Laboratoriya mashg'ulot-6 mavzu: murakkab oqsillar tarkibini o'rganish murakkab oqsillarni ajratib olish va ularning tarkibini aniqlash

Sutdan kazein olish (tadqiqot Boshqird davlat universitetining Birsk filiali laboratoriyasida o'tkazildi).
Ishning maqsadi: sutdan kazeinni ajratish. Rang reaksiyalari yordamida kazein molekulasidagi fosfor va peptid bog'lanishlarini aniqlash.
Uskunalar va reaktivlar: 50 ml hajmli kimyoviy stakan, tomchilab yuboriladigan pipetka (3 dona), 10 ml o'lchov tsilindri, suv hammomi, filtr qog'ozi, filtrlash uchun shisha voronka, plastik probirka stend, 5 ml shisha. probirkalar, probirka ushlagichi, tayoqchali stakan, metall spatula, to‘liq sut 3,2% va undan yuqori, yog‘siz sut, pasterizatsiyalangan sut 2,5%, distillangan suv, 5% xlorid kislota eritmasi, 10% natriy gidroksid eritmasi, konsentrlangan nitrat kislota, 1 dona. % - mis sulfat eritmasi, molibden reaktivi, universal indikator qog'oz.
Ishnig borishi:5 ml sutni 50 ml li stakanga soling va 7 ml distillangan suv qo'shing. Aralash aralashtiriladi va 1% li HCl eritmasidan 10-15 tomchi qo'shiladi. Kislota tomchilab qo'shiladi, chunki kazein cho'kmasi ortiqcha kislotada eriydi. Suspenziya aralashtiriladi. 3-5 daqiqadan so'ng. bo'shashgan cho'kma hosil bo'ladi (4-rasm).



4-rasm - Bo'shashgan cho'kindi
Kislota olib tashlash uchun stakanga 10 ml distillangan suv solinadi, aralashtiriladi va 5 daqiqaga qoldiriladi. Suyuqlik ehtiyotkorlik bilan dekanatsiya qilinadi (cho'kindidan drenajlanadi). Cho'kmaga yana 10 ml distillangan suv qo'shing va muloyimlik bilan aralashtiring va 5 daqiqadan so'ng. aralashmani qog'oz filtri orqali filtrlang.
Kazein tarkibidagi fosforni aniqlash uchun ikkinchisi ishqoriy gidrolizga uchraydi va noorganik fosfor molibden reaktivi yordamida aniqlanadi. Buning uchun filtrdan olingan cho‘kma sig‘imi 50 ml bo‘lgan stakanga o‘tkaziladi va unga 6 ml 10% li NaOH eritmasi qo‘shiladi. Stakanning tarkibi suv hammomida 1 soat davomida isitiladi, xona haroratiga qadar sovutiladi va tarkibi lakmus bilan ozgina kislotali bo'lguncha (~ pH 6 gacha) 20-30 tomchi konsentrlangan HNO3 qo'shib neytrallanadi. Neytrallash jarayonida oqsilning to'liq bo'lmagan gidrolizlanishining yuqori molekulyar mahsulotlarining cho'kmasi cho'kishi mumkin (5-rasm).

5-rasm - makromolekulyar mahsulotlarning cho'kmasi

Cho'ktirilgandan so'ng suyuqlik filtrlanadi va filtrat bilan peptid bog'i va fosfor kislotasi mavjudligi uchun molibden testi bilan biuret reaktsiyasi o'tkaziladi. 5-10 ml sig'imli probirkadagi 5 tomchi gidrolizatga 0,5 ml 10% li NaOH eritmasidan va 2 tomchi 1% li CuSO4 eritmasidan qo'shing. Binafsha rangning ko'rinishi kuzatiladi (6-rasm).

6-rasm - biuret reaktsiyasi

So`ngra sig`imi 5-10 ml bo`lgan probirkadagi 10 tomchi molibden reaktiviga 5 tomchi gidrolizat qo`shiladi va aralashma qaynayotgan suv hammomiga bir necha daqiqaga qo`yiladi. Tizimda noorganik fosfat mavjud bo'lganda, suyuqlik limon sariq rangga aylanadi (7-rasm). Eritma sovutilganda kompleks birikma (IN4)3H4[P(Mo2O7)6] sariq choʻkmasi hosil boʻladi.

7-rasm - noorganik fosfat mavjudligi
Xulosa
Kazein muhim oziq-ovqat mahsulotidir. Kazeinning yaxshi manbalari sut va pishloqdir. Kazein, shuningdek, ikkinchisini oqsil bilan boyitish uchun mo'ljallangan ba'zi xun takviyalarida ham qo'llaniladi. Bunday qo'shimchalar ko'pincha turli patologik sharoitlar, masalan, og'ir kuyishlar, isitma yoki surunkali kasalliklar uchun buyuriladi.

Foydalanilgan manbaa va adabiyotlar:

1.Казеин // Химическая энциклопедия. - Текст: электронный. - URL:
https://gufo.me/dict/chemistry_encyclopedia/Ka3euH (дата обращения 19.02.2021.)
2.Биохимия молока и молочных продуктов : учебник / К. К. Горбатова, П. И.
Гунькова, под общ. ред. К. К. Горбатовой. - 4-е изд., перераб. и доп. - Санкт- Петербург : ГИОРД, 2010. - 336 с. - Текст : электронный. - URL: https://docplayer.ru/27383049-Biohimiya-moloka-i- molochnyh-produktov-
izdatelstvo-giord.html (дата обращения 21.02.2021.)
3. Дымар О. В. Производство казеина: основы теории и практики :
монография / О. В. Дымар, С. И. Чаевский. - Минск: РУП «Институт мясомолочной промышленности», 2007. - 70 с. - Текст : электронный. - URL: https://my.b-ok.as/book/3084229/4a850e (дата обращения 20.02.2021.)
4.Охрименко О. В. Исследование свойств молока и молочных продуктов.
Практикум по «Химии и физике молока» : учебное пособие / О. В. Охрименко, А. В. Охрименко. - Вологда- Молочное : ИЦ Вологодской государственной молочнохозяйственной академии имени Верещагина, 2000. - 162 с. - Текст : электронный. - URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=24600982 (дата обращения 22.02.2021.)
5.Рогожин, В.В. Биохимия молока и молочных продуктов / В.В. Рогожин .-СПб.:
ГИОРД,2006.-320с. - Текст: электронный. - URL: https: //search.rsl.ru/ru/record/ 01003141164