- IgM’in Fc bölgesine karşıt anti-IgM Ab katı faza
- bağlanır
- Üzerine hasta serumu (IgM?) konulur
- Üzerine viral antijen
- Enzimle işaretli antikor
- Substrat…
Konjugat faz formu - Katı fazda viral Ag
- Hasta serumu (IgM?)
- ENZİMLE İŞARETLİ anti IgM Ab (KONJUGAT)
- Substrat…
UYGULAMA CİHAZ SİSTEMLERİ UYGULAMA CİHAZ SİSTEMLERİ - MİKROELİSA TEMELLİ AÇIK SİSTEMLER
- Klasik Cihazlar
- İlk yıllarda kullanılan bağımsız yıkayıcı ve okuma cihazlarından ibaret sistem
- Yarı Otomatik veya Tam Otomatik Cihazlar
- Örnek yükleme, Yıkama ve okuma cihazları entegre sistemler
MAKROELİSA TEMELLİ KAPALI SİSTEMLER - Kan bankası rutin çalışmalarına son yıllarda giren sistemlerdir.
- Çalışma sistemleri ve Prensipleri;
- Kapalı bir cihaz ve bu cihazda çalışmaya uygun kitler ile cihaza bağlı bilgisayar ve yazıcı.
- Piyasada en sık bulunan sistemlerde kullanılan kitler;
- Enzyme-linked flureskent assay (ELFA)
- Mikro partikül enzim immuno assay (MPEIA)
- Fluoresan polorizasyon immuno assay (FPIA)
- Chemiluminescent Assay (CA) yöntemleri ile çalışmaktadır.
Bu sistemlerin; - BAŞLICA AVANTAJLARI
- Duyarlılık ve özgüllükleri yüksektir.
- Tam otomatik (inkübasyon, yıkama, reaktif pipetleme işlemleri) 24 saat kesintisiz çalışmaktadırlar. Açık sistemlere göre kontaminasyon, teknisyen hataları son derece azalmaktadır.
- Random acces(Rastgele erişimli)
- Çok sayıda farklı testi aynı anda ve aralıklı yapan sistem
- İstenilen bir test istenilen bir örnekten istenilen bir durumda(acil)yapabilmeye uygun
- STAT girişli (tek örnek ve bir örneklik reaktif kullanımı) olmalarıdır.
- Reaktif kompartmanlarının 2-8 0C sahip olmalarıdır ve cihazlarda atık torbalarının olması.
- Bunların yanında gerek cihaz donanımı gerek kitlerin hazırlanma tekniklerine ilişkin olarak avantajları vardır.
DEZAVANTAJLARI - DEZAVANTAJLARI
- Kurumu tek cihaza ve buna bağlı olarak tek kite zorunlu kılmaları
- Açık sistemlere göre pahalı olmaları
Viral lizat veya rekombinant antijenler Sodyum dodesilsulfat yardımıyla (SDS) Viral lizat veya rekombinant antijenler Sodyum dodesilsulfat yardımıyla (SDS) POLİACRYLAMİD JEL zemininde, molekül ağırlıklarına göre elektroforetik olarak ayrılır. Polipeptit antijenler, ikinci bir elektroforez ile NİTROSELÜLOZ MEMRAN ŞERİTLER ÜZERİNE transfer edilir. Hasta serumu ile şerit üzerindeki antijenler özel bir testte temas ettirilir (elektroforetik yöntem) Hasta serumunda aranılan antikorlar varsa, şerit üzerindeki antijen bulunan BANDLARDA RENK KOYULUĞU (KOYU-ZAYIF-RENKSİZ) oluşur. Kitin internal Pozitif ve Negatif kontrollerindeki band renkleri değerlendirmede önemlidir. Ve band için, HANGİ ANTİJEN VARSA REAKTİF kabul edilir. Şeritlerin üzerindeki bandların pozitifliğine göre o hasta için, etkenin sonuç virulansı patternlerine göre POZİTİF-NEGATİF VEYA SAPTANMAYAN sonuç verilir. Etkene özgü IgM, IgG, IgA antikorlarına göre test yapılabilir. HIV, H.pylori ve T.pallidum enfeksiyonlarının tanısında özgüllüğü yüksek olarak kullanılmaktadır.
HÜCRESEL İMMUNİTEYE YÖNELİK TEST YÖNTEMLERİ - İKİ BAŞLIK ALTINDA İNCELENİR
- İNVİTRO TEST YÖNTEMLERİ
- İNVİVO TEST YÖNTEMLERİ
1)LÖKOSİT SAYIM VE FENOTİPLEMESİ 1)LÖKOSİT SAYIM VE FENOTİPLEMESİ LÖKOSİT SAYIMI - Mikroskopik yöntemlerle
- Hemositometrik hücre sayımı
- Işık mikroskobu (40’lık)
- Thoma ve Neabaur lamları
- %0.4’lük tripan mavisi
- ♣ Rutinde Pek kullanılmıyor
- Gelişmiş immuno hemotolojik cihazlar
- En uygun yöntemdir
- Piyasada farklı firma cihazları var
LÖKOSİT FENOTİPLEMESİ - Vücudun değişik bölgelerinde
- Kemik iliği, kan, dalak ve lenf nodüllerinde
- Lökositlerin sayı ve tipleri
- ♣ Lenfositlerin
- B lenfositleri
- T lenfositleri
- T4 ve T8
- ♣ Monositlerin
- ♣ Granülositlerin
- Nötrofiller
- Bazofiller
- Eozinofiller
- İmmuno hematolojik cihazlar,
- Flowsitometrik cihazlarla
-
Hücre yüzey moleküllerinin (Marker) fenotiplemesi Hücre yüzey moleküllerinin (Marker) fenotiplemesi - CD (cluster of differntiation – farklılaşma kümeleri) antijenleri
- Hematopoetik hücrelerin yüzeyinde yer alırlar
- 250’ye yakın CD tanımlanmıştır
- Lökositlerin yüzeyindeki CD antijenik epitopları
- ♣ Monoklonal antikorların (MAbs)
- Fluoresan boyalar
- Enzimlerle konjuge edilerek
- Fluoresan mikroskobuyla
- Flow sitometri cihazlarıyla( EN SIK)
- * Kantitatif analizi ve
- * Hücre ayrımı ve tanımlaması yapılır
Do'stlaringiz bilan baham: |