Elektron mikroskopiya usullarini tibbiyotda ahamiyati

Floresan mikroskop(ML-2, ML-3) lyuminestsent ob'ektlarni o'rganish uchun mo'ljallangan, bunga ikkinchisini UV nurlanishi bilan yoritish orqali erishiladi. Preparatlarni ko'rinadigan qo'zg'atilgan floresansi (ya'ni, aks ettirilgan yorug'lik) nurida kuzatish yoki suratga olish orqali gistokimyo, gistologiya, mikrobiologiya va immunologik tadqiqotlarda qo'llaniladigan sinov namunasining tuzilishini aniqlash mumkin. To'g'ridan-to'g'ri lyuminestsent bo'yoqlar bilan bo'yash yorug'lik mikroskopida ko'rish qiyin bo'lgan hujayra tuzilmalarini aniqroq aniqlash imkonini beradi.
Rentgen mikroskopi rentgen nurlaridagi ob'ektlarni o'rganish uchun ishlatiladi, shuning uchun bunday mikroskoplar mikrofokusli rentgen nurlanish manbai, rentgen tasvirini ko'rinadiganga o'zgartirgich - osiloskop trubkasida ko'rinadigan tasvirni hosil qiluvchi elektron-optik konvertor bilan jihozlangan. yoki fotografik plyonkada. Rentgen mikroskoplari 0,1 mkm gacha bo'lgan chiziqli ruxsatga ega, bu sizga kashf qilish imkonini beradi. nozik tuzilmalar tirik modda.
Elektron mikroskop yorug'lik mikroskoplarida farqlanmaydigan o'ta nozik tuzilmalarni o'rganish uchun mo'ljallangan. Yorug'likdan farqli o'laroq, elektron mikroskopda o'lchamlari nafaqat diffraktsiya hodisalari, balki elektron linzalarning turli xil aberratsiyalari bilan ham aniqlanadi, ularni tuzatish deyarli mumkin emas. Mikroskopning maqsadi asosan elektron nurlarning kichik teshiklaridan foydalanish tufayli diafragma bilan amalga oshiriladi.
Mikroskopning asosiy komponentlari
M.ning koʻp turlarida (teskari boʻlganlar bundan mustasno, pastga qarang) linzalarni biriktirish moslamasi preparat oʻrnatiladigan obʼyekt stolining tepasida, stol ostiga esa kondensator oʻrnatilgan. Har qanday M. trubkasi (naycha) boʻlib, unga okulyar oʻrnatiladi; Qoʻpol va nozik fokuslash mexanizmlari (preparatning, obʼyektivning va okulyarning nisbiy holatini oʻzgartirish orqali amalga oshiriladi) ham M.ning majburiy aksessuari hisoblanadi. Bu tugunlarning barchasi tripod yoki M korpusga o'rnatiladi.
Amaldagi kondensatorning turi kuzatish usulini tanlashga bog'liq. Yorqin maydonli kondanserlar va fazali yoki interferentsiya kontrasti usuli bilan kuzatish uchun kondensatorlar bir-biridan juda farq qiladigan ikki yoki uch linzali tizimlardir. Yorqin maydonli kondensatorlar uchun raqamli diafragma 1,4 ga yetishi mumkin; ular diafragma ìrísí diafragmasini o'z ichiga oladi, bu ba'zan preparatning qiyshiq yoritilishini olish uchun yon tomonga siljishi mumkin. Fazali kontrastli kondanserlar halqali diafragmalar bilan jihozlangan. Linzalar va nometalllarning murakkab tizimlari qorong'u maydon kondensatorlaridir. Alohida guruh epikondenserlardan iborat bo'lib, ular aks ettirilgan yorug'likda qorong'u maydon usuli bilan kuzatishda zarur bo'ladi, halqali linzalar tizimi va linzalar atrofida o'rnatilgan nometall. UV mikroskopida ultrabinafsha nurlar uchun shaffof bo'lgan maxsus oyna-linzalar va linzali kondensatorlar qo'llaniladi.
Ko'pgina zamonaviy mikroskoplardagi linzalar bir-birini almashtiradi va kuzatishning o'ziga xos shartlariga qarab tanlanadi. Ko'pincha bir nechta linzalar bir aylanadigan (aylanuvchi deb ataladigan) boshga o'rnatiladi; bu holda linzalarni o'zgartirish oddiygina boshni burish orqali amalga oshiriladi. Xromatik aberatsiyani tuzatish darajasiga ko'ra (qarang Xromatik aberatsiya ) mikro linzalar Akromatlar va apochromatlar bo'linadi (qarang Akromat). Birinchisi dizayndagi eng oddiylari; ulardagi xromatik aberatsiya faqat ikkita to'lqin uzunligi uchun tuzatiladi va ob'ekt oq yorug'lik bilan yoritilganda tasvir biroz rangli bo'lib qoladi. Apokromatlarda bu aberratsiya uchta to'lqin uzunligi uchun tuzatiladi va ular rangsiz tasvirlarni beradi. Axromatlar va apoxromatlarning tasvir tekisligi biroz qiyshiq (qarang Maydon egriligi ). Koʻzning akkomodatsiyasi va M.ni qayta fokuslash yordamida butun koʻrish maydonini koʻrish imkoniyati vizual kuzatishdagi bu kamchilikni qisman qoplaydi, lekin u mikrofotografiyaga katta taʼsir qiladi — tasvirning oʻta chekka qismlari xiralashgan. Shuning uchun qo'shimcha maydon egriligini tuzatishga ega mikroob'ektivlar keng qo'llaniladi - planaxromatlar va planapoxromatlar. An'anaviy linzalar bilan birgalikda maxsus proyeksiya tizimlari qo'llaniladi - ko'zoynaklar o'rniga kiritilgan va tasvir yuzasining egriligini to'g'rilaydigan gomallar (ular vizual kuzatish uchun yaroqsiz).
Bundan tashqari, mikroob'ektivlar farqlanadi: a) spektral xarakteristikalar bo'yicha - spektrning ko'rinadigan hududi uchun linzalar uchun va UV va IQ mikroskoplari uchun (linzalar yoki oyna-linzalar); b) ular uchun mo'ljallangan quvur uzunligi bo'ylab (M. dizayniga qarab), - linzalar uchun 160 mm trubka uchun, 190 mm trubka uchun va shunday deb ataladi. "naychaning uzunligi - cheksizlik" (ikkinchisi "cheksizlikda" tasvirni yaratadi va tasvirni okulyarning fokus tekisligiga aylantiruvchi qo'shimcha - naycha deb ataladigan ob'ektiv bilan birgalikda ishlatiladi); c) linzalar va preparat o'rtasidagi muhitga ko'ra - quruq va immersion ichiga; d) kuzatish usuliga ko'ra - oddiy, faza-kontrast, interferentsiya va boshqalarga; e) preparatlar turlari bo'yicha - qoplamali va qoplamasiz preparatlar uchun. Alohida turdagi epi linzalar (an'anaviy linzalarning epikondenser bilan birikmasi). Linzalarning xilma-xilligi mikroskopik kuzatish usullarining xilma-xilligi va mikroskoplarning dizayni, shuningdek, turli xil ish sharoitlarida aberatsiyalarni tuzatish talablarining farqlari bilan bog'liq. Shuning uchun har bir linzadan faqat u yaratilgan sharoitlarda foydalanish mumkin. Masalan, uzunligi 190 mm boʻlgan M.da 160 mm trubka uchun moʻljallangan linzadan foydalanish mumkin emas; Qopqoqli linzalar bilan slipsiz slaydlarni kuzatish mumkin emas. Me'yordan har qanday og'ishlarga juda sezgir bo'lgan katta diafragma (A > 0,6) quruq linzalari bilan ishlashda dizayn shartlariga rioya qilish ayniqsa muhimdir. Ushbu maqsadlar bilan ishlashda qoplamaning qalinligi 0,17 mm ga teng bo'lishi kerak. Suvga cho'mdiruvchi linzadan faqat u mo'ljallangan immersion bilan foydalanish mumkin.
Amaldagi ko'zoynak turi bu usul kuzatish ob'ektiv M. tanlash bilan belgilanadi kichik va o'rta kattalashtirish akromatlar bilan, Gyuygens okulyarlar ishlatiladi, apochromatlar va yuqori kattalashtirish akromatlar bilan - deb atalmish. kompensatsiya ko'zoynaklari shunday hisoblanganki, ularning qoldiq xromatik aberatsiyasi linzalarnikidan farq qiladi, bu esa tasvir sifatini yaxshilaydi. Bundan tashqari, tasvirni ekranga yoki fotografik plitaga proyeksiyalovchi maxsus fotoko‘z va proyeksiyali okulyarlar mavjud (bu yuqorida tilga olingan gomallarni ham o‘z ichiga oladi). Alohida guruh UV nurlari uchun shaffof bo'lgan kvarts ko'zoynaklaridan iborat.
M.ning turli aksessuarlari nazorat sharoitlarini yaxshilash va tadqiqot imkoniyatlarini kengaytirish imkonini beradi. Har xil turdagi yoritgichlar eng yaxshi yorug'lik sharoitlarini yaratish uchun mo'ljallangan; ob'ektlar hajmini o'lchash uchun ko'z mikrometrlari (qarang Ko'z mikrometri ) ishlatiladi; binokulyar naychalar preparatni ikkala ko'z bilan bir vaqtning o'zida kuzatish imkonini beradi; mikrofotosurat uchun mikrofoto qo'shimchalari va mikrofoto sozlamalari ishlatiladi; chizma qurilmalari tasvirlarni eskiz qilish imkonini beradi. Miqdoriy tadqiqotlar uchun maxsus qurilmalar qo'llaniladi (masalan, mikrospektrofotometrik nozullar).
M.ning konstruksiyasi, jihozlari va asosiy boʻlinmalarining xarakteristikalari qoʻllanish sohasi, muammolar doirasi va u moʻljallangan obʼyektlarning tabiati bilan yoki usul (usullar) bilan belgilanadi. u ishlab chiqilgan kuzatuv yoki ikkalasi tomonidan. Bularning barchasi ob'ektlarning qat'iy belgilangan sinflarini (yoki hatto ularning ba'zi o'ziga xos xususiyatlarini) yuqori aniqlik bilan o'rganish imkonini beradigan har xil turdagi ixtisoslashtirilgan ko'rsatkichlarni yaratishga olib keldi. Boshqa tomondan, deb atalmish bor. universal M., bu bilan siz mumkin turli usullar turli ob'ektlarni kuzatish.
Biologik M. keng tarqalgan. Ular botanika, gistologik, sitologik, mikrobiologik va tibbiy tadqiqotlar, shuningdek, biologiya bilan bevosita bogʻliq boʻlmagan sohalarda — kimyo, fizika va boshqalarda shaffof obʼyektlarni kuzatishda qoʻllaniladi.Biologik M.ning bir-biridan farq qiluvchi koʻplab modellari mavjud. ularning konstruktiv dizayni va o'rganilayotgan ob'ektlar doirasini sezilarli darajada kengaytiradigan aksessuarlarda. Ushbu aksessuarlarga quyidagilar kiradi: uzatiladigan va aks ettirilgan yorug'lik uchun almashtiriladigan yoritgichlar; yorqin va qorong'i maydonlar usullari bo'yicha ishlash uchun almashtiriladigan kondensatorlar; fazali kontrastli qurilmalar; ko'z mikrometrlari; mikrofoto qo'shimchalar; oddiy (ixtisoslashtirilmagan) M.da lyuminestsent va polarizatsiya qiluvchi mikroskopiya texnikasidan foydalanish imkonini beruvchi yorugʻlik filtrlari va qutblanish moslamalari toʻplami. Biologik M. uchun yordamchi uskunalarda preparatlar tayyorlash va ular bilan, jumladan bevosita kuzatish jarayonida turli operatsiyalarni bajarish uchun moʻljallangan mikroskopik texnologiya vositalari (qarang Mikroskopik texnologiya) muhim rol oʻynaydi (qarang: Mikromanipulyator, Mikrotom).
Biologik tadqiqot mikroskoplari turli xil sharoit va kuzatish usullari va namunalar turlari uchun almashtiriladigan linzalar to'plami, shu jumladan aks ettirilgan yorug'lik va ko'pincha fazali kontrastli linzalar uchun epi-maqsadlar bilan jihozlangan. Maqsadlar to'plami vizual kuzatish va mikrofotografiya uchun ko'zoynaklar to'plamiga mos keladi. Odatda bunday M.da ikki koʻz bilan kuzatish uchun durbin naychalari boʻladi.
Biologiyada umumiy maqsadli M.dan tashqari kuzatish usuliga ixtisoslashgan turli M.lar ham keng qoʻllaniladi (quyida q.).
Invertli mikroskoplar ulardagi linzalar kuzatilayotgan ob'ekt ostida, kondensator esa tepada joylashganligi bilan ajralib turadi. Ob'ektiv orqali yuqoridan pastgacha o'tadigan nurlarning yo'nalishi ko'zgular tizimi tomonidan o'zgartiriladi va ular odatdagidek pastdan yuqoriga qarab kuzatuvchining ko'ziga tushadi (