Embrion genda ildiz meristema hosil bo'lishi uchun zarur The Arabidopsis hobbit

MATERIALLAR VA USULLAR
Bu erda biz ildiz meristem spetsifikatsiyasi uchun zarur bo'lgan
HOBBIT (HBT) genidagi mutatsiyalarni tahlil qilamiz. Biz hbt mutant
fenotipini kvadrant bosqichidan boshlab bazal embrion mintaqasining
g'ayritabiiy rivojlanishiga qarab kuzatdik . Bu hudud odatda ko'chat ildizi
meristemasida ma'lum hujayra turlari uchun asoschi hujayra bo'lgan
gipofizni keltirib chiqaradi (1-rasm, Dolan va boshq., 1993; Scheres va
boshqalar, 1994). Embrion rivojlanishining keyingi bosqichlarida hbt
mutantlari bazal mintaqaga tutashgan markaziy mintaqa hujayralarining
aberrant rivojlanishini ko'rsatadi, bunda lateral ildiz qopqog'ining
shakllanishi va istiqbolli ildiz meristemasida hujayra bo'linishi induksiyasi
nuqsonli. Ushbu ma'lumotlar HBT gen mahsulotining erta mintaqaviy
spetsifikatsiyadagi rolini va hujayrali o'zaro ta'sirlarni o'z ichiga olishi
mumkin bo'lgan keyingi spetsifikatsiya hodisalarini ko'rsatadi .
522
V. Villemsen va boshqalar
allele hbt2311 hbte56 , hbtGVI-20/1, hbtGVII-24/1, hbtG221-30 /2 va
hbt1611, hbt5859 bilan hbte56 va hbtGVII -24/1 kombinatsiyalarida , hbt
-27b
va hbt/ 29b kombinatsiyalarida ,
va
hbt8052 va hbt9620
ning
hbtGVII-24/1
bilan kombinatsiyalarida , shuning uchun barcha hbt
allellarini bitta komplementatsiya guruhiga joylashtiradi.
Hbt2311, hbt5859, hbt5721, hbt8052, hbt 9620, hbtGVII-24/1 va
hbtG221-30/2 etuk embrionlaridagi otish apikal meristema konfokal
lazerli skanerlash mikroskopi (LMCS va boshqalar) tomonidan
tasvirlangan (LMCS va boshqalar) 19k. ).
Individual F2 hbt mutantlari suyuq azotda maydalangan va 200 µl ddH2O da
to‘xtatilgan. 2-10 µl DNK izolatlari CAPS va mikro sun'iy yo'ldosh markerlari
yordamida tahlil qilindi (Koorneef va Stam, 1992). n hbt
xromosomalaridagi
rekombinatsiya chastotalari
r =
nCol/(nCol + nLer) sifatida hisoblangan va
genetik masofalar Kosambi xaritalash funksiyasi yordamida hisoblangan. hbt
va II xromosoma belgilari m246 (8/52 rekombinant xromosomalar, 15,4±5,5
cM) va GPA1 (24/294 rekombinant xromosomalar, 8,2±1,6 cM) o'rtasida
bog'liqlik kuzatildi .