KLİNİK İmmunolojide hastaliğin tanisi iÇİN


Download 446 b.
bet7/11
Sana12.11.2017
Hajmi446 b.
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

Katı faz formu

    •  IgM’in Fc bölgesine karşıt anti-IgM Ab katı faza
    • bağlanır
    •  Üzerine hasta serumu (IgM?) konulur
    •  Üzerine viral antijen
    •  Enzimle işaretli antikor
    •  Substrat…
  • Konjugat faz formu

    •  Katı fazda viral Ag
    •  Hasta serumu (IgM?)
    •  ENZİMLE İŞARETLİ anti IgM Ab (KONJUGAT)
    •  Substrat…




    UYGULAMA CİHAZ SİSTEMLERİ

    • UYGULAMA CİHAZ SİSTEMLERİ

      • MİKROELİSA TEMELLİ AÇIK SİSTEMLER
        • Klasik Cihazlar
          • İlk yıllarda kullanılan bağımsız yıkayıcı ve okuma cihazlarından ibaret sistem
        • Yarı Otomatik veya Tam Otomatik Cihazlar


    • MAKROELİSA TEMELLİ KAPALI SİSTEMLER

      • Kan bankası rutin çalışmalarına son yıllarda giren sistemlerdir.
      • Çalışma sistemleri ve Prensipleri;
        • Kapalı bir cihaz ve bu cihazda çalışmaya uygun kitler ile cihaza bağlı bilgisayar ve yazıcı.
      • Piyasada en sık bulunan sistemlerde kullanılan kitler;
        • Enzyme-linked flureskent assay (ELFA)
        • Mikro partikül enzim immuno assay (MPEIA)
        • Fluoresan polorizasyon immuno assay (FPIA)
        • Chemiluminescent Assay (CA) yöntemleri ile çalışmaktadır.




    Bu sistemlerin;

    • Bu sistemlerin;

      • BAŞLICA AVANTAJLARI
        • Duyarlılık ve özgüllükleri yüksektir.
        • Tam otomatik (inkübasyon, yıkama, reaktif pipetleme işlemleri) 24 saat kesintisiz çalışmaktadırlar. Açık sistemlere göre kontaminasyon, teknisyen hataları son derece azalmaktadır.
        • Random acces(Rastgele erişimli)
          • Çok sayıda farklı testi aynı anda ve aralıklı yapan sistem
          • İstenilen bir test istenilen bir örnekten istenilen bir durumda(acil)yapabilmeye uygun
        • STAT girişli (tek örnek ve bir örneklik reaktif kullanımı) olmalarıdır.
        • Reaktif kompartmanlarının 2-8 0C sahip olmalarıdır ve cihazlarda atık torbalarının olması.
        • Bunların yanında gerek cihaz donanımı gerek kitlerin hazırlanma tekniklerine ilişkin olarak avantajları vardır.


    DEZAVANTAJLARI

      • DEZAVANTAJLARI
        • Kurumu tek cihaza ve buna bağlı olarak tek kite zorunlu kılmaları
        • Açık sistemlere göre pahalı olmaları


    Viral lizat veya rekombinant antijenler Sodyum dodesilsulfat yardımıyla (SDS)

    • Viral lizat veya rekombinant antijenler Sodyum dodesilsulfat yardımıyla (SDS)

    • POLİACRYLAMİD JEL zemininde, molekül ağırlıklarına göre elektroforetik olarak ayrılır.

    • Polipeptit antijenler, ikinci bir elektroforez ile NİTROSELÜLOZ MEMRAN ŞERİTLER ÜZERİNE transfer edilir.

    • Hasta serumu ile şerit üzerindeki antijenler özel bir testte temas ettirilir (elektroforetik yöntem)

    • Hasta serumunda aranılan antikorlar varsa, şerit üzerindeki antijen bulunan BANDLARDA RENK KOYULUĞU (KOYU-ZAYIF-RENKSİZ) oluşur.

    • Kitin internal Pozitif ve Negatif kontrollerindeki band renkleri değerlendirmede önemlidir.

    • Ve band için, HANGİ ANTİJEN VARSA REAKTİF kabul edilir.

    • Şeritlerin üzerindeki bandların pozitifliğine göre o hasta için, etkenin sonuç virulansı patternlerine göre POZİTİF-NEGATİF VEYA SAPTANMAYAN sonuç verilir.

    •  Etkene özgü IgM, IgG, IgA antikorlarına göre test yapılabilir.

    • HIV, H.pylori ve T.pallidum enfeksiyonlarının tanısında özgüllüğü yüksek olarak kullanılmaktadır.







    • HÜCRESEL İMMUNİTEYE YÖNELİK TEST YÖNTEMLERİ

      •  İKİ BAŞLIK ALTINDA İNCELENİR
        • İNVİTRO TEST YÖNTEMLERİ
        • İNVİVO TEST YÖNTEMLERİ


    1)LÖKOSİT SAYIM VE FENOTİPLEMESİ

    • 1)LÖKOSİT SAYIM VE FENOTİPLEMESİ

    • LÖKOSİT SAYIMI

      •  Mikroskopik yöntemlerle
        •  Hemositometrik hücre sayımı
          •  Işık mikroskobu (40’lık)
          •  Thoma ve Neabaur lamları
          •  %0.4’lük tripan mavisi
          • ♣ Rutinde Pek kullanılmıyor
      •  Gelişmiş immuno hemotolojik cihazlar
        •  En uygun yöntemdir
        •  Piyasada farklı firma cihazları var


    • LÖKOSİT FENOTİPLEMESİ

      •  Vücudun değişik bölgelerinde
        •  Kemik iliği, kan, dalak ve lenf nodüllerinde
          •  Lökositlerin sayı ve tipleri
            • ♣ Lenfositlerin
            •  B lenfositleri
            •  T lenfositleri
            •  T4 ve T8
            • ♣ Monositlerin
            • ♣ Granülositlerin
            •  Nötrofiller
            •  Bazofiller
            •  Eozinofiller
            •  İmmuno hematolojik cihazlar,
            •  Flowsitometrik cihazlarla


     Hücre yüzey moleküllerinin (Marker) fenotiplemesi

    •  Hücre yüzey moleküllerinin (Marker) fenotiplemesi

      •  CD (cluster of differntiation – farklılaşma kümeleri) antijenleri
        •  Hematopoetik hücrelerin yüzeyinde yer alırlar
        •  250’ye yakın CD tanımlanmıştır
        •  Lökositlerin yüzeyindeki CD antijenik epitopları
          • ♣ Monoklonal antikorların (MAbs)
            •  Fluoresan boyalar
            •  Enzimlerle konjuge edilerek
            •  Fluoresan mikroskobuyla
            •  Flow sitometri cihazlarıyla( EN SIK)
            • * Kantitatif analizi ve
            • * Hücre ayrımı ve tanımlaması yapılır




    Do'stlaringiz bilan baham:
    1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11


    Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2017
    ma'muriyatiga murojaat qiling