Microsoft Word sbornik rs rtf

* 
Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова,
** 1410 
Центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора МО РФ, 
Санкт-Петербург, Россия 
Проблема химической безопасности жизни человека из сугубо академической переросла в 
социально значимую и весьма актуальную для населения целых регионов. Появляется все больше 
мест, где постоянное пребывание человека, вследствие химического загрязнения представляет угрозу 
для его здоровья, а иногда и жизни. В настоящее время основной нерешенной научной проблемой 
является оценка длительного воздействия малых и сверхмалых доз ксенобиотиков различных 
классов, а так же других факторов химически опасных объектов. В практическом здравоохранении 
все сильнее ощущается нехватка методов объективной оценки влияния на здоровье человека 
пролонгированного низкодозового воздействия промышленных и бытовых химических соединений. 
В свою очередь изменения иммунологической реактивности могут служить предпосылкой для 
развития целого ряда тяжелых соматических заболеваний. Оценка состояния иммунной системы 
должна стать неотъемлемой частью системы медицинского обеспечения работников химически 
опасных объектов и лиц, проживающих в непосредственной близости от них. Иммунологические 
показатели целесообразно использовать при решении целого ряда медицинских задач. Результаты 
иммунологических исследований могут выступать в качестве экспертных критериев при 

---

73
установлении причинной связи заболеваний с профессиональным воздействием токсичных 
химикатов, быть важным элементом при оценке профессиональной пригодности и возможности 
проживания людей в условиях химического загрязнения окружающей среды. Определение 
индивидуальной чувствительности к токсичным соединениям может быть использовано для оценки 
уровня неблагоприятного воздействия токсикантов и картирования загрязненности территории. 
Иммуноэпидемиологическое обследование лиц, работающих и проживающих в условиях химической 
опасности, является основой выявления групп риска развития иммунологической и иммунозависимой 
патологии с целью проведения своевременной иммунотропной терапии. Иммунокоррекцию, в 
данном случае, можно рассматривать как лечебно-профилактический метод, способствующий 
уменьшению негативного влияния комплекса факторов химической опасности на здоровье людей.
УВЕЛИЧЕНИЕ ПРОПУСКНОЙ СПОСОБНОСТИ
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ ПРИ ОЦЕНКЕ
ПОГЛОЩЕННЫХ ДОЗ РАДИАЦИОННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ:
ПРИМЕНЕНИЕ БЫСТРЫХ МЕТОДОВ ДИЦЕНТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
И ЕГО ПРОВЕДЕНИЕ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ 
М.В. Репин*, Л.А. Репина** 
* 
Объединенный институт ядерных исследований, Дубна, ** Государственный 
научный центр РФ – Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, Россия 
В настоящее время анализ дицентрических хромосом в лимфоцитах крови человека является 
золотым стандартом в радиационной биологической дозиметрии. Однако такой анализ требует 
значительного количества времени. В связи с этим одной из актуальных проблем современной 
биодозиметрии является уменьшение времени, необходимого для оценки поглощенных доз 
радиационного воздействия. 
1. 
Ранее нами было обосновано применение дицентрического анализа лимфоцитов крови 
человека без определения числа центромер хромосом в клетках без повреждений, уменьшающего 
общее время микроскопического анализа. Широко известным стал также и другой быстрый метод, 
который не требует определения общего числа хромосом во всех анализируемых метафазных клетках 
(«Quickscan» 
метод). В настоящем докладе представляются соответствующие теоретические и 
практические основы этих методов цитогенетического анализа, а также особенности их применения. 
2. 
В докладе демонстрируется возможность проведения дицентрического хромосомного анализа в 
режиме реального времени (Real-time dicentric chromosome assay). Показано, что использование 
быстрых методов дицентрического анализа в режиме реального времени в случаях массовых 
радиационных поражениях людей потенциально увеличивает в несколько раз пропускную 
способность цитогенетических лабораторий.
Полученные разработки могут быть использованы в любой цитогенетической лаборатории, 
осуществляющей оценку поглощенных доз радиационного воздействия, поскольку они не требуют 
дополнительного оборудования и переподготовки имеющегося персонала. 
РАЗРАБОТКА ГОСУДАРСТВЕННОГО СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА 
СОСТАВА КРОВИ, СОДЕРЖАЩЕЙ РТУТЬ 
Г.В. Рутковский, Р.К. Глушков, А.М. Малов, Л.А. Муковский, Е.В. Семенов,
В.К. Сибиряков 
Институт токсикологии ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия 
Как известно, ртуть является приоритетным экотоксикантом, острые и хронические отравления 
этим металлом и его соединениями нередкое явление в наше время. Специфическая диагностика 
отравлений соединениями ртути основана на количественном определении металла в биосредах. Для 
объективной оценки полученных аналитических данных необходимы средства контроля качества 

---

74
лабораторных исследований. В качестве таких средств обычно используются стандартные или 
контрольные образцы состава металлов в биосредах и, прежде всего, в крови. Подобные образцы для 
ртути в РФ не производятся. В этой связи в Институте токсикологии в 2008 г. был разработан и 
прошел необходимую экспертизу стандартный образец предприятия состава ртути в крови, а затем 
были проведены исследования по созданию государственного стандартного образца (ГСО) состава 
крови, содержащей ртуть. С этой целью были изготовлены образцы лиофилизированной крови белых 
крыс, подвергавшихся подострой (в течение 30 дней) затравке нитратом ртути и бычьей крови, в 
которую методом in vitro вводили водный раствор ГСО ртути. Химический анализ полученных 
стандартных образцов показал, что содержание в них Hg
2+
оказалось в пределах заданных 
диапазонов: партия № 1a – 4-10 мкг/дм
3 
(
аттестованное значение – 7,5 мкг/дм
3
) 
и партия № 1b – 
20-35 
мкг/дм
3
(
аттестованное значение – 22,0 мкг/дм
3
). 
На основании результатов проведенных 
исследований и подготовленной нормативно-технической документации в ФГУП УНИИМ 
(
г. Екатеринбург) была проведена экспертиза представленных материалов, на основании которой 
Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии выдало Свидетельство № 1579 
об утверждении типа ГСО состава крови, содержащей ртуть (CO BL-Hg). Разработанный ФГУН ИТ 
ФМБА России ГСО внесен в Государственный реестр с регистрационным номером ГСО 9653-2010 и 
допущен к применению в Российской Федерации. 
ПОСТРОЕНИЕ КАЛИБРОВОЧНОЙ КРИВОЙ ДОЗА-ЧАСТОТА 
ДИЦЕНТРИКОВ ПРИ ОБЩЕМ ФРАКЦИОНИРОВАННОМ ОБЛУЧЕНИИ 
ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ ЦЕЛЕЙ БИОДОЗИМЕТРИИ 
А.В. Семёнов 
Российский научный центр радиологии и хирургических технологий 
Минздравсоцразвития РФ, Санкт-Петербург, Россия 
Для биологической реконструкции доз, полученных человеком при неконтролируемом 
облучении, частота хромосомных аберраций (дицентриков), регистрируемых в его лимфоцитах, 
сопоставляется с калибровочной кривой доза-эффект, построенной по результатам облучения 
лимфоцитов in vitro. Данный подход успешно применяется для случаев острого однократного 
облучения человека. Однако в ситуациях, связанных с радиационными авариями облучение людей 
часто имеет фракционированный или пролонгированный характер. Очевидно, что в этих случаях 
оценки поглощённых доз могли бы быть более точными при использовании кривой доза-эффект, 
полученной при фракционированном тотальном облучении человека в известных дозах.
В настоящей работе была исследована дозовая зависимость частоты дицентриков при тотальном 
фракционированном облучении 3 онкопациентов в интервале доз от 0 до 1,15 Гр γ-излучения 
60
Со: по 
0,115 
Гр ежедневно. Было установлено, что эта зависимость удовлетворительно описывается 
линейной функцией вида Y=(0,39±0,17)+(3,04±0,61)*D, где Y – количество дицентриков на 100 
клеток, а D – доза облучения в Гр. Сравнение данного уравнения с уравнением, полученным при 
однократном облучении в тех же дозах лимфоцитов этих пациентов in vitro, показало, что выход 
дицентриков на единицу дозы при облучении in vivo достоверно ниже, чем при облучении in vitro. 
Следовательно, применение in vitro калибровочной кривой при реконструкции доз, поглощённых 
человеком в режиме фракционированного / пролонгированного облучения, может приводить к их 
заниженной оценке. 
Использование калибровочной кривой доза-эффект, полученной нами при тотальном 
фракционированном облучении человека в известных дозах, позволяет более точно определять дозу 
при неконтролируемом облучении человека в случае фракционированного/пролонгированного 
характера радиационного воздействия. 

---

75
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЧИНЫ 
ВАРИАБЕЛЬНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ «COMET ASSAY» 
Н.П. Сирота, Е.А. Кузнецова 
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия 
Метод электрофореза индивидуальных клеток – Comet assay (метод «комета тест», метод ДНК-
комет), особенно его щелочная версия, широко используется для оценки уровня поврежденности 
ДНК и ее репарации в индивидуальных клетках разных тканей человека, животных и растений. 
Накопленные данные позволили поставить задачу о включении этого метода в батарею официальных 
тестов по оценке генотоксичности на уровне клеточных культур и лабораторных животных. В связи с 
этим проводится валидация метода, результаты которой показали наличие большой вариабельности в 
межлабораторных исследованиях. Анализ литературных и собственных экспериментальных данных 
наводит на мысль, что одной из причин может быть не идентичность условий проведения 
электрофореза, являющегося необходимым этапом исследований. В работе исследовано влияние 
напряженности электрического поля (1-3.0 B/см), температуры электрофоретического буфера и 
концентрации агарозы (0,5-1,0%) на уровень поврежденности клеточной ДНК, выявляемый в норме и 
после воздействия ионизирующей радиации in vitro. Показано, при использовании напряженности 
более 1,0 В/см наблюдается существенный рост чувствительности метода. Различия в концентрации 
используемой агарозы на 0,25%, сопровождаются статистически значимой вариабельностью 
результатов по параметру длины хвоста и момента хвоста «комет». Предлагается новый подход к 
анализу массива получаемых данных. Обнаружена изменчивость ответа на радиационное 
воздействие (доза 4Гр, in vitro) лейкоцитов индивидуальных мышей при мониторинге животных в 
течение двух месяцев. Предполагается, что наблюдаемая изменчивость в чувствительности к 
радиационному воздействию обусловлена вариабельностью внутриклеточного антиоксидантного 
статуса. 
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ИНДИКАЦИИ
И БИОДОЗИМЕТРИИ ХИМИЧЕСКИХ И РАДИАЦИОННЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ