects in G-proteins, enzymopathies or in the
thrombocytic cytoskeleton
Wiskott-Aldrich syndrome,
ASS-like syndrome
Secretion defects
Impaired storage, transport and/ or secretion of ADP,
ATP, serotonin
δ-storage pool diseases
Disorders of the coagulation amplification
Changes in the phospholipids on the thrombocytic
surface
Scott syndrome
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update
3

---

Clinical findings and anamnesis
Clinical findings with thrombocytopathies are extraordinarily
variable and can range from subclinical signs of bleeding to
life-threatening hemorrhaging. Classic signs of bleeding are
hemorrhaging from mucous membranes such as epistaxis,
petechial hemorrhaging particularly on the inferior parts of
the body, sugillations, menorrhagias or a generally increased
hematoma tendency. Frequently there is prolonged bleeding
from abrasions or cuts. Instances of bleeding within the fra-
mework of a surgical procedure can occur inter-operatively
as well as postoperatively. Primarily associated underlying
diseases must be ruled out. A positive family anamnesis
points to a hereditary background. A thorough anamnesis of
medications is a prerequisite for the classification of a possi-
ble bleeding background. Especially
δ-storage pool diseases
often are a part of a complex of symptoms, e.g. when com-
bined with immune defect syndrome or metabolic disorders.
Laboratory-medical diagnostics in the clarification
of thrombocytopathies
Because of the variable clinical findings with unspecific
signs of bleeding, thrombocytopathy should always be ruled
out when clarifying the cause of bleeding liability. If there is
no laboratory-diagnostic correlate during the initial examina-
tion, a possibly expanded diagnostic repeat is required. Much
like clinical findings laboratory-diagnostic findings in part
also demonstrate high variability.
Pre-analytic influencing variables
Pre-analytics play a critical role in the diagnosis of platelet
function and last but not least must be taken into account in
the interpretation of laboratory-diagnostic findings.
Test material The various procedures in platelet function
testing usually require the use of citrated plasma with par-
tially different citrate content or citrated whole blood
[10, 11]. Citrate-anticoagulated whole blood is used particu-
larly for flow cytometry procedures or further function tests.
Blood collection Blood collection must be largely atrau-
matic and be performed with large caliber cannulae. Short
compression times, slow aspiration of the sample and com-
plete filling along with multiple light swirling for the quick
and complete distribution of the anticoagulant are necessary
to avoid in vitro activation and aggregate creation.
Sample transport Transport to the laboratory must be
speedy and an analysis should be performed within 1 to
3 hours. Unrefrigerated transports at room temperature must
be monitored. Various pneumatic tube systems can affect pla-
telet function and in cases of unusual functional findings a
control following non-mechanized transport is advisable
[12]. Blood collection regularly results in a release of ADP,
so that testing must not take place immediately after sample
collection.
Further sample processing Most functional tests are per-
formed in platelet-rich plasma that is obtained through centri-
fugation of citrated whole blood at 100
´ g for 20 minutes.
Laboratory-diagnostic procedures and
interpretation of results
Blood count and microscopic differentiation
A multitude of thrombocytopathies are characterized by a si-
multaneous thrombocytopenia or an occurrence of macro-
platelets or a platelet anisocytosis in the peripheral blood
smear (e.g. MYH9-associated diseases such as May Hegglin
anomaliy, Epstein, Fechtner and Sebastian platelet syndrome,
BSS and WAS). A pronounced anisocytosis may require an
optic or flow cytometric determination to obtain the correct
platelet count. Other diseases such as GT typically are ac-
companied by unremarkable platelet counts. With
α-storage
pool diseases the color of platelets appears reduced or gray
(gray platelet syndrome) in the May-Grünwald-Giemsa stain
because of the deficient
α-granules. Changes in the electron-
dense granules (dense bodies) cannot be recognized by light-
optical microscope.
With other thrombocytopathies (e.g. MYH9-associated
forms) it is possible to identify deposits of non-muscular myo-
sin as inclusion bodies in neutrophilic granulocytes. Last but
not least is the necessity of performing a differential blood
count for clarifying a possible underlying hematologic dis-
ease.
Aggregation diagnostics
– PFA-100 (Table 2)
The PFA-100 system (Platelet Function Analyzer by Sie-
mens) was designed as a measuring instrument for standar-
dized testing of bleeding time, i.e. in vitro bleeding time
[10, 13]. The closure time of a capillary coated with the
activators collagen/ADP or collagen/epinephrine is deter-
mined with the use of citrate-anticoagulated whole blood.
An activation or aggregation of the platelets takes place un-
der conditions of shear stress for adaptating to the in vivo
situation and after a variable period of time leads to capil-
lary closure.
Table 2
Systematic characteristic values PFA-100.
Advantages
Disadvantages
Whole blood system with shear stress
Low specificity for thromobocytopathies
High negative predictive value for severe defects
Requires further diagnostics
Good standardization
Moderate sensitivity with storage defects
Requires only small sample volume
Influenced by platelet number and hematocrit
Requires little time and personnel
High costs of analysis
4
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update

---

With the help of the PFA-100 and within the framework
of clinical studies a pathologic platelet function could be de-
termined in nearly all patients with the marked clinical pic-
ture of BSS or GT [10]. Typically both closure times are pro-
longed with these severe glycoprotein defects. With milder
functional impairments different studies partially resulted in
very variable sensitivities for both closure times. Sensitivities
of only 20 to 80% could be demonstrated in various storage
pool diseases [10]. Prolonged closure times frequently occur
in patients with liver diseases or uremia. However, it remains
largely unclear to what extent this represents a clinical effec-
tive platelet dysfunction.
Any effects of medication must be taken into account when
interpreting the results. COX-inhibiting therapies (e.g. ASS)
typically induce a prolongation of the epinephrine-mediated
closure time, ADP-antagonizing medications like clopidogrel
sometimes can lead to a variable prolongation of the ADP-
mediated closure time. GPIIb/IIIa inhibitors induce a prolon-
gation of both closure times. The procedure cannot be used in
patients with a platelet count of <150 or >500 exp9/l or a he-
matocrit <0.35 or >0.50, since this can result in pathologic
findings independent of the platelet function.
Based on the partially very variable sensitivities for differ-
ent thrombocytopathies unremarkable findings in the PFA-
100 system cannot rule out the presence of a thrombocytopa-
thy. Characteristic values for this method in the clarification
of thrombocytopathy are shown in Table 2.
Light transmission aggregometry (Born method)
(Tables 3 and 4)
The method according to Born makes use of platelet-rich
plasma and is based on light transmission aggregometry.
After inducing aggregation by means of various activators
(collagen, ADP, epinephrine, arachidonic acid, thrombin, ris-
tocetin), the change and quantity of light transmittance of the
charge is captured over time and evaluated via spectometry.
Evaluation is primarily aimed at the maximum amount of ag-
gregation that can be triggered (
“second wave”). With the
help of the aggregation curves the
“first wave”, which shows
the shape change in the thrombocytic activation, and the
curves
’ gradients are optically evaluated as the measure for
the intensity of the thrombocytic amplification. Aggrego-
metric patterns for the different thrombocytopathies are
shown in Table 3.
Born aggregometry was established primarily for mapping
severe glycoprotein defects such as BSS or GT and for this
purpose it possesses high sensitivity. The method has not
been entirely validated for diagnosing secretion or enzyme
defects. Additionally the interpretation of minor dysfunctions
is complicated by the high inter-individual variability of
healthy or clinically unremarkable persons [14]. Besides the
clarification of severe glycoprotein defects the use of low
concentrations of the activator ristocetin (0.5 mg/mL) makes
the differential diagnostic clarification of a type 2B von Will-
ebrand syndrome possible.
Medications like ASS or clopidogrel affect the signaling
pathways tested in aggregometry. GPIIb/IIIa inhibitors typi-
cally lead to a complete inhibition of aggregation in the pre-
sence of all activators. In Born aggregometry pathologic
findings regularly occur with patients suffering from liver or
renal diseases or myeloproliferative syndromes. The reaction
to the different activators, however, is very variable, the sen-
sitivity and the association with an increased hemorrhagic
diathesis is largely unclear. The advantages and limits of this
method are shown in Table 4.
Table 3
Constellations in light transmission aggregometry with various thrombocytopathies.
ADP
Collagen
Epinephrine
Arachidonic acid
Ristocetin
Bernard-Soulier syndrome
N
N
N
N
↓↓↓
COX defect
N
N-
↓
↓
↓-↓↓↓
N
ADP receptor defect
↓-↓↓↓
N-
↓
N
N
N
Storage pool diseases
N-
↓
N-
↓
N-
↓
N-
↓
N
Glanzmann
’s thrombasthenia
↓↓↓
↓↓↓
↓↓↓
↓↓↓
N
Uremia
N-
↓
N-
↓
N-
↓
N-
↓
N-
↓
Table 4
Systematic characteristic values of light transmission aggregometry.
Advantages
Disadvantages
Many years of experience (
“gold standard”)
Non-physiologic test system (platelet-rich plasma)
Overall test of primary hemostasis
Lack of standardization
Differentiation of various thrombocytopathies
Variable sensitivities with storage defects
High sensitivity with severe defects
High inter-individual variability
Influenced by number of platelets
Requires large volume of blood
Highly time-consuming and high personnel costs
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update
5

---

Impedance aggregometry
Impedance aggregometry takes place in whole blood and is
based on the electrode-based resistance change at the start of
aggregation following activation with various stimulants.
This procedure is used for monitoring when platelet aggrega-
tion inhibitors are administered. This method
‘s value appears
to be equal to that of light transmission aggregometry,
although it has hardly been proven in the differential diag-
nostic clarification of thrombocytopathies with existing he-
morrhagic diathesis.
ATP release test and determination
of COX-dependent mediators
This procedure is based on the luminometric determination
of the total content of adenine nucleotides (e.g. ATP) or their
release from platelets after activation. Adenine nucleotides
are constituents of the
δ-granules, whose formation or release
within the framework of
δ-storage pool defects is typically
impaired. Hence this test system is used in the differential
diagnostic clarification of these forms of thrombocytopathies.
Limiting factors of this procedure are the limited validation
of the method with insufficient knowledge regarding sensi-
tivities and further laboratory diagnostic characteristic values
such as method variability. At present there are no laboratory
diagnostic procedures for the evaluation of intra-thrombocy-
tic plasmatic constituents (e.g. factor V).
It is possible to perform a quantitative determination of
associated metabolites like TXA
2
following the activation of
platelets in order to clarify enzyme defects of COX or
TXAS, which can influence the signal transduction or ampli-
fication. The high inter-individual variability and the lack of
standardized testing allows only a very limited interpretation.
Flow cytometry (Table 5)
In the clarification of thrombocytopathies flow cytometry is
based mostly on the antibody-mediated quantification of sur-
face antigens of the platelet membrane. This method typi-
cally identifies the basis expression and the expression fol-
lowing thrombocytic activation. It is particularly useful as a
confirmative diagnosis with pathologic findings in aggrego-
metry. For example, it makes possible a flow cytometric de-
tection of receptor defects as with GT (GP Iib/IIIa) or BSS
(GPIb VI-X) with evidence of the reduced or absent binding
of specific antibodies [15]. Besides its primary use in the
quantification of platelet-associated glycoproteins, it also per-
mits determination of the factors associated with granules.
This makes it possible to determine the expression of P-se-
lectin from
α-granules after activation of the platelets on their
cell surface and to support the diagnosis of an
α-storage pool
disease. The ATP content as the criterion for a
δ-storage pool
disease can be detected via the deposit of the fluorescence
dye mepacrine with subsequent flow cytometric quantifica-
tion. A quantification of surface proteins after thrombocytic
activation with specific activators can point to defects within
specific signal transduction pathways. Features of this proce-
dure are shown in Table 5.
Electron microscopy
Because of its high resolution capability electron microscopy
permits the optical examination of ultrastructures in platelets.
It can, for example, detect changes of the cytoskeleton, of
thrombocytic granules or membrane components.
Genetic diagnostics
Gene mutations are known for numerous thrombocytopathic
disorders (BSS, GT,
δ-storage pool diseases, MYH9-asso-
ciated forms) [3, 16]. Because of the multitude of genetic
mutations underlying the different hereditary thrombocytopa-
thies and the unclear clinical association, genetic diagnostics
at present are of minor importance in the clinical classifica-
tion. Nevertheless the clarification of molecular causes can
contribute substantially to the pathophysiologic understand-
ing of platelet dysfunctions.
Clinical case presentation
Anamnesis
Presentation of a 70-year old female patient after intra- and
post-interventional bleeding during thyroid puncture.
Earlier anamnesis
Postoperative bleeding within the framework of a tonsillect-
omy, with two births and with tooth extractions. Menorrhoea
>7 days, in childhood low grade epistaxis. Family history:
recurrent epistaxis on the father
’s side.
Laboratory diagnostic clarification
• With unremarkable von Willebrand-relevant parameters
(Willebrand factor antigen, ristocetin cofactor activity as
functional test und factor VIII activity), as well as unre-
Table 5
Systematic characteristic values of flow cytometry.
Advantages
Disadvantages
Whole blood system
Target-dependent procedure
High specificity for glycoprotein defects
Poor standardization
Analysis of activator-specific reaction patterns is possible
High machine costs
Requires only small sample volume
High personnel costs
Not influenced by number of platelets or hematocrit
High cost of analysis
6
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update

---

markable multimer analysis no indication of von Wille-
brand syndrome.
• With unremarkable overall testing (aPTT, Quick) and
factor XIII in the reference range no indication of any
existing factor deficiencies. With unremarkable reptilase
clotting time no indication for a dysfibrinogenemia.
• Unremarkable blood count, no thrombocytopenia, platelets
morphologically unremarkable.
• Nothing remarkable in platelet function diagnostic (PFA-
100 and Born aggregometry).
Repeated medical check-up
• Minor reduction of arachidonic acid-induced aggregation
(51%, normal: >70%) without taking ASS or NSAR. Pro-
longed epinephrine- mediated closure time in the PFA-100
(213 sec, normal: 84
– 160 sec).
• The subsequently arranged examination of thrombocytic
release reaction resulted in a reduction of collagen- and
thrombin-induced ATP secretion (collagen 2.8 nmol/exp
9
PLT, normal: >7 nmol/exp
9
; thrombin 5.8 nmol/exp
9
PLT,
normal: 13
– 40 nmol/exp
9
).
Diagnosis and summary
The controlled findings constellation in connection with the
anamnestic bleeding background is indicative of a
δ-storage
pool disease. This clinical case illustrates the large clinical
and laboratory-diagnostic variability with an initially unre-
markable constellation.
Summary and outlook
Thrombocytopathies are disorders of the primary hemostasis
with very variable clinical expression. Together with a de-
tailed anamnesis basic diagnostics consisting of a hematolo-
gic and a microscopic examination as well as platelet aggre-
gation tests (PFA-100, LTA) lead to a tentative diagnosis.
Important methods in the further differentiation and charac-
terization are flow cytometry, release measurements and ge-
netic procedures. In the future genetic analyses and the use
of mass-spectrometric processes for testing thrombocytic
proteins, lipids or mediators could considerably expand the
diagnostic repertoire.
References
1. Ho SJ, Gemmell R, Brighton TA. Platelet function testing in
uraemic patients. Hematology 2008;13:49
–58.
2. Blonski W, Siropaides T, and Reddy KR. Coagulopathy in liver
disease. Curr Treat Options Gastroenterol 2007;10:464
–73.
3. Streif W, Knofler R, Eberl W. Inherited disorders of platelet
function in pediatric clinical practice: a diagnostic challenge.
Klin Padiatr 2010;222:203
–8.
4. Sandrock K, Zieger B. Current strategies in diagnosis of inherited
storage pool defects. Transfus Med Hemother 2010;37:248
–58.
5. Simon D, Kunicki T, Nugent D. Platelet function defects. Hae-
mophilia 2008;14:1240
–9.
6. Althaus K, Greinacher A. MYH-9 Related Platelet Disorders:
Strategies for Management and Diagnosis. Transfus Med He-
mother 2010;37:260
–267.
7. Weiss HJ. Impaired platelet procoagulant mechanisms in pa-
tients with bleeding disorders. Semin Thromb Hemost 2009;35:
233
–41.
8. Nurden AT. Glanzmann thrombasthenia. Orphanet J Rare Dis,
2006;1:10.
9. Salles II, Feys HB, Iserbyt BF, De Meyer SF, Vanhoorelbeke K,
Deckmyn H. Inherited traits affecting platelet function. Blood
Reviews 2008;22:155
–172.
10. Favaloro EJ. Clinical utility of the PFA-100. Semin Thromb
Hemost 2008;34:709
–33.
11. Rechner AR. Platelet function testing in clinical diagnostics.
Hamostaseologie 2010;31.
12. Wallin O, Söderberg J, Grankvist K, Jonsson PA, Hultdin J.
Preanalytical effects of pneumatic tube transport on routine hae-
matology, coagulation parameters, platelet function and global
coagulation. Clin Chem Lab Med 2008;46:1443
–9.
13. Mani H, Z Wolf, Lindhoff-Last E. Progress in diagnostic eva-
luation of platelet function disorders. Hamostaseologie 2010;30:
217
–229.
14. Budde U. Diagnose von Funktionsstörungen der Thrombozyten
mit Hilfe der Aggregometrie/Diagnosis of Platelet Function De-
fects with Platelet Aggregometers. LaboratoriumsMedizin,
2005;26:564
–571.
15. Miller JL. Glycoprotein analysis for the diagnostic evaluation
of platelet disorders. Semin Thromb Hemost, 2009;35:224
–32.
16. Nurden AT, Fiore M, Pillois X, Nurden P. Genetic testing in the
diagnostic evaluation of inherited platelet disorders. Semin
Thromb Hemost, 2009;35:204
–12.
Drogies et al.: Thrombocytopathy: an update
7