+он плазмасида липидлар гидропероксиди ми=дорини
спектрофотометрик услубида ани=лаш.
Хар хил кимёвий моддалар, дори препаратлари ва касалликлар о=ибатида
кузатиладиган липидларнинг пероксидли оксидланишини фаолланиши
бахолашда =он таркибидаги липидлар гидропероксиди ми=дорини ылчаш
мущим диагностик ахамиятга эга.
Услуб асоси. Липидлар гидропероксидининг коньюгирлашган диенли
структураларини 232-234нм да интенсив нур ютишига асосланган.
Жихозлар. Спектрофотометр, лаборатория силкитгичи, хар щил хажмдаги
пипеткалар, пробиркалар
Реактивлар.
Этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) эритмаси, 1мг/мл нисбатдаги, изопропил
спирти, гептан, 0,1н
хлорид кислотаси, рН-2,0
Материал.
+он плазмаси, унинг олишда стабилизатор сифатида эркин радикалли
оксидланиш ингибитори былган 1мг/мл са=лаган ЭДТА-дан фойдаланилади.
Ишнинг бажарилиши.
0,2мл плазмага 4мл гептан-изопропил спирти =ышилиб (1:1 нисбатда) ,
лаборатория силкиткичида 15 минут давомида чай=
атилади . Сынгра
пробиркага 1мл хлорид кислотаси, рН -2,0 ва 2мл гептан =ышилиб, яхшилаб
чай=атиб аралаштирилади . 30 минутдан
кейин аралашма тиниб, =аватларга
ажралгач гептанли =авати эхтиётлик билан олинади ва 233нм
фотометрланади. Назорат намунасига плазма ырнига 2мл сув олиниб,
ю=оридаги амалларнинг хаммаси =айтарилади.
Хисоблаш. Липидлар гидропероксидининг 1мл плазмадаги ми=дори нисбий
бирликда формула быйича ифодаланилади.
Д233 . Vэ
= Д 233
.
20 1мл палзмага, бунда
Vn
Д233- ылчанган оптик зичлик =иймати, Vэ-4мл гептанли экстрактнинг
охирги хажми, Vn-0,2мл =он плазмасини олинган хажми ёки 1мг липидаги
(Д233 1мг липидга) нисбий бирликда. Айни
щолда плазма таркибида
липидлар ми=дорини параллель ани=лаш керак былади . Каламуш =они
плазмасида липидлар ва липидлар ми=дори : умумий липидлар-1,64-2,8 г/л,
липидлар гидроксиди 1мл плазмадаги нисбий бирлиги-1,34-2,37, 1мг
липидларда-0,83-0,85 гептан =аватини олишда охиригача олмаслик маь=ул ,
чунки озгина сув =ышилса гептан =авати хиралашиб, 233 =иймати ошиб
кетади.
Do'stlaringiz bilan baham: