Microsoft Word Введение в спектральный и люм анализ doc

 
5.3. Вторичная люминесценция, люминесцентные зонды. 
Есть много биологически важных соединений, которые сами не люминес-
цируют и поэтому использовать весьма чувствительные, неразрушающие веще-
ство и хорошо отработанные методы люминесцентного анализа для их изуче-
ния напрямую невозможно. Поэтому в настоящее время при изучении биообъ-
ектов наряду с исследованием собственной флуоресценции клеток и тканей ши-
роко используется метод флуоресцентных зондов. Суть этого метода заклю-
чается в следующем: существует ряд люминесцирующих веществ (зондов), ко-
торые избирательно взаимодействуют с определенными компонентами клетки 
и отдельными молекулами, причем образующийся комплекс флуоресцентного 
зонда и взаимодействующего с ним вещества клетки как правило имеет более 
интенсивную флуоресценцию, чем люминесцентный зонд в несвязанном со-
стоянии. Свечение этого комплекса под действием света называют вторичной 
(наведенной) или зондовой флуоресценцией.
Так, в результате творческого содружества кафедры медицинской и био-
логической физики БГМУ, Республиканского центра гемо- и лимфосорбции и 
лаборатории молекулярного анализа Института физики НАН РБ, был предло-
жен быстрый и эффективный метод оценки степени очистки сывороточного 
Рис.14 

---

35 
альбумина человека путем добавления к плазме крови флуоресцентного зонда 
АНС. Флуоресценция АНС в водном растворе очень слаба (квантовый выход 
0,006), но при связывании с белком квантовый выход возрастает до 0,3-0,8. По-
этому, чем интенсивнее люминесценция зонда (АНС), тем большее количество 
зонда связалось с сывороточным альбумином и значит, тем выше степень очи-
стки альбумина. Этот эффект иллюстрируется на рис.14.
Применение вторичной флуоресценции позволило, например, изучить 
распределение ионов кальция в клетке и в различных органах, а также его из-
менение в процессе жизнедеятельности организма. Наибольшее распростране-
ние в качестве зонда на кальций нашел хлортетрациклин. Он образует сложный 
комплекс с ионами кальция, связанными биомембранами, который флуоресци-
рует тем интенсивнее, чем больше кальция адсорбировано на биомембранах 
[4]. 
В настоящее время известно более ста различных флуоресцентных зон-
дов, специфически связывающихся с определенными биомолекулами и клеточ-
ными субструктурами (см.[2]).