Методика проведения лабораторных анализов в свп, их клинико-диагностическое значение

МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И МОЧЕ ФЕРМЕНТАТИВННЫМ МЕТОДОМ (Био-Ла-Тест)
Мочевина – основной конечный продукт обмена белков в организме человека. На долю мочевины приходится 80-90% выделяемого с мочой азота. Биологическая роль синтеза мочевины в печени (орнитиновый цикл мочевинообразования) заключается в связывании образующегося при дезаминировании аминокислот аммиака в относительно малотоксичную молекулу мочевины, которая затем экскретируется с мочой. Зная количество экскретируемой за сутки мочевины и количество азота, поступающего с пищей, можно вычислить азотистый баланс, который является важным показателем состояния белкового и аминокислотного обмена. Азотистый баланс может быть:

1. 
   положительным – у детей, у выздоравливающих после тяжелой болезни;
   
2. 
   отрицательным – при тяжелых заболеваниях, в том числе онкологических, при голодании и в старческом возрасте;
   
3. 
   равным нулю (азотистое равновесие) – у здоровых взрослых людей (при нормальном питании).
   

Принцип метода. Метод - ферментативный, уреаза гидролизует мочевину с образованием аммиака и двуокиси углерода. Возникший аммиак определяют по цветной реакции салицилата со щелочным раствором гипохлорита.

Ионы аммония в присутствии нитропруссида реагируют с фенолом и гипохлоритом. В результате реакции образуется индофенол (синего цвета), интенсивность окрашивания которого пропорциональна концентрации ионов аммония (и соответственно мочевины).

Оснащение работы

Оборудование	Посуда	Реактивы
ФЭК	Центрифужные пробирки	Дистиллированная вода
Центрифуга	Высокие пробирки	Готовый набор реактивов для приготовления 900 мл рабочих растворов для 200 определений мочевины в мочи и в сыворотке. Био-ЛА-Тест PLIVA –Lachema a.s.
	Пипетки на 2,0 мл
	Микропипетки на 0,1 мл
	Кварцевые кюветы 10 мм