Kurs ishining maqsadi : genomni tahrirlashning asosiy usullarini o'rganishdir. Ushbu maqsad bilan bog'liq holda biz quyidagi vazifalarni

II. Genlarni tahrirlash usullar 
2.1. Genlarni tahrirlashning zamonaviy usullari
Genomni tahrirlash quyidagilar yordamida amalga oshiriladi: 
- kimerik oligonükleotidlar; 
- meganukleazlar, 
- ZF yadrolari, 
- TALE yadrolari, 
- CRISPR/Cas texnologiyalari, 
- sun'iy molekulyar qaychi ARCUT. 
Kimerik oligonükleotidlar yordamida birinchi mutagenez 1999 yilda amalga 
oshirilgan. 
Shuni ta'kidlash kerakki, oligonukleotid konstruktsiyalari yordamida 
mutagenezning turli xil o'zgarishlari mavjud. 
Biroq, ushbu yondashuvdan foydalanish istiqbollari kichik, chunki: 
- mutatsiyalarni kiritish jarayonining past samaradorligi; 
- kerakli o'simliklarni tanlashda jiddiy qiyinchiliklar. 
Shuningdek, genomik tahrirlash usullaridan biri bu DNKdagi ikki zanjirli 
uzilishlardan, shuningdek, meganukleazlardan foydalanishdir. 
Rekombinatsiyaning eng yuqori samaradorligi uchun maqsadli DNK mintaqasiga 
ikki zanjirli uzilishlarni kiritish talab qilinadi, buning uchun meganukleazlar mos 
keladi. Ikki zanjirli uzilish tufayli, rekombinatsiya tufayli yangi DNK segmentini 
genomning ma'lum bir joyiga kiritish juda oson. 

---

14 
Keyinchalik, ZF nukleazlari yordamida genomni tahrirlash xususiyatlariga to'xtalib 
o'tamiz. 
Shunday qilib, DNK molekulasidagi ikki zanjirli uzilishlar rekombinatsiya 
samaradorligini sezilarli darajada oshiradi, shuning uchun bunday uzilishlar 
yaratilishi kerak. Yuqori samaradorlik uchun kimerik nukleazadan foydalanish 
taklif etiladi. Bunday holda, "sink barmoqlari" tanib olish maydoni sifatida 
ishlatiladi. Shunday qilib, ularni FokI cheklash fermentining katalitik sohasi bilan 
birlashtirib, ular aslida ZF yadrosiga aylandi. 
Shuni ta'kidlash kerakki, ZF genomini tahrirlashning eng qiyin qismi nukleotidlar 
ketma-ketligiga xos bo'lgan sink barmoqlarini qurishdir. 
Genomni tahrirlashning yana bir usuli - TALEN texnologiyasi. Turli 
organizmlarning genomlariga maqsadli mutatsiyalarni kiritishning soddaligi va 
yuqori samaradorligi bilan tavsiflanadi. Bu texnologiya TALE nukleazasidan 
foydalanishga asoslangan. Shuni ta'kidlash kerakki, TALEN texnologiyasidan 
foydalangan holda genomni tahrirlashning eng yuqori samaradorligi uchun 
tahrirlash saytlarini qidirish, genetik muhandislik konstruksiyalarini loyihalash va 
maqsadli bo'lmagan saytlarni aniqlash uchun mo'ljallangan bir qator kompyuter 
dasturlari yozilgan. 
Bundan tashqari, shuni ta'kidlaymizki, CRISPR/Cas genomlarini tahrirlash 
texnologiyasi boshqalardan sezilarli ustunligi tufayli hozirda ustunlik qilmoqda. 
Shunday qilib, uning asosiy afzalliklari tayyorgarlik protseduralarining nisbatan 
soddaligi va tezligidir. Shu bilan birga, genomga kiritilgan o'zgarishlarning aniqligi 
ushbu texnologiyaning turli xil takomillashuvlari tufayli ancha yuqori. 
Keyinchalik, genomlarni tahrirlash uchun ARCUT sun'iy molekulyar qaychidan 
foydalanishga e'tibor qaratamiz. 

---

15 
Shunday qilib, ba'zi mualliflar ARCUTni ZFN genomik tahriri, shuningdek, 
meganukleazlardan foydalanish bilan solishtirishadi. Biroq, genomlari shu tarzda 
tahrirlangan yangi organizmlar hali olinmaganligi aniqlandi.