Mikrobiolog. p65
Download 1.38 Mb. Pdf ko'rish
|
umumiy mikrobiologiya
OZBEKISTON RESPUBLIKASI OLIY VA ORTA MAXSUS TALIM VAZIRLIGI ORTA MAXSUS, KASB-HUNAR TALIMI MARKAZI A.B. GANIXOJAYEVA, H.A. NAZAROVA UMUMIY MIKROBIOLOGIYA Òibbiyot kollejlari uchun darslik 5-nashri Òoshkent «ILM ZIYO» 201 7 2 Oliy va orta maxsus, kasb-hunar talimi ilmiy-metodik birlashmalari faoliyatini muvofiqlashtiruvchi Kengash tomonidan nashrga tavsiya etilgan. Darslik, asosan, sogliqni saqlash tasarrufidagi tibbiyot kollejlarining tibbiy profilaktika ishi yonalishi feldsher-laborant va tibbiy profilaktika ishi feldsheri ixtisosliklarining mikrobiologiya fanidan hozirgi kunda tez-tez uchrab turadigan yuqumli kasalliklarga aniq tashxis qoyish maqsadida tayyorlandi. Darslikda yuqumli kasalliklarga sababchi bolgan mikroorganizm- larning barcha xossalari, ularning tashxis usullari yoritilgan. Ò a q r i z c h i l a r : Ò.N. ISAXOJAYEVA tibbiyot fanlari nomzodi; I.U. BAHROMOV biologiya fanlari nomzodi. © A.B. Ganixojayeva va boshq., 201 © «ILM ZIYO» nashriyot uyi, 201 ISBN 978-9943-16-340-9 UOK 579.2(075) ÊBK 28.4ya722 G21 -y. 7 -y. 7 3 KIRISH «Umumiy mikrobiologiya» darsligi uch qismdan iborat bolib, umumiy mikrobiologiya mikrobiologiya fanining rivojlanish tarixi, mikroorganizmlar tasnifi, morfologiyasi, polimorfizmi, ultrastruk- turasi, fiziologiyasi, tashqi muhit omillarining tasiri, tabiatda tarqalishi, bakteriofaglar, antibiotiklar, ularning genetikasi, infeksiya va immunitet tushunchalari, allergiya va anafilaksiya hodisasini; xususiy mikrobiologiya har bir yuqumli kasallikni keltirib chiqaruvchi mikroorganizmlarning barcha xossalari, shu kasallikka tashxis qoyish usullari va kasallikning oldini olish chora-tadbirlarini; sanitariya mikrobiologiyasi tashqi muhitda uchraydigan mikroorganizmlar va ularning odam organizmiga tasirini organadi. Mikrobiologiya biologiyaning bir bolimi bolib, mikroorga- nizmning tashqi muhit bilan bogliqligi va uning rivojlanishini orga- nadi. Bu fan mikroorganizmlarning xossalarini, shuningdek, ular chaqiradigan kasalliklar va tashqi muhit obyektlarida mikroorganizmlar keltirib chiqaradigan jarayonni organadi. Mikroorganizmlarning foydali xossalari ham bolib, ulardan xalq xojaligida keng foyda- laniladi. Mikroorganizmlar tabiatda keng tarqalgan, ular suvda, tup- roqda, odam va hayvon organizmida uchraydi. Ayrim mikroorga- nizmlar yordamida tabiatda moddalar almashinuvi (organik chiqindi- larning mikroorganizmlar tasirida noorganik moddalarga aylanishi va osimliklar tomonidan ozlashtirilishi) sodir bolsa, boshqa mikroorganizmlar esa odam va hayvon organizmida kasalliklarni keltirib chiqaradi. Mikrobiologiya keng qamrovli bolib, oz navbatida, bir qancha mustaqil fanlarga bolinadi. Umumiy mikrobiologiya mikroblarning tuzilishi, hayoti, tabiatda tarqalishi, ozgaruvchanligi va irsiy belgi- larning berilishini organadi. Òibbiyot mikrobiologiyasi organizmda kasallik keltirib chiqaruvchi mikroorganizmlarni hamda ular orga- nizmga kirganda, yuzaga keltiradigan jarayonlarni organadi. Òibbiyot mikrobiologiyasining vazifasi yuqumli kasalliklarni aniqlashning laboratoriya-diagnostika usullarini, immunobiologik tibbiyot prepa- ratlarini ishlab chiqish, yuqumli kasalliklarning oldini olish chora- tadbirlarini belgilashdan iboratdir. Hozirgi vaqtda tibbiyot mikrobiologiyasi: virusologiya (viruslar haqidagi fan); protozoologiya (sodda jonivorlarni organadi); mikologiya (zamburuglarni organadi); 4 3.Veterinar mikrobiologiya (hayvon organizmida kasallik chaqiruv- chi mikroorganizmlarni organadi. Bu fan tibbiyot mikrobiologiyasi bilan chambarchas bogliq. Chunki kopgina mikroorganizmlar odam va hayvonlar organizmida kasallik qozgatadi.) 4. Sanoat mikrobiologiyasi (oziq-ovqat ishlab chiqarish sanoatida qollaniladigan oziq-ovqat va boshqa moddalarni mikroorganizmlar tasiridan himoya qilishda antibiotik va boshqa dorivor moddalardan foydalanishni organadi) fanlari bilan uygun amalga oshiriladi. «Agromikrobiologiya» tuproq tuzilishi va uning hosildorligini oshirishda, mikroblarning roli va ahamiyati haqidagi fan. Inson mikroorganizmlar ochilishidan oldin ular bilan toqnash kelgan. Xamir oshirishda, sutni ivitishda, uzum sharbatini achitishda achitqilardan foydalangan. Insoniyatga azaldan malumki, ayrim kasalliklar butun shahar va qishloq aholisini olimiga sabab bolgan. Qadimgi yunon shifokori Giðpokrat yuqumli kasalliklar va alohida kasallik tugdiruvchi buglar haqida yozib qoldirgan va ularni «miazmalar» deb nomlagan. Shunday fikrlar italiyalik shifokor Jirolamo Frakastoro (XVI asr) tomonidan ham bildirilgan, u «tirik, mayda va bizning sezgi azolari- mizga mushkul bolgan zarrachalar» odam organizmiga kirib, kasallikni keltirib chiqarishi haqidagi nazariyani yaratadi. Yuqumli kasalliklarning sababchisi tirik organizmlar ekanligi haqidagi fikrni XVII asr boshlarida Afanasiy Kirxer aytib otadi. Bunday taxminlarni gollandiyalik tabiat- shunos Antoni van Levenguk (16321723) toliq isbotlab beradi. U qavariq linzalardan 160 marta kattalashtirib korsatuvchi mikroskopni yaratadi. U mikroskop yordamida turib qolgan yomgir suvlarini, tish qirindilarini va boshqalarni korib, rasmini chizgan holda ularni tirik mavjudotlar, deb nomlaydi. U oz kuzatuvlarining rasmlarini Londonga, qirollik jamiyatiga jonatadi. Shundan boshlab, mikrobiologiyaning morfologiya qismiga asos solindi va mikroorganizmlar sharsimon, tayoqchasimon, buramali shakllar sifatida organilib kelinmoqda. 17711772-yillarda harbiy shifokor Daniil Samoylovich Moskvada toun (chuma) epidemiyasini alohida organizm keltirib chiqaradi, degan xulosaga keladi. U birinchi bolib, toun bilan kasallangan bemorning kiyimlarini dezinfeksiya qildi. Kuchsizlantirilgan olat mikrobi bilan soglom odamni va bemorlar bilan kontaktda bolganlarni emladi. Emlash kasallikning oldini olishda qollanilishi, odamlar ishonchini qozondi. Suniy emlashda kasallik yengil otadi yoki odam umuman kasallanmaydi. Chechak kasalligi kopchilikning yostigini quritdi. 1723-yilda Parijda chechakdan 20000 kishi, Neapolda 1768-yilda 16000 kishi bir necha hafta ichida hayotdan koz yumgan. Angliyalik shifokor Eduard Jenner chechak bilan kasallangan odamlarni aniqladi. Bu hol kopincha sut soguvchilarda kuzatildi. Ular chechak bilan kasallangan hayvonlarni 5 sogganlarida, sigir chechagi bilan bilmagan holda zararlanganlar. Bu tekshirishlar 10 yil davom etadi. 1796-yili Jenner soglom bolani sigir chechagining yiringli ajralmasi bilan emladi. 1,5 oydan song shu bolaga chechak bilan kasallangan bemor materialidan yubordi. Bola kasallanmadi. Shundan boshlab, chechakka qarshi emlash boshlanib, millionlab kishilar olimining oldi olindi. Oradan bir necha yillar otgach, Levenguk organizmlarda yuqumli kasalliklar kelib chiqishida tirik mavjudotlarning hech qanday aloqasi yoq, degan fikrni ilgari suradi. XIX asrga kelib, fransiyalik olim Lun Paster (18221895) yuqumli kasalliklarning kelib chiqishida mikroorga- nizmning ahamiyati va ularga qarshi kurash usullarini ilmiy asoslab berdi. L.Paster kimyogar bolib, u mikroorganizmning yashash muhitinigina emas, balki muhitning kimyoviy tarkibini ham ozgartirish xossasiga ega ekanligini isbotlab berdi. U bijgish va chirish jarayoni mikro- organizmlar tasirida borishini asosladi. Paster tomonidan kislorodsiz sharoitda yashaydigan mikroorga- nizmlar (anaeroblar) aniqlangan. Uning muhim xizmatlaridan biri, tirik organizmlarda moslanish oz-ozidan sodir bolmasligini isbotlab berishi boldi. Bu muammo uzoq vaqtdan beri kopgina olimlar boshini qotirib kelar edi. Paster oz tajribasida oziqa muhitlariga mikroorganizmlar faqat havo orqali tushishini korsatadi. Buning uchun S shaklidagi kolbada qaynatilgan oziqa muhitni ancha vaqtgacha ochiq qoldirgan, natijada u tiniq (steril) qolgan, chunki havodan tushgan mikroblar kolbaning bogziga chokib, muhitga tushmagan. Bundan tashqari, Paster Fransiya iqtisodiyotiga katta zarar korsatayotgan iðak qurtlariga va ular keltirib chiqaradigan kasalliklarga qarshi kurash choralarini ham topdi. Fan tarixida birinchi bolib, Paster mikroorganizmlarni yuqori harorat tasirida yoqotish usulini ishlab chiqdi, bu usulni sterilizatsiya deyiladi. Qaynatganda oz xossasini yoqotadigan oziq-ovqat mahsulot- larini sterilizatsiya qilishdan «yumshoq» usulda pasterilizatsiya qilishni taklif etadi. U vabo qozgatuvchisini saqlovchi kulturadan kuchsizlan- tirilgan vaksina tayyorlaydi va tovuqlarni shu vaksina bilan emlaydi. 1885-yili Paster quturishga qarshi vaksina taklif qiladi. Nemis olimi Robert Kox (18431910) mikroorganizmlarni osti- rishda alohida koloniya va sof kulturani ajratib olishda zich oziqa muhitni amaliyotda qolladi. R. Kox birinchi bolib, mikroorganizm- larni boyashda anilin boyoqlarni qollashni, mikroskopda korayot- ganda yoritgichdan foydalanishni, immersion korishni, rasmga olishni taklif qiladi. U 1882-yilda sil qozgatuvchisi (Kox tayoqchalari)ni va 1883-yilda vabo qozgatuvchisini aniqladi. XIX asr oxirida bogma qozgatuvchisini (E. Kelbs va F. Lyoffler), qorin tifi (K. Ebert va G. Gaffki), qoqshol (A. Nikolayev va S. Kita- 6 zato), dizenteriya (A. V. Grigoryev) va boshqa qozgatuvchilar aniq- landi. 1874-yili Qozon universiteti professori Ò. N. Minx qaytalama tif bilan kasallangan bemor qonini oziga yuborib tajriba otkazdi. U kasallik qon soruvchi hasharotlar orqali tarqaladi, degan taxminni aytdi. Ikki yildan song O.O. Mochutkovskiy Minx tajribasini takrorladi. Oziga toshmali va qaytalama tif bilan kasallangan bemorning qonini yuborib, Minx tomonidan aytilgan taxminni, yani qozgatuvchining bemor qonida uchrashini isbotlab berdi. D. I. Ivanovskiy (18641920) tamaki bargining mozaik kasalligini organadi va bu kasallikni mayda agentlar keltirib chiqaradi, degan fikrga keldi. Olimning bunday fikrga kelishi sababi, u kasallangan tamaki bargidan tayyorlangan suyuqlikni mayda filtrdan otkazib, soglom osim- likka yuborganda, uning zararlanishini misol qilib korsatdi. Bu infeksion kasalliklarning virus tabiatligini isbotlovchi birinchi ishlardan edi. «Mikrobiologiya» fanining rivojlanish tarixini shartli ravishda, bir qancha davrlarga bolish mumkin. Morfologik davr, bu davrlarda mikro- organizmlarning morfologiyasi (A. Levenguk) organildi. Fiziologik davr L. Paster, R. Kox ishlari bilan boglangan. Immunologik-viru- sologik davrda immunitet va virusologiya nazariyasiga asos solindi. Rus olimi I.I. Mechnikov (18451916) «Mikrobiologiya» fanining rivojlanishiga oz hissasini qoshdi. Olim immunitet nazariyasini, yani organizm yuqumli kasalliklarga berilmasligida toqimalarning himoya roli haqidagi nazariyani yaratdi. U organizmning ayrim hujayralari (leykotsitlar, taloq hujayralari, suyak komigi va boshq.) begona moddalar, bakteriyalarni ushlab olish va hazm qilish xossasiga ega ekanligini tushuntirib berdi. Bunday hujayralarni fagotsitlar (phago yutaman, cytos hujayra), bu jarayonni esa fagotsitoz deb atadi. Yalliglanishni orga- nishda fagotsitoz asos bolib hisoblanadi. I. I. Mechnikov aytganidek, fagotsitoz kasallik chaqiruvchi mikroblar organizmga kirganida, orga- nizmning faol reaksiyasi bolib hisoblanadi. Olimning faoliyati keng va kop qirralidir. U organizmning qarish sabablarini aniqlagan va inson hayotini uzaytirish yollarini qidirgan. U ichakda yashovchi chi- rituvchi mikroorganizmlar tasirida hosil bolgan zaharli moddalar organizmni zaharlaydi, deb tushuntiradi. Buning oldini olish uchun chirituvchi mikroblarga antagonistik tasir korsatuvchi sut achitqi bakteriyalarini ichakka yuborishni tavsiya etadi. Ichak mikroflorasining bunday ozgarishi natijasida chirituvchi zaharlar odam organizmiga kamroq tasir qiladi va inson hayoti uzayadi. Hozirgi vaqtda isbotlanishiga kora, ichakning doimiy florasini ozgartirish mumkin emas, lekin I.I. Mechnikovning bir turdagi 7 mikroblarning boshqa mikroorganizmlarga tasiri xususidagi fikrlari yuqumli kasalliklarni davolashda antibiotiklardan foydalanish imko- nini beradi. Olim vabo, qorin tifi va sil qozgatuvchilarini organdi. U 1886-yili Odessada birinchi bakteriologik stansiyani tashkil qildi va mikrobiologlar maktabini ochdi. Uning yaqin yordamchisi va shogirdi A.M. Bezredkoning (18681940) immunitet muammolari va anafi- laksiya haqidagi ishlari amaliyotda keng qollaniladi. L. A. Òarasevich (18681927) ham Mechnikovning shogirdlaridan biri, u immunitet va anafilaksiya mexanizmi ustida ishlar olib borgan. Epidemiyaga qarshi kurashda yaxshi tashkilotchi bolib, sil va ichak infeksiyasiga qarshi emlash ishlarini olib borgan. U 1918-yilda zardob va vaksinalarni nazorat qiluvchi institutni tashkil etdi. Z. V. Yermolyeva (18981974) vabo va unga qarshi kurash chora- larni olib borib, urush yillarida birinchi bolib penitsillinni yaratgan va minglab kishilarning hayotini saqlab qolgan. P. F. Zdrodovskiy (1890 1976) rikketsioz va brutselloz kasalliklarini organadi. Shuningdek, u kopgina kasalliklarni davolovchi va oldini oluvchi preparatlarni yaratadi. Sodda jonivorlar keltirib chiqaradigan maleriya (bezgak) va ichak kasalliklarining immunologiyasi bilan shugullanadi. XIX asrning birinchi yarmida bir qancha yuqumli kasalliklarni qozgatuvchi mikroorganizmlar aniqlanadi va mikrobiologiya sohasi tez rivojlana boshlaydi. Buning natijasida yuqumli kasalliklar haqidagi malumotlar ham ancha kopaydi. XX asrning boshlarida Òurkistonda yuqumli kasalliklar va ularning qozgatuvchilarini organish shu yerda yashagan olimlar P.F. Borovskiy, A.D. Grekov, L.M. Isayevlar tomo- nidan amalga oshirilgan. Albatta, bu borada ozbek olimlarining ham hissasi katta bolgan. Bu sohada izlanish olib borgan va kopgina ilmiy xodimlar tayyorlagan olimlardan Ò. X. Najmiddinov, V. M. Majidov, I. K. Musaboyevlarning nomlarini tilga olish orinlidir. Ozbekiston Fanlar akademiyasi akademigi, Rossiya Òibbiyot fanlari akademiyasining muxbir azosi, professor I.K. Musaboyev rahbarligida ichburug, virusli gepatit, vabo, difteriya kabi kasalliklarning patogenezi va davolash usullarini takomillashtirish haqida ilmiy ishlar yozilgan. Hozirgi kunda bolalarda uchraydigan yuqumli kasalliklarni organishda Ozbekiston Fanlar akademiyasining akademigi Ò.O. Dami- nov, professor O.S. Mahmudov, S.N. Nazarovlar keng ilmiy izlanishlar olib borishyapti. Shu jumladan, Ozbekiston Fanlar akademiyasi akademigi, Rossiya Òibbiyot fanlari akademiyasining muxbir azosi A.O. Obidovning mikrobiologiya va immunologiya sohasidagi, pro- fessor S.S. Mahsumovning virusologiyaga oid ilmiy ishlari katta ahamiyatga ega. 8 I qism. UMUMIY MIKROBIOLOGIYA 1-bob. MIKROBIOLOGIK LABORATORIYA Mikrobiologik laboratoriya kasalxonalar, poliklinikalar, sanitariya- epidemiologiya stansiyalari, ilmiy tekshirish institutlari qoshida tashkil etiladi. Òibbiyot mikrobiologik laboratoriyasining vazifasi yuqumli kasalliklarga tashxis qoyishdan iboratdir. Buning uchun mikroorga- nizmlar ajratib olinib, uning xossalari organiladi. Bundan tashqari, patogen mikroorganizmlarning tashuvchisi ham aniqlanadi. Maxsus sanitariya-bakteriologik laboratoriyalarda tashqi muhit va turli xil obyektlarni mikroblar bilan ifloslanish darajasini aniqlash ishlari olib boriladi. Mikrobiologik tekshirish uchun material bolib kopincha odam chiqindisi (najas, siydik, qusuq moddasi, balgam), shuningdek, qon, ot suyuqligi, oshqozon yuvindisi, murdalardan olingan material va boshqalar hisoblanadi. Mikrobiologik laboratoriyalarda yuqumli materiallar bilan ishlash sababli, u alohida joylashgan bolishi lozim. Yuqumli materiallar bilan ishlash va mikrobiologik tekshirishlar olib borish uchun laboratoriya bir qancha xonalardan iborat bolishi lozim: • laboratoriya xonasi; • boks, boks oldi xonasi bilan; • oziqa muhitni tayyorlash xonasi; • yuvish xonasi; • sterilizatsiya xonasi; • preparat tayyorlash xonasi; • qabulxona; • vivariy xonasi; • omborxona. Qabulxonada laboratoriyaga keltirilgan tekshirish materiallari qabul qilinib, maxsus jurnallarga yozib qoyiladi va tekshirish natijalari shu xonada beriladi. Laboratoriya xonasi mikrobiologik tekshirish uchun moslashtirilgan boladi. U keng, yorug, devorlari yogli boyoqlar bilan boyalgan yoki kafel bilan qoplangan bolishi, poli lenoleum bilan qoplangan, har bir ishchi uchun alohida stol, tozalash va dezinfeksiyalashga qulay bolishi uchun stol usti maxsus plastinka yoki oyna bilan qoplangan bolishi, buyum oynacha, shtativ, bakteriologik qovuzloq, paxta, spirtovka, boyoqlar, loviyasimon jomcha kop- rikchasi bilan, dezinfeksiyalovchi moddalar bolishi lozim. Labo- ratoriyada laborant uchun alohida stol, preparat tayyorlash joyi, 9 termostat, sentrifuga, mikroskop, shkaf, issiq va sovuq suv keluvchi chiganoq umumiy kanalizatsiyaga ulangan bolib, gazli yoki spirtli gorelka bolishi shart. Mikrobiologik laboratoriyada ishlash qoidasi: 1. Ish tartibi va qoidasi bilan tanishganlargagina laboratoriyada ishlashga ruxsat etiladi. 2. Laboratoriyada ishlovchilar ichak infeksiyasi va boshqa infek- siyalarga qarshi emlanishlari lozim. 3. Laboratoriyaga maxsus kiyimda xalat, shiðpakda kirish lozim. 4. Har bir laboratoriya xodimi shaxsiy gigiyena qoidalariga rioya qilishi, ish stollarini toza tutishi kerak. 5. Keltirilgan barcha tekshirish materiali zararli, deb qaralishi va maxsus patnislarga qoyilishi lozim. 6. Òekshirish materiali keltirilgan idish dezinfeksiyalovchi mod- dalar bilan zararsizlantirilishi darkor. 7. Keltirilgan tekshirish materiali maxsus jurnallarga yozilishi va tartib raqami qoyilishi lozim. 8. Zararli materialni bir idishdan boshqasiga qoyish faqat dezinfeksiyalovchi modda ustida bajarilishi kerak. 9. Zararli material qolga, stol yoki boshqa buyumlarga tushsa, albatta, dezinfeksiyalovchi moddalar bilan zararsizlantirilishi zarur. 10. Ish tugagach, avval stol usti yigishtirilib, zararsizlantiriladi, song esa qol zararsizlantiriladi. 11. Ish tugagach, zararli material zararsizlantiriladi, ish tuga- magan bolsa maxsus shkafda qoldirilishi lozim. 12. Laboratoriyada ichish, chekish, ovqatlanish, oziq-ovqatlarni saqlashga ruxsat etilmaydi. 13. Laboratoriya har kuni dezinfeksiyalovchi moddalar bilan nam sharoitda tozalanishi va har hafta devorlar, idishlar sovunli suv bilan yuvilishi kerak. Laboratoriya ish tartibi inson uchun yuqish xavfi darajasiga qarab tashkil etiladi. Mikroorganizmlar yuqish xavfiga kora tort darajaga bolinadi: 1. Òoun (chuma) qozgatuvchisi. 2. Epidemiologik kasalliklarni keltirib chiqaruvchi qozgatuv- chilar (vabo, brutselloz, tulyaremiya, kuydirgi, manqa (sap), lep- tosiroz). 3. Bakterial epidemiologik infeksiya qozgatuvchilari (qorin tifi, A va B parafin, dizenteriya), sil, bogma, kokyotal, meningit, sozak, patogen anaeroblar, spiroxetalar (epidemik qaytalama tif va zaxm) va boshqalar. 10 4. Salmonellalar, esherixiyalar, klebsiyellalar, stafilokokklar, streptokokklar, gazli gangrena qozgatuvchilari va boshqalar. 1- va 2-guruh qozgatuvchilarini ota xavfli kasalliklar labora- toriyasida tekshiriladi. 3-guruhga kiruvchi qozgatuvchilar DSENMdagi laboratoriyalarda, kasalxonalarda va boshqalarda tekshiriladi, 4-guruhga kiruvchi qozgatuvchilar barcha mikrobiologik laboratoriyalarda tekshiriladi. Mikrobiologik tekshirishda, asosan, tekshirish materiallarini olish texnikasi va laboratoriyaga olib borish katta ahamiyatga ega. Har qanday tekshirish materialini olish texnikasiga rioya qilingan holda steril idishga olinishi lozim. Najas steril rektal qovuzloq yordamida togri ichak- ka 815 sm kiritilib olinadi. Qovuzloqlik probirkadagi konservantga (glitserin aralashmasi, fosfat bufer aralashmasi va boshq.) solinadi. Najasni tekshirishga olishda, steril karton tarelka yoki dezinfeksiya- lovchi moddalarda zararsizlantirilgan va issiq suvda yaxshilab chayilgan tuvakdan foydalanish mumkin. Siydik steril kateter yordamida steril idishga yoki probirkaga olinadi. Balgam steril bankalarga olinadi, venadan olingan qon esa maxsus steril oziqa muhitli idishlarga solinadi. Jarohatlardan yiring, burun va halqumdan surtma paxta tampon yordamida olinib, steril probirkaga solinadi, qusuq moddasi ogzi steril bankalarga toplanadi. Murdalardan materialni olgandan keyin bir necha soat otgach olish lozim, chunki ichak mikroflorasi butun organizmga tez tarqalib ketadi. Yurakdan qon steril shpris yordamida, jigar, taloq va boshqa azolardan bolakchalar steril qaychilar yordamida olinadi. Òekshirish materiali olingan idishlar bemorning familiyasi, ism-sharifi, yoshi, olingan vaqti, taxminiy tashxis, tekshirish maqsadi, shifokorning familiyasi, ism-sharifi va boshqalar yozib jonatiladi. Mikrobiologik tekshirish usullari 1. Mikroskopik usul tekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanib, boyab mikroskop ostida tekshiriladi. Bu usulda mikro- organizmlarning morfologiyasi organiladi, shunga asoslanib kasal- liklarga tashxis qoyiladi. Masalan, sozak (gonoreyalar), bogma, qaytalama tif, zaxm va boshqalar. 2. Mikrobiologik usul tekshirish materialini oziqa muhitiga ekib, sof kulturasi ajratib olinadi va shu qozgatuvchining xossalari or- ganiladi. 3. Serologik usul (lotin. serum zardob) bemor qon zar- dobidagi nomalum antigen va antitelo aniqlanadi. 11 4. Biologik usul laboratoriya hayvonlariga tekshirish materiali yuborilib, ular ustida tajriba otkaziladi. 5. Allergik usul organizmning allergenga nisbatan yuqori sezuvchanligi aniqlanadi tuleremiya, sil, brutselloz va boshqalar. 1. Mikrobiologik laboratoriyaning ahamiyati qanday? 2. Mikrobiologik laboratoriya qanday xonalardan iborat? 3. Mikrobiologik laboratoriyada ishlashda qanday qoidalarga rioya qilish lozim? 4. Mikrobiologik tekshirish uchun tekshirish materiallari qanday toplanadi va jonatiladi? MIKROSKOP, TUZILISHI VA U BILAN ISHLASH Mikroorganizmlarni aniqlash va tekshirishda mikroskoplardan foydalaniladi. Oddiy va murakkab mikroskoplar mavjud. Mikroskop ikki qismdan iborat boladi. Optik va mexanik qismlar. Optik qismga okular (7x10x115), obyektiv (80x20x40x90), kondensor va kozgu kiradi. Mexanik qismga tubus, mikroskop boshchasi, revolver, shtativ, oyoqcha, stolcha, makrovint, mikrovint, kondensor uchun vint, tubusni harakatlantiruvchi vint, stolni harakatlantiruvchi vint, kozgu vilkasi, klemmalar kiradi. Mikroskop qulay qilib qoyiladi, song kichik obyektiv ornatiladi. Chap qol stol ustida boladi, ong qol yordamida kozgu harakatlan- tirilib yoruglik yigiladi. Òayyorlangan preparat stolga qoyiladi, obyektiv yon tomondan qaralib oxirigacha tushiriladi. Okularga qaragan holda makrovint yordamida shtativni tasvir hosil bolgunga qadar kotariladi. Laboratoriyada asosan, obyektiv 90x dan foydalaniladi. Bu immersion obyektiv bolib, preparat ustiga 1 tomchi yog tomizilishi va obyektiv yogdan uzilmasligi lozim. Mikroskop oz joyidan qimirlatilmaydi, tubus boshatilib, yon atrofdagilarga korsa- tish mumkin. Ish tugagach, preparat dezinfeksiyalovchi moddaga tash- lanadi, obyektivdagi yog artiladi, kichik obyektiv ornatilib, shta- tiv oxirigacha tushiriladi. Òubus mahkamlanadi, kozgu vertikal holatga keltiriladi. Ishlatib bolingan mikroskop gilofiga solib qoyiladi. 1. Mikroskop qanday qismdan iborat? 2. Yoruglik qanday topiladi? 3. 90x obyektivda preparatlar qanday organiladi? 4. Mikroskop ishsiz holatga qanday keltiriladi? ? Nazorat uchun savollar ? Nazorat uchun savollar 12 2-bob . MIKROORGANIZMLARNING ASOSIY TASNIFI VA MORFOLOGIYASI Mikroorganizmlar (lotin. micros kichik) oddiy koz bilan korib bolmaydigan organizmlar. Ularga sodda jonivorlar, spiroxeta, zamburuglar, viruslar, rikketsiya va bakteriyalar kiradi. Mikroorga- nizmlarning birinchi umumiy biologik tasnifi XVIII asrda shvetsiyalik olim K. Linney tomonidan morfologik xossalarga kora tasniflangan. Mikro va mikroorganizmlar bolim, sinf, tartibavlodturlarga bolinadi. Òur deb, morfologik, fiziologik xossalariga kora, bir-biriga oxshash mikroorganizmlarga aytiladi. 1980-yilda amerikalik olim Bergi bu tasnifni yaratadi. Masalan, achitqi mikroblar, sut kislota tashkil etgan mikroorganizmlar uchun umumiy, xalqaro tasnif qabul qilin- gan, uning asosida sistema yotadi. Mikroorganizmning qaysi turga tegishli ekanligini aniqlash uchun turli xil usullar yordamida uning hujayra shakli, spora qilish, harakatchanligi, fermentativ xossalari organiladi, yani farqlash ishlari otkaziladi. Òur ichida variantlar: morfovariantlar morfologiyasiga kora, bio- variantlar biologik xossasiga kora, xemovariantlar fermentativ xossa- siga kora, serovariantlar antigenlik xossasiga kora, fagovariantlar fagga sezuvchanligiga kora farqlanadi. K. Linney mikroorganizmlarni belgilashda, umumbiologik binominal (ikkita) nomenklaturani kiritgan. Birinchisi avlodini korsatib, katta harf bilan yoziladi. Ikkinchisi turini korsatadi, kichik harflar bilan yoziladi. Masalan, Staphylococcus aureus tillarang stafilokokk. Òabiatda quyidagi mikroorganizmlar tafovut etiladi: patogen mikroorganizmlar, kasallik chaqiruvchi mikroorganizmlardir. Masalan, vabo, sil, bogma va boshqa kasalliklarni qozgatuvchilar. Saprofit mikroorganizmlar foydali mikroorganizmlardir. Masalan, achitqi mikroblar, sut kislota hosil qiladigan va boshqa bakteriyalar. Ular sanoatda keng qollaniladi. Shartli-patogen mikroorganizmlar malum sharoitlardagina kasallik keltirib chiqaradi. Masalan, ichak tayoqchasi va boshqalar. Patogen mikroorganizmlarga quyidagilar kiradi: • bakteriyalar; • zamburuglar; • sodda jonivorlar; • spiroxetalar; • rikketsiyalar; • viruslar. 13 Bakteriyalar Bakteriyalar xlorofilldan mahrum bolgan bir hujayrali orga- nizmlar. Bakteriya hujayrasining ortacha kattaligi 26 mkm boladi. Bakteriya uning shakli, katta-kichikligi turlicha bolib, tashqi muhit omillari tasirida ozgarishi mumkin. Uning bu xossasi polimorfizm deyiladi. Shakliga kora, barcha bakteriyalar uch guruhga bolinadi: sharsimon, tayoqchasimon va burmalilar. Sharsimon bakteriyalar kokklar deyiladi (lotin. coccus maymunjon, yumshoq mevalar), ularning diametri 0,51 mkm boladi. Ular sharsimon, nishtarsimon, sham alangasiga oxshash, loviyasimon shaklda boladi. Kokklar bolingandan song joylanishiga kora, quyidagilarga bolinadi: mikrokokklar (lotin. microskichkina) hujayralar turli xil tekisliklarda bolinadi va alohida-alohida joylashadi, diðlokokk (lotin. diðloosikkita) hujayra, bir tekislikda bolinib, ikkitadan joylashadi, ularga pnevmokokk, gonokokklar kiradi. Streptokokklar (lotin. sireptoszanjir) hujayralar bir tekislikda bolinadi va ajralmasdan zanjirini hosil qiladi. Stafilokokk (lotin. staphyle uzum shingili) hujayralar turli xil tekislikda bolinadi va bir yerda toplanib uzum shingilini hosil qiladi. Òetrakokk (lotin. tetra tortta) hujayralar ikkita perpendikular tekislikda bolinadi va torttadan joylashadi. Sarsina (lotin. sarcio biriktiraman) hujayralar uchta perpendikular tekislikda bolinadi va top-top yoki plaketga oxshash 8 yoki 16 ta hujayradan joylashadi. Kokklar tabiatda keng tarqalgan, shuningdek, odam va hayvon organizmida uchraydi. Mikrokokk, tetrakokk, sarsinalar saprofit mikroorganizmlardir. Diðlokokk, stafilokokk, streptokokklar patogen mikroorganizmlar hisoblanadi. Òayoqchasimon bakteriyalar batsillalar deb ataladi, ular silindr shaklida bolib, 16 mkm kattalikda, 0,5 dan 2 mkm kenglikka ega. Bakteriyalarning chetlari chort kesilgan (kuydirgi), yumaloq (ichak tayoqchasi), uchli (toun) yoki kengaygan (bogma) boladi. Bolingandan song quyidagicha joylashadi: ikkitadan diðlobakteriyalar (klebsiyellalar), zanjirsimon (kuydirgi qozgatuvchilar), bir-biriga burchak ostida yoki kesib joylashadi (bogma qozgatuvchisi). Kopgina bakteriyalar tartibsiz joylashadi. Òayoqchasimon bakteriyalar orasida biroz bukilgan vibrionlar uchraydi (vabo qozgatuvchi). Buramali bakteriyalarga spirillalar va spiroxetalar kiradi. Bu bakteriyaning shakli buramani eslatadi. Kopgina buramali bakteriyalar kasallik keltirib chiqarmaydi. Uch patogen turi mavjud: Treponema zaxm qozgatuvchi, Borrelia endemik va epidemik qaytalama tif qoz- gatuvchisi, Leptospira leptospiroz (suv isitmasi) qozgatuvchisi. 14 Bakteriya hujayrasining tuzilishi Bakteriyaning hujayraviy tuzilishi yoruglik, mikroskop, elektron mikroskop va mikrokimyoviy usul yordamida organiladi. Bakteriya hujayrasi quyidagi qismlardan iborat: 2 qavatli qobiq, sitoplazma, kiritmalar, yadro (nukleoid), qoshimcha spora, kapsula, xivchin, pililar. Hujayra qobigi shilliq qobiq, hujayra qobigi, sitoplazmatik membranadan iborat. Shilliq qobiq hujayrani tashqi tarafdan orab turadi va himoya funksiyasini bajaradi. Hujayra devori hujayraning asosiy elementlaridan hisoblanadi. U hujayraga shakl berib, uni tashqi muhitdan himoyalaydi. Hujayra devorining asosiy xossalaridan biri tanlab, otkazuvchanligidir, yani hujayraga kerakli oziq moddalarni (aminokislota, uglevod va b.) yetkazib berish va hujayradan almashinish natijasida hosil bolgan moddalarni olib chiqib ketishidan iborat. Hujayra devori hujayra ichidagi bosimni saqlab turadi, devorning mustahkamligini polisaxarid tabiatli moddamurein ayrim boshqa moddalar hujayra devorini parchalaydi. Masalan, lizotsim. Hujayra devoridan mahrum bakteriyalarni protoplastlar deyiladi. Ular nafas olish, bolinib kopayish, fermentlarni sintezlash xossasiga ega. Òashqi muhit omillariga, mexanik tasirotga, osmatik bosimga, aeratsiya va boshqalarga chidamliligini saqlashi mumkin. Hujayra devori qisman parchalangan bakteriyalarni sferoplastlar deyiladi. Sitoplazmatik membrana hujayra devorining ichki tarafiga mahkam yopishgan boladi. U juda yupqa (810 mm), oqsil va fosforliðiddan tashkil topgan. Bu qobiq orqali hujayra oziqlanadi. Membranada permeazi fermenti bolib, moddalarni va nafas olish fermentlarini faol tashish hissasini bajaradi. Sitoplazmatik membrana hujayra bolinishida ishtirok etadigan mezosomani hosil qiladi, hujayrani giðertonik eritmaga solinganda, u membranani hujayra devoridan ajratishi mumkin. Sitoplazma bakteriya hujayrasidagi kolloid modda, suv, oqsil, uglevod, yog, mineral tuzlardan tashkil topgan. Uning kimyoviy tarkibi, konsistensiyasi, tashqi yadro moddasi ribosoma va turli xil kiritmalarni saqlaydi. Nukleoid hujayraning yadro moddasi, irsiy apparati bolib hisoblanadi. Yetilgan hujayra nukleoidi ikkita uzukka oxshash buralgan DNK iðchasidan iborat, DNK molekulasida genetik malumotlari kodlangan hujayraning yadro moddasi genetik atamaga kora, genofor yoki gen nomini olgan. Sitoplazmada ribosoma bolib, u oqsillarni parchalash funksiya- sini bajaradi. Uning tarkibiga 60 % RNK va 40 % oqsil kiradi. Hujay- ralar soni 10000 taga yetadi. Ribosomalar bir-biriga qoshilib poliso- malarni hosil qiladi. 15 Kiritmalar ozida turli xil zaxira oziq moddalar: kraxmal, glikogen, yog va lyutein donachasini saqlovchi granulalar. Ular sitoplazmada joylashgan. Bakteriya hujayralari hayot jarayonlarida himoya organellalarini, kapsula va sporani hosil qiladi. Kapsula hujayra devorining tashqi tarafdan yopishgan shilliq qavat hisoblanadi. Ayrim bakteriyalar, odam yoki hayvon organizmiga tushganda, kapsula hosil qiladi. Kapsula mikroorganizmlarni odam organizmining antagonistik omillardan himoya qiladi (pnevmokokk, kuydirgi qozgatuvchilari). Ayrim mikroorganizmlarning doimiy kapsulasi mavjud (klebsiyellalar). Ular kapsula hosil qilishiga kora, quyidagilarga bolinadi. Mikroorganizmlar organizmga tushganda va tashqi muhitda kapsula hosil qiladigan (klebsiyella), kapsula hosil qilmaydigan (sil, qoqshol), faqat organizmda kapsula hosil qiladigan (pnevmokokk, kuydirgi) mikroorganizmlarga bolinadi. Sporalarni faqat tayoqchasimon bakteriya hosil qiladi. Bakteriyalar noqulay sharoitga tushganda (yuqori harorat, quritish, vodorod ion korsatkichining ozgarishi, oziqa moddalar kamayishi va b.) oz turini saqlab qolish uchun spora hosil qiladi. Spora bakteriya ichida joylashadi, yani sitoplazma va nukleoid bir yerga toplanib, mustahkam qobiq bilan oralib oladi. Spora vegetativ hujay- radan tarkibida kam miqdorda suv, kop miqdorda yog va kalsiy tuzi bolishi bilan farqlanadi, bu sporani chidamli qiladi. Spora 1820 soat ichida yana vegetativ shaklga aylanadi. Bakteriya hujayrasi faqat bitta spora hosil qiladi, shuningdek, bolinib kopayuvchi azo bolib hisoblanmaydi, faqat tashqi muhit omillaridan saqlaydi. Spora hosil qiladigan aerob bakteriyalarni batsillalar, anaeroblarni esa klostridiylar deyiladi. Sporalar shakliga, katta-kichikligiga, joylanishiga kora farqlanadi. Joylanishiga kora: markaziy hujayraning ortasida (kuydirgi), sub- terminal hujayraning uchiga yaqin (botulizm), terminal hujayraning uchida joylashadi (qoqshol). Sporani zararsizlantirish uchun avtoklavda 11,5 atm bosim ostida 1 soat davomida sterilizatsiya qilish lozim. Xivchinlar harakatlanuvchi azolar. Ular yupqa iðsimon fibril- lalar, oqsilflagellindan tashkil topgan. Xivchin bakteriyalarga nisbatan uzun boladi. Xivchinlar sitoplazmadagi bazal tanachalaridan boshlanadi va hujayradan tashqariga chiqadi. Ularning harakatchanligini mikroskop ostida yoki yarimsuyuq agarda aniqlash mumkin. Xivchinlarning tuzilishi elektron mikroskopda organiladi. Bakteriyalar xivchinlarning joylanishiga kora, guruhlarga bolinadi: monotrixlar bitta xivchinli bakteriyalar (vabo qozgatuvchisi), amfitrixlar bakteriyaning ikki uchida bir necha yoki top bolib joylashadi (spirillalar), lofotrik bakteriyaning bir 16 uchida bir top bolib joylashadi (ishqor hosil qiluvchi najasli bakte- riyalar), peretrixlar xivchin bakteriya devorining barcha qismida joylashadi (ichak tayoqchasi). Pili yoki fibrillar bakteriya hujayrasining yuza qismida joylashadi. Ular xivchinlarga nisbatan yupqa va kalta, buramali boladi. Pililar pilin oqsilidan tashkil topgan. Ular odam va hayvon hujayrasiga yopishishda va nasl belgilarini uzatishda ishtirok etadi. Boyoqlar, ularning tasnifi Mikroblarni boyab organish, ularni farqlash uchun anilin boyoqlar qollaniladi. I.Boyoqlar tarkibiga kora, ikki xil boladi: 1. Asosli boyoqlar, ularga: a) asosli fuksin kukunsimon, qizil rangda; b) gensian binafsha kukunsimon, binafsha rangda; d) metilen kok kukunsimon, kok rangda. 2. Kislotali boyoqlar, ularga ezoin, fuksin va boshqalar kiradi. II.Boyoqlar tayyorlanishiga kora, uch xil boladi: 1. Òoyingan spirtli boyoqlar, ular faqat spirt yordamida tayyor- laniladi. Asosli boyoqlardan 910 gr olinib, 100 ml 96° li spirt qoshiladi va erib ketguncha termostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldi- riladi. Vaqt otgach olinib, filtr qogozi orqali filtrlanadi. Òoyingan spirtli boyoqlarni oldindan tayyorlab qoyish mumkin, chunki ular tez aynimaydi. Masalan, 910 gr fuksin kukunidan olib, 96° li 100 ml spirtda eritiladi, natijada toyingan fuksin boyogi hosil boladi. 2. Spirtli-suvli boyoqlar, ular spirt va suvdan tashkil topgan. Ularni tayyorlash uchun bir qism toyingan spirtli boyoqqa 9 qism distillangan suv qoshiladi. Masalan, suyultirilgan fuksin (Pfeyfer) boyogini tayyorlash uchun 1 ml toyingan fuksin boyogiga 9 ml distillangan suv qoshiladi. 3. Suvli boyoqlar, ular faqat distillangan suvda tayyorlaniladi. Masalan, Lyugol eritmasini tayyorlash uchun: Yod 1 gr. Kaliy yodit 2 gr. Distillangan suv 300 ml. Lyugol eritmasini tayyorlash texnikasi. Kam suv miqdori (30 50 ml) olinib, unga 2 gr kaliy yodit solib eritiladi. Òoliq erib bolgandan song kristall yod solinadi va erib ketguncha aralashtiriladi. Erigandan song qolgan suv miqdori qoshiladi. Sinev usulida qogoz boyoqlarini tayyorlash. 17 1. Gensian binafsha boyogini tayyorlash uchun: Gensian binafsha kukunidan 1 gr. Glitserin 5 ml. 96° li spirt 100 ml. 2. Fuksin boyogini tayyorlash uchun: Asosiy fuksin kukuni 2 gr. Glitserin 5 ml. 96° li spirt 100 ml. Boyoqlarni tayyorlash texnikasi. Hovonchaga boyoq kukunidan solinib, glitserin bilan yaxshilab aralashtiriladi. Song spirt solinadi va erib ketguncha aralashtiriladi va 2 sm kenglikda qirqib, tayyorlab qoyilgan filtr qogoziga shimdiriladi. Qogozlar uy haroratida quritiladi va kesib ishlatiladi. Mikroorganizmlar morfologiyasini organish Mikroorganizmlarning morfologiyasini organish uchun mikro- skopik usuldan foydalaniladi. Bu usulning muvaffaqiyatli chiqishi tekshirish materiali yoki bakteriologik kulturadan togri surtma preparat tayyorlanishiga bogliq. Kultura deb, laboratoriya sharoitida oziqa muhitida ostirilgan mikroorganizmlarga aytiladi. Surtma preparat tayyorlash texnikasi Ishlash uchun toza va yogsizlantirilgan buyum oynachalari hamda yopchiq oynachalari kerak. Yangi oynachalar 1520 daqiqa 25 % sodali, sovunli suvda qaynatiladi, oqava suvda chayiladi. HCl eritmasiga solib qoyiladi, song yana suv bilan yuviladi. Boyoq yoki immersion yog bilan ifloslangan (ishlatilgan) oynachalarni ikki usulda zararsiz- lantirish mumkin. Xlor aralashmasiga 2 soatga solib qoyiladi, song 5 % sodali yoki ishqoriy eritmada 3040 daqiqa qaynatiladi va yaxshilab yuviladi. Yangi zararsizlantirilmagan oynachalarni sovunlab yuvish, song quruq latta bilan artish mumkin. Diqqat! Agar buyum oyna yaxshilab yogsizlantirilgan bolsa, suv hamma tarafga bir xilda tarqaladi, yaxshi tozalanmagan bolsa, tomchi mayda tomchilarga bolinadi. Surtma preparat tayyorlash uchun bakteriologik qovuzloq tayyorlab olish lozim. Bakteriologik qovuzloq 56 sm uzunlikda platina yoki xrom simidan tayyorlanadi. Sim qovuzloqning bir uchi ushlagichga yoki shisha tayoqchaga mahkamlanadi, ikkinchi uchi uzukka oxshatib, 11,5 yoki 23 mkm kattaligida qayriladi. 18 Diqqat! Òogri tayyorlangan bakteriologik qovuzloq suvga solib olinganida, suv pardasi hosil boladi. Surtma preparat tayyorlashdan avval, bakteriologik qovuzloq ishchi qismi alangada vertikal, song gorizontal holatda metall yoki shisha asosi choglantiriladi. Ishdan oldin va ishdan keyin, albatta, bakteriologik qovuzloq choglantirilishi shart! Suyuq oziqa muhitida osgan mikrob kulturasidan surtma preparat tayyorlash Yogsizlantirilgan buyum oynasi alangada kuydiriladi va paxta bilan artiladi. Ong qolda bakteriologik qovuzloq yuqorida aytilgandek choglantiriladi. Probirka chap qolning katta va korsatkich barmoqlari orasiga olinadi. 45 yoki kichik barmoq yordamida, probirka qopqogi siqib ochiladi. Ish ehtiyotkorlik bilan bajarilishi lozim. Probirkaning ogzi alangadan otkazilib olinadi. Qovuzloqni probirka ichiga kiritilib, devorida sovitiladi va mikrob kulturasidan olinadi. Qovuzloqni probirka devoriga tekkizilmasdan chiqariladi va alangadan otkazilib, probir- kaning qopqogi yopiladi. Probirkani shtativga qoyiladi. Qovuzloqdagi mikrob kulturasi buyum oynachasida bir-ikki tiyinlik kattalikda bir xilda yoyiladi. Qovuzloq alangada choglantiriladi. Surtma preparatni quritishga qoldiriladi. Zich oziqa muhitida osgan mikrob kulturasidan surtma preparat tayyorlash Òayyorlangan buyum oynacha ustiga Paster piðetkasi yoki qovuzloq yordamida natriy xlorning (0,9 %) izotonik eritmasi tomiziladi. Choglantirilgan qovuzloq probirka devorida yoki mikrob kulturasi osmagan yerda sovitiladi va mikrob kulturasidan olib, buyum oyna- chasidagi izotonik eritma bilan aralashtiriladi. Òayyorlangan surtma preparat bir xilda yoyilgan bolishi va quyuq bolmasligi lozim. Òayyor- langan surtmani quritishga qoldiriladi. Yiring yoki balgamdan surtma tayyorlash Yiring yoki balgamdan choglantirilgan qovuzloq yoki steril piðetkada olinib, buyum oynachasi ortasiga tomiziladi. Ikkinchi buyum oynacha bilan birinchi oynacha yopiladi. Ikkita buyum oynacha u tomondan bu tomonga harakatlantiriladi, natijada ikkita katta surtma hosil boladi. Qondan surtma tayyorlash Buyum oynasining bir chetiga qon tomchisi tomiziladi, song ikkinchi pardozlangan oynacha bilan 45° ostida qonga tekkiziladi. 19 Pardozlangan oynacha yordamida qon buyum oynachaning u boshidan bu boshiga yurgiziladi. Òogri tayyorlangan surtma sargishroq va yoruglik otadigan boladi. Ichki azolardan va qattiq oziq-ovqatlardan surtma tayyorlash Sinamaga olinadigan azo yoki oziq-ovqat pinset yordamida ushlanadi va steril skalpel yordamida bolakcha qirqib olinadi. Mana shu bolakcha buyum oynasining 23 joyiga surtiladi. Surtmani quritish Surtma xona haroratida havoda quritiladi. Uni tez quritish kerak bolsa, alanga ustida katta va korsatkich barmoq ustiga qoyilib, qol kuyadigan balandlikda ushlab quritiladi. Diqqat! Yuqori harorat tasirida hujayra tuzilishi buziladi. Surtmani fiksatsiya qilish Surtma toliq qurigandan song fiksatsiya qilinadi. Fiksatsiya ikki usulda olib boriladi: 1. Fizikaviy usulbuyum oynachasi katta va korsatkich barmoq yoki pinset yordamida ushlanib, 6 daqiqa davomida uch marta alangadan otkaziladi. 2. Kimyoviy usulqonda tayyorlangan surtma, tamgalardagi hujayra elementlari yuqori harorat tasirida parchalanadi. Shuning uchun quyidagi moddalardan foydalaniladi: a) metil spirtida 5 daqiqa; b) etil spirtida 10 daqiqa; d) Nikiforov eritmasida 1015 daqiqa; e) asetonda 5 daqiqa. Fiksatsiya qilishdan maqsad: 1) mikroorganizm buyum oynacha- siga yaxshi yopishishi uchun; 2) materialni zararsizlantirish uchun; 3) yaxshi boyalishi uchun. Fiksatsiyalangan surtma preparat deyiladi. Preparatni boyash Preparatlarni boyash maxsus jihozlangan stolda olib boriladi. Uning usti linoleum, plastinka yoki oyna bilan qoplangan bolib, ustida distillangan suv, koprikcha, pinsetlar, silindr, piðetkalar, filtr qogozi, boyoq yigindisi, suvni tokish uchun idish bolishi va stol vodoprovod yaqinida joylashgan bolishi kerak. 20 Mikroorganizmlarning boyoqlarga nisbatan xossasi tinktorial xossa deyiladi. Mikrobiologiyada anilin boyoqlar keng qollaniladi. Kopgina mikroorganizmlar boyoqni oziga tez oladi. Barcha boyoqlar kristall yoki kukun shaklida chiqariladi. Ulardan toyingan spirt yoki fenol erit- malari tayyorlanadi. Song ishlash uchun boyoqning spirtli, suvli yoki fenol-suvli eritmalari tayyorlanadi. Agar boyoqlarning konsentr- langan eritmalari qollanilsa, preparat ustiga filtr qogozi qoyilib, uning ustiga boyoq tomiziladi. Bunda boyoq bolakchalari qogozda qoladi. Oddiy usulda boyash Fiksatsiya qilingan surtma ustiga piðetka yordamida boyoq eritmasi tomiziladi, vaqt otgach boyoq tokiladi, suv bilan yuviladi va filtr qogozda quritiladi. Oddiy usulda boyalganda, faqat bitta boyoqdan foydalaniladi. Metilen koki va ishqoriy Lyofflar kok boyogida 35 daqiqa, fuksin Pfeyffer boyogida 12 daqiqa boyaladi. Boyalgan va quritilgan preparat ustiga immersion yog tomiziladi va immersion sistemada tekshiriladi. Murakkab boyash usuli Gram usulida boyash. Gram usuli keng tarqalgan farqlash usullaridan biridir. 1. Fiksatsiya qilingan surtma preparat ustiga Sinev yoki gensian binafsha boyogi shimdirilgan filtr qogoz qoyilib namlanadi, 12 daqiqa ushlangach qogoz olib tashlanadi. 2. Preparatlarni yuvmasdan Lyugol eritmasi tomiziladi va qoray- guncha ushlanadi (1 daqiqa), song boyoq tokiladi. 3. Preparatni yuvmasdan 96° li etil spirti tomiziladi, boyoq ketguncha (3060 sek) ushlanadi yoki preparat 12 sekund stakan- dagi spirtga tushirib olinadi. 4. Preparat suv bilan yuviladi. 5. Fuksin Pfeyffer boyogi bilan 3 daqiqa boyaladi, suv bilan yuviladi va quritiladi. Mikroskopning immersion sistemasida tekshiriladi. Barcha mikroorganizmlar Gram usulida boyalganda ikki xil boyaladi Gram- musbat va Grammanfiy. Grammusbat bakteriyalarning hujayra devorida RNK magniy tuzini saqlaydi, ular yod va asosiy gensian binafsha boyogi bilan birikma hosil qiladi. Bu birikma spirt tasirida parchalanmaydi va rangini yoqotmaydi. Bunda bakteriyalar binafsharangga boyaladi. 21 Grammanfiy bakteriyalar hujayra devorida RNK magniy tuzlarini saqlamaydi. Hosil qilgan birikmani ushlab qololmaydi, spirt tasirida boyoq yuvilib ketadi. Qoshimcha fuksin Pfeyffer boyogi bilan boyalganda, uning rangini oladi va qizil rangga kiradi. Negativ preparatlar Negativ preparatlar deb, mikroblarni boyamasdan korish usuliga aytiladi. Bu usulga Burri, Gins usullari kiradi. Mikroblarni bu usulda boyalganda, bakteriya hujayrasi va kapsula qora fonda rangsiz bolib korinadi. Burri usuli. Yogsizlantirilgan buyum oynasiga 10 marta suyul- tirilgan qora tush tomiziladi va uning ustiga choglantirilgan bakteriologik qovuzloq yordamida bir tomchi mikrob kulturasidan olib tomiziladi. Ikkinchi buyum oynasi bilan 45° burchak ostida mikrob kulturani qonga oxshab surtiladi. Xona haroratida quritiladi, fiksatsiya qilmasdan mikroskop ostida tekshiriladi. Bunda qora fondagi mikrob tanasi rangsiz bolib korinadi. Burri-Gins usuli Yuqorida aytilganidek, Burri usulida surtma tayyorlab olinadi va xona haroratida quritilib, fiksatsiya qilinadi. Fiksatsiyani spirt yoki kimyoviy usulda sulema yordamida qilinadi. Ehtiyotlik bilan yuviladi. Fuksin Pfeyffer boyogi bilan 35 daqiqa boyaladi. Vaqt otgach, ehtiyotlik bilan yuvilib, xona haroratida quritiladi. Mikroskop ostida immersion sistemada tekshiriladi. Qora fondagi hujayra qizil, kapsula rangsiz korinadi. Diqqat! Filtr qogozi bilan quritilmaydi, chunki preparatni shikastlash mumkin. Sil-Nilsen usuli (kislotaga chidamli bakteriyalarni boyash uchun) Bu usul sil va prokaza bakteriyalarini aniqlashda qollaniladi, chunki ular hujayra devorida kop miqdorda yog, mum va oksikislotalar saqlaydi. Ular kislota, ishqor, spirt tasiriga juda chidamli. Hujayra devori otkazuvchanligini oshirish uchun boyashning birinchi bos- qichlari qizdirish bilan boshlanadi. 1. Surtma preparat tayyorlanadi va quritiladi, song fiksatsiya qilinadi. Fiksatsiya qilingan preparat ustiga filtr qogoz qoyilib, fuksin Sil boyogi tomiziladi. Preparat qisqich yordamida ushlanib spirtovka alangasida bug chiqquncha ushlanadi. Qaytadan boyoq tomizilib, yana 22 alangada ushlanadi. Bu ish 23 marta takrorlanadi. Preparat sovigandan keyin qogoz olib tashlanadi va suv bilan yuviladi. 2. Preparat 5 % li sulfat kislotasi bilan rangsizlantiriladi, yani 23 marta kislotaga botirib olinadi yoki preparat ustiga tomizilib, 2030 sekund ushlanadi va suv bilan yuviladi. 3. Suv-spirtli metilen kok boyogi bilan 35 daqiqa boyaladi va suv bilan yuviladi. Uy haroratida quritiladi. Mikroskopning immersion sistemasida tekshiriladi. Kislotaga chidamli bakteriyalar qizil, chidamsizlari kok rangda korinadi. Ojeshko usulida boyash (sporani aniqlash) 1. Havoda quritilgan surtma ustiga bir necha tomchi 0,5 % li xlorid kislota tomizilib, spirtovka ustida bug chiqquncha ushlanadi. Bu ish 23 marta takrorlanadi. Preparat quritiladi va fiksatsiya qilinadi. 2. Qolgan boyash ishlari Sil-Nilsen usulidagidek olib boriladi. Mikroskop ostida qaralganda, bakteriya hujayrasi kok yoki havo rangda, spora qizil rangda korinadi. Romanovskiy-Gimza usuli boyicha boyash Mikrobiologiyada hujayra tuzilishini, masalan, uning ozagini organishda bu usuldan keng foydalaniladi. Bundan tashqari, bu usul sodda jonivorlar, spiroxeta va rikketsiyalar morfologiyasini organishning asosiy usullaridan biri hisoblanadi. Romanovskiy-Gimza boyogi azir, eozin va metilen kokining aralashmasidan iborat. Bu boyoq suyuq holatda kokimtir binafsha tusda boladi (tayyor holda ham sotiladi). Bevosita surtmani boyashdan avval 10 ml distillangan suv (pH 7,0) va 7 tomchi boyoqdan iborat aralashma tayyorlanadi. Fiksatsiya qilingan surtma boyoq aralashmasi solingan idishga tushirilib, preparat surtilgan tomoni pastga qaragan holatda 1 soat davomida qoyiladi. Songra boyoq tokib tashlanadi, preparat suvda yaxshilab yuvilib, ochiq havoda quritilad. Mikroskopda tekshirishda esa immer- sion obyektividan foydalaniladi. Zbradovskiy usuli. Bu usul Sil-Nilsen usulining takomillashtirilgan va rikketsiyalarni boyashga moljallangan urinishidir. Boyashga kirishishdan avval, 10 tomchi sil karbol fuksinini 10 ml distillangan suvda aralashtirilib, boyoq tayyorlaniladi. Fiksatsiya qilingan preparat mazkur aralashmada 5 daqiqa davomida boyalgandan keyin, boyoqni tokib tashlab, xlorovodorod kislotasining 0,01 % li eritmasida 13 sekund davomida rangsizlantiriladi. Preparat yuvib tashlangach, 5 daqiqa davomida 1 % metilen kokida boyaladi, suvda yuvilib immer- sion sistemasi boyicha mikroskopda tekshiriladi. Rikketsiyalar qizil rangga boyaladi, ular kopayadigan hujayralar esa kokish tusga kiradi. 23 Mikroorganizmlarning harakatchanligini aniqlash Mikroorganizmlarning harakatchanligi ikki usulda aniqlanadi: 1. Makroskopik usul. 2. Mikroskopik usul. Makroskopik usul. Choglantirilgan bakteriologik qovuzloq yordamida tekshirish materiali olinadi va yarimsuyuq uglevodli muhitga sanchib ekiladi. Ekilgan muhit termostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach, oziqa muhitni termostatdan olib tekshiriladi. Mikrob kultura harakatchan bolsa, oziqa muhitning barcha qismida yoyilib osadi. Mikrob kultura harakatsiz bolsa, oziqa muhitining sanchib ekilgan yeridagina osadi. Mikroskopik usul. Mikroblarning harakatchanligini aniqlash uchun suyuq muhitda osgan mikrob kulturasi yoki fiziologik eritmada eritilgan mikrob yuvindisi kerak boladi. Mikroblarning harakatchan- ligini mikroskop usulda aniqlash ikki usulda: ezilgan va osilgan tomchi preparatlari yordamida aniqlanadi. Ezilgan tomchi preparati. Yogsizlantirilgan buyum oynasi ustida choglantirilgan bakteriologik qovuzloq yoki piðetka yordamida mikrob kulturasi olib tomiziladi. Yopqich oynachasining tort chetiga vazelin surtib tomchining ustiga burchak ostida yotqiziladi (havo qolmasligi uchun), preparat qurib qolmasligi uchun nam kameraga solib qoyiladi. Nam kamera bu namlangan filtr qogozi solingan Petri kosachasidir. Filtr qogoz ustiga 2 ta gugurt chopi qoyiladi va uning ustiga tayyorlangan preparat ornatiladi. Petri kosachasining qopqogi yopiladi. Mikroskopning 40 x obyektivida tekshiriladi. Osilgan tomchi preparat. Yopqich oynachaning tort chetiga va- zelin surtiladi, uning ustiga bir tomchi mikrob kulturasi tomiziladi. Song asta-sekin botiq oynachani yopqich oynacha ustiga yopiladi, tomchi oynachalarni tezlikda aylantiriladi. Germetik yopilgan kamera- dagi tomchi uzoq vaqt saqlanadi. Mikroskopik kichik obyektivda (8 x ) tomchining cheti topiladi, song katta obyektivda tekshiriladi. 1. Bakteriologik qovuzloq qanday tayyorlanadi? 2. Fiksatsiya qilishning maqsadi va usullarini bayon eting. 3. Mikroorganizmlarning sporalari qanday usulda aniqlanadi? 4. Sil-Nilsen usuli nima maqsadlarda qollaniladi? 5. Mikroorganizmlarning harakatchanligi qanday usullarda aniqlanadi? ? Nazorat uchun savollar 24 3-bob. MIKROORGANIZMLAR FIZIOLOGIYASI Fiziologiya bobida mikroorganizmlarning hayotiy funksiyalari: oziqlanish, nafas olish, osish va bolinib kopayishi organiladi. Fiziologik funksiya asosida, uzluksiz moddalar almashinuvi (meta- bolizm) yotadi. Moddalar almashinuvi negizida, qarama-qarshilik va ozaro bogliq- lik jarayoni assimilatsiya (anaboliz) va dissimilatsiya (katabolizm) yotadi. Assimilatsiya jarayonida oziq moddalar ozlashtiriladi va ulardan hujayra tuzilishi sintezida foydalaniladi. Dissimilatsiya jarayonida esa oziq moddalar oksidlanib parchalanadi, buning natijasida mikrob hujayrasining hayoti uchun kerak bolgan energiya ajraladi, oziq moddalar bolinishi natijasida murakkab organik birikmalar oddiy, past molekulali moddalarga parchalanadi, ular qisman hujayra toqi- masidan chiqarib yuboriladi. Qolgan qismi esa hujayrada biosintetik reaksiyada ishtirok etadi va assimilatsiya jarayoniga qoshiladi. Oziq moddalar sintezi va parchalanish jarayoni fermentlar ishtirokida sodir boladi. Moddalar almashinuvi mikroorganizmlarda shiddatli boladi. Qulay sharoitda bir dona mikrob hujayrasi bir kunda ozidan 3040 marta katta oziq moddalarni qayta ishlashi mumkin. Bakteriyalarning kimyoviy tarkibi Moddalar almashuvi jarayonini tushunish uchun mikroorga- nizmlar kimyoviy tarkibini bilish lozim. Mikroorganizmlar hujayrasi barcha tirik organizmlardek, ozida kimyoviy moddalarni saqlaydi. Organogenlar (uglerod, vodorod, kislorod, azot) ahamiyatga ega elementlardan hisoblanadi. Murakkab organik moddalar oksidlarni, uglevodlarni va yoglarni tuzishda ishtirok etadi. Mikroorganizmlar tarkibida mineral va kopgina boshqa elementlar boladi. Ularning kop qismi organik moddalar bilan kimyoviy boglangan, qolganlari esa hujayrada tuz sifatida uchraydi. Miqdor jihatidan hujayra tarkibining 7585 % ini suv tashkil qiladi. Quruq moddalar ulushiga organik (oqsil, nuklein kislota, uglevod, yog) va mineral birikmalar kiradi, ular 1525 % ni tashkil etadi. Suvhujayra hayotida katta ahamiyatga ega. Barcha moddalar hujayraga suv bilan kiradi, almashinuv mahsulotlari esa shu suv bilan chiqib ketadi. Suv mikrob hujayrasida mustaqil birikma sifatida bosh holda uchraydi, lekin ularning kopchiligi hujayraning turli kimyoviy komponentlari (oqsil, uglevod, yog) bilan boglangan va 25 hujayraning ichki tuzilishi tarkibiga kiradi. Bosh holdagi suv hujayrada boladigan kimyoviy reaksiyalarda ishtirok etib, turli xil kimyoviy birikmalar erituvchisi, shuningdek, kolloidlar uchun dispers muhit bolib xizmat qiladi. Hujayra tarkibidagi bosh suv hujayraning fiziologik holati, hujayraning yoshi va tashqi muhit sharoitiga qarab ozgarishi mumkin. Sporali shakldagi bakteriyalarda suv vegetativ shakldagi hujayralarga nisbatan kam boladi. Kapsulali bakteriyalarda suv miqdori juda kop boladi. Oqsillarquruq moddaning 5080 % ini tashkil qiladi va mikroor- ganizmlarning muhim biologik xossalarida aniqlanadi. Bu oddiy oqsillarprotein va murakkab proteidlardir. Hujayraning hayot faoliyatida nukleoproteidlaroqsillarning nuklein kislotasi (DNK va RNK) bilan birikmasi katta ahamiyatga ega. Mikrob hujayrasi tarkibida nukleinoproteidlardan tashqari kam miqdorda liðoproteidlar, gliko- proteidlar, xromoproteidlar boladi. Oqsillar sitoplazma va nukleoid- larga bolinib, hujayra devori tarkibiga kiradi. Ularga fermentlar, kopgina toksinlar (mikroorganizmlar zahari) kiradi. Mikroorganizmlarning turi, spetsifikligi oqsil moddalarning sifat va miqdoriy tarkibiga bogliq. Nuklein kislotalar hayvon hujayrasida qanday funksiyani bajarsa, mikrob hujayrasida ham xuddi shunday funksiya bajaradi. DNK yadro (nukleoid) tarkibida boladi, mikroorganizmlarning genetik xossasi asosida tuziladi. RNK yadro va sitoplazmada boladi va hujayra oqsil biosintezida ishtirok etadi. Nuklein kislotasi umumiy miqdori mikrob hujayrasi quruq moddasining 1030 % ni tashkil etadi va bu mikrob hujayrasining turi hamda yoshiga bogliq boladi. Uglevodlar quruq moddaning 1218 % ni tashkil qiladi. Mikrob hujayrasida enegiya va uglevod manbai sifatida foydalaniladi. Hujayraning tarkibiy qismi hujayra qobigi, kapsula va boshqalardan tarkib topadi. Mikroor- ganizm hujayralari ozida oddiy (mono va disaxaridlar) va yuqori molekular uglevodlarni saqlaydi. Kopgina bakteriyalarda kimyoviy tarkibiga kora, kraxmal va glikogenlarni eslatuvchi kiritmalar bolishi mumkin, ular hujayrada oziq-ovqat zaxiralari rolini oynaydi. Uglevodlar turli mikroorganizmlarda turlicha boladi va ular mikroorganizmlarning yoshiga, yashash sharoitiga bogliqdir. Yoglar (quruq moddaning 0,240 % ini) sitoplazmatik membranada hujayra qobigining tarkibiy qismi hisoblanadi. Ular energiya almashinuvida ishtirok etadi. Ayrim mikrob hujayralarida yoglar zaxira modda sifatida toplanadi. Yoglar, asosan neytral yoglar, yog kislotasi, fosfoliðidlardan iborat. Ularning miqdori mikroorganizmlarning turi va yoshiga bogliq. Masalan, sil mikobakteriyalarida yog miqdori 40 % ni tashkil etadi, 26 bu bakteriyalarni tashqi muhit omillariga chidamliligini yuzaga keltiradi. Mikroorganizm hujayrasida yoglar uglevod va oqsillar bilan boglangan murakkab kompleksni hosil qilishi mumkin, bu mikroorga- nizmlarning toksigenlik xossasini belgilaydi. Mineral moddalar ortacha quruq moddaning 214 % ni tashkil etadi, ularga fosfor, natriy, kaliy, oltingugurt, temir, xlor va boshqalar kiradi. Fosfor nuklein kislota, fosfoliðidlar, kopgina fermentlar, shuningdek, AÒF (adenozin trifosfat kislotasi) tarkibiga kiradi, hujayraning energiya akkumulatori bolib hisoblanadi. Natriy hujayrada osmotik bosimni saqlashda ishtirok etadi. Òemir nafas fermentlari tarkibiga kiradi. Magniy Grammusbat bakteriyalarning yuzasida joylashgan, magniy ribonukleat tarkibiga kiradi. Mikroelementlar oz miqdorda uchrasa-da, mikroorganizmlarning rivojlanishi uchun juda zarur. Ularga kobalt, marganes, mis, xrom, rux, molibden va boshqa kopgina elementlar kiradi. Mikroelementlar ayrim fermentlarning sintezida va ularni faol- lashda ishtirok etadi. Alohida kimyoviy elementlarning ozaro nisbati mikroorganizm turiga, oziq muhit tarkibiga, almashuv xarakteriga va tashqi muhitda yashash sharoitiga bogliq. Bakteriyalarning oziqlanishi Barcha mikroorganizmlarning oziqlanish, nafas olish, bolinib kopayish jarayonini amalga oishirish uchun oziq moddalar zarur. Mikroorganizmlar energiya manbai va oziq modda sifatida turli xil organik moddalar va noorganik birikmalardan foydalaniladi, shuningdek, normal hayot kechirish uchun ularga mikroelementlar va osish omillari talab qilinadi. Mikroorganizmlarning oziqlanish jarayonida oziga xoslik bor. Birinchidan, oziq moddalar hujayraning butun devori orqali kiradi. Ikkinchidan, mikrob hujayrasi juda tez boradigan metabolitik reaksiyasiga ega. Uchinchidan, mikroorganizmlar yashash muhitini ozgartirishga juda tez adaptatsiyalanish (moslanish) xususiyatiga ega. Har xil sharoitda yashashga kora, mikroorganizmlarning turli xil oziqlanish turlari tafovut etiladi. Oziqlanish turi. Oziqlanish turi azot va uglerodni hazm qilishiga qarab aniqlanadi. Vodorod va kislorod organogenlarning manbai bolib suv hisoblanadi. Oziq moddalarni parchalashi uchun mikroor- ganizmlarga suv juda zarur, chunki ular hujayraga faqat erigan modda bilan kiradi. 27 Uglerodni qabul qilishga kora, mikroorganizmlar ikki turga bolinadi: avtotroflar va geterotroflar. Avtotroflar (yunon. autosozim, tropheoziqlanaman) oddiy noorganik birikmalardan murakkab organik birikmalarni sintezlash xususiyatiga ega. Ular uglerod manbai sifatida uglekislota va boshqa neorganik uglerod birikmalaridan foydalanishi mumkin. Avtotroflar tuproq (nitrifikatsiya, serobakteriya va b.) bakteriyalari hisoblanadi. Geterotroflar (yunon. heterosboshqa, trepheoziqlanaman) osib rivojlanish uchun tayyor organik birikmalarga muhtoj. Ular uglerodni uglevodlardan (kopincha glukoza), kop atomli spirtlardan, organik kislotalardan, aminokislotalardan va boshqa organik moddalardan oladi. Geterotroflarga mikroorganizmlarning katta guruhdagi azolari kiradi, ular orasida saprofit va parazitlarni uchratishimiz mumkin. Saprofitlar (yunon. saproschirigan, photonosimlik) olik organizmdan tayyor organik birikmalarni oladi. Ular olik organizm qoldiqlarining chirishida katta rol oynaydi. Masalan, chirituvchi bakte- riyalar va boshqalar. Parazitlar (yunon. parasitos haromxor, tekinxor) tirik osim- lik, hayvon va odam hujayrasidagi organik birikmalar hisobiga yashaydi va bolinib kopayadi. Bunday mikroorganizmlarga rikketsiyalar, viruslar va ayrim sodda jonivorlar kiradi. Azotni qabul qilishiga kora, mikroorganizmlar ikki guruhga bolinadi, aminoavtotroflar va aminogeterotroflar. Aminoavtotroflar oqsilni sintezlashida hujayralar havoni azot molekulasi yoki ammoniy birikmalardanaminokislota, murakkab oqsildan oladi. Ularga barcha patogen mikroorganizmlar va kopgina saprofitlar kiradi. Energiya manbaiga kora, mikroorganizmlar quyidagilarga bolinadi: ••••• fototroflar biosintez reaksiyasi uchun energiyani quyosh nuridan (purpur serobakteriyalar) oladi; ••••• xemetraflar energiyani noorganik va organik moddalarni ok- sidlash hisobiga oladi. Lekin mikroorganizmlarni oziqlanishiga kora, chegaralab bol- maydi, chunki shunday turdagi mikroorganizmlar borki, ular gete- rotrof turidan avtotrof turiga va aksincha, ozgarishi mumkin. Hozirgi vaqtda mikroorganizmlarning oziqlanishiga kora, yangi atamalar kiritilgan: geterotroflar, organotroflar, avtotroflarlitotroflar (yunon. litos tosh) deb ataladi, chunki bunday mikroorganizmlar faqat mineralli muhitda osish qobiliyatiga ega. Osish omillari. Mikroorganizmlarning rivojlanishi va bolinib kopayishi uchun alohida moddalar zarur, ular bu moddalarni ozlari 28 sintezlay olmaydi va shuning uchun ularni tayyor holda olishlari lozim. Bunday moddalarni osish omillari deyiladi va ular mikroorganizm toqimasiga oz miqdorda kerak boladi. Ularga turli xil vitaminlar, ayrim aminokislotalar (oqsillarini sintezlash uchun kerak) va boshqalar kiradi. Kopgina osish omillari turli xil fermentlar tarkibiga kiradi va biokimyoviy jarayonlarda katalizator vazifasini bajaradi. Mikroorganizmlarning oziq moddalarga va osish omillariga muhtojligini bilish juda zarur, chunki ularni ostirishda oziq moddalarni tanlay olishimiz lozim. Oziq moddalar transportirovkasi. Oziq moddalar mikrob hujayrasi sitoplazmasiga faqat katta bolmagan molekula turida va erigan holda kirishi mumkin. Murakkab organik moddalar (oqsillar, polisaxaridlar va b.) mikrob hujayrasi ishlab chiqarilgan fermentlar tasiriga uchraydi va shundan keyingina, ulardan foydalanish oson boladi. Oziq moddalarni hujayraga kirishi va undan metabolizm moddalarining chiqarilishi, asosan, sitoplazmatik membrana orqali bajariladi. Oziq moddalar hujayraga bir necha usullarda kiradi: 1. Passiv diffuziya, yani moddalar membrana qatlamidan otadi, natijada ularning konsentratsiyasi va qobiqning ikki tomonidagi bosim ortadi. Shunday qilib, muhitning konsentratsiyasi, hujayradagi moddalar konsentratsiyasi yuqori bolganda, oziq moddalar hujayraga kirishi mumkin. 2. Yengillashtirilgan diffuziya hujayraga oziq moddalar permeaza deb nomlangan molekula tashuvchilar yordamida faol ravishda kiritiladi. Bu moddalar ferment tabiatli bolib, sitoplazmatik membrananing tashqi tomonida har bir permeaza oziga mos oziq moddaga adsorb- siyalanadi. Bu jarayon energiyadan foydalanmasdan tugaydi, yuqori konsentratsiyadan past konsentratsiyaga moddalarni kochiradi. 3. Faol tashish. Oziq moddalar permeaza yordamida xuddi shunday faol tashish yoli orqali amalga oshiriladi, bu jarayonda energiya sarf etiladi. Bu holda hujayradagi konsentratsiya muhitdagi konsentratsiyadan yuqori bolgandagina, oziq moddalar hujayraga kirishi mumkin. Qator hollarda tashilayotgan moddalar modifikatsiyaga uchraydi va bunday moddalarni tashish usuli radikallarning kochirish yoki kimyoviy guruhni translokatsiyasi deb ataladi. Òashilayotgan mod- dalarni uzatish mexanizmiga kora, bu jarayon faol tashishga oxshash- dir. Mikrob hujayrasidan moddalarning chiqishi passiv diffuziya yoki yengillashtirilgan diffuziya jarayonida permeaza ishtirokida amalga oshiriladi. 29 Fermentlar va ularning moddalar almashinuvidagi roli Fermentlar bu tirik hujayralar ishlab chiqaradigan oqsil tabiatli moddadir. Ular biologik katalizator hisoblanadi va mikroorganizmlarda moddalar almashinuvida ishtirok etib, asosiy rol oynaydi. Kimyoviy tarkibi, xossalari va tasir etish mexanizmiga kora, mikroblarning fermentlari hayvon va osimliklarning hujayra va toqimalari hosil qiladigan fermentlarga oxshashdir. Mikrob hujayra- sining fermentlari, asosan, sitoplazmada joylashadi, ayrimlari yadro va hujayra qobigida saqlanadi. Mikroorganizmlar malum sinflarga kiruvchi oltita har xil fermentlarni: oksireduktazalarni, transferazalar, gidrolazalar, liazalar, izomerazalar, ligazalarni sintezlashi mumkin. Spetsifik tasir fermentlarning xarakterli xossasi bolib, yani har bir ferment malum kimyoviy birikmalar bilan reaksiyaga kirishadi va bitta yoki bir necha kimyoviy reaksiyalarni parchalaydi. Masalan, laktoza fermenti laktozani, maltoza fermenti maltozani parchalaydi. Fermentlarning faolligi oziqa muhitning harorati, vodorod ion korsatkichi va boshqa omillariga bogliq. Kopgina patogen mikroorganizmlar uchun optimal pH 7,27,4, optimal harorat 3750°C hisoblanadi. Mikroorganizmlarning fermentlari ekzofermentlarga va endo- fermentlarga tasniflanadi. Ekzofermentlar tashqi muhitga ajralib, oziq moddalarga makromolekulalarni oddiy birikmalarga parchalaydi, ular mikrob hujayrasi tomonidan hazm bolishi mumkin. Ekzofermentlarga gidrolazalar kiradi, ular oqsil-yog, uglevodlarni gidrolizlaydi. Bu reaksiya natijasida oqsillar aminokislotalarga va pentonlarga, yoglar yog kislotalari va glitseringa, uglevodlar (polisaxaridlar) disaxarid va monosaxaridlarga parchalanadi. Endofermentlar hujayra ichida boradigan moddalar almashinuvida ishtirok etadi. Shuningdek, mikroorganizmlarda konstituktiv va induktiv fer- mentlar mavjud. Konstituktiv fermentlar har qanday sharoitda ham mikrob hujayrasida uchraydi. Bunday fermentlarga protiaza, liðozakarpogidrolaza va boshqa fermentlar kiradi. Induktiv (adaptiv) fermentlar oziqa muhitidagi mos substrat tasirida va mikroorganizm uni ozlashtirishga majbur bolganda hujayrada sintezlanadi. Masalan, agar bakteriyalar oddiy sharoitda kraxmalni parchalovchi amilaza fermentini ishlab chiqarmasa, ular faqat kraxmal saqlovchi oziqa muhitga ekilgan hollarda bu fermentlar sintezlay boshlaydi. Shunday qilib, induktiv fermentlar mikrob hujayrasi sharoiti ozgarganda ham yashash uchun moslanishga imkon beradi. 30 Kopgina patogen mikroorganizmlar almashinuvi fermentlaridan tashqari, agressiv fermentlarni ham ishlab chiqaradi, ular mikroorga- nizmlarning tabiiy himoya tosigini kechib otishga xizmat qiladi va patogenlik omili bolib hisoblanadi. Bunday fermentlarga gialuronidaza, dezoksiribonukleaza, letsitovitellaza va boshqalar kiradi. Gialuronidaza biriktiruvchi hujayralar oraligida moddalarni parchalaydi, shuning- dek, qozgatuvchini makroorganizmda tarqalishiga imkon yaratib beradi. Mikroorganizmlar ajratadigan turli xil fermentlar ularning bio- kimyoviy xossasini belgilaydi, har qanday mikroorganizmlarning fermentativ tuzilishi doimiy xossasi hisoblanadi. Òurli mikroor- ganizmlar fermentlarning yigindisiga kora, bir-biridan farqlanadi va identifikatsiyalash uchun katta ahamiyatga ega. Mikroorganizm fermentlarining amaliyotda qollanilishi Qadimdan odamlar pivo va vinoni tayyorlashda achitqi ferment- laridan foydalanishgan. Oziq-ovqat sanoatida fermentlar qollanilishi ularning texnologik jarayonini identifikatsiyalashda, tayyor mahsu- lotlar miqdorini va sifatini yaxshilashga imkon beradi. Malum turdagi zamburuglarning fermentlari xamir tayyorlashda qollaniladi, yopilgan nonning hajmini, govakligini oshiradi, mazasini, hidini, yangiligini yaxshilaydi. Ayrim mikroorganizmlarning fermentlari meva va sabzavotlardan sharbatlarni ajratib olish jarayonini tezlashtiradi. Fermentlar ayrim mikroorganizmlarga metanni ozlashtirishga imkon beradi va bu turdagi bakteriyalardan shaxtalarda metanga qarshi kurashishda foydalaniladi. Bakteriyalarning fermentlari yuvish vosita- lariga qoshiladi. Bunday preparatlar oqsil bilan ifloslanishni tozalaydi, chunki fermentlar oqsillarni suvda yaxshi eriydigan moddalarga par- chalaydi, yuvganda yaxshi yuviladi. Òibbiyot sanoatida mikroorganizmlarning fermentlari yordamida vitaminlar, gormonlar, alkaloidlar olinadi. Bakteriyalarning nafas olishi Mikroorganizmlarning nafas olishi (yoki biologik oksidlanish) biokimyoviy jarayonning yigindisi hisoblanadi, natijada mikrob hujayrasining hayoti uchun zarur bolgan energiya ajraladi. Barcha fiziologik jarayonlarda mikroorganizmlarning harakatlanishi, osishi, bolinib kopayishi, spora va kapsula hosil qilishi, toksinni ishlab chiqarishi faqat energiyaning quyilib kelishi natijasidagina vujudga kelishi mumkin. Mikroorganizmlar turli xil kimyoviy birikmalari, uglevodlar (kopincha glukozalarni), spirtlar, organik kislotalar, yoglar 31 va boshqalarni oksidlashi natijasida energiya hosil qiladi. Oksidlanishning manosi shundan iboratki, oksidlanuvchi moddalar elektronlarni beradi, tiklanuvchi esa uni qabul qiladi. Nafas olishiga kora, mikroorganizmlar quyidagi turlarga bolinadi. Obligat (talabchan) aeroblar, obligat anaeroblar, fakultativ (ixtiyoriy) anaeroblar. Obligat aeroblar (sil mikobakteriyasi va b.) kislorodli sharoitda yashaydi va bolinib kopayadi, yani oksidlanish reaksiyasi kislorod molekulasi ishtirokida energiya bilan amalga oshadi. Masalan, glukozaning aerob sharoitida oksidlanishi misol bola oladi: C 6 H 12 O 6 +6O 2 6CO 2 +6HO 2 +2882,6 kD (688,5 kkal). Kam miqdorda kislorodga muhtoj bolgan mikroaerofillar ham (ayrim leptospiralar, brutsellalar) mavjud. Obligat anaeroblar (qoqshol, botulizm va b.) faqat kislorodsiz sharoitdagina hayot kechiradi. Anaeroblarda nafas olish, substratlarning fermentatsiyasi kam miqdorda energiya ajralish yoli bilan vujudga keladi. Anaeroblar 1 mol glukozani parchalaganda, aerob nafas olgandagiga nisbatan kam miqdorda energiya ajraladi: C 6 H 12 O 6 2C 2 H 5 OH+2CO 2 +130,6 kD (31,2 kkal). Bosh holda kislorodning bolishi anaeroblarga oldiruvchi tasir korsatadi. Bu shunga bogliqki, kislorodning bolishi organik birikmalarning yakuniy mahsuloti vodorod peroksid bolib hisoblanadi. Anaeroblar vodorod peroksidini parchalovchi katalaza fermentini ishlab chiqarish xususiyatiga ega emasligi sababli, u bakteriyada yigilib, unga toksigen tasir korsatadi. Fakultativ anaeroblar kislorod molekulasi bolgan va bolmagan hollarda ham yashab, bolinib kopayadi. Ularga kopgina patogen va saprofit bakteriyalar kiradi. Organik birikmalarning kislorodsiz sharoitda parchalanish jarayoni energiya ajralishi bilan boradi, buni bijgitish deb ham ataladi. Malum mikroorganizmlar ishtirok etishi va uglevodlar parchalanishining yakuniy mahsulotiga qarab, bijgitishning bir necha turi farqlanadi: achitqi bilan amalga oshiriladigan spirtli, sut kislota bakteriyalari keltirib chiqaradigan sut kislotali, yog kislotali bakteriyalar keltirib chiqara- digan yogli-kislotali bijgitish va boshqalar. Mikroorganizmlar nafas olganda ajraladigan issiqlikni saqlab turuvchi maxsus idishlardagi oziqa muhitlarida ostirilib kuzatiladi, bunda oziqa muhitining harorati sekin-asta kotariladi. Ayrim mikroorganizmlarning nafas olganida, ortiqcha issiqlik chiqarishi torf, gong, pichan va paxtaning oz-ozidan yonib ketishiga sabab boladi. 32 Mikroorganizmlar nafas olishining biokimyoviy mexanizmi biologik kimyo darsliklarida toliq korsatilgan. Mikroorganizmlarning pigmentlanishi Ayrim mikroorganizmlar (bakteriya, zamburuglar) moddalar almashinuvi jarayonida boyaluvchi moddalarni pigmentlarni hosil qiladi. Pigmentlar xossasiga va kimyoviy tarkibiga kora har xil boladi. Ular suvda eriydigan (kok yiring tayoqchalari ishlab chiqaradigan kok pigmentpiotsianin), spirtda va suvda eriydigan pigmentlar (galati tayoqchalar ishlab chiqaradigan prodigiozanqizil pigment), spirt va suvda erimaydigan pigmentlar (qora va kulrangachitqi va mogor pigmentlari)ga bolinadi. Suvda erimaydigan pigmentlar (liðoxromlar) bakteriyalar kolo- niyasini boyaydi (masalan, stafilokokkning fermentlari sariq, tilla- rang, mallarangga boyaladi). Suvda eriydigan pigmentlar oziq muhitning rangini ozgartiradi (kok yiring tayoqchalari). Mikrob hujayrasi malum oziq muhitida, kislorodli sharoitda va yoruglik tasirida pigment hosil qiladi. Organizmni pigment hosil qilish xossasi kop hollarda doimiy hisoblanadi, bu ayrim bakteriyani farqlashda test sifatida qollaniladi (masalan, stafilokokk, kok yiring tayoqchalari). Mikroorganizmlarning pigment hosil qilishi malum fiziologik ahamiyatga ega. Pigmentlar mikrob hujayrasining tabiiy ultrabinafsha nurlardan himoya qiladi, nafas olish jarayonida ishtirok etadi, ayrimlari antibiotik tasirga ega (prodigiozan). Mikroorganizmlarning nur sochishi va xushboy hid ajratishi Mikroorganizmlarning (bakteriyalar, zamburuglar) nur sochish xossasiga ega bolgan turlari uchraydi. Bakteriyalarning nur sochishi uzluksiz oksidlanish jarayoni natijasida bolib, bu jarayon energiya ajralishi bilan boradi. Dengiz suvlari, baliq terisi, chirigan daraxtlar yoruglik ajrata- digan bakteriyalar yoki fitobariyalar yordamida ozidan yoruglik taratadi. Yoruglik ajratadigan bakteriyalarning barchasi aeroblardir. Ularning asosiy qismi dengiz suvlarida hayot kechiradi, chunki ular tuz miqdori kop bolgan sharoitda yaxshi bolinib kopayadi. Fotobakteriyalar bilan simbiozda yashaydigan orgimchak, chumoli va boshqalar ham yoruglik ajratishi mumkin. Yoruglik ajratadigan bakteriyalar qorongida yaxshi bilinadigan yashil yoki havorang yoruglik ajratadi. Qorongida qoziqorinlar ham yoruglik ajratadi. 33 Yoruglik ajratadigan bakteriyalar 1518°C da hayot kechiradigan va ular chirish jarayonini keltirib chiqarmaydi. Ular baliq hamda goshtli muhitda yaxshi osadi va ulardan nur ajralishiga yordam beradi. Ayrim mikroorganizmlar ozidan xushboy hid, masalan, etil uksus, sut, yog, pishloq, qaymoq va boshqa hidlarni ajratadi. Bunday bakteriya turli xil qandolat mahsulotlari, oziq-ovqatlar tayyorlashda qollaniladi. Bakteriyalarning osishi va bolinib kopayishi Mikroorganizmlar hayotida asosiy jarayonlardan biri ularning osishi va bolinib kopayishidir. Mikroorganizmlar osganda ularning kattaligi va barcha hujayralarning tarkibi ozgaradi. Bakteriya hujayrasining kattalashuvidan iborat bolgan osish jarayoni juda tezlik bilan boradi, u bir necha daqiqa ichida osadi. Bakteriyalar voyaga yetgach, kopaya boshlaydi. Ular kondalan- giga oddiy bolinish yoli bilan kopayadi. Bu jarayonning favqulodda tez borishi xarakterlidir. Bakteriya hujayrasi yetarli oziq-ovqat bolganda, qulay haroratda har 2030 daqiqada bolinadi. Bakteriyalar bemalol kopaya olsa, 5 kunda bitta hujayradan barcha dengiz va okeanlarni toldirib yubora oladigan tirik massa hosil bolishi hisoblab chiqilgan. Haqiqatda esa, bakteriyalarning shiddat bilan kopayishi, hatto eng yaxshi sharoitda ham bir necha soatdan oshmaydi. Òabiiy sharoitda kopgina noqulay omillar bakteriyalarning kopayishiga tosqinlik qiladi. Xususan, oziqa muhitida ulardagi moddalar almashinuvidan hosil boladigan mahsulotlar toplanishi bakteriyalarning osishi va kopayishiga zararli tasir qiladi. Ularning qisman nobud bolishiga olib keladi. Kondalang bolinishida bakteriyalar malum yoshga yetganda DNK molekulasi ikki baravar ortadi. Qiz hujayra ona DNK molekulasining nusxasini oladi. Bu jarayon qiz hujayra sitoplazmasi tola bolinganda tugallanadi. Chegara hosil bolishida sitoplazmatik membrana va hujayra devori ishtirok etadi. Agar bolinish hujayraning ortasidan boshlansa, ikkita qiz hujayra bir xil kattalikda boladi (izomorf bolinish). Ayrim hollarda chegara bir uchiga yaqinroqda hosil boladi, bunda qiz hujayralar bir xil kattalikda bolmaydi (geteromorf bolinishi). Bakteriyalarda (kokklar) bolinib kopayishi turli xil tekisliklarda boradi. Shuning uchun zanjirsimon (streptokokk), uzum shingiliga oxshash (stafilokokk), ikkitadan (diðlokokk, tetrakokk, sarsina) joylashadi. Òayoqchasimon bakteriyalar faqat kondalang yolida, bitta tekislikda bolinib kopayadi. 34 Ayrim bakteriyalar kurtaklash usulida (sil mikobakteriyasi) boli- nib kopayadi. Bundan tashqari, kanyugatsiya usulida bolinib kopayishi ham tafovut etiladi, bu bolinish jinsiy bolinib kopayishga oxshash. Masalan, ichak tayoqchasi. Suyuq oziqa muhitida bakteriyalarning bolinib kopayishi bir necha fazalarda boradi: 1. Latent bosqich. Mikrob hujayrasi oziqa muhitiga moslashadi, moddalar almashinuvi tezlashadi, hujayra kattalashadi. Bakteriyalar birinchi fazaning oxirida bolinib kopaya boshlaydi. 2. Logorifmik kopayish bosqichi. Bu fazada bakteriyalar bolinib kopayishi tezlashadi, ularning soni ortadi. 3. Statsionar bosqich. Bakteriya hujayrasining konsentratsiyasi doimiyligicha qoladi. Bunda tirik va olik bakteriyalar miqdori teng- lashadi. 4. Olish bosqichi. Bakteriya hujayrasining hayot faoliyati sekinlashadi va ola boshlaydi, chunki bunda oziqa modda kamayib, zaharli moddalar kopayadi. Olik hujayralar miqdori ortadi. 5. Òola olish bosqichi. Bakteriya hujayralari toliq nobud boladi. Bakteriyalarning tola olishi bir necha kun, hafta yoki oydan song yuzaga kelishi mumkin. Suyuq oziqa muhitida bakteriya miqdori 1824 soatdan song ortadi. Bunda muhit loyqalanadi. Chokma yoki parda hosil qiladi. Zich oziqa muhitida esa koloniya hosil qilib osadi. Spiroxetalar va rikketsiyalar ham kondalang usulda bolinib kopayadi. 1. Mikrob hujayrasining kimyoviy tarkibi qanday? 2. Mikroorganizmlarda qanday oziqlanish turi mavjud? 3. Oziq moddalar hujayraga qanday otadi? 4. Mikroorganizmlar nafas olishiga kora qanday turlarga bolinadi? 5. Bakteriyalar qanday usulda bolinib kopayadi? 4-bob. ÒASHQI MUHIT OMILLARINING MIKROORGANIZMLARGA TASIRI Mikroorganizmlar hayoti uni orab turgan va ularga tasir korsa- tuvchi tashqi muhit bilan chambarchas bogliq. Mikroorganizmlarga tasir korsatuvchi barcha omillarni uch guruhga: fizikaviy, kimyoviy, biologik omillarga bolish mumkin. Òashqi muhit omillarning yaxshi yoki oldiruvchan tasir korsatishi, mana shu omilning tabiatiga, shuningdek, mikroorganizmlarning xossasiga bogliq. ? Nazorat uchun savollar 35 Fizikaviy omillar Mikroorganizmlarga fizikaviy omillardan sovuq va issiq harorat, quritish, yoruglik energiyasi, ultratovush va bosim tasir korsatadi. Harorat. Har bir mikroorganizmlarning hayot faoliyati malum harorat bilan chegaralangan. Asosan, uch harorat mavjud minimal haroratmikrob hujayrasi bu haroratda bolinib kopaymaydi, opti- mal harorat mikroorganizmlar osib bolinib kopayishi uchun qulay harorat hisoblanadi, maksimal harorat mikrob hujayrasining rivojlanishi sekinlashadi yoki toxtaydi. Barcha mikroorganizmlar haroratga nisbatan psixrofillar, mezofillar va termofillarga bolinadi. Psixrofillar (yunon. psyhros sovuq, phileo sevaman) yoki sovuq haroratni sevuvchi mikroorganizmlardir. Ular past haroratda osadilar. Ular uchun minimal harorat 0°C, optimal harorat 1020°C, mak- simal harorat 30°C ga teng. Ularga shimoliy dengiz hamda okeanlarda tuproq va chiqindi suvlarda yashaydigan mikroblar kiradi. Mezofillar (yunon. mesos ortacha), bularga kopgina saprofit va barcha patogen mikroorganizmlar kiradi. Ular uchun maksimal harorat 46°C, optimal harorat 2837°C va minimal harorat 10°C ga teng. Òermofillar (yunon. termos issiq). Bular uchun minimal haro- rat 30°C, optimal harorat 5060°C, maksimal harorat 7075°C ga teng. Ular issiq suv havzalarida, tuproqning yuza qismida, gongda uchraydi. Yuqori va past harorat mikroorganizmlarga turlicha tasir korsatadi. Ayrim mikroorganizmlar yuqori haroratga juda sezgir boladi. Harorat maksimal korsatkichdan ortgan sari mikroblarning olishi tezlashadi. Vegetativ mikroorganizmlar 60°C tasirida 3060 daqiqadan song, 80100°C tasirida 12 daqiqadan song nobud boladi. Bakteriyalarning sporalari ancha chidamli boladi. Masalan, batsillaning sporasi qaynatgandan 1020 daqiqa, botulizm klostridiyning sporasi 6 soatgacha saqlanadi. Barcha bakteriyalar va sporalar 165170°C harorat tasirida 1 soat ichida nobud boladi. Kopgina mikroorganizmlar past haroratga chidamli boladi. Vabo va salmonellalar muzda uzoq saqlanadi. Ayrim mikroorganizmlar suyuq havoda (190°C), bakteriyalarning sporalari 250°C haroratda ham tirik qolishi mumkin. Patogen mikroblari kokyotal, meningokokk, gonokokk va boshqalar past haroratda tez nobud boladi. Mana shuni etiborga olib, tekshirish materialini laboratoriyaga yuborilayotganda, sovuqdan saqlagan holda olib borish lozim boladi. Past harorat achituvchi va bijgituvchi jarayonni yuzaga keltiruvchi mikroorganizmlarga oldiruvchan tasir korsatadi. Shuning uchun oziq-ovqat mahsulotlarini muzlatkichlarda, omborxonalarda saqlanadi. 36 0°C haroratda mikroorganizmlar anabioz holatiga tushadi, moddalar almashinish jarayoni sekinlashadi va bolinib, kopayishi toxtaydi. Agar mikroblar yana oziga qulay haroratga va oziq muhiti kop bolgan sharoitga tushsa, ozini qayta tiklaydi. Haroratning tez ozgarishi (muzlash yoki erish) mikroorganizmlarga oldiruvchan tasir korsa- tadi, yani hujayra qobigining bolinib ketishiga olib keladi. Quritish. Mikroorganizmlarning normal hayoti uchun suv zarur. Quritish tasirida sitoplazmatik membrananing butunligi buziladi, natijada mikrob hujayrasining oziqlanishi toxtab, hujayra nobud boladi. Quritish tasirida mikroblarning olishi turlichadir. Masalan, patogen meningokokk, gonokokk, leptospiralar, treponema va bosh- qalar quritish tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Vabo vibrioni 2 kungacha, salmonellalar 70 kun, sil mikobak- teriyasi 90 kungacha saqlanishi mumkin. Sil kasalligi bilan kasallan- gan bemorning qurigan balgamida sil qozgatuvchisi qurigan oqsil qobigi bilan oralgan boladi. Shuning uchun u 10 oygacha saqlanishi mumkin. Quritishga va boshqa omillarga sporalar juda chidamlidir. Kuydirgi batsillasining sporasi 10 yilgacha, mogor zamburuglari 20 yilgacha saqlanadi. Quritish tasirida mikroblar nobud bolgani uchun azaldan sabzavot va mevalar, gosht, baliq, dorivor osimliklar quritib saqlangan. Quritish yoli bilan saqlangan oziq-ovqatlar namli sharoitga tushganda tez buziladi, chunki mikroblar oz faoliyatini yana tiklaydi. Mikroorganizm kulturalarini, vaksina va biologik preparatlarni saqlashda liofil quritish usuli keng qollaniladi. Bunda preparatlar muzlatilib, song vakuum sharoitida quritiladi. Bu holatda mikrob hujayrasi anabioz holatiga otadi va bir necha oy, hatto bir necha yillargacha biologik xossasini saqlab qoladi. Yoruglik nurlari. Mikroblar hayot faoliyatlarida doimiy quyosh radiatsiya nurlari tasiriga uchraydi. Òik quyosh nuri fotosintezlovchi bakteriyalardan tashqari, mikroorganizmlarga ham bir necha soat ichida oldiruvchan tasir korsatadi. Quyosh nuri tarkibidagi ultrabinafsha nurlari hujayra fermentlarini inaktivatsiyalaydi va DNKni jarohatlaydi. Patogen mikroorganizmlar UBN (ultrabinafsha nuri)ga juda sezgir boladi. Shuning uchun laboratoriyada kulturalarni qorongida saqlash maqsadga muvofiqdir. Buni Buxner oz tajribasida isbotlab bergan. Petri kosachasidagi oziqa muhitga kop miqdorda mikrob kulturasi ekiladi. Qora qogozdan «typhus» sozi kesib olinadi va kosachaning orqa tarafiga yopishtiriladi. Kosachani tonkarilgan holatda tik quyosh nurida 1 soatga qoldiriladi, vaqt otgach, qogoz olib tashlanadi va kosachani 37°C da 24 soat termostatda qoldiriladi. Ertasiga termostatdan 37 kosachani olib qaralganda, uning qogoz yopishgan joyida mikroblarning osgani korinadi. Òik quyosh nuri tushgan yerida esa mikroblar osmagani kuzatiladi. Quyosh nurining ahamiyati katta bolib, tashqi muhit, havo, suv, tuproqning yuza qismini patogen mikroblardan tabiiy ravishda tozalab turadi. UBNlarning bakteriotsidlik tasiridan yopiq xonalardagi (jarrohlik, boglov, boks va b.) havoni sterilizatsiya qilishda keng foydalaniladi. Bu nurlarning manbai bolib, ultrabinafsha nur ajratuvchi lampa, bakteriotsid lampalar hisoblanadi. Ultratovush mikrob hujayrasini jarohatlaydi. Uning tasirida hujayra ichidagi sitoplazma faollashadi va hujayra ichidagi bosim ortib ketadi (10000 atm). Bu hujayra qobigining butunligiga tasir korsatib, hujay- rani nobud qiladi. Ultratovush oziq-ovqatlarni (sut, meva, sharbatlar), ichimlik suvlarini sterilizatsiya qilishda qollaniladi. Bosim. Mexanik bosimga bakteriyalar va sporalar chidamli boladi. Òabiatda okean va dengizlarning 100010000 metr chuqurligida 100900 atm bosim ostida yashaydigan mikroblar ham aniqlangan. Ayrim turdagi bakteriyalar 30005000 atm, sporalar 20000 atm bosimiga chidamli. Kimyoviy omillar Kimyoviy omillar mikroorganizmlarga turlicha tasir korsatadi. Ularning tasiri kimyoviy modda tabiatiga, konsentratsiyasiga, mikrob- larga tasir etish vaqtiga bogliqdir. Kimyoviy modda konsentratsiyasiga qarab, oziqlantiruvchi yoki oldiruvchi tasir korsatadi. Masalan, 0,52 % glukoza eritmasi mikroblarning osishiga tasir korsatsa, 2040 % glukoza eritmasi esa mikrob hujayrasining bolinib kopayishini sekinlashtiradi. Kimyoviy moddalardan dezinfeksiya qilish maqsadida foydalaniladi. Dezinfeksiya deb, tashqi muhitdagi patogen mikroorganizmlarni yoq qilish jarayoniga aytiladi. Dezinfeksiyalovchi moddalarga fenol va ularning ogir metall tuzlari, ayrim kislotalar, ishqor, spirt va boshqalar kiradi. Ular mikroorganizmga oldiruvchan tasir korsatadi. Antiseptiklar, kimyoviy moddalar mikroorganizmlarga oldiruvchi tasir korsatadi yoki ularni bolinib kopayshini susaytiradi. Ulardan davolash maqsadida (kimyoterapiya), shuningdek, teri va shilliq qavatdagi jarohatlarni zararsizlantirishda foydalaniladi. Vodorod peroksid, yodning spirtli eritmasi, brilliant yashili, kaliy permanganat eritmasi va boshqalar antiseptik xossaga ega. Ayrim antiseptik moddalar (uksus, benzoy kislotasi va b.) oziq-ovqatlarni konservatsiya qilishda qollaniladi. 38 Mikroblarga tasir korsatish mexanizmiga kora, kimyoviy mod- dalar bir necha guruhlarga bolinadi: 1. Yuza-faol moddalar (yog kislotalari, sovun va b.) mikro- organizmlarning hujayra devori va sitoplazmatik membranasiga tasir korsatadi. 2. Fenol, krezeol mikrob oqsilini koagulatsiyaga uchratadi. Ulardan zararli materiallarni zararsizlantirishda foydalaniladi. 3. Oksidlovchilar mikrob oqsil bilan ozaro tasirga otib, ferment- larning faoliyatini buzadi va oqsillarni denaturatsiyaga uchratadi. Ularga xlor, ozon va boshqalar (xlor aralashmasi, xloramin, vodorod peroksid, kaliy permanganat, yod va b.) kiradi. 4. Formaldegid 40 % formalin eritmasidan dezinfeksiyalash uchun foydalaniladi. U vegetativ mikroorganizmlarni oldiradi. 5. Ogir metall tuzlari (simob, rux) mikrob oqsilini koagulatsiyaga uchratib, ularni nobud qiladi. Kumush, oltin, simob, oz konsentratsiyada mikroblarga bakteriotsid tasir korsatadi. Bunga oligodinamik tasir (oliqosoz, kam, dinamyskuch) deyiladi. Simobli preparatlar mikroblarga kuchli tasir korsatadi, ularni dezin- feksiya qilishda sulema (1:1000 eritmasi) qollaniladi. Lekin ular mikroorganizmlarga zaharli tasir korsatadi. 6. Boyoqlar (brilliant yashili, rivanol va b.) bakteriyalarning osishiga tosqinlik qiladi. Boyoqli eritmalar antiseptik modda sifatida tasir korsatadi. Fizikaviy va kimyoviy omillarning mikroorganizmlarga tasiri aseptika va antiseptikaning asosini tashkil etadi. Aseptika fizikaviy usulda ifloslangan obyektdagi mikroblarga tosqinlik qilish chora-tadbirlariga aytiladi. Antiseptika organizmdagi va tashqi muhitdagi mikroor- ganizmlarni kimyoviy moddalar yordamida zararsizlantirish chora- tadbirlariga aytiladi. Biologik omillar Òabiiy sharoitda mikroorganizmlarning yashashi chegaralanmagan. Ular ozaro murakkab bogliqlikda bolib, simbioz, metabioz va antagonizmga asoslangan. Simbioz bu bir-biriga foyda keltiruvchi turli xil organizmlarni birlikda kengayishiga aytiladi. Ularni birlikda yashashi, alohida yasha- shiga qaraganda yaxshi boradi. Masalan, sut-achitqi bakteriyalar, spirtli achitqilar sut mahsulotlarini (kefir, qimiz) tayyorlashda qollaniladi. Metabioz bir turdagi organizm ikkinchi turdagi organizm yasha- shiga sharoit yaratib beradi. Masalan, aerob mikroorganizmlar kislo- rodni yutib, anaeroblarga kislorodsiz sharoit yaratib beradi. 39 Antagonizm bir turdagi mikroorganizm ikkinchi turdagi mikroorganizmning yashashiga tosqinlik qiladi. Masalan, sodda jonivorlar bakteriyani yemiradi, faglar esa hujayrani lizisga uchratadi. Chaqaloq ichagidagi sutda achitqi bakteriyalari Bifidobacterium bifidum bolib, ular sut kislotasini ajratib, ichakdagi chirituvchi bakteriyalarga oldiruvchan tasir korsatadi. 1. Mikroorganizmlar hayot faoliyatiga qanday fizikaviy omillar tasir korsatadi? 2. Qanday dezinfeksiyalovchi moddalarni bilasiz va ular tasir etish mexanizmiga kora, qanday guruhlarga bolinadi? 3. Mikroorganizmlar orasida qanday bogliqliklar mavjud? Sterilizatsiya Sterilizatsiya deb, pushtini quritish, yani tashqi muhit obyekti- dagi mikroorganizmlarning sporalarini yoqotish jarayoniga aytiladi. Sterilizatsiya bir necha usullarda olib boriladi: 1. Fizikaviy usul (yuqori harorat, ultrabinafsha nurlari, bakte- riologik filtr va b.) 2. Kimyoviy usul (turli xil dezinfeksiyalovchi antiseptik moddalar- dan foydalaniladi). 3. Biologik usul (antibiotiklar yordamida). Laboratoriya sharoitida, asosan, fizikaviy usuldan foydalaniladi. Fizikaviy usul Alangada choglantirish usulida sterilizatsiya qilinganda, tashqi obyektdagi vegetativ hujayralar va mikroorganizm sporalari toliq nobud boladi. Asosan, bakteriologik qovuzloq, shpatel, piðetka, buyum oynachasi, yopqich oynacha, kichik asboblar va boshqalar choglantirish yordamida sterilizatsiya qilinadi. Qaychi, skalpel, yani otkir asboblar choglantirish yordamida sterilizatsiya qilinmaydi, chunki ular alanga tasirida otmas bolib qoladi. Quruq issiqlik yordamida sterilizatsiyalash Quruq issiqlik yoki issiq havo yordamida sterilizatsiya Paster pechi (quritish shkafi)da olib boriladi. Paster pechining devori ikki qavatdan iborat, tashqi tarafdan issiqlik otkazmaydigan metall bilan qoplangan. U gaz elektr yordamida isitiladi. Elektr tokida ishlaydigan shkaf haro- ? Nazorat uchun savollar 40 ratni birday saqlaydigan avtomatik asbob bilan taminlangan. Haroratni nazorat qilish uchun termometri bor, uning ikki teshigi bolib, biri yuqorida aytilgan termometr uchun, ikkinchisi hidlar chiqishi uchun moljallangan. Quritish shkafida laboratoriya idishlari sterilizatsiya qilinadi. Shkaf ichiga bir xilda va toliq issiqlik borishi uchun idishlar tola olinmaydi. Shkaf eshigi yaxshilab yopiladi, song tokka ulanadi, 160165°C ga yetkazib, 1 soat davomida sterilizatsiya qilinadi. Sterilizatsiya vaqti tugagach, elektr tokidan ochiriladi, lekin shkaf eshigi soviguncha ochilmaydi. Agar eshigi ochib yuborilsa, sovuq havo shkaf ichiga kirib idishlarni sinishiga va darz ketishiga sabab bolishi mumkin. Paster pechi turli xil harorat tartibida ishlaydi: 160165°Ñ 60 da- qiqa; 180°Ñ15 daqiqa; 200°Ñ5 daqiqa. Suyuqliklar (oziqa muhitlar), fiziologik eritma va boshqalar, sintetik va rezinali buyumlar sterilizatsiya qilinmaydi, chunki ular erib ketadi. Qaynatish yoli bilan sterilizatsiya qilish Qaynatishda sterilizatordan foydalaniladi. Oddiy va elektr sterilizator- lar mavjud. Shðris, pinset, shisha idishlar, rezinali qolqoplar, kateter va zondlar qaynatiladi. Sterilizatorga qaynagan yoki distillangan suv solinadi va 2030 daqiqa qaynatiladi. Vaqt suv qaynab chiqqandan boshlab belgilanadi. Qaynatilganda sporasiz bakteriyalar nobud boladi, sporali bakteriyalar saqlanib qoladi, chunki ular chidamli hisoblanadi. Bug yordamida sterilizatsiya ikki usulda olib boriladi: 1. Yuqori bosim ostida sterilizatsiya qilish. 2. Harakatdagi bug yordamida sterilizatsiya qilish. Yuqori bosim ostida sterilizatsiya qilish avtoklav asbobida olib boriladi. Avtoklavlarda faqat maxsus tayyorgarlikdan otgan shaxslar ishlashi mumkin. Avtoklav ikki xil boladi: 1. Vertikal. 2. Gorizontal. Avtoklav silindr shaklidagi, usti tomonidan issiqlik otkazmaydigan metall bilan qoplangan. Ogir qopqogi boltlar yordamida mahkam yopiladi. Avtoklav ichidagi bosimni nazorat qilish uchun manometri bor. Pastki qozon bugi hosil qilish uchun, unga tashqi tarafdan jomragi orqali distillangan suv quyiladi. Uchta teshigi bolib: bug kirishi uchun, bug chiqishi uchun, manometr uchun. Bug chiqishi uchun jomragi mavjud. Ish rejimi: 1. Distillangan suv quyiladi va bug chiqarish jomragi ochiladi. 2. Sterilizatsiya qilinadigan materiallar bikslarga solinib, avtoklavga joylashtiriladi va qopqogi yopilib, boltlar bilan mahkamlanadi. 41 3. Elektr tokiga ulanadi. 4. Bug bir xilda tovush chiqargandan song, bug chiqarish jomragi yopiladi va manometr strelkasi kozdan kechiriladi. Strelka 0 atm 100°C 0,2 atm 105°C 0,5 atm 112°C 1,0 atm 120°C 1,5 atm 127°C 2,0 atm 134°C 5. Vaqt otgach avtoklav tokdan ochiriladi, manometr strelkasi «0» ga kelguncha poylab turiladi, song bug chiqarish jomragi ochilib bug chiqariladi va avtoklav qopqogi orqa tomondan turib oziga qarab ochiladi. Avtoklavda toliq sterilizatsiya bolganligini yuqori haroratda oz xossasini ozgartiradigan oltingugurt, benzoynayga kislota, ISÒE kimyoviy moddalardan foydalaniladi. Ular sterilizatsiya qilishdan avval avtoklavga solib qoyiladi va sterilizatsiya tugagandan song tekshiri- ladi. Agarda ular rangi ozgarib kristall holga aylangan bolsa, sterilizatsiya toliq bolganligini korsatadi. Harakatdagi bug yordamida sterilizatsiya qilish Harakatdagi bug yordamida sterilizatsiya qilishni avtoklav va Kox asbobida olib borish mumkin. Avtoklavda yuqorida aytilgandek ishlar olib boriladi, faqat bug chiqarish jomragi yopiladi. Jomrak yopilgandan song avtoklavda bosim ham ortmaydi. Kox asbobi silindr shaklga ega, konussimon qopqogi mavjud, devori ikki qavatdan iborat, ustki qavati issiqlik otkazmaydigan asbest bilan qoplangan. Qopqogining ustida ikkita teshigi bolib, bug chiqa- rish va termometr uchun. Ichida ikkita koprigi bor, unga suv quyiladi. Òeshik chelagi bolib, unga oziqa muhitlar joylashtiriladi va koprikcha ustiga ornatiladi. Kox asbobini elektr yoki gaz plitasi ustida qaynatiladi. Kox asbobida 100°C haroratdan yuqorida oz xossasini ozgar- tiradigan mochevina, sutli, uglevodli, jelatinali va boshqa oziqa muhit- lar sterilizatsiya qilinadi. Sterilizatsiya 3 kun 100°C da 3060 daqiqa olib boriladi, bolib-bolib sterilizatsiya qilinadi. Birinchi kun vegetativ holatdagi mikroblar nobud boladi. Sterilizatsiya tugagach, oziqa muhit solingan chelakcha olinib, uy haroratida qoldiriladi. Shunda sporali shakldagi mikroblar vegetativ shaklga aylanadi. Ikkinchi kun sterilizatsiya qilinganda, ular ham nobud boladi. Sterilizatsiya toliq bolishi uchun uchinchi kun sterilizatsiya davom ettiriladi. 42 Koxning quyultiruvchi asbobi. Bu asbob, asosan, zardob va tuxum saqlaydigan oziqa muhitlarni sterilizatsiya qilish va quyultirish maqsadida qollaniladi. Koxning quyultiruvchi asbobi metall qutidan iborat, devori ikki qavatdan iborat, oraligi boshliq. Òashqi tarafdan issiqlik otkazmay- digan asbest bilan qoplangan, bir chetida maxsus teshigi bolib, shu yerdan distillangan suv quyiladi va teshik qopqogi termometr orna- tilgan qopqoq bilan yopiladi. Sterilizatsiya qilinadigan oziqa muhit probirkalarga solinib, asbobdagi shtativga quyi holda ornatiladi. Asbob elektr yoki gaz plitasida qizdiriladi. Borayotgan jarayonni oynali qopqogi orqali nazorat qilib turish mumkin. 90°C da bir soat yoki uch kun bolib-bolib sterilizatsiya qilinadi. Òindalizatsiya. Past haroratda bolib-bolib sterilizatsiya qilishga tindalizatsiya deyiladi. Òarkibida oqsil saqlovchi 60°C dan yuqorida oz xossasini ozgartiruvchi muhitlar sterilizatsiya qilinadi. Bunda suv hammomida 5658°C da besh kun davomida sterilizatsiya qilinadi. Pasterilizatsiya. 6070°C da 1 soat davomida sterilizatsiya qilishga pasterilizatsiya deyiladi. Bu usulda vino, pivo, sut va sut mahsulotlari sterilizatsiya qilinib, ular tarkibidagi achituvchi mikroblar oladi va ular uzoq vaqt saqlanadi. Mexanik usulda sterilizatsiya. Buning uchun Zeyts filtridan foydalaniladi. U filtrasbest va sellulozadan tashkil topgan. Ikki xil filtr mavjud: «F» filtr yirik moddalarni ushlab qoladi, «S» filtr sterilizatsiyalovchi filtr bolib, bakteriyalarni ushlab qoladi, lekin viruslarni otkazib yuboradi. Bu filtr metall plastinka orasiga olinadi va boltlar bilan mahkam- lanadi. Metall plastinka ortasida suyuqlik otishi uchun teshigi bor, bu plastinka Erlenmayr kolbasiga ornatiladi. Kolba ichidagi havo jomrak orqali sorib olinadi, natijada vakuum hosil boladi. Voronka orqali suv quyilganda kolbadagi vakuum sharoitiga havo orniga suv sorilib otadi. Mexanik usulda sterilizatsiya qilishdan avval, albatta, filtrlar sterili- zatsiya qilinishi lozim. Infraqizil nurlar yordamida 200280°C haroratda vakuum ostida jarrohlik asboblari 58 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Ultrabinafsha nur (UBN) yordamida davolash muassasalarida boglov xonalari, jarrohlik xonasi, tuguruq xonasi, chaqaloqlar yotadigan xona, bemorlar yotadigan xona, muolaja xonasi, dori tayyorlaydigan xona, boks, boks oldi va boshqa xonalar sterilizatsiya qilinadi. Kimyoviy usul. Bu usuldan oziqa muhitlarni, vaksina va zardoblarni mikroblar bilan ifloslanishini oldini olishda foydalaniladi. Shuning 43 uchun oziqa muhitiga toluol, efir, xloroform qoshib tayyorlanadi. Bu oziqa muhitlari ishlatishdan avval suv hammomida 56°C haroratda qizdirib yuborilganda bu moddalar uchib ketadi. Vaksina va zardoblarni uzoq vaqt saqlash uchun tayyorlanish jarayonida borniy kislotasi, mertiolit, formalin, toluol, etilen oksidi, propilen oksidi, farmaldegid qoshiladi. Bu kimyoviy moddalardan jarrohlik asboblarini, plastmas- sadan tayyorlangan anjomlarni sterilizatsiya qilishda foydalaniladi. Biologik usul. Bu usulda, asosan, antibiotiklardan foydalaniladi. Virusologik laboratoriyalarda viruslarni ostirishda boshqa mikroblar osmasligi uchun toqima kulturasiga antibiotiklar tasir ettiriladi. Antibiotik mikroblarga oldiruvchan tasir etadi, viruslarga esa tasir etmaydi. Dezinfeksiya Mikrobiologik amaliyotda turli xil dezinfeksiyalovchi moddalardan foydalaniladi. 35 % li fenol, 510 % li lizol, 15 % li xloramin, 36 % li vodorod peroksid, 15 % li formalin, sulema 1:1000 (0,1 %) eritmalari, 70° li spirt va boshq. Patologik materiallar (yiring, najas, siydik, balgam, qon, orqa miya suyuqligi) dezinfeksiyalovchi moddalar bilan zararsizlantiriladi. Zararsizlantirish quruq xlorli ohak yoki 35 % li xloramin eritmasi bilan olib boriladi. Zararli material yoki mikrob kulturasi bilan ifloslangan piðetka, shisha shpatel, buyum va yopqich oynachalar 3 % li fenol yoki vodorod peroksid eritmasiga 1 kunga solib qoyiladi. Ish tugagach laborant oz ish stolini, qolini dezinfeksiyalovchi moddalar bilan zararsizlantirishi lozim, stol usti 3 % li fenol eritmasi namlangan paxta bilan, qol esa 10 % li xloramin eritmasi bilan zararsizlantiriladi. Qollar salfetka bilan tozalanib, song sovunli suvda yuvilib, chayiladi. Mikrobni biologik xossasiga patogen mikrobning qanday muhitda ostirilganiga qarab, dezinfeksiyalovchi moddani konsentratsiyasi va tasir etish vaqti tanlanadi. Masalan, sulema, fenol, spirt, oqsilli substrat (yiring, qon, balgam) zararsizlantirishga yaroqsiz, chunki ular tasirida oqsillar ivib qoladi. Ivigan oqsil mikroblarni dezinfeksiya- lovchi moddalar tasiridan himoya qiladi. Sporali mikroorganizmlarni saqlovchi kulturalar 5 % li xloramin, 5 % li faollashtirilgan xloramin, 510 % li formalin eritmalari va boshqa moddalar bilan dezinfeksiya qilinadi. Kun boyi, ish davomida, ish tugagandan song dezinfeksiyalashga oxirgi yoki yakuniy dezinfeksiya deyiladi. 44 Dezinfeksiyalovchi moddalar va ishchi eritmalarni tayyorlash Xlorli ohak otkir hidli, oq kukun modda, suvda yaxshi erimaydi. Uning bakteriotsid tasiri tarkibidagi 2536 % li faol xlorga bogliq. 25 % dan kam faol xlorni saqlovchi xlorli ohak dezinfeksiyalash uchun yaroqsiz. Xlorli ohakni notogri saqlash natijasida u pachalanadi va faol xlorni yoqotadi. Parchalanish natijasida issiqlik, namlik, yoruglik ajraladi. Shuning uchun xlorli ohakni quruq, qorongi yerda, ogzi mahkam yopiladigan idishlarda saqlash lozim. Quruq xlorli ohak odam va hayvon chiqindilarini zararsizlantirishda qollaniladi (200 g bir litr najasga, 10 g bir litr siydikka). 10 % li xlorli ohak eritmasini tayyorlash uchun 1 kg quruq xlorli ohakni sirli chelakka solinib maydalandi. Song 10 litr sovuq suv quyib aralashtiriladi, qopqogi yopilib bir kunga sovuq joyda qoldiriladi. Biroz vaqt otgach eritmani bir necha qavatli dokadan otkaziladi. Bu eritmani qoramtir shisha idishlarda yogoch qopqoq yopib, salqin joyda 10 kungacha saqlash mumkin. Kerakli konsentratsiyadagi ishchi eritmalar asosiy eritmani qollashdan oldin tayyorlanadi. Xlorli ohakning 0,2 % li eritmasini tayyorlash 1-jadvalda korsatilgan. 1-jadval Xlorli ohak eritmasini tayyorlash i h c h s I g n i n i s a m ti r e k a h o il r o l x i g a d i s a m ti r e n e s n o k - r t t a % ,i s a y i s i n i s a m ti r e i h c h s I a d h s a l r o y y a t y i s o s a ,i r o d q i m g n i n a m ti r e l m a v o l I a g r ti l 1 a g r ti l 0 1 2 , 0 5 , 0 0 , 1 0 , 3 0 , 5 0 , 0 1 0 2 0 5 0 0 1 0 0 3 0 0 5 y i s o s A a m ti r e 0 0 2 0 0 5 0 0 0 1 0 0 0 3 0 0 0 5 y i s o s A a m ti r e i z i o f g n i n a m ti r e i h c h s I i n i s a m ti r e k a h o il r o l x n a g n il o n u h c u h s a l r o y y a t x a g i r o d q i m k a h o il r o l .i d a n a l q i n a b a r a q 45 Xloramin oq yoki sariq rangli kristall modda bolib, 2428 % li faol xlor saqlaydi. Xona haroratida suvda yaxshi eriydi, shuning uchun ishlatishdan oldin tayyorlanadi. Xloraminning 0,210 % li eritma- lari qollaniladi. Xloraminning turli xil konsentratsiyasini tayyorlash 2-jadvalda korsatilgan. % ,i s a y i s t a r t n e s n o K g ,i r o d q i m n i m a r o l X a g r ti l 1 a g r ti l 0 1 2 , 0 5 , 0 0 , 1 0 , 2 0 , 5 0 , 0 1 2 5 0 1 0 2 0 5 0 0 1 0 2 0 5 0 0 1 0 0 2 0 0 5 0 0 0 1 Xloramin shisha yoki sirli idishlarda eritiladi. Uni usti yopiq qoramtir idishlarda 15 kungacha saqlash mumkin. Faollashtirilgan xloramin. Xloraminga faollashtiruvchi modda 1:1 yoki 1:2 qilib qoshilganda xloraminning dezinfeksiyalovchi xususiyati ortadi. Faollashtiruvchi modda sifatida xlorid, sulfat, ammoniy nitratidan foydalaniladi. Faollashtirilgan xloraminning 0,51 va 2,5 % li konsentratsiyasi qollaniladi. Ularni ishlatishdan oldin tayyorlanadi. Xloramin va ammoniy tuzi alohida tortib olinadi, avval xloramin, song faollash- tiruvchi modda eritiladi. Faollashtiruvchi moddaning farqi shundan iboratki, xloramin qoshilganda faol xlor ajralishi tezlashadi. Shuning uchun faollashgan xloramin vegetativ mikroorganizmlarga emas, sporali kulturalarga ham oldiruvchan tasir korsatadi. Faollashtirilgan xloramin faqat pastroq va kichik konsentratsiyada qollaniladi. Fenol (karbol kislota) rangsiz kristall, otkir hidli modda, quyosh nuri, havo, namlik tasirida qizil rangga aylanadi. Ular usti qoramtir shisha idishlarda, yopiq holda yoruglik tushmaydigan yerda saqlanadi. Fenol suvda, spirtda, efir, yoglarda eriydi.U gigroskopik xossaga ega bolib qoladi. Suyuq karbol kislotasi 50 % fenol va 10 % suvdan tashkil topgan. Uning 35 % li suv eritmasi qollaniladi. Uning tayyorlanishi 3-jadvalda korsatilgan. Issiq suvda (4050°C) eritilganda, fenolning faolligi ortadi. Xloraminning turli xil konsentratsiyasini tayyorlash 2-jadval 46 Diqqat! Kristall fenoli yoki suyuq karbol kislotasi teriga tushsa, ogir kuyish keltirib chiqaradi. Shuning uchun katta konsen- tratsiyali karbol kislotasi bilan ehtiyotkorlikda ishlash lozim, ishlashdan avval qolga rezina qolqop kiyish yoki vazelin surtish lozim. Agar teriga tushsa, terini iliq suvda sovunlab yuvish yoki 40° li spirt bilan artish lozim. 1. Mikrobiologik laboratoriyalarda qanday dezinfeksiyalovchi moddalar qollaniladi? 2. Xlorli ohak, xloramin, fenollarning asosiy xossalari va tashqi korinishini bayon eting. 3. Sporali mikroorganizmlarni zararsizlantirish uchun dezin- feksiyalovchi moddalarning qanday eritmalari qollaniladi? Zararli materiallarni zararsizlantirish Òekshirib bolingan zararli materiallar ikki usulda zararsizlantiriladi: 1. Fizikaviy usul. Zararli materiallar baklarga solinib, avtoklavga ornatiladi va 1,52 atm bosim ostida bir soat davomida zararsizlan- tiriladi. Song avtoklavdan olib, 2 % li sodali sovunli suvda qaynatiladi, iliq suvda chayiladi. 2. Kimyoviy usul. Zararli material 24 soatga dezinfeksiyalovchi modda- larga solib qoyiladi, vaqt otgach olib, 2 % li sodali sovunli suvda qaynatiladi, iliq suvda chayiladi. Yangi keltirilgan laboratoriya idishlari ham 2 % li sodali sovunli suvda qaynatiladi. Iliq suvda chayiladi. Laboratoriya idishlarini sterilizatsiyaga tayyorlash Yuvib quritilgan laboratoriya idishlari sterilizatsiyaga quyidagicha tayyorlanadi: Piðetkalarsterilizatsiya qilinishidan avval uchiga paxta tampon tiqiladi, song uchidan boshlab 45 sm kenglikdagi qogoz lentasi 3-jadval Karbol kislota eritmasini tayyorlash a t o l s i k l o b r a K i s a m ti r e i h c h s i % ,i s a y i s t a r t n e s n o k l o b r a k ll a t s i r K a d . g ,i s a t o l s i k n u h c u h s a l r o y y a t i s a t o l s i k l o b r a k q u y u S a d .l m ,i r o d q i m r ti l 1 r ti l 0 1 r ti l 1 r ti l 0 1 3 5 0 3 0 5 0 0 3 0 0 5 3 3 0 6 5 5 0 3 3 0 0 6 0 5 5 ? Nazorat uchun savollar 47 oraladi va unga hajmi yozib qoyiladi. Yoki metall penallarga solib, sterilizatsiya qilinadi. Petri kosachalarikosacha orasiga qogozcha qoyilib, ortiqchasi qirqib tashlanadi. Petri kosachalari 35 tadan qilib, qogozchalarga oraladi. Probirkalaravval probirkalarga qopqoqchalar yasab olinadi. Òortburchak qilib qirqilgan doka probirka ogziga qoyilib, paxta solib presslanadi, song ið bilan boglab, dokaning ortiqchasi kesib tashlanadi. Probirkalar 1050 tadan qilib qogozga oraladi. Kolbaavval yuqorida aytib otilganidek, qopqoqcha yasab olinadi, song qogozli qopqoqcha bilan yopiladi. 5-bob. MIKROORGANIZMLARNING ÒABIAÒDA ÒARQALISHI Mikroorganizmlar tashqi muhitda keng tarqalgan. Ular tuproqda, suvda, havoda, odam va hayvon organizmlarida uchraydi. Mikroor- ganizmlar moddalar almashinuvi jarayonida ishtirok etadi. Ular tashqi muhitdagi turli sharoitga moslanish xossasiga ega va turli miqdorda uchrashi mumkin. Har bir obyekt oziga xos xarakterga, mikrofloraga ega. Mikroorganizmlar haqidagi bilimimiz yuqumli kasalliklar tar- qalishi va ularni yoqotish imkonini beradi. Òuproq mikroflorasi Mikroorganizmlarning rivojlanishi uchun tuproq eng qulay muhit hisoblanadi. Òuproqda organik moddalar, mineral birikmalar, namlik yetarli bolsa, bu kop miqdorda mikroblar toplanishiga sharoit yaratadi. Namligi kop bolmagan tuproqda mikroblar kop, chol tuproqlarida namlik kam bolganligi sababli, mikroblar kam boladi. Òuproqning yuza qismiga quyosh nuri, quritish tasir korsatadi. Shuning uchun namroq, 1020 sm chuqurlikdagi tuproqda mikrob koproq boladi. Òuproqning yanada chuqurroq qismida mikroblar miqdori kamayadi. Òuproq mikroflorasi turlicha: nitrifikatsiya, azogifikatsiya, denitrifi- katsiya, oltingugurt va temir, bakteriyalar, zamburuglar, sodda joni- vorlar uchraydi. Kopgina mikroblar tabiatda organik moddalarni parchalashda ishtirok etadi. Mikroblar yordamida tuproqning kimyoviy tarkibi va tuzilishi ozgaradi. Òuproq infeksiya qozgatuvchilarni tarqatuvchi omil bolib ham hisoblanadi. Odam va hayvon chiqindilari, murdalar, xojalik chiqindilari bilan birgalikda patogen mikroblar ham tuproqqa tushadi. Ularning kop- 48 chiligi oziq-ovqatlarning yetishmovchiligi, quyosh nuri va antago- nistik mikroblar tasirida nobud boladi. Lekin ayrim mikroblar tuproqda bir necha oylab, yillab saqlanishi mumkin. Òuproq orqali gazli gangrena, qoqshol, kuydirgi, botulizm va boshqa mikroblar tarqaladi. Suv mikroflorasi Ochiq suv havzalari kopgina mikroblarning yashashi uchun tabiiy sharoit bolib hisoblanadi. Suvga ular tuproq, odam va hayvon chiqindilari, tashlandiqlar, chiqindi suvlar orqali tushadi. Suvda ichak tayoqchasi, qorin tifi, vabo qozgatuvchilari uzoq vaqt saqlanadi va bolinib kopayadi. Aholiga yaqin joylashgan suv havzalari koproq ifloslanadi, chunki u yerga aholi chiqindilari, xojalik va sanoat suvlari tashlanadi. Shuning uchun bu suvning mikroflorasi turlicha boladi. Suv mikroflorasi suv havzalarini ifloslanish darajasiga, asosan, organik birikmalar bilan ifloslanganligiga bogliq. Suvda doimo ozini ozi tozalash jarayoni ketadi. Mikroblar quyosh nuri, kimyoviy moddalar, chokish, mikroorganizmlar ishlab chiqaradigan antibiotik moddalar, zamburuglar va suv osimliklari tasirida nobud boladi. Dengiz va okeanda ham mikroblar boladi, lekin kamroq miqdorda. Yerosti suv havzalaridagi, buloqdagi suvlar ancha toza suv hisoblanadi. Suv orqali yuqumli kasalliklarni keltirib chiqaruvchi qozgatuvchilardan ichak infeksiya qozgatuvchilari, poliomiyelit, tulyaremiya, lentospiroz, vabo qozgatuvchilari bolib, epidemiyani keltirib chiqarishi mumkin. Suvning ifloslanishi bartaraf etilishi bilan yuqumli kasalliklar kelib chiqishi oldi olinadi. Havo mikroflorasi Havoda mikroblarning rivojlanishi uchun oziq muhitlar bolmaydi. Undan tashqari, quyosh radiatsiyasi va haroratning ozgarishi va boshqa omillar mikroblarga oldiruvchan tasir korsatadi. Shunga qaramasdan havoda malum miqdorda mikroblar uchraydi, ular tuproqning yuza qismidan chang bilan havoga kotariladi. Havodagi mikroblar oz- garuvchandir. Sanoat shaharlarida havo iflos, qishloqlarda esa tozaroq, ormon, dengiz, toglarda havo toza boladi. Mikroblar havoning yuqori qismida pastki qismiga qaraganda kamroq boladi, qishda esa yozga qaraganda kamroq boladi. Patogen mikroblar havoga bemorlar yotal- ganda, aksirganda, gaplashganda, shuningdek, ifloslangan tuproq va moddalardan tarqaladi. Bunga havo-tomchi yoli orqali tarqalish deyiladi. Masalan, bogma, griðp, qizamiq. Bunda havo changi orqali kokklar, sil, kuydirgi, sporali mikroorganizmlar tarqaladi. Bularning oldini olish uchun dokali niqob taqish tavsiya etiladi. 49 Inson organizmining mikroflorasi Inson organizmining normal mikroflorasi mikro va makro- organizmlarning ozaro tasiri natijasida evolutsiya jarayonida yuzaga keladi. Organizmning malum qismi va azolari uchun xarakterli mikroblar turining yigindisi biotsinozorganizmning normal hayot faoliyati uchun zarurdir. Biotsinozning buzilishi, uning uchun odatdan tashqari mikroorganizmlarning hosil bolishi, ayniqsa, kasallik qozgatuvchisi mikroblarning yuzaga kelishi, yuqumli kasalliklarni keltirib chiqaradi. Homiladorlik vaqtida homila steril boladi. Bola tugilayotgan vaqtda onaning tugilish kanali orqali unga mikroorganizmlar tushadi. Shuningdek, ona terisidan, doyalar qolidan, atrofdagi buyumlar va havodan bola organizmiga mikroorganizmlar tushadi. Inson hayoti davomida mikroflora xarakteri ozgarib turadi. Lekin malum azolar uchun doimiy xarakterlidir. Odamning ichki azolari, odatda, sterildir (qon, miya, jigar va b.). Òashqi muhit bilan aloqada bolgan azo va toqimalar ozida mikroorganizmlar saqlaydi. Òeri mikroflorasi yetarlicha doimiydir. U stafilokokk, streptokokk, difteriodlar, spora hosil qiluvchi bakteriyalar xamirturushga xos zamburuglar bilan namoyon boladi. Ular uchun teri va yog bezlari ajratadigan moddalar olik hujayralar va parchalanish mahsulotlari ozuqa hisoblanadi. Mikroorganizmlar toza teriga tushganda, terida doimo yashaydigan bakteriyalar va turli xil bezlar ishlab chiqaradigan mahsu- lotlar tasirida, odatda, nobud boladi. Òerining ifloslanishi patogen mikroorganizmlarning rivojlanishiga yordam beradi. Shuning uchun terini doimo toza tutish katta aha- miyatga ega. Ogiz boshligi mikroflorasi kop va turli-tumandir. Harorat, namlik, oziq moddalarning doimiyligi, solakning ishqory reaksiya- liligi mikroorganizmlar rivojlanishi uchun qulay sharoit hisoblanadi. Òurli xil kokklar, sut kislota bakteriyalari, difteriodlar, spiroxetlar, aktinomitsetlar xamirturushga xos zamburuglar va urchuqsimon tayoqchalar ustunlik qiladi. Ogiz boshligi mikroorganizmlari tish kariyesi, stomatit, yumshoq toqimaning yalliglanishi kelib chiqishiga sabab boladi. Yalliglanish jarayonining birinchi bosqichida streptokokklar, bak- teriodlar, aktinomitsetlar ustunlik qiladi. Kariyes yuzaga kelishi natijasida unga yiring hosil qiluvchi bakteriyalar, protey, klostridlar va boshqalar qoshiladi. Bu kasalliklarni oldini olishda ogiz boshligi gigiyenasi katta ahamiyatga ega. 50 Meda va ichak yoli mikroflorasi. Meda suyuqligining kislotaliligi ortganida, meda mikroflorasi kamayadi. Ingichka ichakda ishqoriy sharoit bolishiga qaramasdan mikroorganizmlar kamdir. Chunki ularga fermentlar yomon tasir korsatadi. Mikroorganizmlarning bolinib kopayishi uchun yogon ichak qulay sharoit hisoblanadi. Inson hayoti davomida yogon ichak mikroflorasi ozgarib turadi: emizikli bolalarda sut kislota hosil qiladigan bakteriyalar, kattalarda bakteriodlar, bifidum-bakte- riyalar, ichak tayoqchalari, najas streptokokklar va boshqalar uchraydi. Najasda turli xil mikroorganizmlarni uchratishimiz mumkin. «Nafas yoli mikroflorasi» odam nafas olayotgan havo bilan birga turli xil va kop mikroorganizmlarni qabul qiladi. Ularning kopchiligi burun shilligida ushlanib qoladi yoki yuqori nafas yoli olik epiteliyalari bilan tashqariga chiqariladi. Burun, halqumda, yutqinda, asosan, stafilokokk, streptokokk, defteriodlar va boshqalar uchraydi. Organizm boshashishi (muzlashi, jarohat olishi, oriqlab ketishi) natijasida, yuqori nafas yolida doimo yashovchi mikroorganizmlar turli xil kasalliklarni keltirib chiqarishi mumkin. Bunda nafas yolining pastki qismlarini (bronxitlar, opkaning yalliglanishi) shikastlaydi. Koz shilliq qavatining mikroflorasi. Koz mikroflorasi kamdir, chunki yosh tarkibidagi lizotsin moddasi ularga oldiruvchan tasir korsatadi. Shunga qaramasdan, stafilokokklar va difteroidlarni uchra- tishimiz mumkin. Qin mikroflorasi. Ayol kishining hayoti davomida qin mikroflorasi ozgaradi. Qizlarda kokk florasi uchrasa, ayollarda Dederleyn tayoq- chalari kop boladi. Odamning normal mikroflorasiuning sogligini saqlashda muhim sharoit bolib hisoblanadi. Organizm sistemasidagi mikrob biotsinoz buzilishi, patologik jarayonning kelib chiqishi, organizmning himoya funksiyasini pasayishi, disbakterioz kelib chiqishiga sabab boladi. 1. Òuproq, suv, havo mikroflorasi nima bilan xarakterlanadi? 2. Odam tanasidagi normal mikrofloraning roli qanday? 6-bob. OZIQA MUHIÒLAR VA MIKROBIOLOGIK ÒEKSHIRISHLAR Mikrobiologik tekshirish deb, tekshirish materiallarini oziqa muhitiga ekib, mikroorganizmlarning sof kulturasini ajratib olish va ularning xossalarini organishga aytiladi. Sof kultura deb, bir turdagi mikroorganizmlardan iborat kulturaga aytiladi. Bu yuqumli kasalliklarga ? Nazorat uchun savollar 51 tashxis qoyishda, mikroblarning turi va tiðini aniqlashda, tekshirish ishlarida, mikroblarning hayot davomida ishlab chiqaradigan modda- larini (toksinlar, antibiotiklar, vaksina va b.) olishda kerak. Mikroorganizmlarni ostirishdakultivatsiyalashda, yani suniy sharoitda ostirish (alohida substraktlar, oziqa muhitlar) zarur. Orga- nizmlar muhitida mikroorganizmlar hayotdagi barcha jarayonlarni (oziqlanadi, nafas oladi, bolinib kopayadi va b.) bajaradi, shuning uchun ularni kultivatsiyalovchi muhitlar deb ham ataladi. Oziqa muhitlar Oziqa muhitlar mikrobiologik ishning asosi hisoblanadi va ularning sifati barcha tekshirish natijalari bilan bogliq. Oziqa muhitlar mikroblarning hayoti uchun eng yaxshi sharoit bolishi lozim. Oziqa muhitlariga qoyiladigan talablar Oziqa muhitlar quyidagi talablarga javob berishi lozim: 1. Òoyimli bolishi kerak, yani mikroorganizm energiyasini yetarlicha oziqlanishini qoniqtiradigan bolishi lozim. Bularga orgonagenlar, mineral (noorganik) moddalar, mikroelementlar kiradi. Mineral moddalar mikroelementlar tuzilishini va fermentlarni faollashti- ribgina qolmay, muhitning fizikaviy va kimyoviy xossalarini (osmatik bosimi, pH va b.) aniqlab beradi. Ayrim mikroorganizmlarni ostirishda oziqa muhitiga ostirish omillari vitaminlar, ayrim aminokislotalar va boshqalar qoshiladi, chunki hujayra ularni sintezlay olmaydi. Diqqat! Mikroorganizmlar tirik mavjudotga oxshash kop miqdorda suvga muhtoj boladi. 2. Vodorod ion (pH) korsatkichi optimal darajada bolishi lozim. Muhitning optimal reaksiyasi hujayra qobigining otkazuvchanligiga va mikroorganizmlarning oziqa muhitlarni hazm qilishiga tasir korsatishi mumkin. Kopgina patogen bakteriyalar uchun kuchsiz ishqoriy sharoit optimaldir (7,27,4). Masalan, vabo vibrioni uchun optimal ishqoriy sharoit (pHi 8,59,0) va sil qozgatuvchisi uchun kuchsiz kislotali (pHi 6,26,8) sharoit optimal muhit bolib hisoblanadi. 3. Mikrob hujayrasi uchun oziqa muhiti izotonik bolishi, yani muhitni osmatik bosimi hujayra ichidagi bosim bilan bir xil bolishi lozim. Kopgina mikroorganizmlar uchun 0,5 % li natriy xlor eritmasi optimal muhiti mos keladi. 4. Steril bolishi lozim, begona mikroorganizmlar bolishi orga- nilayotgan mikroblar osishiga, uning xossalarini organishga tosqinlik qiladi. 52 5. Zich oziqa muhitlar nam bolishi, mikroorganizmlar uchun optimal konsistensiyaga ega bolishi kerak. 6. Oksidlanish-qaytarilish potensialiga ega bolish lozim, yani oladigan va beradigan elektron moddalar nisbatiga ega bolishi kerak. pH indeksida potensial oziqa muhit kislorod bilan toyinganini korsatadi. Bir mikroorganizmlarga yuqori potensialboshqalari uchun past potensial kerak. Masalan, anaeroblar: RH 2 indeksi 5 tadan kop bolmaganda, aeroblar RH 2 indeksi 10 tadan past bolmaganda bolinib kopayadi, kopgina muhitlarning oksidlanish potensiali aerob va fakultativ anaeroblarga qoyilgan talablarni qoniqtiradi. 7. Kulturaning osganini, boshqa mikroorganizmlar tasirida ifloslanganligini aniqlash uchun oziqa muhitlar tiniq bolishi lozim. Oziqa muhitlarining tasnifi Òurli xil mikroorganizmda oziqa muhitlar va muhitlarning xossasiga talab bir xil emas. Òekshirish maqsadiga qarab u yoki bu oziqa muhitlar tanlanadi. Hozirgi vaqtda xilma-xil oziqa muhitlar taklif qilingan tasnif asosi qilib quyidagi xossalari olingan: 1. Òayyorlanishga kora, oziqa muhitlar tabiiy va suniylarga bolinadi. Òabiiy oziqa muhit osimlik va hayvon mahsulotlaridan tayyorlanadi. Hozirgi vaqtda qimmatli mahsulotlar (gosht va b.) ornini bosuvchi: suyak va baliq unlari, oziq-ovqat achitqisi, quyilgan qon va boshqalar oziq-ovqat hisoblanmaydiganlar bilan almashtirish yolga qoyilgan. Shunga qaramasdan, tabiiy mahsulotlardan tayyorlanadigan oziqa muhitlar tarkibi juda murakkab va ishlatilayotgan xomashyoga qarab ozgaradi. Bu muhitlardan keng kolamda foydalaniladi. Ular kimyoviy toza organik va anorganik birikmalardan tayyorlanadi. Suniy muhit ikki marta distillangan suvda suyultirilgan va aniq korsatilgan konsentratsiyada olinadi. Bu muhitlarning ahamiyatli tomoni shundaki, ularning tarkibi doimo saqlanadi (ularga aniq, qancha va qanday moddalar kiradi), shuning uchun bu muhitlar oson qayta ishlab chiqariladi. 2. Zichlik darajasi (konsistensiyasi)ga kora suyuq, zich va yarim- suyuq turlarga bolinadi. Zich va yarimsuyuq oziqa muhitlardan tayyorlanadi. Suyuq oziqa muhitlarga agar-agar yoki jelatin qoshilsa, zich va yarimsuyuq muhit hosil boladi. Agar-agar polisaxarid modda, dengiz suv otlaridan olinadi. U mikroorganizmlar uchun oziqa bolib hisoblanmaydi va faqat muhitni zichlashtirishda foydalaniladi. 80100°Ñ haroratda eriydi. 4045°Ñ haroratda qotadi. Jelatina hayvon oqsili, 2530°Ñ jelatinali muhitlarda eriydi. Shu- ning uchun ularda kulturalar xona haroratida ostiriladi. pH 6,0 dan 53 past va 7,0 dan yuqori bolganda, muhitlarning zichligi kamayadi va ular yomon soviydi. Ayrim mikroorganizmlar jelatinadan oziqlanish moddasi sifatida foydalaniladiular osganda muhit suyuladi. Bundan tashqari, zich muhit sifatida qonning ivigan zardobi, ivitilgan tuxum, kartoshkali muhitlar qollaniladi. 1. Òarkibiga kora, muhitlar oddiy va murakkab muhitlarga bolinadi. Ularga gosht-peptonli shorva (GPSh), gosht-peptonli agar (GPA), Xottinger agari va shorvasi, peptonli suv va oziqali jelatina kiradi. Murakkab muhitlar tayyorlash uchun oddiy oziqa muhitlariga qon, zardob, uglevodlar va mikroorganizmlarning bolinib kopayishi uchun zarur bolgan moddalar qoshiladi. 2. Qollanilishiga kora: a) asosiy oziqa muhitlari kopgina patogen mikroorganizmlarni ostirish uchun qollaniladi. Bularga GPA, GPSh, Xottinger agari va shorvasi, peptonli suv kiradi; b) maxsus oziqa muhitlari oddiy oziqa muhitlarda osmaydigan mikroorganizmlarni ostirish va ajratib olish uchun qollaniladi. Masalan, streptokokklarni ostirish uchun oziq muhitlarga shakar, pnevmokokk va meningokokklar uchun qon zardobi, kokyotal qozgatuvchisi uchun qon qoshiladi; d) elektiv (tanlanib olingan) muhitlar malum turdagi mikroor- ganizmlarni ostirish uchun ishlatiladi. Bu muhit mikroorganizmlarni osishiga tosqinlik qiladigan muhitlardir. Masalan, ot suyuqligi qoshilgan muhit ichak tayoqchasini osishiga tosqinlik qilib, qorin tifi qozgatuvchisini osishiga sharoit yaratadi. Oziqa muhitlari malum antibiotiklar, tuzlar erishi yoki pH ning ozgarishi natijasida elektiv muhitga aylanadi. Suyuq elektiv muhitlarni boyituvchi muhitlar deb ham ataladi. Masalan, pH 8,0 teng peptogen suv, pH shunday muhitlarda vabo vibrioni bolinib kopayadi, boshqa mikroorganizmlar osmaydi; e) differensial-diagnostik muhitlar deb, bir turdagi mikroblar boshqa turdagi mikroblardan fermentativ faolligiga kora farqlovchi muhitlarga aytiladi. Masalan, uglevodli va indikatorli Gissa muhitlari uglevodni parchalovchi mikroorganizmlar osganda, muhitning rangi ozgaradi; f) konservatsiyalovchi muhitlarbirlamchi ekish va tekshirish materialini laboratoriyaga jonatish uchun qollaniladigan muhit- lardir. Bu muhitlar patogen mikroorganizmlarni olishdan saqlaydi, saprofitlar esa nobud boladi. Masalan, glitserinli aralashmadan qator ichak bakteriyalarini aniqlashda, natijasini tekshirishda foydala- niladi. 54 1. Oziqa muhitlar qanday talablarni bajarishi lozim? 2. Òayyorlanishiga kora, oziqa muhitlar qanday tasniflanadi? 3. Muhitlarni zichlashtirishda nimadan foydalaniladi? 4. Oddiy oziqa muhitlarga nimalar kiradi va ular qanday maqsadda qollaniladi? 5. Qanday muhitlar murakkab muhitlar deyiladi, buning asosida nima yotadi? 6. Qanday muhitlarda mikroblarning fermentativ faolligi organiladi? 7. Bir turdagi mikroblarni osishi va ikkinchi turdagi mikroblarning osishiga tosqinlik qiladigan muhitlarga qanday muhitlar deyiladi? Muhitlarni tayyorlash Oziqa muhitlarni tayyorlash quyidagi bosqichlarda olib boriladi: 1. Muhitni pishirish. 2. pH korsatkichini optimal darajaga tenglashtirish. 3. Yoritish. 4. Filtrlash. 5. Quyish (qadoqlash). 6. Strelizatsiya qilish. 7. Nazorat qilish. Pishirish Oziqa muhitlarni elektr yoki gazli plitalarda, suv hammomida, avtoklavda yoki bugda isitiladigan qozonlarda pishiriladi. Oziqa muhitlarda pH ini aniqlash Oziqa muhitlarda pH ikki usulda aniqlanadi: 1. Indikator qogozi yordamida. Òaxminan aniqlanadi. 2. pH patensiometr (shisha elektrodlar) yordamida pH-metrning aniqlash tartibi. Vodorod ion konsentratsiyasini (pH) aniqlashda intek, pH, (JSE) DO meter asbobidan foydalanamiz. Asbobni ishlatish uchun maxsus berilgan pH4, pH7, pH10 eritmalaridan foydalaniladi. Asbob tok manbaiga ulanadi, elektrodlar CH 2 ATC tomonga ulanadi, chunki pH ni aniqlashda «B» kanalidan foydalaniladi. POWER bosiladi, channel «B»ga togrilanadi, «B» kanal pH da bolishi kerak. Elektrod har bir buffer eritmaga, yani pH4, pH7, pH10 ga solinganda, elektrod distillangan suv bilan 2 marta yuviladi va salfetkada artilishi shart. ? Nazorat uchun savollar 55 1. pH4 li idishga elektrod tushiriladi: a) POWER bosiladi. b) RESET bosiladi. d) READY MEASURE knopkalari bosiladi, ekran kuzatiladi, oxirgi bosqichigacha kuzatish zarur, ekranda pH4 ni korsatsa, yani POWER bosilsa, ekran ochadi. Songra elektrodni distillangan suvda yuvib (2 marta), salfetkada artiladi. 2. Shu tartibda pH7, pH10 lar ham kuzatiladi. 3. Hamma pH lar normal holatda ekanligiga ishonch hosil qilin- gach, tajribamizdagi eritmaning pH ini aniqlashimiz lozim. Yoritish Agar oziqa muhit pishirilayotganda xiralashsa yoki loyqalansa, u yoritiladi. Buning uchun oziqa muhit 50°C gacha qizdiriladi va tuxum oqiga 2 miqdor suv aralashtirilib qoshiladi va aralashtirilib qaynatiladi. Òuxum oqi ivib, muhitdagi erimay, aralashmay muallaq yurgan zarrachalarni chokmaga olib tushadi. Bunda tuxum oqi orniga qon zardobidan ham foydalanish mumkin (2030 ml zardob 1 ml muhitga). Filtrlash Suyuq muhitlar va eritilgan jelatinali muhitlar qogoz yoki ma- terial filtr orqali filtrlanadi. Zich oziqa muhitlarini filtrlash qiyinroq, chunki ular tez zichlanadi. Asosan, ular paxta, doka filtr orqali filtrlanadi. Issiq avtoklav, isitilgan voronka va muhit issiqligida qogoz va matoli filtrlardan ham foydalanish mumkin. Filtrlashni choktirish usuli bilan almashtirishimiz mumkin. Buning uchun muhitni baland silindrga qoyib, avtoklavda eritiladi. Muhit asta-sekin sovishi natijasida erimagan, muallaq yurgan zarra- chalar silindr tagiga chokadi. Ertasi kuni chokma qismini pichoq bilan olib tashlaymiz. Òiniq qolgan qismini alohida idishga olamiz va eritib idishlarga quyamiz. Quyish Muhitlar probirkalarga 35 ml yoki flakon, kolba, butilkalarga 10 ml hajmda quyiladi, tolatib yuborish mumkin emas. Chunki sterilizatsiya vaqtida qopqogi namlanishi mumkin, bunda muhit sterilligini yoqotadi. 100°C dan yuqori haroratda sterilizatsiya qilinadigan muhitlarni quruq, toza idishlarga quyish mumkin. Pastroq haroratda sterilizatsiya qilinadigan muhitlarni, albatta, steril idishlarga quyish lozim. 56 Muhitlarni voronka, uchi Mor qisqichi bilan qisilgan rezina naycha orqali yoki olchamli buretka, dozator, shpris-piðetka va boshqalar yordamida quyiladi. Idishlar paxta-doka qopqoqlar bilan yopilib, ustidan qogoz qalpoqcha bilan yopiladi. Sterilizatsiya Oziqa muhitlarni sterilizatsiya qilish ularning tarkibiga bogliq. Ularni sterilizatsiya qilish tartibi 4-jadvalda korsatilgan. 4-jadval Oziqa muhitlarni sterilizatsiya qilish a q i z O ti h u m a z il ir e t S t a y is i b it r a t i m o n g n i n b o b s A t a r o r a H t q a V a q i z o y i d d O it i h u m a q i z o b a k k a r u M ir a lt i h u m . 1 ,i lt u s ,i l d o v e l g U il a n it a l e j . 2 il b o d r a z ( il li s q O h c i z il m u x u t i k o y ) r a lt i h u m . 3 q u y u s il li s q O r a lt i h u m v a l k o t v A g n i n v a l k o t v A m a k h a m i g o q p o q y n a d s a m li p o y o i k x o K i b o b s a x o K i h c v u ti v I i b o b s a i m o m m a h v u S r o t a v it k a n i i k o y i b o b s a 1 ( C ° 0 2 1 ) m t a g u b ( C ° 0 0 1 ) i m i q o C ° 5 8 0 8 C ° 5 9 C ° 8 5 a q i q a d 0 2 a q i q a d 0 6 0 3 3 - o b - b il o b ( n u k a z il ir e t s b il t , a y is n u k 3 n a d t a o s 1 ) t a o s 1 t a o s 1 ( n u k 4 3 t e k - a m t e k ) Òayyorlangan muhitlarning sterilligini nazorat qilish: A. Steril muhitlar termostatda ikki kunga qoldiriladi, vaqt otgach, olib tekshiriladi. Agar muhitimizda mikrob kulturasi osmagan bolsa, oziqa muhit steril hisoblanadi. B. Kimyoviy nazorat. Oziqa muhitining pHi, penton, azot xloridlari aniqlanadi, ularning miqdori retseptdagi korsatkichlarga togri kelishi lozim. D. Biologik nazorat tayyorlangan muhitlarga tanlangan maxsus mikrob kulturasi ekiladi. Agar mikrob kulturasi ossa, demak, oziqa muhit mikroblarning osishi uchun layoqatli hisoblanadi. 57 1. Oziqa muhitlarning pH qanday aniqlanadi? 2. Kopgina patogen mikroblar uchun oziqa muhitning pH qanday bolishi lozim? 3. Agarli muhitlar qanday haroratda eirydi va zichlanadi? 4. Oksidli va uglevodli muhitlar quyiladigan laboratoriya idishlari qanday tayyorlangan bolishi lozim? Ekish usullari Ekish bakteriologik tekshirishning asosiy bosqichi hisoblanadi. Òekshirish materiali, maqsad va oziqa turiga qarab turli xil usullarda ekiladi. Ularning maqsadi qoshimcha, begona mikroblar ekilishidan himoya qilishdan iborat. Shuning uchun havoni ortiqcha harakatga keltirmasdan tez ishlash lozim boladi. Ekish vaqtida gaplashishga ruxsat etilmaydi. Oziqa muhitga ekishni boksda bajarish maqsadga muvofiqdir. Diqqat! Zararli material bilan ishlayotgan vaqtda shaxsiy xavf- sizlik qoidalariga rioya qilishni unutmang! Probirkadan probirkaga ekish: osgan mikrob kulturalar probirka va oziqa muhitli probirka biroz egilgan holda chap qolning katta va korsatkich barmoqlari orasida ushlanadi, probirkalar uchi bir tekis- likda turishi kerak. Mikrob kulturali probirka oziga yaqin tomonda ushlanadi. Bakteriologik qovuzloqni ong qolda ruchka ushlangandek ushlanadi va avval tik, song gorizontal holda choglantiriladi. Ong qolning kaft cheti va kichik barmoq bilan probirkalar qopqogi bir vaqtning ozida ochiladi. Probirkalar qopqogi siltanib tortilmasdan, burab asta ochilishi lozim. Ularning ogzi alangadan otkaziladi, choglantirilgan bakteriologik qovuzloq alanga ustida probirka ichiga kiritiladi, devorida sovitiladi, tekshirilayotgan materialdan ozgina olib, asta-sekin oziqa muhitli probirkaga solib ekiladi. Òekshirish materiali suyuq oziqa muhitiga probirka devoriga surtilib, muhit bilan yuvilib, chayqatib ekiladi. Suyuq oziqa muhiti tampon yordamida ekilganda, tampon oziqa muhitga choktiriladi va 35 sek chayqatiladi. Zich oziqa muhit ekilayotgan tamponning hamma tomoni aylantirilib oziqa muhit yuzasiga surtiladi, ekib bolingach tampon laboratoriyaga olib kelingan probirkaga solinadi va avtoklavda zararsizlantiriladi. ? Nazorat uchun savollar 58 Diqqat! Muhit tokilib ketmasligi yoki probirka qopqogini namlamasligi lozim. Qiyshiq agarga ekish. Choglantirilgan bakteriologik qovuzloq yordamida olingan material qiyshiq agarning kondensatsion suyuqligiga aralashtiriladi va oziqa muhit yuzasiga shtrixsimon holda yuqoriga qarab ekiladi. Òik agarga tekshirish materiali bakteriologik qovuzloq yordamida (ukol) sanchib ekiladi. Song alangadan otkazilib yopiladi va bakte- riologik qovuzloq choglantiriladi. Suyuq materialni steril piðetka yordamida ekish mumkin. Ekib bolgach, piðetkani dezinfeksiyalovchi moddaga solib qoyiladi. Probirkadagi muhitga Petri kosachasidagi kulturadan olib ekish Petri kosachasidagi osgan kultura kosachasining orqa tomonidan qalamcha yordamida belgilanib olinadi va organiladi, songra kosachaning qopqogi yuqoriga qilinib oldinga qoyiladi. Bakteriologik qovuzloq avval tik, keyin gorizontal holda choglantirilib, mikrob kulturasini osmagan yerga tekkizilib sovitiladi, song bakteriologik qovuzloq yordamida belgilangan shubhali koloniyaning yarmi olinadi va kosachaning qopqogi yopilib, song chap muhitli probirkaga yuqorida aytilgandek ekiladi. Petri kosachasi tonkarib qoyiladi, qovuzloq choglantiriladi. Petri kosachasidan agarga ekish. Shpatel bilan ekish Shpatel bir uchi uchburchak shishali yoki metall naycha. Chap qolning bosh va korsatkich barmogi yordamida Petri kosachasining qopqogi ochiladi. Òekshirish materiali olingan shpatel kosacha ichiga kiritiladi va shpatelda tekshirish materiali qolmaguncha aylanma harakat qilib ekiladi. Song shpatel kosacha ichidan chiqariladi va kosacha qopqogi bekitiladi. Shisha shpatel dezinfeksiyalovchi moddaga solinadi, metall shpatel esa spirt lampasi alangasida choglantiriladi. Qovuzloqda ekish Oz miqdorda ekiladigan material (ayrim hollarda ekiladigan ma- terial steril izotonik eritmada yoki shorvada aralashtiriladi) bakte- riologik qovuzloq yordamida Petri kosachadagi agarning chetiga surtib olinadi va qovuzloq uzilib kosachaning u devoridan bu devoriga qarab shtrix holda ekiladi, ortiqchasi alangada kuydiriladi. 59 Sektorlab ekish Petri kosachasi orqa tomondan qalamcha bilan sektorlarga bolinadi. Bakteriologik qovuzloqqa u chiziqdan bu chiziqqa qarab ekiladi. Ekilayotgan vaqtda chizigidan otib ketmaslikka etibor berish lozim. Òampon yordamida ekish tekshirilayotgan material olingan tampon, ogzi biroz ochilgan Petri kosachasiga aylanma harakatda oziqa muhit yuzasiga surtiladi. Gazon usulida ekish 1 ml (20 tomchi) suyuq kultura (agar zich muhitidagi kultura bolsa, uni steril fiziologik eritmada yoki shorvada suyultirib olinadi) Petri kosachadagi agarning yuzasiga quyilib, hamma qismiga yoyiladi. Petri kosachasi biroz qiyshaytirilib, piðetka yordamida ortiqchasi olib, dezinfeksiyalovchi moddaga tashlanadi. Piðetkani ham dezinfeksiyalovchi moddaga tashlanadi. Òekshiri- layotgan suyuq kultura yoki suyultirilgan kultura steril Petri kosachasiga quyiladi va kosachaga yoyiladi. Uning ustiga eritilgan va 45°C gacha sovitilgan 1520 ml agar quyiladi. Yaxshilab aralashtirish uchun kosachani sekin-asta chayqatib aylantiriladi. Kosachadagi agar qotguncha stol ustida qoldiriladi. Ekilgan kosachalarning orqa tomoniga yozilib, termostatga 37°C da tonkarib qoyiladi. 1. Oziqa muhitga ekilayotganda aseptik sharoit kerakmi? Buni isbotlab bering. 2. Òekshirilayotgan materialni ekib bolgach, ish stoli qanday zarar- sizlantiriladi? Mikroorganizmlar sof kulturasini ajratib olish usullari Suyuq va zich oziqa muhitida osgan bir turdagi mikroorganizmlar toplamiga sof kultura deyiladi. Òekshirilayotgan materialning xossasi va tekshirish maqsadiga kora, sof kulturani qator usullarda ajratib olish muhitida ostirilgan koloniyadan foydalaniladi. Koloniya deb, bir dona mikrobning bolinib kopayishi natijasida hosil bolgan mikroblar toplamiga aytiladi. Sof kulturani ajratib olish bosqichlari: 1-kun alohida koloniyalarni ajratib olinadi. Òekshirish materiali qovuzloq, piðetka, shisha tayoqcha yordamida Petri kosachasidagi agar ustiga tomiziladi. Shpatel yordamida tekshirilayotgan material ekiladi, song shpatelni choglantirmasdan 2 va 3-kosadagi agarlarga ? Nazorat uchun savollar 60 ekiladi. Bunday ekilganda birinchi kosachaga koproq, ikkinchisiga kamroq, uchinchi kosachaga undan ham kam tekshirilayotgan mate- rial tushadi. Bakteriologik qovuzloq yordamida ham alohida koloniyani ajratib olish mumkin. Buning uchun tekshirish materiali fiziologik eritmada yoki shorva yordamida eritiladi, song ketma-ket 3 ta agarga choglantirmasdan ekiladi. Bu usul Drigalskiy usuli deb ataladi. Ekilgan kosacha termostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kun kosachalardagi mikrobning osishi organiladi. 1-kosa- chada mikroblar qoshilib osadi. Shuning uchun koloniyani alohida ajratib olishning iloji bolmaydi, 2 va 3-kosachalarda alohida koloniyalar hosil boladi. Bu koloniyalarni oddiy kozda, lupa, mikroskopning kichik obyektivida, ayrim hollarda sterioskopik mikroskop yordamida organiladi. Kerakli koloniyani kosachaning orqa tomonidan belgila- nadi va sof kulturasini ajratib olib, qiyshiq agarga olib ekiladi. Ekkanimizni termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Diqqat! Qiyshiq agarga faqat alohida koloniyadan olib ekish lozim. 3-kun. Qiyshiq agarda osgan kulturani organiladi. Surtma tayyorlanadi, boyalib mikroskop ostida organiladi, agar bir turdagi mikroorganizmlar korinsa, sof kultura ekilganiga ishonch hosil qilinadi va xossalari organiladi. Malum manbalardan ajratib olingan va organilgan kulturaga shtamm deyiladi. Qondan (gemokultura) sof kultura ajratib olish uchun u suyuq muhitga, yani steril sharoitda olingan 1015 ml.li suyuq muhitga ekiladi. Qonda mikroblar kam bolgani uchun shunday qilinadi. Qonni 1:10 qilib suyuq muhitga ekiladi. Shunday qilib, qonni suyultirishga erishamiz (suyultirilmagan qon mikroorganizmlarga oldiruvchi tasir korsatadi). Kolbadagi ekilgan muhitimizni termostatda qoldiramiz. Bir kundan song kolbada osgan kulturadan olib, alohida koloniya hosil qilish uchun Petri kosachadagi agarga ekamiz. Kerak bolgan hollarda 23 kundan keyin qaytadan olib ekiladi. Siydik, oshqozon yuvindisi va boshqa suyuqliklardan sof kultura ajratib olish uchun ular aseptik sharoitda sentrifuga qilinadi. Sof kulturani ajratib olishning qolgan ishlari yuqorida bayon etilgandek olib boriladi. Sof kulturani ajratib olish uchun elektiv muhitlar qollaniladi. Uni ajratib olishda biologik usuldan ham foydalaniladi. Masalan, spora hosil qiluvchi bakteriyalarni ajratib olishda tekshirilayotgan material 80°C haroratda 10 daqiqa qizdiriladi, bunda vegetativ mikroorga- nizmlar nobud boladi. Kislota va ishqorga chidamli sil qozgatuvchisi- 61 ning sof kulturasini ajratib olish uchun mana shu moddalar yordamida qoshimcha mikroorganizmdan ozod bolinadi. Pnevmokokk va toun yotgan material yuboriladi. Ularning organizmida bu qozgatuvchilar tezroq bolinib kopayadi. Ilmiy tekshirish ishlarida, asosan, genetik tekshirishlarda bir hujayradan kultura ajratib olinadi. Bunday kulturani klon deyiladi. Ularni olishda mikromaniðulator mikroskop olchamli asboblar (igna, piðetka) bilan taminlangan asbobdan foydalaniladi. Ushlagich yordamida, mikroskop nazoratida bu asbob osilgan tomchi preparatiga solinib, kerakli 1 dona hujayra ajratib olinadi va u oziqa muhitiga ekiladi. Ajratilgan kulturani organish Ajratib olingan mikrob kulturasini morfologiyasi, harakatchanligi, tinktorial xossasi, oziqa muhitlarda osishi (kultural xossasi), fermentativ faolligi va qator boshqa xossalarini organish shu mikrobning avlodi, turi, tiði va kichik tiðlarini aniqlashga yordam beradi. Bu mikroorganizmlarning identifikatsiyasi, yani farqlash deyi- ladi. Mikroorganizmlarni farqlash infeksiyaning kasallik diagnos- tikasida, infeksiya manbai hamda uning tarqalish yollari va qator boshqa ilmiy-amaliy tekshirishlarda katta yordam beradi. Kultural xossasi Barcha mikroorganizmlar oziqa muhitlarda turlicha osadi. Bu ularni farqlashda differensiyasida xizmat qiladi. Ayrimlari oddiy oziqa muhitlarida yaxshi osadi, boshqalari oziqa muhitga talabchan, faqat maxsus muhitlarda osadi. Mikroorganizmlar oziqa muhitida kop, ortacha yoki kam osishi mumkin. Pigment hosil qiluvchi mikroor- ganizm kulturalari turli xil rangda bolishi mumkin. Stafilokokk oq, sariq, tillarang, yashil tayoqchalar kok-yashil pigmentlarni hosil qiladi, faqat koloniyanigina emas, balki oziqa muhitning rangini ham ozgartiradi. Zich oziqa muhitida mikroorganizmlar ekilayotgan materialning miqdoriga qarab qoshilib ketgan yoki alohida koloniya hosil qilib osadi. Koloniyalar quyidagi xossalariga kora xarakterlanadi. Kattaligi millimetr qogoz yoki chizgich yordamida aniqlanadi. Ular yirik (45 mm va undan katta diametrga ega), ortacha 24 mm, kichik (12 mm) va nuqtasimon (1 mm kam) boladi. Formasiga (shakliga) kora, ikki xil boladi: S shaklli yumaloq, bortib chiqqan, chetlari tekis va R shaklli notekis, chetlari gadir- budur, yassi koloniyalar. Chetlari mikroskop ostida yoki lupa yordamida 62 aniqlanadi. Òekis, gadir-budur, toqilgan romolchaga oxshash, ildizsimon va boshqacha bolishi mumkin. Yuzasi oddiy koz yoki lupa yordamida aniqlanadi; silliq, burushgan, quruq, yaltiroq, jilosiz, gadir-budur boladi. Òiniqligi tiniq, xira boladi. Zichligi darajasi (konsistensiyasi) bakteriologik qovuzloq yordamida aniqlanadi; qaymoqsimon, sochiluvchan va shilliq choziluvchan boladi. Rangi pigment hosil qilishiga bogliq, oqish- sariq, tillarang (stafilokokk) va boshqa ranglarda bolishi mumkin. Suyuq oziqa muhitida mikroorganizmlar bir xilda loyqalanib, chokma donador, changga oxshash, paxtasimon yoki nozik, burushgan, qopol parda hosil qilib osadi. Harakatchan mikroorganizmlar yarimsuyuq muhitga sanchib ekilganda yoyiladi, osadi, harakatsizlari sanchib ekilgan yeridagina osadi, qolgan qismi tiniq qoladi. Mikroorganizmlarning kultural xossalari oddiy koz, lupa, mikroskopning kichik obyektivi yoki stereoskopik mikroskop ostida organiladi. Morfologik xossasi Mikroorganizmlarning morfologik xossasini organish ham mikroorganizmlar differensiatsiyasiga xizmat qiladi. Morfologiyasi boyalgan preparatlar organiladi. Hujayraning shakli, olchami, ularning preparatda joylanishi, spora, kapsula, xivchinlarining borligi aniqlanadi. Preparatlarni boyalganda, mikroblarning boyoqlarga nisbatan munosabati (tinktorial xossasi) boyoqlarni yaxshi yoki yomon qabul qilishi, differensial boyoqlarga qanday munosabatdaligi (Gram, Sil-Nilsen va boshqalarda qanday boyaladi) aniqlanadi. Mikroblarning harakatchanligini boyalmagan preparatlar yordamida aniqlash mumkin. Òiriklikka oid boyoqlar mikroorganizmlarning harakatchanligini yoki olik hujayralarni farqlash, ularning bolinib, kopayishini kuzatishga imkon beradi. Fermentativ faolligi Mikroorganizmlarning fermentativ faolligi boy va xilma-xildir. Mana shu xossasi boyicha mikroblarning turi va tiðigina emas, balki ularning biovariantlarini ham aniqlash mumkin. Mikroblarning asosiy fermentativ xossalarini va ularning sifatini aniqlash usullarini korib chiqaylik. Uglevodlarni parchalash (saxarolitik faolligi), yani shakar va kop atomli spirtlarni kislota yoki kislota va gazgacha parchalanish xossasini u yoki bu uglevod va indikator saqlovchi Gissa muhitlarida organiladi. Saxarolitik fermentlar tasirida uglevodlar kislotagacha parchalanadi, kislota tasirida indikator oz rangini ozgartiradi, natijada, muhit ham 63 oz rangini ozgartiradi. Mikroblar bu uglevodni parchalamasa, muhitning rangini ozgartirmaydi. Gazgacha parchalanganini suyuq muhitlarda suzgichlarda gaz toplanishi yoki zich muhitlarda pufak- chalar hosil bolganligidan bilishimiz mumkin. Suzgich bu bir uchi kavsharlangan shisha naycha bolib, u oziqa muhitiga sterilizatsiya qilishdan avval solib qoyiladi. Mikroblar saxarolitik faolligini Endo, EMS, Ploskiryov muhitlarida ham organish mumkin. Muhit tarkibidagi laktozani mikroorganizmlar kislotagacha parchalaydi, kislota tasirida rangsiz fuksin oz rangini ozgartiradi, natijada, muhit va koloniya ham oz rangini ozgartiradi. Laktozani parchalanmaydigan mikroorganizmlarning koloniyalari rangsiz boladi. Amilaza hosil qiladigan mikroorganizmlar kraxmalli muhitda osganda kraxmalni parchalaydi. Kraxmal parchalaganini aniqlash uchun unga bir necha tomchi Lyugol eritmasi tomizilganda, muhitning rangi ozgarmaydi. Kraxmal parchalanmasa Lyugol eritmasi tomizil- ganda kok rangga aylanadi. Proteolitik (yani oqsillarni, poliðeptidlarni va boshqalarni parchalash) xossasi. Mikroblarning bu xossasi jelatinali, sutli, zardobli, peptonli muhitlarda organiladi. Mikroblar jelatinali muhitda osgan jelatinani fermentlashi natijasida muhitni suyultiradi. Kazein- ni parchalovchi mikroblar sutni peptonlaydi, sut iviydi. Pepton par- chalanganda indol, vodorod sulfid, ammiak ajraladi. Ularning hosil bolishini indikator qogoz yordamida aniqlash mumkin. Malum eritmalar filtr qogozga shimdiriladi, quritiladi va 56 sm uzunlikda qirqiladi, mikrob kultura GPSh ga ekilgandan song qopqogiga ornatiladi (qistirib qoyiladi). Òermostatda ostirilgandan song natija oqiladi. Pepton amiakkacha parchalansa qogoz kok rangga kiradi. Vodorod sulfidgacha parchalanishi natijasida 20 % qorgoshin asetat eritmasi va natriy gidrokarbonat shimdirilgan qogoz qorgoshin sulfid hosil bolishi natijasida qora rangga kiradi, indol hosil bolishi bilan oksalat kislota shimdirilgan qogoz qizil rangga kiradi. Yuqorida aytilgan muhitlardan tashqari, mikroblarning turli xil substratlarga parchalanishini malum reaktivlar shimdirilgan qogoz disklari yordamida aniqlash mumkin. Zich yoki suyuq muhitga qogoz disklari solinadi, 37°C haroratda 3 soat termostatda saqlangandan song olib tekshiriladi. Qogoz diskning rangi ozgarganiga qarab ugle- vod, oqsil, aminokislota va boshqalarning parchalanganligini bilishi- miz mumkin. Gemolitik (eritrotsitlarni parchalash) xossasi qonli muhitlarda organiladi. Suyuq muhitlar bunda tiniq qoladi, zich oziqa muhitida koloniya atrofida tiniq rangsiz zona hosil boladi. Metgemoglobin hosil bolsa, koloniya atrofida yaxshilanuvchi soha hosil boladi. 64 7-bob. FAGLAR Faglar bakteriyalar va kopgina boshqa mikroorganizmlarning viruslari. Malum sharoitda ular oziga mos hujayrani eritish (lizislash) xossasiga ega. Faglarning tasiri tabiatda namoyon boladi va amaliyotda keng qollaniladi. Faglarning ochilishi va uni organish tarixi 1898-yili N.F. Gamaleya kuydirgi batsilla filtrati shu mikroor- ganizmlarni saqlovchi yangi kulturani lizisga uchratishini aniqladi. 1915-yili F. Òuort oq xira stafilokokk koloniyalari malum agent tasirida sekin-asta yoqolib ketishini aniqladi, yani stafilokokkni lizisga uchra- tuvchi agentlar bakteriologik filtrdan otishi va shu mikroorganizmlarning yangi kulturalarini lizisga uchratish xossasini saqlab qolishini aniqladi. Bakteriofaglarning ochilishi kanadalik olim D. Erell nomi bilan bogliq. D. Erell (1917) dizenteriya bilan kasallangan bemordan har kuni olingan najas filtratini, shu kasallik qozgatuvchisini saqlovchi yangi kulturaga qoshgan. Bu kultura termostatda qoldirilganda osgani kuzatiladi. Lekin bir kuni qaralganda, uni osmay qolgani, yani erib ketgani kuzatildi. Bu bemorning tuzalish davriga togri kelgan. D. Erell filtratning eritish xossasi qayta ekilgan sayin oshib bo- rishini isbotlaydi. Bu tirik agent bakteriologik filtrdan otib, hujayrani eritish xossasiga ega va ular viruslar degan xulosaga keladi. Hozirda uning bu fikrlari kopchlik olimlar tomonidan tan olingan. D. Erell bu virusni bakteriofag deb nomladi, bakteriyalarni yutuvchi (yunon. fagos yutuvchi), jarayonni esa bakteriofagiya deb atadi. Elektron mikroskopi yaratilgandan song fagning korpuskular tabiati tasdiqlandi va uning morfologiyasi organiladi. D. Erellning bu kashfiyoti, qator yuqumli kasalliklar oldini olish va davolashda qollanilishi shifokorlarning diqqatini oziga tortdi. Hozirgi vaqtda tibbiyot amaliyotida va turli xil biologik tekshirishlarda faglar keng qollanilmoqda. Faglar bilan bakteriologlar, virusologlar, bioxi- miklar, genetiklar, biofiziklar, molekular biologlar, eksperimental onkologlar, genni organuvchi mutaxassislar, injener biotexnologlar va boshqalar shugullanadilar. Faglarni organish hozir ham davom etmoqda, u biologiyaning qiziqarli bolimlaridan biridir. Faglarning xossalari Faglarning tabiati. Kopgina tadqiqotchilar faglar organizmlar bolib, barcha tirik organizm singari kopayish, oz nasl belgilarini, xossalarini nasldan naslga uzatish xossasiga ega va turli xil omillar 65 tasirida ozgarishi mumkin, deb hisoblaydilar. Ular faqat rivojlana- yotgan yosh hujayralargagina tasir korsatishi va parchalashi mumkin. Faglarning morfologiyasi. Kopgina faglar itbaliq yoki spermato- zoid shakliga ega bolib, bosh va dum qismidan iborat. Ichak tayoq- chasining Ò fagi toliq organilgan. Bosh qismi dum qismiga yoqacha yordamida birikadi. Dum qismi 22 buramadan iborat oqsil jild qoplangan. Dum qismining pastida bazal plastinkasi joylashgan, undan fibrillalar tarqaladi. Bazal plastinkasidan lizosim moddasi ajraladi. Ularning kattaligi, shakli, boshining kattaligi, dumining uzunligi, tuzilishi turli faglarda turlichadir. Masalan, dumi uzun, gilofi qisqaradigan, dumi uzun, dumi qisqarmaydigan, dumi kalta, dumsiz va iðsimon faglar mavjud. Faglarning kimyoviy tarkibi. Barcha viruslar singari faglar ham bitta kislota (kopgina DNK fagi uchraydi) va oqsildan tashkil topgan. Nuklein kislotasining molekulasi spiralsimon buramadan iborat va bosh qismida joylashgan. Fagning jildi kapsid oqsil tabiatli. Faglarning spetsifikligi (mosligi). Faglar mutlaq spetsifik xossaga ega. Malum turga spetsifik bolgan faglar tafovut etiladi, yani turdagi mikroorganizmlarga parazitlik qilish xossasiga ega bu faglar mikrob xojayini nomi bilan ataladi (stafilokokk, streptokokk, dizenteriya va b.), polivalent faglar ham bolib, ular bir avlodga kiruvchi bir qancha turlarni lizisga uchratishi mumkin. Faglarning sezgir hujayrasi bilan ozaro tasiri. Bu jarayon ketma- ket boradigan bir qancha bosqichlardan iborat. Jarayon bir necha daqiqadan 12 soatgacha davom etishi mumkin. Bu jarayonni ichak tayoqchasi Ò fagida korib chiqamiz. 1-bosqich adsorbsiya bosqichi. Faglar dumlari bilan ozlariga mos hujayra devoriga yopishadilar. Bitta hujayraga yuzlab faglar yopishishi mumkin (hujayrani lizisga uchratish uchun bitta fag ham yetarlidir). 2-bosqichi kirish bosqichi (inyeksiya). Fag tarkibidagi nuklein kislotasi hujayra ichiga kochishi, turlicha faglarda turlicha otadi. Ichak tayoqchasining Ò fagida bazal plastinkadagi fibrillalar yordamida hujayra devoriga yopishadi va asosi bilan hujayra devorini teshadi. Bazal plas- tinkadagi lizotsim moddasi sitoplazmatik membranani buzadi. Bunda jild qisqarib, fag tarkibidagi nuklein kislota hujayraga kiradi. Fagning oqsil jildi tashqarida qoladi. 3-bosqichi reproduksiya bosqichi. Hujayra ichida oqsil va yosh faglar hosil boladi. 4-bosqich yetilish bosqichi. Bu bosqichda yosh faglar yetilgan faglarga aylanib toplanadi. 66 5-bosqichi lizis bosqichi. Yetilgan faglar hujayrani lizisga uchratib tashqariga chiqadi. Hujayra devori bolinib ketadi va yuzlab faglar tashqi muhitga, tashqariga chiqadi. Bu jarayon hujayra ichidagi lizis deb nomlanadi. Bundan tashqari, hujayradan tashqaridagi lizis ham uchraydi, bunda hujayra devoriga kop miqdordagi spetsifik faglar adsorbsiyala- nadi. Ular hujayra devorida koplab teshiklar hosil qiladi va hujayra ichidagi mahsulotlar shu teshiklar orqali oqib ketadi. Shunday qilib, hujayradan tashqaridagi lizisda faglar miqdori ortmaydi, chunki ular bolinib kopaymaydi. Mikroorganizmlarga tasir qilish xarkateriga kora, virulent va motadil faglar farqlanadi. Virulent faglar oziga mos hujayrani zararlab, lizisga uchratadi va yangi hujayralarni lizisga uchratuvchi kop miqdorda yetilgan faglar yuzaga kelishiga sababchi boladi. Bunda suyuq muhit tiniqlashib, kop miqdorda faglarni saqlaydi va fagolizat lizis muhit hosil boladi. Zich oziqa muhitida esa qoshilib ketgan tiniq lizis qismlari yoki alohida steril lizis zonasi hosil boladi. Ularni negativ koloniyalar (pilakchalar) deyiladi. Bu negativ koloniyalar kattaligi va tuzilishiga kora farqlanadi. Motadil faglar hujayralarning hammasini lizisga uchratmaydi. Ularning ayrimlari hujayraning genetik apparatiga boglanib yashaydi va profaglar deb nomlanadi. Bunda birlashgan xromosomalar hosil boladi, bakteriya hujayrasi nobud bolmaydi. Hujayralar bolinib kopayganda, profaglar kam bolinib, yangi hujayralarga bir xilda taq- simlanadi. Mikrob hujayrasining motadil (profag) fag bilan simbiozda yashashi lizogeniya, profag saqlovchi kulturani lizogen deyiladi. Bu nom profaglar hujayra xromosomasini tashlab sitoplazmaga otib, virulent fagga aylanishi mumkinligini korsatadi. Virulent faglar hosil bolgan hujayralar nobud boladi. Motadil faglar mikrobiologik ishlab chiqarishga zarar yetkazishi mumkin. Masalan, agar vaksina, antibiotik va boshqa biologik moddalarning shtammlari lizogen bolib qolsa, motadil faglarning virulent faglarga aylanishi xavfi tugiladi, ishlab chiqarish shtamm- larining lizisga uchrashiga sababchi boladi. Motadil faglar mikroor- ganizmlar ozgaruvchanligiga tasir qiluvchi kuchli omil bolib hisoblanadi. Profaglar mikrob kulturasining xossasini ozgartirishi mumkin, yani toksin hosil qiluvchi qilib qoyishi mumkin. Faglarning tabiatda tarqalishi. Faglar oziga sezgir hujayra bor yerda, suvda, tuproqda, chiqindi suvlarda, odam va hayvon chiqin- disida va boshqalarda uchraydi. Barcha malum bakteriyalar oziga sezgir faglarning xojayini hisoblanadi. 67 Faglarning chidamliligi. Vegetativ shakldagi faglar xojayinlariga nisbatan fizik va kimyoviy omillarga ancha chidamli. Faglar 75°C haroratgacha qizdirishga, uzoq vaqt quritishga, pH 2,0 dan 8,5 gacha ancha chidamli. Ular antibiotiklarga, timol, xloroform va qator boshqa moddalarga sezuvchan emas. Shuning uchun moddalar faglarni ajratishga va saqlashda qollaniladi. Kislota va dezinfeksiyalovchi moddalar faglarga halokatli tasir korsatadi. 1. Fag haqida tushuncha bering. 2. Faglarning tasirini kim birinchi bolib kuzatgan? 3. Faglarni kim ochgan va ularning tabiatini organgan? 4. Faglarning tuzilishi va kimyoviy tarkibi qanday? 5. Faglarning spetsifik tasiri qanday namoyon boladi? 6. Virulent va motadil faglarning farqi nimada? Virulent faglarni organish usullari. Materialni tayyorlash Òashqi muhit obyektlaridan, odam va hayvon azo va chiqindilarini, mikroorganizm kulturasini va boshqalarni bakteriologik filtr yordamida otkazilib olingan filtrat tekshirish materiali bolib hisoblanadi. Òekshi- rish materialini filtrlashdan oldin uni quyidagicha tayyorlab olinadi. Suyuqliklar, siydik, suv, yuvindilar va boshqalar qogoz filtr yoki sentrifuga yordamida yirik moddalardan tozalanadi, chunki yirik moddalar bakteriologik filtrlarning teshigini berkitib qoyishi mumkin. Choziluvchan moddalar (yiring, najas) fiziologik eritmada yoki shorvada aralashtiriladi, yuqorida aytilganidek, yirik moddalardan tozalanib filtrlanadi. Quyuq material (azo bolaklari, oziq-ovqat va b.) chinni hovonchada steril kvars qumi va fiziologik eritma yoki shorva bilan yaxshilab aralashtiriladi, yirik moddalardan tozalanadi, song filtrlanadi. Mikroorganizmlar kulturasi (malum yoki organilayotgan). Fag bilan ishlaganda 2024 soatli agardagi yoki 26 soatli shorvadagi mikrob kulturasidan foydalaniladi. Kulturaning sofligini surtma preparat tayyorlab fuksin Pfeyffer yoki Gram usulida boyab organiladi. Qiyshiq agarda osgan kulturadan mikrob yuvindisi tayyorlab olinadi. Buning uchun qiyshiq agarga 35 ml steril fiziologik eritma quyiladi. Probirka kaft orasiga olinib burab chayqatiladi, yani sekinlik bilan oziqa muhit yuzasidagi kulturani yuvadi. Bu ishni ehtiyotkorlik bilan olib borish ? Nazorat uchun savollar 68 kerak, qopqoq namlanmasligi lozim. Yuvindi alohida steril probirkaga quyilib, fiziologik eritma bilan 1:10 qilib suyultiriladi (0,5 ml yuvindiga 4,5 ml fiziologik eritma). Fag bilan ishlaganda, steril idishlar, probirka, Petri kosachasi, hovoncha, pipetka, termostat, filtrlovchi asbob, sentrifuga, shtativ- lar, koloniya sanaydigan asbob kerak boladi. Diqqat! Fag bilan ishlash aseptik sharoitni talab qiladi. Sifat usuli U yoki bu materialda fagning bor-yoqligini oziga sezgir mikrob kulturasi yordamida aniqlanadi. Zich oziqa muhitida fagni aniqlash. Òest kulturani Gazon usulida Petri kosachasidagi agarga ekiladi. Ekilgan Petri kosachasi qopqogi ochilgan holda termostatda 3040 daqiqaga qoldiriladi, shundan song organilayotgan materialdan muhit yuzasiga tomiziladi. Agar tek- shirilayotgan materialda fag bolsa, mikrob kulturasi lizisga uchraydi. Mikrob kulturasi tomizilgan yerda koloniya lizis, yani steril hosil boladi. Suyuq oziqa muhitida fagni aniqlash. Bir xil hajmli probirkadagi ikkita shorvaning biriga tekshirilayotgan fag yoki filtrat solinadi, shorvaning ikkalasiga bir tomchidan mikrob kulturasi tomiziladi. Ikkinchi probirka nazorat probirkasi bolib hisoblanadi. Probirkalarni termostatda 1220 soatga qoldiriladi. Natija nazorat probirkasida mikrob osgan bolsagina loyqalanish oqiladi. Agar tajriba probirka tiniq qolsa, fag borligidan dalolat beradi. Tajriba probirkasi loyqalansa, kosachadagi agarni olib ekiladi, chunki kultura fagga chidamli bolishi mumkin. Zich oziqa muhitida fag aniqlanmasa, tekshirilayotgan materialda fag yoq, degan xulosaga kelish mumkin. Miqdoriy usul Kopgina tekshirish ishlarini olib borishda miqdoriy usulning ahamiyati katta. Shifokor fagning faolligini bilishi shart, chunki kasallikni davolash va oldini olish uchun dozasini aniqlay olish lozim. Fagning faolligi titr tushunchasida namoyon boladi, suyuq va zich muhitida faglarning titrini aniqlash mumkin. Suyuq oziqa muhitida faglarning titrini Appelman usulida aniqlanadi. Fagning titri test kulturani toliq lizisga uchratgan eng yuqori suyultirish darajasidir. Zich oziqa muhitida fagning titri Gratsiya usulida aniqlanadi. Appelman usulida faglarni titrlash (suyuq muhitda). Fagni titrlashda harorat, aeratsiya, mikroblar miqdori, probirkalar bir xil hajmda bolishi lozim. Faqat faglarning miqdorigina ozgaradi. 69 Biologik tajribada ishtirok etadigan barcha komponentlar, albatta, togri ishlashi togrisida nazoratdan otishi lozim. Faglar titrlashda shorvaning sterilligiga va fagga nazorat qoyiladi. Òajriba otkazish texnikasi. 12 ta bir xil hajmdagi steril probirka olib, hammasiga 4,5 ml.dan steril GPSh solib chiqamiz. Barcha probirkalarda shorvaning miqdori, korinishi bir xil bolishi lozim. Agar bunday bolmasa, xatolikka yol qoyilganligidan dalolat beradi. Bunday hollarda standart bolmagan probirka almashtiriladi va yangidan steril shorva quyiladi. Shorvani quyishda 510 ml.li steril piðetka- lardan foydalaniladi. Probirkalar shtativga qoyiladi va 1 dan 10 gacha tartib raqami qoyib chiqiladi. 11-probirkaga «NK» (nazorat kultura), 12-probirkaga «NF» (nazorat fag) deb yoziladi. Òajriba probirkalarda fagni suyultirib chiqiladi. 1 va 12-probirkaga 0,5 ml fag solinadi, songra yaxshilab aralashtiriladi. Nazorat fag probirkamizga ham fagdan xuddi shuncha solamiz. Piðetkani almashtirib, boshqa piðetkada birinchi probirkadan 0,5 ml olib ikkinchisiga, ikkinchisidan 0,5 ml olib uchinchisiga va oninchi probirkagacha shu yosinda ishni olib boramiz, har safar piðetkani almashtiramiz. 10- probirkadan 0,5 ml olib, dezinfeksiyalovchi moddaga tokiladi. «Nazorat fag» probirkasidan ham 0,5 ml olib tashlanadi. Fagni suyultirishda 12 ml.li piðetkalardan foydalaniladi. Probirkadagi suyuqliklarning hajmi bir xil qolishi lozim. «Nazorat fag» probirkasidan tashqari, barcha probirkalarga 1 tom- chidan (0,05 ml) test-kulturadan solib chiqamiz, songra probirkalarni chayqatamiz. Nazorat fag probirkasidan tashqari barcha probirkalarda biroz loyqalanish bolishi kerak. Agar bunday bolmasa, ishni qayta- dan bajaramiz. Probirkalarning barchasini termostatda 37°C haroratda 1820 soatga qoldiramiz. Vaqt otgach, probirkalar termostatdan olinadi, natija nazorat probirkalardan boshlab oqiladi. Nazorat kultura probirkamiz bakteriyalar bolinib, kopayishi natijasida probirkamizdagi muhit loyqalanishi yuzaga keladi. Bu tajribaga olingan kulturamiz bolinib kopayish xususiyatiga ega ekanligini korsatadi va oziqa muhit uning rivojlanishini qoniqtira olishini korsatadi. Nazorat fag probirkasi tiniq qolishi kerak. Bu muhitni, probirkalarni va fagni sterilligidan dalolat beradi. Nazorat probirkalarimizda shunday ozgarishlar bolsagina, tajriba probirkalari tekshiriladi. Agar tajriba probirkalarimizda kultura osgan bolsa, bu fagning yoqligini yoki kamligini korsatadi. Fagning titri aniqlanadi, yani kultura lizisga uchragan eng yuqori suyultirish darajasi aniqlanadi. Òitr suyultirish darajasining teskari korsatkichi bilan 70 belgilanadi, bu probirkaning tartib raqamiga togri keladi. Masalan, agar 7-probirkamiz tiniq bolgan bolsa, fagning titri 10 7 darajasiga togri keladi. Gratsiya usulida fag titrini aniqlash (zich oziqa muhitida). Bu usul titrlanayotgan materialda faglarning miqdoriy titrini aniqlashga yordam beradi. Bunda har bir fag lizis zonasini berishga asoslangan. Òajriba otkazish texnikasi. 2025 ml GPA quyilgan Petri kosachalaridagi agarga steril qogoz qoyilib, termostatda yoki bakte- riotsid lampa (lampa oraligi 2 m bolishi lozim) ostida quritish uchun qoyiladi. Òitrlanayotgan fagni 10 1 dan 10 10 gacha (yuqorida bayon etilgandek) suyultirib chiqiladi. Buning uchun barcha probirkalarga 2,5 ml.dan eritilgan va 45°C gacha sovitilgan GPA quyiladi va birinchi probirkaga fag solinib aralashtirib chiqiladi, 10-dan olib dezinfeksiya- lovchi moddaga tokiladi. Onta probirkamizning barchasiga 0,1 ml.dan test kultura solamiz. Probirka ichidagilar qotib qolmasidan oziqa muhit quyiladi va tartib raqami qoyilgan Petri kosachalariga quyib chiqamiz (1-probirkadan 1-kosachadagi agarga, 2 dan 2-kosachaga va hokazo). Kosachalarni termostatda 30 daqiqaga qoldiramiz. Natija 1820 soatdan keyin oqiladi. Fag katta konsentratsiyada bolganligi sababli (birinchi kosachalarda), qoshilib ketgan kulturaning lizisi yuzaga keladi. Fag miqdori kam bolgan suyultirish darajalaridagi kosachalarda sanay oladigan alohida lizis koloniyalari hosil boladi. Sanalganda adashib ketmaslik uchun kosachaning orqa tomonidan lizis koloniyalar belgilanib chiqiladi. Koloniyani sanaydigan asbob ishni yengillashtiradi. 1 ml fagolizatda faglar miqdorini aniqlash uchun quyidagi formuladan foydalaniladi: n=yxx, bu yerda, n qidirilayotgan son (faglarning miqdori); y kosa- chada hosil bolgan lizis koloniyalar soni; x kosachadagi fagning suyultirish darajasi. Masalan, 10 8 kosachamizda (1:10 · 8) 25 ta lizis koloniya hosil bolgan. 1 ml tekshirayotgan suyuqlikda 25 · 10 fag mavjud. Bir qancha suyultirish darajalaridagi faglarning miqdori aniqlanib, ortacha arifmetik korsatkichi hisoblab chiqilganda, togri natijaga erishish mumkin. Faglarni ajratish usullari Fag tekshirilayotgan material filtratida fag aniqlanadi va organiladi. Fagning borligi va faolligini fagga sezgir mos kulturaning lizisga uchrashidan aniqlash mumkin. 71 Filtratda kam miqdorda fag bolganligi sababli, bu usul ishonchli natijani bermaydi. Faglarning miqdorini oshirish uchun boyitish usulidan foydalaniladi. Boyitish usuli. Òayyorlangan filtratimizni 23 soat mos mikro- organizm saqlovchi 23 soatli shorvaga ekiladi va termostatda qoldiriladi. Fag kultura toqimalarda bolinib kopayadi va titri anchagina ortadi. Shundan song shorva filtrlanadi va filtratdagi fagning xossasi hamda faolligi aniqlandi. Faglarning amaliyotda qollanilishi Fag qollanilishi ularning ota spetsifikligi va mikrob hujayrasini parchalash yoki ular bilan simbiozga otish xususiyatiga asoslangan. Fagoprofilaktika va fagoterapiya faglar yordamida infeksiyani davolash va oldini olishga asoslangan. Bunda fag bemor organizmida kasallik qozgatuvchilari bilan toqnashib, ularni nobud qiladi. Hozirgi vaqtda faglar stafilokokk hamda streptokokk infeksiyalarini davolashda va oldini olishda keng qollanilmoqda. Shuningdek, vabo, toun, ichak tayoqchasi va proteyalar keltirib chiqaradigan infeksiyalar hamda antibiotik bilan davolab bolmaydigan infeksiyalarni yoqotishda va oldini olishda amaliyotga joriy etilgan. Fagodiagnostika: a) malum faglar yordamida ajratib olingan kulturani farqlashda foydalaniladi. Kulturani lizisga uchratgan fagga shu kultura mos keladi. Masalan, agar vabo fagi lizisni yuzaga keltirsa, demak, bu vabo vibrioni kulturasidir. Òiðga oid faglarning ota spetsi- fikligi tur ichidagi variantlarni fagovarlarni farqlash imkonini beradi. Faglar yordamida farqlash epidemiologiyada katta ahamiyatga ega, chunki infeksiya manbaini aniqlashda va qator savollar yechimida ularning roli kattadir; b) mikroblarning test kulturasi yordamida nomalum fagni aniqlash. Agarda fag dizenteriya qozgatuvchisini lizisga uchratsa, demak, u dizenteriya fagi hisoblanadi; d) fag titrining ortishi reaksiyasi yordamida (RNÒF) tezlash- tirilgan diagnostik usul, sof kultura, ajratib olishni talab qilmaydi. Bemordan yoki tashqi muhitdan olingan tekshirish materiali va titri aniqlangan indikator fagi shorvaga solinadi. Òermostatda ostirilgan fag titri Gratsiya usulida aniqlanadi. Òitrning 5 va koproq ortishi, tekshirish materialida fagga mos qozgatuvchi borligidan dalolat beradi, chunki fag bolinib kopaygan boladi. Motadil faglar biologiyada kopgina savollarni yechishda qollaniladi. Ular yordamida genetik kodlar organiladi, gen injeneriya- sida katta yutuqlarga erishilgan. Osimtalarning osishini organishda ulardan keng foydalaniladi. 72 Fag preparatlari Fag preparatlarini olishda yaxshi organilgan mikroorganizm shtammlari va reaktorlarda ostirilgan faglardan foydalaniladi, bu katta miqdorda fagolizator olish imkonini beradi. Faglar suyuq holda (ampula va flakonlarda), shamcha va tabletka korinishida chiqariladi. Òablet- kalar ogiz orqali ichiladi, u kislotaga chidamli qobiq bilan oralgan bolib, faglarni oshqozon shirasidagi xlorid kislota tasiridan himoya qiladi. Fag preparatlari, albatta, qoshimcha mikrofloraga, zararsizlikka va faolligiga kora nazoratdan otishi lozim. Fag idishlarida, albatta, fagning nomi, qayerda chiqarilganligi, seriya raqami, ishlatish muddati korsatilishi lozim. 1. Fag olinishida va qollanilishida uning qanday xossasi asos qilib olinadi? 2. Nima sababdan faglar steril sharoitda titrlanadi? 3. Faglarning Appelman usulidagi titri qaysi tajriba probirkalaridan oqiladi? 8-bob. ANÒIBIOÒIKLARGA UMUMIY ÒAVSIF Antibiotik (yunon. antiqarshi, bioshayot) tirik organizm- ning hayot faoliyati moddasi bolib, mikroorganizmlarga tanlab oldiruvchan yoki ularning osishiga tosqinlik qiladigan xususiyatga ega. Mikroorganizmlarda antibiotik ishlab chiqarish mikrob antogonizmining (yunon. antikurashaman, qarshilik qilaman) birdan bir asosiy korsatkichi hisoblanadi. Antibiotik xususiyatga ega bolgan kopgina mikroorganizmlar: zamburuglar, aktinomitset, sporatli bakteriyalar tuproqda uchraydi. Antagonistlarni suv havzalarida (kol, daryo), shuningdek, odam va hayvonning normal mikroformalarida uchratish mumkiin. Mikroorganizm: ichak tayoqchasi, bifidum bakteriya odam ichidagi laktobatsillalar. Mikrob antagonizmining amaliyotda qollanilishini birinchi bolib L. Paster va I.I. Mechnikov organdi. L. Paster 1877-yilgi izlanishlari natijasida kuydirgi batsillalarini chirituvchi bakteriyalar bilan oziqa muhitda ostirilishi kuydirgi batsillalarini osishini toxtatadi, deb fikrini bildirdi. L. Paster olib borgan kuzatishlari natijasida, bakteriyalar antagonizmini yuqumli kasalliklarni davolashda qollash mumkin, degan xulosaga keldi. I. I. Mechnikov 1894-yili ichak infeksiyalarini ? Nazorat uchun savollar 73 chirituvchi bakteriyalarining ahamiyatini organib, chirituvchi bakteriya ishlab chiqaradigan moddalar organizmni zaharlaydi va odamni tez qarishiga sabab bolishini aniqladi. Shuningdek, sut kislotasi hosil qiladigan bakteriyalar (bolgar tayoqchasi) ichakdagi chirituvchi bakteriyalarning rivojlanishiga tosqinlik qilishini aniqladi va mikroorganizmlarning antagonistik munosabatda bolishi organizmning qarishiga qarshi kurashishlardan biri, deb fikrini bildirdi. Rus olimlaridan V.A. Manassein va A.G. Polotebnov 1871 1872-yillarda antibiotik topilishidan ancha oldin, yashil mogor penitsil- liumini teridagi yiringli yaralarni davolashda qollaganlar. Bir turdagi mikroorganizmni boshqa turdagi mikroorganizmlarga tasirini (anta- gonizm) qollash fikri yaxshi natijalar berdi. Kok yiring tayoqchalardan R. Emmerix va O. Lev birinchi antibiotik piotsinozani oldilar. Lekin u keng qollanilmadi. Antibiotiklarga 1929-yilda A. Fleming asos soldi. U oziqa muhitidagi tillarang stafilokokklar oldida tasodifan osgan va atrofidagi koloniyalarni lizisga uchrashini kuzatadi. Fleming mogor bulyon kulturasini filtrati faqat stafilokokklarnigina emas, balki boshqa mikroorganizmlarni ham oldirishini aniqlaydi. U 10 yil davomida kimyoviy toza penitsillinni olishga harakat qildi, lekin buni uddalay olmadi. Òozalangan penitsillin preparatini 1940-yilda angliyalik E. Cheyn va Ò. Flori olishadi. Mikrobiolog Z.V. Yermolyeva 1942-yili penitsillin olish uchun boshqa mogordan foydalanadi. Bu 19411945-yilgi urush davrida katta foyda berdi. Penitsillin topilishi va uning yiringli kasalliklarni davolashda keng qollanilishi olimlarda yangi antibiotiklarni topishga ishtiyoq uygotdi. Hozirgi kunda 2000 dan ortiq turli xil antibiotiklar topilgan. Lekin klinik amaliyotda bularning barchasi qollanilmaydi, chunki ayrimlari toksik tasirga ega, boshqalari odam organizmi sharoitida faol emas. Olinish manbaiga kora, antibiotiklar quyidagicha tavsiflanadi: I. Past osimliklardan olinadigan antibiotikar: a) mogor zamburugidan olinadigan antibiotiklar (penitsillin va b.); b) aktinomitsentlardan olinadigan antibiotiklar (streptomitsin, tetratsiklin va b.); d) bakteriyalardan olinadigan antibiotiklar (gramitsidin, poli- miksin). II. Yuqori darajali osimliklardan olinadigan antibiotiklar (piyoz, sarimsoq piyozlar, fitotsidlar). III. Hayvon toqimalaridan olinadigan antibiotiklar (lizotsim, ekmolin, interferon). 74 Antibiotiklar mikroorganizmlarga bakteriotsid va bakteriostatik tasir korsatadi. Bakteriotsid tasiri oldiruvchan tasir bolib, bakteriostatik tasir esa ularni bolinib kopayishiga tosqinlik qiladi va toxtatadi. Òasir etish xarakteri antibiotikka va uning konsentratsiyasiga bogliq. Antibiotiklarning antimikrob tasir mexanizmi turlichadir. Biri bakteriya hujayrasi devorining sintezini buzadi (penitsillin, sefa- losporinlar), boshqalari hujayradagi oqsillarning sintez jarayonini toxtatadi (streptomitsin, tetratsiklin, levomitsetin). Uchinchisi esa bakteriya hujayrasidagi nuklein kislotasi sintezini buzadi (rifampitsin va b.). Har bir antibiotik tasir etish spektori xarakteriga egadir, yani preparat malum bir mikroorganizm turiga oldiruvchan tasir korsatishi mumkin. Keng spektrda tasir korsatadigan antibiotiklar turli xil mikroorganizm guruhlariga nisbatan faol (tetratsiklin) yoki kopincha Grammusbat va Grammanfiy bakteriyalarni bolinib kopayishini buzadi (streptomitsin va b.). Qator antibiotiklar tor doiradagi mikroorganizmlarga nisbatan tasir korsatadi. Masalan, polimiksinga Grammanfiy bakteriyalar sezuvchandir. Antibiotiklar tasir etish doirasiga kora antibakterial, zamburuglarga va osimtalarga qarshi turlarga bolinadi. Antibakterial antibiotiklar bakteriyalarni rivojlanishiga tasir qiladi va preparatlarni keng guruhini tashkil etadi. Ular kimyoviy tarkibiga kora turli xil boladi. Bakteriyalar keltirib chiqaradigan yuqumli kasalliklarni davolash uchun kopincha keng spektrda tasir korsatadigan antibiotiklar qollaniladi: tetratsiklin, levomitsetin, streptomitsin, gentamitsin, kanamitsin, yarimsintetik penitsillinlar va sefalosporin va boshqa preparatlar. Zamburuglarga qarshi antibiotiklar (nistatin, levorin, B amfo- teritsini, grizeofulvin) mikroskopik zamburuglarning osishiga tasir korsatadi, yani mikrob hujayrasining sitoplazmatik membranasining butunligini buzadi. Bu antibiotiklar zamburuglar keltirib chiqaradigan kasalliklarni davolashda qollaniladi. Osimtalarga qarshi antibiotiklar (rubomitsin, bruneomitsin, olivomitsin) hayvon hujayrasidagi nuklein kislotasining sintezini buzadi va turli formadagi yomon sifatli yangi hosil bolgan osmalarni davolashda qollaniladi. Antibiotiklarning biologik faolligini xalqaro tasir birligi ÒBda olchanadi. Ularning faol birligi sifatida unga sezuvchan bakteriyalarga antimikrob tasir korsatadigan preparatning eng kam miqdori qabul qilinadi (masalan, penitsillin uchun tillarang stafilokokk, streptomitsin uchun ichak tayoqchasi va b.). Hozirgi vaqtda antibiotiklar faol birligi toza preparatning mikrogrammlarida olchanadi. Penitsillinning faol birligi 0,6 mkg, deb qabul qilingan, kopgina antibiotiklar uchun 1 ÒB 1 mkg.ga togri keladi (streptomitsin va b.). 75 Mamlakatimizda antibiotiklar ishlab chiqarish korxonalari qurilgan. Òabiiy antibiotiklarni biosintez yoli bilan olinadi: zamburug aktinomitset, bakteriya shtammlarini kerakli malum optimal haroratda va aeratsiyada suyuq oziqa muhitida ostiriladi. Antibiotik moddalar mikroorganizm metobolizmining oxirgi mahsuloti hisoblanadi va ularni kimyoviy usulda ajratib olinadi. Antibiotiklarning kimyoviy tuzilishini organish natijasida kimyoviy sintez usuli yordamida sintetik preparatlarni olish imkoni yaratilgan (levomitsetin). Yarimsintetik antibiotiklarni olish usulini ishlab chiqilishi katta yutuqlardan hisoblanadi. Bu usul tabiiy preparatlarning kimyoviy tuzilishini ozgartirishga asoslangandir. Keyingi paytlarda klinik amaliyotida penitsillin, sefalosporinlar, tetratsiklinlar, rifampitsin va boshqa yarimsintetik preparatlar keng qollanilmoqda. Antibiotiko- terapiya ayrim hollarda mikroorganizmlar tomonidan turli asoratlarga sabab bolib, shuningdek, ularning xossalarini ozgarishiga olib keladi. Antibiotikoterapiyada kuzatiladigan asoratlar. Bemor organizmiga yuborilgan ayrim antibiotiklar (penitsillin, streptomitsin va b.) yuqori sezuvchanlik holatini, allergiyani yuzaga keltiradi, bu holat prepa- ratlarni qabul qilgan sari ortib boraveradi. Allergik reaksiyalarda toshmali qichitmalar (dermatit) burun, lablar, qovoqlarning shishishi kuza- tiladi. Eng xavfli asoratlardan biri anafilaktik shok hisoblanadi, buning natijasida bemor olishi mumkin. Diqqat! Antibiotik yuborishdan avval, organizmning antibiotikka nisbatan sezuvchanligini aniqlash lozim. Buning uchun bilakning ichki tomoniga teri ostiga 0,1 ml antibiotik yuboriladi va buni 2030 daqiqa kuzatiladi. Agar reaksiya musbat (+) bolsa, 1 sm kenglikda qizarish va shish hosil boladi, bu holda antibiotik yuborish mumkin emas. Organizmga keng miqyosda tasir korsatadigan antibiotiklarni katta miqdorda yuborilishi nafas yoli, ichak va boshqa azolarning normal mikroflorasini nobud bolishiga olib keladi. Buning natijasida, bu antibiotiklarga chidamli shartli patogen bakteriyalar (stafilokokk, proteya) va candida avlodiga kiruvchi zamburuglar faollashishi va ikkilamchi infeksiyani yuzaga keltirishi mumkin. Shunday qilib, zamburugli teri, shilliq qavat, ichki azolar kandidozi, disbak- terioz (normal mikroflora tarkibini buzilishi) hosil boladi. Kandidamikoz yuzaga kelishining oldini olish uchun antibiotiklar zamburuglarga qarshi preparatlar bilan birga yuboriladi. Normal 76 mikroflora turlaridan tayyorlangan (kolibakterin, bifidumbakterin, bifanol) preparatlarni qollanishi antibiotiklar qollanilgandan keyin disbakterioz hosil bolishining oldini oladi. Bemorni davolash maqsadida antibiotiklarni uzoq vaqt qollash uning organizmiga toksin tasir korsatishi mumkin, tetratsiklin jigarni shikastlashi, levomitsetin azolarni, streptomitsin vestibular va eshitish analizatori, sefalosporinlar buyrak ish faoliyatini buzilishi (nefrotoksik)ga sabab boladi. Kopgina antibiotiklar getovitamin va oshqozon-ichak sistemasi azolarining shilliq qavatini yalliglaydi. Antibiotiklar homilaning rivojlanishiga katta tasir korsatadi, bu ayniqsa, homiladorlikning birinchi davrida antibiotik qabul qilgan ayollarda kuzatiladi. Òetratsiklin guruhidagi antibiotik togridan togri homila organizmiga salbiy tasir korsatadi. Zamburuglardan ajratib olingan antibiotiklar Ayrim zamburug shtammlari Penicillium (Penicillium notatum, Penicillium chrysoqenum) avlodidan penitsillin olingan. Penitsillin patogen kokklar: Grammusbat stafilokokk, pnev- mokokk, Grammanfiy meningokokk, gonokokklarga nisbatan kuchli faoldir. Uni kuydirgi, qoqshol, gazli gangrena, zaxm va boshqa kasalliklarni davolashda qollaniladi. Penitsillinni peroral (ogiz orqali) qollash mumkin emas, chunki u kislotali va ishqoriy sharoitda faolligini yoqotadi va oshqozon hamda ichak yolida parchalanadi. Penitsillinni qollashda uning organizmdan tez chiqib ketishi, terapiyada kerakli samarani berishi, qondagi penitsillin konsentratsiya- sini saqlash uchun har 34 soatda yuborish lozimligi oldindan aniq edi. Keyinchalik uzoq tasir etadigan penitsillin yaratildi. Ularga ekmonovotsillin, bitsillin-1, bitsillin-3, bitsillin-6, bitsillin-13 anti- biotiklari kiradi. Bu antibiotiklardan revmatizm va zaxm kasalliklarini davolashda keng foydalaniladi. Hozirgi vaqtda yarimsintetik penitsillin, metatsillin, oksatsillin, kloksatsillin va boshqalar olingan, ular penitsillinaza tasirida parcha- lanmaydi va penitsillinga chidamli bolgan stafilokokk infeksiyalarni davolashda qollaniladi: ampitsillin faqat Grammusbatlargagina emas, balki Grammanfiy qorin tifi, dizenteriya va boshqa qozgatuvchilarga faol tasir korsatadi. Oksatsillin va ampitsillin oshqozonning kislotali sharoitiga chidamlidir, shuning uchun (peroral) ogiz shilliq qavati orqali qollash mumkin. Cephalosporium avlodiga kiruvchi zamburuglar sefalosporin antibiotigini ishlab chiqaradi. Uning keng qollaniladigan yarimsintetik azolaridan seporin (sefaloridan) va sefamezin kam toksinli, keng spektrda tasir korsatadi, penitsillinaza tasirida 77 parchalanmaydi, penitsillinga sezuvchan organizmlarda allergik reaksiyalar keltirib chiqarmaydi, kopgina yuqumli kasalliklarni davolashda keng qollaniladi. Aktinomitsetlar hosil qiladigan antibiotiklar Nursimon zamburuglarning (aktinomitsetlar) antagonistik tasiri- ni birinchi bolib N.A. Krasilnikov (1939) aniqlagan. Amerikalik olim A. Vaksman (1943) streptomitsinni ajratib oldi. Streptomitsinning ochilishi silga qarshi kurashishda yangi davrni ochib berdi, chunki sil mikobakteriyasi streptomitsinga sezgirdir. Streptomitsin Grammusbat va Grammanfiy bakteriyalarga oldiruvchan tasir korsatadi va toun, tulyaremiya, brutselloz va boshqa kasalliklarni davolashda qollaniladi. Òeri ostiga, mushakka, venaga yuboriladi. Bakteriyalar streptomitsinga chidamli bolib qoladi. Ayrim mikroorganizmlar streptomitsinga bogliq shaklni hosil qiladi, ular faqat streptomitsin qoshilgan oziqa muhitlarida bolinib kopayadi. Òetratsiklin aktinomitsetlarning tabiiy antibiotik tetratsiklin, xlortetratsiklin, oksitetratsiklin guruhining mahsuloti bolib hisobla- nadi. Barcha preparatlar keng miqyosda tasir korsatadi. Grammusbat va Grammanfiy turdagi bakteriyalar rikketsiyalarning, ayrim sodda jonivorlarning (dizenteriya amyobasi) bolinib kopayishiga tosqinlik qiladi. Òetratsiklin oshqozon-ichak sistemasi orqali yaxshi soriladi, kandidozlarning oldini olish uchun u nistatin bilan birga qollaniladi. Keyingi yillarda oksitetratsiklinning yarimsintetik hosilalari (metatsik- lin, doksitsilin va b.) keng qollanilmoqda, ularni tabiiy preparatlar bilan solishtirganda ancha foydali bolib chiqdi. Streptomyces venezuelac Levomitsetin sintetik preparat kultura suyuqligidan ajratib olingan, tabiiy xloramfenikolga oxshash Gram- musbat va Grammanfiy bakteriyalar, rikketsiyalar spiroxetalarga antimikrob tasir korsatadi. Levomitsetin ichak infeksiyalari: qorin tifi, paratif, dizenteriya, shuningdek, turli xil rikketsiozlarni, toshmali tif va boshqa kasalliklarni davolashda qollaniladi. Aktinomitsetlardan eritromitsin, olendomitsin, kanamitsin, rifamitsin, linkomitsin va boshqa antibiotiklar olinadi. Bu preparatlar zaxira antibiotiklarga kiradi va kasalliklarni davolashda bakteriyalarning boshqa antibiotiklarga chidamli bolgan hollarida qollaniladi. Bakteriyalar ishlab chiqaradigan antibio- tiklardan polimiksin va C gramitsidini amaliyotda katta ahamiyatga ega. Polimiksinlar B.polimixa spora hosil qiladigan tuproq batsillalari ishlab chiqaradigan antibiotik guruhini birlashtiradi. B, M va E polimiksinlar, asosan, Grammanfiy bakteriyalarga enterobakteriyalar, kok yiring tayoqchalari va boshqalarga nisbatan faoldir. 78 Gramitsidin antibiotigini G.M. Gauze va M.G. Brajnikova (1942) B. brurs tuproq batsillalarining turli xil shtammlaridan ajratib olganlar. Unga Grammusbat bakteriyalar sezgir. C gramitsidini eritrotsitlarni gemolizga uchratishi mumkin, shuning uchun mahalliy yiringlanish jarayonlarni davolashda qollaniladi. Hayvon toqimalaridan ajratib olingan antimikrob moddalar Lizotsimni birinchi bolib rus olimi I.L. Lashenkov (1909) tovuq tuxumining oqsilida aniqlagan. Keyinchalik lizotsim toqimalaridan ajratib olingan antimikrob moddalarda, sutda, koz yoshlarida, solak va turli azolarning toqimalari (buyrak, taloq, jigar)da aniqlagan. U organizmning tabiiy himoya omili hisoblanib, patogen soprafit mikroorganizmlarda bakteriologik (bakteriyalarni erituvchi) tasir korsatadi. Uni koz va teri kasalliklarini davolashda qollaniladi. Ekmolin Z.B. Yermolyeva tomonidan baliq toqimalaridan ajratib olingan. U penitsillin (ekmonovotsillin) bilan birga qollaniladi, bu ularning organizmga tasirini kuchaytiradi va uzaytiradi. Interferon kopchilikda alohida qiziqish uygotdi. U virus toqi- malari tasirida organizm hujayralarida hosil boladi va viruslarni bolinib kopayishidan tabiiy himoya qiladigan omil hisoblanadi. Interferon Ayzeks va Lindemanlar tomonidan 1957-yilda ochilgan, keng spektrda viruslarga qarshi tasir korsatish xossasiga ega. Interferonning tasir etish mexanizmi organilganda aniqlanishicha, u kopgina viruslarni nuklein kislotasi sinteziga tasir korsatadi va ularning olimiga sabab boladi. Interferon spetsifik tasir korsatishi xossasiga ega, yani odam interferoni hayvon organizmidagi viruslarga tasir korsatmaydi. U odam leykotsitidan ajratib olinadi va uni IF α, deb belgilanadi. Griðp va boshqa virus respirator kasalliklarining oldini olishda va davolashda qollaniladi. Keyingi yillarda interferon yangi hosil boladigan osmalarga samarali tasir korsatishi aniqlandi. Yuqori darajali osimliklardan olinadigan antibiotik moddalar. 1928- yilda Ò.P. Òokin yuqori darajali osimliklarning kopchiligi uchib ketadigan mikroblarga antimikroblar tasir korsatish xossasiga ega bolgan moddalarni hosil qilishlarini aniqlagan. Fitotsidlar uchuvchi efir moylari bolib, juda chidamsiz. Ularni sof holda ajratib olish ota murakkab. Fitotsidlar piyoz, sarimsoq, evkaliðt va lishaynik barglaridan, sariqchoy otlaridan ajratib olinadi. Shuningdek, rediska, aloe, xren osimligi va boshqa osimliklarda ham 79 aniqlangan. Òibbiyot amaliyotida fitotsidlarni qollanilishi chega- ralangandir, chunki yaxshi tozalangan, kam zaharli va chidamli pre- paratlarni tayyorlashni iloji topilmagan. Mikroorganizmlarning antibiotikka nisbatan chidamliligi. Kopgina antibiotiklar bilan davolanganda, antibiotikka sezuvchan mikroorga- nizmlarning chidamli shaklda aylanishi sodir boladi. Bakteriyalarning antibiotik orttirilgan chidamliligi yangi tugiladigan bakteriya hujayrasiga nasldan naslga otadi. Chidamlilikning hosil bolish mexanizmi turlichadir. Kop hol- larda chidamlilik bakteriyalarning fermentlarni sintezlashiga, malum antibiotik moddalarning parchalanish xossasiga bogliq boladi. Masalan, stafilokokklarning penitsillinga chidamliligi, ularning antibiotik parchalovchi penitsillinaza fermentini hosil qilish xususiyati bilan asoslanadi. Ichak tayoqchasi, proteriya va boshqa ichak bakteriyalari oilasiga penitsillinaza konstitutiv (doimiy) ferment hisoblanadi, ular- ning penitsillinga tabiiy ravishda chidamliligini yaratib beradi. Bakteriyalarning kopgina dorilarga chidamliligi aniqlangan, yani bakteriya hujayrasi bir qancha antibiotiklarga chidamlilik xosasisga ega bolishi mumkin. Antibiotik tasirida bakteriyaning morfologik, kultural, biologik xossalari ozgaradi, yani bakteriyaning «L» shakli yuzaga keladi. Antibiotikoterapiyaning sifati bakteriyalarning qollanilayotgan preparatning sezuvchanlik darajasiga bogliq. Shuning uchun davolashda, avval mikroblarning antibiotikka sezuvchanligi aniqlanadi. Mikroorganizmlarning antibiotiklarga sezuvchanligini organish Klinik amaliyotda mikroorganizmlarga bakteriotsid va bakteriostatik tasir korsata oladigan antibiotiklargina qollaniladi. Har qanday laboratoriya tekshiruvchilarida mikroorganizmning antibiotik sezuv- chanlik mezoni bolib, tajribada kasallik minimal konsentratsiyasi hisoblanadi. Dorilarning sezuvchanligini aniqlash uchun qozgatuv- chining sof kulturasidan foydalaniladi. Sezuvchanlikka tekshirish uchun bemorni antibiotiklar bilan davolashdan oldin organizmdan mikrob kulturasini ajratib olishimiz lozim, chunki ular tasirida kasallik qoz- gatuvchilarini toliq yoqotish mumkin. Mikroorganizmlarning antibiotik sezuvchanligi agar-agarda standart disklar yordamida diffuz usuli yoki suyuq oziqa muhitida seriyalab suyultirish usulida aniqlanadi. Bunda penitsillin va streptomitsinga chidamlilik yaqqol namoyon boladi. Antibiotik terapiyaning sama- raliligi, asosan, bakteriyaning qollanilayotgan preparatlarga chidam- lilik darajasiga bogliqligi bilan aniqlanadi. Shuning uchun bemor 80 organizmidan ajratib olingan mikroorganizm kulturasining davolash uchun qollaniladigan turli xil antibiotiklarga sezuvchanligi aniqlanadi. Antibiotiklarning tasir etish jarayonida bakteriyalarning morfo- logik, kultural, biologik xossalari ozgarishi mumkin, yangi forma bakteriyalar hosil bolishi mumkin. Zamburuglardan ajratib olingan antibiotiklar. Penicillium avlodi zamburuglaridan penitsillin olingan. Penitsillin patogen kokklar: Grammusbat stafilokokk, strep- tokokk,pnevmokokk, Grammanfiy meningokokk va gonokokklarga nisbatan ota faoldir. U kuydirgi, qoqshol, gazli gangrena, zaxm va boshqa kasalliklarni davolashda ham qollaniladi. Aniqlash usullari Disk usuli. Òayyorlangan mikrob yuvindisi yoki bir kunlik shorvadagi kultura Gazon usulida ekiladi. Mikrob yuvindisi tayyorlash uchun steril fizioloigk eritmadan 56 ml olib, qiyshiq agardagi sof kulturaga solinadi va probirka kaft orasiga olib chayqatiladi. Mikrob yuvindisini bir milliard mikrob kulturasini saqlovchi 10-loyqalanish standartiga solishtiriladi. Ekilgan kosachani 3040 daqiqa termostatda quritiladi. Song ekilgan agar yuzasiga pinset yordamida antibiotik shimdirilgan disklar qoyib chiqiladi. Har bir disk agarga yaxshi yopishishi uchun pinset bilan bosiladi. Dikslar bir-biridan va kosacha devoridan 21,5 sm uzoqlikda bolishi lozim. Bitta kosachada bir shtammning 45 ta antibiotikka sezuvchanligini organish mumkin. Bu kosachani termostatda 37°C haroratda 1824 soatga qoldiriladi. Kosacha tonkarilgan holatda qoyilishi kerak, chunki kondensatsion suv muhit yuzasiga tushishi mumkin. Vaqt otgach, natija oqiladi. Antibiotikning tasir kuchi disk atrofida osishning kechikishiga qarab baholanadi. Mikroblar osishining kechikishi zonasining diametrini, antibiotik diski bilan qoshib millimetr qogoz yoki chizgich yordamida olchanadi. Mikroblarning antibiotikka nisbatan sezuvchanlik darajasi 5-jadvalda korsatilgan. 5-jadval Mikrobning antibiotikka sezuvchanlik darajasi k it o i b it n a g n i n b o r k i M i s a j a r a d k il n a h c v u z e s i r t e m a i d a n o z li r e t S n a h c v u z e S n a h c v u z e s m a K n a h c v u z e s i r o q u Y 0 1 > 0 1 < q il o t r a l b o r k i M a s l o b n a g a m s o 81 Kop hollarda faol materiallarda (yiring, jarohat ajratmasi va b.) mikroblarning antibiotikka nisbatan sezuvchanligi aniqlanadi. Bunda tekshirish materiali oziqa muhit yuzasida steril shisha shpatel bilan bir xilda yoyiladi, song antibiotik disklari ornatiladi. Bu oddiy usul bolib, laboratoriyalarda keng qollaniladi va sifatli usul, deb qaraladi. Suyuq oziqa muhitida seriyalab suyultirish usuli Suyuq oziqa muhitida seriyalab suyultirish uchun aniq va miqdoriy usul bilan hisoblanadi, bu usulni ilmiy tekshirish institutlari, kasallik- larning oldini olish muassasalarida ota muhim hollarda qollaniladi. Òajriba qoyish uchun sof mikrob yuvindisi, antibiotik eritmasi, Xottinger shorvasi kerak boladi. Antibiotikning faolligi ÒB (tasir birligi) ml.da (ml yoki mkg) olchanadi. Asosiy antibiotik eritmasini tayyorlash uchun idishiga miqdori korsatilgan antibiotiklar solinadi. Agar birligi grammda korsatilgan bolsa, antibiotikning 1 grammiga 1 mln tasir birligi togri keladi. Mana shu eritmada kerakli bolgan antibiotik aralashmasi tayyorlash lozim. Asosiy antibiotik aralashmani tayyorlash 6-jadvalda korsatilgan. 6-jadval Penitsillinning asosiy eritmasini tayyorlash h s I i b it r a t i n i s a m ti r e y i s o s a g n i n n il li s ti n e P a m t a s r o k n u h c u h s a l r o y y a t n a g n a l r o y y a t l m 1 t a r a p e r p i g a d a m ti r e B T ,i s a y i s t a r t n e s n o k . 1 . 2 . 3 ) i g il r i b r i s a t ( B T 0 0 0 0 0 3 n o k a l F i d a li ti r e a d v u s n a g n a ll it s i d l m 0 1 + ) i d a n a l b o s i h a m h s a l a r a - 1 u b ( li r e t s l m 9 , 9 + l m 1 , 0 n a d a m h s a l a r a - 1 ) a m h s a l a r a - 2 u b ( v u s n a g n a ll it s i d l m 4 , 3 1 + n a d a m h s a l a r a - 2 l m 6 , 1 H S P G 0 0 0 0 3 0 0 3 2 3 Òajribani quyish. Bir xil hajmli 12 ta probirka olinib, barchasi 1 ml.da GPSH ga quyiladi. Birinchi probirkaga 1 ml 32 ÒB/ml asosiy antibiotik eritmasidan steril pipetka yordamida solinadi, 1-probirkadagi eritmani yaxshilab aralashtiriladi va 1 ml olib, 2-probirkaga quyi- ladi, 2-dan 3-ga, 3-dan 4-ga va shunday qilib, 10-probirkagacha 82 suyultiriladi, 10-dan 1 ml olib, dezinfeksiyalovchi moddaga tokiladi. Shunday qilib, 1-probirka 16 yed, 28 yed, 34 yed va boshqa antibiotk eritmani saqlaydi. Antibiotikni suyultirishda, har bir probirkaga alohida piðetka qollaniladi. 11-probirka bakteriyaning osishini nazorat qiluvchi probirka hisoblanadi. «KK», 12-probirka oziq muhitning sterilligini nazorat qiluvchi probirka hisoblanadi. 12-probirkadan tashqari, barcha probirkalar 0,1 ml tekshirilayotgan kulturadan solinadi. 1827 soat termostatda saqlangandan song natija oqiladi. Natija nazorat probirkalardan boshlab oqiladi. 11-probirkamizda mikrob kulturasi osgan bolib, 12-probirka tiniq bolsa, tajriba probirkalari tekshiriladi, eng oxirgi antibiotik miqdori tekshirilayotgan shtamm uchun minimal toliq oldiruvchi konsentratsiya bolib hisoblanadi. Zich oziqa muhitida seriyalab suyultirish usuli. Suyuq oziqa muhitdagidek antibiotikning ikki marta suyultirilgan eritmasi tayyorlanadi. Song 1 qism har bir antibiotik aralashmasidan, 9 qism eritilgan va 45°C ga sovitilgan GPA (1 ml antibiotik + 9 ml GPA) solib yaxshilab aralashtirilgach, Petri kosachasiga quyiladi. Suyultirilgan kulturaning loyqaligini 10-loyqalanish standartiga solishtiriladi va fiziologik eritmada 10 7 darajagacha suyultirib chiqiladi. Bakteriologik qovuzloq yordamida antibiotikli oziq muhit yuzasiga tekshirilayotgan kulturadan tomiziladi. Bitta kosachaga 2025 shtamm tomizish mumkin. Petri kosachasini termostatda 37°C da 1820 soatga qoldiriladi. Antibiotik aralashtirilmagan GPA solingan Petri kosachasiga tekshirilayotgan mikrob kulturasidan (kontrol) ekiladi. Nazorat kosachalarida mikrob kulturasi osgan bolsa, natija oqiladi. Bakteriyalar toliq osmagan eng oxirgi Petri kosachasidagi antibiotik mikroblarni oldiruvchi minimal konsentratsiya deyiladi. Fleming boyicha yolakcha usuli. Bu usul antibiotikning tasir qilish spektrini aniqlash uchun qollaniladi. Petri kosachasidagi GPAda steril skalpel bilan kengligi 1 sm keladigan qilib yolakcha ochiladi va qirqilgan agar olib tashlanadi. Song probirkadagi erigan va 45°C ga sovitilgan GPA ga malum konsentratsiyadagi antibiotik eritma solinadi. Probirkadagilar yaxshilab aralashtiriladi va tayyorlangan yolakchaga quyiladi, suyuqlik yolakchadan toshib ketmasligi lozim. Agar qotgandan keyin qovuzloq yordamida yolakchaga perpendikular holda bir qancha tekshirilayotgan mikrob kulturalari ekiladi. Ekmani ter- mostatda 37°C da 1824 soatga qoldiriladi. Natijani oqish. Preparatga sezgir kulturalar yolakchadan uzoqroqda osadi, preparatga sezuvchan bolmagan kulturalar esa yolakcha chetigacha osadi. 83 Optik loyqalanish standartlari bilan ishlash usuli 1 ml oziqa muhitidagi mikrob miqdorini aniqlash uchun optik loyqalanish standarti qollaniladi. Ular davlat ilmiy tekshirish institutlarida tayyorlanadi. Quyidagi loyqalanish standartlari mavjud. 1 ml.da 0,5 mlrd mikrob saqlaydi (5-loyqalanish birligi), 1 ml.da mikrob tanachasi sonini aniqlashdan oldin mikrob aralashmasi olinadi. Buning uchun probirkadagi qiyshiq agarda ostirilgan mikrob kulturasiga 56 ml fiziologik eritma solinib, kaft orasida chayqatilib, muhit yuzasidagi mikrob kulturasi yuviladi. Hosil bolgan aralashmadan steril piðetka yordamida qalinligi va diametri standart steril probirkaga solinadi. Mikrob yuvindisi optik loyqalanish standartiga solishtiriladi. Kerak bolgan hollarda mikrob aralashmasini fiziologik eritma bilan kerakli loyqalanish standartiga tenglashtiriladi. Agar tayyorlangan mikrob yuvindisi miqdori standart probirkadagi korsatilgan songa togri keladi. 1. Laboratoriya tekshirishlarida nima mikroorganizmlarning anti- biotikka sezuvchanlik kriteriyasi bolib hisoblanadi? 2. Antibiotikka sezuvchanlikni aniqlash uchun bemor oganizmidan qachon mikrob kulturasini ajratib olish lozim? 3. Mikroorganizmlarni antibiotikka nisbatan sezuvchanligini aniqlashda qanday usullar mavjud? Kimyoprofilaktika va kimyoterapiya Òibbiyot amaliyotida yuqumli kasalliklarni davolash va oldini olishda kimyoviy moddalardan foydalanilib kelingan. Hindular bez- gakka qarshi kurashishda xin daraxti ildizidan keng foydalanishgan. Yevropada esa XVI asrda zaxmni davolashda simobni qollashgan. Kimyoterapiya deb, kasalliklarni davolashda kimyoviy moddalardan foydalanishga aytiladi. Bu kimyoviy moddalar kasallik qozgatuvchiga spetsifik tasir korsatib, odam hujayra va toqimasiga tasir etmaslik xossasiga ega. Kimyoterapiyaning ilmiy asoslari P. Erlix tomonidan tariflangan. U birinchi bolib margimush (mishyak) saqlovchi salvar- san va neosalvarsan preparatlarini kashf qiladi. Bir necha on yillar davomida bu preparatlar bilan zaxm kasalligini davolab keladi. Kimyoprofilaktika deb, yuqumli kasalliklarning oldini olishda kimyoviy preparatlar qollanilishiga aytiladi. Kimyoterapevtik preparat- larning kasallik qozgatuvchisga tasir etishining asosi ularning ? Nazorat uchun savollar 84 mikroorganizm metabolizmi uchun kerak bolgan qator moddalarga: aminokislotalar, vitaminlar, fermentlar va boshqalarga, kimyoterapevtik preparatlarning molekula tuzilishining oxshashligidadir. Bunda bakteriya hujayrasi oziga kerakli komponentlarni sorish orniga preparatni soradi va bu preparat oz tasirini korsatadi. Hujayradagi kerakli sistemalarning buzilishi natijasida u nobud boladi (bakteriotsid tasir), tasir etish kuchi kamroq bolsa, bakteriostatik tasir korsatiladi. Sulfanilamid preparatlarning (streptotsid, norsulfazol, sulfadi- mezin va b.) kashf qilinishi kimyoterapiya rivojlanishining asosiy bosqichlaridan biri bolib hisoblanadi. Ular angina, yiringli yallig- lanish infeksiyalarini, ichak kasalliklarini davolashda yaxshi natija beradi. Sil kasalligiga qarshi kurashishda sintetik kimyoterapevtik preparatlardan PASK (paraminosalitsilat kislota), tibon, ftivazid va boshqalar katta yordam beradi. Hozirgi vaqtda viruslar va osmalarga qarshi kimyoviy preparatlar ishlab chiqilmoqda va qollanilmoqda. Biologik kelib chiqi- shiga ega bolgan kimyoterapevtik preparatlardan antibiotiklar katta ahamiyatga ega. Shuningdek, kimyoterapevtik preparatlar salbiy tasir korsatish xossasiga ham ega. Ular malum moddalar almashinuvi zanjiriga tasir korsatib, mikrob hujayrasi qatorida odam hujayrasiga ham tasir korsatishi mumkin. Kimyoviy preparatlar bilan davolanish natijasida odam organizmida qoshimcha tasir korsatadigan oraliq mahsulotlar kop miqdorda toplanib qoladi. Preparatlarni qollash natijasida odam organizmida qon tarkibining ozgarishi, hujayralarning mutatsiyasi va boshqa funksional buzilish hodisalari vujudga kelganligi korsatib otilgan. 9-bob. MIKROORGANIZMLAR GENEÒIKASI Òirik organizmlar avlodlarning malum belgilarini saqlab qolish xususiyatiga irsiyat deyiladi. Irsiyatni organish jarayonida aniqlanishicha, har bir keyingi avlod turli xil omillar tasirida oldingi avloddan farqlovchi belgilarni qabul qilishi mumkin. Bu xususiyatga ozgaruv- chanlik deyiladi. Shunday qilib, irsiyat va ozgaruchanlik bir-biriga chambarchas bogliq. Òirik organizmlarning irsiyat va ozgaruvchanligini organadigan fan «Genetika» deyiladi (yunon. genos tugilish). XIX asrda Ch. Darvin mavjud bolgan barcha tirik organizmlar bazi shakllardan, ozgarish yoli natijasida yuzaga kelganligini isbotlab bergan, nasldan naslga uzatish natijasida hosil bolgan bu ozgarishlar evolutsion jarayonning asosi bolib hisoblanadi. Ch. Darvinning bu nazariyasi yuqori baholandi. Bu nazariya XIX asrdagi eng katta ixtirolardan biri hisoblanadi. Murakkab tuzilishga ega bolgan organizmdagi irsiyatni organish ularning uzoq hayot kechirishi va 85 koplab nasl qoldirishi sababli, kopgina qiyinchiliklarni yuzaga keltirdi. Bularni organish uchun mikroorganizmlar qulay obyekt bolib hisoblanadi, chunki ular kam yashaydi va tez bolinib kopayadi hamda koplab nasl qoldirish xususiyatiga ega. Bundan tashqari, ularda namoyon boladigan morfologik ozgarishlarni mikroskop yordamida bemalol organish mumkin. Mikroorganizmlar biokimyoviy jihatdan faol bolib, buni maxsus oziqa muhitlaridan foydalangan holda organish mumkin. Mikroorganizmlar turli xil omillar (harorat, ultrabinafsha va rentgen nurlari va b.) tasirida oz xossasini ozgartirish xususiyati irsiyat va ozgaruvchanlikni organishda, ulardan model sifatida keng foydalanishga imkon yaratdi. Genetik tekshirishlarning birinchi obyekti ichak tayoqchasi bolgan, u laboratoriya sharoitida yaxshi osadi. Shuningdek, bu bakteriyalarning morfologik, kultural, biokimyoviy xususiyatlari yaxshi organilganligi katta ahamiyatga ega boladi. Keyinchalik genetikani organishda boshqa bakteriyalar va viruslar obyekt vazifasini bajaradi. Mikroorganizmlar genetikasini organishda shu narsa aniqlandiki, ularda genetik malumot tashuvchi rolini DNK (ayrim viruslarda RNK) oynaydi. Bakteriyalarda DNK molekulasi ikki iðdan tashkil topib, ularning har biri bir-biri bilan buralib ketgan. Hujayralar bolinayotganda, buramali iðchalar ikki marta ortadi har bir ið yangi iðcha qurilishida qolið yoki matritsa sifatida xizmat qiladi. Bunda hujayralar bolinishi jarayonida hosil bolgan har bir ið, yangi hosil bolgan DNK mole- kulali ikkita iðchani saqlaydi. DNK tarkibiga tort azotli asoslar adenin, guanin, sitozin va timin kiradi, ularning DNK zanjirlarda joylanishi belgilab qoyilgan, bu ularning nasl malumotlarini aniqlab beradi. Gen irsiyatning funksional birligi hisoblanadi. DNK iðining qismi bolgan genlarning toliq yigindisiga ega bolgan hujayra genotið deyiladi. Genlar quyidagilarga bolinadi: struktura genlari hujayra ishlab chiqaradigan aniq oqsillar haqidagi malumotlarni tashiydi va gen regulatorlar struktura genlarning ishini tartibga solib turadi. Masalan, hujayralar shu ondagi sharoitda kerak bolgan oqsillarni ishlab chiqa- radi, lekin sharoit ozgarishi bilan generegulatorlar hujayrani yangi sharoitga moslashtirib, xossalarini ozgartiradi. Mikroorganizmlarning morfologik, kultural, biokimyoviy va boshqa xossalarining ozgarishi, tashqi muhit omillari tasirida yuzaga keladi, ular bir-biri bilan ozaro bogliq. Masalan, hujayraning mor- fologik xossalari ozgarishi, odatda, fiziologiyaning ozgarishi oqibatida kuzatiladi. 86 Mikroorganizmlar ozgaruvchanligini organish jarayonida ozga- ruvchanlikning asosiy shakli dissotsiatsiya ekanligi aniqlandi. Ozgaruvchanlikning bu turi P.de Kryui va J. Arkrayton tomonidan aniqlanib, quyidagicha namoyon boldi: ayrim kulturalarni zich oziqa muhitiga ekilganda koloniyalarning ikkita turga bolinishi sodir boladi, yani silliq, yumaloq, yaltiroq, chetlari tekis S shaklli (ingl. Smooth silliq) va yassi, xira, chetlari gadir-budur R shaklli (ingl. Rough burushgan)dir. Shuningdek, oraliq shakl: meformalar (shilliq) va g shaklli (pakana) uchraydi. Silliq S shaklli koloniyalar malum sharoitda R shaklli koloniya- larga aylanadi, lekin R shaklli koloniyalarning S shaklga otishi juda qiyin kechadi. Dissotsiatsiya qator bakteriyalarda kuydirgi, toun va boshqa qozgatuvchilarda kuzatiladi. S BA R SHAKLLI KOLONIYALAR • koloniyalar silliq, yaltiroq, bortib chiqqan togri shaklli, cheti tekis; • shorvada bir xilda loyqa- lanib osadi; • harakatchan bakteriyalarda xivchinlar bor; • kapsula hosil qiladigan bak- teriyada kapsulasi bor; • biokimyoviy jihatdan faol; • patogen xossaga ega; • kasallikning otkir davrida hosil boladi • koloniyalar xira, burushgan, chetlari gadir-budur, notogri shaklli; • shorvada chokma hosil qilib osadi; • harakatchan bakteriyalarda xiv- chini bolmasligi mumkin; • kapsulasi yoq; • biokimyoviy jihatdan kam faol; • kopgina bakteriyalar kasallik tugdirmaydi; • kasallikning surunkali davrida hosil boladi S shaklli R shaklli Kasallik tugdiruvchi bakteriyalar kopincha S shaklida boladi. Sil, kuydirgi, toun qozgatuvchilari bundan xoli, ularning R shakllari kasallik tugdiradi. Bakteriya hujayrasida yuzaga keladigan ozgarishlar modifikatsion ozgaruvchanlikda nasldan naslga otmay, mutatsion ozgaruvchanlikda nasldan naslga otgan bolishi mumkin. 87 Modifikatsion ozgaruvchanlik Mikroorganizmlarda ozgaruvchanlik ularning yashayotgan noqulay sharoitlariga javob berishi natijasida hosil boladi (7-jadval). Bu tashqi tasir kuchiga moslanish reaksiyasidir. Hujayrada hosil boladigan ozgarishlar nasldan naslga otmagani sababli mutatsion ozgaruvchan- lik kuzatilmaydi, qulay sharoit tiklanganda hosil bolgan ozgarishlar yoqoladi. Ozgaruvchanlik mikroorganizmlarning turli xil morfologik, kultural, biokimyoviy va boshqa xossalariga tasir etishi mumkin. k il n a h c v u r a g z o n o i s t a k if i d o M a g l s a n n a d l s a n ) h s i n a l r u t ( i d y a m t o k il n a h c v u r a g z o n o i s t a t u M i d a t o a g l s a n n a d l s a n k i g o l o f r o M l a r u tl u K y i v o y m i k o i B n o i s t a t u M a y i s t a n i b m o k e r k i ð it o n e G a y i s t a m r o f s n a r T a y i s k u d s n a r T a y i s t a g u y n o K Morfologik ozgaruvchanlik bakteriyaning kattaligi va shakli ozgarishi bilan namoyon boladi. Masalan, oziqa muhitga penitsillin qoshilganda ayrim bakteriyalarning hujayralari uzunlashadi. Oziqa muhitida kalsiy tuzi konsentratsiyasi yetishmasligi sababli quyidagi tayoqchasining spora hosil qilishi tezlashadi. Kalsiy tuzi konsentra- tsiyasi kopayishi uning spora hosil qilishini yoqotadi. Bakteriyalarning bir oziqa muhitida uzoq vaqt ostirilishi, ular hayoti davomida ishlab chiqqan moddalarning toplanishi va tasir etishi natijasida polimor- fizmni yuzaga keltiradi. Kultural ozgarish oziqa muhit tarkibi ozgarganda bakteriyaning kultural xossalari ozgaradi. Masalan, stafilokokk kislorod yetishmasli- gidan pigment hosil qilish xossasini yoqotadi. Mojizakor tayoq- chalar xona haroratida ravshan qizil pigment hosil qiladi, lekin 37°C da pigment hosil qilish xossasi yoqoladi va boshqalar. Biokimyoviy turlanish har bir bakteriya malum fermentlar yigindisiga ega, bu fermentlar yigindisi tufayli oziqa moddalarni hazm qiladi. Ular malum oziqa muhitlardagina ishlab chiqiladi va genotiðlarda aniqlangan. Bakteriyalarning hayot faoliyati davomida 7-jadval Mikroorganizmlarning ozgaruvchanligi 88 barcha genlar ishtirok etmaydi, asosan, mos ferment sintezida ishtirok etadigan genlargina ishtirok etadi. Bakteriyalar genida hamma vaqt adaptiv fermentlar ishlab chiqa- rilishini aniqlovchi genlar mavjud. Masalan, ichak tayoqchasi laktoza uglevodni saqlamaydigan muhitga ekilganda, laktoza fermentini ishlab chiqarmaydi, agar uni laktoza uglevodi saqlaydigan muhitga ekilsa, bu fermentni ishlab chiqaradi. Adaptiv fermentlar malum yashash sharoitiga moslanishga imkon beradi. Shunday qilib, ozgaruvchanlik bu mikroorganizmlarning tashqi muhit omillari ozgargan sharoitda ularni osib va bolinib kopayishiga imkon yaratadigan xossasi. Hosil qilgan xususiyatlari nasldan naslga otmaydi, shuning uchun ular evolutsiyada rol oynamaydi, ammo mikroblarning tirik qolishiga imkoniyat yaratadi. Mutatsion ozgaruvchanlik Mutatsion ozgaruvchanlik mutatsiya va genotiðik rekombinatsiya natijasida hosil bolishi mumkin. Mutatsiya (yunon. mutatio ozgarish) bu genlar tuzilishi ozgarishining nasldan naslga uzatilishi. Ayrim mutatsiyalar genlarning yirik qismi chokishi va qisman ozgarishi bilan kuzatiladi bunday mutatsiya takrorlanmaydi. Mayda mutatsiya DNK asosining alohida qoshilishi yoki tushib qolishi bilan bogliq. Bunda bakteriya xususiyatlari qisman ozgaradi. Bunday ozgargan bakteriyalar oz holatiga toliq qaytishi mumkin. Xususiyati ozgargan bakteriyalar mutantlar deyiladi. Mutant- larni yuzaga keltiruvchi omillar mutagenlar deyiladi. Bakteriyalarning mutatsiyalari spontan va induksiyalangan mutatsiyalarga bolinadi. Spontan mutatsiya nazorat qilib bolmaydigan omillar tasirida hosil boladi. Induksiyalangan mutatsiya mikroorganizmlarni maxsus mutagenlar (kimyoviy moddalar, nurlar, harorat va b.) bilan qayta ishlashi natijasida hosil boladi. Bakteriyalarning mutatsiyasi natijasida quyidagilar kuzatiladi: a) morfologik xossalarining ozgarishi; b) kultural xossasining ozgarishi; d) mikroorganizmlarda dorivor mahsulotlarga nisbatan chidam- liligini hosil bolishi; e) proteylar aminokislotalarni sintezlashi uglevod va boshqa oziq moddalardan foydalanish, kasallik tugdirish xossasi va boshqalarni kuchsizlantiradi. Genotiðik rekombinatsiya. Òransformatsiya. Hujayralarning boshqa hujayralar DNK sini transformatsiya jarayonida oziga qabul qilish 89 xususiyati omilkorlik (komponentlar) deyiladi. Omilkorlik holati kopincha logarifmik kopayish fazasiga togri keladi. Òransduksiya bu genetik malumotning (DNK) donor bakte- riyasida retsiðiyent bakteriofat ishtirokida kochirilishi. Bunday xossaga asosan motadil faglar ega. Ular bakteriya hujayrasida kopayib oz DNK tarkibiga, bakteriya DNKsini qisman kiritadi va uni retsiðiyentga beradi. Òransduksiyaning uch tiði farq qilinadi umumiy, maxsus va abortiv (chala). 1. Umumiy transduksiyada bakteriya xromosomalarining turli qismlarida joylashgan har xil genlarni hosil qilish, dorivor mah- sulotlarga va boshqalarga chidamliligini oshirish xususiyati ozgarishi mumkin. 2. Maxsus transduksiya bu bakteriya xromosomalarining maxsus qismlarida joylashgan faqat ayrim maxsus genlarni faglar orqali uzatilishi. Bu hollarda faqat malum belgilar va xususiyatlar uzatiladi. 3. Abortiv (chala) transduksiya donor xromosomasining qandaydir bitta bolagi faglar orqali uzatilishi. Bu bolakcha retsiðiyent hujayraning xromosomasiga kirmaydi, balki sitoplazmasida aylanib yuradi. Retsiðiyent hujayra bolganida bu bolakcha faqat bitta qiz hujayraga otadi, ikkinchi hujayraga retsiðiyentning ozgarmagan xromosomasi qoladi. Òransduksiya faglar yordamida hujayradan boshqa hujayraga, toksin, spora, xivchinlar, qoshimcha fermentlar hosil qilishi, dorivor mahsulotlarga chidamliligini oshirish va boshqa xossalarni otkazishi mumkin. Konyugatsiya bu genetik materiallarning bir hujayradan boshqa hujayraga kontaktda bolgandagi otishi. Genetik materiallarni uzatuvchi hujayralar donor deyiladi, genetik materiallarni qabul qiluvchilarni retsiðiyentlar deyiladi. Bu jarayon bir tomonlama xarakterga ega donor hujayradan retsiðiyent hujayraga otadi. Donor bakteriya F + (erkak), retsiðiyent F (ayol) deb belgi- lanadi. F + va F hujayralar bir-biriga yaqinlashadi, ular orasida sitoplazmatik koprikcha hosil boladi. Koprikning hosil bolishi F omil (ingl. fertility serpushtlik) yordamida nazorat qilinadi. Bu omil jinsiy tukchalar (sexpili) hosil bolishiga javob beruvchi genlarni saqlaydi. Donor vazifasini faqat F omilini saqlovchi hujayralargina bajarishi mumkin. Retsiðiyent hujayralar bunday omildan mahrum. Hujayralar chatishganda F omil donor hujayradan retsiðiyentga otadi. Retsiðiyent F omilni qabul qilgach, ozi donor (F+) bolib keladi. 90 Konyugatsiya jarayonini mexanik usulda qaynatish yordamida uzish mumkin. Bunday hollarda retsiðiyent ozidagi DNK malumot- larni toliq ololmaydi. Genetik malumotlarning konyugatsiya usulida uzatilishi enterobakteriyalarda yaxshi organilgan. Konyugatsiya jarayoni boshqa rekombinatsiya turlari singari bir turdagi bakteriyalar ora- sidagina emas, balki turli xil bakteriyalar orasida ham borishi mumkin. Bunday hollarga rekombinatsiya turlari orasidagi rekombinatsiya deyiladi. Plazmidalar Plazmidalar bu bakteriya hujayrasining uncha katta bolmagan xromosomadan tashqaridagi DNK molekulasi. Ular sitoplazmada joylashgan va doira tuzilishiga ega. Plazmidalar bir qancha genlar saqlaydi, ular DNK hujayrasida uchraydigan genlarga qaramasdan mustaqil ravishda uchraydi. Plazmidalarning asosiy belgilaridan biri mustaqil ravishda genlarning yangilanishiga xizmat qilishidir. Ular bir hujayradan boshqa hujayraga otishi va tashqi muhitdan ozlariga yangi genlarni qabul qilishi mumkin. Profaglar lizogen hujayralarda nasldan naslga uzatiladi va qator ozgarishlarni keltirib chiqaradi, masalan, toksin hosil qilish xos- sasi. F omil alohida joylashgan va konyugatsiya jarayonida ishtirok etadi. R omil hujayraga dorivor mahsulotlarga chidamlilikni oshirishni uzatadi (R omilni birinchi bolib ichak tayoqchasida, song shigellalarda ajratib olingan). Òekshirishlar shuni korsatadiki, R omillar hujayradan ajralib chiqishi mumkin, bu plazmidalarga xosdir. R omil turigina turlar orasidagi va plazmidalarga xosdir. R omil turigina turlar orasidagi va hatto avlodlar orasida transmissiv xossaga ega, bu atiðik shtammlarga tashxis qoyishda qiyinchiliklar tugdirishi mumkin. Bakteriotsinogen omillar (col omil), birinchi bolib ichak tayoqchasida (E.coli) aniqlandi, shuning uchun u kolotsin deb nomlandi. Keyinchalik boshqa bakteriyalarda vabo vibrioni vibriotsinlar, stafilokokklarda stafilotsinlar va boshqalarda aniqlandi. Col omil bu plazmidaning kichik alohidaligidir. U oqsil mod- dalar sintezini buzadi. Qondosh yoki shu turdagi bakteriyalar olimiga sabab boladi. Bakteriotsinlar oziga mos hujayra yuzasiga yopishadi va metabolizmni buzadi, bu hujayrani nobud qiladi. 91 Ozgaruvchanlikning amaliyotdagi ahamiyati Paster suniy ravishda qutirish, kuydirgi qozgatuvchilarida qay- tarib bolmaydigan ozgarishlarning oldini oladigan va bu kasalliklardan himoya qiladigan vaksinalar yaratdi. Keyinchalik mikroorganizmlarning genetikasi va ozgaruvchanlikni organish natijasida, vaksina tayyorlash uchun qollaniladigan kop miqdorda bakteriya va virus shtammlari olish imkoni yaratildi. Mikroorganizmlar genetikasini organish natijalari, yuqori orga- nizmlarning irsiyatini aniqlashda muvaffaqiyatli qollaniladi. Genetikaning yangi bolimi gen injenerligi katta ilmiy va amaliy ahamiyatga ega. Gen injenerligi usuli genlarning tuzilishini ozgartirish va bakteriya xromosomasiga muhim hamda kerakli moddalar sinteziga javobgar boshqa organizmlar genini kiritishga imkon yaratadi. Hozirgi vaqtda bu usulda insulin, interferon va boshqa tibbiy preparatlar olinmoqda. Mutagen omillar va seleksiyani qollashda mutant pro- dutsent 1001000 marta faol antibiotikdan olinmoqda. 1. Irsiyat nima? 2. Gen regulatorlarining roli qanday? 3. Dissotsiatsiya nima va siz qanday dissotsiatsiya shaklini bilasiz? 4. Modifikatsion ozgaruvchanlik nima, ularni qanday xossalari mavjud? 5. Mutatsion ozgaruvchanlik nima va ular qanday shakllarda namoyon boladi? 6. Plazmidalar nima? 7. Ozgaruvchanlikning tibbiyot amaliyotida ahamiyati. 10-bob. INFEKSIYA HAQIDA TALIMOT Infeksiya yoki infeksion jarayon (lotin. infectjo yuqtiraman, ifloslantiraman) kasallik tugdiruvchi mikroorganizmlarning kirishi va bolinib kopayishidan hosil boladigan hamda rivojlanadigan belgilar yigindisidir. Infeksiyaning namoyon bolishi turlicha, bu mikroorganizmlar xossasiga, mikroorganizmlar holatiga va orab turgan sharoitiga bogliq. Infeksion jarayonning oxiri, yani namoyon boladigan darajasi infek- sion kasallik hisoblanadi. ? Nazorat uchun savollar 92 Infeksion kasalliklar avvaldan malum. Juda qadim otmishdan bu kasalliklarning kelib chiqish sabablari togrisida toliq tasavvurga ega bolishmagan va buni Olloh tomonidan berilgan jazo, deb hisoblashgan. Lekin Giðpokrat, XVI asrda D. Frakastoro va boshqalar yuqumli kasal- liklar bemordan sog odamga otadigan maxluqqa bogliqdir, deydilar. XIX asr ortalarida L. Paster, R. Kox, I.I. Mechnikov, D.I. Iva- novskiy va boshqa olimlar infeksion kasallikning qozgatuvchisi bolib, mikroorganizmlar hisoblanishini isbotlab berishdi. Odamning har qanday infeksion kasalligiga muayyan turdagi mikroorganizmlar sabab bolishi haqidagi masala uzil-kesil hal etildi. Infeksion kasalliklar quyidagi xossalari bilan tavsiflanadi: 1. Infeksion kasalliklar mikroorganizmlar tasirida yuzaga keladi. 2. Bemordan sog odamga yuqadi. 3. Aholi orasida keng tarqalib sporadik, epidemiya, endemiya va pandemiyalarni keltirib chiqaradi. 4. Infeksion kasalliklar malum davrlarda, yashirin (inkubatsion), darak beruvchi simptomlar (prodromal), kasallikning asosiy klinik belgilari namoyon boladigan davri. 5. Kasallikdan song immunitet yuzaga keladi (butun umrga mustahkam, kuchsiz). Kasallik keltirib chiqaruvchi patogen mikroorganizmlar quyidagi xossalari bilan tavsiflanadi: 1. Patogenlik xossasi. 2. Virulentlik xossasi. 3. Spetsifiklik xossasi. 4. Òoksigenlik xossalari. Patogen mikroorganizmlar tarifi Mikroorganizmlarning makroorganizmlarda patologik jarayonni, yani kasallikni keltirib chiqarish xususiyatiga patogenlik deyiladi (lotin. pathos uqubat, genos tugilish). Bu xususiyati bolgan mikro- organizmlarni patogen mikroorganizmlar deyiladi. Patogenlik bu genga shartlab qoyilgan tur xususiyatdir. Kopgina patogen mikroorganizmlar spetsifiklik xossasiga ega, yani shu turdagi mikroorganizmlar oziga xos kasalliklarni keltirib chiqa- radi, masalan, vaboni vabo vibrioni, sozakni gonokokk va b. Bir turga kiruvchi u yoki bu shtammlar turli xil patologik tasir etishi mumkin. Patogenlik tasirining olchov birligi virulentlik deyiladi. Virulentlik mikroorganizmlarning barcha xossalari ozgarishi mumkin. Bu ozgarishlar fenotiðik xarakterga ega bolib, hujayra 93 genining buzilishi natijasi hisoblanadi, bunda ular nasldan naslga otadi. Virulentlikning susayishini yuzaga keltiruvchi fenotiðik ozgarishlar, mikroorganizmlar noqulay sharoitga tushganida, masalan, ularga turli xil fizikaviy va kimyoviy omillar tasir etganda hosil boladi. Bu ozga- rishlar mikroorganizmlar qulay sharoitga tushganda qayta tiklanadi, virulentlik yana ortadi. Virulentlikning barqaror pasayishi uzoq vaqt turli xil moddalar tasir etganda yuzaga kelishi mumkin. Kalmet va Geren sil bakteriyalaridan tirik vaksina BSJni oldi. Olimlar 13 yil kulturani buqa ot suyuqligi qoshilgan oziqa muhitga ekdilar. Bunda safroga yuqori chidamli avirulent bakteriya hujayrasi seleksiyada (tanlash) katta orin egalladi. Boshlangich kulturalarda ular miqdori kop emas (ularning populatsiyadagi xossalari korinmadi). Mikroorganizmlarga sezgir hayvonlarda passajlash orqali virulentlikni oshirish mumkin boldi. Bunda seleksiyada virulentlikning asosiy populatsiyasi alohida orin tutadi. Mikroorganizmlarning virulentligi ularning adgeziyaga (yopishish), kolonizatsiya (kopayish), invaziya (toqimalarga mikroorganizm kirishi) va fagotsitozni toxtatish qobiliyatiga bogliq. Adgeziya mikroorganizm hujayrasini oziga sezgir malum xojayin organizmiga shimilish xususiyati. Kolonizatsiya hujayra devoriga mikroblar yopishishi (masalan, vabo vibroni enterotsidlarda bolinib kopayishi) yoki yopishgan mikroblar hujayra ichiga kirishi (masalan, dizenteriya qozgatuvchilari yogon ichakning toqimasida bolinib kopayishi) mumkin. Invaziyalik biriktiruvchi va boshqa toqimalar otkazuvchan- ligi buzilishi (oshirilishi) mikrob fermentlarining xususiyatiga bogliq. Bunday fermentlarga: a) gialuronidaza (tarqalish omili) biriktiruvchi toqimaning gialuron kislotasini parchalaydi va shuningdek, mikroblarning toqimaga kirishiga imkoniyat yaratib beradi; b) neyraminidaza turli xil toqimalar tarkibiga kiruvchi glikopro- teidlar, glikotsidlar, polisaxaridlardan neyramin kislotasini ajratib oladi. Fagotsitozni toxtatish bu funksiyani bakteriyaning kapsulasi bajaradi. Òurli xil mikroorganizmlar kapsulasi tarkibiga kiruvchi moddalar har xil bolib, ularning funksiyalari ham turlicha, quyidagi qozgatuvchisining kapsulasidagi poliðeptid uni fagotsitlar ushlab olishidan saqlaydi. Kok yiring tayoqcha polisaxaridlari bakteriyani ushlab oladi va hujayra ichida hazmni kechiktiradi. Yuqorida aytib otilgan omillardan tashqari, mikroblar ayrim fermentlar fagotsitozidan himoyalanadi. Masalan, stafilokokk koagulaza plazmaning ivishiga yordam beradi, bu mikrob hujayrasi atrofida himoya 94 «gilof»ni hosil qiladi, fibrinolizin fibrinni eritadi, shu bilan mikroblar tarqalishiga imkon yaratadi. Mikroblarning toksinlarni sintezlash xossasi virulentlikda muhim ahamiyatga ega. Mikroorganizmlar hosil qiladigan zaharli moddalar ikki guruhga bolinadi ekzotoksinlar va endotoksinlar (8-jadval). 8-jadval Endo- va ekzotoksinlarning xossalari r a l n i s k o t o z k E r a l n i s k o t o d n E il t a i b a t li s q O i s k e l p m o k n i e t o r p d i r a x a s il o p o ð i L a g ti h u m i q h s a t n a d a r y a j u H a n i g n o s o i d a n a l a y i z u ff i d q il g o b n a li b i s a n a t a r y a j u h b o r k i M il r a h a z il h c u K il r a h a z m a K b a l n a t a g a m i q o t a v o z A i d a t a s r o k r i s a t i n it a l o h a y i s t a k i s k o t n i y i m u m U i d a r a q i h c b i r it l e k li b a l o m r e T li b a t s o m r e T a g n i s k o t a n a a d i r i s a t n il a m r o F i d a n a l y a n a m s i q a d i r i s a t n il a m r o F i d a n a l z i s r a r a z r a l a y i r e t k a b t a b s u m m a r G i d a r a q i h c b a l h s i b a l h s i r a l a y i r e t k a b y if n a m m a r G i d a r a q i h c Ekzotoksinlar tashqi muhitga yengil diffuziyalanadigan mikro- organizmlar metabolizmining mahsuloti hisoblanadi. Ular oqsil tabiatli bolib, bu ularni tashqi muhitga chidamli qiladi, lekin botulizm neyrotoksin, stafilokokk va vabo enterotoksinlari bundan xoli, ular qaynatilganda tez parchalanadi. Ekzotoksin hosil qiladigan mikroorganizmlar kirgan yerda joyla- shadi (kirish darvozasida) va ular hosil qilgan toksinlar makroorga- nizmlarda aylanib yuradi, masalan, qoqshol, bogma va b. Ekzotoksinlar juda zaharliligi va spetsifikligi organotropligi bilan xarakterlanadi. Òoksinning har bir turi malum bir toqimani shikastlaydi. Masalan, qoqshol ekzotoksini nerv sistemasiga zarar yetkazadi, natijada bemorning muskullari tortishadi (spazm), bogma ekzotoksin yurak-qon tomir sistemasiga, buyrakusti bezlariga zarar yetkazadi va h.k. Biologik faolligiga kora, toksinlar bir xil emas: ularning ayrimlari kasallik belgilarini toliq keltirib chiqaradi, masalan, qoqshol, bogma, botulizm toksinlari. Qolganlari infeksion jarayonning kelib chiqishida qisman ishtirok etadi, masalan, stafilokokk, ichak tayoq- chasi va boshqalarning gemolitik toksini. 95 Ekzotoksinlar tashqi muhitga singib ketadi. Ularni olish uchun mikroblar suyuq oziqa muhitlarida 37°C da 512 kun undiriladi. Bunday shorvada yetarli miqdorda ekzotoksin toplanadi. Shunday shorva filtrlansa, olingan suyuqlikda toksin boladi. Hozirgi vaqtda qator ekzotoksinlar sof holda ajratib olingan va toliq organilgan. Òozalangan toksinlar yuqori toksigenlik xossasiga ega. Òoksinlarning faol markaziga kimyoviy va fizikaviy omillar tasir ettirilib, toksinning zaharli tasirini bartaraf qilish mumkin. Ekzotok- sinlarni 0,4 % formalin tasirida, 3940°C da 34 hafta saqlaganimizda, ular zaharli xossasini yoqotadi, lekin antigenlik xossasini saqlab qoladi. Bunday preparatlar vaksinaga oxshab tayyorlanadi va anatok- sinlar deb ataladi. Endotoksinlar liðopolisaxaridprotein kompleksidan iborat, mikroorganizm hujayrasiga mustahkam boglangan. Ular spetsifik emas. Organizmga kiritilganda bosh ogrigi, darmonsizlik, halloslash va shu kabi umumiy zaharlanish belgilarini yuzaga chiqaradi. Endotoksinlarning mikrob hujayrasi bilan bogliqligi uni harorat va tashqi muhit omillarga chidamli qiladi. Endotoksin olish uchun mikrob hujayrasini parchalash lozim. Òoksin tasirini ularga sezgir hayvonlarda aniqlanadi. Masalan, bogma toksinini dengiz chochqachasida, botulizm toksinini oq sichqonlarda va boshqalarda organiladi. Virulentlik va mikrob toksinlarining kuchini ifodalovchi malum birlik bor: DLM, DCJ, D50, DLM (Dosis letalis mimuima). Mikrob yoki toksinning eng kam dozasi laboratoriya hayvonlarining kop qismini olimiga sabab boladi. DCL (Dosis certe letalis) laboratoriya hayvonlarini 100 % olimga olib keluvchi mikroblar yoki toksinlar dozasidir. DL50 (Dosis letalis) laboratoriya hayvonlarining 50 % ini olimga olib keluvchi mikrob yoki toksin dozasidir. Virulentlik va toksin kuchining miqdori mikrob turi shtammiga, toksin turiga, shuningdek, yuborish usuliga bogliq. Òoksin kuchini aniqlash uchun tekshirish materialidan qator suyultirish darajalarini tayyorlab olinadi, har bir suyultirish darajasidan shu toksinga sezgir bolgan qator hayvonlarga yuboriladi. Infeksion jarayonning paydo bolishida mikroorganizmning ahamiyati Infeksion jarayonning yuzaga chiqishi malum darajada makroor- ganizmlar reaktivligiga, kasallik tugdiruvchi mikroblar va zahar- larning organizmga tushishiga bogliq. Bunga quyidagi omillar katta ahamiyatga ega. 96 Odamning yoshi. Yoshning ahamiyati organizm fiziologik xususiyati, jumladan, moddalar almashinuvi tabiati bilan belgilanadi. Malumki, 6 oylikkacha bolgan bolalarda qizamiq, skarlatina (qizilcha), bogma juda kamdan kam kuzatiladi, lekin shu kasalliklar 1 yoshdan 8 yoshgacha bolgan bolalarda koproq uchraydi. Katta yoshdagi kishilar zotiljamni ogir otkazadi. Bundan tashqari, shunday infeksion agentlar mavjudki, ular turli yoshdagi organizmlarni bir xilda jarohatlaydi, masalan, griðp. Nerv sistemasining holati. Nerv sistemasining ruhiy siqilishi infeksion kasalliklarning kelib chiqishiga va ogir otishiga sabab boladi, chunki bunda mikroorganizm himoya mexanizmining faolligi pasayadi. Endokrin sistemasining holati. Endokrinologiya kasalliklari bilan kasallangan organizmda (diabet, qalqonsimon bez funksiyasining buzilishi va h.k.) kopincha yiringli yalliglanish jarayonlari yuzaga keladi, bunga organizmning himoya kuchi kamayishi sabab boladi. Ovqatlanish. Och qolish yoki uzoq vaqt toyib ovqat yemaslik kopgina infeksion kasalliklarni keltirib chiqaradi. Sil, vabo, dizenteriya va boshqa infeksiyalar toyib ovqat yemaslik, och qolish natijasida kelib chiqadi. Ovqatda oqsil miqdorining yetishmasligi oqsil almashinish jarayoni buzilishiga olib keladi va natijada och qolish yuzaga keladi. Bu esa immunoglobulin sintezini, fagotsitoz faolligi pasayishini keltirib chiqaradi. Hujayralar fagotsitoz faolligining susayishi A vitamin yetish- masligi natijasida ham kelib chiqishi mumkin. Bu teri va shilliq qavatlarda yalliglanish yuzaga kelishiga sababchi boladi. B va C vitamini yetish- masligi organizmni sil, bogma, stafilokokk, streptokokk va boshqa kasalliklarga moyil qiladi. Normal mikroflora organizmning himoya funksiyasida katta ahamiyatga ega. Masalan, ichak tayoqchasi yogon ichakda doimo yashaydi, u qorin tifi va boshqa ichak patogen mikroorganizmlariga oldiruvchan tasir korsatadi. Òashqi muhit omillarining infeksion jarayon kelib chiqishi va rivojlanishiga tasiri Organizm sovqotishi uning kopgina patogen va shartli patogen mikroorganizmlarga nisbatan chidamliligini susaytiradi. Masalan, sovuq havo va namlikning birgalikdagi tasiri nafas yoli shilliq qavatining chidamliligini susaytiradi, bu esa kasallikni keltirib chiqaradi. Ortiqcha issiqlash uzoq vaqt va kuchli quyosh nuri tasiri, ionlovchi radiatsiyaning yuqori, kasb zararliklari (issiq sexlardagi yuqori haroratdan nurlanish, kimyoviy moddalardan zaharlanish, kislorod yetishmasligi, 97 jismoniy va aqliy toliqish va b.) infeksion kasalliklar kelib chiqishiga sabab boladi. Shu bilan birga, yomon sanitariya-gigiyenik sharoit, tiqilinch yashash, sanitariyaga xilof sharoit, madaniy saviyaning pastligi qozgatuvchini doimo aylanib yurishiga qulay muhit tugdiradi, bunday vaziyatda osongina yangi kasalliklar kelib chiqadi. Shunday qilib, mikroorganizmlar virulentligi makroorganizm holati va tashqi muhit omillarining munosabati infeksion jarayon kelib chiqishi hamda kechish xarakterini aniqlaydi. Infeksiyaning tarqalish mexanizmi Infeksiya qozgatuvchilarini tarqatuvchi manba odam yoki hayvon hisoblanadi. Kasal odam yoki hayvon infeksiya tarqalishida asosiy rolni oynaydi, bemor chiqindilari (najas, siydik, balgam va h.k.)da mikrob- lar juda kop boladi. Òuzalayotgan davrdagi bemor (rekonvalessent), soglom bakteriya tashuvchilar ham infeksiya manbai hisoblanadi. Infeksiya manbaining xarakteriga kora, barcha infeksion kasal- liklar ikki guruhga bolinadi: infeksiya manbai odam hisoblansa antroponoz infeksiya, infeksiya manbai hayvon hisoblansa, zoonoz infeksiya deyiladi. Infeksiyaning tarqalish mexanizmi turlichadir. Har bir turdagi mikroorganizm uchun bemor organizmi (yoki bakteriya tashuvchi organizmi)da malum joyda joylashishi aniqlangan. Odamdan infeksiya otish yollari juda xilma-xil bolishi mumkin. 1. Alimentar yol orqali qozgatuvchilar ichak ajratmasi bilan tashqi muhitga tushadi va oziq-ovqatlar mana shunday qozgatuvchilar bilan ifloslanadi, bu oziq-ovqatlarni odam istemol qilishi natijasida kasallik yuqadi. Masalan, ich terlama, dizenteriya va h.k. 2. Havo orqali, yani havo-tomchi yoli orqali bemor orga- nizmida qozgatuvchi nafas yolida joylashadi va u aksirganda, yotal- ganda va gaplashganda tashqi muhitga chiqaradi. Masalan, bogma, kokyotal, griðp va boshqalar. Bundan tashqari, havo changi orqali ham yuqadi, yani chang bilan havoga kotarilishi, hayvon juni qayta ishlanayotgan vaqtlarda havoga otadi. Masalan, sil, kuydirgi, tulyaremiya va h.k. 3. Suv orqali organizmdan ajralgan najas, siydik tarkibidagi qozgatuvchilar suvga tushadi. Masalan, vabo, dizenteriya, ich terlama. 4. Kontakt yol orqali yani togridan togri bemor bilan aloqaga otganda, masalan, zaxm, sozak, OITS va boshqalar. Bundan tashqari, bemorning tevarak-atrofidagi narsalar (mebel, idish-tovoq, kiyim-kechak, oyinchoq va h.k.) orqali yuqadi. Masalan, gepatit, bogma, griðp. 98 5. Òransmissiv yol bilan qon soruvchi hasharotlar orqali (bit, kana, burga, chivin va b.), infeksiya mikrobi qonda bolganda, shu usulda yuqadi. Bunga bezgakning Anofeles chivinlari orqali yuqishi, toshmali va qaytalama tiflarning bit orqali yuqishi misol bola oladi. 6. Mexanik yol pashsha, suvaraklar orqali yuqishi. Ular oz oyoqlarida qozgatuvchilarni tashiydi. Masalan, gepatit, dizenteriya va b. 7. Infeksiya tuproq orqali otishi mumkin, masalan, qoqshol, gazli gangrena shu orqali tarqaladi. 8. Vertikal yol orqali ona homiladorlik vaqtida yuqumli kasallik bilan kasallansa, homila ham shu kasallik bilan kasallanishi mumkin, masalan, gepatit, sil, zaxm va b. Kirish darvozalari bu patogen mikroorganizmlarni xojayin organizmiga kiradigan azo va toqimalar. Masalan, ich terlama qozgatuvchisi faqat ogiz orqali tushgandagina, gonokokk qozga- tuvchisi faqat koz va jinsiy yol shilliq qavatiga tushgandagina kasallikni keltirib chiqaradi. Agar boshqa yol orqali organizmga kirsa, kasallik keltirib chiqarmaydi va mikroorganizmlar nobud boladi. Ayrim mikroorganizmlar, masalan, toun (chuma), tulyaremiya, kuydirgi xojayin organizmning turli qismlaridan kirib, kasallik keltirib chiqarishi mumkin. Bunday hollarda kirish darvozalari bu kasallikning shakllarini belgilab beradi (teri, opka, ichak shakllari va b.). Organizmning kirish darvozalari ikkiga bolinadi: teri va shilliq qavatlar. Jarohatlangan teri orqali organizmga qozgatuvchi kirib kasallikni keltirib chiqaradi, masalan, qoqshol, gazli gangrena va b. Jarohatlanmagan teri (teri teshikchalari) orqali organizmga mikroor- ganizm kirib, kasallik keltirib chiqaradi. Masalan, furunkul, karbunkul, milkak va b. Shilliq qavatlar koz shilliq qavati orqali (masalan, konyunk- tiva), quloq shilliq qavati (otit), burun shilliq qavati (griðp), ogiz shilliq qavati (ich terlama), jinsiy azolar shilliq qavati (zaxm) orqali organizmga mikroblar kirib, kasallik keltirib chiqaradi. Organizmga kirgan qozgatuvchilar limfogen, gematogen, nerv tolalari va toqimalar orqali tarqaladi. Infeksion kasalliklarning kechish dinamikasi Infeksion kasalliklar dinamikasi bir necha davrlar yigindisini tashkil etadi. Infeksion kasalliklar boshqa «yuqumsiz» bilangina emas, balki qanday otishi va klinik belgilari bilan ham farq qiladi. Infeksion kasalliklar infeksiya yuqqandan keyin darrov yuzaga chiqmaydi, bu 99 yashirin davr, deb ataladi. Bu qozgatuvchisi organizmga kirganda, toki, biron-bir kasallik belgilari paydo bolguncha davrni oz ichiga oladi. Bu davrda qozgatuvchilar organizmda bolinib kopayadi, toksinlari toplanadi. Bu davr turli kasalliklarda turlicha muddatda otadi. Masalan, qorin tifi 14 kun, skarlatina (qizilcha) va bogmada 57 kun, kokyotalda 8 kun, qizamiqda 1011 kun, griðpda 23 kun, quturishda oylab va moxov kasalligida 30 yillab choziladi. Inkubatsion (yashirin) davrdan keyin darak beruvchi simptomlar (prodromal) davri boshlanadi. Bu davrda barcha kasallikka xos klinik belgilar namoyon boladi (bosh ogrishi, harorat kotarilishi, holsizla- nish, toliqish, ishtaha yoqolishi va b.). Bu davr bir necha soatdan 3 kungacha davom etadi. Bu davrda taxminiy tashxis qoyiladi. Asosiy klinik belgilarning rivojlanish davri har bir mikroorganizm turiga qarab, har qanday kasallikning oziga xos klinik belgilari yuzaga keladi. Bu davrda kopincha harorat kotarilishi, nafas azolari, hazm qilish azolari, yurak-qon tomir sistemasi funksiyasining buzilishi, toshma toshishi, qon tarkibining ozgarishi va boshqalar yuzaga keladi. Infeksiya turiga qarab, bu davr turlicha muddat davom etadi. Infeksion kasalliklar klinik tekshirishlar yoli bilan emas, labo- ratoriyada (mikrobiologik) tekshirish usullarini tatbiq etish yoli bilan ham aniqlanadi. Bundan tashqari, laboratoriyada tekshirish usullari infeksion kasallikni barvaqt aniqlashga imkon beradi, bu esa bemorni soglom kishilardan oz vaqtida ajratish uchun shartdir. Sogayish davri kasallik belgilarining yoqolishi organizm fiziologik funksiyasini tiklanishi bilan xarakterlanadi. Kasallik tola tuzalishi, vaqtida davolanmagan va ozboshimchalik bilan davolangan hollarda surunkali shaklga otishi, olim yoki nogironlik bilan tugashi mumkin. Infeksion jarayonning shakllari Qozgatuvchining organizmga kirish yoliga qarab, ekzogen va endogen infeksiyalar tafovut etiladi. Ekzogen infeksiya organizmga tashqi muhitdan qozgatuvchi tushishi natijasida yuzaga keladigan infeksiya. Endogen infeksiya (autoinfeksiya) organizmning ozidagi mikroor- ganizmlar tasirida yuzaga keladigan infeksiyadir. Bunday qozgatuvchi organizmga kerakli flora tarkibida uchray- di. Ular organizmning himoya xossasi susayganda kasallik kelib chiqishga sababchi bolib hisoblanadi. Kasallikning kechish muddatiga kora, otkir va surunkali infek- siyalarga bolinadi. Otkir infeksiya qisqa vaqt (bir haftadan bir 100 oygacha) davom etishi bilan xarakterlanadi. Masalan, griðp, qizamiq, vabo, ich terlama va b. Surunkali infeksiya uzoq vaqt (oylab, yillab) davom etadi. Masalan, bezgak, zaxm, sil, brutselloz va b. Agar infek- siya bir turdagi mikroorganizm tasirida kelib chiqsa, monoinfeksiya deyiladi. Organizmga bir vaqtning ozida 23 xil mikrob yuqishi natijasida kelib chiqadigan infeksiyaga aralash infeksiya deyiladi. Asosiy kasallikka (masalan, griðpga) qoshimcha boshqa infeksiya qozgatuvchisi yuqishi (masalan, stafilokokk yoki streptokokk) natijasida yuzaga keladigan infeksiyaga ikkilamchi infeksiya deyiladi. Biror infeksiyani boshdan kechirgan kishi shu kasallikning takror yuqishi natijasida yana osha infeksiya bilan kasallansa, reinfeksiya deyiladi, masalan, saramas, sozak va b. Retsidiv organizmda qolgan qozgatuvchilar hisobidan kasallik belgilarining qaytarilishidir (masalan, qaytalama tif, bezgak va b.), bunda organizmga qaytadigan qozgatuvchi tushmaydi. Birlamchi infeksiya tugaguncha shu infeksiyani qozgatgan mikrob turi takror yuqsa, superinfeksiya deyiladi, masalan, bezgak. Ayrim infeksion kasalliklar yashirin, kasallik belgilarisiz otishi mumkin. Infeksiyaning bunday turi latent infeksiya deyiladi, masalan, sil kasalligi belgisiz otadi. Kasallikning yana bir belgisiz otadigan turi mikrob tashuvchanlik hisoblanadi. Bu kasallikdan song klinik tuzalish davri boshlanadi, kasallanib otgach organizmda qozgatuvchilar qoladi va tashqi muhitga chiqariladi. Masalan, ich terlama, dizenteriya tayoqchalarini tashuvchilar. Ayrim hollarda mikrob tashuvchi bemor yoki patogen mikroblar kasallik tashuvchilar bilan kontaktda bolganda, soglom odamlarda ham yuzaga kelishi mumkin. Organizmda qozgatuvchining joylashishiga kora, quyidagilarga bolinadi: infeksiya ochogi mikroblar mahalliy joylashadi, bu joydan tashqariga tarqalmaydi. Masalan, angina, furunkulyoz va b. Umumlashgan (tarqalgan) mikrobning agressiv kuchi organizm- ning himoya mexanizmini yengib, qozgatuvchi mahalliy ochoqdan chiqib butun organizmga tarqaladi. Infeksiya qozgatuvchisining malum vaqtda qonga otib tarqalishi, lekin bolinib kopaymaslik holatiga bakteriyemiya deyiladi. Infeksiya qozgatuvchisining qonda uzoq vaqt saqlanib, bolinib kopayishiga sepsis yoki septitsemiya (lotin. sepsis yiringli qon) deyiladi. Masalan, toun, kuydirgi, yiring chaqiruvchi kokklar va b. Sepsisda kasallik belgilari bir xil boladi, qozgatuvchining turiga bogliq bolmaydi. Sepsis natijasida turli xil azolarda yiringli ochoqlar hosil boladi, bu septikopiyemiya deyiladi. Qonda toksinlarning aylanib yurishi toksinemiya, viruslarning aylanib yurishi virusemiya deyiladi. 101 Infeksion kasalliklarning tarqalish yollari Infeksion kasalliklar yuqumliligi bilan tavsiflanadi va aholi orasida keng tarqalishi mumkin. Yuqumli kasalliklar aholi orasida tort shaklda tarqaladi. Epidemiya infeksiyaning malum hududda (tuman, qishloq, shirkat xojaligi, shahar) tarqalish shakliga aytiladi. Epidemiya haddan tashqari keng tarqalib, butun mamlakatlarni va hatto qitalarni oz girdobiga olsa, pandemiya deyiladi. Masalan, X va XIV asrda toun pandemiyalari, XIX asrda Osiyo vabosining bir necha pandemiyalari bolgan. 19181919-yillarda griðp pandemiyasi (ispanka) roy berib, butun dunyo boyicha 20 mln.dan ortiq kishi olgan, 1957-yilda esa yer yuzi aholisining qariyb 1 / 3 qismi griðp bilan ogrigan. XX asr vabosi bolmish OITS ham, 2000-yildagi griðpning tarqalishi ham bunga misol bola oladi. Infeksion kasalliklarning yakka-yakka uchraydigan turiga sporadik tur deyiladi, masalan, qoqshol, gazli gangrena va b. Nihoyat, infeksion kasalliklarning yana bir tarqalish shakli endemiya ham bor. Muayyan joyda infeksiya manbai borligiga kora yoki infeksiyani tashuvchi hasharot osha joyda ozi uchun qulay sharoit topganligiga kora, ana shu joyda infeksiyaning uzoq davom etishi epidemiya deyiladi. Bazi joylarda bezgak (Anafeles) chivinlarining bolalashi uchun qulay botqoqliklar borligi, yomon jarohat, pappata- chi isitmasi (iskabtopar chivinlar, flebotomuslar borligi) va boshqa kasalliklarning epidemiya shaklida tarqalganligi misol bola oladi. Infeksion kasalliklarning paydo bolish va tarqalish sabablarini organish boshqa infeksiyalarni yoq qilish imkonini beradi. Aholini soglomlashtirishga qaratilgan profilaktik tadbirlar, infeksiyaning tarqalishiga yol qoymaydigan sharoit tugdirish eng asosiy vazifadir. Aholi yashaydigan joylarni sanitariya jihatidan obod qilish, suv manbalarini qoriqlash, oziq-ovqatlarni sanitariya nazoratidan otkazish, infeksion kasalliklarni barvaqt aniqlash, bemorlarni tez ajratib qoyish va kasalxonaga yotqizish, tevarak-atrofdagi kishilarni tekshirib, batsilla tashuvchilarni aniqlash kabi umumiy tadbirlar infeksion kasalliklarga qarshi kurashda birinchi darajali ahamiyatga ega. Bemorning chiqindilarini, buyumlarini, binoni dezinfeksiya qilish, dezinfeksiya (infeksiya tashuvchi hasharotlarni yoq qilish) va deratizatsiya (kemiruvchilarni yoq qilish) katta ahamiyatga ega. Aholi ortasida sanitariya maorifini keng yolga qoyish goyat muhim tadbirlardan hisoblanadi. Sanitariya maorifining vazifasi 102 infeksion kasalliklarning mohiyatini, sabablarini, tarqalish yollarini va oldini olish usullarini, xususan, shaxsiy gigiyena, ayniqsa, qolni toza tutish, turar joy, hovli va tevarak-atrofdagi hududni sanitariya jihatidan obod qilishning ahamiyatini, sanitariya postlarning rolini va shunga oxshashlarni tushuntirib berishdan iborat. 1. Infeksion jarayon nima? 2. Patogenlik va virulentlik nima? 3. Ekzo- va endotoksinlar qanday farqlanadi? 4. Infeksiya qozgatuvchisining tarqalish mexanizmi qanday? 5. Infeksion jarayonning kelib chiqishi va kechishida mikroorganizm- lar, tashqi muhit omillari qanday rol oynaydi? 6. Infekson kasalliklarning rivojlanish dinamikasi qanday? Biologik tekshirish usullari Laboratoriya hayvonlari ustida olib boriladigan tekshirish usuliga biologik tekshirish usuli deyiladi. Bu tekshirishlarning maqsadi: tekshirish materiallaridan mikroorganizmlarni ajratib olish, ayniqsa, oziqa muhitga ekib ajratib olishning iloji bolmagan hollarda, masalan, virusli kasalliklar, rikketsiya va mikroblar bilan ifloslangan tekshirish materiali, sof kulturani ajratib olish, suniy oziqa muhitida mikrob- larning bolinib kopayishi, ajratib olingan mikroorganizmlarning xossalari (virulentlik va b.)ni aniqlashning iloji bolmagan hollarda bu usul qollaniladi. Eksperimental yuqtirish ayrim infeksion kasalliklarni tiklash, infeksiya va immunitetga tegishli qator savollarning yechimini topishda, immunologik preparatlarning beradigan natijalarini, ularning reaktivlik va ogohlantiruvchi xossalarini aniqlashga yordam beradi. Laboratoriya hayvonlarini tanlashda, uning tekshirilayotgan infeksiyaga sezuvchanlik darajasini etiborga olish, bu qozgatuvchi tabiiy sharoitda uning organizmida kasallik keltirib chiqarmasligini bilish lozim. Laboratoriya hayvonlarining turlari Òajriba uchun kopincha oq sichqonlar, kalamushlar, dengiz chochqachalari, quyonlar tanlanadi. Ayrim maxsus tekshirishlarda laboratoriya hayvonlaridan maymunlar, mushuklar, itlar, otlar, yirik va mayda shoxli hayvonlar, yovvoyi hayvonlar (olmaxon, yumron- qoziq, yovvoyi kalamushlar, dala sichqoni), shuningdek, qushlar ? Nazorat uchun savollar 103 (tovuq, kaptar va b.) tanlanadi. Maxsus laboratoriyalar ham mavjud bolib, ularda aseptik sharoitda ostirilgan mikrobsiz hayvonlarda tekshirish ishlari olib boriladi. Mikroorganizmlarning mikrobsiz hayotini organadigan fanga «Gnotobiologiya» deyiladi. Òekshirish maqsadlaridan biri shuki, mikroorganizmlarda fiziologik va patologik jarayonlarda normal hamda ozgargan mikrofloraning rolini organishdir. Laboratoriya hayvonlarini saqlash Òajriba uchun qollaniladigan hayvonlar maxsus sharoitlarda saq- lanadi. Buning uchun maxsus xonavivariy mavjud. Vivariyda laboratoriya hayvonlari qafaslarda yoki bankalarda saqlanadi. Har bir tur hayvon alohida saqlanadi. Vivariy xonasi issiq, yorug va quruq bolishi lozim. Ularni tabiiy sharoitda parvarish xonalarida urchitiladi. Parvarishxonadan keltirilgan hayvonlar karantin xonasiga otkaziladi. Vivariy qator maxsus va qoshimcha xonalar: karantin, soglom hayvonlar saqlanadigan, yuqtirish va jarrohlik xonasi, oshxona va boshqa xonalardan iborat. Òalabga javob beradigan vivariy xonalarining ikki eshigi bolishi lozim, bundan infeksiya tarqalib ketgan hollarda foydalaniladi. Hayvonlarning umumiy holati har kuni tekshirib turiladi. Ulardagi barcha ozgarishlar (holsizligi, ishtahasining yoqligi, infiltrat hosil bolishi) yoki ularning nobud bolishi maxsus jurnalga yozib qoyiladi. Vivariy xonalarini tozalashga maxsus kiyimlar: xalat, fartuk, rezina qolqop, romol va shiðpak kerak boladi. Agar ota xavfli infeksiya bilan ishlanayotgan bolsa, qoshimcha kleyonkali fartuk, rezina etik, yengcha, niqob kozoynaklar kiyilishi lozim. Òozalashni qafas va bankalardagi kasallangan va olgan hayvonlarni korishdan boshlanadi. Song suv va ovqat solingan idishlar olinib, ovqat qoldiqlaridan tozalanadi, yaxshilab yuviladi, shisha idishlar qaynatiladi. Shundan song maxsus metall qirgichlar bilan qafasdagi axlat tozalanadi va ovqat solinadigan idishlar joyiga qoyiladi. Haftasiga bir marta qafas va bankalar issiq suv bilan yuvilishi, dezinfeksiya qilinishi yoki avtoklavda zararsizlantirilishi lozim. Qafaslar tozalangandan song xona tozalanadi. Shundan song barcha axlatlar pechkada yondiriladi. Olgan hayvonlar yoriladi va ular ham nazoratchilar (shifokor yoki laborant) yordamida hamda ishtirokida yondiriladi. Vivariyda ishlaydigan xodimlar qollarini yaxshilab dezinfeksiya qilishlari va yuvishlari lozim. Hayvonlarni ovqatlantirish Hayvonlarni toliq va togri ovqatlantirish katta ahamiyatga ega. Har bir tur hayvonni ovqatlantirish meyori Sogliqni saqlash vazir- 104 ligi tomonidan ishlab chiqilgan meyor asosida ovqatlantiriladi. Bu meyorga donli aralashmalar, sabzavot-mevalar, xashak, pichan, hayvon mahsulotlari va boshqalar kiradi. Mahsulotlar miqdori va xarakteri hayvonning turiga, tajribaning maqsadiga bogliq. Hayvonlarni yaxshi saqlamaslik, togri va toliq ovqatlantirmaslik ularni kasallikka moyil qilib qoyib, tajriba notogri chiqadi. Hayvonlarni tajribaga tanlash va tayyorlash Òajribaga har qanday hayvonni bir parvarish xonasidan olgan maqul. Òajribaga malum tur, zot, jins, yosh va bir xil ogirlikdagi hayvonlar tanlanadi. Òanlangan hayvonlar toza qafas yoki bankaga solinadi. Qafas ichiga xashak yoki qiðiq solinadi. Mayda hayvonlarni, masalan, oq sichqonlarni 56 tadan qilib qafasga solishimiz mumkin. Hayvonlar boshqa xonalarga qafas yoki bankalarga solib olib chiqiladi. Òajribadan oldin hayvonlarning ogirligi va harorati olchanadi. Haroratni olchash uchun simobli termometr ishlatishdan oldin u zararsizlantiriladi, quruq qilib artiladi va vazelin surtib, togri ichakka kiritiladi. Òermometrni kiritish chuqurligi hamma hayvonlarda bir xil, masalan, dengiz chochqachalarida 3,5 sm. Shuning uchun termometr rezinali halqasigacha kiritiladi. Harorat 5 daqiqa davomida olchanadi, natija maxsus jurnalga yoziladi. Hayvonlarga belgi (markirovka) qoyish Òajribaga olingan har bir hayvonga turiga qarab belgi qoyiladi. Masalan, oq sichqon va kalamushlarga turli qismlari boshi, yelkasi, oldingi ong oyogi, chap oyogi va boshqa qismlari toyingan spirtli boyoqlar fuksin, gensian binafshasi, kaliy permanganat, xrizoidin va boshqa boyoqlar yordamida boyaladi. Boyalgan qismi jurnalga raqam bilan yozib qoyiladi. Masalan, oldingi ong oyogi ¹ 3. Yirik hayvonlar, masalan, quyon, dengiz chochqachalari va boshqalarning esa quloqlariga uch raqamli metall tamgachalar taqiladi. Bu tamgachalarning markazi kengaygan va ikki chetida uchli tishcha- lari boladi. Òamgani quloqqa taqishdan oldin 23 soat spirtga solib qoyiladi va hayvonning qulogi spirt bilan artiladi, songra quloqqa taqiladi va ikki chetidagi tishlari bilan mahkamlanadi. Parrandalar va qushlarning oyogiga raqam yozilgan halqachalar taqiladi. 105 Laboratoriya hayvonlarini zararlash Òajriba otkazishdan oldin hayvonlar qafaslardan olinadi. Ular tishlab yoki tirnab olmasliklari uchun kalamush va sichqonlar dumidan ushlanadi, quyon va dengiz chochqachalari esa yelka teri- sidan ushlanadi. Harakatini chegaralash uchun ular fiksatsiya qilinadi, buning uchun turli xil taxtalar, qutili bokslar, plastinkalar va boshqalar qollaniladi. Òekshirish materiali hayvonning qayeriga yuborilishiga qarab tanlanadi. Masalan, quyonning quloq venasiga modda yuboriladigan bolsa, boshi chiqib turadigan qutili boksdan, qorniga yuboriladigan bolsa, taxtadan, oyogiga yuboriladigan bolsa, turli qismlari ochiladi- gan qutili bokslardan foydalaniladi. Oddiy usullardan biri sochiqqa orab fiksatsiya qilishdir. Sichqon- larni dumidan ushlab aylantirilganda, ular boshi aylanganidan hara- katlana olmaydi. Shundan chap qol bilan sichqonning yelka terisidan ushlanib, kichik barmoq bilan esa dumi siqiladi. Bu maqsadda boshqa usullardan ham foydalanish mumkin. Laboratoriya hayvonlarini zararlash uchun qollaniladigan asboblar (igna, shpris, pinset, skalpel va b.) sterilizatsiya qilingan bolishi kerak. 1. «Biologik usul» deb nimaga aytiladi? 2. Laboratoriya hayvonlarini tajribaga tayyorlashda nimalarga etibor berish lozim? 3. Òajribaga qanday hayvonlar olinadi? 4. Vivariy xonasi qanday talablarga javob berishi va qanday bolimlardan iborat bolishi kerak? 5. Laboratoriya hayvonlari qanday belgilanadi? 6. Laboratoriya hayvonlari nima uchun va qanday fiksatsiya qilinadi? 7. Hayvonlarni zararlash uchun asboblar qanday tayyorlaniladi? Laboratoriya hayvonlarini zararlash usullari Òekshirish materiallarini teri osti, teri ichi, teri usti, mushak orasi, qorin boshligi, venaga, ogiz orqali, nafas yoli orqali, koz va boshqalarga yuboriladi. Òekshirish materialidan teriga yuborishdan oldin, albatta, hayvon juni olib tashlanishi lozim. Songra teri yoki yodning spirtli eritmasi bilan yaxshilab artiladi va zararlovchi material yuboriladi. ? Nazorat uchun savollar 106 Ò e r i o s t i g a . Quyonlarning yelka qismi, dengiz chochqa- chalarining qorin yoki biqin terisi ostiga, sichqon va kalamushlarning yelka qismi terisi ostiga yuboriladi. Òanlangan qismdagi teri ikki barmoq markaziga ushlab olinib, biroz yuqori kotariladi, buklama markaziga tekshirish materiali yuboriladi. Ò e r i i c h i g a bu usuldan allergik sinamalarini qoyishda keng foydalaniladi. Korsatkich va katta barmoqlar yordamida teri taranglashtiriladi va ignaning kesilgan qismi yuqoriga burchak hosil qilib kiritiladi. Dori yuborilgan joyda biroz shish hosil boladi va u tez tarqab ketadi. Ò e r i u s t i g a material tomizilib, teri maxsus kesuvchi uskuna bilan qirqiladi. M u s h a k o r a s i g a y u b o r i s h . Òekshirilayotgan material son muskuli orasiga yuboriladi. Buning uchun chap qolning korsatkich va bosh barmogi bilan muskul ushlanib, ong qol bilan burchak ostida igna kiritiladi. Q o r i n b o s h l i g i g a y u b o r i s h . Bunda hayvonning boshi pastga qilib ushlanadi (ichki azolari diafragmaga yaqinlashishi uchun). Igna qorinning pastki qismiga kiritiladi, orta chiziqdan biroz chek- lanish lozim, bu ichakni zararlanishdan saqlaydi. V e n a i c h i g a y u b o r i s h . Bunda hayvon turiga qarab vena tanlanadi: quyonlarning quloq venasiga, sichqon va kalamushlarning dum venasiga, dengiz chochqachasining yuragiga yuboriladi, chunki ularning venasiga tushib va uni topib bolmaydi. Dengiz chochqa- chasining yuragiga dori yuborish uchun avval barmoq yordamida igna kiritiladi. Igna yurakka kirganda shprisda qon korinadi, shunda tekshirish materialini yuborish mumkin boladi. Vena va yurakka material yuborilayotganda shprisda havo bolmasligi kerak. H a z m q i l i s h a z o s i g a y u b o r i s h . Buning bir qancha usullari bor. Masalan, tekshirish materiali oziq-ovqatga aralashtirib yedirilishi, zond yordamida yuborilishi mumkin. N a f a s y o l i o r q a l i y u b o r i s h . Òekshirish materiali shpris yordamida burun boshligiga yuboriladi. Efirga namlangan paxta hayvonga hidlatiladi, bunda hayvon chuqur-chuqur nafas oladi va burunga tomizilgan materialni ham nafas yoliga kiritadi. Ikkinchi usulda hayvon osmonga qaratib yotqiziladi va tekshirish materiali piðetkada uning burun boshligiga tomiziladi. K o z s h i l l i q p a r d a s i g a y u b o r i s h . Birinchi usulda koz qovogi ochilib, piðetkada tekshirish materiali tomiziladi. Ikkinchi usulda igna yordamida, konyunktiva ostiga tekshirish materiali yuboriladi. Uchinchi usulda, koz muguz pardasi qirqilib, tekshirish materiali shu qirqilgan joyga yuboriladi. 107 Laboratoriya hayvonlarini yorish Olgan hayvonlarni yorib organish hayvon organizmidagi ozgarishlar xususiyati qozgatuvchining organizmda tarqalishi, uning joylashishi va bakteriologik tekshirishlar olim sabablarini aniqlashga yordam beradi. Ayrim hollarda kasallanib olmagan hayvonlarni ozimiz oldirishimizga togri keladi, buning bir necha usullari mavjud. Eng kop qollaniladigan usullardan biri hayvonni ogzi yaxshi yopiladigan idishga solish va unga efir yoki xloroformga namlangan paxta tashlashdir. Shunda hayvon bir necha daqiqa ichida nobud boladi. Bundan tashqari, yana quyidagi usullar ham qollaniladi: sichqon va mayda hayvonlarning boshi kesib tashlanadi, quyonlarning yuragi yoki venasiga havo yuborilib, emboliya hosil qilinadi. Y o r i s h . Hayvonlarni yorish alohida xonalarda, maxsus stollarda olib boriladi. Stolda hayvonni yorish uchun barcha steril asboblar: qaychi, skalpel, pinset, shpris ignasi bilan, spirt lampasi, spirt, paxta, paxta tampon, bakteriologik qovuzloq piðetka, buyum oynacha- lari, Petri kosachasi va probirkalarda oziqa muhiti (oziqa muhiti qozgatuvchining turiga qarab tanlanadi) va boshqalar bolishi lozim. Òajriba boshlanishidan oldin tana yorilib, undagi ozgarishlarning barchasi bayonnomalashtirilishi lozim. Bayonnomada hayvonning turi, tartib raqami, zararlash yoki yorish vaqti, tekshirish materiali, hayvonning nobud bolgan vaqti, kuzatilgandagi ozgarishlar va bosh- qalar yoziladi. Yorish bir qancha bosqichlarda olib boriladi: 1) hayvonni fiksatsiyalash; 2) tashqi korinishini kuzatish; 3) yorish va kokrak qafasini kuzatish; 4) qorin boshligini yorish va kuzatish. Fiksatsiya. Hayvon qorni yuqoriga qilib yotqiziladi, oyoqlari tort tomondagi halqa yoki ilgichga mahkamlanadi va tortiladi. Òashqi korinishni kuzatish. Dezinfeksiyalovchi moddaga namlangan paxta bilan hayvonning tanasi artiladi. Òerining korinishi kuzatiladi va qindan iyagigacha orta chiziq boyicha yoriladi. Buning uchun qollaniladigan asboblar artiladi, yondiriladi va almashtirib turiladi. Pinset yordamida teri ushlanib, skalpel bilan qirqib teriosti kletchatkasidan ajratiladi. Òeri, qoltiqosti va chot bezlari, teriosti yoglari, tomirlarining kengayganligi, qon quyilishlar, yiringli ochoqlar va boshqalar belgilanadi. Agar ozgarishlar bolsa, surtma tayyorlanadi va maxsus oziqa muhitiga ekiladi. Kokrak qafasini yorish. Kokrak suyagi ikki tomondan qovurga ulangan togay boyicha kesiladi va kokrak suyagi olib tashlanadi. Opka, 108 yurakning rangi, kattaligi, konsistensiyasi tekshiriladi. Agar ozgarish- lar bolsa, oziqa muhitiga ekiladi va ozgargan qismidan surtma tayyorlanadi. Opkadan bir bolak kesib olib suv solingan bankaga solinadi, agar opka soglom bolsa, suv yuzasiga qalqib chiqadi, kasal opka esa chokadi. Yurakdan qon olinib oziqa muhitiga ekiladi. Qorin boshligini yorish. Òeri kotarilib qindan diafrag- magacha, songra ikki yoniga qarab kesiladi. Qorin boshligidagi barcha ozgarishlar kuzatiladi. Ozgargan azolardan olib oziqa muhitiga ekiladi, surtma preparat va surtma tamga preparati tayyorlaniladi. Hayvon yorib bolingandan song stol yaxshilab tozalanadi. Hayvon maxsus idishga (masalan, chelakka) solinib, javobgar shaxs ishtirokida yondiriladi yoki avtoklavda zararsizlantiriladi. Agar hayvon jasadini zararsizlantirishning iloji bolmasa, dezinfeksiyalovchi moddaga solib qoyiladi. Òaxta yoki stol spirt bilan artib zararsizlantiriladi. Asboblar dezinfeksiyalovchi eritmalarda zararsizlantirilib, keyin 3040 daqiqa sterilizatorda qaynatiladi. Sporali kultura bilan ishlanganda avtoklavda zararsizlantiriladi. Ekilgan muhitlar termostatda qoldiriladi. Mikrobiologiya amaliyotida hayvonlardan donor sifatida ham foydala- niladi. Qon va qon zardobi oziq muhit ingrediyenti sifatida, shuning- dek, emlangandan song immunologik xossasini aniqlashda qollaniladi. Kopincha quyon, dengiz chochqachasi, bazi hollarda sichqon va kala- mushlar, yirik shoxli hayvonlardan ot, qoy, buqa qonlari keng qollaniladi. Hayvonlardan qon olish usullari Quyonlarning quloq venasidan, kalamush va sichqonlarning dum venasidan, dengiz chochqachalarining yuzaki venalari yaxshi rivojlanmaganligi sababli yuragidan, yirik hayvonlar (ot, qoy)ning boshi va yuragiga boradigan kok tomirdan qon olinadi. Quyonning qulogidan qon olish uchun quloq yungdan tozalanadi, zararsizlan- tiriladi, barmoq bilan urib yoki issiq suvga namlangan paxta bilan artib, quloq venasi quloq pastidan siqilib qizartirib olinadi. Songra tajriba olib boruvchi odam bosh va korsatkich barmogi bilan quloqning pastki qismidan ushlaydi va shprissiz ignani kiritadi, qonni probirkaga oladi. Igna chiqarilib spirt yoki yod bilan igna chiqarilgan joy zararsiz- lantiriladi. Sichqon yoki kalamushlardan qon olish uchun uning dumi kesiladi, undan oqqan qon probirkaga yigiladi yoki piðetkaga sorib olinadi. Qonni toxtatish uchun vodorod peroksid yoki spirt alangasiga kuydiriladi. Yurakdan qon olish uchun hayvon gorizontal holda yotqizilib, fiksatsiya qilinadi. Yungi olinadi, zararsizlantiriladi, chap qol barmogi bilan urayotgan yurak topiladi va shu yerga igna kiritiladi. Agar igna yurakka kirsa, shprisga qon oqadi. Olinadigan qon miqdori hayvon turiga va ogirligiga bogliq boladi (9-jadval). 109 9-jadval Laboratoriya hayvonlaridan olinadigan qonning maksimal miqdori i r u t n o v y a H g n i n r o n o D a h c a t r o g ,i g il r i g o a d .l m ,i r o d q i m n o Q n o q i g r a f a s r i b a d h s i r a q i h c i n n o q a m m a h a d h s i r a q i h c n o y u Q 0 0 0 4 0 0 0 3 0 3 5 2 0 5 1 0 3 1 z i g n e D i s a h c a q h c o h c 0 0 5 0 0 4 2 1 0 1 0 5 0 4 h s u m a l a K 0 0 2 0 5 1 5 3 8 6 Hayvonlardan bir safar qon olinganda unga tana haroratigacha isitilgan fiziologik eritma yuboriladi, uning miqdori olingan qon miqdoriga bogliq boladi. Hamma qon uyqu arteriyasidan chiqariladi. Bunda hayvon gorizontal holda yotqizilib, unga efir hidlatiladi, shun- dan song boyin qismi zararsizlantirilib, uyqu arteriya topib kesiladi va qon steril idishga olinadi. Yurak va boshqa azolar uqalanganda, qoshimcha qon chiqadi. Bu usulning kamchiligi shundan iboratki, bunda hayvon nobud boladi. Qonga ishlov berish va uning tarkibiy qismlarini ajratib olish Fibrinsiz qon tayyorlash. Olingan qon shisha munchoq solingan kolba yoki bankaga solinadi va 1520 daqiqa chayqatiladi. Bunda fib- rin quyuqlashgan holda munchoqqa yopishadi. Fibrindan tozalangan qon alohida steril idishga solinadi. Sitratli qon tayyorlash. Qonga uning ivishi oldini oluvchi modda 5 % li sitrat eritmasi 1:10 (10 ml qonga 1 ml natriy sitrat eritmasi hisobida) qilib aralashtiriladi. Plazma olish. Plazma sitratli qondan olinadi. Qon sentrifugalanadi yoki muzlatkichda 1820 soatga qoldiriladi. Natijada chokma ostida sariq rangli suyuqlikplazma hosil boladi. Qon zardobini ajratib olish. Qon 1 soatga xona haroratida yoki termostatda (37°C da 30 daqiqaga) ivishi uchun qoldiriladi. Hosil bolgan quyuq modda probirka devoridan piðetka yoki qovuzloq yordamida olib tashlanadi. Probirkani muzlatkichda 1 soatga 110 (48 soatdan oshmasligi lozim) quyuq moddalardan tozalashga qoldiriladi. Vaqt otgach, probirkadagi zardob alohida steril idishga ajratib olinadi. Zardob tiniq bolishi lozim. Eritrotsit osilmasini tayyorlash. Qon 1520 daqiqa davomida 2000 3000 aylanma tezlikda sentrifugalanadi. Eritrotsitlar chokmaga tushadi, uning ustiga sargish-qizil xloridning izotonik eritmasi quyiladi, yana sentrifuga qilinadi. Eritrotsitlarni bunday yuvish 23 marotaba, toki chokma ustidagi suyuqlik tiniqlashguncha takrorlanadi. Oxirgi toza suyuqlik tokilib, eritrotsit eritmasi qoldiriladi, buni 23 kun qollash mumkin. Eritrotsitlarni uzoq vaqt qollash uchun ularni formalin bilan qayta ishlash lozim. 50 % li osilma olish uchun bir qism eritrotsitga ikki qism pH i 7,2 bolgan bufer eritma, shuncha miqdorda 3 % li formalin eritmasi quyiladi. Hosil bolgan eritma suv hammomida 37°C da 23 soat ushlanadi. Har 1520 daqiqada chayqatib turiladi, song termostatda (20 soat 37°C da) ushlanadi. Ertasi kuni probirkani termostatdan olib xuddi shu eritma bilan sentrifuga qilinadi, chokma ustidan suyuqlik tokib tashlanadi. Chokmaga yana bufer eritma solinadi, usti mahkam yopilib, 4°C da saqlanadi. 1. Biologik usul deb nimaga aytiladi? 2. Laboratoriya hayvonlarini tanlashda nimaga etibor berish lozim? 3. Òajriba uchun qanday bolimlardan foydalaniladi? 4. Vivariy qanday bolimlardan iborat va ular qanday talablarga javob berishi lozim? 5. Laboratoriya hayvonlari qanday belgilanadi? 6. Siz hayvonlarni qanday zararlash usullarini bilasiz? 7. Laboratoriya hayvonlari qaysi usulda yoriladi? 8. Laboratoriya hayvonlarini yorish qanday bosqichlardan iborat? 9. Ishlatilgan asboblar qanday zararsizlantiriladi? 10. Laboratoriya hayvonlaridan qon qanday olinadi? 11. Hamma qonni chiqarish nima degani? 12. Sitratli qon, fibrinsiz qon, qon qismlaridan plazma, zardob, eritrotsit osilmasi qanday olinadi? 11-bob. IMMUNIÒEÒ HAQIDA ÒUSHUNCHA Immunitet deb, organizmning barcha begona agentlar, shuningdek, kasallik chaqiruvchi mikroorganizmlar va ularning toksinlarini yuqtirmaslik xossasiga aytiladi (lotin. immunitas biror nimadan qutulish). ? Nazorat uchun savollar 111 Organizmga genetik jihatdan begona agentlar antigenlar tushganda, qator mexanizm va omillar tasirga otib, begona agentlarni aniqlaydi va zararsizlantiriladi. Organizm himoya reaksiyalari ichki muhitning gomeostaz doimiyligi buzilishiga qarshi kurashuvchi azo va toqima sistemasi immunosistema deyiladi. Immunologiya immunitet haqidagi talimot bolib, begona moddalarga va mikroorganizmlarga, begona toqima va xavfli osmalarga nisbatan organizmning reaksiyasini organadi. Immunologiya asosida tabiat kuchi bilan boladigan kuzatishlardan odam ozini yuqumli kasalliklardan suniy ravishda himoya qilish imkoni yotadi. Epidemiya ochogida odamlarni kuzatish natijasida hamma ham kasallanaver- maydi, degan xulosaga kelindi. Òoun bilan xastalanib tuzalgan bemorda kasallik qaytarilmaydi, qizamiq bilan faqat bir marotaba kasallanadi, sigir chechagi bilan kasallanganlar chinchechak bilan kasallanmaydi. Malumki, qadimgi xalqlar ilon chaqishidan himoyalanish uchun kesilgan teriga ilon zahari surtilgan osimliklarni boglaganlar, podadagi mollarni yirtqich hayvon hamlasidan himoya qilish uchun kesilgan teriga shu kasallik bilan ogrib olgan hayvon opkasi boglangan. Yuqumli kasalliklarning oldini olish maqsadida suniy emlashni birinchi bolib E. Jenner 1876-yili kashf etgan. L. Paster esa yuqumli kasalliklarning suniy himoyalash qoidalarini ilmiy asoslab bergan. U kuchsizlantirilgan qozgatuvchilar bilan zararlash organizmni shu qozgatuvchi bilan qayta toqnashganda yuqmasligini isbotlab bergan. L. Paster quturish va kuydirgi kasalliklaridan himoyalovchi preparat- larni ishlab chiqqan. Keyinchalik I.I. Mechnikovning hujayra immuniteti (fagotsitoz) va P. Erlixning (kasallik yuqmasligidagi) gumoral omillar ahamiyati haqidagi ishlari immunologiyaning rivojlanishiga olib keldi. Immunitetning asosiy turlari 10-jadvalda korsatilgan. 10-jadval IMMUNITET TURLARI Tugma immunitet (turlari) Òabiiy Orttirilgan Faol Passiv Faol Passiv Suniy X X X X X X X X 112 Òugma immunitet turlari Òugma (tur) immunitet bu berilmaslik xossasining mustahkam va zamonaviy shakli bolib, chidamlilik omillari bilan nasldan naslga otishiga asoslangan. Malumki, odam, yirik shoxli hayvonlar va it tounga sezuvchan emas, hayvonlar esa vabo va bogma bilan kasallan- maydi. Lekin tugma immunitet mutlaq emas, yani mikroorganizm uchun noqulay sharoit yaratish bilan uning yuqtirmaslik xossasini ozgartirishi mumkin. Masalan, ortiqcha issiqlash, sovqotish, avitaminoz, gormonlarning tasiri odam yoki hayvon uchun tegishli bolmagan kasalliklarni yuzaga keltiradi. Paster tovuqlarni sovqottirish yoli bilan ularga suniy ravishda kuydirgi qozgatuvchisini yuborgan va kasallikni yuzaga keltirgan, tovuqlar tabiiy sharoitda, kuydirgi kasalligi bilan kasallanmaydi. Orttirilgan immunitet Orttirilgan immunitet odam hayoti davomida orttiriladi, nasldan naslga otmaydi. Òabiiy immunitet. Òabiiy faol immunitet kasallik bilan ogrib otgandan keyin yuzaga keladi (u postinfeksiya deyiladi). Kopgina hollarda u uzoq vaqt saqlanadi, qizamiq, suvchechak, toun va boshqa kasalliklardan song yuzaga keladi. Shuningdek, ayrim kasalliklarda immunitetning muddati 1 yildan oshmaydi (griðp, dizenteriya va b.). Ayrim hollarda tabiiy faol immunitet kasallik yuzaga chiqmasidan ilgari hosil boladi. U yashirin (latent) infeksiya yoki qozgatuvchining kichik dozada qayta-qayta yuqtirish natijasida hosil boladi (maishiy, turmish immunizatsiyasi). Òabiiy passiv immunitet bu chaqaloqlar (platsenta) immuniteti bolib, homila ona qorindaligidayoq orttiriladi. Shuningdek, chaqaloqlar ona suti orqali ham immunitetni orttirishi mumkin. Immunitetning bu turi uzoq davom etmaydi, 68 oydan song yoqolib ketadi. Lekin tabiiy passiv immunitetning ahamiyati katta, u chaqaloqlarni yuqumli kasalliklarga chalinmasligini taminlaydi. Suniy immunitet (faol immunitet) odamda immunizatsiya (emlash) natijasida orttiriladi. Immunitetning bu turi organizmga kuchsizlantirilgan yoki turli usulda oldirilgan bakteriya, ularning zaharlari, viruslar yuborilgandan song hosil boladi. Masalan, kokyotal, bogma, chechak kasalliklariga qarshi immunitet shular jumlasidan. Bunda organizmda faol qayta qurilish yuzaga keladi, yani qozgatuvchi va toksinlarga oldiruvchi tasir korsatuvchi modda (antitelo) hosil boladi. Shuningdek, hujayra xossasining ozgarishi 113 mikroorganizmlar va ular ishlab chiqaradigan moddalarga tasir korsatadi. Suniy faol immunitet sekin-asta, 34 hafta ichida hosil boladi va 1 yildan 3 oygacha saqlanadi. Suniy passiv immunitet organizmga tayyor antitelo yuborish natijasida yuzaga keladi. Immunitetning bu turi organizmga antitelo, zardob va immunoglobulin yuborilgan zahoti hosil boladi va faqat 1520 kungacha saqlanadi, songra antitelolar parchalanib, orga- nizmdan chiqib ketadi. «Mahalliy immunitet» tushunchasini fanga A.M. Bezredko kiritgan. U organizm toqimalari va alohida hujayralar malum moyillika ega, deb hisoblaydi. Ularni emlash infeksiya qozgatuvchilari kiritish uchun tosiq hosil qiladi. Hozirgi vaqtda umumiy va mahalliy immunitetning birligi isbotlangan. Lekin alohida toqima va azolarning mikroorga- nizmlarni yuqtirmasligi katta ahamiyatga ega. Antimikrob immunitet turli xil mikroorganizmlar keltirib chiqara- digan kasalliklardan song yoki vaksinat (kuchsizlantirilgan tirik yoki oldirilgan mikroorganizmlardan tayyorlangan vaksinalar) yuborilganda, hosil boladi. Antitoksik immunitet bakteriyalarning zaharli toksinlariga nisbatan hosil boladi. Antivirus immunitet virusli kasalliklardan song hosil boladi. Immunitetning bu turi uzoq davom etadi va mustahkam (qizamiq, chechak va b.) boladi. Shuningdek, faol virusli immunitet virusli vaksinalar bilan emlangandan song hosil boladi. Bundan tashqari, organizmni kasallik qozgatuvchisidan tozalanish davriga kora ham, bolishimiz mumkin. Steril immunitet kopgina qozgatuvchilar bemor tuzalganda, organizmdan yoqoladi. Immunitetning bu turi steril immunitet deyiladi (qizamiq, chechak va b.). Sterillanmagan immunitet infeksiya qozgatuvchining moyilligi xojayin organizmida bolgan davrdagina saqlanib turiladi. Bunday immunitet sterillanmagan yoki infeksion immunitet deyiladi. Immunitetning bu turi sil, zaxm va ayrim boshqa infeksiyalarda kuzatiladi. Odamning yuqumli kasalliklar yuqtirmasligi spetsifik va nospetsi- fik himoya omillarida oz aksini topadi. Nospetsifiklik deb, organizmning tugma xususiyatiga aytiladi, bu odam tanasi yuzasidagi va organizm ichidagi turli xil mikroorganizmlarni yoqotishga imkon beradi. Spetsifik himoya omili organizm qozgatuvchisi yoki toksinlar bilan toqnashganda hosil boladi, bu omillarning tasiri faqat shu qozgatuvchilar yoki ularning toksinlariga qarshi qaratilgan boladi. 114 Organizmning nospetsifik himoya omili Organizmni turli xil mikroorganizmlarning zaharlari tasiridan himoya qiluvchi mexanik, kimyoviy va biologik omillari mavjud. Òeri. Jarohatlanmagan teri mikroorganizmlarning kirishi uchun tosiq bolib hisoblanadi. Bunda mexanik omillardan teri va yog bezlari ajratmalari teridagi mikroorganizmni yoqotishga yordam beradi. Kimyoviy omillarda ham ter (yog va ter) bezlari ajratmalari himoya rolini bajaradi. Ular ozida bakteriotsid (bakteriyalarni oldirish) xossasiga ega bolgan yog va sut kislotalarini saqlaydi. Biologik himoya omillari teri normal mikroflorasining patogen mikroorganizmlarga oldiruvchan tasiriga asoslangan. Shilliq qavatlari. Òurli azolarning shilliq qavatlari mikroorganizm kirishi uchun tosiq bolib hisoblanadi. Nafas yolining mexanik himoyasi tebranuvchi kiðrikchalari bor epiteliylar yordamida amalga oshiriladi. Yuqori nafas yoli epiteliy kiðrikchalarining harakati ogiz va burun boshligi yonalishi boyicha mikroorganizmlarni harakatlanishiga tosqinlik qiladi. Burun boshligidagi tukchalar ham bakteriyalarga shunday tasir korsatadi. Aksirish va yotalish mikroorganizmlarning chiqib ketishiga yordam beradi va aspiratsiya (nafas orqali organizmga kirishi)ning oldini oladi. Koz yoshi, solak, ona suti va organizmdagi boshqa suyuqliklar ozida lizotsim moddasini saqlaydi. U mikroorganizm- larga oldiruvchi (kimyoviy) tasir korsatadi. Shuningdek, shilliq qavatlarning normal mikroflorasi biologik himoya omili sifatida patogen mikroorganizmlarga antagonist bolib hisoblanadi. Yalliglanish mikroorganizmning begona zarrachalarga nisbatan reaksiyasidir. Yalliglanishning sabablaridan biri organizmga infeksiya qozgatuvchilarining kirishidir. Yalliglanishning yuzaga kelishi mikroorganizmni oldirishga yoki ulardan ozod bolishga olib keladi. Yalliglanish shikastlanish ochogida qon va limfa bezlarining buzilishi bilan ifodalanadi. Bu haroratning kotarilishi, shish, qizarish va ogriq bilan kechadi. Nospetsifik himoyaning hujayraviy omillari fagotsitoz Yalliglanish mexanizmining asoslaridan biri fagotsitoz bak- teriyalarni yutish jarayoni hisoblanadi. Fagotsitoz jarayonini birinchi bolib I.I. Mechnikov tariflagan. U fagotsitozni bir hujayrali amyoba- larda organishdan boshlagan, amyobalar uchun fagotsitoz jarayoni oziq-ovqatlarni hazm qilish tarzi hisoblanadi. Hayvonot dunyosi rivojlanishida bu jarayonning turli bosqichi kuzatilgan. I.I. Mech- nikov odamda fagotsitozning maxsus hujayralarini aniqlagan. Ular yordamida bakteriyalar yoqotiladi, qon quyilish ochogida olik hujayralar shimiladi va h.k. 115 Organizmdagi turli xil hujayralar (leykotsitlar, qon tomirlaridagi endoteliy hujayralari) fagotsitar faollikka ega. Bunday faollik harakat- chan polimorf yadroli leykotsitlarda, qondagi monotsitlar va makrofag toqimalarda, suyak komigida namoyon boladi. Barcha bitta yadroli fagotsit hujayralar monokular fagotsit sistemasi (MFS) ga kiritildi. Fagotsitoz hujayra lizosomalarida 25 dan ortiq gidrolitik fer- menlar va oqsillar mavjud. Ular antibakterial xususiyatga ega. Fagotsitoz bosqichlari 1-bosqich.Yaqinlashish bosqichi. Fagotsit obyektiga (begona moddaga) oxirgi kimyoviy tasirot hisobiga yaqinlashadi. Bunday harakat musbat xemotaksis deb ataladi. 2-bosqich.Yopishish bosqichi mikroorganizmlar fagotsitga yopishadi. 3-bosqich.Yutish bosqichi. Mikroorganizmlar hujayrasi begona moddalarni yutadi, fagosomalarni hosil qiladi. 4-bosqich. Nobud bolish bosqichi. Fagolizosomalar hosil bolishi, fermentlar va bakteriotsid oqsillar ularga tushishi natijasida qozgatuv- chilar nobud boladi va hazm qilinadi. Mikroorganizmning nobud bolshi bilan tugallanadigan jarayon tugallangan fagotsitoz deyiladi. Lekin ayrim mikroorganizmlar fagotsit ichida nobud bolmaydi, balki ular bolinib kopayadi. Bularga gonokokklar, sil mikobakteriyalari, brutsellalar kiradi. Bunday jarayon tugallanmagan fagotsitoz deyiladi. Bunda fagotsitlar nobud boladi. Boshqa fiziologik funksiyalar singari fagotsitoz organizmning holatiga MNS (markaziy nerv sistemasi)ning boshqarish ahamiyatiga, yoshga, ovqatlanishga bogliq. Leykotsitlarning fagotsitoz faoliyati kopincha yuqumli bolmagan kasalliklarda tez-tez ozgarib turadi. Qator fagotsitoz korsatkichlarni aniqlash yordamida kasallikning kechishi, bemorning holati, tuzalayotgan yoki tuzalmayotganligi, olib borilayotgan davolash choralarining natijalari va boshqalarni aniqlash mumkin. Fagotsitozlarning funksional holatini baholash uchun kop hollarda yutish faolligi ikki test asosida aniqlanadi: 1) fagotsitoz korsatkichi fagotsit hujayrasining foizi (100 ta kuzatilayotgan, mikroblarni yutgan leykotsitlar miqdori); 2) fagotsit soni mikroblarni yutgan bitta leykotsit yoki boshqa fagotsitlarning ortacha miqdori. Fagotsitlarning bakteriotsid imkoniyati lizosomalar soni, hujayra- dagi fermentlar faolligi va boshqa usullar yordamida aniqlanadi. Fagotsitozning faolligi qon zardobida antitelolar opsoninlar mavjudligiga bogliq. Bu antitelolar fagotsitozni tezlashtiradi, hujayra yuzasini fagotsit tomonidan yutilishiga tayyorlaydi. 116 Fagotsitozning faolligi organizmning u yoki bu qozgatuvchiga berilmaslik darajasi bilan aniqlanadi. Ayrim kasalliklarda fagotsitoz asosiy himoya omili, boshqa kasalliklarda esa yordamchi bolib hisoblanadi. Lekin barcha hollarda hujayraning fagotsitoz xossasi yoqligi kasallikning kechishi va oqibatini keskin yomonlashtiradi. Hujayraning reaktivligi Infeksion jarayonning rivojlanishi va immunitetning shakllanishi hujayra qozgatuvchining birlamchi sezuvchanligiga bogliq. Òugma turi bir turdagi hayvon hujayrasining boshqa patogen mikroorga- nizmlarga sezuvchanligi yoqolishidir. Bu hodisaning mexanizmi toliq organilmagan. Malumki, hujayra reaktivligi turli xil omillar tasiriga (fizikaviy, kimyoviy, biologik) va yoshga qarab ozgaradi. Nospetsifik himoyaning gumoral omillari Fagotsitlardan tashqari, qonda eruvchi nospetsifik moddalar ham mavjud, ular mikroorganizmlarga oldiruvchi tasir korsatadi. Ularga komplement properdin, B-lizinlar, X-lizinlar, eritrin leykinlar, pla- kinlar, lizotsim va boshqalar kiradi. Komplement (lotin. complemantum qoshimcha) mikroor- ganizmlar va boshqa begona hujayralarni eritish xossasiga ega bolgan murakkab oqsil fraksiyali sistemadir. Masalan, eritrotsitlar. Komple- mentlarning bir qancha komponentlari tafovut etiladi. C 1 , C 2 , C 3 va boshqalar. Komplementlar 55°C haroratda 30 daqiqa davomida parchalanadi. Uning bunday xossasi termolabillik deyiladi. Shuningdek, u chayqatganda, ultrabinafsha nurlar va boshqalar tasirida parcha- lanadi. Komplementlar qon zardobidan tashqari, organizmdagi turli xil suyuqliklarda va yalliglanish suyuqligida ham aniqlangan, lekin orqa miya suyuqligida va kozning oldingi kamerasida uchramaydi. Properdin (lotin. properdi tayyorlash) magniy ioni ishtirokida komplementni faollashtiruvchi normal qon zardobi komponentlari guruhidir. U fermentlarga oxshash va organizmni infeksiyaga chidamliligida katta rol oynaydi. Qon zardobida properdin miqdorining kamayishi immunitet jarayoni faol emasligidan dalolat beradi. B-lizinlar odam qon zardobidagi termostabil (harorat tasiriga chidamli) modda bolib, mikroblarga, asosan, Grammusbat bakte- riyalarga antagonistik (oldiruvchi) tasir korsatadi. 63°C va UBN (ultra- binafsha nurlar) tasirida parchalanadi. X-lizin harorati kotarilgan bemorlarning qonidan ajratib olingan termostabil modda. Komplement ishtirokisiz bakteriyalarni, 117 asosan, Grammanfiy bakteriyalarni lizislash xossasiga ega. 70100°C harorat tasiriga chidamli. Eritrin hayvon eritrotsitlaridan ajratib olingan, bogma qozga- tuvchisi va boshqa mikroorganizmlarga bakteriostatik tasir korsatadi. Leykinlar leykotsitlardan ajratib olingan bakteriotsid modda. Issiqqa chidamli. 7580°Ñ harorat tasirida parchalanadi. Qonda juda oz miqdorda uchraydi. Plakinlar leykinlarga oxshash modda, trombotsitlardan ajratib olinadi. Lizotsim ferment, mikrob hujayrasi qobigini parchalaydi. U koz yoshida, solak, qon suyuqligida uchraydi. Koz konyunktivi (koz jildi), ogiz, burun shilliq pardalarida lizotsim modda bolganligi sababli ulardagi jarohatlar malum darajada tez tuzaladi. Shuningdek, siydik, prostata suyuqligi, turli xil toqimalarning suyuqliklari ham bakteriotsid xossaga ega. Yuqorida aytib otilgan komponentlar himoya omillarining barchasi emas. Ular orasida asosiysi antitelo immunoglobulin hisoblanadi. Antigenlar Antigenlar genetik jihatdan organizm uchun begona modda (oqsillar, nukleoproteidlar), polisaxaridlar va boshqalar, antigen tasirida hosil boladi. Ular organizmga kirganda maxsus immunologik reaksiya bilan javob qaytaradi. Shunday reaksiyalardan biri antitelo hosil bolishidir. Antigenlar ikki asosiy xossaga ega: 1) immunogenlik, yani antitelo va immunologik limfotsitlarni hosil qilish xossasi; 2) maxsus antitelo va immunologik limfotsitlar bilan ozaro tasirotga otish xossasi. Bu immunologik reaksiyalar tasirida (neytralizatsiya, lizis va b.) namoyon boladi. Bu ikki xossaga ega bolgan antigenlar tola qimmatli antigenlar deyiladi. Ularga begona oqsillar, zardoblar, hujayra elementlari, toksinlar, bakteriyalar, viruslar va boshqalar kiradi. Immunologik reaksiyalar antitelo hosil qilmaydigan moddalarga boy bolmagan antigenlar deyiladi, ular organizmdagi tayyor antite- lolar bilan ozaro reaksiyaga kirishadi, ular gaptenlar deb ham ataladi. Gaptenlar yirik molekular oqsil, polisaxaridlar bilan tola qimmatli antigenlarga aylanadi. Begonalik, yirik molekularlik, kolloidlik parchalanish xossalaridir. Òurli xil moddalarning antigenlik xususiyatini aniqlovchi shartlardan biridir. Bu begona moddalar organizmning ichki muhitiga tushganda va immunologik sistema hujayralari bilan uchrashganda antigenlik xossasi namoyon boladi. Antigenlar spetsifik xossaga ega, yani ular faqat oziga mos antitelolar bilan ozaro reaksiyaga kirishadi. Buning asosida organizm- 118 ning ichki muhiti doimiyligini saqlovchi mexanizm yotadi. Bu doimiylikni immunologik sistema taminlab turadi. Immunologik sistema ichki muhitiga kirgan begona moddalar mikroorganizmlar, ularning zaharlaridan oziga mosini tanlab oladi va ularni yoqotadi. Insonning immunologik sistemasi doimo immunologik nazoratda turadi. U begona moddalarni barcha hujayralar ichida bitta geni ozgacha bolsa ham juda yaxshi ajrata oladi. Antigenlar bir-biridan moddalar tuzilishidagi munosabatiga qarab farqlanadi bu spetsifiklikdir. Bu antigen determinanti bolib hisob- lanadi, yani antigenning kichik molekula qismini antitelo bilan birikishidir. Bunday qismlarning soni turli antigenlarda turlichadir va antitelo molekulasini korsatadi. Antigenlar tasirida hosil bolgan antitelolar bilan ozaro reaksyaga kirishish xossasi amaliyotda keng qollaniladi: 1) kasalliklarga tashxis qoyishda (bemor qon zardoblaridagi spetsifik antitelo yoki spetsifik qozgatuvchini aniqlashda); 2) yuqumli kasalliklarning oldini olishda va davolashda (immuno- terapiya yordamida qator kasallik qozgatuvchilari yoki ularning zaharlarini neytralizatsiya qilish, organizmda mikrob yoki toksinga berilmaslik xossasini hosil qilish) qollaniladi. Immunologik sistema «mos» va «begona» antigenlarni aniq farqlay oladi, asosan, u begona antigenni sezadi. Lekin xususiy antigenlarga nisbatan (lutoantigen) organizmning sezuvchanligi ortadi va bu antigenlarga nisbatan antitelo (autoantitelo) hosil boladi. Hayot davomida immun sistema bilan kontaktda bolmagan hujayralar, moddalar (koz gavhari, spermatozoidlar, qalqonsimon bez va b.) autoantigen bolib qoladi. Ular immun sistema bilan jarohat olgan hollarda qonga sorilganda aloqada boladilar. Autoantitelo hosil bolishi natijasida autoimmun kasalliklar kelib chiqishi mumkin: 1) autoantitelo oziga mos azo hujayrasiga togridan togri sitotoksik tasir korsatadi (masalan, Xasimoto buqogi qalqonsimon bezning shikastlanishi); 2) autoantigen autoantitelo kompleksining bevosita tasiri jarohatlangan azoda yigiladi va jarohatlaydi (masalan, qizil ter sili sistemasi, revmatoid artrit). Mikroorganizmlarning antigenlari. Mikrob hujayrasi ozida kop miqdorda antigen saqlaydi, ular hujayrada turlicha joylashadi va infeksion jarayon yuzaga kelishida katta ahamiyatga ega. Òurli mikroorganizm guruhida antigenlar turli xil tarkibda uchraydi. Ichak tayoqchasida O-, K-, H-antigenlari yaxshi organilgan. O-antigen mikrob hujayrasining hujayra devorida boglangan. U «somatik» antigen deb ham ataladi, chunki bu antigen tanadagi 119 (some) hujayrada saqlanadi. O-antigen Grammanfiy bakteriyalarda murakkab liðopolisaxaridprotein kompleksi (endotoksin)dan iborat. U termostabil bolib, spirt va formalin tasirida parchalanmaydi. Asosiy yadro (soche) va yonidagi polisaxarid zanjiridan tuzilgan. O-anti- genlarning spetsifikligi bu zanjirning tuzilishi va tarkibiga bogliq. K-antigenlar (kapsula) mikrob hujayrasining hujayra devori va kapsulasiga bogliq, shuningdek, ular yuzaki qobiq antigen deb ham ataladi. K- antigeni O-antigeniga nisbatan yuza joylashgan. Ular kislotali polisaxaridlar hisoblanadi. K-antigenning bir qancha turlari mavjud: A, B, L va hokazo. Bu antigenlar bir-biridan haroratga chidamliligiga kora farqlanadi. A-antigeni ancha chidamli, L-antigeni chidamsizroq. Yuzaki K-antigenga Vi antigeni kiradi, bu antigen ichterlama va ayrim boshqa ichak bakteriyalarida uchraydi. U 60°C harorat tasirida par- chalanadi. Vi antigeni mikroorganizmning virulentligiga bogliq. H-antigenlar (xivchinli) bakteriya xivchinida joylashgan. Ular ozida flagellin oqsilini saqlaydi. Qizdirilganda parchalanadi. Formalin bilan zararsizlantirilganda, oz xossasini saqlab qoladi. Himoyalovchi antigen (protektiv) (lotin. protekti himoya, himoyaga oluvchi) qozgatuvchilar tasirida odam organizmida hosil boladi. Kuydirgi, toun, brutselloz qozgatuvchilari himoya qiluvchi antigenni hosil qilish xossasiga ega. Uni jarohatlagan toqimalar suyuqligida aniqlash mumkin. Infeksion kasalliklarda laboratoriya diagnostika usullaridan biri patologik materialda antigenlarni aniqlash hisoblanadi. Antigenlarni aniqlash uchun turli xil immunologik reaksiyalar qollaniladi. Mikroorganizmlar rivojlanishida, osishida va bolinib kopayishida ularning antigenlari ozgarishi mumkin. Ayrim yuzaki joylashgan antigen komponentlari esa yoqoladi. Bu holat dissotsiatsiya deb nomlanadi. Masa- lan, S koloniyalarining R koloniyalarga dissotsiatsiyasi misol bola oladi. 1. Immunitet nima? 2. Immunitetning qanday turlarini bilasiz? 3. Nospetsifik himoya omillari nima? 4. Fagotsitoz nima? 5. Fagotsitozning qanday bosqichlarini bilasiz? 6. Òugallangan va tugallanmagan fagotsitoz deganda nimani tushu- nasiz? 7. Nospetsifik himoya gumoral omillari nima? 8. Antigenlar nima? 9. Antigenlarning asosiy xossalari qanday? 10. Mikrob hujayrasining qanday antigenlarini bilasiz ? ? Nazorat uchun savollar 120 Antitelo Antitelo antigenlar tasirida hosil boladigan immunoglobulin modda, qonning spetsifik oqsilidir. Odam qon zardobida ikki xil oqsil mavjud: albuminlar va globulinlar. Antitelolar, asosan, antigenlar tasirida ozgargan globu- linlar bilan boglanadi va ular immunoglobulin deyiladi (Iq). Globulinlar bir xil emas. Ular elektr toki otkazilganda gelda harakat- lanish tezligiga kora, uch fraksiyaga bolinadi: α , β , γ . Antitelolar globulinga taalluqli. Globulinning bu fraksiyasi elektr maydonida eng katta tezlikda harakatlanish kuchiga ega. Immunoglobulinlar molekular massasi, ultrasentrifugalangandagi chokish tezligi va boshqa xossalariga kora farqlanadi. Bu xossalari boyicha besh sinfga bolinadi: LqG, LqM, LqA, LqE, LqD. Ularning barchasi infeksion kasalliklarga qarshi hosil boladigan immunitetda katta rol oynaydi. G immunoglobulini (LqG) barcha odam immunoglobulinining 75 % ni tashkil etadi. Ular immunitet hosil bolishida faol ishtirok etadi. Immunoglobulinlar orasida yolgiz u homila orqali otib, homilada passiv immunitet hosil qiladi. Molekular massasi va ultrasentrifugalangandagi chokish tezligi katta emas. M immunoglobulini (LqM) homila organizmi zararlanganda yoki immunizatsiya qilinganda, birinchi bolib hosil boladi. Bu sinfga odamning hayoti davomida, klinik belgilari namoyon bolmaydigan infeksiya yoki kop marotaba infeksiya yuqqanda hosil bolgan normal antitelolar kiradi. Molekular massasi va ultrasentrifugalangandagi chokish tezligi yuqori. A immunoglobulini (LqA) shilliq sekretlari (moloziva solak va b.)ga kirish xossasiga ega. Ular mikroorganizmlarni nafas, meda- ichak shilliq qavatlariga kirishidan himoya qilish vazifasini bajaradi. Molekular massasi va ultrasentrifugalangandagi chokish tezligi LqG ga yaqin. E immunoglobulini (LqE) allergik reaksiyalarga javobgar hisoblanadi. Mahalliy immunitet hosil bolishida katta ahamiyatga ega. D immunoglobulini (LqD) qon zardobida oz miqdorda aniq- langan. Òoliq organilmagan. Immunoglobulinning tuzilishi. Immunoglobulin sinfi azolarining barchasi bir xilda tuzilgan. LqG molekulasi soddaroq bolib, ikki juft poliðeptid zanjiridan tuzilgan. Har bir jufti molekular massasiga kora, farqlanuvchi ogir va yengil zanjirlardan iborat. Har qaysi zanjir anti- genlar tasirida hosil boladigan ozgarishlar va genetik jihatdan aniqlangan doimiy qismdan iborat. Antiteloning bunday spetsifik qismlari faol markaz deb ataladi. Ular antitelolarni hosil qilgan antigenlar bilan 121 ozaro reaksiyaga kirishadi. Antitelo molekulasidagi faol markazlar miqdori valentlikni korsatadi antitelo boglanishi mumkin bolgan antigen molekula soni LqG va LqA ikki valentli, LqM besh valentlidir. Immunogenez antitelo hosil bolishi antigenlarning dozasi, qisqaligi va yuborish usuliga bogliq. Antigenlarga nisbatan birlamchi immun javobning ikki bosqichi farq qiladi: induktiv antigen organizmga tushganidan to antitelo hujayralari hosil bolgunicha bolgan davrni (20 soatgacha) va produktiv antigen yuborilgandan keyingi kunning oxiri va qon zardobida antitelo hosil bolishi davrini oz ichiga oladi. Antitelo miqdori sekin-asta ortib boradi (4 kun), 710-kunlari maksimal darajaga yetadi va birinchi oyning oxiriga borib kamayadi. Ikkilamchi immun javob antigen qayta yuborilganda hosil boladi. Bunda induktiv bosqich qisqa antitelo tez va shiddat bilan ishlab chiqariladi. 1. Antitelo nima? 2. Siz immunoglobulinlarning qanday sinflarini bilasiz? Immun javobning hujayraviy mexanizmi Organizmning limfa hujayralari faqat mikroorganizmlardagina emas, balki barcha genetik jihatdan begona hujayralarda immunitet hosil bolishida asosiy funksiyani bajaradi. Masalan, toqima kochirib otkazilganda, limfa hujayralari ozinikini begonadan farqlash va bego- nani yoqotish xossasiga ega. Barcha hujayralar immunologik sistemasining boshlanishi qon yuradigan tanaga oid hujayralar hisoblanadi. Keyinchalik ikki turdagi limfotsitlar hosil boladi: Ò- va B- (timustobi va bursatobi). Bu hujayralar nomlanishi ularning kelib chiqishiga bogliq. Ò- hujayralar timusda (qalqonsimon yoki ayrisimon bezda) va periferik limfa toqimalarida timusni ajratadigan moddalar tasirida hosil boladi. B-limfotsitlarning nomlanishi (bursatobe) «bursa» sumka sozi- dan olingan. Fabritsius qush sumkasida va odam B- limfotsitida hosil boladigan hujayralar bir-biriga oxshash. Lekin odamda Fabritsius sumkasiga oxshash azo aniqlanmagan. B-limfotsitlar bir necha bosqichlardan otib, plazma hujayralarini hosil qiladigan limfotsitlarga aylanadi. Plazma hujayralari antitelolarni hosil qiladi va shu antitelo yuzasida uchta immunoglobulinlar sinfi joylashadi: LqG, LqM, LqA. Maxsus antitelo mahsulotining immunologik javobi quyidagicha boladi: begona antigen organizmga kirganda, birinchi bolib makrofaglar ? Nazorat uchun savollar 122 tomonidan fagotsitozga uchraydi. Makrofaglar oz yuzasida antigen- larni qayta ishlab va jamgarib, u haqda Ò-hujayralarga malumot beradi. Ular yetila boshlaydi, bolinib kopayadi va B-limfotsitlar antitelo mahsulotlariga kiruvchi gumoral omillarni ajratadi. Oxirgilari ham plazma hujayrasida yetiladi va rivojlanadi, mos antitelolarni sintezlaydi. Makrofaglar, Ò- va B-limfotsitlarning birlashgan kuchlari orga- nizmning immunologik funksiyasini bajaradi begona genetik mod- dalardan, shu qatori yuqumli kasallik qozgatuvchilaridan himoya qiladi. Antitelo yordamida himoya shunday bajariladi: antigenga sintezlangan immunoglobulinlar antigenlar bilan birikadi, ularni parchalashga va turli xil tabiiy mexanizmlar: fagotsitlar, komplement va boshqalar yordamida zararsizlantirishga sezuvchan qilib qoyadi. 1. Immunologik javobda makrofaglarning roli qanday? 2. Immunologik javobda Ò-limfotsitlarning roli qanday? 3. Immunologik javobda B-limfotsitlarning roli qanday? Antigen va antitelolarning tasir etishi Antigen va antilelolarning tasir etish mexanizmi turli xil izohlarga ega. Erlix ularni kuchli kislota va kuchli ishqorlar birikishi natijasida yangi modda tuz hosil bolish reaksiyasiga oxshatgan. Borde antigen va antitelolar boyoq hamda filtr qogoz yoki yod va kraxmalga oxshash oz-ozini ozaro adsorbsiyalaydi, deb hisoblaydi. Lekin bu nazariyani maxsus immunologik reaksiyalar asosida tushuntira olmaydi. Antigen va antiteloning birikish mexanizmini Marrek (panjara nazariyasi) va Polinglar (ferma nazariyasi) giðotezalarida toliqroq tushuntirib beradilar. Marrek antigen va antitelo birikishini panjaraga oxshatadi, antigen antitelo bilan almashib konglomerat (aralash- quralash) panjarani hosil qiladi. Poling giðotezasiga kora, antitelolar ikki valentlikka ega (ikki spetsifik determinant), antigen esa polivalent bolib, bir qancha valentlikka ega. Antigen va antitelo birikkanda «ferma» qurilishini eslatuvchi aglomeratni hosil qiladi. Antigen va antitelo optimal nisbatda qurollanmagan, koz bilan korib boladigan mustahkam kompleksni hosil qiladi. Antigen kop bolsa, har qaysi antiteloning faol markazi antigen molekulasi bilan toladi, boshqa antigenlar molekulasi bilan birikishi uchun antitelo yetishmaydi va amalda, qurollanmagan koz bilan korib bolmaydigan kompleksni hosil qiladi. Antitelo kop bolganda panjara hosil qilish ? Nazorat uchun savollar 123 uchun antigen yetishmaydi, antitelo determinantlari va namoyon boladigan reaksiya ham bolmaydi. Bayon qilingan nazariyaga kora, antigen va antitelolarning spetsifik reaksiyalari bugunda antigen va antitelolarning faol markaz determinant guruhi ozaro tasir etuvchi sifatida tanildi, chunki antitelolar antigenlar tasirida hosil boladi, ularning tuzilishi anti- gen determinant guruhiga mosdir. Antigen determinant guruhi va antitelo faol markaz bolagi qarama-qarshi elektr zaryadiga ega va ular birikib kompleks hosil qiladi. Bu kompleksning mustahkamligi ularga tasir etuvchi muhit va komponentlar nisbatiga bogliq. Immunitet haqida nazariya immunologiya keyingi on yillarda katta yutuqlarga erishdi. Kopgina yuqumli kasalliklarning oldini olish, infeksion va qator boshqa (autoimmun, immunotanqislik) kasalliklarni davolash, rezus toqnashuv vaziyatlarda homila olimi oldini olish, toqima va azolarni kochirib otkazish, diagnostika maqsadida im- munitet reaksiyalarini qollash usullari ishlab chiqildi va takomillash- tirildi. Immunitet reaksiyalari Bir tirik organizm va laboratoriya sharoitida hosil qilinishi mumkin bolgan, antigen va antitelolar yoki antigen va sensibilizatsiyalangan limfotsitlar orasida boradigan reaksiyadir. Yuqumli kasalliklarga tashxis qoyish amaliyotida immunitet reaksiyalari XIX asrning oxiri va XX asrning boshlarida qollanila boshlandi. Yuqori sezuvchanlik (juda katta suyultirish darajasida ham antigenlarni ushlab olish) va ota spetsifik (tuzilishiga kora yaqin antigenlarni farqlash imkoniga ega)ligi sababli, ular tibbiyot va biologiyada amaliy va nazariy savollarning yechimida oz kolamini topdi. Bu reaksiyadan immunologlar, mikrobiologlar, infeksionistlar, bioximiklar, genetiklar, molekular biologlar va turli soha shifokorlari foydalanadilar. Antigen va antitelo orasidagi reaksiya serologik (lotin. serum zardor) yoki gumoral reaksiya (humor suyuqlik) deyiladi, chunki ularda ishtirok etadigan antitelo (immunoglobulin) qon zardobida uchraydi. Sensibilizatsiyalangan limfotsitlar bilan antigenlar orasidagi reaksiya hujayraviy reaksiya deyiladi. 1. Antitelolar qanday hosil boladi? 2. Antitelolar hosil boladigan qanday nazariyalarni bilasiz? 3. Antigen va antiteloning ozaro tasir mexanizmi qanday? ? Nazorat uchun savollar 124 Serologik reaksiyalar Serologik reaksiya antigen va antitelo orasidagi ozaro tasir reaksiyasi bolib, ikki bosqichda otadi: 1-bosqich spetsifik antigen va unga mos antitelolar kompleksining hosil bolishi. Bu bosqichda kozga korinarli ozgarishlar sodir bolmaydi, lekin hosil bolgan kompleks muhitdagi nospetsifik omillarga (elektrolitlar, komplement, fagotsit) sezgir bolib qoladi. 2-bosqich nospetsifik bosqich. Bu bosqichda antigen va antitelolarning spetsifik kompleksi muhitdagi nospetsifik omillar bilan ozaro tasirotga otadi, natijada reaksiya sodir boladi. Ularning ozaro tasirini oddiy koz bilan ham (yopishish, erish va b.) korish mumkin. Ayrim hollarda kozga korinadigan ozgarishlar sodir bolmaydi. Serologik reaksiyalardagi bosqichlarning korinish xususiyati an- tigen va muhit sharoitining tuzilishiga bogliq, uning antitelo bilan ozaro tasiri yuzaga keladi. Agglutinatsiya, pretsiðitatsiya, immun lizisi, komplement boglanish reaksiyasi va boshqa reaksiyalar mavjud (11-jadval). 11- jadval Serologik reaksiyada ishtirok etadigan komponent va uning muhit sharoitiga bogliqligi , a d n a g l o b o l e ti t n A n a g i d a l o b r i d o s r a l a y i s k a e r a v n e g it n A g n i n r a l o l e ti t n a i r i s a t o r a z o g n i n a y i s k a e R k if i s t e p s o n i r a lt n e n o p m o k a y i s t a n it u l g g A a y i s t a n it u l g g a m e G a y i s t a ti ð i s t e r P - e t k a b :i s i z il n u m m I - o ti s z il o m e g s i z il o i r s i z il - a l g o b t n e m e l p m o K i s a y i s k a e r h s i n a y i s t a z il a r t y e N z o ti s t o g a F r a l a y i r e t k a B r a lt i s t o r ti r E a m i q o t a v o z a , r a ll i s q O - p a g ,t a z il ,i r a lt k a r t s k e r a l n e t - ti s t o r ti r e , r a l a y i r e t k a B r a l a r y a j u h a q h s o b , r a l ,t a z il ,t a r t s k e , n e t p a G - y a j u h , r a l n e g it n a a l o t r a l a r r a l s u r i v , r a l n i s k o T r a l a y i r e t k a B r a lt il o r t k e l E ) a m ti r e k i n o t o z i ( k i n o t o z i ( ti l o r t k e l E ) a m ti r e t n e m e l p m o K t n e m e l p m o K r a lt il o r t k e l E r a lt i s t o g a F 125 Serologik reaksiyaning qollanilishi Yuqumli kasalliklar diagnostikasida serologik reaksiyalar qollanadi. Ulardan: 1) bemor qon zardobida antitelolarni aniqlash uchun, yani serodiagnostikada; 2) antigenning turini aniqlash, masalan, bemor organizmidan ajratib olingan mikroorganizmlarni aniqlashda, yani ularning identifikatsiyasida foydalaniladi (12-jadval). 12-jadval Serologik reaksiyalarning qollanilishi n a d h s i r i h s k e T d a s q a m n e g it n A o l e ti t n A t a b s u m g n i n a y i s k a e R i s a ji t a n i n o l e ti t n A h s a l q i n a ) a k it s o n g a i d o r e s ( i n n e g it n A h s a l q i n a ) a y i s t a k if it n e d i ( m u l a M - it s o n g a i d ( ) m u k m u l a m o N g n i n r o m e B i b o d r a z n o q n u m m I k it s o n g a i d ( ) b o d r a z - s i n a g n e g it n a m u l a M - r a z n o q r o m e b n a t a b . r o b o l e ti t n a a d i b o d n a g t o y a li n a g r O n a g n a l n u m m i n e g it n a . s o m a g b o d r a z Serologik reaksiyalar ilmiy tekshirishlarda va shuningdek, zardob- ning faolligini (titrini) aniqlashda qollaniladi. Serologik reaksiyani olib borish alohida tayyorgarlikni talab qiladi. Serologik reaksiyani qoyish uchun idishlar quruq va toza bolishi lozim. Probirkalar (bakteriologik, agglutinatsiya, pretsiðitatsiya va sentrifuga probirkalari), Paster va darajalangan turli xil piðetkalar, kolbalar, silindrlar, buyum va yopqich oynachalar, Petri kosachasi, botiq plastmassali plastinkalar qollaniladi. Asbob va uskunalar: qovuzloq, shtativ, lupa, agglutinoskop, termostat, muzlatkich, sentrifuga, tarozi va toshlari. Materiallar: antitelolar (immun va tekshirilayotgan zardob), antigenlar (mikroorganizmlar kulturasi, diagnostikumlar, ekstratlar, lizatlar, gaptenlar, eritrotsitlar, toksinlar), komplement, natriy xloridning izotonik eritmasi. Zardoblar bemorning qon zardobi. Zardob kasallikning ikkinchi haftasida antitelo hosil bolganda olinadi, ayrim hollarda rekonvalessent (tuzalayotgan bemor) va kasallanib otgan odam qon zardobidan foydalaniladi. Kopincha qon zardobini olish uchun qon venadan 35 ml miqdorida steril probirkaga olinadi va laboratoriyaga yollanma bilan jonatiladi. Yollanmada bemorning familiyasi, ismi, sana va taxminiy tashxisi yozilishi lozim. 126 Qon och qoringa yoki ovqatlanilgan bolsa, 6 soatdan keyin olinishi kerak. Ovqatlangandan song qon zardobida yog tomchilari saqlanishi mumkin, bu zardobni xiralashtiradi va tekshirishga yaroqsiz qilib qoyadi (bunday qon zardobi xilezzaiflashgan zardob deyiladi). Diqqat! Qon olinayotganda aseptika qoidalariga rioya qilish lozim! Qon zardobini olish uchun qon 1 soatga xona haroratida yoki termostatda (37°C, 30 daqiqaga) qoyilishi uchun qoldiriladi. Diqqat! Zardobni termostatda 30 daqiqadan ortiq ushlash mumkin emas, chunki gemoliz sodir bolishi mumkin, bu tekshirishga tosqinlik qiladi. Hosil bolgan qonning quyuq qismi Paster piðetkasi yoki qovuzloq yordamida probirka devoridan olib tashlanadi. Probirkani muzlatgichga malum vaqtga (1 soatga, 48 soatdan oshmasligi kerak) quyuq qismidan zardobni toliq ajratib olish uchun qoldiriladi. Song, zardob Paster piðetkasi yordamida alohida idishga ajratib olinadi. Zardobga qon elementlari qoshilib ketmasligi uchun uni juda ehtiyotlik bilan ajratib olish lozim. Zardob juda tiniq bolishi zarur. Xira zardoblar tindirilgandan song ajratib olinadi. Sentrifugalash yordamida ham zardobni qon elementlaridan ajratib olish mumkin. Zardob olish uchun qon barmoq yoki quloq tugmachasini teshib Paster piðetkasida olinadi. Emizikli bolalardan qon U simon tovon orqa kesilmasidan olinadi. Paster piðetkasidan foydalanilganda qon teshilgan joydan piðetka yordamida olinadi. Piðetkaning uchi kavsharlanadi. Piðetka uchini pastga qilib probirkaga joylashtiriladi. Uning uchi sinmasligi uchun probirkaga kichik paxta bolagi solib qoyiladi. Probirka yollanma bilan labora- toriyaga jonatiladi. Immun zardoblari malum sxema asosida mos antigenlar (vaksina) bilan emlangan odam va hayvon (kopincha quyon va otlar) qonidan olinadi. Olingan zardobda uning faolligi (titri), yani malum tajriba sharoitida mos antigenga ularning eng yuqori suyultirish darajasidagi sezuvchanligi aniqlanadi. Zardoblar qon ishlab chiqarish korxonalarida tayyorlaniladi. Ular ampulalarga quyiladi, ampulalarda ularning nomi va titri korsatiladi. Kop hollarda zardoblar quritiladi. Quruq zardob ishlatishdan oldin distillangan suvda oldingi hajmiga yetguncha (bu hajm korsatilgan) suyultiriladi. Barcha quyuq diagnostik preparatlar 410°C haroratda saqlanadi. Serologik tekshirish uchun adsorbsiyalangan va nativ (adsorb- siyalanmagan) immun zardoblardan foydalaniladi. Nativ zardoblar- ning kamchiligi shundan iboratki, ularda guruh antitelolari, yani mikroorganizmlar uchun umumiy antigenga ega bolgan antitelolar 127 mavjud. Bunday antigenlar esa bir guruhga, avlodga, oilaga mansub mikroblardagina uchraydi. Adsorbsiyalangan zardoblar ota spetsifikligi bilan farqlanadi; ular faqat gomologik (oziga mos) antigenlargagina sezuvchandir. Antitelolar begona antigenlarga (geterogenlar) adsorbsiyasi yiroqlashgan. Adsorbsiyalangan zardobda antitelolarning titri juda past (1:40, 1:320), shuning uchun ular suyultirilmaydi. Agglutinatsiya reaksiyasi Agglutinatsiya reaksiyasi deb, mos antitelo tasirda antigenlar mikrob yoki hujayralarning bir-biriga yopishib, fiziologik eritmada chokmaga tushishiga aytiladi. Hosil bolgan chokma agglutinat deb ataladi. Reaksiya qoyish uchun quyidagilar kerak boladi: 1. Antitelolar (agglutininlar) bemor qon zardobi yoki immuno- logik zardob. 2. Antigen olik yoki tirik mikroorganizmlar, eritrotsitlar yoki boshqa hujayralar. 3. Fiziologik eritma. Serodiagnostikada agglutinatsiya reaksiyasi ichterlama, paratif (Vidal reaksiyasi), brutselloz (Rayta reaksiyasi) va boshqa kasalliklarda keng qollaniladi. Bunda antitelo bemor qon zardobi, antigen esa malum mikrob kulturasi hisoblanadi. Mikrob yoki boshqa hujayralar identifikatsiyasida antigen bolib nomalum mikrob kulturasi, antitelo bolib malum immun zardobi qollaniladi. Bu reaksiya ichak infeksiyalari, kokyotal va boshqa kasalliklar diagnostikasida qollaniladi. Ingrediyentlarni tayyorlash: 1) zardobni ajratib olish (yuqorida aytib otilganidek); 2) antigenni tayyorlash. Òirik mikrob aralashmasi gomogen bolishi lozim va loyqalanish optimal standartga (1 ml.da taxminan 30 birlikda) togri kelishi kerak: Uni tayyorlash uchun 24 soatli qiyshiq agarda ostirilgan kultura qollaniladi. Bu kulturaga 34 ml steril fiziologik eritma quyib kultura yuviladi, alohida steril idishga ajratib olinadi, standartga solishtiriladi, agar kerak bolsa, suyultiriladi. Olik mikrob aralashmasi diagnostikumning qollanilishi ishni ancha yengillashtiradi va uni xavfsiz qiladi. Asosan, ishlab chiqarish korxonalarida tayyorlangan diagnostikumlardan foydalaniladi. Reaksiya ikki usulda olib boriladi: taxminan agglutinatsiya reaksiyasi buyum oynachasida olib boriladi va kengaytirilgan hajm agglutinatsiya reaksiyasi (probirkalarda olib boriladi). 128 Òaxminiy agglutinatsiya reaksiyasi. Yogsizlantirilgan buyum oynachasiga 2 tomchi spetsifik (adsorbsiyalangan) zardob va bir tomchi fiziologik eritma tomiziladi. Adsorbsiyalanmagan zardob taxminan 1:5 1:25 ga suyultiriladi. Òomchilar orasida oraliq bolishi shart. Buyum oynachasida qanday tomchi qayerda ekanligi qalam bilan belgilanadi. Mikrob kulturasi zardobning bitta tomchisi va fiziologik eritma bilan bakteriologik qovuzloq yoki piðetkada gomogen aralashma hosil bolguncha aralashtiriladi. Kultura tomizilmagan zardob nazorat zardobi hisoblanadi. Diqqat! Kulturani zardobdan fiziologik eritma tomchisiga otkazish mumkin emas, chunki fiziologik eritma tomchisi kontrol antigen bolib hisoblanadi. Reaksiya xona haroratida 13 daqiqa ichida otadi. Nazorat zardob tiniq, nazorat antigen xira, bir xilda loyqalangan bolishi kerak. Kultura va zardob tomizilgan tomchimizda chokma hosil bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Agar mikrob kulturamiz tanasi bilan yopishgan bolsa, mayda donador chokma, agar xivchinlar bilan yopishgan bolsa, yirik donador chokma hosil boladi. Agar reaksiya manfiy bolsa, xuddi nazorat antigenga oxshash bir xilda loyqalanish hosil boladi. Reaksiya natijasi qorongi fonda kesib otuvchi yoruglikda aniq korinadi. Uni organishda lupadan ham foydalanish mumkin. Kengaytirilgan hajmdagi agglutinatsiya reaksiyasi Bemordan qon olib yuqorida aytib otilgandek, zardob ajratib olinadi. Qon zardob 1:50 dan 1:1600 gacha suyultiriladi. Aggluti- natsiyalovchi zardobning titri deb, gomologik hujayralarni aggluti- natsiyaga uchratuvchi eng yuqori suyultirish darajasiga aytiladi. Zardobni suyultirish: 1) shtativga kerakli hajmdagi, balandligi va tubi bir xil bolgan probirkalar qoyib chiqiladi; 2) barcha probirkalarga suyultirish darajalari yoziladi; 1-probirkaga tajriba nomeri yoki antigenning nomi yoziladi. Ikkita nazorat probirkaga «NZ» nazorat zardob va «NA» nazorat an- tigen, deb yoziladi; 3) barcha probirkalarga 1 ml.dan fiziologik eritma solinadi; 4) alohida probirkada ishchi eritmasi tayyorlab olinadi. Masalan, 1 : 50 suyultirish uchun probirkaga 4,9 ml fiziologik eritma va 0,1 ml zardob solinadi. Probirkaga, albatta, suyultirish darajasi yozilishi shart. Ishchi eritmasidan 1 ml.dan olib, birinchi va nazorat zardob probirkasiga solinadi; 5) qolgan probirkalarda ham zardob suyultirib chiqiladi. Suyul- tirish usuli 13-jadvalda berilgan. 129 13-jadval Kengaytirilgan hajmdagi agglutinatsiya reaksiyasi uchun zardobni suyultirish - t n e y i d e r g n I a d .l m , r a l r a l a k r i b o r P it a r o z a n a b i rj a T 1 2 3 4 5 - r a z b o d - it n a n e g k i g o l o i z i F a m ti r e 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 b o d r a z 0 5 : 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 i s a j a r a d h s i r it l u y u s i n b o d r a Z 0 0 1 : 1 0 0 2 : 1 0 0 4 : 1 0 0 8 : 1 0 0 6 1 : 1 0 0 1 : 1 E s l a t m a : Korsatilgan strelkalar suyuqlikni probirkadan pro- birkaga quyilishini belgilaydi. Suyuqlik 5-probirkadan 1 ml olib, dezinfeksiyalovchi moddaga quyiladi. Diqqat! Barcha probirkalardagi suyuqlikning hajmi bir xil bolishi lozim. Zardob suyultirib bolingandan keyin nazorat zardob probirkasi- dan tashqari barchasiga 12 tomchidan diagnostikum yoki yangi tayyorlangan mikrob aralashmasi (antigen) solib chiqiladi. Bunda probirkalarda biroz loyqalanish sodir bolishi kerak. Nazorat zardob tiniq qoladi. Probirkalar yaxshilab aralashtiriladi va termostatga 37°C haroratda 1824 soatga qoldiriladi. Òaxminiy natijani 2 soatdan song oqish mumkin. Natija hamma vaqtdagidek nazorat probirkalardan boshlab oqiladi. Nazorat zardob tiniq, nazorat antigen loyqalangan bolishi kerak. Probirkalarni qorongi fonda kesib otuvchi yoruglikda, lupa yoki agglutinoskopda organish mumkin. Agar reaksiya musbat bolsa, donador chokma hosil boladi. Agglutinat sekin-asta «zontiksimon» bolib probirka tubiga chokadi, chokma ustidagi suyuqlik tiniqlashadi. Yirik yoki donador chokmaligini aniqlash uchun probirkadagi suyuqlikni biroz chayqatish lozim. Reaksiyaning intensivligi quyidagicha belgilanadi: ++++ barcha hujayralar chokma tushgan, suyuqlik tiniq bolsa, reaksiya ota musbat deyiladi; +++ chokma kamroq, suyuqlik tiniq bolmasa, reaksiya musbat deyiladi; → → → → 130 ++ chokma yanada kamroq, suyuqlik esa xira bolsa, reaksiya kuchsiz musbat deyiladi; + oz miqdorda chokma bolib, suyuqlik xira, loyqa bolsa reaksiya shubhali hisoblanadi; Zchokma yoq, suyuqlik bir xilda loyqalangan, nazorat antigenga oxshash bolsa, reaksiya manfiy deyiladi. 1. Immunitet reaksiyalari deb nimaga aytiladi? 2. Serologik reaksiyalarda qanday komponentlar ishtirok etadi? 3. Agglutinatsiya reaksiyasi deb nimaga aytiladi? 4. Agglutinatsiya reaksiyasi qoyish texnikasi qanday? 5. Diagnostikum nima? 6. Qachon mayda va yirik donador chokmalar hosil boladi? Gemagglutinatsiya reaksiyasi Laboratoriya amaliyotida tasiri turli xildagi ikkita gemagglutinatsiya reaksiyasi qollaniladi. Birinchi gemagglutinatsiya reaksiyasi serologik reaksiyaga kiradi. Bu reaksiyada eritrotsitlar mos antitelolar bilan agglutinatsiyaga uchraydi (gemagglutinatsiya). Bu reaksiya qon guruhini aniqlashda keng qollaniladi. Ikkinchi gemagglutinatsiya reaksiyasi serologik reaksiya hisoblanadi. Bunda eritrotsitlarga antitelolar emas, viruslar hosil qiladigan moddalar tasir etadi. Masalan, griðp virusi tovuq eritrotsitlarini va dengiz chochqachalarining eritrotsitlarini, poliomiyelit virusiqoy eritrotsitlarini agglutinatsiyalaydi. Bu reaksiyada tekshirilayotgan materialda u yoki bu virusning borligi aniqlanadi. Reaksiya qoyish texnikasi. Reaksiya probirkalarda yoki maxsus botiq plastinkalarda olib boriladi. Virus borligi aniqlanmoqchi bolgan material 1:10 dan 1:1280 gacha fiziologik eritmada suyultiriladi. Har bir suyultirish aralashmasidan 0,5 ml olib, 0,5 ml 12 % li eritrotsit osilmasi bilan aralashtiriladi. Kontrol probirkada 0,5 ml eritrotsit osilmasi 0,5 ml fiziologik eritma bilan aralashtiriladi. Probirkalarni termostatda 30 daqiqaga, plastinkani xona haroratida 45 daqiqaga qoldiriladi. Natijani oqish. Reaksiya musbat bolsa, probirka yoki plastinka tubida qirrali «zontiksimon» chokma hosil boladi. Reaksiya manfiy bolsa, chetlari tekis «tugmasimon» chokma hosil boladi. Shunday chokma nazorat probirkada ham bolishi lozim. ? Nazorat uchun savollar 131 Tormozlangan gemagglutinatsiya reaksiyasi Bu serologik reaksiya bolib, spetsifik viruslarga qarshi antitelo virus bilan ozaro tasirga otib (antigen) uni neytrallaydi, eritrotsitlar agglutinatsiyalash xossasini yoqotadi, yani gemagglutinatsiya reak- siyasini tormozlaydi. Òormozlangan gemagglutinatsiya reaksiyasining (RÒGA)ni yuqori spetsifikligi yordamida virusning turini aniqlashga imkon tugiladi. Reaksiyani qoyish texnikasi. 0,25 ml virusga qarshi zardob ketma-ket ikki marta 1:10 dan 1:2560 gacha suyultirilib, teng hajmda virus saqlovchi tekshirish materiali bilan aralashtiriladi, u gemag- glutinatsiya reaksiyasida aniqlangan titridan 4 marta kam boladi. Aralashmani chayqatib termostatda 30 daqiqaga qoldiriladi, songra 0,5 ml.da 12 % li eritrotsit osilmasidan solib chiqiladi. Reaksiya uchta nazorat bilan kuzatiladi (14-jadval). 14-jadval Òormozlangan gemagglutinatsiya reaksiyasini nazorat qilish l m , r a lt n e y i d e r g n I r a l a k r i b o r P t a r o z a n b o d r a z n e g it n a r a lt is t o r ti r e 0 1 : 1 b o d r a Z i r ti t s u r i v n a g li r it l u y u s a t r a m 4 a m ti r e k i g o l o i z i F 5 2 , 0 5 2 , 0 5 2 , 0 5 2 , 0 5 , 0 i d a n a l h s u a q i q a d 0 3 a d C ° 7 3 a d t a t s o m r e T i s a m li s o ti s t o r ti r e % 2 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 Natijani oqish. Natija termostatda 30 daqiqa yoki xona haroratida 45 daqiqa ushlangandan song oqiladi. Reaksiya togri qoyilgan bolsa, kontrol zardob va eritrotsitlar tugmasimon chokmaeritrotsitlar agglutinatsiyaga uchramaydi, kontrol antigenda zontiksimon chokma virus eritrotsitlarni agglutinatsiyaga uchratadi.Òajribamizdagi eritmada zardob organilayotgan virusga mos bolsa, tugmasimon chokma zardob hosil boladi, yani neytrallangan boladi. Zardob titribu gemagglutinatsiyani tormozlashni sodir qilgan eng yuqori suyultirish darajasidir. Bilvosita gemagglutinatsiya reaksiyasi Bilvosita (passiv) gemagglutinatsiya reaksiyasi eritrotsitlar yuzasida eruvchan antigen adsorbsiya qilinganda, adsorbsiyalangan antigen bilan antitelolar ozaro tasir etganda, agglutinatsiya xossasini qabul 132 qilishiga asoslangan. Bilvosita gemagglutinatsiya reaksiyasi kopgina yuqumli kasalliklarga tashxis qoyishda qollaniladi. Reaksiya qoyish. Òekshirilayotgan zardob 30 daqiqa davomida 56°C haroratda qizdiriladi, 1:101:1280 gacha suyultiriladi va 0,25 ml.li probirkalarga yoki plastinkalarga solinadi, ularga 2 tomchidan eritrotsitar diagnostikum (eritrotsitlarga antigenlar adsorbsiyalangan) solib chiqiladi. Nazorat probirkalari: 1) eritrotsit osilmasi diagnostikumi bilan immun zardob; 2) diagnostikum aralashmasi bilan normal zardob; 3) normal eritrotsitar aralashmasi tekshirilayotgan zardob. Birinchi nazoratda agglutinatsiya sodir bolishi lozim, ikkinchi va uchinchi nazoratda agglutinatsiya bolmasligi kerak. Bilvosita gemagglutinatsiya reaksiyasi yordamida nomalum antigenni aniqlash mumkin, bunda eritrotsitlar malum antiteloni adsorbsiyalashi lozim. Gemagglutinatsiya reaksiyasini 0,025 ml (mikrousulda) hajmda ham olib borish mumkin, bunda mikrotitratorlardan foydalaniladi. 1. Gemagglutinatsiya reaksiyasi deb nimaga aytiladi? 2. Gemagglutinatsiya reaksiyasini qachon musbat va manfiy deya olasiz? 3. Òormozlangan va egri gemagglutinatsiya reaksiyalarining mexanizmi qanday? 4. Bu reaksiyalar qanday maqsadlarda qollaniladi? Pretsipitatsiya reaksiyasi Eruvchan antigen (lizat, ekstrat, gapten) va mos antitelolarni fiziologik eritmada chokma halqa hosil qilish reaksiyasiga pretsiðitatsiya reaksiyasi deyiladi. Reaksiya natijasida hosil bolgan loyqasimon halqa yoki chokma pretsiðitat deyiladi. Bu reaksiya agglutinatsiya reaksiyasidan antigen bolakchalarining hajmiga kora farqlanadi. Pretsiðitatsiya reaksiyasi qator yuqumli kasalliklar (kuydirgi, meningit va b.) diagnostikasida antigenni aniqlash uchun: tibbiyot sudida turli oqsil, qon, sperma va boshqa doglarning tabiatini (xilini) aniqlashda, sanitariya-gigiyena tekshiruvlarida oziq-ovqat mahsulot- larining soxtaligini tekshirishda qollaniladi. Reaksiya qoyish uchun quyidagilar kerak boladi: 1. Antitelo (pretsiðitinlar) yuqori antitelo titri bilan immun zardobi 1:100000 dan kam bolmasligi kerak. Asosan, suyultirilgan zardob qollaniladi. 2. Antigen eruvchan oqsil moddalar yoki liðoid-polisaxarid tabiatli (tola qimmatli antigenlar va gaptenlar). ? Nazorat uchun savollar 133 3. Fiziologik eritma. Pretsiðitatsiya reaksiyasi ikki usulda olib boriladi: halqa pretsiðitatsiya reaksiyasi va agardagi (gele) pretsiðitatsiya reaksiyasi. Diqqat! Pretsiðitatsiya reaksiyasida ishtirok etadigan komponent- larning barchasi tiniq bolishi lozim. Halqa pretsiðitatsiya reaksiyasi. Pretsiðitatsiya probirkasiga Paster piðetkasi yordamida 0,20,3 ml (56 tomchi) zardob probirka devoriga tekkizilmasdan solinadi. Zardobning ustiga probirka devoridan ehtiyotlik bilan teng hajmda antigen yuboriladi. Bunda probirka biroz qiyshay- tirilgan holda ushlanadi. Agar togri qavatlangan bolsa, zardob va antigen orasida aniq chegara hosil boladi. Aralashib ketmasligi uchun probirka ehtiyotlik bilan shtativga qoyiladi. Antigen va antitelo chegarasida loyqasimon «halqa»pretsiðitat hosil bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Reaksiya nazorat probirkalar bilan birgalikda olib boriladi. Reaksiya ingrediyentlarini tartib bilan solish katta ahamiyatga ega. Zardobni antigenga, nazoratda fiziologik eritmaga qavatlantirish mumkin emas, chunki zardobning nisbiy zichligi yuqori, u probirka tubiga chokadi va suyuqliklar orasida chegara bolmaydi (15-jadval). 15-jadval Halqa pretsiðitatsiya reaksiyasini qoyish l m , r a lt n e y i d e r g n I r a l a k r i b o r P it a r o z a n a b i rj a t 1 2 3 4 5 i b o d r a z n u m m I i b o d r a z l a m r o N n e g it n a n a g t o y a li r i h s k e T s o m a g i b o d r a z n u m m I n e g it n a n e g it n a a n o g e B a m ti r e k i g o l o i z i F 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 3 , 0 a ji t a N i k o Y + E s l a t m a : + «halqa» hosil boladi; «halqa» hosil bolmaydi. Natijani 530 daqiqadan song, ayrim hollarda bir soatdan song nazorat probirkalardan boshlab oqiladi. Ikkinchi probirkadagi «halqa» immun zardobini mos antigen bilan reaksiyaga kirish xususiyati borligidan dalolat beradi. 35-pro- birkalarda «halqa» bolishi mumkin emas, chunki u yerda mos anti- gen va antitelolar yoq. Birinchi probirkadagi «halqa» reaksiyasining 134 musbat natijasitekshirayotgan antigenni olingan immun zardobiga mos ekanligini bildiradi, «halqa»ning yoqligi (faqat 2-probirkada «halqa» bolishi) tekshirayotgan antigenni olingan immun zardobiga mos kelmasligini bildiradi reaksiya manfiy boladi. Agardagi pretsiðitatsiya reaksiyasi (geli). Bu reaksiyada antigen va antitelolarning ozaro tasiri zich oziqa muhitida yuzaga keladi, yani gelda reaksiya musbat bolsa, antigen antitelo orasida xira moylovcha hosil boladi. Moylovchaning bolmasligi antigen va antiteloning bir- biriga mos kelmaganligidan dalolat beradi. Bu reaksiya tibbiy biologik tekshirishlarda, yani bogma qozgatuvchisining toksin hosil qilishini aniqlash maqsadida qollaniladi (reaksiya qoyish texnikasi bilan bogma kasalligining diagnostikasi mavzusidan organishingiz mumkin). 1. Agglutinatsiya va pritsiðitatsiya reaksiyalarining farqi nimaga asos- langan? 2. Nima sababdan xira ingrediyentlar pritsiðitatsiya reaksiyasida ishlatilmaydi? 3. Reaksiya nechta usulda olib boriladi? 4. Reaksiyaning musbat ekanligi qayerdan bilinadi? Lizis reaksiyasi (sitolizi) Immun lizisi deb, komplement ishtirokida, antitelo tasirida mos antigenlar (hujayralar)ning lizisga uchrashiga aytiladi. Reaksiya qoyish uchun quyidagilar kerak boladi: 1. Antigen mikroblar, eritrotsitlar yoki boshqa hujayralar. 2. Antitelo (lizin) immun zardobi, bazi hollarda bemor qon zardobi. Bakteriologik zardob bakteriyalarni lizisga uchratuvchi (erituvchi) antitelolarni saqlaydi, gemolitik zardob-gemolizinlar, eritrotsitlarni lizisga uchratuvchi, spiroxetalarni lizisga uchratuvchi spiroxetolizinlar, hujayralarni lizisga uchratuvchi sitolizinlar va boshqalarni saqlaydi. 3. Komplementdengiz chochqachasi qon zardobida juda kop komplement uchraydi. Bu zardobning (bir qancha hayvon yoglari aralashmasi) komplementi sifatida foydalaniladi. Yangi (nativ) komplement turgun emas va u qizdirilganda, chayqatilganda, saqlanganda tez parchalanadi, shuning uchun olingandan keyin ikki kungacha qollash mumkin. Komplementni konservalash uchun unga 2 % li borat kislota va 3 % li natriy sulfat qoshiladi. Bunday usul bilan tayyorlanganda komplementni 4°C haro- ? Nazorat uchun savollar 135 ratda ikki haftagacha saqlash mumkin. Kopincha quruq komplement qollaniladi, ishlatishdan oldin oldingi holga kelguncha, fiziologik eritmada eritiladi (yorligida yozilgan). 4. Fiziologik eritma. Gemoliz reaksiyasi. Reaksiyani qoyish uchun quyidagilar kerak boladi: 1. Antigen 3 % li yuvib tozalangan qoy eritrotsiti osilmasi 0,3 ml eritrotsitga 9,7 ml izotonik eritma hisobida tayyorlanadi. 2. Antitelo, qoy eritrotsitiga mos gemmolitik zardob (gemo- lizin) bu qon ishlab chiqarish korxonasida tayyorlanib liofillanadi va yorligida titri korsatiladi. Gemolizin titri deb, komplement ishtirokida 3 % li eritrotsitlarni toliq gemolizga uchratuvchi zardobning eng yuqori suyultirish darajasiga aytiladi. Gemoliz reaksiyasi uchun gemolizinning uch marotaba suyultirilgan titri olinadi, yani suyultirilayotganda uch marta kam qilib suyultiriladi. Masalan, zardobni 1:1200 titrgacha suyultirish kerak bolsa, uni 1:400 (0,1 ml zardobga 39,9 ml fiziologik eritma) titrigacha suyultiriladi. Gemolizinning ortiqchasini yoqotish lozim, chunki uning ayrim qismi boshqa komponentlarni adsorbsiyalashi mumkin. 3. Komplementni 1:10 (0,2 ml komplement va 1,8 ml fiziologik eritma) suyultiriladi. 4. Fiziologik eritma (16-dajval). 16-jadval Gemoliz reaksiyasi l m , r a lt n e y i d e r g n I r a l a k r i b o r P a b i rj a t t a r o z a n 1 2 3 4 5 a m ti r e k i g o l o i z i F n i z il o m e g il r ti t h c U i s a m li s o it i s t o r ti r e y o q % 3 i s a m li s o ti s t o r ti r e a n o g e b % 3 0 1 : 1 t n e m e l p m o K 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 a d t a t s o m r e t a d t a r o r a h il C ° 7 3 a v i d a li t a q y a h c b a li h s x a y r a l a k r i b o r P .i d a n a l q a s t a o s 1 a ji t a N - o m e G z il i d y a m l o b z il o m e G Natijani oqish. Reaksiya togri qoyilgan bolsa, 1-probirkada gemoliz sodir boladi, probirka ichidagi suyuqlik tiniq bolib qoladi. 136 Nazorat probirkalarda suyuqlik xira boladi: 2-probirkada gemoliz sodir bolishi uchun komplement, 3-probirkada gemolizin, 4-probirkada gemoliz va komplement, 5-probirkada antigen antiteloga mos emas. Kerak bolgan hollarda gemolitik zardob quyidagi sxema asosida titrlanadi. Òitrlashdan avval, zardobni 1:100 (0,1 ml zardob va 9,9 ml fiziologik eritma) suyultirib olinadi, shu eritmadan kerakli titrlarni tayyorlash mumkin, masalan: 1. 1:1000,1 ml zardobdan 1:100+0,9 ml fiziologik eritma 2. 1:12000,1 ml __________ » _______________ + 1,1 ml __________ » _______________ 3. 1:15000,1 ml __________ » _______________ + 1,4 ml __________ » _______________ 4. 1:18000,1 ml __________ » _______________ +1,7 ml 17-jadval Gemolitik zardobni (gemolizin) titrlash , r a lt n e y i d e r g n I l m r a l a k r i b o r P a b i rj a t t a r o z a n 1 2 3 4 5 6 n i z il o m e G 0 0 0 1 : 1 0 0 2 1 : 1 0 0 5 1 : 1 0 0 8 1 : 1 0 0 1 2 : 1 r a lt i s t o r ti r E ) a m li s o % 3 ( t n e m e l p m o K a m ti r e k i g o l o i z i F 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 0 , 1 5 , 0 0 , 2 a d t a t s o m r e t a d t a r o r a h il C ° 7 3 a v i d a li t a q y a h c b a li h s x a y r a l a k r i b o r P i d a li r i d l o q t a o s 1 a ji t a N z il o m e G i d a l o b z il o m e G i d y a m l o b z il o m e G i d y a m l o b 17-jadvalda keltirilgan misolda gemolitik zardob 1:1200 ga teng. Yangi gemolitik zardob qollanilganda undagi komplementlarni parcha- 137 lash uchun uni inaktivatsiyalash kerak. Buning uchun uni 30 daqiqa 56°C suv hammomida yoki termoregulatorli inaktivatorda qizdiriladi, oxirgi usul yaxshiroq: chunki u zardobni qizib ketishidan, yani denaturatsiyadan saqlaydi. Denaturatsiyalangan zardob tajriba uchun yaroqsiz hisoblanadi. 1. Lizis reaksiyasi deb nimaga aytiladi? 2. Komplement bolmaganda eritrotsitlar gemolitik immun zardobi bilan qanday reaksiyaga kirishadi? Komplement boglanish reaksiyasi Komplement boglanish reaksiyasi deb, mos antigen va antitelo- larning komplement ishtirokida ozaro boglanib kompleks hosil qilishiga aytiladi. Bu reaksiya antigenlarni identifikatsiya qilishda va infeksion kasalliklarning serologik diagnostikasida, ayniqsa, spiroxetalar (Vasser- man reaksiyasi), rikketsiya va virus kasalliklarida keng qollaniladi. Komplementni boglash reaksiyasi murakkab serologik reaksiya hisoblanadi. Unda komplement va ikki sistema antigen hamda antitelolar ishtirok etadi. Aslida bular ikki serologik reaksiyadir. Birinchi sistemaasosiy bolib, antigen va antitelo (biri malum, boshqasi nomalum)dan tashkil topgan. Unga malum miqdorda komplement qoshiladi. Bu sistemadagi antigen va antitelo mos bolsa, komplement ishtirokida boglanib oladi. Hosil bolgan kompleks juda mayda zarrachali va korinmaydi. Bu kompleksni hosil bolganini ikkinchi sistema gemolitik yoki indikator yordamida organiladi. Ikkinchi sistemada qoy eritrotsitlari (antigen) va unga mos tayyor immun kompleksini saqlovchi gemolitik zardob (antitelo) boladi. Agar birinchi sistemadagi antitelo va anti- gen bilan komplement boglangan bolsa, ikkinchi sistemada gemoliz sodir bolmaydi, chunki unda bosh komplement yoq. Gemolizning bolmasligi (probirka ichida xira yoki uning tagidagi eritrotsitlar chokmaga tushsa) reaksiya musbat ekanligini korsatadi. Agar birinchi sistemadagi antigen va antitelo mos bolmasa, immun kompleks hosil bolmaydi va komplement bosh qoladi. Bosh qolgan komplement ikkinchi sistemada ishtirok etadi, natijada gemoliz sodir boladi. Komplement boglanish reaksiyasi manfiy (probirka ichidagilar tiniq qonni eslatadi) hisoblanadi. Komplement boglanish reaksiyasi komponentlari: 1.Antigen odatda, lizatlar, ekstraktlar, gaptenlar, kam hollarda mikroorganizmlar ilinmasi. Bu asosiy sistemaga kiradi. ? Nazorat uchun savollar 138 2.Antitelo bemor qon zardobi. 3.Komplement dengiz chochqachasining qon zardobi kiradi. 4.Antigen qoy eritrotsiti. Bu gemolitik sistemaga kiradi. 5.Antitelo qoy eritrotsitlariga mos gemolitik zardob. 6.Fiziologik eritma. Komplement boglanish reaksiyasi kop miqdorda murakkab komponentlar ishtirok etgani uchun, ular oldindan titrlangan va reaksiya aniq miqdorda va teng hajmda olinishi lozim: 0,5 yoki 0,25, kam hollarda 0,2 ml hajmda olinadi. Barcha tajriba 2,5; 1,25 yoki 1,0 ml (katta hajmlar aniq natijani beradi) hajmda olib boriladi. Reaksiya komponentlarini tajriba qanday hajmda olib borilsa, shu hajmda titrlash lozim, yetish- magan komponentlarni fiziologik eritma bilan almashtiriladi. Ingrediyentlarni tayyorlash 1. Gemolitik zardob (gemolizin). Zardob titriga kora, 3 marotaba kam suyultiriladi. Umumiy suyultirilgan zardobni barcha tajriba uchun tayyorlanadi, uning hajmini bitta probirkadagi zardob hajmini (masalan, 0,5 ml) probirkalar soniga kopaytirilib topiladi. Uning suyultirish darajasi tajribaga nisbatan koproq boladi. 2. Qoy eritrotsitlari. Barcha tajribadagi probirkalar uchun yuvilgan 3 % qoy eritrotsit ilinmasi tayyorlaniladi. Gemolitik sistemani tayyorlash uchun probirkalarga qoshishdan 30 daqiqa avval teng hajmda suyultirilgan gemolizin va eritrotsit ilinmalarini yaxshilab aralashtiriladi, zardob eritrotsitlarga quyilganidan song uni ham yaxshilab aralashtiriladi va termostatda 37°C 30 daqiqa saqlanadi (sensibilizatsiyalanadi). 3. Komplement, odatda, 1:10 suyultiriladi. Har bir tajribadan oldin, albatta, uni titrlanadi. Komplement titri deb, 37°C da 1 soat ichida gemolitik sistemaga solinganda toliq gemolizga uchratuvchi, uning eng kam miqdoriga aytiladi. Komplementni titrlash sxemasi jadvalda keltirilgan. Natijani oqish. Nazorat probirkalarida gemoliz izlari ham bolmasligi lozim, chunki ularning birida komplement, boshqasida gemolizin bolmaydi. Nazorat probirkada reaksiyaning komotoksikligi (eritrotsitlarni toliq lizisga uchratish xossasi) komponentlarning yoqligidan dalolat beradi. 18-jadvalda keltirilgan misolda 1 : 10 suyultirilgan komplement titri 0,15 ml.ga teng. Òajribadagi komplementning faolligi reaksiyadagi boshqa komponentlar bilan nospetsifik adsorbsiyalanishi hisobidan pasayishi mumkin, shuning uchun tajriba uchun komplement miqdori orttiriladi: titr dozasidan keyingisi olinadi. Buishchi dozasidir. Keltirilgan misoldan u 0,2 ml komplementni 1 : 100 suyultirilganiga teng. Chunki, 139 komplement boglanish reaksiyasida ishtirok etadigan barcha komponent- lar teng hajmda bolishi lozim (bizning misolimizda u 0,5 ml.ga teng). Komplementning ishchi dozasiga (0,2 ml 1 : 10) 0,3 ml fiziologik eritma qoshiladi. Barcha tajriba uchun ularning har bir hajmi (komplement va fiziologik eritma) komplement boglanish reaksiyasida ishtirok etadigan probirkalar soniga kopaytiriladi. Masalan, tajriba olib borish uchun 50 ta probirkada 1 : 10 suyultirilgan 10 ml.dan komplement (0,2 ml · 50) va 15 ml fiziologik eritma (0,3 ml · 50) olish lozim. 18-jadval 4. Antigen odatda, titr korsatilgan holda tayyor olinadi, yani suyultirilgandan keyin 1 ml saqlashi lozim bolgan antigen miqdori. Masalan, 0,4 ml titrda uni 0,95 ml fiziologik eritmada suyultiriladi. Òajriba uchun titr yarmiga teng (0,5 ml) miqdorda antigen olinadi. Bu uning ishchi dozasidir. Barcha tajriba uchun antigenning umumiy suyultirilishi tayyorlaniladi, 0,5 ml.ni tajribadagi probirkalar soniga kopaytiriladi. 5. Antitelo bemor qon zardobi. Òajribadan oldin yangi zardobni undagi bor komplementlarni parchalash uchun inaktivatsiya qilish lozim. Buning uchun uni 30 daqiqada 56°C suv hammomida yoki inaktivatorda qizdiriladi. Oxirgi usul afzalroqdir: u zardobni ortiqcha qizib ketishiga, yani denaturatsiyalanishiga yol qoymaydi. Denatu- ratsiyalangan zardob tajriba uchun yaramaydi. Bemor qon zardobi, odatda, 1 : 10 dan 1 : 100 gacha suyultirilgan holda qollaniladi. - t n e y i d e r g n I l m , r a l r a l a k r i b o r P a b i rj a t t a r o z a n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 k it il o m e g a m e t s i s - o r ti r e r a lt i s t k i g o l o i z i F a m ti r e 5 4 , 1 4 , 1 5 3 , 1 3 , 1 5 2 , 1 2 , 1 5 1 , 1 1 , 1 5 0 , 1 0 , 1 5 , 1 5 , 1 - e l p m o K 0 1 : 1 t n e m 5 0 , 0 1 , 0 5 1 , 0 2 , 0 5 2 , 0 3 , 0 5 3 , 0 4 , 0 5 4 , 0 5 , 0 5 , 0 k it il o m e G a m e t s i s 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 y o q % 3 it i s t o r ti r e 5 , 0 a d t a t s o m r e t il C ° 7 3 a v i d a li t a q y a h c b a li h s x a y r a l a k r i b o r P i d a li r i d l o q a g t a o s 1 a ji t a N q o y z il o m e G i d a l o b r i d o s z il o m e G q o y z il o m e G Komplementni titrlash 140 Immun zardoblari kopincha ishlab chiqarish sharoitlarida va inaktivatsiya qilingan holda chiqariladi. Ularni 1 : 50 va undan yuqori darajada suyultiriladi. Asosiy tajribani olib borish Òajribani olib borishda komponentlarni tartib bilan solish katta ahamiyatga ega.Òajriba ikki bosqichda olib boriladi (19-jadval). 19-jadval Komplementni boglash tajriba reaksiyasi , r a lt n e y i d e r g n I l m r a l a k r i b o r P 1 2 3 4 5 6 7 a b i rj a t t a r o z a n - e t k a b k i g o l o i r a m e t s i s - r a z r a l b o d - it n a n e g o m e g - k it il - e t s i s a m i g a d i s a z o d i h c h s i t n e m e l p m o k x 1 2 h c i q s o b - 1 a m ti r e k i g o l o i z if 5 , 0 5 , 0 5 , 1 5 2 , 1 0 , 1 5 , 0 n a g li r it l u y u s 0 1 : 1 i b o d r a z r o m e b 5 , 0 5 , 0 i g a d a z o d i h c h s I n e g it n a 5 , 0 5 , 0 i g a d a z o d i h c h s I t n e m e l p m o k 0 1 : 1 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 2 , 0 5 , 0 0 , 1 a q i q a d 0 6 5 4 a d C ° 7 3 a d t a t s o m r e t a v i d a l a q y a h c b a li h s x a y r a l a k r i b o r P i d a n a l q a s t a o s 8 1 a d C ° 4 i k o y h c i q s o b - 2 k it il o m e g 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 0 , 1 a d t a t s o m r e t il C ° 7 3 a v i d a l a q y a h c b a li h s x a y r a l a k r i b o r P i d a li r i d l o q a h c i n u g l o b z il o m e g q il o t a d r a l a k r i b o r p - 7 a v 6 , 3 , 2 a ji t a N - s u m i k o y t a b - n a m y if + + + + ) + ( 141 1-bosqich. Probirkalarga talab qilingan miqdorda fiziologik eritma, song talab qilingan hajmda suyultirilgan zardob va shunday hajmda ishchi dozada antigen va komplement solinadi. Òajriba, albatta, reak- siyada ishtirok etadigan barcha ingrediyentlar: zardob, antigen gemolitik zardob va komplement kontroli bilan olib boriladi. Probirkalar yaxshilab chayqatiladi va 37°C haroratda 4560 daqiqa yoki 4°C haroratda 18 soat saqlanadi. Shu vaqt ichida spetsifik antigen va antitelolar komplement yordamida boglanib oladi. Reaksiyani «sovuqda» borishi spetsifik va sezuvchanlikni oshiradi. 2-bosqich. Probirkalar termostat yoki muzlatkichdan olingandan song ularning barchasiga oldindan 30 daqiqa termostatda ushlangan (sensibilizatsiyalangan) gemolitik zardobdan 1 ml.dan solib chiqiladi. Probirkalar chayqatilib va yana termostatda qoldiriladi. Natijani oqish. 2, 3, 6, 7- probirkalarda toliq gemoliz bolishi uchun probirkalarni termostatda qoldiriladi (nazorat zardob antigen va bir, ikki doza komplement). Eng birinchi ikki doza komplement saqlovchi 7-probirkada gemoliz sodir boladi. Agar bu probirkada gemoliz va probirka ichidagi suyuqlik tiniq bolsa, boshqa kontrol probirkalarni diqqat bilan kuzatish lozim. 2, 3 va 6-probirkalar tiniq bolgani zahoti shtativdagi probirkalarni termostatdan olish lozim. Òajriba probirkalarining termostatda uzoq ushlanmaganini, 5-probirkada biroz loyqalanish bolishini korsatadi. 5-probirkada yarimishchi dozada komplement va togri reaksiya qoyil- ganda ham toliq gemoliz sodir bolishi mumkin emas. Nazorat zardob va antigen nina (2, 3-probirkalarda) gemoliz bolishi, ularning dozasi togri tanlanganini korsatadi va qayta zardob hamda antigen komplementni boglay olmaydi. Gemolitik sistemaning kontrolida (4-probirka) reaksiya togri olib borilsa, gemolizning izlari bolmaydi, chunki unda komplemet yoq. Nazorat probirkalardagi ozgarishlar togri ekanligiga ishonch hosil qilinganidan song tajriba probirkalari tekshiriladi. Òajriba probirkalarida gemolizning bolmasligi reaksiya natijasining musbatligini bildiradi. Bu zardobda olingan antigenga nisbatan spetsifik antitelo borligidan dalolat beradi. Ular hosil qilgan kompleks komplementni boglab oladi va gemoliz reaksiyasi bolishiga yol qoymaydi. Agar probirkada gemoliz sodir bolsa, reaksiyaning natijasi manfiy, deb sanaladi. Bu hollarda bemor zardobidan olingan antigenga nisbatan mos antitelo bolmaydi, natijada komplement bosh qoladi va u gemoliz reaksiyasida ishtirok etadi. Reaksiya quyidagicha baholanadi: ++++ eritrotsitlar 100 % chokmaga tushadi, chokma ustidagi suyuqlik tiniq boladi; 142 +++ 25 % eritrotsitlar gemolizga uchraydi. Chokma ustidagi suyuqlik och pushti rangda boladi. Komplement boglanish reaksiyasi keskin musbat deyiladi; ++ 50 % eritrotsitlar lizisga uchraydi. Chokma ustidagi suyuqlik pushti rangda boladi. Reaksiya natijasi musbat deyiladi; + 75 % eritrotsitlar lizisga uchraydi, chokma ustidagi suyuqlik och qizil rangda boladi, chokma juda kam boladi; 100 % eritrotsitlar lizisga uchraydi. Suyuqlik tiniq qizil rangga kiradi. Komplement boglanish reaksiyasi manfiy boladi. 1. Komplement boglanish reaksiyasi qaysi usulda bajariladi? 2. Komplement boglanish reaksiyasida qanday sistemalar ishtirok etadi? 3. Gemolitik sistema reaksiyada qanday rol oynaydi? 4. Komplement boglanish reaksiyasida qancha bosqich bor va qanday tartibda olib boriladi? 5. Komplement boglanish reaksiyasida gemolizning bolmasligi nimadan darak beradi? Yuqumli kasalliklarning immunoterapiya va immunoprofilaktikasi Kasallikning yengil kechishi olimga olib keluvchi xavfli xastalik- larning oldini olib qilinadigan harakatlarga bogliqligi azaldan malum. Immunoprofilaktikani ilmiy isbotlab va amaliyotda qollashni birinchi bolib Lui Paster kiritadi. U kuchsizlantirilgan mikroorganizmlarni qol- lash prinsiðlarini hamda odam va hayvonlarda uchraydigan ayrim yuqumli kasalliklarning oldini oluvchi preparatlar (vaksinalar) tayyorlashni taklif etadi. Bunga yuz yildan oshdi va ular hozirgi vaqtda suniy immunitet hosil qilishda yuqumli kasalliklar bilan kurashishning asosi bolib qoldi. Immunizatsiya suniy faol immunitet hosil qilish uchun inson organizmiga butun hayoti davomida malum yoshlarda preparatlar yuboriladi. Chaqaloqlarga tugilganining birinchi kunlaridanoq silga qarshi BSJ vaksinasi qilinadi. Bola 1 oyligidan bogma, kokyotal, qoqshol, poliomiyelit, qizamiq va boshqa kasalliklarni oldini olish uchun vaksinalar bilan emlanadi. Shunday qilib, yuqumli kasalliklarga qarshi maxsus profi- laktika ishlari olib boriladi, shuning uchun vaksinalardan foydalaniladi. Vaksinalar (vaccini sigir chechagi sozidan olingan) orga- nizmga yuborilganda suniy faol immunitetni vujudga keltiradigan preparatdir, chunki ular tarkibida antigenlar bolib, bunday immun- lash usulini vaksinatsiya deyiladi. ? Nazorat uchun savollar 143 Vaksinalar oz tabiati va tarkibi jihatidan turlicha boladi. Quyidagi vaksinalar tafovut qilinadi: 1. Òirik mikroorganizmlardan tayyorlangan vaksinalar. 2. Olik mikroorganizmlardan tayyorlangan vaksinalar. 3. Kimyoviy vaksinalar. 4. Anatoksinlar. Òirik vaksinalar verulentlik xossasi kuchsizlantirilgan (lotin. attenuer yumshatish, kuchsizlantirish), lekin immunogenlik xossasini (yuqumli kasalliklarni oziga yuqtirmaslik xossasini chaqiradigan) saqlab qolgan tirik mikroorganizmlardan tayyorlanadi. Bunday mikroorganizmlarni olish uchun turli xil usullardan foydalaniladi: 1. Mikroorganizmlarni osish va bolinib kopayishi uchun ularni noqulay oziqa muhitlarida ostirib, ularga fizikaviy va kimyoviy omillar tasir ettirish yoli bilan olinadi. Silga qarshi ishlatiladigan vaksina BSJni Kalmett va Gerenlar tayyorlashgan. 2. Infeksiya qozgatuvchisiga sezuvchan bolmagan laboratoriya hayvonlarining organizmiga passajlash (yuborish) yoli bilan tayyor- lanadi. Lui Paster shu yol bilan quturishga qarshi vaksinani oladi. 3. Odam organizmi uchun kam virulent bolgan tabiiy mikroor- ganizm kulturalarini tanlash va boshqa yollar bilan olish mumkin. M. P. Pokrovskaya, N.N. Jukov-Verejnikov, E.I. Koropkovalar tounga qarshi vaksinani shu usulda olganlar. Òirik vaksinalar kuchli immunitet hosil qiladi, ular tabiiy infek- siyaga xos faqat klinik belgilarsiz yoki kam namoyon boladigan jarayonni keltirib chiqaradi. Bunda u immunogenezning barcha mexa- nizmini harakatga keltiradi, odamda yuqumli kasalliklarning oziga yuqtirmaslik xossasini hosil qiladi. Oldirilgan mikroblardan tayyorlangan vaksinalar. Bu vaksinalar quyidagicha tayyorlanadi. Buning uchun koproq tibbiy xossalarga ega bolgan va antigenlik jihatdan yuksak sifatli kulturalarning ayrim shtammlari tanlab olinib, yapaloq shisha idishlar (matraslar)ga qoyil- gan agarga ekiladi. Bakteriyalar termostatda 24 soat osgandan keyin fiziologik eritma bilan yuviladi, suspenziyaning muayyan quyuqligi (masalan, 1 ml.da 124 mlrd mikrob tanasi) belgilanadi, songra mikroblar 60°C haroratda 1 soat qizdirish yoli bilan yoki kimyoviy moddalar (fenol, formalin, spirt, aseton), ultrabinafsha nur va bosh- qalar bilan oldiriladi. Bunday tasir etgan mikroorganizmlarning immunogenlik xossasini toliq saqlab qoladigan omillargina tanlab olinadi. Kimyoviy vaksinalar mikrob osilmasiga maxsus usulda ishlov berish yoli bilan mikrob hujayrasining alohida komponentlaridan (antigenlar) tayyorlanadi. 144 Kimyoviy vaksinalar organizmga yuborilganda tez soriladi. Shuning uchun vaksinalarga sorilish vaqtini uzaytiradigan moddalar: aluminiy gidrooksidi, aluminiy kaliyli achchiq tosh, mineral yoglar va bosh- qalar qoshiladi. Bu «depo»ni hosil qilish deyiladi. Kimyoviy vaksinalar ichterlama, meningit va boshqa kasalliklar- ning profilaktikasida qollaniladi. Anatoksinlar (lotin. ana teskarisi, aksi) asosan, antitoksik xarakterdagi immunitet vujudga keladigan kasalliklarda organizmning suniy yol bilan immunlash uchun mikrob emas, balki anatoksin ishlatiladi. Anatoksinlar 1923-yilda Ramon ekzotoksinlarini 0,30,4 % for- malin bilan zararsizlantirish va 37°C da 34 hafta saqlash yoli bilan tayyorlanadi. Ular toksik xossalarini tamomila yoqotib, lekin antigenlik xossalarini tola saqlagan boladi. Binobarin, anatoksinni organizmga kiritish bilan antitoksin hosil qilinadi. Hozirgi vaqtda bogma, qoqshol va boshqa qozgatuvchilarning toksinlaridan anatoksinlar olinmoqda va keng qollanilmoqda. Anatoksinlar oziqa muhit aralashmalaridan (ballast oqsillardan) tozalanadi va yuborilgan joyidan asta-sekin soriladigan moddalarga shimdiriladi. Vaksinalar tarkibiga kiruvchi antigenlarning miqdoriga kora, quyidagi vaksinalar farqlanadi: monovaksinalar (bir turdagi antigen- lardan tashkil topgan), divaksinalar (ikkita tur antigendan), trivak- sinalar (uch tur antigenlardan tashkil topgan) va boshqalar. Assotsiatsiyalangan vaksinalar turli xil bakteriyalarning antigenidan va anatoksinlaridan tayyorlanadi. Masalan, assotsiatsiyalangan kokyotal, bogma, qoqshol vaksinasi (AKDS), ozida olik kokyotal mikroblari va bogma, qoqshol anatoksinlarini saqlaydi. Vaksinalarni mushak ichiga, teri ostiga, teri ustiga, teri ichiga, ogiz orqali yuboriladi. Vaksinatsiya (emlash) bir marotaba, ikki yoki uch marotaba 12 hafta yoki undan kop vaqt oraligida emlanadi. Vaksinaning xarakteriga kora, har bir vaksina uchun yuborish sxemasi ishlab chiqilgan. Vaksina yuborilgandan keyin umumiy va mahalliy reaksiyalar yuzaga kelishi mumkin. Umumiy reaksiyalarga haroratning kotarilishi (39°C gacha), bosh ogrishi, tinka qurishi, holsizlanish va boshqalar kiradi. Bu holat ikki-uch kundan keyin otib ketadi. Mahalliy reaksiyalarga vaksinatsiyadan song 12 kun otgach, vaksina yuboril- gan joyda infiltrat va qizarish hosil boladi. Vaksinalar (tulyaremiyaga, silga qarshi va b.) teri ustiga yuborilganda, mahalliy reaksiyalarning yuzaga kelishi emlashning ijobiy tasiridan darak beradi. Emlash ruxsat etilmaydigan kishilarni aniqlash maqsadida, emlanuvchi kishilarning vaksinatsiyadan oldin tibbiy korikdan otka- 145 zish talab etiladi. Qanday kasalliklari bor kishilarni emlash mumkin emasligi instruksiyada korsatib qoyiladi. Masalan, harorat kotarilgan hollarda, otkir yuqumli kasalliklarda, allergiya va boshqalarda. Shuningdek, ayollar homiladorligining ikkinchi yarmida emlanmaydi. Vaksina yordamida suniy emlashdan keyin immunitet 6 oydan 1 yilgacha, chinchechak, tulyaremiya va boshqa bazi infeksiyalarda bir necha yil saqlanadi. Vaksinatsiyada immunitet inyeksiyadan song 12 hafta otgach paydo boladi. Immunitetni yuksak darajada va uzoq muddatda saqlash uchun revaksinatsiya (yani, takror vaksinatsiya) otkaziladi, u organizmning immunitet vujudga keltirishdagi faolligini oshiradi. Revaksinatsiya bir necha oyda (bogmada) yoki bir necha yilda (chinchechakda) bir marta otkaziladi. Vaksina va anatoksinlar bakterial preparatlar ishlab chiqariladigan korxonalarda tayyorlanadi. Ularni tayyorlash uchun katta miqdorda mikrob osilmasi (biomassa) yoki virus saqlovchi material kerak boladi. Òayyor preparatlar ampula yoki shishalarga solinadi va kop hollarda quritiladi. Quruq preparatlar faollik va boshqa xossalarini uzoq vaqt saqlab qoladi. Ayrim vaksinalar tabletka yoki drojji korinishida chiqa- riladi, masalan, poliomiyelitga qarshi vaksina. Har bir ampula, shisha va qutichalarga preparatning nomi, hajmi, ishlatilish muddati, seriya raqami, nazorat raqamlari yoziladi. Prepa- ratlar, asosan, 4°C da saqlanadi. Ularni muzlatish, song eritish va yuqori harorat tasiridan saqlash, jonatilayotganda kerakli sharoitlarga rioya qilish lozim. Òashqi korinishida ozgarish bolgan va darz ketgan ampulalarni ishlatish man etiladi. Vaksinaning alohida turi bu autovaksinadir. Ular bemor organizmidan ajratib olingan mikroblarda bakteriologik laboratoriyalarda tayyorlanadi. Autovaksina osha bemorni davolash uchungina qollaniladi. Kopgina autovaksina surunkali shaklda otadigan infeksiyalarni davo- lashda qollaniladi (stafilokokk va b.). Ularni sxema asosida kam dozada kop marotaba yuboriladi. U organizmning himoya kuchini kuchaytiradi va bemorning sogayib ketishiga yordam beradi. Zardoblar organizmga yuborilganda, suniy passiv immunitet hosil qiladigan preparatlardir, chunki ular tarkibida tayyor antitelolar boladi. Ular ikki xil boladi: davolashda va profilaktikada qollaniladigan zardoblar hamda diagnostik zardoblar. Bu preparatlar ozida tayyor antitelolar saqlaydi. Ularni donor qonidan, yani odam yoki hayvonlarni maxsus immunlash yoli orqali tayyorlanadi (qizamiq, qoqshol, gripp). Bundan tashqari, kasallanib otgan yoki soglom odam qonida yetarli miqdorda antitelolar bolsa, 146 ularning qon zardobi ham qollaniladi. Shuningdek, immun preparat- larni tayyorlashda xomashyo sifatida yoldosh va abort qonidan ham foydalaniladi. Antibakterial va antitoksik zardoblar mavjud. Antibakterial zar- doblar kamroq qollaniladi. Antitoksik zardoblar koproq ahamiyatli, ular antitoksinli bolib, bogma, qoqshol, gazli gangrena, botulizm va boshqa kasalliklarni davolashda qollaniladi. Zardoblar alohida institutlarda tayyorlanadi, ularni zardob tayyorlaydigan maxsus bolimlari boladi. Otlar zardobida antitoksin yetarli darajada toplan- guncha ular anatoksin bilan uzoq vaqt immunlanadi (giperimmu- nizatsiya). Songra ulardan qon olinib, tindiriladi va zardob ajratiladi, titrlanadi (1 ml.dagi antitoksik birikmalar miqdori aniqlanadi), keyin uni steril holda saqlash uchun unga konservantlar (xinazol, xloroform) qoshiladi, ampulalarga quyiladi va davlat nazoratidan otkaziladi. Ot qonidan olingan preparatlar ozida odam uchun begona bolgan oqsillarni saqlaydi, ularni organizmga qayta yuborilganda allergik reaksiyalar: zardob kasalligi va anafilaktik shokni yuzaga keltiradi. Buni oldini olish maqsadida zardobli preparatlarni organizmga ehtiyotlik bilan (Bezredko usulida) yuboriladi. Hozirda antitoksik zardoblarni ballast oqsillardan turli fizikaviy- kimyoviy usullar «Diaferm3» dializ fermentlar yordamida parcha- lash, oqsillarning turli fraksiyalarini choktirish yoli bilan tozalanadi. Natijada, tozalangan, antitelolar konsentratsiyasi yuqori bolgan (1 ml.da 500010000 AB) zardoblar solinadi. Bunday zardoblarning yorliqlariga tegishli belgilar «diaferm», «dializlangan» sozlari yozib qoyiladi. Zardoblarga ham vaksinalar singari yorliq yopishtiriladi va unda zardobning tayyorlangan vaqti, 1 ml.dagi antitoksik birliklar miqdori, qollash muddati korsatiladi. Ularni ham qorongi va salqin joyda saqlash kerak boladi. Ular tiniq bolishi, biroz yaltirab turishi, chayqatganda yirik ipir-ipir bolmasligi lozim. Zardoblar bilan davolash kasallik jarayonini tez toxtata olishiga asoslangan. Zardobdagi antitoksin toksinni neytrallaydi (zararsizlantiradi), shundan song bemorning ahvoli ancha yaxshilanadi. Kasallik boshlangach, zardob qancha ertaroq yuborilsa, davolash natijasi shuncha muvaffaqiyatli boladi. Odatda, zardob mushak orasiga, ayrim hollarda, masalan, qoqsholda zardobni venaga yoki beldan umurtqa kanaliga (intralumbal) yuborish mumkin. Organizmga kasallik yuqqanda, uni mikroblar va zaharlardan himoya qilish uchun tez yordam berish kerak bolganda zardobni profilaktik maqsadda ham yuborish mumkin. Bunda yuborilgan zardob darhol passiv immunitetni vujudga keltiradi, chunki organizmga tayyor antitelolar kiritiladi. Passiv immunitet 23 hafta davom etadi. 147 Qoqshol (stolbnyak)ning oldini olish uchun zardob bilan majburiy tartibda jarohatlangan va jarohatlanmagan kishilar ham emlanadi, buni har bir tibbiyot xodimi yaxshi bilishi lozim. Hozirgi vaqtda ular orniga gammaglobulinlar qollanilmoqda. Gammaglobulinlar zardobdagi oqsillarning fraksiyalaridan biri bolib, bu fraksiyada antitelolar konsentratsiyasi yuqori boladi. Immunoglobulinlar qizamiq, gepatit, poliomiyelit, kokyotal, qizilcha va boshqa kasalliklarning oldini olishda qollaniladi. Zardob preparatlarini oz vaqtida va togri yuborilishi kopgina yuqumli kasalliklarning oldini oladi. Zardoblardan kasalliklarga tashxis qoyishda ham keng foydalaniladi, yani immunologik reaksiyalarni qoyishda qollaniladi. Buning uchun agglutinatsiyalovchi, pretsipita- tsiyalantiruvchi, gemolizlantiruvchi va lizislantiruvchi zardoblardan foydalaniladi. Bu zardoblar agglutinatsiya, pretsipitatsiya gemoliz yoki lizis reaksiyalarini qoyishda ishlatiladi. Zardoblarni diagnostikada qollanilishi serodiagnostika deyiladi. 1. Vaksinalarning qanday turlarini bilasiz? 2. Passiv immunitet qanday preparatlar yordamida hosil qilinadi? 3. Autovaksina nima? 4. Seroterapiya, seroprofilaktika va serodiagnostika deganda nimani tushunasiz? 12-bob. ALLERGIYA Allergiya (lotin. allos begona, erqon tasir etish) bu orga- nizmning turli xil begona moddalarga (antigenlarga) nisbatan yuksak sezuvchanligi. Yuksak sezuvchanlik holatini yuzaga keltiruvchi moddalarga allergenlar deyiladi. Allergen bolib mikroorganizmlar (bakteriyalar, viruvslar, zamburuglar), mikrob hujayrasi ishlab chiqaradigan moddalar, hayvonga mansub bolgan oqsillar (tuxum, sut va b.), osimlik tabiatli oqsillar (qoziqorin, yer tuti va b.), davolovchi getereologik zardoblar va boshqalar hisoblanadi. Bu moddalarning barchasi tola qimmatli antigen hisoblanadi. Bundan tashqari, gaptenlar ham allergiyani keltirib chiqaradi. Ular organizmdagi oqsillar bilan birikish natijasida allergik moddalarni hosil qiladi. Bundan tashqari, allergiyani allergenlar (boyoqlar, laklar, sovun va b.), maishiy aller- genlar (chang, mushuk va it, hayvon junlari, yostiq parlari va b.), ? Nazorat uchun savollar 148 osimlik allergenlari (osimliklar gullayotgandagi changlar), dorivor moddalar (antibiotiklar, aspirin va b.) ham keltirib chiqarishi mumkin. Allergiya organizmning turli xil agentlarga oziga xos giper- sezuvchanligidir. Ularning asosida antigen va antitelolarning reaksiyasi yotadi. Organimzga birinchi safar kirgan allergenlarning biri antiteloni hosil qilsa, ikkinchisi Ò-limfotsitlarni sensibilizatsiyalaydi. U yoki bu holda ham ozgarishlarni hosil qilgan allergenlar bilan qayta uchrashish organizmning yuqori sezuvchanligini orttiradi. Bu allergen bilan qayta kurashish namoyon bolishi mumkin. U allergenga va organizmning immunologik tuzilish xarakteriga bogliq. Barcha allergik reaksiyalar ikki guruhga: tez yuzaga chiqadigan va asta-sekin yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalarga bolinadi. Òez yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalarga: anafilaksiya, ArtyusSaxarov fenomeni, zardob kasalligi, atopiya (bronxial astma, pollinoz, krapiv- nitsa (eshak yemi) va b.) kiradi. Asta-sekin yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalarga infeksion allergiya, kontakt dermatit, dorivor allergiya kiradi. Òez yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalar Anafilaksiya (lotin. ana qarshi, phylaxis himoya) bu begona antigenlarni qayta yuborilgandan keyin shok yoki unga yaqin holatni tez namoyon qiladigan yuksak sezuvchanlik. Anafilaksiyani yuzaga keltiruvchi moddalarni anafilaktogenlar deyiladi. Ularga begona oqsillar, bakteriya toksinlari, mikrob hujay- rasining polisaxaridlari, turli xil dorivor moddalar, yani tola qimmatli antigenlar va gaptenlar kiradi. Anafilaksiya mexanizmi. Anafilaktogen (masalan, ot zardobi dengiz chochqachasiga yuborilganda) birinchi safar yuborilganda oziga xos sensibilizatsiyani yuzaga keltiradi. Antitelolar (IoE) hosil boladi, ular 1012 kundan keyin maksimal titrda toplanadi. Bu antitelolar qonda aylanib yurib qisman hujayra tanasiga singadi. Begona oqsilning sensibilizatsiyani yuzaga keltiruvchi birinchi dozasini sensibilizatsiyalovchi doza deyiladi. Bu uncha katta bolmagan dozadir (dengiz chochqachasi uchun ot zardobidan 0,010,001 ml). Sensibilizatsiya antigenni parenteral (oshqozon-ichak yoli) yubo- rilganda yuzaga keladi. Lekin u antigen ichak yoki opka shilliq qavati orqali otayotganda ham yuzaga kelishi mumkin. Yuzaga kelgan allergik holat uzoq vaqt bir necha oy va hatto yillab saqlanishi mumkin. Ana shu anafilaktogenni qayta yuborilganda tez yuzaga chiqadigan allergik reaksiya turi anafilaktik shokni yuzaga keltiradi, uning tasirida hayvon nobud boladi. Anafilaktik shokning kelib chiqish shartlari quyidagilardan iborat: 149 1. Qayta yuboriladigan doza sensibilizatsiyalovchi dozadan 10100 marta ortiq bolishi lozim. 2. Bu doza togridan togri qonga yuborilishi lozim. Anafilaksiya patogenezida organizmga begona oqsil yoki boshqa anafilaktogen kirganda, unga javoban hosil bolgan antitelo asosiy rolni oynaydi. Bu antitelolar qisman hujayra nishon deb nomlangan hujayralarda adsorbsiyalanadi. Allergenning hal qiluvchi dozasini qayta yuborilganda, u shu hujayra yuzasidagi antitelolar bilan reaksiyaga kirishadi, hujayra membranasining yaxlitligi buziladi. Bu hujayradan koplab gistamin moddasining ajralishiga va anafilaktik shokni yuzaga kelishiga olib keladi. Qonda aylanib yurgan antitelo va antigenlarning boglanishi pretsiðitatlarning hosil bolishiga sabab boladi, shu- ningdek, mediatorlar faolligini yuzaga keltiradi. Sensibilizatsiyalangan hayvon zardobini shu turga oid soglom hayvonga yuborilsa, 12 kun otgandan keyin (bu vaqt yuborilgan antiteloni ishonch hujayrasiga fiksatsiyalanishi uchun kerak) u ham sensibilizatsiyalanadi. Anafilaktogenning hal qiluvchi dozasi hayvonlarda shokni yuzaga keltiradi. Bu passiv anafilaksiya deyiladi. Anafilaktik shokning klinik belgisi turli xil hayvonlarda turlicha kechadi. Dengiz chochqachalarida anafilaktogenning ikkinchi dozasini vena ichiga yuborilganda reaksiya darhol yuzaga chiqadi, hayvon betoqat bolib, oyogi bilan burnini qashlaydi, aksiradi, hansirash, song titroq yuzaga keladi, ixtiyorsiz siydik va najasi ajraladi va hayvon nobud boladi. Ular yorib korilganda bronxlar spazmi (qisilishi), opkalar shishgani, ovqat hazm qilish azolarida qizarish va qon quyilishi kuzatiladi. Itlarda anafilaktik shok tomirlarning qisilishi va jigarda qonning turib qolishi bilan kuzatiladi. Quyonlar anafilaksiyasida ular nafas olishning toxtashi va qon bosimining tushib ketishidan nobud boladilar. Bu holat kichik qon aylanish doirasi arteriyasining spazmi natijasida yuzaga keladi. Odamda anafilaktik shok zardobli preparatlarni yuborish qoidalarini buzilishi yoki penitsillin va boshqa dori moddalari yuborish natijasida yuzaga keladi. Reaksiya koz mushaklarining spazmasi, yurak-tomir sistemasining buzilishi bilan namoyon boladi. Òana harorati 12°C ga pasayadi, hansirash kuzatiladi, tomir urishi tezlashadi, arterial bosim pasayadi, qaltirash, bogimlarda ogriq va boshqa belgilar yuzaga keladi. Ayrim hollarda anafilaktik shok olim bilan tugaydi. Anafilaktik shokning oldini olish uchun desensibilizatsiyani, yani yuqori sezuvchanlikni yoqotish kerak. Shu maqsadda barcha ana- filaktogen moddalarni yuborishdan avval, shokni yuzaga keltirmay- digan va yuborilgan anafilaktogen antiteloni boglab oladigan dozasi yuboriladi. Masalan, odamga kerak bolgan begona ot zardobidan 150 (bogma, qoqsholga qarshi) avval 0,51,0 ml, 2 soatdan keyin qolgan dozani yuboriladi. Bu zardobni Bezredko usulida yuborish deyiladi. Zardobli preparatlar hamma vaqt bolib-bolib yuboriladi. Avval yuboriladigan preparatga odamning sezuvchanligi aniqlanadi. Shu maqsadda birlikning ichki tomoniga yuborilishi kerak bolgan, 1 : 100 suyultirilgan zardobdan teri ichiga 0,1 ml yuboriladi. Agar reaksiya manfiy (biroz qizarish va 1 sm.dan kamroq kenglikda shishish) bolsa, 2030 daqiqadan song 0,10,5 ml suyultirilmagan zardob- dan teri ichiga yuboriladi. 3060 daqiqadan song reaksiya manfiy bolsa, qolgan doza ham yuboriladi. Zardob kasalligi odamga begona zardob (masalan, ot zardobini) yuborilganida yuzaga keladi. U preparat yuborilgan zahoti yuzaga kelib va anafilaktik shok turiga kora ogir otishi mumkin. Organizmga zardob yuborilganda shu zardobga nisbatan antitelo hosil boladi, shu zardobni qaytadan yuborilganda zardob kasalligi yuzaga keladi. Lekin zardob kasalligi zardobni birinchi marotaba kop miqdorda yuborilgan hollarda ham yuzaga kelishi mumkin. Bunday hollarda u zardob yuborilganidan 812 kundan song namoyon boladi, chunki bu davr mobaynida organizmda zardobga nisbatan antitelo sintezlanadi. Òoshma toshadi (eshak yemi), badan qichishadi, bogimlarda ogriq paydo boladi, limfa tugunlari kattalashadi, haroratning kotarilishi kuzatiladi, asta- sekin bu belgilar yoqoladi. Immunoglobulinlar qollanilishi zardob kasalligining oldini oladi. Atopik reaksiyalar (atopiya) (lotin. atopos ajablanarlik, galati) allergenlar sezuvchanlik yuqori bolgan odamlarda orga- nizmga allergenlar kirganda ularga nisbatan javobning hosil bolishidir. Yuqori sezuvchanlikka moyillik nasldan naslga otadi. Bu reaksiyaning mexanizmi organizmning shu allergen bilan birinchi uchrashuvida hosil bolgani kabi, allergen va antitelo orasidagi tasirdek boradi. Bunda anafilaksiyadagidek gistamin va unga oxshash moddalar ajraladi, ular silliq mushaklarni qisqartiradi, tomirlarning otkazuvchanligini oshiradi va boshqalar. Azo va toqima hujayralariga antitelolar yopishishiga qarab, turli xil holatlar yuzaga keladi: nafas yolini shikastlanishi allergik tumov va bronxial astma, koz shilliq qavatining shikastlanishini konyun- ktiva, terini shikastlanishi eshak yemi (krapivnitsa) toshishi va bosh- qalar. Bundan tashqari, atopiya organizm ayrim moddalarni oziq- ovqatlar, dorivor va osimlik moddalarini kotara olmasligi natijasida ham yuzaga keladi. Atopiyaning anafilaksiyadan farqi shundaki, u desensibilizatsiyaga berilmaydi va faqat odamlarda kuzatiladi. Bronxial astma. Kasallik bogilish xuruji va ogir spazmatik yotal bilan otadi. U bronx mushaklarini qisqarishi va bronx shilliq qavatining 151 shishishi natijasida kelib chiqadi. Asosan, astmani kelib chiqishiga, turli xil allergenlar chang, osimliklar, hayvon juni, dori moddalari va boshqalar sabab boladi. Pollinoz (pichan isitmasi ñåííàÿ ëèõîðàäêà). Odatda, bahor va yoz oylarida, osimliklarning gullash davrida kuzatiladi. Osimlik changi yoki zamburug sporalari shilliq qavatlarga kirishi natijasida konyunktivit, tumov, bosh ogrigi, ayrim hollarda nafas siqishi kuzati- ladi. Kasallikning rivojlanishi organizmning oldingi sensibilizatsiyasiga bogliq. Qonda antitelo bilan osimlik changlarini aniqlash mumkin. Krapivnitsa (eshak yemi) toshmalar «obi non» singari yirik qizarish va qichishish bilan namoyon boladi. Oziq-ovqatlar (yer tuti, qozi- qorin, tuxum va b.) yoki kimyoviy moddalar, masalan, fenolftalein bilan ishlaganda kuzatiladi. Asta-sekin yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalar Asta-sekin yuzaga chiqadigan allergik reaksiyalar allergiyaning bir korinishi bolib, organizmning sensibilizatsiyasi, Ò-limfatsitlar- ning (sensibilizatsiyalangan Ò-limfatsitlar) faolligi va toplanishiga bogliq. Òez yuzaga chiqadigan allergiyaning asta-sekin chiqadigan allergiyadan farqi quyidagilardan iborat: birinchidan, qonda aylanib yurgan antitelolar bilan boglanmagan va sensibilizatsiyalangan hayvon zardobini boshqa hayvonga asta-sekin yuzaga chiqadigan allergiyani asta-sekin uzatilishi sodir bolmaydi. Ikkinchidan, u tez yuzaga chiqmasdan, allergen bilan kontaktda bolishi natijasida 2428 soatdan keyin yuzaga chiqadi. Asta-sekin yuzaga chiqadigan allergik reaksiyaning mexanizmi. Allergenning Ò-limfatsit bilan (shu allergenga mos retseptorning bolishi) uchrashuvi Ò-hujayraning faolligini oshiradi va uni kopayishiga olib keladi. Natijada organizmda shu allergenga sensibili- zatsiyalangan Ò-limfatsitlar toplanadi. Shu allergen bilan qayta uchrashganda Ò-limfatsitlar yana faollashadi va antigenni olib yuruvchi nishon hujayralarni parchalash jarayoniga makrofaglarni jalb qiladi. Bunda Ò-limfatsitlar nobud boladi. Atrofdagi hujayralarga zaharli moddalar ajraladi. Allergiyaning klinik belgilari namoyon boladi. Infeksion allergiya bu mikroorganizmlarga yoki ular ishlab chiqaradigan mahsulotlarga organizmning yuksak sezuvchanlik holati. Kopgina yuqumli kasalliklarda yuzaga keladi va ularning patogenezida katta rol oynaydi va bemor sogaygandan keyin ham ancha vaqtgacha saqlanadi. Infeksion allergiya, brutselloz, zaxm va boshqa kasalliklarda kuzatiladi. 152 Infeksion allergiyada reaksiyaning spetsifikligi kopincha yuqumli kasalliklar diagnostikasida (sil, brutselloz, tulyaremiya va b.) qollaniladi. Òeri ichiga yoki teri ustiga oz miqdorda allergen, filtrat yoki lizat kultura, qizdirish yoki kimyoviy moddalar tasirida oldiril- gan bakteriya ilinmasi yuboriladi. Organizm yuqori sezuvchanligida allergen yuborilgan yerda reaksiya sodir boladi: qizarish, shishish, ogriq. Ayrim hollarda umumiy reaksiya ham sodir bolishi mumkin: darmonsizlik, kamquvvatlik, umumiy jarayonni zorayishi (masalan, silda tuberkulin yuborilganda) kuzatiladi. Kontakt dermatit teri allergik kasalligi. U turli xil kimyoviy moddalar bilan uzoq vaqt davomida ishlash natijasida sodir boladi. Bunda sovun, yelim, boyoqlar, rezina, dorilar, kosmetika va boshqa oddiy zararsiz moddalar allergen bolib hisoblanadi. Ular gaptenlar bolib hisoblanadi, lekin ular organizmdagi oqsillar bilan birikib antigen (allergen) bolib qoladilar. Kasallikning kechishi turlichadir, teri qizarishidan boshlab nekrozgacha kuzatiladi. Kontakt dermatitga ekzema (ekzematoz dermatit) kiradi. Ayrim odamlarda turli xil oziq-ovqat mahsulotlari (tuxum, suzma, yer tuti va b.)ga, dorilar (asetilsalitsil kislotasi, amidopirin va b.)ga allergiya kuzatiladi. Ular gaptenlar bolib, bu moddalar organizmdagi oqsillar bilan birikib antigen bolib qoladi va allergiyani yuzaga keltiradi. Faqat allergen bilan qayta toqnash kelishning oldini olish bilan kopgina allergik reaksiyalarni bartarf etish mumkin. Lekin yuqori sezuvchanlik holatini yuzaga keltiruvchi antigenni aniqlash murakkab kechadi. Buning uchun tavsiya etilgan allergen bilan teri ichi sinamasi qoyiladi. Keyingi yillarda kopgina infeksion (infeksion allergiyani yuzaga keltiruvchi turli xil mikroorganizmlardan), noinfeksion (turli xil changlar, oziq-ovqat mahsulotlari, kimyoviy moddalar va b.) allergenlar kuzatilmoqda. Shuni esda tutish kerakki, organizmga aller- genni oz miqdorini yuborilganida ham qoshimcha allergizatsiyani chaqiradi. Shuning uchun songgi vaqtda laboratoriyada allergik usul keng qollanilmoqda. 1. Allergik reaksiyalarning qanday turlarini bilasiz? 2. Anafilaksiya qachon yuzaga keladi va namoyon boladi? 3. Organizmga zardobli preparatlarni yuborganda anafilaksiya yuzaga chiqmasligi uchun qanday ishlarni olib borish lozim? ? Nazorat uchun savollar 153 II qism. XUSUSIY MIKROBIOLOGIYA PATOGEN KOKKLAR Kokklar bu mikroorganizmlarning keng guruhi bolib, ularga patogen, shartli patogen va patogen bolmagan turlari kiradi. Bu bolimda patogen va shartli patogen kokklar korib otiladi. Berg tasnifiga kora, patogen kokklar uch oilaga kiritiladi: 1. Micrococcaceae Staphylococcus (stafilokokklar) avlodi. 2. Streptococcaceae Streptococcus avlodi (streptokokklar va pnevmokokklar). 3. Neisseriaceae Neisseria avlodi (meningokokklar va gonokokklar). Patogen kokklar yiringli jarayonlarni keltirib chiqaradi, shu xossasiga kora, ular bir-birlariga oxshaydi, shuning uchun ularni yiring chaqiruvchi kokklar deb ataladi. Kokklarda organotroplik darajasi bir xil bolmay, bu pnevmokokk, meningokokk va gonokokklarda koproq namoyon boladi. Barcha patogen kokklar harakatsiz bolib, spora hosil qilmaydi, pnevmokokk kapsula hosil qiladi. Boyalishiga kora ular Grammusbat (stafilokokk, streptokokk) va Grammanfiy (meningokokk, gonokokk) boladi. Yiring chaqiruvchi kokklar bir-biridan oziqa muhitlarga talabchanligiga va biokimyoviy faolligiga kora farqlanadi. Stafilokokk esa oziq muhitga talabchan emas, biokimyoviy xossasiga kora faoldir. 13-bob. STAFILOKOKKLAR Stafilokokklarni birinchi bolib, 1880-yilda L. Paster aniqlagan. A. Ogston (1882) va F. Rozenbax (1884) ularni chuqur organishgan. Morfologiyasi. Stafilokokklar (yunon. staphyle uzum shingili) sharsimon, diametri 0,51,5 mkm, surtmada uzum shingiliga oxshab joylashadi. Lekin yiringda alohida yoki juft-juft bolib joylashadi. Ular harakatsiz, spora hosil qilmaydi, maxsus usullarda undirilganda, mikrokapsula hosil qiladi, Grammusbat. Kultural xossasi. Stafilokokklar fakultativ anaerob, lekin kislo- rodli sharoitda yaxshiroq osadi. Oddiy oziqa muhitida yaxshi osadi va bolinib kopayadi, qonli muhitda ham yaxshi osadi, optimal harorati 37°C, pHi 7,27,4. 154 Tuxum sarigi qoshilgan tuzli agar va tuzli-sutli agar elektiv muhit bolib hisoblanadi. GPA da stafilokokklar 24 mm kenglikda chetlari tekis, bortib chiqqan, yumaloq, xira, yaltiroq koloniya hosil qilib osadi. Ular ostirilganda oq, sariq, tillarang pigment hosil qiladi. Ayniqsa, sutli muhitda, uy haroratida va yoruglik tarqoq yerda yaxshiroq pigment hosil qiladi. Stafilokokkning pigmenti suvda erimaydi, aseton, efirda, spirt va boshqalarda yaxshi eriydi. Qonli muhitda koloniya atrofida gemoliz zonasini hosil qiladi. Suyuq muhitda bir xilda loyqalanib va probirka tubida chokma hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Stafilokokklar saxarolitik va proteolitik fermentlar ishlab chiqaradi. Saxarolitik fermentlar laktoza, glukoza, saxaroza, maltoza, glitserin va boshqalarni kislotagacha parchalaydi. Stafilokokkning proteolitik xossasi kazeinni eritish xossasida, jelatinani sekinlik bilan suyultirishda va boshqa oqsillarni parchalanishida namoyon boladi. Stafilokokklar quyidagi patogen fermentlar ishlab chiqaradi: 1)koagulaza (qon plazmasini ivitadi); 2)gialuronidaza (tarqalish faktori); 3)letsitinaza (hujayra qobigidagi litsitinni eritadi); 4) DNK aza (DNKni depolimerizatsiyalaydi); 5)fosfataza va boshq. Plazmakoagulaza fermentini aniqlash tillarang, stafilokokkni boshqa turdagi stafilokokklardan farqlashda qollaniladi. Kopgina stafilokokklar penitsillinni parchalaydi. Toksin hosil qilish. Stafilokokklar ekzotoksin ishlab chiqaradi, ularda tort xil gemolizin kiradi. Shulardan α toksini koproq ahamiyatga ega. U quyidagi xususiyatlarga ega: gemolitik eritrotsitlarni gemolizga uchratadi, dermonekroz teri ichiga yuborilganda, nekrozni keltirib chiqaradi, letal hayvon venasiga yuborilganda uning olimiga sabab boladi. Stafilokokklar gemolizindan tashqari, leykotsitlarni parchalaydigan leykotsidin toksinini ham ishlab chiqaradi. Bazi shtammlarni ente- rotoksin hosil qiladi, u ovqatdan zaharlanishni yuzaga keltiradi. Antigenlik xossasi. Stafilokokklar ozida polisaxarid va oqsil tabiatli antigen saqlaydi. Tillarang stafilokokkning 40 taga yaqin fagovarlari bolib, infeksiya manbai va tarqalish yolini aniqlashda katta aha- miyatga ega. Tasnifi. Odam organizmidan ajratib olingan stafilokokklarning uch turi aniqlangan. S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus (20-jadval). 155 20-jadval Odam organizmidan ajratib olingan stafilokokk turlarining farqlanishi k k o k o li f a t S i r a l r u t i r a l a s s o X + + + + + + + + I z o h : «+» chidamliligi, ferment ishlab chiqarishi; «» ferment ishlab chiqarmasligi, chidamsizligi. Tashqi muhit omillariga chidamliligi. Stafilokokklar ancha chidamli, shuning uchun ularni suv, havo, tuproq, jihozlarda aniq- lash mumkin. 100°C haroratda shu zahoti, 70°C haroratda 1015 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratda yaxshi saqlanadi. Muzla- tilganda bir necha yilgacha saqlanadi. Quritishga chidamli. Tik quyosh nuri tasirida bir necha soatdan keyin nobud boladi. Dezinfeksiyalovchi eritmalar tasirida 1520 daqiqadan song nobud boladi. Brilliant yashiliga sezgir. Patogenligi. Stafilokokka yirik va mayda shoxli hayvonlar, sigir, ot, chochqa, tovuqlar sezgir boladi. Laboratoriya hayvonlaridan quyonlar, oq sichqon va mushuk bolachalari sezgir. Infeksiya manbai. Kasal odam va bakteriya tashuvchi. Tarqalish yoli. Havo-tomchi, havo changi, alimentar, egri kon- takt yoli bilan tarqaladi. Odamlarda keltirib chiqaradigan kasalliklar. Piodermiya furunkul (chiðqon), karbunkul (hoðpoz), panaritsa abssess (fasod boglash), angina, sistit osteomiyelit, xoletsistit, mastit, sepsis, septikopiye- miya, ovqatdan zaharlanish va boshqa kasalliklar. Patogenezi. Shilliq pardalar va teri kirish darvozasi hisoblanadi. Stafilokokk kasalliklarining kelib chiqishida tillarang stafilokokkning (S. aureus) ahamiyati katta. S. epidermidis va S. saprophyticus larning odam patologiyasida roli kamroqdir. Kasallik patogenezi qozga- Plazmani koagulatsiyalashi DNK aza fermentini ajratish Fosfataza mahsu- lotini ishlab chiqarishi α gemolitik faolligi Anaerob sharoitda mannitni parchalash Erob sharoitda mannitni parchalash Novobiotsinga chidamliligi S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus 156 tuvchining fermentativ toksigenlikka, bakteriya hujayrasi modda- lariga va makroorganizmning immun sistemasi xossalariga bogliqdir. Kopincha teri va teri ostini zararlab milkak (tirnoq ostini yalliglab yiring boglashi), furunkul (chiðqon), piodermitlar (terining yiringli kasalliklari)ni keltirib chiqaradi. Stafilokokklar kopincha ikkilamchi infeksiyalarni keltirib chiqaradi, masalan, griðpdan pnevmoniya. Ular, shuningdek, jarohat infeksiyasini keltirib chiqaradi. Akusherlik amaliyotida stafilokokkning roli katta, chunki chaqaloqlar ularga juda sezgir boladi. Stafilokokk kasalliklari paytida allergiyaning kuchayishi katta ahamiyatga ega, shuning natijasida kasalliklarning qaytalanishi bilan xarakterlanadi. Stafilokokk kasalliklari orasida ovqatdan zaharlanish asosiy orin egallaydi. Kasallik belgilariga kora ular qusish, ich ketish, bosh ogrigi va boshqa kasallik belgilari bilan namoyon boladi. Immunitet. Odam organizmida tabiiy himoya mavjud bolib, bu fagotsitoz va antitelolar tufaylidir. Ular mexanik omillarga bogliqdir. Bu organizmga tushgan stafilokokk qozgatuvchilarning organizmda tarqalib ketishiga qarshilik korsatib, yalliglanish jarayonining oldini oladi. Hosil bolgan ochoqda stafilokokklar fagotsitozga uchraydi. Kasallik jarayonida hosil bolgan antitoksin, immunitetning umumiy kompleksida ahamiyatli omil hisoblanadi. Orttirilgan immunitet esa mustahkam bolmaydi, shuning uchun kasallikni qaytalanishi kuza- tiladi. Profilaktikasi. Sanitariya-gigiyena sharoitlarni yaxshilash, bemor- lar va bakteriya tashuvchilarni aniqlashni faollashtirish, kasalxona muassasalarida ish tartibini yaxshilashdan iborat. Maxsus profilaktikasi. Stafilokokk anatoksini va stafilokokka qarshi immunoglobulin yuboriladi. Davosi. Bakteriyalarga qarshi dorilar, polivalent stafilokokk bakte- riofagi, stafilokokka qarshi zardob va immunoglobulinlar yuboriladi. Ayrim hollarda stafilokokk infeksiyasi surunkali shaklda otganda, autovaksina buyuriladi. 1. Qanday xususiyatlariga kora, stafilokokklar bir guruhga kiritiladi? 2. Stafilokokklar qanday patogen fermentlar va omillarni ishlab chiqaradi? 3. Stafilokokklar qanday kasalliklarni keltirib chiqaradi? 4. Stafilokokklarning qanday turlari bor? ? Nazorat uchun savollar 157 MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH Tekshirish maqsadi: stafilokokklarni aniqlash va farqlash. TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Yiring (furunkul, karbunkul, abssessda). 2. Tomoqning ustki qismidan shilliq (anginada). 3. Balgam (zotiljamda). 4. Siydik (piyelit va sistitda). 5. Ot suyuqligi (xoletsistitda). 6. Qon (sepsisga shubha qilinganda). 7. Qusuq modda, oshqozon yuvindisi, oziq-ovqat qoldiqlari (ovqatdan zaharlanganda). 8. Burundan shilliq (bakteriya tashuvchilikka tekshirganda). Tekshirish materialini toplash usuli g n i n a h o s n a g n a lt a h o r a j i n il a i r e t a m h s i r i h s k e T .i d a n il o n a d i m s i q q o r r u q u h c t a h o r a j q i h c O , k il i p il a k o d i k o y a t x a p g n i r i y n a d i r a l a h o s a d i m a d r o y i s a k t e p i p r e t s a P q i p o Y .i d a n il o a d r a l n o y a r a j a s e i n g n i r i y a d i m a d r o y s i r p h s li r e t s .i d a n il o .i d a n il o n a li b k il i p a t x a p li r e t S a g r a l h s i d i li r e t S .i d a li g i y a g h s i d i li r e t S t e t a ê ( i d a n a l p o t e a d i m a d r o y r i k b a l a t r e . ) m i z o l h s il o i n k i d y i s a g r a l h s i d i li r e t s i n i r o d q i m .i d a n il o a t 3 ( h s a l p o t a g h s i d i r i b i n i r o d q i m m a h . ) n i k m u m .i d a n il o l m 5 1 0 1 n a d i s a n e v k a li B a d i h s i d i li r e t S .i d a n a l p o t a g h s i d i li r e t S .i d a n il o Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Mikrobiologik. 3. Biologik. A, B, C Jarohatlangan sohadan yiring olish. Tomoq, burundan shilliq olish. Balgam. Siydik. Ot suyuqligi. Qon. Qusuq moddasi. Oshqozon yuvindisi. 158 TEKSHIRISH USULI Tekshirishning birinchi kuni il a i r e t a m h s i r i h s k e T i r a ll u s u h s i r i h s k e T a v n o q il % 5 3 i g a d i s a h c a s o k i r t e P a g r a g a il z u t n a g li h s o q i g i r a s m u x u t , b a l r o y y a t a m t r u s g n i r i Y .i d a li k e l a i r e t a m a d it s o p o k s o r k i m b a y o b a d il u s u m a r G .i d a li r i h s k e t il z u t n a g li h s o q i g i r a s m u x u t a v il n o Q .i d a li k e a g r a g a a v n o q i n i s a m k o h c ,i d a n a l a g u fi r t n e S a g r a g a il z u t n a g li h s o q i g i r a s m u x u t a d il u s u m a r G , b a l r o y y a t a m t r u S .i d a li k e .i d a li r i h s k e t a d it s o p o k s o r k i m b a y o b il z u t n a g li h s o q i g i r a s m u x u t ,i l n o Q .i d a li k e a g r a g a a m ti r e g o l o i z if , b i n il o s a g a h c n o v o H l m 2 1 .i d a n a l r o y y a t a m h s i r o q n a li b i g i r a s m u x u t , b il o n a d a m h s i r o q .i d a li k e a g r a g a il z u t n a g li h s o q .i d a li k e a g a v r o h s il r a k a h S Barcha ekilgan muhitlarni termostatda bir kunga qoldiriladi. Kateter yordamida olingan siydik chokmasi va abssessdan shpris yordamida olingan yiringdan surtma tayyorlab, boyab mikroskop ostida tekshiriladi, stafilokokklar korinsa, stafilokokklar aniqlandi deb taxminiy tashxis qoyish mumkin. Tekshirishning ikkinchi kuni. Suyuq va zich oziqa muhitini termostatdan olib organiladi. Tuxum sarigi qoshilgan tuzli agarda osgan shubhali koloniya- dan olib, sof kultura ajratib olish uchun qiyshiq agarga ekiladi. Shubhali koloniyani, yani kamalaksimon chegara hosil qilgan koloniyani tanlash lozim. Mikrob kulturasi osgan kosachani pigment hosil qilish uchun 23 kunga uy haroratida qoldiriladi. Qonli agardagi eritrotsitlarni gemolizga uchratgan, aniq gemoliz chegarasi bolgan koloniyadan olib, sof kulturani ajratib olish uchun qiyshiq agarga ekiladi. Bemor qoni ekilgan shakarli shorva 10 kunga qoldiriladi va har 23 kunda qonli hamda tuxum sarigi qoshilgan tuzli agarga ekib organiladi. Zich oziqa muhitida mikrob kultura osmasa, shakarli shorvadan olib zich oziqa muhitiga qaytadan ekiladi. Ekilgan muhitlar bir kunga termostatda qoldiriladi. Yiring. Shilliq qavatlardan olingan ajralma. Siydik. Balgam, ot suyuqligi. Qusuq moddasi, ovqat qoldigi. Qon. 159 Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhitlarni termostatdan olib kozdan kechiriladi. Qiyshiq agardan olib surtma tayyorlab, Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Agar Grammusbat, uzum shingiliga oxshab joylashgan stafilokokklar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi: A) Plazmakoagulaza reaksiyasi otkaziladi. B) Gemolitik xossasi organiladi. D) DNK mahsuloti aniqlanadi. E) Mannitni anaerob sharoitda parchalashi aniqlanadi. F) Fagga sezuvchanligi organiladi. G) Antibiotikka sezuvchanligi organiladi. Plazmakoagulaza reaksiyasi. Quyon qonidan olingan sitratli plazmani fiziologik eritma bilan 1:4 suyultiriladi va ikkita pretsiðitat probilkaga 0,30,5 ml solinadi. Probirkalarning biriga tekshirilayotgan sof kulturadan bakteriologik qovuzloq bilan solinadi. Ikkinchi probirka esa nazorat probirkasi hisoblanadi. Natijada 23 soatdan keyin oqiladi. Agar plazma ivimagan bolsa, 24 soat xona haroratida qoldiriladi. Shundan song natija oqiladi. Tekshirilgan stafilokokk kultura koagulaza fermentini ajratsa, plazma ivib qoladi (probirkani ton- karganda tokilmaydi). Nazorat probirkadagi plazmaning konsistensiyasi ozgarmaydi. Koagulazani aniqlashdagi tezlashtirilgan usul. Yogsizlantirilgan buyum oynacha ustiga bir tomchi steril suv va tekshirilayotgan mikrob kultura solinib aralashtiriladi. Song unga suyultirilmagan plazmadan tomiziladi. 2060 daqiqadan song yirik chokma hosil boladi, bu reaksiya musbat hisoblanadi. Gemolitik xossasini aniqlash. Tekshirilayotgan mikrob kulturani 5 % qonli agarga ekiladi (αgemolizni ishlab chiqaruvchi shtammlar quyon va qoy eritrotsitlarini gemolizga uchratadi, β gemolizinli shtammlari esa faqat qoy eritrotsitlarini gemolizga uchratadi). DNK mahsulotini aniqlash. Tekshirilayotgan mikrob kulturani DNK saqlovchi muhitga ekiladi. 1820 soatga termostatga qoldiriladi. Vaqt otgach olib, osgan kultura ustiga 57 ml xlorid kislotasi quyiladi. DNK kislota bilan reaksiyaga kirishadi va muhit loyqalanadi. Agar tekshirilayotgan mikrob kultura DNK fermentini ishlab chiqarsa, DNKni depolimerizatsiyalaydi va muhit tiniq qoladi. Mannitni anaerob sharoitda parchalash. Tekshirilayotgan kulturani mannit saqlovchi muhitga sanchib ekiladi. Muhit ustiga vazelinli yog quyiladi, termostatda 37°C haroratda 1824 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach olib qaralganda, muhitning rangi ozgargan bolsa, reaksiya musbat hisoblanadi. 160 Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Hisoblab chiqilgan belgilarning mavjudligi tillarang stafilokokkni boshqa turdagi stafilokokkdan farqlashga imkon beradi va toliq tashxis qoyiladi: S.aureus aniqlandi, deb javob beriladi (21-jadval). 21-jadval Tillarang stafilokokkning xususiyatlari - k i M g n i n b o r i r u t - u g a o k a m z a l P i s a y i s k a e r a z a l n a d t a o s 4 2 3 g n o s - o r ti r E i n r a lt i s t - z il o m e g h s a l - it i s t e L a z a n i g il l o a f i n ti n n a M - a l a h c r a p i h s K N D - u s h a m it o l - a ll i T g n a r - o li f a t s k k o k + + + + I z o h : «+» reaksiya musbat. Epidemiologik zanjirni aniqlash maqsadida, ajratib olingan kulturani fagga nisbatan sezuvchanligi organiladi. Fagga sezuvchanlikni aniqlash bemor va tashqi muhitdan ajratib olingan stafilokokklarning farqini tasdiqlab beradi. Fagga sezuvchanlikni aniqlash. Petri kosachasiga 20 ml 1,5 % li GPA quyiladi. Qotish va quritish uchun termostatda 30 40 daqiqaga qoldiriladi. 1 ml 46 soatlik stafilokokk kulturasi ochiq muhit yuzasiga yoyilib ekiladi, ortiqchasi piðetkada olib tashlanadi va quriguncha termostatda qoldiriladi. Petri kosachasi orqa tomonidan sektorlarga bolinadi. Sektorlar soni qollanilayotgan faglarning soniga teng bolishi kerak. Har bir sektorga malum fag tomiziladi. Petri kosachalarini termostatda 37 ° C da qoldiriladi. 67 soatdan keyin natija oqiladi, xona haroratida qoldirilgan bolsa, 1824 soatdan song natija oqiladi. Mikroblarning antibiotikka sezuvchanligini aniqlash. Ajratib olingan stafilokokk kulturasini antibiotikka sezuvchanligini qogoz disklari yordamida aniqlanadi. Biologik sinama. Letal (oldiruvchanlik) xususiyatini aniqlash sinamasi. Toksinning oldiruvchan tasir korsatishini aniqlash uchun quyon venasiga (yoki qorin boshligiga) 1 kg quyon ogirligiga 0,10,2 ml hisobida stafilokokk kulturasi yuboriladi. 34 kundan song quyonlar nobud bolsa, bu toksin oldiruvchan tasir etganidan darak beradi. Dermonekrotik sinama. Quyonning biqin yoki orqa juni olinadi va teri ichiga ikki milliard stafilokokk kulturasini saqlovchi aralashmadan 161 0,2 ml yuboriladi. Agar tekshirilayotgan mikrob kultura dermonekrotik toksin ajratadigan bolsa, mikrob kulturasi yuborilgan yerda yiringli yara (nekroz) hosil boladi. Natijada 1824 soatdan song oqiladi. 1. Stafilokokk chaqiradigan kasalliklardan qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Stafilokokklarni aniqlash uchun qanday laboratoriya tekshirish usullari qollaniladi? 3. Plazmakoagulaza reaksiyasini qoyish usuli qanday? 4. Stafilokokkning gemolitik xususiyatini aniqlash uchun qanday oziqa muhitidan foydalaniladi? 5. Fagga sezuvchanlik qanday maqsadda olib boriladi? 14-bob. STREPTOKOKKLAR Steptococcus avlodiga Streptococcus pneumonia va Sterptococcus pyoqenes kiradi. Streptokokklarni birinchi bolib Bilrot (1874) va L. Paster (1879) aniqlagan. Ularni 1884-yilda E. Rozenbax organadi. STREPTOCOCCUS PYOGENES (GEMOLITIK) Morfologiyasi. Streptokokklar sharsimon shaklda boladi. Har bir mayda va yirik kokkning diametri 0,61 mkm bolib, polimorfizm xarakterlidir. Streptokokklar bir tekisda bolingani sababli zanjirsimon bolib joylashadi. Zanjirlarning uzunligi turlicha boladi. Zich oziqa muhitida kalta, suyuq oziqa muhitida uzun zanjir boladi. Strep- tokokklar harakatsiz, spora hosil qilmaydi, yangi kulturalar ayrim hollarda kapsula hosil qiladi. Grammusbat boyaladi. Kultural xossasi. Fakultativ anaerob. Ular 37°C va pH 7,67,8 da rivojlanadi. Qonli va zardobli muhitlarda osadi. Zich oziqa muhitida mayda, yassi, xira kulrang koloniya hosil qilib osadi. Qonli agarda β−gemolitik streptokokklar koloniya atrofida gemoliz zonasini hosil qilib osadi. α-gemolitik streptokokklar esa yashillanuvchi gemoliz zona hosil qiladi. Ayrim streptokokklar gemoliz zona hosil qilmasligi ham mumkin. Shakarli shorvada streptokokklar probirka tubida, devoriga yopish- gan donador chokma hosil qilib osadi, muhit tiniq qoladi. Fermentativ xossasi. Streptokokklar saxarolitik xossaga ega. Ular glukoza, laktoza, mannit (hamma vaqt emas) va maltozani kis- lotagacha parchalaydi. Proteolitik xossasi ularda kam ifodalangan. Ular sutni ivitadi, jelatinani suyultirmaydi. ? Nazorat uchun savollar 162 Toksigenlik xossasi. Streptokokklar qator ekzotoksinlarni hosil qiladi: 1) streptolizinlar eritrotsitlarni parchalaydigan toksin (0-strep- rolizin kardiotoksin tasir etadi); 2) leykotsidin leykotsitlarni parchalovchi bu toksinni yuqori virulentli shtammlar hosil qiladi; 3) eritrogen (skarlatina) toksini skarlatinaga tegishli kasallik belgilarini, yani intoksikatsiya, qon tomirlarining reaksiyalari, tosh- malar va boshqa belgilarni namoyon qiladi. Eritrogen toksinning sintezi profag tomonidan determinlanadi; 4) sitotoksinlar glomerulonefritni chaqirish xossasiga ega. Antigenligi va tasnifi Streptokokklarda turli xil antigenlar aniqlangan. Hujayra sitoplaz- masida barcha streptokokklarga umumiy bolgan turga oid nukleoproteid tabiatli antigen mavjud. Hujayra devorning yuzasida oqsil tabiatli tur, antigeni devorida esa polisaxarid guruh antigeni aniqlangan. Polisaxarid guruh spetsifik antigeni tarkibiga kora barcha streptokokklar A, B, C, D, va S guruhlarga bolinadi. Guruhdan tashqari, streptokokklar serologik tiðlarga bolinadi va arab raqami bilan belgilanadi. A guruhi 70 ta tiðni saqlaydi. Bu guruhga odamda turli xil kasalliklarni keltirib chiqaruvchi streptokokklar kiradi. B guruhi odam uchun shartli patogen bolgan streptokokklarni saqlaydi, C guruhi odam va hayvon uchun patogen hisoblangan streptokokklarni saqlaydi. D guruhiga odam uchun patogen hisoblanmagan streptokokklar, enterokokklar kiradi, ular odam va hayvon ichagida hayot kechiradi. Ular boshqa azolarga tushsa yalliglanish jarayonini keltirib chiqaradi, masalan, xoletsistit, piolit va boshqalar. Shunday qilib, ularni shartli patogenlar qatoriga kiritishimiz mumkin. Ajratib olingan kulturani qaysi guruhga mansubligini guruh zardobi bilan quyiladigan presiðitatsiya yordamida aniqlanadi. Serologik tiðini aniqlash uchun esa tiðospetsifik zardoblar bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Tashqi muhit omillariga chidamliligi Streptokokklar tashqi muhitga ancha chidamli. 60°C haroratda 30 daqiqadan song nobud boladi. Qurigan balgam va yiringda oylab saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi moddaning odatdagi konsentratsiyasi ularni 1520 daqiqadan song nobud qiladi. Enterokokklar dezinfeksiyalovchi moddaga ancha chidamli boladi. 5060 daqiqadan song nobud boladi. Hayvonlar sezuvchanligi. Patogen streptokokklarga yirik va mayda shoxli hayvonlar, ot, itlar, qushlar sezgir boladi. Laboratoriya hayvonlaridan esa quyonlar va oq sichqonlar sezgir boladi. Odam 163 uchun patogen streptokokklarning hammasi ham tajriba hayvonlar uchun patogen bolmaydi. Infeksiya manbai. Odamlar (bemor va bakteriya tashuvchi) va kam hollarda hayvonlar yoki streptokokk bilan ifloslangan oziq-ovqat mahsulotlari infeksiya manbai bolib hisoblanadi. Tarqalish yoli. Havo-tomchi va havo changi, ayrim hollarda oziq-ovqat mahsulotlari, maishiy yol orqali ham tarqaladi. Kasallik ekzogen natijasida, shuningdek, endogen-burun halqumi, qin shilliq qavatida hayot kechiruvchi shartli patogen sreptokokklarning faollashishi natijasida yuzaga kelishi mumkin. Organizmning qarshi kurash kuchi pasayishi (och qolish, sovqotish, toliqish va b.) autoinfeksiya hosil bolishiga olib keladi. Streptokokk infeksiyalarining patogenezida taxminiy sensibiliza- tsiya, yani oldindan kasallanib otgan streptokokk katta ahamiyatga ega. Streptokokkning qon yoliga tushishi septik jarayonning ogir otishiga sabab boladi. B gemolitik streptokokkning A serologik guruhi odamlarda kopincha kasallik keltirib chiqaradi. Ular ozidan patogen fermentlarni, gialuronidaza, fibrinolizin (streptokinaza), dezoksiribo- nukleaza va boshqalarni ajratadi. Bundan tashqari, streptokokklarda antifagotsitar xususiyatiga ega kapsula, M proteini aniqlanadi. Streptokokklar odamlarda turli xil otkir va surunkali otadigan, yiring hosil qilmaydigan, klinik belgilar va patogenezi boyicha farqlanadigan infeksiyalarni keltirib chiqaradi. Yiring hosil qiladigan infeksiyalardan flegmona, abssesslar, jarohat infeksiyalari, strep- todermiya, sepsis angina va boshqalar, yiring hosil qilmaydigan yuqori nafas yolining otkir infeksiyasi, skarlatina, revmatizm, saramas va boshqa kasalliklarni keltirib chiqaradi. Streptokokklar kopincha ikkilamchi infeksiyalarni griðp, qiza- miq, kokyotal va boshqa kasalliklarni keltirib chiqaradi va jarohatni bitishini qiyinlashtiradi. Immunitet. Antitoksik va antibakterial xarakterga ega immunitet hosil boladi. Bir qancha hollarda esa organizmni oldindan kasallanishga moyil qilib qoyadi, shuning uchun streptokokkli anginalar, saramas va boshqa jarayonlar kop marta takrorlanishi mumkin. Profilaktikasi. Maxsus profilaktikasi ishlab chiqilmagan. Umumiy profilaktikasida sanitariya-gigiyena tadbirlarini olib borish, organizm- ning umumiy chidamliligini mustahkamlashdan iborat. Davosi. Antibiotiklardan foydalaniladi. Kopincha penitsillin qollaniladi, chunki streptokokklar unga chidamsiz. Shuningdek, eritromitsin va tetratsiklinlardan ham foydalaniladi. Revmokarditda streptokokklarning ahamiyati. Revmokarditning patogenezi toliq organilgan. Lekin bu kasallikning kelib chiqishida 164 streptokokklar asosiy rol oynaydi. Buni quyidagi omillardan bilishimiz mumkin: 1. Revmokardit bilan kasallangan bemorlar tomogining ustki qismida B gemolitik streptokokklar aniqlangan. 2. Revmatizm kopincha organizmni sensibilizatsiyalovchi an- gina, tonzillit, faringit kasalliklaridan song yuzaga keladi. 3. Bemor qon zardobida streptokokk ferment va toksinlariga qarshi antistreptolizin, antistreptogialuronidazalar antitelolari aniqlanadi. Keyingi yillarda surunkali revmokardit turining kelib chiqishida α-shaklli streptokokklarga etibor qilinmoqda. Profilaktika. Revmokarditi, streptokokk kasalliklarining (masalan, bahor va kuzda profilaktika sifatida penitsillin bilan) oldini olish ishlari olib borilishi lozim. Davolashda antibakterial preparatlarpenitsillin qollaniladi. Skarlatina (qizilcha) etiologiyasida streptokokkning ahamiyati. G.N. Gabrichevskiy (1902) birinchi bolib, gemolitik streptokokk skarlatina qozgatuvchisi ekanligini aniqlagan. Lekin boshqa kasalliklarni keltirib chiqaruvchi streptokokklar skarlatinani keltirib chiqaruvchi qozgatuvchidan farqlanmaydi, degan fikr yuritiladi, ammo bunga kopchilik qoshilmaydi. Hozirgi vaqtda aniqlanishicha, skarlatinani eritrogentoksin ajratuvchi A guruhiga mansub streptokokklar keltirib chiqarar ekan. Kasallanib otganlarda antitoksid mustahkam immunitet hosil boladi. Qayta kasallanish holatlari kam kuzatiladi. Skarlatinaga bolalar bir xilda moyil bolmaydi. 15 yashar bolalar skarlatinaga koproq moyil boladi. 6 oylikka qadar bolalar skarlatina bilan juda kam kasallanadi, chunki onadan otgan immunitet ularni kasallikdan saqlaydi. V.I. Ioffening olib borgan kuzatishlariga qaraganda, organizmning skarlatinaga moyillik darajasi uning streptokokk zahariga qay darajada sezuvchanligiga bogliq. Streptokokk kuchli sezuvchan bolgan bolalarda skarlatina koproq kuzatiladi. Bola organizmining streptokokk zahariga sezuvchanligi Dik reaksiyasi yordamida aniqlangan. Dik reaksiyasi quydagicha olib boriladi. Bularning ichki qismiga, teri ichiga gemolitik streptokokk toksinining kichik dozasi yuboriladi. Toksin kiritilgan joy qizarib, unda infiltrat paydo bolsa, reaksiya musbat natija berdi, deb hisoblanadi. Reaksiya- ning musbat natija bermasligi muayyan organizm antitoksin zaharni zararsizlantirganidan guvohlik beradi, shuning uchun bunday organizm skarlatinaga moyil emas, deb hisoblanadi. Profilaktika. Bemorni alohida xonaga ajratiladi va kasalxonaga yotqiziladi. Muloqotda bolganlarga, zaiflashgan bolalarga gamma- globulin yuboriladi. Maxsus profilaktika ishlab chiqilmagan. 165 Davosi. Skarlatinani davolash uchun penitsillin muvaffaqiyat bilan qollaniladi. Penitsillin bilan davolanilsa, kasallikning ogir shakllari kuzatilmaydi, unga boshqa kasalliklar qoshilmaydi va bemor tezda sogayib ketadi. Kasallikning ogir shakllarida antitoksik zardob yuboriladi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Angina va skarlatinada bodom bezlaridan sidirib olingan yiring. 2. Saramas, streptodermiyada yalliglanish ekssudati. 3. Abssessda yiring. 4. Nefritda siydik. 5. Sepsis, endokarditga shubha qilinganda qon olinadi. Tekshirish materialini yigish Asosiy tekshirish usullari 1. Bakteriologik. 2. Mikroskopik. TEKSHIRISHNING BORISHI Tekshirishning birinchi kuni S i d a n il o a d i m a d r o y n o p m a t a t x a p li r e t . X .i d a n il o k e d i g a d i r o q u y i d d u S i d a n il o a d i m a d r o y s i r p h s li r e t . .i d a n il o a d s ir p h s li r e t s n a d a n e v l m 5 1 0 1 .i d a n il o a d r e t e t a k is i h s x a y , a g h s i d i li r e t S , b i r it n a l y a if a r a t a m m a h g n i n n o p m a t a g r a g a il n o q % 5 g n o s n a d n a g li k e a g it i h u m a q i z o h c i Z .i d a li k e b it r u s .i d a li k e a g a v r o h s il a z o k u l g g n i r i y i h c m o t r i b a g r a g a il n o q % 5 i g a d i s a h c a s o k i r t e P u h S .i d a li q i h c b it r u s n a li b l e t a p h s a h s i h s a v i d a li z i m o t , b a y o b a d il u s u m a r G , b a l r o y y a t a m t r u s n a d l a i r e t a m .i d a li r i h s k e t a d it s o p o k s o r k i m a g r a g a il n o q % 5 n a d i s a m k o h c ,i d a n a l a g u fi r t n e s k i d y i S .i d a li k e , b a y o b a d il u s u m a r G , b a l r o y y a t a m t r u s n a d i s a m k o h C i n n o q n a g li r it l u y u s 0 1 : 1 .i d a li r i h s k e t a d it s o p o k s o r k i m .i d a li k e a g a v r o h s il a z o k u l g il % 2 , 0 Shilliq qavatdan surtma. Ochiq yalliglanish jarayonida. Yopiq yalliglanish jarayonida. Qon. Siydik. Shilliq. Yiring. Siydik. Qon. 166 Ekilgan muhitlarni termostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Glukozali shorvada streptokokklar probirka tubida devorga yopishgan donador chokma hosil qilib osadi, oziqa muhit tiniq qoladi. Glukozali shorvadan olib 0,25 % glukoza saqlovchi Marten shorvasiga ekiladi (Lensfild pretsiðitatsiya reaksiyasini qoyish uchun). 5 % qonli agarda esa β gemolitik streptokokklar aniq gemoliz zonasini hosil qilib osadi, gemolitik streptokokk esa yashillanuvchi gemoliz zonasini hosil qilib osadi. Shunday shubhali koloniyalardan olib: 1. Surtma preparat tayyorlanadi va Gram usulida boyaladi. Mikroskop ostida Grammusbat, qisqa va uzun zanjirsimon bolib joylashgan streptokokklar korinsa tekshirish ishlari davom ettiriladi. 2. Sof kulturani ajratib olish uchun koloniyaning qolgan qismidan olib, zardobli qiyshiq agarga ekiladi. Ekmalarni termostatda 37°C ha- roratda 24 soatga qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekmalarni termostatdan olib, qiyshiq agardagi kulturaning sofligi tekshiriladi. Buning uchun surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Agar faqat streptokokklar korinsa, saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga (laktoza, glukoza, maltoza, saxaroza va mannitga) ekiladi. Proteolitik xossasini organish uchun sutga, jelatinaga va 40 % ot suyuqligiga ekiladi. Ekmalarni termostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Marten shorvasi tekshiriladi. Agar streptokokka xos osish hosil bolgan bolsa, serologik guruhini aniqlash uchun Lensfild pretsiðitatsiya reaksiyasi otkaziladi. Lensfild pretsiðitatsiya reaksiyasini qoyish texnikasi. Bir kunlik Marten shorvasida osgan kulturani bir qancha sentrifuga probir- kasiga quyiladi, 1015 daqiqa (3000 min/aylan) sentrifugalanadi. Chokma ustidagi suyuqlik dezinfeksiyalovchi moddaga tokiladi, chokmaning ustiga steril fiziologik eritma quyilib yana sentrifuga qilinadi. Chokma ustidagi suyuqlik dezinfeksiyalovchi eritmaga tokiladi, chokmasi esa alohida probirkaga toplanadi. Uning ustiga 0,2 % li xlorid kislotadan 0,4 ml solinadi. Probirkani suv hammomida 15 da- qiqaga qoldiriladi, vaqt-vaqti bilan probirka chayqatib turiladi. Qay- natilgan probirkani yana sentrifuga qilinadi. Bunda antigen chokma ustidagi suyuqlikka aralashadi va shu suyuqlikni alohida probirkaga olib 0,2 % natriy gidroksidi bilan pHi 7,07,2 gacha togrilanadi. Indikator sifatida bromtimol koki (0,01 ml 0,04 % eritmasi) qoshiladi. Korsatilgan reaksiyada eritmaning rangi somon-sariq rangdan kok rangga aylanadi. 167 Songra 5 ta pretsiðitatsiya probirkasiga 0,5 ml.dan streptokokk guruhiga qarshi zardob solinadi (bu zardob quyonlarni immunizatsiya qilish yoli bilan olinadi). 1-probirkaga A zardobi, 2-probirkaga B zardobi, 3-probirkaga C zardobi, 4-probirkaga D zardobi, 5-probirkaga fiziologik eritma solinadi. Shundan song Paster piðetkasida barcha probirkalarga tayyorlangan aralashma (antigen) probirka devoridan sekinlik bilan quyiladi. Agar reaksiya musbat bolsa, ikki suyuqlik orasida oq halqa loyqa hosil boladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Agar Giss qatorini kislotagacha parchalasa, 40 % li ot suyuqligida osmasa, sutni ivitsa, jelatinani suyultirmasa, pretsiðitatsiya reaksiyasi musbat bolsa, tekshi- rish materialida streptokokk bor, deb xulosa chiqariladi. 1. Streptokokkni aniqlash uchun qanday tekshirish usullaridan foydalaniladi? 2. Lensfild pretsiðitatsiya reaksiyasi nima maqsadda qoyiladi? 3. Nima sababdan pretsiðitatsiya reaksiyasida antigen tiniq bolishi lozim? Reaksiya qoyish texnikasini tushuntirib bering. Oziqa muhitlari Tuxum sarigi qoshilgan tuzli Chistovich agari. Tuxum sarigi aralashmasi tayyorlanadi (1 ta tuxum sarigi + 150 ml steril fiziologik eritma). Gosht-peptonli tuzli agar (810 % natriy xlorid) eritiladi va 45°C gacha sovitiladi, songra 20 % li tuxum sarigi aralashmasi (sterillikka rioya qilgan holda) qoshiladi va Petri kosachalariga quyiladi. Qonli agar. Gosht-peptonli agar eritiladi va 45°C gacha sovitiladi. Agarning soviganligi engakka tekkizib aniqlanadi. Bunda muhit issiq bolib, terini kuydirmasligi kerak. Unga aseptik sharoitda (yaxshi boksda) 3 % dan 30 % gacha (asosan, 5 %) steril defibrillangan qon qoshiladi, yaxshilab aralashtiriladi va qotib qolmasidan Petri kosachalariga quyiladi. Tuzli agar (tuzli shorva). Gosht-peptonli shorva va gosht- peptonli agarga (810 %) katta miqdorda natriy xlorid qoshiladi. Shorva probirkalarga, agarni Petri kosachalariga quyiladi. Zardobli agar. GPA (gosht-peptonli agar) eritiladi, 45°C gacha sovitiladi, songra unga 1020 % konservant saqlamaydigan va taxminan 56°C da 30 daqiqa davomida suv hammomida inaktivatsiya qilingan zardob qoshiladi. Yaxshilab aralashtiriladi va Petri kosacha- lariga quyiladi. ? Nazorat uchun savollar 168 Sutni tayyorlash. Yangi sutni qaynashga yaqin olinadi va sovuq yerda qoldirilib qaymogi olinadi, songra yana qaynaguncha otda ushlanadi. Sut bir kunga qoldirilib qaymogi olinadi va steril paxta orqali filtrlanadi. Filtrdan otgan sutga 10 % natriy karbonat eritmasi bilan pH 7,2 gacha ishqorlanadi va probirkalarga 56 ml.dan solinadi. Marten shorvasi. Gosht suviga teng miqdorda Marten peptoni (xlorid kislota) tasir ettirilgan chochqachaning oshqozon qiymasi qoshiladi. Hosil bolgan aralashma 10 daqiqa qaynatiladi, 10 % li natriy gidrooksidi bilan pHi 0,8 gacha ishqorlanadi, 0,5 ml natriy asetat qoshiladi va yana qaynatiladi. 0,25 % glukoza qoshiladi va probirkalarga quyiladi. 15-bob. PNEVMOKOKKLAR (STREPTOCOCCUS PNEVMONIAE) Pnevmokokklarni birinchi bolib R. Kox (1871) aniqlagan. Morfologiyasi. Pnevmokokklar tomonlari bir-biriga qaraganda diðlokokklardir, qarama-qarshi tomonlari chozilgan va sham alan- gasini eslatadi. 0,750,5 x 0,51 mkm kattalikda, juft-juft bolib joylashgan. Suyuq oziqa muhitidan tayyorlangan surtma preparatda ular streptokokklarga oxshash qisqa zanjirsimon bolib joylashgan. Ular harakatsiz, spora hosil qilmaydi, organizmda ikkala kokkni orab turuvchi kapsula hosil qiladi. Kapsulasida haroratga chidamli antifagin moddasini (pnevmokokklarni fagotsitozdan va antitelo tasiridan himoya qilib turadigan) saqlaydi. Suniy oziqa muhitida osgan pnevmokokklar oz kapsulasini yoqotadi. Pnevmokokklar Gram- musbat bolib boyaladi. Eski kulturasida Grammanfiy bolib boyalgan pnevmokokklar ham aniqlanadi. Kulturali xossasi. Pnevmokokklar fakultativ anaerobdir. 3637°C haroratda va pH 7,27,4 bolgan muhitda osadi. Oziqa muhitiga talabchan; qon yoki zardob qoshilgan oziqa muhitida yaxshi osadi, chunki ular kopgina aminokislotalarni sintezlamaydi. Zardobli agarda shudring tomchisiga oxshash mayda, nozik, tiniq koloniyalarni hosil qilib osadi. Qonli agarda namli yashil-kulrang koloniya atrofida yashil- lanuvchi gemoliz zonasini hosil qilib osadi. Bu gemoglobinning metgemoglobinga aylanganligidan dalolat beradi. Pnevmokokklar zar- dobli va 0,2 % glukozali shorvada yaxshi osadi. Suyuq oziqa muhitida bir tekisda loyqalanadi va probirka tubida chokma hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Pnevmokokklar yaxshi namoyon boladi- gan saxarolitik xossasiga ega. Ular laktoza, glukoza, saxaroza, maltoza, 169 inulinni kislotagacha parchalaydi. Mannitni parchalamaydi. Proteolitik xossasiga kora kam faol, sutni ivitadi, jelatinani parchalamaydi, indol hosil qilmaydi. Pnevmokokklar ot suyuqligida eriydi. Inulinni parchalashi va ot suyuqligida ularni erishi diagnostikada katta ahamiyatga ega. Pnevmokokklar gioluronidaza, fibrinolizin va boshqa patogen omillarni ishlab chiqaradi. Toksigenligi. Pnevmokokklar endotoksid, gemolizin, leykotsi- dinlarni hosil qiladi. Pnevmokokklarning virulentligi oz kapsulasida antifaginni saqlashiga bogliq. Antigenligi va tasnifi. Pnevmokokklarning tanasida ikki xil anti- gen bor; hujayra bilan boglangan oqsilli antigen pnevmokokklarning hamma turlari uchun umumiy antigen hisoblanadi. Ikkinchisi esa mikroblarning kapsulasida joylashgan polisaxarid antigen bolib, har bir tur uchun spetsifikdir. Antigenlarning tuzilishiga qarab, 84 ta serovarga bolinadi. I, II, III serovarlari odam uchun patogen hisoblanib, kasallik keltirib chiqaradi. Chidamliligi. Pnevmokokklar tashqi muhitga kam chidamli bolib, hatto suniy oziqa muhitida ham 56 kundan song oladi. Shuning uchun oziqa muhitini har 23 kunda tez-tez almashtirishga togri keladi. 60°C li harorat tasirida 35 daqiqadan song nobud boladi. Past harorat va qurishga ancha chidamli, qurigan balgamda 2 oygacha saqlanib qolishi mumkin. Dezinfeksiyalovchi moddalardan 3 % li fenol, 1:1000 nisbatli sulema eritmasi ularni bir necha daqiqadan song nobud qiladi. Hayvon uchun patogenligi. Pnevmokokklarni tabiiy xojayini odam hisoblanadi. Lekin pnevmokokklar buzoqlarda, qozichoq- larda, chochqalarda, it va maymunlarda ham kasallik keltirib chiqarishi mumkin. Laboratoriya hayvonlaridan oq sichqonlar pnevmokokka juda sezgir. Ularga tekshirish materiali parenteral yol orqali yuborilganda, sepsis paydo boladi va ular hayvonlarni 2448 soatdan keyin oldiradi. Olgan sichqonlar yorib korilganda, infeksiya qilingan yerda fibrinoz ekssudat topiladi, taloq va jigarning kattalashganligi va qonga tolishganligi (giðeremiya) aniqlanadi. Qon va azolar mikroskopda tekshirilganda kapsulalarda pnevmokokklar topiladi. Infeksiya manbai. Kasal odam va bakteriya tashuvchilar hisob- lanadi. Tarqalish yoli. Havo-tomchi, havo changi yoli orqali tarqaladi. Kirish darvozasi. Koz, quloq, nafas yoli shilliq qavatlari orqali organizmga kiradi. 170 Odamlarda keltirib chiqaradigan kasalliklar. Pnevmokokklar turli xil yiring yalliglanish kasalliklarini keltirib chiqaradi. Quyidagi kasalliklar pnevmokokk uchun spetsifikdir: 1. Krupoz zotiljam (opkaning zardob yigib yalliglanish kasalligi). 2. Koz muguz pardasining yuguruk yarasi. 3. Quloqni yalliglanishi (otit). Bundan tashqari, sepsis, meningit, angina, plevrit, abssess va boshqa kasalliklarni keltirib chiqaradi. Kopincha krupoz zotiljam uchrab turadi, opkaning bitta, kam hollarda ikki yoki uch bolagini jarohatlaydi. Kasallik otkir boshlanadi, yuqori harorat va yotal bilan otadi. Kasallik olim bilan tugashi mumkin. Immunitet. Kasallikdan song kuchsiz immunitet hosil boladi va yana qaytalashi mumkin. Profilaktikasi. Maxsus profilaktikasi yoq. Umumiy profilaktika- sida shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilish, bemorlarni vaqtida aniqlash, tashxis qoyish va davolash, aholi orasida sanitariya maorifi ishlarini olib borish muhim orin tutadi. Davosi. Bemorlar sulfanilamid (norsulfazol va b.), penitsillin, biomitsin va boshqa antibiotiklar bilan davolanadi. 1. Pnevmokokklarning morfologik, kultural, fermentativ xossalari qanday? 2. Pnevmokokklarning patogenlik omili nima va ularni fagotsitozdan nima himoya qiladi? 3. Pnevmokokklar organizmga qaysi kirish darvozasi orqali kiradi? 4. Ular organizmda qanday kasalliklarni keltirib chiqaradi? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Balgam (zotiljamda). 2. Yaradan ajralayotgan suyuqlik (koz muguz pardasining yugurik yarasi). 3. Tomoqning ustki qismidan olingan shilliq (anginada). 4. Quloq ajratmasi (otitda). 5. Yiring (abssessda). 6. Plevra punktati (plevritda). 7. Qon (sepsisga shubha qilinganda). ? Nazorat uchun savollar 171 Tekshirish materialini yigish Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskop. 2. Mikrobiologik. 3. Biologik. Tekshirishning birinchi kuni. Balgamni steril Petril kosachasiga solinadi va yogsizlantirilgan buyum oynasida uning yiringli qismidan surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Mikroskop ostida Grammusbat, juft-juft bolib joylashgan va sham alangasiga oxshash diðlokokklar korinsa, pnevmokokk bor deb shubha qilinadi va unga qaratilgan tekshirish ishlari otkaziladi. Tekshirish materialidan olib qonli agarga ekiladi. Sepsisga shubha qilinganda qon olinadi va shakarli shorvaga ekiladi; unda osgan kulturadan olib, songra qonli agarga ekiladi. Turli xil florani saqlovchi balgamdagi pnevmokokklarni ajratib ostirish uchun biologik usuldan foydalaniladi. Oq sichqonlar organizmida pnevmokokklar boshqa mikroorganizmlarga nisbatan yaxshi va tez osadi. Biologik usuli. Ozgina (35 ml) balgam steril shorva bilan yaxshilab aralashtiriladi; shu aralashmadan 0,5 ml olib oq sichqonning qorin boshligiga yuboriladi. 68 soatdan keyin oq sichqonlarda kasallik belgilari namoyon bola boshlaydi. Bu vaqtda pnevmokokklarni qorin boshligidagi suyuqlikda aniqlash mumkin. Ekssudat steril shpris yordamida sorib olinadi. Undan surtma preparat tayyorlanadi va Gram usulida boyab, mikroskopda tekshiriladi. Sof kulturani ajratib olish uchun ekssudat zardobli agarga ekiladi. Agar sichqon nobud bolsa yoki kasallansa, uning yuragidan qon olib, pnevmokokklar sof kultu- rasini ajratib olish uchun zardobli agarga ekiladi. .i d a li g i y a g h s i d i li r e t S .i d a n il o n a li b n o p m a t li r e t S .i d a n il o n a li b s i r p h s li r e t S a d a m ti r e k i g o l o i z if i n o p m a t a t x a p li r e t S - a l a rj a n a d q o l u q i k o y n a d a r a y , b a l m a n .i d a n il o a m t r u s n a d a d d o m n a g t o y a t x a p li r e t s , a s l o b n o y a r a j il g n i r i y q i h c O - il o a d i m a d r o y q o l z u v o q i k o y a d i n o p m a t li r e t s , a s l o b n o y a r a j q i p o y r a g a ;i d a n .i d a n il o a d s i r p h s .i d a n il o l m 0 1 5 n a d i s a n e v k a li B Balgam. Tomoq shilligi. Plevra punktati. Yara va quloq ajratmasi. Abssess yiring. Qon. 172 Pnevmokokklarning turini aniqlash uchun tezlashtirilgan usul (mikroagglutinatsiya reaksiyasi). Yogsizlantirilgan buyum oynacha ustiga 4 tomchi sichqon qorin boshligidan olingan zararlangan ekssudatdan tomiziladi. Birinchi tomchiga agglutinatsiyalovchi zardobning I turi, ikkinchisiga zardobning II turi, uchinchisiga III turi, tortinchisiga fiziologik eritma (nazorat) tomiziladi. Zardobning I va II turini 1:10, zardobning III turini 1:5 nisbatda qilib oldindan suyultirib qoyilgan boladi. Barcha tomchilar yaxshilab aralashtiriladi, quritiladi, fiksatsiya qilinadi va suyultirilgan fuksin bilan boyaladi. Agar reaksiya musbat bolsa, tomchilarning birida mikroblarning toplangani (agglutinatsiya)ni kuzatish mumkin. Tomoqning ustki qismidagi shilliq, yara va quloqdan ajralayotgan suyuqliklarning barchasida begona mikrofloralar mavjud. Sof kulturani ajratib olish uchun ular qonli agarga ekiladi va oq sichqonlar zararlantiriladi. Ochiq va yopiq jarayondan olingan yiring ham qonli agarga ekiladi, song uni 12 ml shorvada yaxshilab aralashtirilib, 0,5 ml hajmda sichqonlarga yuboriladi. Plevradan punktat olib sentrifugaga qoyiladi. Chokmasi olib, zardobli shorvaga va zardobli agarga ekiladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar termostatdan olib tekshiriladi. Pnevmokokklar zardobli agarda mayda, nozik, tiniq, koloniya hosil qilib osadi, qonli agarda esa nam yashil kulrang koloniya atrofida yashillanuvchi gemoliz zonasini hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida bir xil loyqalanish va changga oxshash chokma hosil qilib osadi. Shubhali koloniyaning yarmidan surtma preparat tayyorlanib boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Qolgan yarmidan sof kulturani ajratib olish uchun zardobli qiyshiq agarga ekiladi va termostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Sof kultura tekshiriladi: 1. Surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyaladi va mik- roskopda tekshiriladi. 2. Saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga (laktoza, glukoza, saxaroza, maltoza) sanchib ekiladi. 3. Inulinli muhitga ekiladi. Tekshirish materiali inulin va lakmus qoshilgan muhitga ekiladi va termostatda 1824 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach olib qaralganda, pnevmokokklar bolsa, oziqa muhit- ning rangi qizil rangga aylanadi (streptokokklar bolsa, oziqa muhitning rangi ozgarmaydi). 4. Optoxinga sezuvchanligi organiladi. Sof kulturadan olib, 1:50000 nisbatan optoxin saqlovchi 10 % li qonli agarga ekiladi. Pnevmokokklar optoxinli muhitda osmaydi, streptokokklar esa osadi. 5. Ot-safro sinamasi otkaziladi. Ikkita agglutinatsiya probirkasiga 1 ml.dan tekshirilayotgan kulturadan solinadi. 173 Probirkalarning biriga quyon ot-safro suyuqligidan tomchi tomiziladi, ikkinchi probirka tekshiruv probirkasi hisoblanadi. Har ikki probirkani termostatga 37°C haroratda 1824 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach olib qaralganda, tajriba probirkadagi pnevmokokklar lizisga uchraganligi sababli muhit tiniq qoladi, tekshiruv (nazorat) probirkasida loyqalanish boladi. Ot-safro sinamasini zich oziqa muhitida ham otkazish mumkin. Buning uchun oddiy yoki zardobli agarda osgan pnevmokokk koloniyalari ustida quruq ot-safrosi solinadi. Bunda shubhali koloniyalar erib yoqolib ketadi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Agar Giss qatorini inulin kislotagacha parchalasa, ot-safro tasirida lizisga uchrasa, optoxinli muhitga, tekshirish materialida pnevmokokk bor, deb xulosa qilinadi. Pnevmokokklarning virulentligini aniqlash. Bir kunli pnevmo- kokk osgan suyuq kulturani 1 % li peptonli 10 2 dan 10 8 gacha suyultiriladi. Har bir suyultirish darajasidan 0,5 ml olib, oq sichqonlarga yuboriladi. 10 7 darajasigacha sichqonlarni olimga olib kelsa virulentli, 10 4 10 6 darajasida ortacha virulentli, olimga olib kelmasa avirulentli pnevmokokklar deyiladi. 1. Pnevmokokklarning sof kulturasini ajratib olish uchun qanday usullardan foydalaniladi? 2. Qanday hayvonlar pnevmokokka sezgir? 3. Zararlangan sichqondan olingan ekssudat bilan qanday reaksiya va nima maqsadda qoyiladi? 4. Pnevmokokklarni qaysi yiring chaqiruvchi kokklardan farqlash lozim va qanday sinamalar yordamida farqlash ishlari olib boriladi? 5. Pnevmokokklarning virulentligi qanday aniqlanadi? Oziqa muhitlari Inulin sinamasi uchun oziqa muhit. 200 ml distillangan suvga 10 ml inaktivatsiya qilingan buqa zardobi, 18 ml lakmus eritmasi va 3 gr inulin qoshiladi. Bug oqimida 100°C haroratda 3 kun davomida sterilizatsiya qilinadi. Ot-safro qoshilgan muhit. Oddiy oziqa muhitlariga 1040 % ot-safro qoshiladi, pH togrilanadi va 120°C haroratda 20 daqiqa avtoklavda sterilizatsiya qilinadi. Steril oziqa muhitiga steril ot-safroni aseptik sharoitda qoshib tayyorlash ham mumkin. ? Nazorat uchun savollar 174 16-bob. MENINGOKOKKLAR NEISSERIA avlodiga odam uchun patogen bolgan ikki tur mik- robi kiradi: N. meningitidis va N. gonorrhoeae, Neisseria meningitidis Vekselbaum tomonidan bemorning orqa miya suyuqligidan ajratib olinadi. Morfologiyasi. Botiq tomonlari bir-biriga qaraganda loviyasimon, juft-juft joylashgan diðlokokklar, kattaligi 0,60,8x1,21,5 mkm. Ular polimorf, harakatsiz bolib, spora hosil qilmaydi, kapsula hosil qiladi. Grammanfiy boyaladi. Sof kulturada torttadan va alohida kokksimon bolib joylashadi, orqa miya suyuqligidan tayyorlangan surtma preparatda juft-juft bolib joylashadi. Yiringda esa leykotsitlar ichida joylashadi. Kultural xossasi. Meningokokklar aerobdir. Oziqa muhitida talabchan, qon, zardob qoshilgan oziqa muhitida 3637°C haroratda yaxshi osadi, 25°C da osishi toxtaydi. pH 7,47,6 bolgan muhitda ularning osishi uchun nam va katta miqdorda karbonat angidrid (osishni kuchaytiradigan omil) kerak boladi. Yangi tayyorlangan oziqa muhitiga ekishni talab qiladi. Zich oziqa muhitida meningokokklar katta bolmagan 23 mm diametrli, nozik yarimtiniq, choziluvchan, salgina kokimtir koloniya hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida biroz loyqalanish va chokma hosil qiladi. Yangi ajratib olingan kulturalar S shaklida, eski kulturalar esa R shaklida boladi. Fermentativ xossasi. Meningokokklar fermentativ xossasiga kora kam faoldir. Ular glukoza va maltozani kislotagacha parchalaydi. Proteolitik xossasi ularda namoyon bolmaydi (sutni ivitmaydi, jelatinani suyultirmaydi). Meningokokklarning patogenligi ularning kapsulasi borligidadir. Kapsula ularni fagotsitozdan himoya qilib turadi, tukcha (pili)lar mikrobning hujayra epiteliysiga yopishishiga yordam beradi va gialuro- nidaza, neyraminidaza fermentlari hosil bolishida ishtirok etadi. Toksigenligi. Bakteriya hujayrasi parchalanganda yuqori haroratga chidamli va kuchli endotoksin ajraladi. U hujayra devorining yog, oqsil, uglevodi hisoblanadi. Bu toksinni kasallik vaqtida bemorning qoni va orqa miya suyuqligida aniqlash mumkin. Kasallikning ogir kechishi toplanib qolgan toksinning miqdoriga bogliq. Antigenligi. Polisaxarid (kapsula) antigeniga kora, meningokokklar A, B, C, D, X, U, I 135, 29E seroguruhlariga bolinadi. Oldingi tasnifga kora, A, B va C guruhlari asosiy guruhlar hisoblanadi. A guruh meningokokklari umumlashgan jarayonni yuzaga keltiradi va epidemiyaning kelib chiqishida katta ahamiyatga ega. B va C guruh meningokokklari esa sporadik kasalliklarni keltirib chiqaradi. Qolgan guruh azolari hali toliq organilmagan. 175 Tashqi muhit omillariga chidamliligi. Meningokokklar tashqi muhitga kam chidamlidir. Haroratning kotarilishi ularga halokatli tasir korsatadi. 70°C harorat tasirida 23 daqiqa, 55°C harorat tasirida 5 daqiqadan song nobud boladi. Meningokokklar qurishga sezgir boladi va tik quyosh nurlarining tasirida tez halok boladi, haroratning ozgarishiga ham sezgir. Shunday qilib, meningokokklar tashqi muhitda uzoq saqlanmaydi. Shu sababli kasallikning tarqalishida tashqi muhitdagi buyumlar rol oynamaydi. Meningokokklar dezinfek- siyalovchi moddalarga ham unchalik chidamli emas: 1 % li karbol kislota eritmasi meningokokkni deyarli darhol oldiradi. Patogenligi. Tabiiy sharoitda meningokokka hayvonlar sezgir emas. Lekin meningokokklar maymunlarga yuborilganda meningit vujudga keladi. Dengiz chochqachalari va oq sichqonlarning qorin boshligiga tekshirish materiali yuborilsa, ular endotoksin tasirida intoksika- tsiyadan halok boladi. Infeksiya manbai. Kasal odam va bakteriya tashuvchilar infeksiya manbai hisoblanadi. Tarqalish yoli. Havo-tomchi yoli orqali tarqaladi. Keltirib chiqaradigan kasalliklari: 1. Nazofaringit (burun va yutqun shilliq qavatining yalliglanishi). 2. Meningokokksemiya. 3. Epidemik serobrospinal meningit. Patogenezi va klinikasi. Infeksiya tekkan shilimshiqning mayda tomchilari nafas olganda, burun-halqum shilliq pardasiga meningo- kokkni olib kiradi. Meningokokk dastavval shilliq pardada joylashadi, bolinib kopayadi va odamni mikrob tashuvchi bolib qolishi yoki otkir nazofaringit kasalligini keltirib chiqaradi. Ular limfa yoliga otib qonga soriladi va butun organizmga tarqaladi; turli azolarda, kopincha bosh miya bilan orqa miyaning yumshoq pardalarida joylashib, unda yiringli yalliglanish jarayonini, yani meningokokk- semiyani vujudga keltiradi. Meningokokklar bosh va orqa miya qobiqlariga otib yiringli yalliglanish, meningitni yuzaga keltiradi. Meningitning yashirin davri 24 kunni tashkil etadi. Kasallik tosatdan boshlanib, harorat juda yuqori darajaga kotariladi, bemorning boshi qattiq ogriydi, qusadi. Tez orada ensa muskullarining tortishishi natijasida gardon qotadi, bemor hushidan ketadi, koz qorachiqlari kengayadi, talvasa tutishi mumkin. Meningitda quloq, koz, burun, bogiz, shuningdek, yurak klapan- larining zararlanishi kabi ogir kasalliklar kuzatiladi. Meningokokklar meningitda orqa miya suyuqligi xira boladi va shu xossasi bilan sil meningitidan farq qiladi. Orqa miya suyuqligi olinganda miyaning ichki bosimi ortganligi sababli orqa miya suyuqligi tirqirab oqadi. Meningit 176 bilan kopincha bolalar kasallanadi. Agar vaqtida davolanmasa, kasallik olim bilan tugashi mumkin. Ayrim hollarda meningokokklar sepsisiga oxshagan kasallikni vujudga keltiradi. Immuniteti. Kasallikdan song barqaror immunitet yuzaga keladi va bu opsonin, komplementni boglovchi va bakteriotsid antitelolar sababli vujudga keladi. Kasallikning kechishi oqsil va polisaxarid antigenlarga nisbatan antitelolarning hosil bolish tezligiga bogliq. Profilaktikasi. Maxsus profilaktikasi uchun A va C polisaxarid seroguruhlarini saqlovchi kimyoviy vaksina ishlab chiqilgan. Shoshilinch profilaktikasida immunoglobulindan foydalaniladi. Umumiy profilaktikasida bemorlarni, bakteriya tashuvchilarni aniqlash, nazofaringit bilan ogrigan bemorlarni ajratib qoyish, ularni kasalxonalarga yotqizish ishlarini olib borish lozim. Aholi orasida sanitariya maorifi ishlarini olib borish, shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilish kerak. Davosi. Bemorlar antibakterial preparatlarpenitsillin, levo- mitsetin, ampitsillin va boshqalar bilan davolanadi. Sulfanilamid preparatlar keng qollaniladi. Bemor oz vaqtida davolansa, batamom sogayib ketadi. 1. Meningokokklarning morfologik tuzilishi qanday? 2. Meningokokklar rivojlanadigan muhitlar va ularning biokimyo- viy faolligi. 3. Meningokokklar keltirib chiqaradigan kasalliklarning oldini olish uchun qanday chora-tadbirlar otkaziladi? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Orqa miya suyuqligi. 2. Burun-halqum shilligi. 3. Qon. Tekshirish materialini olish Orqa miya suyuqligi lyumbal punksiya yoli bilan olinadi. Shu maqsadda bemor oldinga engashtirib yoki shu holatda yotqiziladi, songra II, III va IV bel umurtqasining orqasidan igna sanchiladi. Belning shu joyidan igna sanchish (punksiya qilish) xavfsiz, chunki orqa miyaning shu joydagi qismi uning suyuqligida suzib yuruvchi ? Nazorat uchun savollar 177 oxirgi iðlardan iborat. Yosh bolalarning umurtqa kanali oddiy shpris ignasi bilan, katta kishilarniki esa maxsus Bir ignasi bilan teshiladi. Igna orqa miya kanaliga kirishi bilanoq, undan yiringli suyuqlik jildirab chiqa boshlaydi. Orqa miya suyuqligi aseptikaning barcha qoidalariga rioya qilingan holda steril probirkaga 25 ml hajmda yigiladi. Orqa miya suyuqligi 23 soat ichida sovuqdan va qurishdan saqlangan holda paxtaga orab yoki isitgich qoyib, laboratoriyaga keltiriladi. Burun-halqum shilligi. Shilliq paxtali tampon yordamida olinadi. Tampon uchidan 34 sm balandlikda 135° li burchak ostida probirka devoriga egiltirib olinadi. Song steril shpatel yordamida til bosiladi va ong qol bilan tampon yuqoriga qaratilib, ogiz orqali kiritiladi va burun-halqumdan shilliq olinadi. Tampon sekin-asta lunjga, tishga, tilga tekkizilmasdan ogizdan chiqarilib, shu zahotiyoq Petri kosacha- sidagi zardobli agarga hamma qismi bilan surtib ekiladi. Boshqa mikrofloralar osmasligi uchun oziqa muhitiga linkomitsin qoshiladi. Ekilgan muhitni sovuqda saqlagan holda laboratoriyaga keltiriladi. Qon. Bilak venasidan 510 ml qon olinadi va 0,1 % li glukozali shorvaga ekiladi. Tekshirish materiali va shorva 1:10 nisbatda bolishi kerak. Qon davolanishdan oldin va och qoringa yoki ovqatlangandan song 34 soat otgach olinadi. Tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Mikrobiologik. 3. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Orqa miya suyuqligi sentrifugada aylantiriladi va chokmasidan bir tomchi olib, Petri kosachasidagi zardobli agarga ekiladi. Chokmasidan surtma preparat tayyorlanib quritiladi, fiksatsiya qilinadi, fuksinning suvdagi eritmasi yoki metilen koki boyogida boyalib, mikroskopda tekshiriladi. Mikroskop ostida loviyasimon diðlokokklar korinsa, taxminiy tashxis qoyiladi. Qolgan chokmaning ustiga 5 ml yarimsuyuq agar quyilib termostatda qoldiriladi. Qon va burun-halqum shilligi ekilgan oziqa muhitlar ham ter- mostatda 37 °C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Menigokokklarga diagnoz qoyishda tezlashtirilgan «Binaks» test sinamasini qoyish. Òekshirilayotgan likvordan tampon yordamida olinadi va «Binaks» standart testining ikkita boshligiga likvor tomizi- ladi. Boshliqning biriga reagentdan uch tomchi, ikkinchisiga fiziologik eritma solinadi. «Binaks» testi yopiladi. Òekshirish materialida menigo- kokklar bolsa, ikkita tayoqcha hosil boladi (musbat reaksiya). Agar menigokokklar bolmasa, bitta tayoqcha hosil boladi (manfiy reaksiya). 178 Tekshirishning ikkinchi kuni. Petri kosachasida shubhali koloniyalarni stereoskopik mikroskop ostida tekshiriladi va sof kulturasini ajratib olish uchun zardobli agarga ekiladi. Qon ekilgan flakondagi suyuq muhitda osgan kulturadan olib, Petri kosachasidagi zardobli agarga ekiladi. Ekilgan muhitlar termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Zardobli agarga meningokokklar nozik, nam, oq, kulrang koloniya hosil qilib osadi. Sof kulturani aniqlash uchun surtma preparat tayyorlab, metilen koki boyogida boyab, mikroskop ostida tekshi- riladi. Agar meningokokklar korinsa, sof kultura ekanligidan dalolat beradi va tekshirish ishlari davom ettiriladi. 1. Zardobsiz agarga ekiladi, termostatda 37°C haroratda qoldiriladi. 2. Zardobli agarga ekiladi, termostatda 37°C haroratda qoldiriladi. 3. Zardobli agarga ekiladi, termostatda 22°C haroratda qoldiriladi. 4. 0,25 % zardob qoshilgan Giss muhitlariga (laktoza, glukoza, saxaroza, maltoza) ekiladi. 5. Oksidaza sinamasi quyiladi. Buning uchun shubhali koloniya ustiga dimetilparafenilendiamin eritmasi tomiziladi. Agar oksidaza fermenti bolsa, koloniyaning rangi pushti rangga kiradi. Agar qon ekilgan muhitda hech qanday osish bolmasa, uni bir haftaga qoldiriladi, har ikki kunda zardobli agarga ekib turiladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Agar 37°C ga qoldirilgan zardobsiz agarda osmasa, 37°C zardobli agarda ossa, 22°C zardobli agarda osmasa, glukoza va maltozani kislotagacha parchalab, saxaroza va laktozani parchalamasa, oksidaza sinamasi musbat bolsa, tekshirish materialida meningokokk qozgatuvchi bor, deb xulosa qilinadi. Patogen bolmagan neysserlar 37°C haroratda termostatda qoldi- rilgan zardobli va zardobsiz agarda osadi, 22°C haroratda zardobli agarda ham osadi, Giss qatoridagi uglevodlarni parchalashi va parchalamasligi mumkin, oksidaza sinamasi manfiy boladi. Meningokokk guruhini aniqlash. Sof kultura ajratib olingandan song, serologik usulda meningokokkning guruhi aniqlanadi. Buning uchun agglutinatsiyalovchi va pretsiðitatsiyalovchi zardoblardan foydalaniladi. Yogsizlantirilgan buyum oynachasi ustiga A, B, C va boshqa agglutinatsiya zardob va nazorat sifatida bir tomchi fiziologik eritma tomiziladi. Har bir tomchi ustiga sof kulturadan solib chiqiladi. Tomchilarning biri agglutinatsiya bersa, u sof kulturaning guruhini korsatadi. Serologik guruhini aniqlash uchun gele pretsiðitatsiya reaksiyasini qoyish mumkin. Hozirgi vaqtda diagnostika maqsadida A, C va boshqa seroguruhlar uchun eritrotsitar diagnostikumi yordamida bevosita gemagglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. 179 1. Meningokokk infeksiyalarida qanday tekshirish materiallari olinadi? 2. Tekshirish materiallari laboratoriyaga qanday jonatiladi va nima sababdan shunday qilinadi? 3. Meningokokklarni boshqa neysserlardan qanday farqlab olinadi? 4. Meningokokkning seroguruhlarini aniqlash uchun qanday reaksiya qollaniladi? Oziqa muhitlari Linkomitsinli muhit. 80 ml eritilgan va 50°C gacha sovitilgan 2 % li agarga 20 ml ot yoki buqa zardobi, 0,50,7 ml linkomitsin eritmasi (1 ml muhitga 0,001 mg linkomitsin eritmasi) qoshiladi. Muhit yaxshilab aralashtiriladi va Petri kosachalariga quyiladi. 17-bob. GONOKOKKLAR Neisseria gonorrhoeae Neisseriaceae oilasiga, Neisseria avlodiga kiradi. Gonokokklarni olim Neysser 1879-yili aniqlagan va ularning barcha oilasi uning nomi bilan yuritiladi. Morfologiyasi. Gonokokk kop xossalari bilan meningokokklarga oxshaydi. Gonokokklar loviyasimon, botiq tomoni bilan bir-biriga qaragan diðlokokklar (kofe doniga oxshash) 1,21,3x0,70,8 mkm kattalikda. Ular polimorf bolib yirik, mayda va L-shaklli bakte- riyalari ham uchraydi. Gonokokklar harakatsiz, spora hosil qilmaydi. Patologik materialda (yiring) kapsulaga xos moddasi aniqlangan. Grammanfiy boyaladi. Dori va boshqa moddalar tasirida Gram- musbat boyala oladi. Patologik materialda leykotsitlar ichida yoki alohida joylashadi. Kultural xossasi. Gonokokklaraerobdir. Oziqa muhitiga talabchan. Qon, zardob qoshilgan oziqa muhitida 37°C haroratda va pH 7,27,4 muhitida yaxshi osadi. Muhit yangi tayyorlangan va nam bolishi kerak. Zardobli agarda gonokokklar mayda 12 mm, tiniq, yaltiroq, chetlari tekis, shudring tomchisiga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Qonli muhitda gemoliz zonasini hosil qilmaydi. Zardobli shorvada biroz loyqalanadi va parda hosil qilib osadi, parda keyinchalik probirka tubiga chokib qoladi. ? Nazorat uchun savollar 180 Fermentativ xossasi. Gonokokklarning saxarolitik xossasi kam namoyon boladi, ular faqat glukozani kislotagacha parchalaydi. Proteolitik xossasiga ega emas. Toksigenligi. Gonokokkning hujayra devorida liðopolisaxaridli toksik substansiya mavjud (kam organilgan). Antigenligi. Gonokokklarning antigenlik tuzilishi doimiy emas va turli omillar tasirida ozgarib turadi. Tashqi muhit omillariga chidamliligi. Gonokokklar juda chidamsiz mikroblar. Organizmdan tashqarida quritilganda, bir necha soatda nobud boladi, lekin qalin yiring qatlamida va har xil buyumlarda (hol koylak, lozim, choyshab, sochiq, gubka va b.) 24 soat va undan ortiq saqlana oladi. Gonokokk haroratning ozgarishiga sezgir bolib, issiq va sovuq haroratga chidamsiz. 5660°C ularga oldiruvchan tasir korsatadi, 4041°C da yashashi sekinlashadi. Past harorat va qurish tez oldiruvchi tasir korsatadi. Dezinfeksiyalovchi eritmalar 1 % li fenol, 1:1000 nisbatdagi sulema eritmasi gonokokklarni bir necha daqiqada oldiradi. Gonokokklar kumush tuzlarining eritmalariga juda sezgirdir. Masalan, 1:1000 nisbatdagi kumush nitrat eritmasi uni 5 daqiqada oldiradi, amaliyotda shunday foydalaniladi. Ultrabinafsha nurlari tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Patogenligi. Hayvonlar gonokokka sezgir emas. Lekin oq sichqon- larning qorin boshligiga gonokokk toksini yuborilganda, ular toksin tasirida nobud boladi. Infeksiya manbai. Gonoreya (sozak) bilan kasallangan bemor infeksiya manbai hisoblanadi. Tarqalish yoli. Asosan, jinsiy aloqa orqali tarqaladi. Kam hollarda bilvosita kontakt yoli orqali tarqaladi. Soglom odam kasal bilan jinsiy aloqada bolganda, unga bevosita yaqinlashish natijasida sozak yuqadi, lekin u jinsiy yoldan boshqa yol bilan ham yuqishi mumkin. Masalan, bazan bolalar (kopincha qizlar) kasal onasi, enagasi bilan bir orinda yotganda, umumiy kiyim-kechak, choyshab, sochiq, vanna, togora, gubka va shu kabilardan foydalanganda, ularga sozak yuqishi mumkin. Patogenezi. Gonokokkning tabiiy xojayini bolib, kasal odam hisoblanadi.Gonokokklar organizmga shilliq pardalar orqali tushadi. Gonokokklar uretra shilliq qavati (ayollarda uretra va bachadon boyni) orqali kiradi. Gonokokklarning patogenlik omili ulardagi pili (tukcha) larning borligi bilan tavfsiflanadi, chunki pililar silindrik epiteliy mikrotukchalari bilan birikib, gonokokklarning epiteliy hujayrasi ichiga kirishga yordam beradi va ular bu yerda bolinib kopayadi. Gonokokklar kopincha siydik-tanosil yollari shilliq pardasining yalliglanishiga sabab boladi. Sozakning yashirin davri 35 kun. Sozak otkir va surunkali 181 shakllarda otadi. Otkir sozak erkaklar va xotin-qizlarda, kopincha siydik chiqarish kanali (uretra) shilliq pardasining yiringli yalliglanishi (uretrit) bilan boshlanadi. Songra gonokokk shilliq parda yuzasidan boshqa siydik- tanosil azolariga moyak va uning ortigiga, bachadon boyni, naylari va shu kabilarga otib, ularni yalliglantira oladi. Sozakda uretra va bachadondan yiring ajraladi, siydik chiqarishda ogriq yuzaga keladi. Gonokokk limfogen va gematogen yol bilan organizmda tarqal- ganda boshqa azolarni ham yalliglantira oladi. Sozak artritlari, endokarditlari va hatto sepsisi paydo bolishi mumkin. Bemor davolan- masa yoki notogri davolansa, kasallik surunkali shaklga otadi va uning tashxisini qoyish hamda davolash yanada qiyinlashadi. Gonokokk koz konyunktivasining yiringli yalliglanishi bleno- reyaga ham sabab bola oladi. Bu kasallik onaning infeksiyali tuguruq yollaridan chaqaloq otayotganda kopincha paydo boladi. Immuniteti. Kasallikdan song organizmda immunitet hosil bolmaydi. Profilaktikasi. Maxsus profilaktikasi yoq. Blenoreyaning oldini olish maqsadida chaqaloq tugilganda ikkala koz konyunktivasiga 12 % li kumush nitrat (30 % albutsid) eritmasi 12 tomchidan tomiziladi. Umumiy profilaktikasida sanitariya maorifi ishlarini olib borish, shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilish, begonalar bilan jinsiy aloqaga otmaslik, gigiyenik madaniyat darajasini oshira borish muhim orin egallaydi. Davosi. Sozakni davolash uchun sulfanilamid preparatlar, penitsillin, streptomitsin ishlatiladi. Bu preparatlardan togri foydala- nilsa, ular bemorlarni tez va ishonchli davolaydi, aks holda gonokokk- larning dorilarga chidamliligi oshib, sozakning sulfanilamid pre- paratlar va penitsillinga chidamli shakllari vujudga keladi. Surunkali sozakni davolashda eng samarali preparat gonokokk vaksinasi hisoblanadi. U oldirilgan gonokokklarning fiziologik erit- madagi suspenziyasidan iborat. Vaksina shifokor korsatmasi bilan teri ostiga yuboriladi. 1. Gonokokklarning morfologiyasini tasvirlab bering. 2. Gonokokklarning kultural va fermentativ xossalari qanday? 3. Gonokokklarning chidamliligini bilasizmi? 4. Gonokokklar qanday kasalliklarni keltirib chiqaradi va ular qanday yuqadi? 5. Gonokokk infeksiyalari kelib chiqmasligi uchun qanday chora va tadbirlar otkazilishi lozim? ? Nazorat uchun savollar 182 MIKROBIOLOGIK TASHXIS TEKSHIRISH MATERIALI 1. Erkaklarning uretra shilliq qavati ajratmasi. 2. Ayollarning uretra shilliq qavati va bachadon boyni ajrat- masi. 3. Kozning yiringli ajratmasi. 4. Qon. Tekshirish materialini yigish Ayollar va erkaklarning uretra shilligidan ajratma paxtali tam- pon, qovuzloq yoki qoshiqcha yordamida olinadi. Kozdan yiringli ajratma olish uchun steril tampon fiziologik eritmada namlab olinadi va yiringdan sinama olinadi. Qon bilak venasidan 56 ml olinadi. E s l a t m a : Bakteriologik va bakterioskopik tekshirish uchun tekshirish materiali: 1) antibiotik bilan davolanishdan avval olinishi kerak; 2) davolanish tugagach, 10 kun otgandan keyin olinishi kerak; 3) siydik ajratgandan song 2 soat otgach, olinishi kerak; 4) purkagich bilan purkalgandan song 2 soat otgach, olinishi kerak. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik (otkir shakllarida). 2. Mikrobiologik. 3. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Otkir shakli. Uretra shilliq qavatidan olingan material ikkita yogsizlantirilgan buyum oynachasining yarmigacha surtib preparat tayyorlanadi, quritiladi, fiksatsiya qilinadi va metilen koki yoki eozin bilan boyaladi. Bu boyoqlar bilan kasal- likka taxminiy tashxis qoyish maqsadida boyaladi. Ikkinchi preparatni toliq tashxis qoyish uchun Gram usulida boyaladi. Buning uchun fiksatsiya qilingan preparat ustiga filtr qogozi qoyilib, 1 % li kristall binafshaning suvdagi eritmasi bilan 1 daqiqa davomida boyaladi. Vaqt otgach qogoz olib tashlanadi, suv bilan yuviladi va Lyugol eritmasi bilan preparat qorayguncha ushlanadi, songra yana suv bilan yuviladi va spirtda oqish kulrang bolguncha ushlanadi. Undan song qogoz yana suv bilan yuviladi va 1 % li neytral qizil eritmasi bilan 3 daqiqa boyalib, suv bilan yuviladi, quritiladi va mikroskopda tekshiriladi. Natija musbat bolsa, hujayra elementlari, yadro binafsha rangda, 183 leykotsitlar ichida yoki ulardan tashqarida toplangan gonokokklar toq sariq rangda korinadi. Surunkali shakli. Agarda gonokokklarni aniqlashning iloji bolmaganda, kopincha surunkali shakllarda, tekshirish materiali assitsiz muhitda ekiladi. Ekilgan muhit 37°C li eksikatorga 10 % li karbonat kislotali sharoitda qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Shubhali koloniyalarni belgilab organiladi. Undan surtma preparat tayyorlanadi va Gram usulida boyab, mikroskopda tekshiriladi. Agar Grammanfiy diðlokokklar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Sof kulturani ajratib olish uchun shubhali koloniyaning yarmidan olib, zardobli qiyshiq agarga ekiladi. Oksidaza sinamasi otkaziladi, yani shubhali koloniyaning ustiga dimetilparafenilendiamin eritmasi tomiziladi. Koloniyaning rangi toq jigarrangdan qora ranggacha ozgarishi mumkin. Qiyshiq agarni termostatga 37°C li haroratda 24 soatga qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Sof kulturani aniqlash uchun surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyaladi va mikroskopda tekshiriladi. Agar gonokokklar korinsa bu sof kulturaligidan dalolat beradi. Saxarolitik xossasini organish uchun 30 % li zardob qoshilgan Giss muhitlariga (laktoza, saxaroza, glukoza, mannit va maltoza) ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Agar osish roy bermagan bolsa, yana termostatda 12 kunga qoldiriladi. Agar osish bolsa, natija oqiladi (22-jadval). 22-jadval Gonokokklarning boshqa neysseriylardan farqi I z o h : «» parchalamaydi; «+» parchalaydi. Serologik usul Kasallikning uchinchi haftasida otkaziladi. Kasallikning surunkali shakli va unga shubha qilingan hollarda bemorning qon zardobi bilan komplement boglanish reaksiyasi qoyiladi. Antigen sifatida olik gonokokk kulturasidan foydalaniladi. i r a l r u t b o r k i M T S E T a z o t k a L a z o k u l G ti n n a M a z o tl a M a d A P G i h s i s o r a l k k o k o n o G + i d y a m s O r a l k k o k o g n i n e M + + i d y a m s O r a l k k o k l a r a t a K i d a s O 184 1. Gonokokk infeksiyalarida tekshirish materiali sifatida nima olinadi? 2. Tekshirish materiallari qachon olinishi lozim? 3. Otkir va surunkali shakllaridan asosiy tekshirish usullari qaysi? 4. Gonokokklarni qaysi mikroorganizmlarda farqlash lozim? Oziqa muhitlari Tuxum sarigidagi muhit. Quyon goshtidan tayyorlangan 100 ml.li GPA ga 15 ml yangi tuxumning sarigi, 6 ml fenol qizil indikatori, 1 ml distillangan steril suvda eritilgan 1,5 ml shakar qoshib kosachalarga quyiladi. Assit agar. Quyon goshtidan tayyorlangan shorva filtrlanib, unga 2 % agar, 1 % pepton va 0,5 % natriy xlor qoshiladi. Muhit qayna- guncha qizdiriladi, filtrlanadi, idishlarga solib, avtoklavda 115°C haro- ratda 15 daqiqa sterillanadi. Ichak bakteriyalari oilasi Ichak guruhi bakteriyalariga Enteroobactericeae oilasiga morfologik, kultural, tinktorial xossalari bir-biriga oxshash mikro- organizmlar kiradi. Ular odam va hayvon ichagida hayot kechiradi, lekin tashqi muhitda ham aniqlanadi. Chunki ular najas bilan tashqi muhitga chiqariladi. Hozirgi vaqtda ichak bakteriyalari oilasiga 12 avlod mikroorga- nizmlar kiritiladi. Masalan, Esherixiy, Salmonella, Shigella, Proteus, Klebsiyella, Iyersiniya va boshqalar. Bular avlodlar va yana turlarga, biologik va serologik variantlarga bolinadi. Bu avlodlarning boshlangichi bolib, ichak tayoqchasi hisoblanadi. Evolutsion ozgarishi natijasida ichak tayoqchasi parazitik hayot kechirishga moslashdi va patogen turga aylandi. Hozirgi vaqtda u kopgina ichak kasalliklarini kelib chiqishiga sabab bolmoqda. Ichak bakteriya- larining patogen turlari bolib qorin tifi, A va B paratif toksikoin- feksiya, dizenteriya va boshqa turlar hisoblanadi. Barcha ichak bakteriyalari tayoqchasimon, uchlari yumaloq, surtma preparatda tartibsiz joylashadi, Grammanfiy boyaladi, fakul- tativ anaerob, oddiy oziqa muhitida yaxshi rivojlanadi. Ular bir- biridan fermentativ, antigenlik xossasiga kora farqlanadi. Saprofitlarda fermentativ faollik ancha kuchli namoyon boladi. ? Nazorat uchun savollar 185 18-bob. ESHERIXIYLAR Bu avlodga faqat bitta ichak tayoqchasi E coli kiradi, lekin kopgina variantlarni oz ichiga oladi. Ular biologik, fermentativ, antigenlik xossasiga kora, bir-biridan farqlanadi. Ichak tayoqchasini 1888-yili Esherix najasdan ajratib olgan va mikrob uning nomi bilan atalgan. Ichak tayoqchasining tabiiy yashash joyi hayvon va odam ichagi bolib hisoblanadi va ular ichakning normal mikroflorasiga kiradi. U hayot faoliyati davomida fermentlar ishlab chiqaradi, ovqat hazm qilishda ishtirok etadi, B guruh vitamin- larini sintezlaydi va boshqa patogen mikroblarga antagonistik tasir korsatadi (masalan, dizenteriya, qorin tifi, toksikoinfeksiya, qozga- tuvchilarga). Agar yogon ichakda ichak tayoqchasi bolmasa, disbak- terioz kasalligi kelib chiqadi. Bunda ichakdagi normal mikroflora tarkibi buziladi, proteylar, zamburuglar, kokk floralari kopayib ketadi. Organizmning qarshilik korsatish kuchi susaygan hollarda Esherixiylar boshqa azolarga tushib, ogir patologik jarayonlarni keltirib chiqaradi. Shuning uchun ichak tayoqchasi shartli patogen mikroor- ganizm, deb ataladi. Ichak tayoqchasi najas bilan tashqi muhitga tushadi. Tuproq, suv, oziq-ovqatlar va obyektlarda ichak tayoqchasining aniqla- nishi ularni najas bilan ifloslanganligidan dalolat beradi. Ichak tayoq- chasining borligini (koli-titr, koli-indeks) aniqlash obyektlarining sanitar holati kortsatkichi sifatida qollaniladi. Morfologiyasi. E. coli mayda 0,53,0 x 0,50,8 mkm kattalikdagi tayoqchasimon mikroblardir. Grammanfiy, harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Kopgina shtammlari kapsula hosil qiladi, spora hosil qilmaydi. Ayrim ichak tayoqchasining variantlari harakatsiz boladi. Kultural xossasi. Ichak tayoqchasi fakultativ anaerob bolib, oddiy oziqa muhitlarida, 37°C haroratda va pH 7,27,8 muhitida yaxshi osadi. Odam va hayvon organizmidan ajratib olingan ichak tayoqchasining shtammlari 4345°C da yaxshi osadi. Ichak tayoqcha- sining tashqi muhit obyektlarida aniqlanishi sanitariya sharoiti yomon- ligidan dalolat beradi. GPAda xira, biroz bortib chiqqan, chetlari tekis, nam koloniya hosil qilib osadi. GPSHda bir tekis loyqalanish hosil qilib osadi. Differensial-diagnostik Endo muhitida yaltiroq metall, malina rangli koloniya hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Fermentativ xossasiga kora, faol hisoblanadi. Laktoza, saxaroza, glukoza, mannit, maltozani kislota va gazgacha parchalaydi. Proteolitik xossasiga kora, indol hosil qiladi. Jelatinani suyultirmaydi. Alohida biovarlari laktoza va saxarozani parchalamaydi. Toksigenligi. Ichak tayoqchasi liðopolisaxarid tabiatli endotoksin hosil qiladi. 186 Antigenlik tuzilmasi. Esherixiylar antigenlik tuzilmasiga qarab farqlanadi. Esherixiylarda uch turdagi antigen tafovut etiladi: somatik Oantigeni, yuzaki Kantigeni (kapsula), xivchinli Hantigeni. Somatik termostabil Oantigeni liðopolisaxaridprotein kompleksni (yog, oqsil, uglevod tabiatli) oz ichiga oladi va u bakteriyaning hujayra devorida joylashgan. Oantigeniga kora mikrobning 170 turi tafovut etiladi. K antigeni O antigeniga nisbatan yuzada joylashgan. Esherixiylarning K antigeni turlicha: A, B, L va M antigenlari. A va M antigenlari termostabil, yani yuqori haroratga chidamli, B va L antigeni esa chidamsiz. K antigenining 100 ta guruhi tafovut etiladi. Kantigen agglutinatsiya reaksiyasini qoyishga tosqilik qiladi: shuning uchun 100°C qizdirilib, ulardan O antigeni ajratib olinadi. H antigeni faqat mikroblarning harakatchan turlaridagina uchraydi. Uning 50 dan ortiq turlari aniqlangan. H antigeni boyicha ajratib olingan kulturani serovariantlari aniqlanadi. Ichak tayoqchasining bu xossasi agglutinatsiya reaksiyasi yordamida aniqlaniladi. Fegovarlari esa bakteriofaglar yordamida sezuvchanligi aniqlanib organiladi. Chidamliligi. Ichak tayoqchasi tashqi muhitga ancha chidamli. 55°C harorat tasirida 1 soatdan song, 60°C issiqlik tasirida esa 15 daqiqadan song nobud boladi. Tuproqda, suvda 23 oygacha saqlanadi, sutda esa faqat saqlanib qolmasdan, hatto bolinib kopayadi. Dezinfeksiyalovchi moddalar (3 % li xloramin, 1:1000 sulema eritmasi) tasirida 2030 da- qiqadan song nobud boladi. Brilliant yashiliga (zelyonkaga) juda sezgir. Patogenligi. Esherixiylarning alohida seroguruhlari hayvonlarda oshqozon-ichak kasalliklarini keltirib chiqaradi. Laboratoriya hayvon- laridan dengiz chochqachalari ichak tayoqchasiga sezgir. Laboratoriya hayvonlarining zararlangan azolariga qarab esherixiylar ularda turli xil patologik jarayonlarini keltirib chiqaradi. Masalan, mikroblar teriga yuborilganda yalliglanish va abssess, qorin boshligi va venaga yubo- rilganda sepsis, peritonit kasalliklarni keltirib chiqaradi. Infeksiya manbai. Kasal odam infekiya manbai hisoblanadi. Ichak tayoqchasi organizmga tashqi muhitdan tushadi. Organizmdagi mavjud ichak tayoqchasi boshqa azolarga ham otib, kasallik keltirib chiqarishi mumkin. Tarqalish yoli. Maishiy, oilaviy yol orqali iflos qol, idish- tovoq, oyinchoq, oziq-ovqat va mexanik yol pashsha, suvaraklar orqali tarqaladi. Patogenezi. Esherixiylar keltirib chiqaradigan kasalliklarga esherixioz kasalliklar deyiladi. Ichak tayoqchasi ogiz orqali organizmga tushsa, u albatta, bolalar va kattalarda ichak kasalliklarini keltirib chiqaradi. Ayrim O guruhidagi ichak tayoqchalari ham organizmda kasalliklar keltirib chiqaradi va ular enteropatogen ichak tayoqchalari deyiladi (EPKP). Enteropatogen ichak tayoqchasining bir necha guruhlari tafovut etiladi: 187 1. I guruh bolalarda kolienterit kasalligini keltirib chiqara- digan turlari (0111, 026, 055, 086 va b.). 2. II guruh ichburugga xos kasalliklarni keltirib chiqara- diganlari (025, 0124, 0143, 0144 va boshqa seroguruhlari). 3. III guruh vaboga oxshash kasalliklarni keltirib chiqara- diganlari (01, 05, 06, 078 va boshqa seroguruhlari). Ichak tayoqchasi oziq-ovqatlarga tushib, ularda bolinib kopayishi ham mumkin. Bunday ifloslangan oziq-ovqt istemol qilingandan song ular ovqatdan zaharlanish kasalliklarini keltirib chiqaradi. Ichak tayoq- chasi boshqa azolarga otganda xoletsistit, sistit, sepsis va boshqa kasalliklarni keltirib chiqaradi. Kolienterit nihoyatda yuqumli bolib, bolalar muassasalarida epidemik tus olishi mumkin. Profilaktikasi. Shaxsiy gigiyena qoidalarga rioya qilish. Maxsus profilaktikasi yoq Davosi. Antibiotiklar bilan davolanadi. Hozirgi vaqtda davolash maqsadida koliðrotey fagi qollanilmoqda va yaxshi natijalar bermoqda. 1. Ichak bakteriyalari oilasining asosiy belgilari qanday? 2. Esherixiylarning antigenlik tuzilishi qanday? 3. Ichak tayoqchalarining organizmdagi roli qanday? 4. Ichak tayoqchalari organizmda qanday kasalliklarni keltirib chiqarishi mumkin? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Najas. 2. Qusuq moddasi. Kerak bolgan hollarda burun va halqum ajratmasi, quloqdan yiring, qon, siydik, murdalardan tegishli material olib tekshiriladi. Reja va epidemiologik korsatma boyicha oziq-ovqat, qol, idish- tovoq, oyinchoq va boshqalardan chayindi olib tekshiriladi. Tekshirish materialini yigish e s ti l g il % 3 i k o y a m ti r e k i g o l o i z if i n s a j a n g 5 3 - a r a n i r ) a m ti r e k i g o l o i z if m s i q 0 7 , n i r e s ti l g m s i q 0 3 ( i s a m h s a l i g r i x o a h c i r o b ij o li i n s a j a N .i d a n il o s a g a k r i b o r p n a g l o b e il o k i k n u h c , r i d q if o v u m a g d a s q a m h s il o i n i m s i q a d ti r e t n - r o y s a j a n n a d r a l q o l a q a h C .i d a n a lt s a k i h s k a h c i a k h c i g n i g , k e d i n a g li t y a a d i r o q u y a v i d a n il o n a d i r a l k a a g r a l a k r i b o r p .i d a li r o b u y a g a y i r o t a r o b a l b i n il o s .i d a n il i q li s o h a m h s a l a r a n a li b a m ti r e k i g o l o i z if b il o g 5 3 ? Nazorat uchun savollar Najas. Qusuq. 188 Tekshirishning asosiy usullari 1. Mikroskopik. 2. Mikrobiologik. 3. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Yigilgan tekshirih materiali Endo yoki Levin muhitiga ekiladi. Ekish quyidagicha olib boriladi: shisha piðetka yoki tayoqcha bilan tekshirish materiali fiziologik eritma yoki glitserin aralashmasida yaxshilab aralashtiriladi va piðetkada olib, oziqa muhit solingan Petri kosachasiga tomiziladi. Petri kosachasining chetida u steril shpatel bilan aralashtiriladi, shundan song shpatel choglantirilmasdan muhitning qolgan qismlariga shtrix holda ekiladi. Iloji boricha 23 ta kosachadagi muhitga ekilgani maqul. Ekilgan muhitlar termostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Endo oziqa mihitida ichak tayoqchasi yaltiroq metall, malina rangli, Levin (EMS eozin metilen sinkali agar) muhitida binafsha rangli koloniya hosil qilib osadi. Shunday shubhali koloniyalarning 10 tasi tanlab olinadi va kosachaning orqa tomonidan ularga raqamlar qoyib yoziladi. Enteropatogen ichak tayoqchasini boshqa esherixiylardan farqlash uchun buyum oynachasida OKA polivalen zardobi bilan har bir koloniya uchun alohida taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Reaksiya qoyish texnikasi: buyum oynachasi yogsizlantirib olinadi, shubhali koloniyalar soniga qarab buyum oynachasiga ham shuncha raqamlar qoyiladi va har bir raqam oldiga bir tomchidan OKA zardobi tomiziladi. Zardob ustiga shubhali koloniyalardan ozginasini quyib aralashtiriladi. Faqat agglutinatsiya bergan koloniya- ning malum qismini olib, sof kultura ajratib olish uchun qiyshiq agarga ekiladi. 10 ta koloniyada ham agglutinatsiya bermasa, salbiy javob olindi, deb hisoblanadi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Qiyshiq agarda ichak tayoqchasi nam, yaltiroq, kulrang, ayrim hollarda xira qatlam hosil qilib osadi. Shulardan olib: 1. Sof kultura ekanligini aniqlash uchun surtma preparat tayyor- lanadi va Gram usulida boyab, mikroskopda tekshiriladi. Agar mikroskop ostida ichak tayoqchalari korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. 2. Buyum oynachasida yana OKA polivalent zardobi bilan taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agar agglutinatsiya bolsa, reaksiya davom ettiriladi. 3. OKA polivalent zardob tarkibiga kiruvchi OKB, OKS, OKD, OKE zardoblari bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Qaysi birida 189 reaksiya bersa, shu zardob tarkibiga kiruvchi turdosh zardoblar bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. 4. Ichak tayoqchasining turini aniqlash uchun turdosh zardoblar bilan taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi (masalan, 0 26 , 0 55 , 0 111 va b.). 5. Saxarolitik xossasini aniqlash uchun Giss (laktoza, glukoza, mannit, saxaroza va b.) muhitiga ekiladi. 6. Antibiotikka sezuvchanligi organiladi. 7. Toliq farqlash ishlarini olib borish uchun kengaytirilgan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Tirik kultura bilan kulturadagi K antigen, qizdirilgan kultura bilan O antigen aniqlanadi. Kengay- tirilgan hajmdagi agglutinatsiya reaksiyasini qoyish uchun qiyshiq agarga 35 ml fiziologik eritma solib, mikrob chayindisi tayyorlab olinadi va uni ikki probirkaga bolib qoyiladi. Probirkalarning birini suv hammomida 100°C haroratda 1 soat davomida qizdiriladi. Kengaytirilgan agglutinatsiya reaksiyasi ikki qator probirkalarda olib boriladi. Oka zardobi 1:1600 gacha suyultirilib chiqiladi. Birinchi qatordagi probirkalarga tirik mikrob kulturasidan 2 tomchidan, ikkinchi qator probirkalarga qizdirilgan mikrob kulturasidan 2 tomchidan solib chiqiladi. Probirkalar chayqatilib termostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Agar uglevodli muhitlarni kislota va gazgacha parchalasa, kengaytirilgan hajm agglutinatsiya reaksiyasida qizdirilgan kultura qatoridagi tomizilgan chokma tirik kultura tomizilgan qatordagi chokmadan 2 barobar ortiq bolsa, reaksiya musbat deyiladi va tekshirish materialida enteropatogen ichak tayoqchasi bor, deb hisoblanadi. 1. Esherixiylarni aniqlash uchun qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Enteropatogen ichak tayoqchalari qanday zardoblar bilan farqlanadi? 3. Tirik va qizdirilgan esherixiy kulturalari bilan kengaytirilgan hajm- dagi agglutinatsiya reaksiyasi nima uchun qoyiladi? 19-bob. SALMONELLALAR Salmonella avlodiga 2000 dan ortiq turdagi bakteriyalar kiradi. Salmonellalar keltirib chiqaradigan kasalliklarni salmonellozlar deyiladi. Salmonellalar morfologik, kultural va fermentativ xossalariga kora bir-biriga oxshash, lekin antigenlik xossasiga kora, bir-biridan farq qiladi. ? Nazorat uchun savollar 190 Salmonellalar monopatogen va poliðatogen guruhlarga bolinadi. Monopatogenlarga qorin tifi, A va B paratiflar kiradi. Bu kasalliklar bilan faqat odamlar kasallanadi. Poliðatogenlarga odam va hayvonlarda kasallik chaqiruvchi qozgatuvchilar kiradi. Qorin tifi qozgatuvchisini 1880-yili Ebert qorin tifi bilan olgan odam organizmidan ajratib olgan. Ashar va Bansod 1886-yili qorin tifiga oxshash kasallik bilan kasallangan bemorning yiring va siydigidan qorin tifi qozgatuvchisiga oxshash mikroblarni aniqlaganlar. Ular qorin tifi qozgatuvchisining biokimyoviy xossasiga kora, farqlanishini aniqlashgan. Ularni A va B paratif qozgatuvchilari, deb nomlashgan. Keyinchalik shularga oxshash kopgina mikroblar aniqlangan va ularni ham salmonella avlodiga kiritishgan. Morfologiyasi. Barcha salmonellalar 1,03,0x0,60,8 mkm kattalikda bolib, tayoqchasimon, surtmada tartibsiz joylashadi, Gram- manfiy boyaladi. Uchlari yumaloq, harakatchan, xivchinlari ðeretrix joylashgan. Spora va kapsula hosil qilmaydi. Kultural xossasi. Fakultativ anaerob hisoblanadi. GPAda nozik, yarimtiniq, biroz bortib chiqqan, yaltiroq koloniya hosil qilib osadi. GPSHda bir tekisda loyqalanadi. Endo, Ploskiryov muhitida salmonel- lalar yaltiroq, rangsiz koloniya hosil qilib osadi, chunki oziqa muhit tarkibidagi laktozani parchalamaydi. Vismut-sulfit agarda 48 soatdan keyin ular qora rangli, ozidan keyin dog qoldiradigan (A para- tifdan tashqari), yaltiroq koloniya hosil qilib osadi. B paratif qozgatuvchisi 1820 soat termostatda saqlangandan song xona haroratida 12 kunga qoldirilganda, koloniya atrofida shilimshiq doira hosil qiladi. Fermentativ xossasi. Salmonellalar glukoza, mannit, maltozani kislota va gazgacha parhalaydi, qorin tifi esa ularni kislotagacha parchalaydi. Salmonellalar laktoza va saxarozani parchalamaydi. Proteolitik xossasiga kora, qorin tifi, B paratif qozgatuvchilari vodorod sulfit hosil qiladi. Indol hosil qilmaydi, jelatinani suyultirmaydi. B paratif qozgatuvchisi lakmusli sutni ishqorlaydi. Toksigenlik xossasi. Liðopolisaxarid tabiatli endotoksin hosil qiladi. Antigenlik xossasi. 1934-yilda Kaufman salmonella zardoblari bilan agglutinatsiya reaksiyasini qoyish natijasiga qarab barcha salmonellalarni guruhlarga va turlarga boldi, antigenlik xossasiga kora, diagnostik sxemasini tuzdi. Salmonellalar 2 ta antigen saqlaydi: O va H anti- gen Oantigeni liðopolisaxaridprotein tabiatli, termostabil, forma- lin tasirida inaktivatsiyalanadi. Hantigen oqsil tabiatli, termolabil, spirt va fenol tasirida inaktivatsiyalanadi, formalinga chidamli. Barcha 191 salmonellalar Oantigeniga kora, A, B, C, D, E va boshqa guruhlarga bolinadi. Oantigeni arab raqamlari bilan belgilanadi. H antigeniga kora ikki fazaga bolinadi. I faza kichik lotin harflari bilan belgilanadi. II fazasi arab raqamlari bilan belgilanadi. Qorin tifi qozgatuvchisi ViX antigenini saqlaydi. Chidamliligi. Salmonellalar muhit tasiriga ancha chidamli. 100°C harorat tasirida shu zahoti, 6070°C tasirida 1015 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratga ancha chidamli. Toza suvda va muzda bir necha oylab, tuzlangan va dudlangan goshtda 2 oygacha saqlanadi. Qurishga chidamli, changda uzoq vaqt saqlanadi. Dezinfeksiyalanuvchi moddalar tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Patogenligi. Kopgina salmonellalar odam, hayvon, parrandalarda kasallik keltirib chiqaradi. QORIN TIFI, A va B PARATIFning QOZGATUVCHILARI Infeksiya manbai. Bemor odam va bakteriya tashuvchilar hisoblanadi. Tarqalish yollari. Bilvosita kontakt (iflos qol, idish-tovoq va b.) suv, alimentar, mexanik yollar orqali tarqaladi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib ogiz shilliq pardasi hisob- lanadi. Mikroblar ogiz orqali oshqozonga otadi, u yerda qisman oshqozon shirasi tasirida nobud boladi. Shu tosiqlardan otgan mikroblar ingichka ichakka otadi va uning limfa tugunida soriladi. U yerda bolinib kopayadi va bu inkubatsion davrda (1014 kun) sodir boladi. Shu davrning oxirida qozgatuvchi limfa tugunidan qonga soriladi (bakteriyemiya) va butun organizmga tarqaladi. Bu davrda qozgatuvchilar ichki azolarning limfa, makrofag sistemasida, jigarda, taloqda, suyak komigida toplanadi. Salmonellalar kopayish uchun qulay sharoit bolib hisoblangan ot pufagida toplanadi, chunki ot suyuqligi bu bakteriyalarning eng sevimli muhiti hisoblanadi. Bakteriyalar ot suyuqligi bilan yana ichakka otadi va spetsifik qorin tifi yalliglanishlarini keltirib chiqaradi. Bakteriyalar qonga otgan davrda ular ozidan endotoksin ajratadi va bu toksin organizmda intoksikatsiyalarni keltirib chiqaradi. Bemorning harorati kotariladi, holsizlanib, tinkasi quriydi, boshi ogriydi. Kasallikning 2-haftasi oxiri va 3-haftasining boshida qozgatuvchilar najas, siydik, solak bilan tashqi muhitga chiqa boshlaydi. Agar vaqtida davolanmasa, bemorlar bakteriya tashuvchi bolib qolishlari mumkin. Immuniteti. Kasallikdan song uzoq vaqt davom etadi, immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Shaxsiy va umumiy gigiyena tartib va qoidalariga rioya qilish, aholi orasida sanitariya maorifi ishlarini olib borishdan iborat. 192 Maxsus profilaktikasi. Tarkibida qorin tifi, A va B paratif antigeni hamda qoqshol anatoksinini saqlovchi kimyoviy vaksina qollaniladi. Bundan tashqari, Vi antigenini saqlovchi spirtli qorin tifi vaksinasi qollaniladi. Kasallik ochogida kontaktda bolganlarga qorin tifi bakteriofagi beriladi. Davosi. Antibiotiklar va intoksikatsiyalarga qarshi preparatlar bilan davolanadi. OVQATDAN ZAHARLANISH (TOKSIKOINFEKSIYA) Salmonellalar bilan ifloslangan oziq-ovqatlarni istemol qilish natijasida vujudga keladi. Infeksiya manbai. Kasal hayvon organizmida salmonellalar saqlovchi hayvon, parrandalar hisoblanadi. Tarqalish yoli. Salmonellalar bilan ifloslangan gosht, gosht mahsulotlari, tuxum, sut, sut mahsulotlarini istemol qilganda yuqadi. Ayniqsa, endotoksin toplangan va salmonellalar bolinib kopaygan oziq-ovqatlarni istemol qilish xavfli hisoblanadi. Patogenezi. Tif va paratifoz kasalliklariga oxshash. Toksikoz va oshqozon-ichak sistemasi kasalliklarining klinik belgilari yuzaga keladi. Kasallik 45 kun davom etadi, ayrim hollarda kasallanib otgan bemorlar bakteriya tashuvchi bolib qoladilar. Profilaktikasi. Mollar doimo nazorat ostida bolishi, mollar va parrandalarni soyish, nimtalash vaqtida sanitariya holatini nazorat qilib turish, shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilishdan iborat. Maxsus profilaktikasi. Toksikoinfeksiya ochogidagi odamlarga salmonellozning polivalent bakteriofagi beriladi. Davosi. Intoksikatsiyaga qarshi preparatlar beriladi, kop miqdorda suyuqlik yuboriladi, oshqozon yuviladi, huqna qilinadi, antibiotiklar beriladi. KASALXONA ICHI SALMONELLOZ INFEKSIYASI Kasalxona ichi salmonelloz infeksiyasining asosiy qozgatuvchisi S. typhi murium hisoblanadi. Shuningdek, kasalxonada S. hedelberq, S derby va boshqa qozgatuvchilar keltirib chiqarganligi qayd qilingan. Bu qozgatuvchilarning morfologik, kultural xossalari bir-biriga oxshash va boshqa salmonellalardan farq qilmasa-da, ular uchun xos ayrim biologik xususiyatlar mavjud. Masalan, kasalxona ichidagi infeksiya qozgatuvchilari malum biovarlarga taalluqli bolib, ular oq sichqonlar uchun ancha patogen hisoblanadi. Infeksiya manbai. Kopincha bakteriya tashuvchilar, ayrim hollarda bemorlar infeksiya manbai hisoblanadi. 193 Tarqalish yoli. Bilvosita kontakt, yani oyinchoq, idish-tovoq, sochiq, choyshab, kam hollarda oziq-ovqat, havo changi orqali tarqaladi. Patogenezi. Kasallik organizmning qarshilik kuchi susaygan hollarda, yani immunologik chidami susayganda yuzaga keladi. Qozgatuvchi organizmga ogiz shilliq qavati va nafas yoli orqali tushadi va bu patologik jarayonning yuzaga kelishi bilan namoyon boladi. Oshqozon- ichak funksiyasining buzilishi, organizmning suvsizlanishi va nafas azolari funksiyasining buzilishi, bakteriyemiya, septik asoratlar yuzaga keladi. Bu kasallik bilan kopincha bolalar kasallanadi. Immuniteti. Kasallik keltirib chiqargan salmonellalarning aynan shu serovariga nisbatan immunitet hosil boladi. Profilaktika va davosi. Umumiy profilaktikasida davolash muassa- salarida sanitariya-gigiyena qoidalarini qattiq nazorat qilish alohida orin tutadi. Sanitariya maorifi ishlarini olib borish muhimdir. Maxsus profilaktikasida kontaktda bolganlarga salmonelloz polivalent bakteriofagi beriladi. Davosi simptomatik. 1. Salmonellalarning morfologik, kultural, fermentativ xossasi qanday? 2. Salmonellalarning tasnifi nimaga asoslangan? 3. Salmonellalar qanday kasalliklarni keltirib chiqaradi? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH 1. Kasallikning birinchi haftasida qon olinib, gemokultura usulida tekshiriladi. 2. Kasallikning ikkinchi haftasi yoki uchinchi haftasining boshida qon olinib, serologik usulda Vidal reaksiyasi qoyiladi. 3. Kasallikning uchinchi haftasida najas, siydik, ot suyuqligi olinib, kooprourino kultura ostirish usulida tekshiriladi. 4. Bundan tashqari, murda yorilganda uning suyak komigi, azolar bolaklari va boshqalar olib tekshiriladi. 5. Toksikoinfeksiyada qusuq moddasi, oshqozon chayindisi, ovqat qoldigi tekshiriladi. MATERIALNI TOPLASH USULI Qon. Steril shpris yordamida bemorning bilak venasidan 1020 ml qon olinadi va elektiv muhit (Rappoport yoki 1020 % ot suyuqligi ? Nazorat uchun savollar 194 qoshilgan shorva) ga ekiladi. Gaz hosil bolishini aniqlash uchun Rappoport mihitiga sterilizatsiya qilishdan avval suzgich solib qoyiladi. Bemor isitmalayotgan vaqtda 10 ml qon olinadi, isitma tushganda qonda bakteriyalar miqdori kam bolganligi uchun 1520 ml qon olinadi. Qon kolbadagi 1:10 nisbatdagi muhitga (masalan, 10 ml qonni 100 ml muhitga) ekiladi. Muhit termostatda qoldiriladi. Ertasi kuni ekilgan muhit termostatdan olib tekshiriladi. Muhitda ozgarish bor-yoqligiga qaramasdan Endo va Ploskiryov muhitlariga ekiladi. Kolbadagi muhitda bakteriyalar osishi bolmasa, termostatda yana 7 kungacha qoldiriladi. Petri kosachasidagi muhitlarda osish bolmasa, har 2 kunda qaytadan Endo va Ploskiryov muhitlariga ekiladi. Agar 7 kun ichida osish bolmasa, salbiy javob beriladi. Agar shubhali koloniyalar hosil bola, sof kultura ajratib olinadi va umumiy sxema asosida tekshirish ishlari otkaziladi. Najas (bemor kasalxonaga tushgandan to chiqib ketgunga qadar tekshiriladi). 35 g olinib, bankaga yoki 30 % li glitserin aralashmasiga solinadi. Najas differensial diagnostik muhitlari bolgan Endo, Plos- kiryov, vismut sulfitli agar va differensial diagnostik muhitga ekish uchun boyituvchi selenitli Myuller yoki Kaufman muhitlariga ekiladi. Shunday qilib u differensial diagnostik muhitlariga 1 kun oralab ekiladi. Tekshirish materialini glitserinli aralashmada 68 soat, yaxshisi, muzlatgichda saqlash maqsadga muvofiq. Ekish usuli. Toplangan material glitserinli aralashmada obdan aralashtiriladi va shisha tayoqcha yoki naycha yordamida bir tomchi olib, Petri kosachadagi oziqa muhit chetiga tomiziladi. Avval shpatel bilan muhit chetiga, song butun oziqa muhit yuzasiga yoyiladi. Shunday usul yordamida alohida koloniya hosil qilinadi. Ekilgan muhitlar termostatda qoldi- riladi. 1824 soatdan keyin kosachalar ter- mostatdan olinib tekshiriladi. Shubhali kolo- niyalar hosil bolganda, sof kultura ajratib olinadi va qolgan tekshirishlarni umumiy sxema asosida olib boriladi. Shubhali kolo- niyalar hosil bolsa, salbiy natija, deb javob beriladi. 195 Siydikni, yaxshisi, steril kateter yordamida olish maqsadga muvofiqdir. Agar bunday olishning iloji bolmasa, siydik chiqarish yoli fiziologik eritma bilan yuviladi, siydikning birinchi qismi tokib tashlanadi. Shundan song steril idishga 20 50 ml siydik olinadi, sentrifuga qilinadi yoki tindiriladi. Chokmadan olib EndoPloskiryov, vismutsulfitli agar va boyituvchi selenitli Myuller yoki Kaufman muhitlariga ekiladi va 24 soatdan keyin differensial-diagnostik oziqa muhitiga ekiladi. Ekilgan muhitlar termostatda qoldiriladi. Ertasi kuni shubhali koloniyalar osgan bolsa, sof kulturasi ajratib olinadi va umumiy sxema asosida tekshirish ishlari olib boriladi. Siydik (bemor kasalxo- nadan chiqib ketgunga qadar tekshiriladi). Yaxshi korinib turgan rozeolasi bolgan teri spirt bilan artiladi, fiziologik eritma bilan yuviladi va steril skalpel bilan rozeola qiriladi (skarifikatsiya qilinadi). Skarifikatsiya qilingan joyga bir tomchi 1020 % li otli shorva tomi- ziladi va rozeola ichidagi modda bilan aralash- tiriladi. Shu moddadan Paster pipetkasida olib uchi alangada kavsharlanadi va laboratoriyaga jonatiladi. Laboratoriyada toplangan material differensial-diagnostik muhitga va boyituvchi 1020 % li shorvaga ekiladi. Ekilganlarni termostatda qoldiriladi. Qolgan tekshirishlar umumiy sxema asosida olib boriladi. Rozeola ichidagi modda. Suyak komigi. Qorin tifi va paratiflarning qozgatuvchilari suyak komigida uzoq vaqt saqlanadi. Suyak komigidagi moddani olish uchun steril holatda punksiya qilinadi. Olingan punksiyani boyituvchi muhitga, songra differensial-diagnostik muhitga ekib, umumiy sxema asosida tekshiriladi (23-jadval). Ot suyuqligi. Ot suyuqligi kasallikning birinchi kunida, isitmalayotgan va rekonvalessensiya davri davomida tekshiriladi. Ot suyuqligi, asosan, bakteriya tashuvchi va rekonvalessentni aniqlash maqsadida tekshiriladi. Ot suyuqligi steril probir- kalarga zond yordamida alohida A, B va C porsiyalarda olinadi. Bu porsiyalarni alohida yoki aralashtirmasdan ekish mumkin, chunki ot suyuqligi salmonellalar uchun oziqa muhit bolib hisoblanadi. Olingan ot suyuqligi 196 termostatda qoldiriladi. Ertasi kuni u differensial-diagnostik muhitlarga ekiladi. Agar bu muhitlarda u osmasa, qaytadan ekiladi. Ot suyuqligi 10 kunga termostatda qoldiriladi va vaqt-vaqti bilan differensial- diagnostik muhitlarga ekib turiladi. Shubhali koloniya hosil bolsa, u umumiy sxema asosida tekshiriladi. Qusuq moddasi. Qusuq moddasi steril hovonchada fiziologik eritmada 1:10 nisbatda suyultiriladi, yuqori qismidan 23 tomchi olib, differensial- diagnostik va boyituvchi muhitga ekiladi. Qolgan tekshirish ishlari umumiy sxema asosida olib boriladi. Qusuq moddasi va oshqozon chayindisi toksikoinfeksiyada tekshiriladi. U kislotali sharoitga ega bol- ganligi uchun ekishdan oldin 510 % li natriy bikorbanat bilan neytrallanadi. Oziq-ovqatlar. Suyuq va yarimsuyuq mahsulotlar yaxshi- lab aralashtiriladi. 23 tomchi olib diffe- rensial-diagnostik va boyituvchi muhitga ekiladi. Yirik mahsulotlardan esa steril pichoq yoki skalpel bilan chuqur qismidan 510 g olib, steril hovonchada fiziologik eritma 1 : 5 yoki 1 : 10 nisbatda suyulti- riladi, songra 23 tomchi olib differensial- diagnostik va boyituvchi muhitlarga ekiladi. Agar shubhali koloniyalar hosil bolsa, umumiy sxema asosida tekshirish ishlari otkaziladi. Azolardan ayrim bolaklar, jigar, taloq, buyrak, ingichka ichakdan esa bolakcha, qon va ot suyuqligi tegishli ravishda tekshirish uchun olinadi. Azolardan bolakchalar steril qaychi va pinset yordamida olinadi, songra steril idishga solinadi. Songra ular steril hovonchada eziladi va differensial-diagnostik va boyituvchi muhitga ekiladi. Shubhali koloniyalar hosil bolgan bolsa, umumiy sxema asosida tekshirish ishlari otkaziladi. Murda yorilganda olingan material. 197 Asosiy tekshirish usullari 1. Bakteriologik. 2. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Tayyorlangan tekshirish materiali differensial-diagnostik va boyituvchi muhitlarga ekiladi. Tekshirish materiali Ploskiryov va vismutsulfitli agarga Endo muhitiga nisbatan ikki baravar kop ekiladi. Chunki birinchisida osishga tosqinlik qiluv- chi omillar boladi. Boyituvchi muhitga 1:5 nisbatda ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Oziq muhitlarini termostatdan 1824 soatdan keyin olinadi va shubhali koloniyalar organiladi. Bir necha (56) shubhali koloniyadan namuna olib, Olkenitskiy yoki Rassel muhitiga ekiladi. Bu muhitlarga namuna quyidagicha ekiladi: shubhali koloniyadan olib, sekin-asta probirka devoriga tekkizmasdan konden- satsion suyuqligida aralashtirilib, yuqoriga qarab shtrix qilib ekiladi va gaz hosil bolishini aniqlash uchun ekishga muhit markazidan uning tubigacha sanchiladi. Ekilgan muhit termostatda qoldiriladi. Agar tekshirish materiali boyituvchi muhitga ekilgan bolsa, u holda differensial-diagnostik muhitiga qaytadan ekiladi. Qolgan ishlar umumiy sxema asosida olib boriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhit termostatdan olib tekshiriladi. Jamlangan Olkenitskiy yoki Rassel muhitining tarkibida laktoza, glukoza, mochevina va indikator mavjud. Anaerobioz sharoitda glukoza parchalanadi. Shuning uchun bunda muhitning qiyshiq qismi ozgarmasdan, tik qismining rangi indikatorga moslashib ozgaradi. Salmonellalar laktoza va mochevinani parchalamaydi. Agar muhitning barcha qismlari ozgarsa, salmonellalar yoq, deb javob beriladi. Shundan song faqat glukozasi parchalangan muhitlargina tekshiriladi: 23-jadval Tif va paratif qozgatuvchilarining antigenlik tuzilishi r a l a ll e n o m l a S i h u r u g r a l n e g it n a ) k it a m o s ( r a l n e g it n a a z a f - 1 a z a f - 2 fi t a r a p 2 1 , 2 , 1 a fi t a r a p 2 1 , 5 , 4 , 1 b 2 , 1 if it n i r o Q ) i V ( , 2 1 , 9 , 1 d A B A B O O H 198 1. Surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyaladi va mikros- kop ostida tekshiriladi. Agar Grammanfiy tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. 2. Saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga ekiladi. 3. Proteolitik xossasini organish uchun lakmusli sutga va indikator qogozi ornatilgan gosht-peptonli shorvaga ekiladi. Ekilgan muhitlar termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 4. Salmonellalarni farqlash uchun agglutinatsiya reaksiyasi otkaziladi. Buyum oynachasi ustida polivalent (A, B, C, D, E) zardobi bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agar reaksiya musbat bolsa, shu zardob tarkibiga kiruvchi guruh qon zardoblari bilan alohida agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Ularning birida agglutinatsiya reaksiyasi bersa, Oantigen va Hantigenining birinchi faza va ikkinchi faza zardoblari bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi (24-jadvali). Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. - a y i r e t k a B i r u t g n i n T S E T if it n i r o Q K K g k + g k fi t a r a p A g k g k g k K fi t a r a p B g k g k g k + I Laktoza Glukoza Saxaroza Mannit Maltoza Indol Lakmusli sut Jelatina H 2 S Salmonellalarning fermentativ xossasi 24-jadval Izoh: Kkislotagacha; kgkislota va gazgacha parchalaydi; Iishqorlaydi. 5. Fagga sezuvchanligi aniqlanadi. 1-usul. Petri kosachasiga 2025 ml gosht-peptonli agar quyiladi va termostatda qopqogi ochiq holda quritiladi. Kosacha orqa tomondan sektorlarga bolinadi va har bir sektorga fagning nomi yoziladi. 46 soat turgan shorvadagi kultura organiladi, chunki u kop miqdorda Vi antigenini saqlaydi. Agar ustida 810 tomchi shorvadagi kulturadan tomiziladi va shisha 199 shpatel bilan butun oziqa muhit yuzasiga yoyiladi. Ekilgan muhit qopqogi ochiq holda termostatda quritiladi. Har bir sektorga malum fag tomiziladi. Tomchi qurigandan keyin termostatda1824 soat qoldiriladi. Natija kosachaning orqa tomonidan oqiladi. Tekshirilayotgan kultura qaysi turdagi fagga mos bola, u lizisga uchrab tiniq zona hosil qiladi. 2-usul. Oziqa muhitga tekshirilayotgan kultura tomizib chiqiladi. Har bir shunday tomchi qurigandan keyin uning ustiga malum fag turi tomiziladi. Termostatda qoldiriladi. Ertasi kuni natija oqiladi. 1. Qorin tifi, paratif va toksikoinfeksiyada qanday tekshirish materiallari olinadi? 2. Gemokultura usuli kasallikning qaysi davrida qollaniladi? 3. Tif va paratif kasalligining qaysi davrida najas va siydik olinadi? 4. Tekshirish materiali qanday differensial-diagnostik muhitlariga ekiladi? 5. Monoretseptor Ozardobi va Hzardobi bilan nima aniqlanadi? Qorin tifi va paratifning serologik diagnostikasi Vidal reaksiyasi. Kasallikning ikkinchi haftasida qonda infeksiyaga qarshi antitelolar hosil boladi. Ularni aniqlash uchun bemorning qon zardobi olinib, kengaytirilgan hajmli agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Antigen sifatida olik salmonella kulturasidan iborat diagnostikum qollaniladi. Reaksiyani qoyish uchun bemorning qon zardobi, diagnostikumlar, fiziologik eritma, probirkalar kerak boladi. Bemor barmogi yoki venasidan steril probirkaga 23 ml qon olinadi va laboratoriyaga jonatiladi. Laboratoriyada probirkani termostatda 37°C haroratda 2030 daqiqa qoldiriladi, qon ivigandan keyin Paster piðetkasi yordamida probirka devoridan ajratib olinadi va 3040 daqiqaga muzlatgichda qoldiriladi. Ajralgan zardob alohida probirkaga solinadi. Zardobni ajratib olish uchun qonni sentrifugalash ham mumkin. Infeksion jarayon yuzaga kelgan organizmda tegishli antigenga nisbatan O va H antitelolar hosil boladi. Oantigen birinchi bolib hosil boladi va tezda yoqoladi. Hantitelolar uzoq vaqt saqlanib qoladi. O va Hantigeni bilan qoyilgan agglutinatsiya reaksiyasining musbat bolishi kasallik borligidan dalolat beradi, faqat Hantigeni ? Nazorat uchun savollar 200 bilan reaksiyaning musbat bolishi kasallanib otganlikdan yoki emlanganlikdan dalolat beradi. Shundan kelib chiqqan holda Vidal reaksiyani O va H antigenlari bilan birga qoyish lozim. Qorin tifi va A va B paratif kasalliklarining belgilari oxshash bolganligi uchun kasallik tabiatini aniqlashda, salmonellalarning qorin tifi hamda A va B paratif diagnostikumlaridan bir vaqtning ozida foydalaniladi. Reaksiya ikki usulda tomchi va hajmli usullarda olib boriladi. Amaliyotda kopincha hajmli agglutinatsiya usuli qollaniladi. Hajmli agglutinatsiya reaksiyasining qatori antigenlar miqdoriga teng bolishi kerak. Bemorning ajratib olingan qon zardobidan ishchi eritma tayyorlab olinadi. Buning uchun alohida probirkaga 0,1 ml bemor qon zardobi va 4,9 ml fiziologik eritma solinadi. Bunda zardob 1:50 nisbatda suyuladi. 3 qatorda 5 tadan probirka olinadi va hammasiga 1 ml.dan fiziologik eritma solib chiqiladi. Birinchi probirkaga 1 ml ishchi eritmadan solib, yaxshilab aralashtiriladi va piðetkaga sorib olinadi va ikkinchi probirkaga solinadi, aralashtirilib ikkinchidan uchinchiga, uchinchidan tortin- chiga va tortinchidan 1 ml olib dezinfeksiyalovchi moddaga tokiladi. Bunday ish qolgan qatorlarda ham takrorlanadi. Song 1-qatorning barcha probirkalariga qorin tifi, 2-qatorga A paratif, 3-qatorga B paratif diagnostikumidan 2 tomchidan solib chiqiladi. Probirkalarni termostatda 37°C haroratda 1824 soat qoldiriladi. Bunda zardob 1:100, 1:200, 1:400, 1:800 nisbatga suyuladi. Vaqt otgach, termostatdan olib natija oqiladi. Agar qatordagi antigen antiteloga mos bolsa, shu qatorda donador chokma hosil boladi. Agar 1:100 nisbatga suyultirilgan zardob probirkalarda aggluti- natsiya bersa, reaksiya shubhali hisoblanadi. Shuning uchun reaksiya 57 kundan keyin qaytadan qoyiladi. Bemorlarda reaksiya qoyilganda antitelo titri ortadi, emlangan va kasallanib otganlarda esa titr oz- garmaydi. Organizmga Vi antigeni yuqori bolgan qorin tifi qozgatuvchisi tushganda bemor qonida Vi agglutininlar hosil boladi. Ular kasal- likning ikkinchi haftasidan boshlab aniqlanadi, lekin ularning titri 1:19 dan ortmaydi. Vi antiteloning aniqlanishi organizmda qorin tifi qozgatuvchisi borligidan dalolat beradi. Bu holat epidemiologik ahamiyatga ega bolib, bakteriya tashuvchini aniqlashda katta yordam beradi. Vi gemagglutinatsiya reaksiyasi.Bu reaksiya antiteloni aniqlay- digan eng aniq reaksiya hisoblanadi. Ushbu reaksiya shunga asoslanganki, 201 odam va qoy eritrotsitlari maxsus usulda ishlov berilganda, oz yuzasiga Viantigenlarni adsorbsiyalashi mumkin va natijada oziga mos Vi antitelolarni agglutinatsiyalash qobiliyatiga ega boladi. Oz yuzasiga antigenlarni adsorbsiyalagan eritrotsitlar eritrotsitar diagnostikum deyiladi. Vi gemagglutinatsiya reaksiyasini qoyish uchun quyidagilar kerak boladi: 1) 12 ml bemorning qon zardobi, 2) salmonelloz eritrotsitar Vi diagnostikumi, 3) Vizardobi, 4) Ozardobi, 5) fiziologik eritma. Reaksiya agglutinatsiya probirkasida yoki plastmassa plastinkalarda olib boriladi. Vidal reaksiyasidek bemordan qon olinib, uning zardobi ajratib olinadi. Zardob 1:10 dan 1:160 gacha suyultiriladi. Har bir suyultirish darajasidan 0,5 ml.dan probirka yoki plastinkadan botiqlikka solinadi va ularning ustida 0,25 ml eritrotsitar diagnostikum solinadi. Reaksiya 0,75 ml hajmda qoyiladi. Taqqoslash sifatida: 1) standart agglutinatsiyalovchi monore- tseptor Vizardobi+diagnostikum zardob titrigacha musbat boishi kerak, 2) fiziologik eritmadagi diagnostikumning (nazorat) reaksiyasi manfiy boladi. Eritma yaxshilab aralashtiriladi va termostatda 37°C haroratda 2 soatga, song xona haroratida 1824 soat qoldiriladi. Natija nazorat probirkalaridan boshlab oqiladi. Diagnostikumni agglutinatsiyalanish darajasiga qarab reaksiya oqiladi. Natija quyidagicha baholanadi: ++++ Eritrotsitlar toliq agglutinatsiyalanadi, chokma «soya- bonga» oxshash boladi. +++ «Soyabon» aniq emas, hamma eritrotsitlar chokmaga tushmaydi. ++ «Soyabon» bilinar-bilinmas agglutinatsiyalangan eritrotsit- lar korinib turadi. Eritrotsitlar tugmasimon chokma hosil qiladi va unday reak- siya manfiy hisoblanadi. 1. Kasallikning qaysi davrida Vidal reaksiyasi qoyiladi? 2. Vidal reaksiyasi qoyish uchun nimalar kerak? 3. Vidal reaksiyasida qanday diagnostikumlar qollaniladi? 4. Serologik reaksiyalardan qaysi biri sezgir reaksiya hisoblanadi? 5. Vi gemagglutinatsiya reaksiyasida diagnostikum sifatida nima olinadi? 6. Vi gemagglutinatsiya reaksiyasining ahamiyati qanday? ? Nazorat uchun savollar 202 20-bob. SHIGELLALAR Dizenteriya qozgatuvchisini 1891-yilda A. V. Grigoryev va 1898- yilda yapon olimi Shig aniqlagan. Keyinchalik mana shu avlodga kiruvchi bakteriyani 1900-yilda Fleksner, 1915-yilda Zonne, 1917- yilda Shtutser- Shmis, 1934-yilda Larj-Saks kabi olimlar aniqlagan. Xalqaro tasnifga kora, dizenteriya kasalligini chaqiruvchi mikrob- larga Shig nomi berilib, Shigella avlodiga kiritilgan. Morfologiyasi. Shigellalar tayoqchasimon (23x0,40,6 mk), uchlari yumaloq, harakatsiz bolib, spora va kapsula hosil qilmaydi, Grammanfiy bolib boyaladi. Kultural xossasi. Fakultativ anaerob hisoblanadi. Oziqa muhitiga talabchan emas. Endo, Ploskiryov EMS muhitlarida ortacha, yarim- tiniq, kulrang, yumaloq, 1,52 mm S shaklli koloniya hosil qilib osadi. Zonne turi esa yirik, yassi, xira, chetlari gadir-budur. R shaklli koloniya hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida loyqalanish, R shaklli chokma hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Shigellalarda fermentativ xossasi yaxshi namoyon bolmaydi. Laktoza va saxarozani parchalamaydi. Zonne shigellasi esa 23 kunlarda ularni kislotagacha parchalaydi. Glukoza va maltozani kislotagacha parchalaydi. Mannitni faqat Fleksner, Boyd, Zonne shigellalari kislotagacha parchalaydi. Proteolitik xosasiga kora, indol va vodorod sulfitni hosil qilishi doimiy emas, sutni ivitadi, jelatinani suyultirmaydi. Mannitni parchalashiga qarab, barcha shigellalar mannitni parchalovchi va mannitni parchalamaydiganlarga bolinadi (25-jadval). 25-jadval Zonne shigellasining biovariantlari Izoh: «+» parchalaydi; «» parchalamaydi. (+) 35 kundan keyin parchalaydi. Mannitni parchalamaydigan shigellalarga GrigoryevShig, Shtutser Shmis, Larj-Saks shigellalari kiradi. Mannitni parchalovchi- larga shigellalarning Fleksner, Boyd, Zonne turlari kiradi (26-jadval). r a v o i B a z o n m a R a z o li s K I + I I + I I I + + V I + + 203 26-jadval Shigellalarning fermentativ xossasi Hozirgi vaqtda Zonne shigellasi tortta fermentativ turga bolinadi. Ular ramnoza va ksilozani parchalashiga kora, bir-biridan farqlanadi. Toksigenligi. Endotoksin ishlab chiqaradi. Shig shigellasi esa endotoksindan tashqari, yana ekzotoksin ham ishlab chiqaradi va bu toksin neyrotoksik tasir korsatadi. Antigenligi. Guruh va turga xos antigenlarni saqlovchi somatik O antigenini saqlaydi. Xalqaro tasnifga kora shigellalar tort guruhga bolinadi va lotincha A, B, C, D harflari bilan belgilanadi. A guruhiga: 1) Grigoryev-Shig; 2) Shtutser-Shmis; 3) Larj- Saks va 810 provizorlari kiradi. Bu guruhga kiruvchi azolar faqat tur antigenini saqlaydi va arab raqamlari bilan belgilanadi. B guruhiga Fleksner shigellasi kiradi. U murakkab antigenlik tuzilishiga ega. U tur antigenini saqlaydi va ular rim raqamlari bilan belgilanadi hamda guruh antigenini saqlab, arab raqamlari bilan belgilanadi. Fleksner shigellasining 6 ta serovarianti mavjud. C guruhiga Boyd shigellasi kiradi, uning tur antigeni bolib, 15 ta serologik turi mavjud. D guruhiga Zonne shigellasi kiradi, uning turiga xos antigeni mavjud (27-jadval). i r u t a ll e g i h S T S E T g i h S - v e y r o g i r G . A K K K s i m h S - r e s t u t h S K K K + s k a S - jr a L K K K + r e n s k e l F . B K K K K + + d y o B . C K K K K e n n o Z . D K 5 2 i n u k K 6 5 i n u k K K K K Laktoza Glukoza Saxaroza Mannit Maltoza Indol Sut Jelatina H 2 S 204 h u r u G r u T r a v o r e S - r a v o r e S i d l o it n a i r a v n a g li r it r a q s i Q n e g it n a i h s il i z u t A 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 B 1 2 3 4 5 6 x y a 1 b 1 a 2 b 2 a 3 b 3 c 3 a 4 b 4 , 4 : I , 6 : I , 4 , 3 : I I , 8 , 7 : I I , 8 , 7 , 6 : I I I , 6 , 4 , 3 : I I I , 6 : I I I , 4 , 3 : V I , 6 : V I , 8 , 7 : V , : I V , 8 , 7 : , 4 , 3 : C 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 D 27-jadval Shigella avlodining tasnifi S. dysenteriay S. flexneri S. boydii S. Sonnei 205 Chidamliligi. 100°C harorat tasirida shu zahoti, 60°C haroratda 2030 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratga chidamli, ariq suvida 3 oy, hol meva va sabzavotlarda 1015 oy saqlanadi. Tik quyosh nuri tasirida 23 soatdan keyin, Shig turi esa 20 daqiqadan song nobud boladi. Desinfeksiyalovchi moddalar tasirida 2030 daqiqadan keyin nobud boladi. Tashqi muhit omillari tasirida A guruhiga kiruvchi turlari chidamsiz bolib, Zonne turi esa ancha chidamli. Patogenligi. Maymundan tashqari boshqa hech qanday hayvon dizenteriya qozgatuvchilariga sezgir emas. Laboratoriya hayvonlaridan quyon va oq sichqonlarga bakteriyalar yuborilganda, intoksikatsiyaga va olimga olib keladi. Infeksiya manbai. Otkir va surunkali shakldagi bemor va bakteriya tashuvchilar hisoblanadi. Tarqalish yollari. Alimentar, suv, sabzavot va mevalar, bilvosita kontakt, mexanik yol orqali tarqaladi. Patogenezi. Ogiz shilliq pardasi orqali tushadi. Oziq-ovqatlar bilan organizmga kirib ichakka tushadi va uning epiteliy shilliq qavatiga otadi, bu yerda bolinib kopayadi. Ular ichakda qisman nobud boladi. Parchalanganda endotoksin hosil qiladi. Bu toksin esa yogon ichak shilliq qavati sezuvchanligini oshiradi, qon tomirlari otkazuvchanligini kuchaytiradi va endotoksin qonga sorilib, natijada intoksikatsiyani yuzaga keltiradi. Ichak shilliq qavati yalliglanish natijasida shishadi, nekrozga uchraydi, gemorragiya yuzaga keladi. Bundan tashqari, endotoksin markaziy nerv sistemasiga tasir korsatadi, yiring aralash ich ketadi. Shig shigellasi keltirib chiqargan kasallik juda ogir otadi, u yogon ichak shilliq qavatiga chuqur kiradi, qizarish va shish hosil qiladi. Ular ajratgan ekzotoksin ogiz intoksikatsiyani yuzaga keltiradi. Bemorning qorni ogriydi, shilliq va qon aralash ich ketadi, najas yashil rangga kiradi. U holsizlanadi, ishtahasi yoqoladi, tinkasi quriydi va boshqa salbiy holatlar kuzatiladi. Kasallikning yuzaga kelishi organizmga kirgan qozgatuvchining dozasiga bogliq. Immuniteti. Odamda dizenteriya infeksiyasiga qarshi tabiiy himoya vositasi mavjud. Kasallikdan song kuchsiz immunitet yuzaga keladi. Zonne shigellasi keltirib chiqargan kasallikdan song esa umuman immunitet hosil bolmaydi. Birinchi guruhga kiruvchi dizenteriya shigellalari (Grigoryev-Shig) keltirib chiqargan kasalliklardan song ancha mustahkam antitoksik immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Bemorlarni vaqtida aniqlash, ajratib qoyish, gospitalizatsiya qilish, vaqtida tashxis qoyish, dezinfeksiya ishlarini olib borish va aholi orasida sanitariya maorifi ishlarini olib borish muhim ahamiyat kasb etadi. Maxsus profilaktikasi. Buni qollash natija bermaydi. Bemorlar bilan muloqotda bolganlarga dizenteriya bakteriofagi beriladi. 206 Davosi. Komplekslashgan. Sulfanilamid va antibiotiklar bilan davolanadi. Spetsifik davosi yoq. 1. Shigella avlodiga kiruvchi dizenteriya qozgatuvchilarini bayon eting. 2. Qaysi uglevodni parchalashiga qarab dizenteriya qozgatuvchisi necha guruhga bolinadi? Bu guruhlarga qaysi qozgatuvchilar kiradi? 3. Shigellalar qaysi yol orqali organizmga tushadi va ichakni qaysi qismini shikastlaydi? 4. Qaysi shigella R shaklli koloniya hosil qilib osadi? 5. Qaysi shigella tur va guruh antigeniga ega? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Najas. 2. Seksion material. 3. Oziq-ovqatlar. Tekshirish materialini yigish Asosiy tekshirish usullari 1. Mikrobiologik. 2. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Agar tekshirishga keltirilgan najas- ning shilliq, yiringli va qonli qismlari bolsa, undan bakteriologik qovuzloq yordamida material olinib, fiziologik eritmada chayiladi va differensial-diagnostik oziqa muhitlariga ekiladi. Glitserin aralashmasida - il o b a l h s o b n a d i r a l n u k i h c n i r i b g n i n k il l a s a k l a i r e t a M i k n u h c , r u r a z h s il o i n i m s i q i h c n i r i b g n i n s a j a N .i d a n n a d s a j a N .i d y a lt s a k i h s i n k a h c i n o g o y r a l a ll e g i h s 3 5 - a r o b a l , b il o s a g a m h s a l a r a il n i r e s ti l g a v i d a n il o g - z u v o q n a g n a l r o y y a t n a d m i s n i m u l A .i d a li t a n o j a g a y i r o t a g a k r i b o r p ,i d a n il o s a j a n b il it i r i k a k k a h c i i r g o t q o l l a i r e t a m i g a d n a g n il i q a n q u H .i d a li t a n o j a v i d a n il o s . n i k m u m i h s i n il o m a h a v m u q li r e t s , b i n il o i m s i q a t 3 2 g n i n k a h c i n o g o Y .i d a li z e b a li h s x a y n a li b a m ti r e k i g o l o i z if .i b a k i g a d a y i s k e f n i o k i s k o t il a i r e t a m h s i r i h s k e T ? Nazorat uchun savollar Najas. Seksion material. Oziq-ovqatlar. 207 keltirilgan najas yaxshilab aralashtiriladi va differensial-diagnostik muhitga shpatel bilan ekiladi. Shigellalar uchun differensial-diagnostik muhit bolib Ploskiryov, Endo va EMS muhitlari hisoblanadi. Alohida koloniyalar hosil bolishi uchun muhit oziqa qoyilgan Petri kosachasi termostatda quritib olinadi. Song muhitga tekshirish materialidan bir tomchi solinib, shpatel yordamida oziqa muhiti yuzasiga yoyib ekiladi. Ikki yoki uchta kosachaga ekilganda har safar tekshirish materialini yangidan olish lozim. Bu esa shigellalarni ajratishga imkon yaratadi. Dizenteriyani davolashda turli xil antibiotiklar, masalan, levomitsetin, sintomitsin kabilarni qollanilishi natijasida qozgatuv- chilar bu antibiotikka chidamli bolibgina qolmay, balki bu antibiotik- larga bogliq ham bolib qoladilar. Shuning uchun muhitlarga kop qollaniladigan antibiotiklar qoshish tavsiya etiladi. Parallel holda tekshirish materiali boyituvchi muhit selinitli shorvaga 1:4, 1:5 nisbatda qilib ekiladi. Barcha ekilgan muhitlarni termostatda 37°C ha- roratda qoldiriladi. Tekshirishnng ikkinchi kuni. Ekilgan oziqa muhitlar termostatdan olib kozdan kechiriladi. Bu oziqa muhitlarda bakteriyalar orta olchamli yarimtiniq, kulrang koloniyalar hosil qiladi. Zonne shigella turi esa yirikroq, yassi, xira, chetlari gadir-budur, R shaklli koloniya hosil qiladi. Shunday shubhali koloniyalardan 46 tasi olinib, sof kulturani ajratib olish uchun Rassel muhitiga shtrix qilib va sanchib ekiladi (paralell holda selenitli shorvadan olib, differensial-diagnostika muhitlariga ekiladi). Ekilgan muhit termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan oziqa muhiti termostatda olinib, kozdan kechiriladi. Laktozani parchalamagan bolsa, yani muhitning qiyshiq qismi ozgarmasdan, tik qismi ozgargan bolsa, tekshirish davom ettiriladi. 1. Surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Bunda agar faqat shigellalar korinsa, sof kultura ajralganligidan dalolat beradi va tekshirish ishlari davom ettiriladi. 2. Saxarolitik xossasini organish uchun Giss muhitiga sanchib ekiladi. 3. Proteolitik xossasini organish uchun gosht-peptonli shorvaga ekilib, qopqogiga indikator qogoz yopiladi. 4. Lakmusli sutga ekiladi. Ekilgan muhitlarni termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 5. Antigenlik xossasi organiladi. Buning uchun buyum oynachasi 1-aralashma bilan taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Bu aralashma tarkibiga Zonne, Nyukasl shigellalarini saqlovchi antiteloli zardob va polivalentli Fleksner zardoblari kiradi. 208 Agar reaksiya musbat bolsa, shu aralashma tarkibiga kiruvchi zardoblar bilan alohida-alohida taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agar Zonne yoki Nyukasl adsorbsiyalangan zardoblari bilan agglutinatsiya bersa, kasallikni Zonne yoki Nyukasl shigellasi keltirib chiqargan, deb javob beriladi. Agar Fleksner bilan agglutinatsiya bersa, reaksiya davom ettiriladi, chunki uning tur va kichik turlari mavjud. Buning uchun avval tur (I, II, III, IV,V) va guruh (13, 467, 8) zardoblari bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Masalan, ajratib olingan kultura II tur zardobi va 3,4-guruh zardoblari bilan agglu- tinatsiya bersa, jadvalga asoslangan holda javob aniqlanadi. Ajratib olingan kultura Fleksner shigellasining 2-serovar, 1a-kichik serovari. Javob: Fleksnerning 2a-shigellasi ajratib olinadi. Agar 1-aralashma bilan agglutinatsiya bermasa, boshqa polivalentlik zardoblar bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agglutinatsiya reaksiyasini qoyishda shigellalarning mannitni parchalashiga ham etibor berish lozim. Mannitni parchalamaydigan kulturalar bilan Grigoryev-Shig, Shtutser-Shmis (1,2), Larj-Saks (37), (810) provizor turlarini saqlovchi polivalentlik zardob bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Mannitni parchalagan hollarda esa 1-aralashma bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agar qaysi birida u reaksiya bersa, shu zardob bilan alohida-alohida agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Boyd zardobi bilan agglutinatsiya reaksiyasini qoyishda, shigellalarning shu joyda koproq uchraydigan serovarlari bilan reaksiya qoyilishi lozim. Bizda Boyd shigellasining 4, 5, 7, 9 va 12-serovarlari uchrab turadi. Tekshirishning tortinchi kuni. Ekilgan muhitlar termostatdan olib kozdan kechiriladi. Fermentativ xossasining ozgarganligiga asoslanib, shigellaning turi aniqlanadi. Serologik reaksiyasiga asoslangan holda javob beriladi. Kasallikka tez tashxis qoyishda biologik usuldan ham foydalanish mumkin. Tekshirish materiali yoki ajratib olingan kultura dengiz chochqachalarining konyunktiva xaltachasiga (pastki koz qovogi ichiga) yuboriladi. Birinchi kunning oxirlarida dengiz chochqachalarida konyunktivit yuzaga keladi. 1. Dizenteriya kasalligida qanday tekshirish materiali olinadi va u qanday toplanadi? 2. Qanday uglevod parchalanishiga qarab, salbiy javob beriladi? 3. Fleksner shigellasining serovar va kichik serovari hamda boshqa shi- gellalarning turini aniqlash uchun qanday zardoblardan foydalaniladi? 4. 1-aralashma tarkibiga qanday zardoblar kiradi? ? Nazorat uchun savollar 209 Shartli-patogen bakteriyalar Mikrobiologiya va infeksiya haqidagi tushunchaning rivojlanishi natijasida malum turdagi mikroorganizmlar oziga xos tarqalish yoli va klassik belgilari bilan namoyon boladigan kasalliklarni keltirib chiqarishi aniqlandi. Lekin XX asrning ikkinchi yarmida odam uchun patogen bolmagan mikroorganizmlar, xususan, ichakda doimo yashaydigan ichak tayoqchasi, teridagi saprofit stafilokokklar, yuqori nafas yollari shilliq qavatidan gemofil mikrofloralar yuqumli kasalliklarni kelib chiqishiga sabab bolayotganligi aniqlandi. Bu mikroorganizmlar shartli-patogen, deb ataladi. Chunki ular malum sharoitlarda, masalan, organizmning kasallikka qarshi kurashish kuchi susayganda yoki uni qozgatuvchi mikroorganizmlar oz xossalarini ozgartirgandagina tasir korsatadi. Butun dunyoda operatsiyadan keyin, kuygan qismlarning bitishida yiringli yalliglanishi asoratlari miqdorini ortishi kuzatilmoqda. Bunday kasalliklar klinika ichi kasalliklari deyiladi. Chunki ular davolash muassasalarida yuzaga keladi. Hozirgi davrda klinik infeksiyalarning tarqalishida turli xil tibbyot asboblaridan foydalanish (kateter kiritish, endo va bronxoskop, ingalator) sabab bolmoqda, chunki bu asbob- lardan foydalanilayotganda aseptika va antiseptika qoidalariga rioya qilish tartibi buzilmoqda. Bundan tashqari, bu vaziyatga shartli-patogen mikroorganizmlar patogenlik tasirini dorivor mahsulotlarga, tashqi muhitga chidamliligining ortishi, toksigenlik xossasi hosil bolishi sabab bolyapti. Hozirda shartli-patogen mikroorganizmlar keng doirani tashkil etadi. Ularga ichak oilasi azolari (klebsiyellalar, proteylar, providensiya, serratsiya), stafilokokk, B guruhidagi streptokokk, enterokokklar, kok- yashil yiring tayoqchalari, spora hosil qilmaydigan anaeroblar va boshqalar kiradi. Klinik infeksiyalar kasalxona ichidagi gigiyenik tartib buzilishi natijasida yuzaga keladi. Infeksiya manbai bolib tibbiyot xodimlari, bemorlar, kasal korgani kelganlar hisoblanishi mumkin. Choyshab, sochiq, havo, tib- biyot asboblari orqali tarqalib, bular ekzogen infeksiyalar hisoblanadi. Ayrim hollarda klinik infeksiya organizm oz mikroflorasining patogen- lik xossasini paydo bolishi natijasida yuzaga keladi. Masalan, operatsiyadan song nafas yolida joylashgan mikroblar undan kislorod yetarli darajada otmaganligi sababli zotiljam (pnevmoniya)ni keltirib chiqaradi. 21-bob. KLEBSIYELLALAR Klebsiyella avlodi enterobakteriya oilasiga mansub bolib, unga turli xil kasalliklar (zotiljam va yiringli-yalliglanish jarayonlari)ni keltirib chiqaruvchi K. pneummoniae, K. ozaenae, K. rinoscleromatislar kiradi. 210 Morfologiyasi. Klebsiyellalar mayda, yogon tayoqlardir. 0,66,0x0,31,5 mkm kattalikda, uchlari yumaloq, harakatsizdir. Kapsula hosil qiladi. Surtma preparatda alohida, juft va qisqa zanjirsimon bolib joylashadi. Kultural xossasi. Klebsiyellalar fakultativ anaerob. Oddiy oziqa muhitida 3537°C da yaxshi osadi. Zich oziqa muhitida yumaloq, bortib chiqqan, shilliq koloniya hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida bir tekis loyqalanish hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Saxarolitik xossasiga kora, laktoza, glukoza va mannitni kislota va gazgacha parchalaydi.Proteolitik xossasiga kora, mochevinani parchalaydi, indol va vodorod sulfit hosil qiladi. Toksigenligi. Endotoksid ajratadi. Ularning virulentligi kapsulasiga bogliq bolib, kapsulasiz shakldagilarning virulentligi pastdir. Antigenlik xossasi. Klebsiyellalar kapsula K antigenini va yuzaki Oantigenini saqlaydi. Hozirgi vaqtda Kantigenini 80 ta, Oanti- genining 11 ta seroguruhlari aniqlangan. Chidamliligi. Klebsiyellalarning kapsulasi bolganligi sababli, ular tashqi muhitga chidamli va tuproqda, suvda, buyumlarda uzoq vaqt saqlanadi. 65°C tasirida bir soatdan song nobud boladi. Dezinfek- siyalovchi moddalarga (xloramin, fenol va b.) sezgir. Antibiotiklarga chidamliligi yuqori. Patogenligi. Tabiiy sharoitlarda turli xil hayvonlardasigir, chochqa, otlarda kasallik (sepsis, zotiljam, septitsemiya) keltirib chiqaradi. Infeksiya manbai. Ekzogen infeksiyaning manbai kasal odam va soglom bakteriya tashuvchilar hisoblanadi. Tarqalish yoli. Maishiy muloqot (iflos qol, buyumlar), bolalar muassasasi va kasalxonalarda oyinchoq, choyshab, sochiq, tibbiy asboblar orqali tarqaladi. Patogenezi. Klebsiyellalar organizmning qarshilik kuchi susayganda chaqaloqlarda ikkilamchi infeksiyani keltirib chiqaradi. Bakteriyalar yuqori nafas yoli va ichak orqali turli xil azolarga va qonga otib, yiringli- yalliglanish jarayoni, sepsis, meningit kasalligini keltirib chiqaradi. Immuniteti. Kasallikdan song kuchsiz, faqat kasallik keltirib chiqargan qozgatuvchiga qarshi (serovar) immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Tuguruqxonalar, davolash va bolalar muassasalarida sanitariya-gigiyena qoidalariga rioya qilish. Sterilizatsiya ishlarini toliq olib borish. Aseptika va antiseptika qoidalariga rioya qilish. Maxsus profilaktikasi yoq. Davosi. Davosi juda qiyin, chunki klebsiyellalar antibiotiklarga juda chidamlidir. Gentamitsin, kanamitsin, ayrim hollarda ampitsillin bilan davolash yaxshi natijalar beradi. 211 MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Balgam. 2. Quloqdan yiring, yara ajratmasi, halqumdan shilliq. 3. Najas. 4. Buyumlardan yuvindi. Tekshirish materialini toplash Balgam och qoringa, ogiz boshligini chayib tishlar tozalan- gandan song olinadi. Balgam ogzi keng, qopqoqli bankalarga olib tekshirishga yuboriladi. Quloqdan yiring, yara ajratmasi va halqum shilligi materiali sifatida steril paxta tampon yordamida olinadi va steril probirkaga solinadi. Steril paxta tampon fiziologik eritmada namlanib, turli xil buyum- lardan yuvindi olinadi, probirkaga solinib, laboratoriyaga jonatiladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikrobiologik. 2. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Najasdan tekshirish materiali sinamasi olingan tampon Petri kosachasidagi GPA, Endo va Ploskiryov muhiti glukozali shorvaga ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qol- diriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar kozdan kechiriladi. Shubhali koloniyadan surtma preparat tayyorlanadi. Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Grammanfiy bolgan tayoq- chasimon bakteriyalar korinsa (45), shilliq koloniyalardan olib sof kulturani ajratish uchun VorfelFergyuson va Rassel muhitiga ekiladi. Probirkaning qopqogiga indol va vodorod sulfit hosil bolganini aniqlash uchun indikator shimdirilgan filtr qogoz ornatiladi. Glu- kozali shorvadan (kerak bolsa) zich oziqa muhitiga olib ekiladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Agar mikroblar harakatsiz, laktoza, glukoza, mochevinani kislota va gazgacha parchalab, indol va vodorod sulfit hosil qilsa, surtma preparat tayyorlab, ularning kapsulasi borligi organiladi va sitratli, malanitli muhitga ekiladi. Agar kapsula borligi aniqlansa, Kantigen saqlovchi zardobi bilan buyum oynachasida taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Reaksiya musbat bolsa «Klebsiyella aniqlandi», deb taxminiy javob berish mumkin. Ekilgan muhitni termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 212 Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Sitratli va malonatli muhitda koloniyalar osib, Rassel muhitida uglevodlarni ular par- chalagan bolsa, kasallikka toliq tashxis qoyiladi. Serologik diagnostika Kasallikning 78-kunlari unga shubha qilinganda, bemor qon zardobi 1:1001:1600 nisbatda suyultirilib, olik skleroma klebsiyellalari bilan komplementni boglash reaksiyasi qoyiladi. Kasallik rivojlanishi bilan antitelolar titrining ortishi unga toliq tashxis qoyishga imkon beradi. 1. Shartli patogen bakteriyalarning asosiy belgilari qanday? 2. Klebsiyellalar boshqa enterobakteriyalardan nimasi bilan farqlanadi? 22-bob. VULGAR PROTEYLAR Proteus Vulgaris avlodi enterobakteriyalar oilasiga kiradi va unga bir necha turlar mansubdir. Ular qator muhitlardagi moddalarni fermentlash xosasiga ega. Morfologiyasi. Bu bakteriyalar mayda polimorf, Grammanfiy tayoqchalar bolib, 0,40,6x1,03,0 mkm kattalikda boladi. Hara- katchan, xivchinlari peritrix joylashgan. Spora va kapsula hosil qilmaydi. O shaklga aylanadi (harakatsiz). Kultural xossasi. Protey fakultativ anaerob bolib, oziqa muhitini tanlamaydi, 2530°C da yaxshi osadi. Yangi tayyorlangan agar yuzida ormalab osuvchi «gujgon oynayotgan» och, kok-gungurt karash hosil qilishi unga juda xos. Mikrobning harakatsiz shakllari yakka, yumaloq pigmentsiz koloniyalar hosil qiladi. Suyuq oziqa muhitida bir tekis loyqalanish hosil qiladi. Fermentativ xossasi. Vulgar proteyning proteolitik xossalari roy- rost korinadi. Jelatinani, ivitilgan zardobni suyultiradi. Vodorod sulfit, ammiak, indol hosil qiladi. Shular va boshqa gazsimon moddalar hosil bolganidan protey kulturalaridan qolansa chirindi hidi keladi. Protey bir qancha uglevodlarni parchalab kislota va gaz hosil qiladi. Protey kuchli proteolitik xossalari borligi uchun chirish jarayonlarida qatnashadi. Toksigenligi. Endotoksin saqlaydi. Antigenlik xossasi. Vulgar proteylar somatik Oantigeni va xivchinli Hantigenini ozida saqlaydi. Hozirgi vaqtda Oantigenining 150 ta, H antigenining 80 ta serovarlari mavjud. O va Hantigen- ? Nazorat uchun savollar 213 larining birlashishi kasallikda qozgatuvchining u yoki bu seroguruh va serovarlarining ustunligini belgilaydi. Chidamliligi. Tashqi muhitga ancha chidamli, 60°C harorat tasirida 1 soatgacha, dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida bir necha daqiqagacha saqlanadi. Kopgina antibiotiklarga ancha chidamli. Patogenligi. Proteylar hayvonlarda kasallik keltirib chiqarmaydi. Infeksiya manbai. Proteylar odam chiqindisi bilan tashqi muhitga chiqariladi. Demak, infeksiya manbai bemor hisoblanadi. Tarqalish yoli. Alimentar, maishiy muloqot (iflos qol, choyshab, sochiq, buyumlar, xirurgik asboblar) yollari orqali tarqaladi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib, shilliq qavatlar va jarohat- langan teri hisoblanadi. Malum sharoitda proteyning patogen shtatlari odamda jarohatlarni, orta quloqni yiringlata oladi, qovoq, buyrak jomini yalliglantiradi, endometrit va enterokolit (ayniqsa, bolalarda), ovqatdan zaharlanish va hatto sepsizga sabab bola oladi. II Jahon urushi davrida jangchilarning jarohatlarida streptokkokdan keyin vul- gar protey juda kop uchragan. Kopgina oziq-ovqatlarni tayyorlash va saqlashda sanitariya qoidalariga rioya qilmaslik sababli, protey ovqatdan zaharlanishga sabab boladi. Ovqatdan yuz beradigan boshqa toksikoinfeksiyalar qanday otsa, protey tushgan ovqatdan zaharla- nish ham asosan, shunday otadi. Profilaktikasi. Kasalxona va bolalar muassasalarida, oziq-ovqat korxonalarida, oshxonalarda sanitariya-gigiyena qoidalariga rioya qilish. Sterilizatsiya ishlarini toliq olib borish. Maxsus profilaktikasi yoq. Davosi. Gentamitsin, karbensillin, kanamitsin va boshqa anti- biotiklardan bemorlarni davolashda foydalaniladi. Siydik yoli, buyrak yalliglanishida nitrofuranlar qatoriga kiruvchi furagin, 5-nok va boshqalar beriladi. Protey fagining qollanilishi yaxshi natija beradi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Najas. 2. Qusuq moddasi. 3. Siydik. 4. Halqumdan shilliq, quloqdan yiring, yaradan ajratma. 5. Murdalardan material. 6. Tashqi muhitdagi buyumlardan yuvinadi. Tekshirish materialini toplash Najas boshqa ichak infeksiyalardagi kabi olinadi. Qusuq moddasi ham toksikoinfeksiyada olinganidek olinadi. 214 Siydikning orta miqdori steril kateterda steril idishga olinadi. Yaradan ajratma, quloqdan yiring, halqum ajratmasi steril paxtali tampon yordamida olinadi. Murdalardan material steril asboblarda steril idishlarga olinadi. Tashqi buyumlardan yuvindi steril paxta tampon yordamida olinib, probirkadagi fiziologik eritmaga solinadi Asosiy tekshirish usullari 1. Mikrobiologik. 2. Serologik. Tekshirishning birinchi kuni. Tekshirish materiallari Endo va Ploskiryov muhitlariga ekiladi, termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar kozdan kechiriladi. Gujgon osgan yoki alohida koloniyadan Rassel yoki Olkeniskiy muhitlarning kondensatsion suyuqligi (Shukevich usuli) ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Muhitlar tekshiriladi. Rassel yoki Olkeniskiy muhitlarining yuzasida koloniyalar yoyilib osgan bolsa, ular glukozani gazgacha parchalab, laktozani parchalamasa, surtma preparati tayyorlanadi, Gram usulida boyalib mikroskop ostida tekshiriladi. Agar Grammanfiy mayda tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Suyuq kulturani organish uchun mannitga, GPSHga ekiladi (vodorod sulfit va indol hosil qilishini aniqlash uchun qopqogiga indikator shimdirilgtan filtr qogoz ornatiladi). Yarimsuyuq agarga, jelatinaga, fenilalaninli aminokislotali muhitga ekiladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Proteylarning kopgina shtammlari mannitni parchalamaydi, indol va vodorod sulfit hosil qiladi, yarimsuyuq agarda yoyilib osadi, harakatchan, jelatinani suyultiradi va fenilalanindezaminaza fermentini hosil qiladi, yani fenilalanin aminokislotali muhit rangini ozgartiradi. Shunday ozga- rishlar bolsa. Proteus avlodi bor, deb javob beriladi. Kasallikka toliq tashxis qoyish uchun buyum oynachasi ustida Proteus bakteriyalarini saqlovchi agglutinatsiyalovchi zardoblar bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Avval polivalent O zardoblari bilan shunday reaksiya qoyiladi. Reaksiya musbat bolsa polivalent zardob tarkibiga kiruvchi O turdagi zardoblar bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. O guruhi aniqlangandan song H zardobi bilan reaksiya qoyiladi va serovari aniqlanadi. 215 1. Proteylar qanday kasalliklarni keltirib chiqaradi? 2. Proteylar keltirib chiqaradigan kasalliklarning oldini olish uchun qanday ishlar olib boriladi? 23-bob. ENTEROKOLIT IYERSINIALAR Yersinialar enterobakteriya avlodiga mansub. Ularga bir qancha turlar kiradi: 1. Yersinia pestis toun (olat) qozgatuvchisi. 2. Yersinia pseudotuberculosis psevdotuberkulyoz qozga- tuvchisi. 3. Yersinia enterocolitica ichak infeksiyalarini keltirib chiqaradi va boshqalar. Yersenia enterocolitica tabiatda keng tarqalgan. Ular kemiruvchilar organizmida va uy hayvonlarida kop uchraydi. Morfologiyasi. Mayda, uchlari yumaloq, Grammanfiy tayoq- chasimon bakteriyalardir. 0,81,2x0,30,7 mkm kattalikda, eski kulturalarda uzun tayoqchasimon yoki iðsimon bolishi mumkin. Harakatchan. Spora hosil qilmaydi. Kultural xossasi. Fakultativ anaerob. Oddiy oziqa muhitlarida 2228°C da yaxshi osadi. GPAda mayda, yaltiroq, rangsiz, (2225°C) termostatda saqlash vaqti uzaytirilsa kattalashadigan koloniya hosil qilib osadi. 37°C haroratli termostatda koloniyalar xiraroq, markazi bortib chiqqan, chetlari gadir-budur boladi. Fermentativ xossasi. Glukozani kislotacha parchalaydi, saxarozani parchalamaydi. Vodorod sulfit hosil qilmaydi, ayrim hollarda indol hosil qiladi. Toksigenligi. Endotoksin ajratadi. Ayrim shtammlari ekzotoksin ham ajratadi. Antigenligi. Yersinia enterocolitica O, K va Hantigenlarini saqlaydi. Oantigeni yog, uglevod tabiatli. Odamda kasallik keltirib chiqa- ruvchilari 0 9 , 0 3 , 0 5 serovarlarga tegishli. Chidamliligi. Yuqori harorat tasiriga chidamsiz. 100°C harorat tasirida shu zahoti, 6080°C da 1520 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratda (1520°C) uzoq vaqt saqlanadi. 414°C da saqlanibgina qolmasdan, bolinib kopayadi. Tik quyosh nurlari tasirida 30 daqiqada, tarqoq nurlar tasirida 68 soatdan song nobud boladi. Quritishga chidamsiz. Oziq-ovqatlarda uzoq vaqt saqlanadi, hatto ularda bolinib kopayadi. ? Nazorat uchun savollar 216 Dezinfeksiyalovchi moddalar (sulema, xloramin, fenol) iyersi- nialarini bir necha daqiqadan song oldiradi. Patogenligi. Yersenia enterocoliticaga laboratoriya hayvonlari sezuvchan emas. Tabiiy sharoitda ular kemiruvchilar, chochqa, itlarni olimga olib keluvchi ogir kasalliklarni keltirib chiqaradi. Infeksiya manbai. Kopgina hollarda kasal hayvonlar, kam hollarda bemor odam infeksiya manbai bolib hisoblanadi. Tarqalish yoli. Oziq-ovqatlar orqali tarqaladi. Patogenezi. Iyersinialar ogiz shilliq qavati orqali tanaga kirib, oshqozon-ichak sistemasiga otadi va u yerda bolinib kopayadi. Ayrim hollarda ular ichak epiteliy hujayrasiga otadi va uning ichida bolinib kopayadi. Endotoksin va zaharli moddalari otkir gastroenterokolitni keltirib chiqaradi. Qozgatuvchi qonga otib, bakteriyemiya va tarqoq jarayonni keltirib chiqaradi. Bunda jigar, taloq va boshqa azolar ham jarohatlanadi. Profilaktikasi. Oziq-ovqat mahsulotlarini saqlash va qayta ishlashda sanitariya nazoratini kuchaytirish. Sanitariya-gigiyena va shaxsiy gigiyena qoidalariga rioya qilish lozim. Maxsus profilaktikasi yoq. Davosi. Kasallik belgilariga kora, tegishlicha davolanadi, anti- biotiklar beriladi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Najas. 2. Qusuq moddasi va oshqozon yuvindisi. 3. Qon. 4. Siydik. 5. Burun va halqumdan shilliq, yara ajratmasi. 6. Murdalardan material. Tekshirish materialini toplash Najas. Barcha ichak infeksiyasidagidek olinadi. Qusuq moddasi Toksikoinfeksiyadagi kabi olinadi. oshqozon yuvindisi. Qon. Tif va paratiflarnikiga oxshash olinadi. Siydik. Boshqa infeksiyadagi kabi olinadi. Burun-halqumdan Klebsiyella va protey kasalliklarida surtma. olinganidek olinadi. Murdalardan material. Boshqa infeksiyalardagidek olinadi. 217 Asosiy tekshirish usuli Mikrobiologik. Tekshirishning birinchi kuni. Barcha tekshirish materiallari Endo, EMC va boyituvchi muhitga ekiladi. 2028°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Endo va EMC muhitida osgan kultura kozdan kechiriladi. Mayda, yumaloq, yaltiroq koloniyalar tanlanadi. Rassel yoki Olkenitskiy muhitiga olib ekiladi. Kosachalarni yana 2028°C haroratda qoldiriladi. Agarda Endo va EMCda koloniyalar osmagan bolsa, boyituvchi muhitlardan olib qaytadan ekiladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Qaytadan kosachalar kozdan kechiriladi. Yirikroq (0,10,2 ml), chetlari tekis, yumaloq, yaltiroq pushti rang beruvchi koloniyalar tanlanadi. Ulardan olib Rassel va Olkenitskiy muhitiga ekiladi. Ekilgan Rassel va Olkenitskiy muhitlari kozdan kechiriladi, surtma preparat tayyorlanadi va Gram usulida boyaladi. Mayda (kam hollarda polimorf) Grammanfiy tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Laktozani parchalamasa, glukoza va moche- vinani parchalasa, vodorod sulfit hosil qilmagan bolsa, hara- katchanligini organish uchun yarimsuyuq agarga ekiladi (1820°C va 37°C). Saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga ekiladi. Proteolitik xossasini organish uchun jelatina va sitratli muhitlarga ekiladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Glukoza, mannit, saxarozani parchalasa, laktoza va ramnozani parchalamasa, vodorod sulfit hosil qilmasa, 22°C da qoldirilgan muhitda harakatchan bolib, 37°C li muhitda harakatsiz bolsa, Yersinia enterocolitica aniqlandi, deb javob beriladi. 1. Yersinia enterocoliticaning alohida belgilari qanday? 2. Yersinia enterocolitica qanday yollar bilan tarqaladi? 3. Kasalliklarning oldini olish uchun qanday profilaktik ishlar olib boriladi? 24-bob. KOK-YASHIL YIRING TAYOQCHASI Kok-yashil yiring tayoqchasi Pseudomonas aeruqinosa Pseudomonadoceae oilasiga, Pseudomonas avlodiga kiradi. Bu mikro- organizmlar shartli patogen mikroorganizmlardir. Ular tashqi muhitda keng tarqalgan, doimo odam va hayvon organizmida hayot kechiradi. ? Nazorat uchun savollar 218 Morfologiyasi. Mayda, Grammanfiy, 1,53,0x0,50,8 mkm kattalikdagi tayoqchasimon bakteriyalardir. Harakatchan, xivchinlari bir uchida (lofotrix) joylashgan. Spora hosil qilmaydi. Ayrim hollarda kapsulaga oxshash shilliq hosil qiladi. Kultural xossasi. Qatiy aerob. Oddiy oziqa muhitlarida yaxshi osadi. Ortacha osish harorati 37°C. GPAda 25 mm kattalikdagi, yumaloq yarimtiniq, kokimtir-kulrang yaltiroq koloniyalar, GPSHda esa bir tekis loyqalanish va parda hosil qilib osadi. Eng xarakterli belgilari shuki, bu mikrob pigment hosil qiladi va xushboy hid chiqaradi. Kok yashil yiring tayoqchasi suvda eriydigan kok-yashil piotsianin pigmentini hosil qiladi, oziqa muhiti sekin-asta yashil yoki kok tusga kiradi. U kopgina bakteriyalarga antagonistik tasir korsatadi, lekin zaharli bolganligi uchun davolash maqsadida qollab bolmaydi. Kok-yashil yiring tayoqchalarining kulturalaridan jasmin, karamel yoki iroqi sovun hidi keladi. Fermentativ xossasi. Faqat glukozani fermentlaydi. Proteolitik xossasi kuchli: jelatinani suyultiradi, sutni, zardobni ivitadi. Sitaxromli oksidaza reaksiyasi musbat boladi. Toksigenligi. Gemolitik va sitotoksik tasir korsatuvchi toksin va leykotsitlarni lizisga uchratuvchi leykotsidin toksinini ajratadi. Antigenligi. P. aeruqinosa O va H antigenini saqlaydi. O zardobi yordamida agglutinatsiya reaksiyasini qoyib, u qaysi O guruhiga tegishli ekanligini aniqlanadi. Chidamliligi. 60°C harorat tasirida 15 daqiqadan song nobud boladi. Ultrabinafsha nurlariga chidamli. 2 % li fenol eritmasi kok- yashil yiring tayoqchasini tez oldiradi. Kuygan tana qismlaridagi qotirlarda, xonadagi changda ikki haftagacha saqlanadi. Kopgina antibiotiklarga chidamli. Patogenligi. Quyonlar, oq sichqonlar va dengiz chochqachalari kok-yashil tayoqchalariga sezgirdir. Infeksiya manbai. Bemor odam va bakteriya tashuvchilar infeksiya manbai bolib hisoblanadi. Tarqalish yoli. Bilvosita kontakt, havo changi yoli orqali tarqaladi. Ular tabiatda tuproq, gong, iflos suv, odam najasi, hayvonlar tezagida keng tarqalgan bolib, chirish jarayonida qatnashadi. Patogenezi. Infeksiyaning kirish darvozasiga bogliq holda kok- yashil yiring tayoqchalari yiringli yalliglanish jarayonlarini keltirib chiqaradi. Organizmning infeksiyalarga chidamliligi kamayganda kok- yashil yiring tayoqchasi jarohatlar, qovuq, buyrak jomi, orta quloq, gaymor boshligining yiringli yalliglanishi, sepsis va boshqa kasal- liklarga sabab boladi. Immuniteti. Kuchsiz immunitet yuzaga keladi. Profilaktikasi. Sanitariya-gigiyena va shaxsiy gigiyena qoidalariga rioya qilish lozim. 219 Davosi. Antibiotiklar (karbenitsillin, polimiksin, gentamitsin va b.), P.aeruqinos bilan emlangan donor qoni plazmasini qoyish va bakteriofagning (piofag) qollanilishi yaxshi natija beradi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Burun, halqumdan shilliq, jarohat ajratmasi. 2. Qon. 3. Siydik. 4. Murdalardan material. 5. Qol va buyumlardan yuvindi. Tekshirish materialini toplash Burun, halqumdan surtma protey va klebsiyelladagi kabi olinadi. Qon. Salmonella infeksiyasida olinganidek olinadi. Siydik. Kateterda bankaga olinadi. Murdadan Steril asboblar yordamida steril idishga material. olinadi. Qol va buyumlardan yuvindi steril paxta tampon yordamida olinadi. Asosiy tekshirish usuli Mikrobiologik. Tekshirishning birinchi kuni. Tekshirish materiallari GPA, GPSH, shakarli shorvaga ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Kok- yashil rangli, jasmin hidi keladigan koloniyalar tanlab olinadi va taxminiy diagnoz qoyiladi. Shubhali koloniyalar probirkadagi laktozali qiyshiq agarga ekiladi, ustiga vazelin moyi qoyiladi. Agar kosachalarda osish bolmasa, ozgarish bolgan probirkadagi kulturadan olib qaytadan ekiladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Laktozani parchalamagan probirkalar tanlab olinadi. Surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyab mikroskop ostida tekshiriladi. Grammanfiy P.aeruqinosaga xos bakteriyalar korinsa, sitoxromoksidaza sinamasi qoyiladi. Sinama musbat bolishi kerak. Shunday ozgarishlar kuzatilsa, toliq tashxis qoyiladi. 1. Kok-yashil yiring tayoqchasining alohida belgilari qanday? 2. Kok-yashil yiring tayoqchlari qayerda uchraydi? 3. Kasallikning oldini olish uchun qanday ishlar olib borilishi lozim? ? Nazorat uchun savollar 220 Ota xavfli infeksiyalarni qozgatuvchilar Ota xavfli infeksiyalarga vabo, zoonoz infeksiyalardan toun (olat), tulyaremiya, brutselloz va kuydirgi (sibir yarasi) kiradi. Ota xavfli infeksiya ochoqlarida ishlaydigan tibbiyot xodimlari Sogliqni saqlash vazirligi tomonidan ishlab chiqilgan qoidalar bilan yaxshi tanishgan bolishlari lozim. Tekshirishlar maxsus laboratoriyalarda olib boriladi. Tibbiyot xodimlari infeksiya ochoqlari va laboratoriyalarda maxsus kiyimlarda ishlashlari lozim. Maxsus kiyim quyidagilardan iborat: kombinezon, xalat, rezina etik, kozoynak, rezina qolqop, dezinfek- siyalovchi moddalarga namlangan sochiq, romol, paxta dokali niqob (u burun, ogiz, iyakni yopishi lozim). Bu maxsus kiyim bosqichma-bosqich kiyiladi va yechiladi. Barcha yechilgan kiyimlar 5 % li lizol eritmasida, kozoynak 70° li etil spirtida zararsizlantiriladi, song avtoklavda sterilizatsiya qilinadi. Tekshirish materiali olinadigan idishlarning butun ekanligi tekshiriladi, qogoz yopishtirilib, bemor haqidagi barcha malumotlar (familiyasi, ismi, tugilgan yili, tekshirish materiali olingan vaqti va hamshira imzosi) yozib qoyilishi kerak. Tekshirish materiali solin- gandan song idishning qopqogi yopiladi. Sham (parafin) quyiladi. Surtma tayyorlanadigan buyum oynachaga oldindan yozib qoyiladi. Tekshirish materiali solingan idish dezinfeksiyalovchi moddaga (5 % li lizol eritmasi yoki karbol kislotasi) namlangan sochiqqa oraladi. Tekshirish materiali ekilgan probirka va Petri kosachalari metall byukslarga solinib, ustiga «ehtiyotlang», deb yozib qoyiladi. Tekshirish materiali maxsus transportda laboratoriyaga yetkaziladi. 25-bob. VABO QOZGATUVCHISI Vibrio cholerae turi Vibrionaceae oilasiga, Vibrio avlodiga kiradi. Vabo qozgatuvchisining ikkita biovari mavjud. Vibrio cholerae biovarini R. Kox (1883) va Vibrio eltor biovarini F. Gotshlixt (1906) aniqlagan. Uzoq vaqt davomida Eltor biovarini vabo qozgatuvchisi, deb hisoblamaganlar. 1962-yilda JSST qaroriga kora, u vabo vibrionining biovari, deb hisoblandi. Keyingi yillarda suvda va tashqi muhitda vaboning NAG vibrioni ham aniqlangan, lekin u toliq nomlanmagan. NAG biovarining otkir ichak kasalliklarini keltirib chiqarishi aniqlandi. Morfologik, kultural va fermentativ xossasiga kora, vabo vibrionlari bir-biridan farqlanmaydi. Ular umumiy H antigeniga ega. O antigeni ularda turlichadir. O antigeniga kora, NAG vibrionining 60 ta O guruhi bor. 221 Morfologiyasi. Vabo vibrioni katta bolmagan (13x0,20,4 mkm), biroz bukilgan, vergul shakliga oxshash, juda polimorf tayoqchadir. Suniy oziqa muhitlarida, ayniqsa, eski kulturalarda sharsimon, donga oxshash, iðsimon, spiralsimon shaklda korinadi. Vabo vibrioni juda harakatchan. Xivchini monotrix joylashgan va u bakteriya tanasiga qaraganda uzun. Spora va kapsula hosil qilmaydi. Gram- manfiy bolib boyaladi. Boyalgan preparatlarda baliq todasiga oxshab korinadi. Elektron mikroskop ostida qaralganda, hujayra devori va sitoplazmatik membrana orasida vakuolalar joylashganligi korinadi. Bu vakuolalarda ekzotoksin sintezlanadi. Kultural xossasi. Vabo vibrioni fakultativ anaerob. Oziqa muhitiga talabchan emas. Keskin ishqoriy reaksiyali muhitlarda ham osa oladi. 3739°C haroratda va pH 89 da yaxshi osadi. Elektiv muhiti 1 % li peptonli suv hisoblanadi. Bu muhitda 56 soatdan song ular nozik havorangli parda hosil qilib osadi. TBRS zich muhitida 1214 soatdan song (tiosulfat nitrat saxarozali ot suyuqligi qoshilgan muhit) sariq rangli koloniya hosil qilib osadi. Muhit havorang berib turadi. Vabo vibrioni S shakldan R shaklga aylanishi mumkin va bu jarayon antigenlik jarayonining ozgarishi bilan sodir boladi. Fermentativ xossasi. Vabo vibrioni biokimyoviy jihatdan faol. Saxarolitik xossasiga kora, glukoza, saxaroza, mannit, mannozani kislotagacha parchalaydi, arabinozani parchalamaydi. Bu kasallik diagnostikasida katta ahamiyatga ega. Proteolitik xossasiga kora, jelatinani voronkasimon holda suyultiradi, triðtofanni indolgacha parchalaydi, oksidaza fermentini ajratadi. Nitratni nitritga qaytaradi. Sutni ivitadi. Vodorod sulfiti hosil qilmaydi. Diagnostik xossasiga kora, kraxmalni parchalaydi va bu diagnostikada ahamiyatga ega. Vabo vibrioni fibrinolizin, plazmakoagulaza, gialuronidaza, letsitinaza, kollagenaza va boshqa patogen fermentlarni ajratadi. Toksigenligi. Vabo vibrioni uch turdagi toksinlarni ajratadi. Tok- sinning I turi endotoksin, mikrob hujayrasi parchalanganda hosil boladi. Yog, uglevod, oqsil tabiatli, yuqori haroratga chidamli. Bu toksin antibakterial immunitet hosil bolishida ishtirok etadi. Toksinning II turi ekzotoksin (xolerogen) bolib, termolabil, enterotoksik tasir korsatadi va vabo patogenezida katta rol oynaydi (ingichka ichak sekretor hujayralari faolligini oshiradi, bu esa organizmning suvsizlanishiga olib keladi). Toksinning III turi termostabil bolib, natriyning ichak epiteliysi orqali otishini tezlatadi. Antigenligi. Vabo vibrioni yuqori haroratga chidamli somatik O antigenini va yuqori haroratga chidamsiz Hantigenini saqlaydi. H antigeni barcha Vibro avlodi uchun umumiy hisoblanadi, spetsifik emas. Oantigeni esa turga xos bolib, 54 guruhga bolinadi. Vibrio cholerae va Vibrio eltor O 1 guruhga tegishlidir. O 1 guruh 3 ta 222 komponentdan iborat A, B, C. Ular birlashganda 3 ta serovar yuzaga keladi. ABserovar Ogava, AC serovar Inaba, ABC serovari Gikokshimalardir. Chidamliligi. 60°C harorat tasirida 5 daqiqa qaynatilganda shu zahoti nobud boladi. Past haroratga chidamli. Muzda bir necha oygacha, dengiz va ariq suvlarida bir necha hafta, pashsha ichagida 45 kungacha saqlanadi. Quritish va quyosh nuriga vabo vibrioni juda sezgir. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida tez nobud boladi. Vabo vibrioni kislotalarga (xlorid kislota va boshq.) juda sezgir. El-Tor biovari esa ancha chidamli. Patogenligi. Tabiiy sharoitda hayvonlar vabo bilan kasallanmaydi. Laboratoriya hayvonlaridan quyon, dengiz chochqachalari sezgirdir. Ularning qorin boshligiga vabo vibrioni yuborilganda toksikoz yuzaga kelib, ularning olimiga sabab boladi. Infeksiya manbai. Tarqalish yoli. Infeksiya manbai bolib bemor odam va soglom bakteriya tashuvchilar hisoblanadi. El-Tor vibrioni keltirib chiqargan vaboda tashuvchilik uzoq davom etadi. Qozgatuvchi oziq-ovqat (sabzavot va mevalar), asosan, suv orqali, maishiy kontakt yoli orqali yuqadi. Vabo qadimdan malum bolgan infeksiya hisoblanib, malum davrlarda epidemiyalar vujudga keltirib, millionlab odamlarni yostigini quritgan. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib ogiz shilliq qavati hisoblanadi. Oshqozonga tushgan vabo vibrioni kislotali sharoit tasirida qisman nobud boladi, kislotali sharoitni kechib otganlari ichakka tushadi, u yerda ishqoriy sharoit va oqsillar (asosan, pepton) kop bolganligi sababli ular bolinib kopayadi, endotoksin ishlab chiqaradi va shu sababli organizmda anatomik va funksional ozgarishlar roy beradi, yani suv-tuz almashinuvi buziladi, termoregulatsiya izdan chiqadi, ingichka ichak zararlanib epiteliysi kochib tushadi. Yurak-qon tomiri sistemasining faoliyati keskin buziladi va boshqa holatlar kuzatiladi. Kasallik tez-tez va mol ich ketishi bilan boshlanadi. Ich tez orada suvday suyuladi va unda ichak epiteliysining parchalari korinadi. Shu tariqa bemorning axlati iðir-iðir bolib qoladi. Songra ich ketishiga qusish ham qoshiladi. Natijada bemor organizmi suvsizlanadi, terining elastikligi yoqolib, burishib qoladi, qon aylanishi qiyinlashadi va badan kokaradi. Bunday holat vabo algidi deyiladi. Kasallikning shu ogir davrida bemorning harorati normadan ham pasayib 35°C gacha tushadi, talvasa tutadi. Bemorning siydigi kelmay qolishi (anuriya) mumkin. Vabodan koplab kishilar halok boladi. Vabodan olgan bemorlarning jasadi yorib qaralganda, ingichka ichak shilliq pardasining yalliglanishi, qið-qizarib bortganligi va kop joylari zararlanganligi aniqlanadi. Ichak suyuqligida, bazan ot 223 pufagining suyuqligida ham juda kop vabo vibrionlari topiladi. Bemor tuzalib ketgan taqdirda, odatda, birinchi haftada, vabo vibrionidan xalos boladi. Vabo kasalligida surunkali bakteriya tashuvchilik bir- muncha kam uchraydi. Vaboning yuqorida tasvir etilgan tiðik shaklidan tashqari, yashindek tez otadigan shakli ham malum. Vaboning bu shakli bilan ogrigan bemor, hatto ichi ketmasdan turib, kasallikning dastlabki soatlaridayoq olib qoladi («quruq» vabo cholera sicca). Klinik belgilarning ogir otishi va yuqori harorat bilan tariflanadigan vabo tifoidi ham kuzatiladi. Bunda kasallikning 13-haftasida aksariyat bemorlar nobud boladi. Vaboning bu shakli ichakdagi shartli-patogen mikroblarning zaharli mahsulotlari qonga sorilishidan kelib chiqadi. Immuniteti. Odam vaboga birmuncha moyildir. Bu kasallik bilan hamma ham kasallanavermaydi. Vabo bilan yengil-yelpi ogruvchilar ham kop uchraydi. Bu epidemiologik jihatdan katta ahamiyatga ega. Vabo bilan kasallanib olgan organizmda antimikrob va antitoksik barqaror immunitet yuzaga keladi; bu agglutinin, vibriolizin, antitoksin va boshqa antitelolarning hosil bolishi bilan tavsiflanadi. Profilaktikasi. Bemorni vaqtida aniqlash, ajratib qoyish va kasalxonalarga tezda joylash, dezinfeksiya ishlarini olib borish lozim. Suv havzalarini, oziq-ovqat mahsulotlarini, chetdan infeksiya kirishini nazorat qilib turish muhim ahamiyatga egadir. Maxsus profilaktikasi. Olik vabo vaksinasi (xolerogen-anatoksin va Oantigeni bilan birgalikda) qollaniladi. Davosi. Tetratsiklin qatoriga tegishli antibiotiklar, shuningdek, kop miqdorda suyuqlik va eritrotsitlar (kaliy va natriy tuzlarini) saqlovchi preparatlar beriladi. 1.Vabo vibrionining biovarlarini bilasizmi? 2. Vabo vibrionining morfologik va kultural, fermentativ xossasi qanday? 3. Vabo vibrionining infeksiya manbai, tarqalish yoli qanday? 4. Vabo kasalligining oldini olish chora-tadbirlari qanday? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Najas. 2. Qusuq moddasi. 3. Murdalardan material. 4. Albatta, suv havzalaridan suv, oziq-ovqat mahsulotlari, tashqi muhitdagi buyumlardan yuvindi olinadi. ? Nazorat uchun savollar 224 Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Bakteriologik. 3. Serologik. Tekshirish materialini toplash Najas. 1. Metall yoki yogoch qoshiqcha yordamida 1020 ml olib, steril idishga solinadi, qopqogi mahkam yopilib, pergament qogozga oraladi. 2. Kateterning bir uchi ichakka kiritiladi, ikkinchi uchi steril bankaga solinadi. Qorin boshligi birozgina bosilganda, suyuq najas idishga tushadi. 3. Yogonligi 23 mm, uzunligi 4550 sm alumin sim ikkiga buklanadi, izotonik eritmada namlanib, togri ichakka kiritib olinadi. Bunda qovuzloqni qaynatib zararsizlantiriladi. Qusuq moddasi: 1015 g steril metall qoshiqcha yordamida olinib, ogzi keng idishga solinadi. Murdadan material ichakning yuqori, orta va pastki qism- laridan bolakcha olinadi. Ichak ichidagi mahsulot steril idishga solinadi. Aholining kopchilik qismida bakteriya tashuvchilikka aniqlaganda, 45 nafar tekshirilayotganlardan olingan materiallarni bitta kolbadagi 1 % li peptonli muhitga ekish mumkin. Agar natija musbat bolsa, undan yana olib alohida-alohida ekish mumkin. Olingan tekshirish materiallari metall byukslarga solinib, yollanma xati bilan jonatiladi. Yollanma xatida bemorning familiyasi, ismi, olingan material, taxminiy tashxisi, qayerda olinganligi, kim olganligi yoritilishi lozim. Tekshirish materiali olinadigan idishda dezinfeksiyalovchi moddalar bolmasligi lozim, chunki vibrionlar dezinfeksiyalovchi moddalarga juda sezgir. Tekshirish malum bosqichlarda olib boriladi. Bosqichlar orasi- dagi davr ancha qisqa bolishi lozim. Suyuq oziqa muhitidan 68 soat- dan song, zich oziqa muhitidan 1218 soatdan song material olib ekiladi. Tekshirishning birinchi bosqichi. Tekshirish materialining 0,51 ml.ni 50100 ml 1 % li peptonli suvga ekiladi. Ishqoriy agarga ular bak- teriologik qovuzloq yordamida ekiladi. Agar vabo vibrionining osishiga vabo fagi tosqinlik qilishi mumkin degan shubhaga kelinsa, u antifag qoshilgan zardobli muhitga ekiladi, termostatda 37°C da qoldiriladi. 225 Parallel holda tekshirish materialidan surtma preparatlar tayyor- lanadi, Nikiforov eritmasida 1520 daqiqaga fiksatsiya qilinadi, karbol fuksini va Gram usulida boyalib organiladi. Agar vabo vibrioniga xos bakteriyalar korinsa, materialdan yoki osilgan tomchi preparatlar tayyorlanib, vibrionlar harakatchanligi organiladi. Tekshirishning ikkinchi bosqichi. 68 soatdan song 1 % li peptonli suv termostatdan olib kozdan kechiriladi. Oziqa muhit yuzasida hosil bolgan pardadan olinib, surtma preparat tayyorlanadi va u fiksatsiya qilinadi. Karbol fuksin Gram usulida boyalib mikroskop ostida organiladi. Mikroskop ostida vabo vibrioniga xos bakteriyalar korinsa, qaytadan 1 % li peptonli suvga ekiladi va O zardobi bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Buning uchun yogsizlantirilgan buyum oynachasi ustiga 100 marta suyultirilgan O zardobi, yoniga 1 tomchi fiziologik eritma tomiziladi. Ikkala tomchi ustiga 1 % li peptonli suvdagi pardadan olib solinadi va yaxshilab aralashtiriladi. Agar tomchida agglutinatsiya sodir bolsa, peptonli suvdan olib ishqoriy agarga ekiladi va termostatda 37°C da qoldiriladi. Tekshirishning uchinchi bosqichi. 1214 soatdan song ekilgan oziqa muhiti kozdan kechiriladi. Shubhali koloniya organiladi. 1:100 nisbatda suyultirilgan O zardobi bilan agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agar agglutinatsiya bergan bolsa, Ogava va Inaba turidagi zardoblar bilan (1:50 suyultirilgan) agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Reaksiya musbat bolsa, taxminiy tashxis qoyiladi. Agglutinatsiya bergan koloniyadan olib, sof kulturani ajratib olish uchun uch xil uglevod saqlovchi muhitga ekiladi, termostatda 37°C da qoldiriladi. Tekshirishning tortinchi bosqichi. 1214 soatdan song ekilgan muhit termostatdan olib kozdan kechiriladi. Qiyshiq agarning qiyshiq qismi rangi ozgarmasdan, tik qismi rangi ozgargan bolsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Kulturalarni farqlash 1. Harakatchanligini ezilgan va osilgan tomchi preparati yordamida organiladi. 2. Kultural xossasi organiladi (oziqa muhitdagi). 3. Agglutinatsiya reaksiyasi yordamida antigenlik xossasi organiladi. (O zardobi va Ogava hamda Inaba turidagi zardoblar bilan). 4. Saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga ekiladi. 5. Proteolitik xossasini organish uchun jelatinga ekiladi. 6. Gemolitik xossasini organish uchun 1 ml shorvaga 1 ml 1 % li qoy eritrotsiti qoshiladi (nazorat) va 24 soatli osgan 1 ml 226 kulturaga 1 ml 1 % li qoy eritrotsiti qoshiladi. Ikkala probirkani 2 soat davomida 37°C termostatda qoldiriladi. Vaqt otgach, sovuqqa olinadi. Natija 16 soatdan song oqiladi. Ureaza faolligi organiladi. Buning uchun material mochevinali muhitga ekiladi. Diastatik xossasi organiladi. Buning uchun kraxmal saqlovchi Koda muhitiga ekiladi. Indikator sifatida Lyugol eritmasi olinadi. Oksidaza sinamasi qoyiladi. 18 soatli agardagi kulturaga 1 tomchi 1 % li paraaminodimetilanilinning suvli eritmasi tomiziladi va unga 1 % li α-naftol spirtli eritma qoshiladi. 23 daqiqadan song kultura kok rangga boyalsa, reaksiya musbatligidan dalolat beradi. Fagga sezuvchanligini aniqlash. Sof kultura ishqoriy agarga ekiladi va Mukerdji IV bakteriofagi, C va Eltor bakteriofagi tomiziladi. Polimiksinga sezuvchanligini aniqlash. Eritilgan va 45°C gacha sovitilgan agarga polimiksin (50 tasir birligini 1 ml muhitga) qoshiladi, songra Petri kosachalariga qoyiladi. Agar qotgandan song sof kulturadan olib bakteriologik qovuzloqda ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 810 soatga qoldiriladi. Tekshirishning beshinchi bosqichi. Natija oqiladi. Vabo vibrioni Giss qatorini kislotagacha parchalaydi, arabinozani parchalamaydi. Proteolitik xossasiga kora jelatinani voronkasimon holda suyultiradi. Gemolitik xossasi 16 soatdan keyin organiladi. V. eltor eritrotsitlarni gemolizlaydi, nazorat probirkasida eritrotsitlar osilmasi ozgarmaydi. V. cholerae eritrotsitlarni gemolizlamaydi. Ureaza fermentini ajratadi, shu sababli muhit sariq rangdan qizil rangga kiradi. Diastatik xossasiga kora muhit ustiga Lyugol eritmasi tomiziladi. Vabo vibrioni kraxmalni parchalashi sababli Lyugol eritmasi tomizil- ganda muhitning rangi ozgarmaydi. Oksidaza sinamasida koloniyaning rangi kok rangga kiradi. Fagga sezuvchanligini aniqlashda S. Mukerdji IV fagi tasirida V. cholerae lizisga uchraydi, V. eltor uchramaydi. Eltor fagi tasirida esa V. cholerae lizisga uchramaydi, V. eltor lizisga uchraydi. Polimiksin muhitda natija 810 soatdan keyin oqiladi. V. cholerae bu muhitda osmaydi. V.eltor osadi. Shunday ozgarishlar bolsa, vabo qozgatuvchisi bor, deb javob beriladi. Tezlashtirilgan usul Immobilizatsiya reaksiyasi. Yogsizlantirilgan buyum oynachasi ustiga 2 tomchi najas yoki peptonli suv yuzasidan olib tomiziladi. 1-tomchiga 1 tomchi O zardobi (1:100), 2-tomchiga fiziologik eritma tomiziladi. Har bir tomchi piðetka yoki qovuzloq yordamida aralash- 227 tiriladi, yopqich oynacha yopiladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Reaksiya musbat bolsa, birinchi tomchida vibrionlarning harakatlanishi toxtaydi, ikkinchi tomchida esa vibrionlarning harakatlanayotganini korish mumkin. Tezlashtirilgan Yermoleva usuli 1 % li peptonli suv solingan 3 ta probirka olinadi. Birinchisiga mikrob kulturasi solinadi, ikkinchisiga tekshirish materiali va O zardobi, uchinchi probirkaga tekshirish materiali va kraxmal solinadi. Barcha probirkalarni termostatda 37°C haroratda 34 soat qoldiriladi. Vaqt otgach ular olib qaraladi. Birinchi probirkada havorang parda hosil boladi. Undan surtma preparat tayyorlab, boyab organiladi. Ikkinchi probirkada O zardobi tarkibidagi antitelolar tasirida antigenlar chokmaga tushadi. Uchinchi probirkaga Lyugol eritmasi tomiziladi. Kraxmalning vabo vibrioni parchalaganligini korishimiz mumkin. 1. Tekshirishga qanday materiallar olinadi? 2. V.cholerae va V.eltor qanday xossalariga kora farqlanadi? 3. Kasallikka tashxis qoyishda qanday tezlashtirilgan usullar qollaniladi? Oziqa muhitlari 1 % li peptonli suv. 1 litr distillangan suvga 10 g pepton, 5 g NaCl, 0,1 g kaliy nitrati va natriy karbonati qoshib qaynatiladi, pH 9,0 ga teng bolguncha togrilanadi. Hosil bolgan muhitni probirka va kolbaga solib, avtoklavda 120°C haroratda 20 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Ishqoriy agar. 1 litr GPA ga 30 ml 10 % natriy karbonati solinib, 45 daqiqa qaynatiladi. pH 8,09,0 gacha togrilanadi. Muhitni probirka va idishlarga solib, avtoklavda 120°C haroratda 20 daqiqa sterilizatsiya qilinadi. 26-bob . TOUN (OLAT) QOZGATUVCHISI Toun bakteriyasini 1894-yilda Iyersen Gonkongda aniqlagan va bakteriyalarning bu avlodi uning nomi bilan ataladi. D. K. Zabolotniy, N. K. Klodnitskiy, I. A. Lebedinskiy, N. F. Gamaleya va hind olimlari toun qozgatuvchisini atroflicha organdilar va bu kasallikni davolashda streptomitsinni qollashni tavsiya etdilar. ? Nazorat uchun savollar 228 Yersiniae avlodiga uch turdagi bakteriyalar kiradi: 1. Yersiniae pestistoun qozgatuvchisi. 2. Yersiniae pseudotuberculosispsevdotuberkulyoz qozgatuvchisi. 3. Yersiniae enterocoliticaichak infeksiyalarini keltirib chiqaradi. Bu avlodga kiruvchi barcha qozgatuvchilar Grammanfiy tayoq- chalar bolib, kopincha tuxumsimon shaklda, 0,40,7x12 mkm kattalikda va spora hosil qilmaydi. Psevdotuberkulyoz va enterokolitik iyerseniylari harakatchandir. Ularning barchasi oziqa muhitiga talabchan emas, fermentativ jihatdan faol bolib, qator uglevodlarni kislotagacha parchalaydi. Morfologiyasi. Ovalsimon tayoqchalar. 0,30,6x12 mkm kattalikda bolib, polimorfdir. Zich oziqa muhitidan tayyorlangan surtma preparatda ular uzunchoq, iðsimon shakllarda korinadi. Spora hosil qilmaydi, harakatsiz, xivchinlari yoq, nozik kapsula hosil qiladi. Grammanfiy bolib boyaladi. Sitoplazmasi bir xilda joylashmaganligi sababli, tayoqchaning ikki cheti toq boyaladi. Metilen koki bilan boyalganda, bunday biðolyarlik (bir qutblilik) yaxshi korinadi. Kultural xossasi. Toun qozgatuvchisi fakultativ anaerob. Oziqa muhitlarga talabchan emas. 2830°C da pH 7,07,2 da 1214 soatdan song osadi. Uning osishini tezlashtirish uchun muhitga ayrim bakteriyalarning ekstraktlari, sarsin, gemolizlangan qon, natriy sulfati va boshqalar qoshiladi. Toun qozgatuvchisining elektiv muhiti bolib, kazeinli muhit va ivigan qon gidrolizati hisoblanadi. Zich oziqa muhitida 1824 soatdan keyin chetlari tekis, mayin koloniya hosil qiladi, 48 soatdan keyin koloniyalarning cheti toqilgan romolchaga oxshab qoladi. Suyuq oziqa muhitida chokma korinishidagi zanjircha holida osadi. Probirka tubida qavatli chokma va parda yuzasida esa osilib turadigan iðchalar«stalaktik osishlar»ni korish mumkin. R shaklda osgan kulturalari virulent hisoblanadi, lekin turli xil omillar tasirida ular S avirulent shaklga aylanadi. Fermentativ xossasi. Saxarolitik xossasi kuchli namoyon boladi. Ular saxaroza, maltoza, arabinoza, glukozani (doimo emas) va mannitni kislotagacha parchalaydi. Toun bakteriyasining ikki varianti tafovut etiladi glitserinni parchalovchilar va parchalamaydiganlar. Proteolitik xossasi kam namoyon boladi: ular jelatinni suyultirmaydi, sutni ivitmaydi, vodorod sulfidini hosil qiladi. Toun bakteriyasi fibrinolizin, gemolizin, gialuronidaza, koagulaza fermentlarini ishlab chiqaradi. Toksigenligi. Toun qozgatuvchisi oqsil tabiatli, bir-biriga bogliq ekzo- va endotoksinlarni ajratadi. U ikki xil fraksiyadan iborat (A va B). Ular aminokislotalarning tarkibiga va antigenlik xossasiga kora farqlanadi. Odam uchun u juda patogendir. Toun toksinini «sichqon zahari» deb ham ataladi, chunki sichqonlar uning tasiriga juda sezgir. 229 Antigenligi. Toun qozgatuvchisining antigenlik xossasi juda murakkab. Ular ottizga yaqin antigenlarni saqlaydi (F, V, W va b.). F fraksiyasi kapsula bilan boglangan va asosiy komponent hisoblanadi. V va W komponentlari hujayrani fagotsitozdan saqlaydi. Toun qozgatuvchisi psevdotuberkulyoz, esherixiya, shigella va odam eritrotsitlari bilan umumiy bolgan O antigenini saqlaydi. Chidamliligi. 100°C tasirida shu zahoti 80°C da 5 daqiqadan song oladi. Past haroratga chidamli, 0°C da 6 oygacha, muzlatilgan murdada bir yilgacha va undan ham kop saqlanadi. Tik quyosh nurlari tasirida 23 soatdan song oladi. Quritishga ular juda sezgir. Oziq- ovqat mahsulotlarida 26 oygacha, burgalarda bir yilgacha, kanalarda 1,5 yilgacha saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida 510 daqiqadan song oladi, sulema va karbol kislotasiga juda sezgir. Patogenligi. Infeksiya manbai bolib, asosan, kemiruvchilar: yumronqoziq, qora va kulrang kalamushlar, sichqonlar, shuningdek, tuyalar, tulkilar hisoblanadi. Laboratoriya hayvonlaridan sichqonlar, kalamushlar, dengiz chochqachalari va boshqalar ularga sezgirdir. Infeksiya manbai. Kasal hayvonlar, asosan, kemiruvchilar infeksiya manbai hisoblanadi. Odamlar ortasida epidemiya kelib chiqishida kemiruvchilardagi epizootik hollar sababchi boladi. Tarqalish yoli va tashuvchisi 1. Transmissiv yol orqali tashuvchisi burgalar hisoblanadi (kemiruvchilar → burga → odam). 2. Havo-tomchi yoli (opka touni odamdan odamga yuqadi). 3. Alimentar yol orqali kasal hayvon goshtini yaxshi pishirmasdan istemol qilganda (kam hollarda). Patogenezi va kasallik shakllari Kirish darvozasi bolib teri va burun, ogiz shilliq pardalari hisoblanadi. Kirish darvozasiga qarab toun kasalligining bir necha shakli tafovut etiladi: 1) bubon, 2) opka, 3) septik, 4) teri, 5) ichak shakllari. Qozgatuvchi tushgan yerda quyidagi ketma-ketlikda: dog→papula → vezikula → pustula → karbunkul → yara hosil boladi. Bemor sogayganda esa yara ornida chandiq qoladi. Kasallikning bu shakli juda kam uchraydi. Asosan, ular teri-bubonli toun shaklida otadi. Bubon shaklida infeksiya kirish joylarida izlar bolmaydi, chunki qozgatuvchi limfa tomirlar orqali uning tarmoqlariga tarqaladi. Bu joylarda otkir yalliglanish jarayoni rivojlanib, birlamchi bubon hosil boladi. Limfa tarmoqlari ozaro qoshilib ketadi. Lekin bubonlar ustidagi teri ozgarmaydi. Mikrofaglar mikroblarni orab olsa-da, 230 fagotsitoz tugallanmaydi. Chunki mikrob toksini tasirida fagotsitlar oladi. Keyinchalik kapillarlar nekrozga uchrab, mikroblar esa qonga otadi va bu birlamchi bakteriyemiya deyiladi. Ichki azolarda infeksiyaning koplab ochoqlari yuzaga chiqadi. Keyinchalik gema- togen yol bilan ikkilamchi bubonlar hosil boladi. Kasallik otkir rivojlanganda bakteriyemiya ikkilamchi ochoqlar (jigar, taloq va b.) hisobiga jadallashadi va septitsemiya shakliga aylanadi. Kasallikning teri shaklida qozgatuvchi tushgan joyda ogriqli papula hosil boladi va u keyinchalik qozgatuvchi saqlaydigan qonli-seroz suyuqlik pustulaga aylanadi. Agar kasallik davolanmasa, karbonkulalar olchami 13 sm va undan ham katta nekrozli yaraga aylanadi. Toun yarasi kam sonli bolib, chandiq hosil qiladi va sekin bitadi. Kasallikning bubonli shakli yuqori harorat, organizmning ogir intoksikatsiyasi, kopincha bakteriyemiyaning rivojlanishi va jarayon- ning yuksalishi bilan tavsiflanadi. Yashirin davri 23 kun, bazan 45 kun davom etadi. Kasallikni oziga xos belgilaridan biri zarar- langan joyda qattiq ogriq paydo boladi. Bubonlar tez rivojlanadi va tovuq tuxumi, olma va undan kattaroq hajmda boladi. Boyin, quloq atrofi, jag osti, kokrak osti, yelka, qoltiq osti, qov va qov orti bubonlari hosil boladi. Boyin va qoltiq osti bubonlari eng xavfli hisoblanadi, chunki ular ikkilamchi opka asoratlariga olib keladi. Kasallik birdaniga, bexosdan, qaltirashlarsiz, darmon qurimasdan, tana haroratining 3839°C gacha, hatto 40°C va undan ham yuqoriga kotarilishi bilan boshlanadi. Ertalab harorat biroz tushadi, kechqurun esa kotariladi. Yuz terisi qizaradi, kozlar yaltiraydi, nafas olish tezlashadi, nafas qisadi, bosh ogriydi, harakat koordinatsiyasi buziladi, nutq ozgaradi. Bazi bemorlarda alahsirash (gallutsina- tsiya), eyforiya kuzatiladi. Kasallik ogir kechganda ikkilamchi opka touni, sepsis, meningit kabi 46 kun ichida bemor nobud boladi. Birlamchi opka shaklining yashirin davri 23 kun. Qaltirash, haroratning 3940°C bolishi, yotal, qonli suyuqlik ajralishi bilan tavsiflanadi. Bemorlar alahsiraydi, tajovuzkor bolib qoladi va qo- chishga harakat qiladi. 23 kun ichida yurak faoliyatining susayishi va nafas olish markazi falajidan bemor nobud boladi. Septik shaklining yashirin davri bir necha soat davom etadi. Bemor- ning birdaniga kuchli qaltirashi, bosh ogrigi va umumiy holatining tezda yomonlashuvi bilan kasallik boshlanadi. Yurak-qon tomir yetishmovchiligi rivojlanib boradi. Nafas olishi toxtab qolishi ham mumkin. Yara bubonlar kozga korinmagan holda rivojlanib boradi. Ayrim bemorlarning olimi kasallik boshlanishidan bir necha soat otgach sodir boladi. Oz vaqtida davolanmasa, kasallik 100 % olim bilan tugaydi. 231 Ichak shakli ham yuqori harorat bilan juda ogir kechadi. Oshqozon, ichakda ogriqlar bolib, bemor qon bilan qayt qiladi. Najas qonli, suyuq bolib, unda qozgatuvchilar boladi. Kasallik 12 kun davom etib, 100 % olim bilan tugaydi. Immuniteti. Kasallikdan song barqaror va uzoq vaqtga choziluv- chi immunitet yuzaga keladi. Ogrib otganlarning qonida toun mikrobiga qarshi antitelolar paydo boladi. Profilaktikasi. Bemorlarni vaqtida aniqlash, tashxis qoyish, ajratib qoyish va kasalxonaga yotqizish, karantin tashkil qilish, kontaktda bolganlarni kuzatish, uyma-uy yurib bemorlarni, harorati bor odamlarni sorab chiqish, infeksiya ochogida dezinfeksiya ishlarini olib borishdir. Tibbiyot xodimlariga streptomitsin va tounga qarshi vaksina yuboriladi. Davlat chegarasi chetdan infeksiya kirishidan himoya qilinadi. Maxsus profilaktikasi. EVtirik vaksinasi qollanilmoqda. Bu vaksina 5 yil davomida qozgatuvchi oziqa muhitiga ketma-ket ekish orqali ajratib olinadi. Immunitet 1 yilgacha davom etadi. Davosi. Streptomitsin, tetratsiklin, maxsus fag va tounga qarshi immunoglobulin beriladi. 1. Toun qaysi guruh infeksiyasiga kiradi? 2. Toun qozgatuvchisining morfologik, kultural va fermentativ xossasi qanday? 3. Infeksiya manbaini bilasizmi? 4. Toun qaysi yol orqali tarqaladi? 5. Toun qanday shakllarda otadi? 6. Kasallikning oldini olish choralarini bayon eting. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Teri shaklidayaradan ajratma, karbunkuldan punktat. 2. Bubon shaklidabubondan punktat. 3. Opka shaklidabalgam. 4. Ichak shaklidanajas. 5. Barcha shaklidaqon. 6. Murdalardanqon, suyak komigi, azolardan bolakchalar. 7. Burgalarning ichak ajratmasi. 8. Olgan kalamush, sichqon va boshqa kemiruvchilar. ? Nazorat uchun savollar 232 Tekshirish materiallarini toplash Bubondan punktat olish uchun jarohatlangan joy va uning atrofidagi teri spirt bilan artiladi. Igna yaraning chetidan sekinlik bilan kiritilib, ortasidan material olinadi. Ogzi keng steril bankaga balgam yigiladi. Najas ham shunday olinadi. Qon 35 ml steril shprisda olinib, shu zahoti bemor oldida shorvaga va Petri kosachasidagi agarga ekiladi. Burganing ichagi ichidagi mahsuloti lupa yordamida organiladi. Kemiruvchilar kasallangandan song ularni yorib, ichki azolaridan surtma preparat tayyorlanadi va oziqa muhitlariga ekiladi. Asosiy tekshirish usuli 1. Mikroskopik. 2. Bakteriologik. 3. Biologik. 4. Lyuminessent-serologik usul. Tekshirishning birinchi kuni. Tekshirish materiallaridan surtma preparat tayyorlanadi. Xona haroratida quritiladi. Nikiforov aralash- masida 1520 daqiqa fiksatsiya qilinadi. Gram va metilen koki boyogida boyaladi. Surtmada Grammanfiy bolgan ovalsimon tayoqchalar, metilen koki bilan boyalganda ikki cheti toq boyalgan toun qozgatuvchilari korinsa, taxminiy tashxis qoyish mumkin. Tekshirish materiallari GPA va GPSH ga ekiladi. Qozgatuvchi- ning yaxshi osishi uchun unga qon, natriy sulfati va boshqalar qoshiladi. Qoshimcha mikroblarni saqlovchi tekshirish materiallarini Tumanskiy yoki Korobkova muhitlariga ekiladi. Bu muhitlar gensian binafshasini ozida saqlaydi. Muhitlar termostatda 28°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Biologik usul Qoshimcha mikroblarni saqlovchi tekshirish materiali, balgam, yiring hayvon terisi ustiga yuboriladi. Qon, bubon punktati qorin boshligiga, teri ostiga yuboriladi. Tekshirish materiallari yuborilgan joyga qarab hayvonlar 39-kunlarda oladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Suyuq oziq muhitida tounga xos bolgan osish bolsa, undan surtma preparat tayyorlanadi. Gram va metilen koki boyogida boyaladi. Mikroskop ostida organiladi. Zich oziqa muhitida tounga xos koloniyalar hosil bolsa, sof kulturalarni ajratib olish uchun undan qiyshiq agarga ekiladi. 23 ta shubhali koloniya ustiga toun bakteriofagi tomiziladi. 233 Termostatda qoldiriladi. 1012 soatdan keyin koloniyalarning lizisga uchrashi diagnostik ahamiyatga ega boladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Qiyshiq agarning yuzasida mikroblar oq kulrang qatlam hosil qilib osgan bolsa, undan surtma preparat tayyorlab, boyab mikroskop ostida organiladi. Agar faqat toun qozgatuvchilari korinsa, sof kultu- raligidan dalolat beradi. Saxarolitik xossasini organish uchun glukoza, maltoza, saxaroza, ramnoza, mannitga ekiladi. Bakteriofagga sezuvchanligi organiladi. Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Toun qozgatuvchisi mannit va maltozani kislotagacha parchalaydi. Saxaroza va ramnozani parchalamaydi. Arabinozani parchalaydi. Glukozani kislotagacha parchalaydi (lekin hamisha emas). Fag tomizilgan koloniya lizisga uchrasa, toun qozgatuvchisi bor, deb javob beriladi (28-jadval). 28-jadval Toun va psevdotuberkulyoz iyersiniyalarining farqi li s o h a n i v e h c o M . 5 i h s il i q + i h s it i v i i n t u S . 6 i d y a l r o q h s i z e T i n t u s il s u m k a L . 7 i d y a l r o q h s i n i k e S s a m e a g E k it il o n i r b i F . 8 a g e a g i s a s s o x - a q h c o h c z i g n e D i d a r i d l o i n i s a h c n u h c u n o v y a H . 9 i g il n e g o t a p i s a h c a q h c o h c z i g n e D i n r a l h s u m a l a k a v i d a r i d l o i n h s u m a l a K i d y a m r i d l o i r a li g l e B i h s i h c v u t a g z o q n u o T z o y l u k r e b u t o d v e s P i s i h c v u t a g z o q i g il n a h c t a k a r a H . 1 z i s t a k a r a H n a h c t a k a r a H a v o n o s s e B h c O . 2 a d it i h u m i d y a m s O i d a s O i g a f o i r e t k a b n u o T . 3 a d i r i s a t i d y a r h c u a g s i z i L i d y a m a r h c u a g s i z i L i n a z o n m a R . 4 i h s a l a h c r a p + 234 Bakteriofag bilan tezlashtirilgan usullar 3 ta Petri kosachasidagi Tumanskiy muhitiga tekshirish materiali ekiladi: 1. Kosachaga tekshirish materiali toun bakteriofagi bilan ekiladi. 2. Kosachaga tekshirish materiali shpatel yordamida ekiladi. Ortasidan ariqcha ochib, unga bakteriofag tomiziladi. 3. Kosachaga faqat tekshirish materiali ekiladi. Barcha ekilgan muhitlar termostatda 28°C haroratda 1214 soat qoldiriladi. Tekshirish materialida toun qozgatuvchisi bolsa, 1-kosachada barcha koloniyalar lizisga uchrashi sababli osish bolmaydi. 2-kosachada steril yolakcha hosil boladi. 3-kosachada toun bakteriyasiga xos osish boladi. Zararlangan hayvonlar kuzatiladi Olgan yoki kasallangan hayvonlar yorib organiladi. Azolardagi ozgarishlar kuzatiladi. Toundan olgan hayvonlarning jigar va talogi kattalashadi. Azolarda gemorragik va nekrotik qismlar aniqlanadi. Azolardan surtma preparat tayyorlanadi. Azolardan bolakchalar olib oziqa muhitiga ekiladi. Qolgan tekshirish ishlari yuqorida bayon etilganidek olib boriladi. 1. Toun kasalligining turli shakllaridan qanday tekshirish materiallari olinadi? 2. Qanday usullardan foydalaniladi? 3. Qanday hayvonlarda biologik sinama otkaziladi? 4. Toun va psevdotuberkulyoz iyerseniyalari qanday xossalariga kora farqlanadi? 27-bob. PSEVDOTUBERKULYOZ QOZGATUVCHISI Psevdotuberkulyoz qozgatuvchisi morfologik, kultural, fer- mentativ xossasiga kora toun qozgatuvchisiga oxshash bolsa-da, lekin ular orasida malum farq ham bor. Psevdotuberkulyoz bak- teriyalari harakatchan. Xivchinlari peretrix joylashgan, biokimyoviy jihatdan ular ancha faol. Antigenlik xossasi. Psevdotuberkulyoz bakteriyalari xivchinli H antigen va 2 ta somatik antigensilliq turdagi va gadir-budur guruhli antigenni saqlaydi. Bu toun qozgatuvchisining psevdotuberkulyoz bilan antigen umumiyligi hisoblanadi. ? Nazorat uchun savollar 235 Psevdotuberkulyoz qozgatuvchisiga hayvonlardan, asosan, kemiruvchilar, uy va yovvoyi hayvonlar sezuvchandir. Odam u bilan alimentar yol orqali kasallanadi. Patogenezi. Psevdotuberkulyoz qozgatuvchisi ogiz shilliq pardasi orqali organizmga tushadi. Oshqozon, ichak azolariga tushadi. Ichakning limfa tugunlariga otib, bolinib kopayadi va limfa yoli orqali qonga soriladi. Natijada, bakteriyemiya va toksikozni yuzaga keltiradi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH Bakterioskopik usultekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanadi. Boyab mikroskop ostida organiladi. Bakteriologik usul tekshirish materiali oziqa muhitlariga ekiladi. Kultural va biokimyoviy xossasi organiladi (eng ishonchli usul hisoblanadi). Serologik usul bevosita agglutinatsiya reaksiyasi qollaniladi. Allergik usul bilakning ichki tomoni terisi ostiga 0,1 ml aller- gen yuboriladi. 720-kunlari qizarish va shish hosil bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Biologik usul tekshirish materiali dengiz chochqachalari va kalamushlarning terisiga, teri ostiga, qorin boshligiga yuboriladi. Dengiz chochqachalari kasallanib, kalamushlar kasallanmasa, psevdotuberkulyoz bor, deb javob beriladi. 28-bob. TULYAREMIYA QOZGATUVCHISI Tulyaremiya qozgatuvchisi birinchi bolib 1911-yilda Kalifor- niyaning Tulyare hududida MakKoy va Chepin tomonidan aniqlangan. 1921-yilda esa amerikalik olim E. Frensis bu kasallikni odamlarga ham xos ekanligini aniqlab, uning tulyaremiya deb nomla- nishini taklif etdi. Shu sababli kasallik Franciella tularensis deyiladi. Kasallik qozgatuvchisi Brucellaceae oilasiga kiradi. Tulyaremiya qozgatuvchisining sinonimlari quyonlar isitmasi, Parino konyunk- tiviti, deb ham yuritiladi. Tulyaremiya otkir zoonoz infeksiyadir. U tabiiy ochoqli yuqumli kasallik bolib, umumiy intoksikatsiya, oziga xos limfadenitlarning rivojlanishi va isitma kotarilishi bilan kechadi. Morfologiyasi. Mayda, kokksimon, tayoqchasimon, bazan iðsimon shaklda boladi. 0,30,6x0,10,2 mkm kattalikda bolib, bakteriologik filtrlardan otadigan kulturalari ham bor. Harakatsiz, spora hosil qilmaydi. Nozik kapsula hosil qiladi (hayvon organizmida). Grammanfiy boyaladi. Azolar bolakchalaridan tayyorlangan, Romanovskiy usulida boyalgan surtma preparatlarda nozik binafsha rangida korinadi. 236 Kultural xossasi. Tulyaremiya qozgatuvchisi fakultativ anaerob. Tuxum sarigi, gosht va baliq goshti, sistin, glukoza va qon qoshilgan muhitlarda yaxshi osadi. Zich oziqa muhitida 3637°C haroratda, pH 6,87,2 bolganda 414-kunlardan song mayda, oq, bortib chiqqan, chetlari tekis, yaltiroq, 13 mm S shaklli koloniya hosil qiladi. R shaklli koloniyalari avirulentdir (uzoq vaqt davomida laboratoriya sharoitida ostirilganda R shakliga otadi). Fermentativ xossasi. Tulyaremiya qozgatuvchisining fermentativ xossasi kam namoyon boladi va faqat maxsus muhitlardagina aniqlanadi. Ular glukoza, maltoza, mannoza, levulezani kislotagacha parchalaydi. Ayrim shtammlari glitserinni parchalaydi va vodorod sulfitini hosil qiladi. Toksigenligi. Tulyaremiya bakteriyasi endotoksin ajratadi va mikrob- larning patogenlik tasiri mana shu toksinga bogliqdir. Antigenligi. S shaklidagi tulyaremiya bakteriyasi ikki xil antigen kompleksini: O va Viantigenlarini saqlaydi. Viantigeniga virulentlik va immunogenlik xossasi bogliq boladi. R shakldagi kulturalar Vi antigenini yoqotadi. Oantigeni brutsellalar bilan umumiydir. Chidamliligi. Suvda va tuproqda 4°C da 45 oygacha, 1°C haro- ratda 9 oygacha saqlanadi. Muzlatilgan mahsulotlarda 6 oygacha, nonda 14 kungacha, goshtda 30 kungacha, hayvon murdalarida 6 oy- gacha, oziq mahsulotlari va somonda 20 kungacha saqlanadi. 23 % li lizol, kreozol, formalin, spirt eritmasida 23 daqiqa mobaynida oladi. Xlorlangan suvda bir necha daqiqa, quyosh nurlarida 3 daqiqa ichida halok boladi. Patogenligi. Kopgina hayvonlar tulyaremiya qozgatuvchisiga sezgir bolib, tabiiy sharoitda 145 tur umurtqali va 100 ta tur umurtqasiz hayvonlar tulyaremiya bilan kasallanadi. Tulyaremiyaga, ayniqsa, kemiruvchilar sezgir boladi. Infeksiya manbai kemiruvchilar, ayniqsa, suv kalamushlari, uy sichqonlari, ondatra, quyon, yirtqich qushlar, hasharotlar, suvda va quruqlikda yashovchilar, baliq va boshqalar bolishi mumkin. Qozgatuvchining uch turi malum. 1. Yevropa turi. 2. Markaziy Osiyo turi. 3. Amerika turi. Tarqalish yoli. 1. Kontaktkasal kemiruvchilar va ularning ajratmalari. 2. Alimentar oziq-ovqat mahsulotlari. 3. Havo changi. 4. Transmissiv yol orqali tarqaladi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib, jarohatlanmagan va jarohat- langan teri hamda shilliq pardalar hisoblanadi. 237 Qozgatuvchi tushgan joyda mayda qizil dogli papula hosil bolib, keyinchalik nekrozli yaraga aylanadi. Limfa yoli orqali limfa tuguniga otadi, u yerda bolinib kopayadi, birlamchi limfadenit rivojlanadi va tulyaremiya bubonlari yuzaga keladi. Koproq yelka, qoltiq osti, qov limfa tugunlari zararlanadi. Bubonlari kam ogriqli, teri ostidagi kletchatka bilan qoshilmagan boladi. Mikroblar olganda mahalliy ozgarishlar va qonga tushganda umumiy intoksikatsiyaga sabab boladigan endotoksin ajratadi. Qon bilan butun azo va toqimalarga tarqab, taloq, opka, jigar ikkilamchi bubonlar hosil qiladi. Zararlangan azolarda oq-sariq rangli granulema shakllanib, ular, odatda, sil granulemalariga oxshash boladi. Yashirin davri 37 kun, bazan 1014 kungacha chozilishi mumkin. Kasallik otkir boshlanadi, qaltirash, tana haroratining 3840°C kotarilishi, bosh ogrigi, holsizlanish kuzatiladi. Ogir- lashgan shakllari toshmalar toshishi, pigmentatsiya, terining post tashlashi bilan kechadi. Isitma 57 kundan 30 kungacha kuzatiladi. Kopincha kasallik 1630 kun davom etadi. Kasallik quyidagi klinik korinishga ega: 1. Bubonli. 2. Yara-bubonli. 3. Koz-bubonli. 4. Anginali bubon. 5. Abdominal yoki ichak. 6. Opka (bronxit va zotiljamli variantlari). 7. Generalizatsiyalashgan yoki birlamchi septik shakllarda otadi. Bubonli shaklikoproq qozgatuvchi teri orqali kirganda kuzatiladi. Birlamchi va ikkilamchi bubonlar kasallikning 23-kunlari hosil boladi. Birlamchi bubonlar bemorlarning bazilarida 14 oy ichida sorilib ketadi. Boshqalarda 23 hafta ichida yiringlab, yoriqlar hosil qiladi. Yiring, odatda, quyuq oq sut rangida bolib, hidsizdir. Yara-bubonli shakli. Mikrob tushgan joyda 12 kunda paydo bolgan dog papula yoki yaraga aylanib, ular oqimtir asosli qora post bilan qoplangan boladi. Koz-bubonli shakli. Qozgatuvchi koz shilliq qavatidan kirib, konyuktivit yoki kozda papula yaralar hosil qiladi va ular toq sariq yiring ajratadi. Bemorning ahvoli ogir bolib, agar ikki kozi ham zararlangan bolsa, ular 68 kundan song halok bolishi mumkin. Anginali bubon shakli. Bodomchasimon bezlar oq kulrang qoplama bilan qoplangan bolib, u juda qiyinchilik bilan kochadi. Qoplama bogma kasalligidagi qoplamaga oxshash, lekin undan farqli olaroq, chegarasi bezlardan tashqariga chiqmagan boladi. Abdominal shaklida kongil aynishi, qusish, oshqozonda ogriqlar, ishtaha yoqolishi kuzatiladi. 238 Birlamchi opka shakli. Uning I variantida opka parenximasi shikastlanadi. Bu variant guruhga oxshash bolib, 1012 kun davom etadi va sogayish bilan tugaydi. II variant uzoq 2 oy va undan ortiq davom etadi. Ikkilamchi opka shakli. Yuqorida sanab otilgan shakllarning ogirlashgan korinishidir. Generalizatsiyalashgan yoki birlamchi septik shakli holsizlangan bemorlarda mahalliy ozgarishsiz, tana haroratining yuqori bolishi bilan kechadi. Kasallikning 2-yarmida kopchilik bemorlarning qol va oyoqlari «qolqop» korinishidagi simmetrik toshmalar bilan qoplanadi. Ular 812 kundan keyin yoqoladi. Kasallikdan song ikkilamchi zotiljam, ikkilamchi meningit, meningoensefalit, infeksion psixoz, nevroz, miokarditlar kelib chiqadi. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam va uzoq vaqtga choziluvchan immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Kemiruvchilarga qarshi kurashish, shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilish, oziq-ovqatlarni ifloslanishidan saqlash lozim. Maxsus profilaktikasi. Tabiiy ochoqlarda yashaydigan aholi emlanadi. Emlash Gayskiy, Elbertlar olgan tirik vaksinani bir safar teri ustiga yuborishdan iborat. Immunitet 36 yilgacha davom etadi. Davosi. Tulyaremiya bakteriyasi kopgina antibiotiklarga streptomitsin, monomitsin, biomitsin, tetratsiklin, kanamitsinlarga sezuvchan. Penitsillin va sulfanilamidlarga sezuvchan emas. 1. Tulyaremiya bakteriyasining morfologik, kultural xossalari qanday? 2. Qozgatuvchining virulentligi qaysi antigenga bogliq? 3. Tulyaremiya bakteriyasining chidamliligini bilasizmi? 4. Tulyaremiya kasalligining infeksiya manbaini bayon eting. 5. Qozgatuvchi qaysi yol orqali tarqaladi? 6. Kasallik qanday shakllarda otadi? 7. Kasallikning oldini olish choralarini bilasizmi? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Bubon yara, bubon anginali shakllarida bubon tarkibidagi modda. 2. Koz shaklidakozdan ajralgan modda. 3. Opka shaklidabalgam. 4. Ichak shaklidanajas. ? Nazorat uchun savollar 239 5. Generalizatsiyalashgan shaklidaqon olinadi. Maxsus laboratoriyalarda kemiruvchilar, ularning ajratmasi, bogimoyoqlilar (kana, burga, chivin), suv, oziq-ovqatlar va bosh- qalar tekshiriladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Allergik. 2. Serologik. 3. Biologik. 4. Bakteriologik (bu usul keng qollanilmaydi. Chunki suniy oziqa muhitlariga tekshirish materiallarini ekib ostirib bolmaydi). Allergik usul Allergik sinama kasalliklarning 35-kunlari ikki usulda: teri usti va teri ichi usullarida olib boriladi. a) Teri usti usuli. Yelkaning tashqari qismiga 10 mlrd olik mikrob hujayrasini saqlovchi 1 ml tulyarin yuboriladi. 4872 soatdan keyin 12 sm kenglikda qizarish hosil bolsa, reaksiya musbat deyiladi. b) Teri ichi usuli. Bilakning ichki tomoniga qizdirib oldirilgan 500 mln mikrob hujayrasini saqlovchi bakteriya osilmasidan 1 ml yuboriladi. 2448 soatdan song 0,3 sm kenglikda qizarish va shish hosil bolsa, reaksiya musbat boladi. Serologik usul Kasalliklarni 1015-kunlari bemorlardan qon olinib, zardobi ajratib olinadi va kengaytirilgan hajm agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Agglutinatsiya reaksiyasi. Bemordan 23 ml qon olinib, zardobi ajratiladi. Zardobni 1:50 dan 1:1600 gacha suyultiriladi. Antigen sifatida tulyaremiya diagnostikumidan foydalaniladi. Diagnostik titr 1:100 va undan yuqori bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Eng yuqori choqqisi kasalliklarning 4-haftasida boladi. Bgar (bilvosita gemagglutinatsiya reaksiyasi) eng sezgir reaksiya hisoblanadi. Bemor qon zardobi 1:10000 gacha suyultiriladi. Antigen sifatida tulyaremiya eritrotsitlar diagnostikumidan foydalaniladi. 1:100 va undan yuqori titrda chokma bolsa, reaksiya musbat deyiladi (11,5 oydan song titr 1:10000 gacha bolib, song pasayib 1:100 da uzoq vaqt saqlanadi). Biologik usul. Patologik material fiziologik eritmada aralashtirilib, 0,30,5 ml hajmda oq sichqonlar yoki dengiz chochqachalarining terisi ostiga yoki qorin boshligiga yuboriladi. Hayvonlar 46-kunlari 240 kasallanib oladi. Ularni ichki azolaridan surtma tayyorlanadi va oziqa muhitlariga ekib organiladi. 1. Kasallikka tashxis qoyishda qanday tekshirish materiallari olinadi? 2. Asosiy tekshirish usullarini bayon eting. 3. Allergik sinama qanday qoyiladi? 4. Tashxis qoyishda qanday reaksiyalardan foydalaniladi? 5. Biologik sinama qaysi hayvonlarda olib boriladi? Oziqa muhitlar Tuxum sarigi qoshilgan muhit. Tuxum sarigi 3:2 nisbatda fiziologik eritma bilan aralashtiriladi. Aralashma 45 ml.dan probirkalarga solinadi va qiyshiq holda 80°C harorat ostida 1 soat davomida sterilizatsiya qilinadi (muhitning sterilligini termostatda 37°C da tekshiriladi). Muhit 1 oygacha sovuqda saqlanadi. 29-bob. BRUTSELLOZ QOZGATUVCHISI Bu infeksional allergik zoonoz kasallik bolib, isitma kotarilishi, gemo- va limfopoyez azolari, tayanch-harakat apparati va periferik nerv tizimining zararlanishi bilan tavsiflanadi. Kasallikni birinchi marta 1859-yilda ingliz shifokori Marston Malta orolida otkir terlama kasalligi sifatida kuzatgan va «Malta isitmasi», deb nomlagan. 1886-yili D. Bryus olgan askar talogida qozgatuvchini aniqladi. 1896-yilda B. Bang abort qilingan sigirning embrion atrofidagi suyuqligidan ham kokkorbakteriyalarni aniqlagan. 1914-yili J. Traum shularga oxshash tayoqchasimon bakteriyalarni kasal chochqalardan ajratib olgan. 1916-yili Ivens barcha ajratib olingan mikroblarni organib, ularning hammasi bir-biri bilan oxshash- ligini aniqladi va Bryus nomi bilan brutsellalar deb atadi. Keyinchalik bakteriyalarning boshqa turlari ham aniqlandi. Ular barchasi Brucella avlodiga kiritildi. Hozirgi vaqtda barcha brutsellalar asosiy xojayinlarida kasallik keltirib chiqarishiga qarab, quyidagi turlarga bolinadi: 1. Brucella meltensismayda shoxli hayvonlarda kasallik keltirib chiqaradi. 2. Brucella abortus bovisyirik shoxli hayvonlarda kasallik keltirib chiqaradi. 3. Brucella suischochqalarda kasallik keltirib chiqaradi. 4. Brucella neotornaechol kalamushlarida kasallik chaqiradi. Odam uchun patogenligi aniqlanmagan. ? Nazorat uchun savollar 241 5. Brucella cahisitlarda kasallik keltirib chiqaradi. Itdan odamga yuqishi mumkin. 6. Brucella ovisqoylarda kasallik qozgatadi. Odam uchun patogen hisoblanmaydi. Har bir turdagi brutsellalar biovarlarga bolinadi: Br.melitensis- ning 3 ta, Br.abortus bovis ning 9 ta, Br.suis ning 5 ta biovari mavjud. Morfologiyasi. Mayda, tayoqchasimon, ovalsimon shakldagi bakteriyalar bolib, 0,60,8x0,30,5 mkm kattalikda, harakatsiz, spora hosil qilmaydi. Nozik kapsula hosil qiladi. Garmmanfiy boyaladi. Surtma preparatda tartibsiz joylashadi. Kultural xossasi. Brutsellalar aerob, oziqa muhitiga talabchan, juda sekin (23 hafta) osadi. Zardob, kartoshka, qon (5 % li qoy qoni), jigarli agar va shorvada yaxshi osadi. Ayrim shtammlarning osishi uchun 510 % li CO 2 lozim. Zich oziqa muhitida nozik, mayda, rangsiz, bortib chiqqan S shaklida, yaltiroq koloniya hosil qilib osadi. Turli xil omillar tasirida R shakliga otishi mumkin. Antibiotik tasirida L shakliga otadi. Suyuq oziqa muhitida bir tekis loyqalanish hosil qiladi. Brucellalar tovuq embrionidagi sariqlik qopchasida yaxshi osadi. Brutsellalar vodorod sulfiti, fuksin va tionin muhitlarida osishiga kora farqlanadi. Fermentativ xossasi. Brutsellalar Driboza. Dgalaktoza, alanin, asparaginlarni parchalaydi. Ayrim shtammlari aminokislotalarni amiakkacha gidrolizlaydi. Brutsellalar gialuronidaza, katalaza, peroksidaza, liðaza, fosfataza fermentlarini hosil qiladi. Toksigenligi. Brutsellalarning patogenlik tasiri endotoksiniga qarab aniqlanadi. Bundan tashqari, ular allergik xossaga ham ega. Antigenligi. Brutsellalar ikki xil somatik A va M antigenini saqlaydi. Bu antigenlar bakteriyalar turiga xosdir, ular mikrob hujayrasining tarkibiga kiradi va turli xil nisbatda boladi. Br. melitensisda M antigeni, Br.abortus bovis va Br.suisda A antigeni ustun turadi. Bundan tashqari, ularda Vi antigeni ham aniqlangan. Chidamliligi. 100°C harorat tasirida shu zahoti, 8085°C da 5 daqiqadan song, 60°C tasirida 30 daqiqadan song oladi. Past haroratga chidamli. Tik quyosh nuri mikroblarga halokatli tasir korsa- tadi. Nam sharoitda 34 oygacha, sut mahsulotlarida 4045 kun- gacha, muzlagan goshtda 5 oygacha, tuproq va suvda 35 oygacha saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi moddalarga (xlorli ohak, lizol, kreozin, karbol kislotasi, formalin, sulema) juda sezgir. Patogenligi. Brutselloz bilan asosan qishloq xojalik hayvonlari mayda va yirik shoxli hayvonlar, chochqa, kiyik va boshqa hayvonlar kasallanadi. Har bir tur mikrob oziga xos kasallik keltirib chiqaradi. 242 Lekin brutsellalar bir turdagi hayvondan ikkinchi turdagi hayvonga yuqishi mumkin. Masalan, Br.abortus bovis mayda shoxli hayvonlarni ham zararlashi mumkin. Kasallikning asosiy belgilari shuki, hayvonlarning urgochilarida bola tashlash, erkagida orxitni keltirib chiqaradi. Bundan tashqari, ularda bogimlar shikastlanadi, ozib ketadi, juni tokiladi va boshqa belgilar yuzaga keladi. Brutselloz yopiq shaklda ham otishi mumkin, bu esa infeksiyaning tarqalib ketishiga sabab boladi. Laboratoriya hayvonlaridan oq sichqonlar va dengiz chochqa- chalari ularga sezuvchan. Ular zararlangandan song bola tashlash, ozish, junlarining tokilishi kuzatiladi. Sichqonlarda septitsemiya yuzaga kelishi mumkin. Infeksiya manbai. Odam uchun infeksiya manbai bolib yirik va mayda shoxli hayvonlar hisoblanadi. Odam brutselloz tarqalishida epidemiologik ahamiyatga ega emas. Tarqalish yoli. Maishiy kontakt, alimentar, havo-tomchi yoli orqali tarqaladi. Kontakt yoli orqali, yani hayvonlarni boqqanda, goshtini bolganda yuqishi mumkin. Havo changi orqali ham, yani hayvonlar junini qayta ishlaganda yuqadi. Brutsellalar bilan ifloslangan oziq-ovqatlarni, sut va sut mahsulotlarini istemol qilish natijasida alimentar yol orqali yuqadi. Patogenezi. Organizmga kirish darvozasi bolib ogiz va burun shilliq qavati va jarohatlangan teri hisoblanadi. Organizmga tushgan brutsellalar limfa yoli orqali limfa tuguniga tushadi, bolinib kopayadi. Limfa yolidan qonga soriladi. Qon bilan butun organizmga tarqaladi, suyak komigida, jigarda, taloqda joylashadi. Tayanch-harakat azolarida, periferik nerv va jinsiy azolar tizimida yalliglanish jarayoni rivojlanadi. Mustahkam ornashgan antigenlar atrofida granulemalar hosil qiladi. Brutsella qonga otib qaytalash (retsediv)ni yuzaga keltiradi. Yashirin davri 13 hafta davom etadi. Birlamchi latent, otkir septik, septik-metastaz, birlamchi, surunkali, ikkilamchi surunkali, ikkilamchi latent, brutsellozdan keyingi asoratlar farq qilinadi. Brutsellozda koproq qov (70 %), qoltiq osti (63 %) va jag osti (29 %) limfa bezlari zararlanadi. Osteoxondritlar, miozitlar, artritlar va osteoartritlar rivojlanadi. Markaziy nerv tizimi meningit, ensefalit, miyelit, ensefalomeningit korinishida zararlanadi. Kasallikning surunkali shakli remissiya (tinch davri), retsediv davri va kuchayish davrlari bilan almashinib turadi. Qayta takrorlanish davrida yangi metastazlar yuzaga keladi yoki eski manbalar kopayadi. Brutsellozdan sogayish bir necha oydan 33,5 yilgacha. Sogayish klinik, bakteriologik, anatomik davrlarga bolinadi. Reinfeksiya 212 yildan song yuzaga kelishi mumkin. Immuniteti. Kasallikdan song hujayraviy agglutinin va komplement boglovchi antitelolar hosil boladi. 243 Profilaktikasi. Qishloq xojaligida hayvonlarni nazorat qilish. Sut va gosht kombinatlarini nazorat qilib turishdan iborat. Maxsus profilaktikasi. Brutsella abortusning 19BA shtammini saqlovchi tirik vaksina bir marta teri ustiga yuboriladi. Revaksinatsiya 812 oydan song olib boriladi. Davosi. Levomitsitin, eritrin antibiotiklari bilan davolanadi. Brutselloz immunoglobulini beriladi. 1. Brutsellozning qanday turlarini bilasiz? 2. Brutsellalar qanday muhitlarda rivojlanadi? 3. Brutsellozning patogenligi nimaga bogliq? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Qon. 2. Orqa miya suyuqligi. 3. Suyak komigi. 4. Siydik. 5. Kokrak suti. 6. Murdadan material. Tekshirish materialini toplash Qon bilak venasidan 510 ml hajmda steril sharoitda olinadi. Gemokultura usulida tekshiriladi. Qon barmoqdan 12 ml hajmda olinadi. Siydik steril kateter yordamida steril idishga olinadi. Kokrak suti steril idishga yigiladi. Orqa miya suyuqligi steril igna yordamida steril idishga olinadi. Suyak komigi steril shpris yordamida steril idishga toplanadi. Asosiy tekshirish usullari 1. Serologik. 2. Allergik. 3. Biologik. 4. Bakteriologik. Bakteriologik usul. Kasallikning birinchi kunlarida tana harorati kotarilgan davrda bemor bilak venasidan 1015 ml hajmda qon olinadi. Qon bemorni antibiotik bilan davolashdan oldin olinadi. Qon (100200 ml hajmli idishga) 3050 ml qiyshiq agar va 2530 ml shorva ? Nazorat uchun savollar 244 qoshilgan muhitga 5 ml.dan solib chiqiladi. Birinchi flakondagi muhitni karbonat angidridi kop bolgan sharoitda qoldiriladi, ikkinchisi esa termostatda 37°C haroratda qoldiriladi. 4 kundan song olib tekshiriladi. Agar koloniyalar osmagan bolsa, yana qoldiriladi. Agar muhit istida mayda, rangsiz, bortib chiqqan koloniyalar hosil bolsa, stereoskopik mikroskopda yoki oddiy mikroskopning kichik obyektivida organiladi. Agar bir oy ichida koloniyalar aniqlanmasa, zich oziqa muhitiga ekilib nazorat qilinadi. Osgan kulturani farqlash uchun surtma preparat tayyorlanadi, boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Song buyim oynachasi ustida maxsus zardob yordamida agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Qaytalagan va surunkali shakldagi bemorlarning suyak komi- gidan va limfa tugunidan punktat olinadi va zich oziqa muhitiga ekiladi. Shubhali koloniya hosil bolsa, surtma preparat tayyorlab, aggluti- natsiya reaksiyasi qoyib organiladi. Serologik usul. Rayt reaksiyasi. Bemorning barmogidan 12 ml qon olinib, zardobi ajratiladi va kengaytirilgan hajmiy agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Bemor qon zardobi 1:25 dan 1:1600 gacha suyultiriladi, antigen sifatida brutsella olik kulturasi diagnostikumi olinadi va barcha probirkalarga 2 tomchidan solib chiqiladi. Termostatda 37°C haroratda 18124 soat qoldiriladi. Diagnostik titri 1:100, 1:200 hisob- lanadi. 1:400 reaksiya musbat bolsa, ota musbat, deb javob beriladi. Taxminiy agglutinatsiya reaksiyasi (Xedelson reaksiyasi, 29-jadval). Har birining kattaligi 4x4 sm keladigan 6 ta tortburchakka bolingan, tozalangan, yogsizlantirilgan oynacha olinadi. Chap tarafdan birinchi tortburchakdan boshlab, raqamlar qoyib chiqiladi va mikropiðetkada tekshirilayotgan zardobdan 0,08; 0,04; 0,02; 0,01 ml nazorat zardo- biga («NZ») 0,02 ml.dan solinadi. «NZ» dan tashqari, barcha tortbur- chaklarga 0,03 ml diagnostikumdan solinadi, nazorat diagnostikum «ND» tortburchagiga ham undan 0,03 ml solinadi. «NZ» va «ND» tortburchaklariga 0,03 ml fiziologik eritma solinadi. Tomchilarni kichik dozadan boshlab, shisha tayoqcha yoki uchi kavsharlangan piðetka bilan aralashtiriladi. 29-jadval Xedelson reaksiyasi t n e y i d e r g n I a b i rj a T t a r o z a N 1 2 3 4 » Z N « » D N « b o d r a Z 8 0 , 0 4 0 , 0 2 0 , 0 1 0 , 0 2 0 , 0 n e g it n A 3 0 , 0 3 0 , 0 0 , 0 3 0 , 0 3 0 , 0 a m ti r e k i g o l o i z i F 3 0 , 0 3 0 , 0 245 Oynachani spirt alangasida biroz isitiladi. Agar antigen va antitelo bir-biriga mos bolsa, birinchi daqiqadayoq donador havorangli chokma hosil boladi. Uzogi bilan 8 daqiqagacha kuzatish mumkin. Sezgir reaksiyalardan yana biri bevosita gemagglutinatsiya reaksiyasi hisoblanadi. Diagnostikum sifatida brutselloz eritrotsitlar diagnostikumidan foyda- laniladi. Allergik usul (Byurne sinamasi). Bilakning ichki tomoniga, teri ichiga 0,1 ml brutsellin (13 haftalik brutsella kulturasining bulyondagi filtrati) yuboriladi. 2448 soatdan song natija oqiladi. Agar 4x6 sm kenglikda qizarish va shish hosil bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Biologik usul. Sinamani oq sichqonlar yoki dengiz chochqa- chalarida otkaziladi. Tekshirish materiali chov qismining teri ostiga yuboriladi. Bu usul infeksion jarayonning limfa tugunida qanday kechishini toliq organish uchun xizmat qilishi mumkin. Hayvonlar kasallanib nobud bolgandan song ularni yorib, oziqa muhitlarga ekib organiladi. 1. Bemordan tekshirishga qanday material olinadi? 2. Tekshirish qanday usullarda olib boriladi? 3. Serologik usulda qanday reaksiyalar qoyiladi, tushuntirib bering. 4. Biologik sinama qanday hayvonlarda olib boriladi va qanday otkaziladi? 30-bob. KUYDIRGI (SIBIR YARASI) QOZGATUVCHISI Kuydirgi odam va hayvonlarda uchraydigan otkir infeksion kasallik bolib, ogir intoksikatsiya, teri qoplamlari va limfa apparatining ishdan chiqishi bilan kechadi. Kuydirgi qozgatuvchisi Bacillus anthracis Bacillacae oilasiga, Bacillus avlodiga kiradi. U qadimgi kasallik bolib, unga «authrax» komir nomi Giðpokrat tomonidan berilgan. Hozirgi nomini esa 1788-yili rus shifokori S. Andreyevskiy taklif etgan. U oziga kuydirgi qozgatuvchisini yuqtirib, kasallik qozgatuvchisini hayvondan odamga yuqishini isbotlagan. 1849-yili Pallendor qozgatuvchining barcha xossalarini, 1878-yili R. Kox sof kulturasini ajratib, uni hayvonlarga yuqtirgan va spora hosil bolishini kuzatgan. L. Paster 1881-yili kuydirgiga qarshi vaksinani ishlab chiqdi. Morfologiyasi. Qozgatuvchi yirik tayoqchasimon bakteriyalar bolib, 6x8x11,5 mkm kattalikda, chetlari chort kesilgan. Gram- musbat boyaladi. Surtma preparatda juft-juft yoki qisqa zanjirsimon ? Nazorat uchun savollar 246 bolib joylashadi. Oziqa muhitida osgan mikrob kulturasidan surtma preparat tayyorlab korilganda, ular uzun zanjirsimon bolib joylashadi. Harakatsiz, bir nechta batsillalarga yoki zanjirga umumiy bolgan kapsula hosil qiladi. Spora hosil qiladi, ovalsimon shaklda bolib, markaziy joylashadi. Spora kislorodli sharoitda 3040°C da yaxshi hosil boladi. 43°C dan yuqori va 15°C dan past haroratda spora hosil bolishi toxtaydi. Spora hosil bolganda, hujayra devori parchalanib ketadi va spora alohida holda tashqi muhitga tushadi. Kultural xossasi. Kuydirgi qozgatuvchisi fakultativ anaerob, oziqa muhitiga talabchan emas, 3538°C haroratda pH 7,27,6 da yaxshi osadi. GPAda yirik, chetlari notekis R shaklidagi koloniya hosil qilib osadi. Koloniya chetlaridagi iðchalar koloniyaga sher boshini eslatuvchi shakl berib turadi. R shaklidagi koloniyalar virulent hisoblanadi. Eski kulturalarda esa S shaklli koloniyalar hosil boladi va ular virulentli hisoblanadi. Gosht-peptonli shorvada (GPSH) probirka tubida paxtaga oxshash chokma hosil qiladi. Muhit tiniq qoladi. Fermentativ xossasi. Kuydirgi batsillasi fermentativ xossasiga kora, faol. Saxarolitik xossasiga kora, glukoza, laktoza, maltoza, levuleza va boshqa uglevodlarni kislotagacha parchalaydi. Proteolitik xossasiga kora, jelatinni tonkarilgan archasimon holda suyultiradi, sutni ivitadi va peptonlaydi. Vodorod sulfiti va ammiak hosil qiladi, nitratni nitritga tiklaydi, kraxmalni gidrolizlaydi. Eri- trotsitlarni gemolizga uchratmaydi. Kuydirgi bakteriofagi tasirida lizisga uchraydi. Kuydirgi batsillasi diastaza, peroksidaza, liðaza ferment- larini ajratadi. Toksigenligi. B antharcis oqsil tabiatli ekzotoksin ishlab chiqaradi: 1) olimga olib keluvchi yoki olim omilini saqlaydi; 2) shish chiqaradigan yoki edematoz; 3) protektiv yoki himoya omiliga ega bolib, yuqoridagi ikki omil tasir qilmaydi. Bu toksinlarni sichqon toksinlari deyiladi. Chunki sichqonlar bu toksinga juda sezgir. Antigenligi. Kuydirgi batsillasi ikkita antigen: 1) yuqori haroratga chidamli somatik antigenga ega. Bu antigenga qarshi antitelo hosil bolmaydi. Uzoq vaqt murdalarda va kulturalarda saqlanadi; 2) kapsula antigeni zararli emas. Chidamliligi. Kuydirgi qozgatuvchisi vegetativ shaklida kam chidamli. 100°C harorat tasirida shu zahoti, 5560°C tasirida 3040 daqiqadan song oladi. Kuydirgi qozgatuvchisining kapsulasi tashqi muhitga chidamli. Hayvon murdalari kuzatilganda, bakteriyalar chirigan bolishiga qaramasdan, bosh kapsulani aniqlash mumkin. 247 Kuydirgi batsillalarining sporalari chidamli: qaynatganda 1520 daqiqa- dan song, 120°C haroratli avtoklavda 20 daqiqadan song oladi. Quruq holda 30 yilgacha, tuproqda 10 yilgacha saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida 23 kundan song oladi. Patogenezi. Kuydirgi qozgatuvchisiga sigirlar, ot, qoy, kiyik, chochqalar sezuvchan bolib, ular somon tarkibidagi sporalarni istemol qilish natijasida kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan quyonlar, oq sichqonlar, dengiz chochqachalari sezuvchan. Ular zararlangandan keyin 24 kun otgach oladi. Infeksiya manbai. Kasal hayvon infeksiya manbai bolib hisoblanadi. Tarqalish yoli: 1) maishiy kontakt; 2) alimentar oziq-ovqatlar orqali; 3) havo changi yoli orqali; 4) transmissiv yol orqali tarqaladi. Havo changi yoli orqali, asosan, lattafurushlar kasallanganliklari uchun uni Fransiyada «Lattafurush kasali», «Jun qirquvchilar kasali», deb ham atashadi. Transmissiv tarqalish yolida kasallik chivin, kuydirgi pashshasi chaqqanda ham yuqadi. Maishiy kontakt yolida hayvonlarni soyganda yuqadi. Alimentar yoli kuydirgi batsillasi bilan ifloslangan oziq- ovqatlarni istemol qilish natijasida yuqadi. Kirish darvozasi bolib, jarohatlangan teri, ogiz, burun, koz shilliq qavatlari hisoblanadi. Qozgatuvchi tushgan joyda karbunkul hosil bolib, teri va teri osti kletchatkasida gemorragik ochoq, shishlar va toqimalar distruksiyasi paydo boladi. Shuningdek, organizmda bakteremiya rivojlanadi. Kasallik teri, opka, ichak shakllarida uchraydi. Kasallikni teri shaklida qozgatuvchi kirgan yerda qizarish paydo bolib, songra u papulaga aylanadi. Papula sekin-asta qizil, jigarrangli vezikulaga aylanadi. Uning tarkibida gemorrargik suyuqlik boladi. U qurigandan song qora chandiq qoladi. Kuydirgining opka shaklida zotiljam, opka shishining klinik belgilari yuzaga keladi va bemor oladi. Kasallikni ichak shaklida yuqorida aytib otilgan uning teri shaklidagi belgilari ichak shilliq pardalarida yuzaga keladi. Kopincha olim bilan tugaydi. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam immunitet hosil boladi. Ammo 13 yildan 820 yil oraligida kasallik qayta yuqishi mumkin. Profilaktikasi. Profilaktika ishlari veterinar xizmati bilan birga olib boriladi. Kasal hayvonlarni ajratib qoyish, dezinfeksiya ishlarini amalga oshirish, aholi orasida sanitariya maorifi ishlarini olib borish muhim ahamiyatga ega. Maxsus profilaktikasi. Hozirgi vaqtda STI vaksinasi qollanilmoqda. Qishloq xojaligi xodimlari ortasida vaksinatsiya ishlari olib boriladi. Kasal hayvonlar bilan ishlagan va ular bilan aloqada bolgan odamlarga kuydirgiga qarshi immunoglobulin va antibiotiklar beriladi. 248 Davosi. Levomitsetin, tetratsiklin, eritromitsin, streptomitsin va boshqa antibiotiklar ishlatiladi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI Kuydirgi qozgatuvchisi bilan ishlash jiddiy tartib asosida olib boriladi 1. Teridagi vezikula, karbunkul, yaradan ajratma. 2. Opka shaklidabalgam. 3. Ichak shaklidanajas. 4. Septik shaklidaqon. 5. Askoli pretsepitatsiya reaksiyasini qoyish uchun tuproq, hay- von juni olinadi. Tekshirish materiallarini yigish Vezikula, karbunkuldan material olish uchun yara atrofi spirtga namlangan paxta yoki doka yordamida artiladi va tekshirish materiallarini steril shpris yoki tampon yordamida olinadi. Laboratoriyaga jonatish uchun tekshirish materiallari Paster piðetkasida olinadi va uchi alangada kavsharlanadi. Agar piðetka bolmasa, yara ichiga steril ið tushiriladi. Ip yaradagi yiringni shimgandan song uni probirkaga solib jonatiladi. Balgam va najas ogzi keng idishga solinadi. Qon bilak venasidan 35 ml hajmda steril shpris yordamida olinadi va Xottinger shorvasining 50 ml.ga solinadi. Bundan tashqari, qondan 23 ta yupqa surtma preparati ham tayyorlanadi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Bakteriologik. 3. Biologik. 4. Allergik. 5. Askoli pretsiðitatsiya reaksiyasi. Tekshirishning birinchi kuni. Mikroskopik usul. Tekshirish mate- riallaridan surtma preparat tayyorlanadi. Nikiforov eritmasida u 20 daqiqa fiksatsiya qilinadi. Gram usulida boyalib, mikroskop ostida tekshiriladi. Kapsulani aniqlash uchun u Gins usulida boyaladi. Mikroskop ostida kuydirgi qozgatuvchisi yirik tayoqchasimon, alohida, juft-juft yoki qisqa zanjirsimon joylashgan umumiy kapsulaga ega. Bakteriyalar Grammusbat boyalgan bolib korinsa, taxminiy tashxis qoyiladi. Bakteriologik usul. Tekshirish materiali GPA va GPSH ga ekiladi. Termostatda 3637°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 249 Biologik usul. Tekshirish materiali fiziologik eritmada yaxshilab aralashtiriladi. Quyonlarga, sichqonlarga 0,10,2 ml.dan yelka teri ostiga, dengiz chochqachalariga 0,20,5 ml.dan yuqori sohasining teri ostiga yuboriladi. Sichqonlar kuydirgidan 12 kundan song, quyon va dengiz chochqachalari 24 kundan song oladi. Tezlashtirilgan biologik usul. 23 ta oq sichqonlarning qorin boshligiga tekshirish materiali yuboriladi. Bir necha soatdan song qorin boshligidagi materiallardan surtma preparat tayyorlanadi va boyalib mikroskop ostida tekshiriladi. Agar kapsulaga oralgan batsillalar korinsa, tegishli javob beriladi. Tekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhitlar termostatdan olib kozdan kechiriladi. Zich oziqa muhitidan osgan kulturalar mikroskop ostida organiladi. Kuydirgiga xos koloniyalar aniqlansa, sof kulturani ajratib olish uchun koloniyaning yarmi olinib, qiyshiq agarga ekiladi. Termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Gosht-peptonli shorvada koloniyalar paxtaga oxshash chokma hosil qiladi. Muhit tiniq qoladi. Antraksidlardan kuydirgini farqlash uchun shorvadan osilgan tomchi preparat tayyorlab organiladi. Kuydirgi qozgatuvchisi harakatsizdir. «Marvarid shodasi» testi (tezlashtirilgan tekshirish usuli). Buning uchun Xottinger muhitiga 30 % li inaktivatsiyalangan ot zardobi va 0,5 tasir birligiga ega bolgan 1 ml penitsillin qoshiladi. Tayyorlangan muhitni 23 ml.dan probirkalarga solinadi. Har bir probirkaga 2 tom- chidan tekshirilayotgan mikrob kulturasidan tomizib chiqiladi. Probirkalarni termostatda 37°C haroratda 3 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach termostatdan olib tekshiriladi. Har bir probirkadan 23 ta surtma tayyorlanadi va qurutiladi. Karnua (6 qism etil spirti +3 qism xloroform +1 qism sirka kislotasi) suyuqligida fiksatsiya qilinadi. Fiksatsiya suyuqlik buglanib ketguncha ushlanadi. Surtma preparatni metilen koki boyogida boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Mikroskop ostida kuydirgi batsillalari marvarid shodasini eslatuvchi zanjirsimon joylashgan, yumaloq bolib korinadi. Chunki batsillalar penitsillin tasirida zanjirsimon shaklga aylanadi. Zararlangan hayvonlar tekshiriladi. Olgan hayvonlar yorib organiladi. Azolardan surtma tayyorlab boyab organiladi. Ichki azolaridan olib oziqa muhitlarga ekib organiladi. Tekshirishning uchinchi kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Qiyshiq agardan olib surtma preparat tayyorlanadi va boyab mikroskop ostida organiladi. Saxarolitik xossasini organish uchun Giss qatoriga ekiladi. Proteolitik xossasini organish uchun lakmusli sutga, jelatinaga, qonli agarga ekiladi va kuydirgi bakteriofagiga sezuvchanligi organiladi. Barcha muhitlar termostatda 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 250 Tekshirishning tortinchi kuni. Natija oqiladi. Kuydirgi batsillasi Giss qatoridagi muhitlarni kislotagacha parchalaydi. Jelatinani tonkarilgan archasimon qilib suyultiradi. 45-kunda sutni ivitadi va qizil rangga ozgartiradi. Qonli agarda eritrotsitlarni gemolizga uchratmaydi. Kuydirgi bakteriofagi tasirida batsillalar lizisga uchrasa, kasallikni kuydirgi qozgatuvchisi keltirib chiqargan, deb javob beriladi. Allergik usul. Bilakning ichki tomoni terisi ichiga kuydirgi antigeni (antraksin) yuboriladi. 2428 soatdan keyin qizarish va shish hosil bolsa, sinama musbat deyiladi. Askoli pretsiðitatsiya reaksiyasi Bu reaksiya kuydirgi batsillasining hayvon juni, terisi, murdasi, tuproqda borligini aniqlash maqsadida olib boriladi. Antigenni tayyorlash. Tekshirish materiali steril hovonchada maydalanib eziladi, ustiga 2550 marta hajmda fiziologik eritma solinadi va qaynatiladi. Hosil bolgan aralashmani filtr qogoz orqali filtrlanadi. Filtrning termoekstrakti tiniq bolishi lozim. Reaksiyani olib borish uchun kuydirgini pretsiðitatsiyalovchi zardob va nazorat uchun kuydirgi antigeni kerak boladi. Reaksiyani qoyish texnikasi. 3 ta pretsiðitatsiya probirkasi olinadi. 1. Probirkaga pretsiðitatsiyalovchi zardob + tekshirilayotgan termoekstrakt solinadi. 2. Probirkaga pretsiðitatsiyalovchi zardob + standart kuydirgi antigeni (nazorat probirka) solinadi. 3. Probirkaga pretsiðitatsiyalovchi zardob + soglom hayvon junidan tayyorlangan termoekstrakt (nazorat) solinadi. Reaksiya musbat bolsa, birinchi va ikkinchi probirkalarda ikki suyuqlik orasida loyqasimon oq halqa hosil boladi. Uchinchi probirkada esa halqa bolmaydi. 1. Kuydirgi kasalligiga tashxis qoyish uchun qanday tekshirish materiallari olinadi? 2. Tekshirish usullarini bayon eting. 3. Qanday tezlashtirilgan usullarni bilasiz? 4. Askoli pretsiðitatsiya reaksiyasi qanday olib boriladi? 31-bob. KOKYOTAL. KOKYOTAL VA PARAKOKYOTAL QOZGATUVCHILARI Bu kasallik qozgatuvchilari Bordetella avlodiga kiradi. 1. B.pertussis kokyotal qozgatuvchisi, 1905-yili Borde va Jangu tomonidan aniqlangan. ? Nazorat uchun savollar 251 2. B.parapertussisparakokyotal qozgatuvchisi 1937-yili Ellering va Kondrik tomonidan aniqlangan. 3. B. bronhoseptikahayvonlarda kasallik keltirib chiqaradi. 1926- yili Braun aniqlagan (kam uchraydi). Morfologiyasi. Ovalsimon shaklda, 0,30,5x11,5 mkm katta- likdagi mayda tayoqchalar. Parakokyotal qozgatuvchisi esa biroz yirikroq. Ikkalasi ham spora hosil qilmaydi, harakatsiz. Kapsula hosil qiladi. Grammanfiy bolib, ikki cheti toqroq boyaladi. Kultural xossasi. Aerob. Oziqa muhitiga talabchan. QOA oziqa muhitida kokyotal qozgatuvchisi 4872 soatdan song, parakok- yotal qozgatuvchisi esa 2448 soatdan song osadi. Kokyotal qoz- gatuvchisi mayda, parakokyotal qozgatuvchisi esa yirikroq, yaltiroq, kulrang, krem rangli, simob tomchisiga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Koloniyani olganda qaymoqqa oxshash dog qoladi. Stereoskopik mikroskopda qaralganda soya korinadi. Energiya manbaining joyi ozgartirilganda soya ham oz joyini ozgartiradi. Bu diagnostikada katta ahamiyatga ega. B.parapertussis tirozinaza fermentini ishlab chiqaradi, tirozin saqlovchi muhitga ekilganda tirozin parchalanishi natijasida muhit jigarrangga aylanadi. Oziqa muhitining rangini ozgartirishi diagnostikada katta ahamiyatga ega. Suyuq oziqa muhitida B.pertussis va B.parapertussis bir tekis loyqalanadi va probirka tubida chokma hosil qilib osadi. Yangi ajratilgan kultura kopincha S shaklda boladi, kasallik oxirida, IIIV fazada olingan materialda va noqulay sharoitda ostirilgan kulturalar bir-biridan farqlanuvchi koloniyalarni hosil qilib osadi. Qonli agarda gemoliz ular zonasini beradi. Suyuq oziqa muhitida bir tekislik loyqalanish va chokma hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. Kokyotal qozgatuvchisi uglevodlarni parchalamaydi, oqsillarni fermentlamaydi. Parakokyotal bakteriyasi esa ureaza va tirozinaza fermentlarini ishlab chiqaradi va ularni parchalaydi. B.pertussis va B.parapertussis patogen bolgan gialuronidaza plazmakoagulaza va letsitinaza fermentlarini ajratadi. Toksigenligi. Kokyotal qozgatuvchisining 4 ta oqsil tabiatli toksini aniqlangan: 1. Termolobil dermenekrotik toksin. 2. Termostabil endotoksin. 3. Leykotsitlarni stimullovchi toksin (hayvonlarga ogizdan yubo- rilganda, olimga olib keladi). 4. Gistaminni sensibilizatsiyalovchi omil (hayvonlarga yuborilganda, ularda gistaminga sezuvchanligi ortadi). 252 Birinchi ikkita toksin parakokyotalga ham xosdir. Antigenligi. Borditella avlodining antigenlik tuzilmasi juda murakkabdir. Diagnostika agglutinogen asosiy antigen bolib hisob- lanadi. Avlod antigeni 7, turga xos agglutinogen kokyotal uchun 1, parakokyotal uchun 14, bronxoseptika uchun 12 hisoblanadi. Monospetsifik 1, 14, 12 antigenlari zardob turlarini farqlash uchun qollaniladi. Turga xos antigenlardan tashqari, Bordetella avlodiga kiruvchi azolarning boshqa agglutinogenlari ham mavjud bolib, ular yordamida qozgatuvchilarning serovarlari aniqlanadi. Chidamliligi. B.pertussis va B.parapertussis tashqi muhitga kam chidamli. 50°C harorat tasirida 2030 daqiqadan song nobud boladi. Past harorat ham ularga oldiruvchan tasir korsatadi. Tik quyosh nurlari tasirida 12 soatdan song, ultrabinafsha nurlari tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Qurigan balgamda bir necha soatgacha saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi moddalarning oddiy eritmalari ham ularga oldiruvchan tasir korsatadi. Ularning ikkalasi ham antibiotiklarga kam sezuvchan, penitsillinga esa umuman sezuvchan emas. Patogenligi. Tabiiy holda hayvonlar bu qozgatuvchilarga sezuv- chan emas. Laboratoriya hayvonlaridan maymun, yosh itlarda kokyotal va sichqonlarda olimni yuzaga keltirishi mumkin. Infeksiya manbai. Bemor odam, ayniqsa, kataral davrdagi bemordir. Tarqalish yoli. Havo-tomchi yoli orqali tarqaladi. Patogenezi. Qozgatuvchilar yuqori nafas yolining shilliq pardalariga tushib, bolinib kopayadi. Kataral yalliglanish jarayoni, tumov avj oladi. Yashirin davri 38 kun. Ozidan toksin ishlab chiqa- radi va bu toksin markaziy nerv sistemasi, yuqori nafas yollari shilliq qavatidagi nerv retseptorlariga tasir korsatadi va natijada yotal keltirib chiqaradi. Keyinchalik bemor yotalganda qotib qolish holati kuzatiladi. Yotal kundan kunga kuchayadi. U vaqt-bevaqt tutib qattiq azob beradi. Yotal, ayniqsa, kechasi tez-tez tutadi. Yotal tutgan vaqtda bemor kopincha qusadi va hatto beixtiyor ichi otib ketadi va siyib qoyadi. Kasallik 68 hafta davom etadi. Yotal tutishi sekin-asta kamayadi va nihoyat boshroq tutib, jarayon tugaydi. Kokyotalga ikkilamchi infeksiyagriðp, zotiljam qoshilganda kasallik, ayniqsa, ogir otadi. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Umumiy profilaktikasida bemorni vaqtida aniqlash va izolatsiya qilish, kontaktdagi bolalarga immunoglobulin yuborish 253 lozim. Maxsus profilaktikasida bolalarga 12 oyligidan boshlab AKDS (kokyotal+bogma+qoqshol vaksinasi) yuboriladi, keyinchalik revaksinatsiya ishlari olib boriladi. Davosi. Boshlangich davrlarida immunoglobulin qollaniladi. Eritromitsin va ampitsillin ishlatiladi. 1. B.pertussis va B.parapertussislarning morfologik xossasini bayon eting. 2. Ular qanday oziqa muhitida osadi va qanday tavsifga ega? 3. Qozgatuvchilarning chidamliligi qanday? 4. B.pertussis va B.parapertussislarning bir-biridan farq qiluvchi xossalari qanday? 5. Infeksiya manbai, tarqalish yoli, patogenezini izohlang. MIKROBIOLOGIK DIAGNOSTIKASI TEKSHIRISH MATERIALI Burundan surtma. Tekshirish materialini toplash. Kosachadagi agarga yotalish usuli (Borde usuli) Bemor yotalayotgan vaqtda KUA oziqa muhiti solingan Petri kosachasi bemorning ogzidan 810 sm uzoqlikda ushlab turiladi, song termostatda qoldiriladi. Bu usul hozirgi vaqtda kam qollaniladi. Yutqinning orqa devoridan surtma olish usuli Tekshirish materialini hamshira oladi va ikkita tampondan foydalanadi. Biri quruq holda, ikkinchisi KUA muhitiga namlanadi. Sinama olishdan avval tampon 120° burchak ostida qayrilib olinadi. Bemorning til asosini shtampel bilan bosib, tampon ogiz boshligiga to yutqinning orqa devoriga tekkuncha kiritiladi. Bunda bemorda yotal yuzaga keladi va shilliq ajraladi. Song tampon sekin-asta ogizdan chiqarilib, Petri kosachasidagi KUA muhitiga ekiladi. Shtrix holda ekilgan kosacha termostatda qoldiriladi. Ikkinchi tamponni ikki marta (KH 2 PO 4 va Na 2 NPO 4 bufer eritmasida, agar va aktivlangan komirda) namlanadi. Bu eritmalar idishlarga solinadi. Eritmalar ishlatishdan avval suv hammomida eritilishi lozim. Òekshirish materiali quruq tampon bilan qanday olingan bolsa, shu yosinda olinadi. Material olingandan keyin u probirkaga solinib laboratoriyaga yuboriladi. ? Nazorat uchun savollar 254 Burun-yutqindan surtma olish usuli Material yuqoridagidek olinadi, lekin tampon burundan kiritiladi. E s l a t m a : 1. Qopqogi ochilgan kosachaning ogzini tonkarilgan holatda ushlash lozim. 2. Òampon simga mahkam oralgan va silliq bolishi lozim. 3. Òekshirish materiali olinayotganda tampon tilga, lunjga tegib ketmasligi lozim. 4. Material och qoringa yoki ovqatlangandan keyin 23 soatdan song olinadi. 5. Òekshirish materialini qish faslida laboratoriyaga jonatish lozim bolsa, probirka va kosachani sovuqdan saqlash uchun ularni paxtaga orab, isitgichga qoyib olib borish lozim. 6. Qanday usulda olinishidan qati nazar, material ikkita kosachaga olinishi lozim. 7. Qoshimcha mikrofloradan ozod bolish uchun KUA muhitiga penitsillin shpatel bilan yoyiladi. Asosiy tekshirish usuli Mikrobiologik. Òekshirishning birinchi kuni. Olingan tekshirish materiali KUA oziqa muhitiga ekiladi, termostatda 37°C haroratdan 5 kunga qoldiriladi. Ertasi kunidan boshlab tekshiriladi. Oziqa muhiti qurib qolmasligi uchun termostatga idishda suv qoyiladi. Òekshirishning ikkinchi-uchinchi kunlari. Ekilgan muhitlar termostatdan olib kozdan kechiriladi. Shubhali koloniyalarni lupa yoki sterioskopik mikroskop ostida tekshiriladi. Shubhali koloniyalar aniqlansa, sof kulturasini ajratib olish uchun sektorlarga bolingan kosachadagi KUA muhitiga yoki probirkadagi KUA qiyshiq agariga ekiladi. Shubhali koloniyalar kop bolsa, surtma preparat tayyorlab, Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Agarda Grammanfiy mayda tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Buyum oynachasi ustida monospetsifik 7-avlod zardobi bilan agglutinatsiya reaksiyasi qo- yiladi. Reaksiya musbat bolsa, kultura Bordetella avlodiga tegishli degan xulosaga kelinadi. Bordetellaning turini aniqlash uchun 1 va 14-mono- spetsifik tur zardoblari bilan agglutinatsiya reaksiyalari qoyiladi. Bironta zardob bilan reaksiya musbat bolsa, taxminiy javob berish mumkin. Òekshirishning tortinchi kuni. Ekilgan muhitlar termostatdan olib kozdan kechiriladi. Avval muhitning rangiga etibor beriladi (muhit jigarrang tusga kirdimi), songra sterioskopik mikroskop ostida osgan kultura tekshiriladi. 255 Shubhali koloniyadan olib surtma preparat tayyorlanadi. Gram usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Songra sof kultura hamda mono- spetsifik avlod va tur zardoblari bilan yana agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. B. pertussis bilan reaksiya musbat bolsa, uning serovarini aniqlash uchun monospetsifik 1, 2, 3-zardoblari bilan reaksiya qoyiladi. Agar 1, 2, 3-zardoblar bilan reaksiya musbat bolsa, birinchi serovar; 1, 2, 0 da shunday bolsa, ikkinchi; 1, 0, 3 da musbat bolsa, uchinchi serovar deyiladi. Serovarni aniqlash epidemiologik jihatdan katta ahamiyatga ega. Òoliq tashxis qoyish uchun ureaza va tirozinaza sinamasi qoyiladi. Ureaza sinamasini qoyish. Probirkaga 0,30,4 ml 2 % li mochevina eritmasi, 23 tomchi fenolftalein va bakteriologik qovuzloqda sof mikrob kulturasidan qoshiladi. Probirka biroz chayqatilib termostatda qoldiriladi. Natija 2 va 24 soatdan keyin oqiladi. B.pertussis muhitning rangini ozgartirmaydi, B.parapertussis ureaza fermentini ajratadi va bu ferment mochevinani ammiakkacha parchalaydi. Ammiak indikatorning rangini ozgartiradi, natijada muhitning rangi ham ozgaradi. Òirozinaza sinamasini qoyish. 0,1 % tirozin qoshilgan qiyshiq goshtli-peptonli agarga sof kultura ekiladi va termostatda qoldiriladi. Ertasi kuni u termostatdan olib kozdan kechiriladi. Agar muhitning rangi jigarrang tusga ozgarib, kultura osgan bolsa, bu yerda B.para- pertussis bor, degan xulosaga kelinadi. B.pertussis bu muhitda osmaydi. Òekshirishning beshinchi kuni. Natija oqiladi. Agar shubhali koloniyalar aniqlanmasa, salbiy javob beriladi. Òezlashtirilgan usul Bakteriologik tekshirish usulida natija 34 kundan keyin beriladi. 1. Immunologik luminessent usulida natijani bir necha soatdan keyin berish mumkin. 2. Òekshirish materiali ekilgan KUA muhitida mikrob kulturasi osmagan bolsa ham, undan surtma preparat tayyorlanadi. Buning uchun steril rezina tampon muhitning yuzasiga va yogsizlantirilgan buyum oynachasiga tekkiziladi. Preparat immunofluoressent usulida tekshiriladi. Agar B.pertussis yoki B.parapertussis aniqlansa, javob beriladi. 1. Kokyotalga shubha qilinganda qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Qoshimcha mikroflora osmasligi uchun oziqa muhitiga nima qoshiladi? 3. B.pertussis va B.parapertussislarni farqlash uchun qanday serologik reaksiya qoyiladi? ? Nazorat uchun savollar 256 32-bob. PAÒOGEN KORINEBAKÒERIYALAR BOGMA QOZGAÒUVCHISI Bogma qozgatuvchisi korinebakteriya avlodiga kiradi (coryna tognagich, diðhthera parda manosini bildiradi). Bu avlodga odamlar uchun patogen va patogen bolmagan qozgatuvchilar kiradi, yani soxta bogma qozgatuvchisi va defteriodlar. Bogma qozgatuvchisini 1883-yili Ò. Klebs aniqlagan, sof kulturasini 1884-yili F. Leffler ajratib olgan. Morfologiyasi. Òayoqchasimon bakteriyalar bolib, 36x0, → ← 30; 5 mkm kattalikda, uchlari biroz kengaygan, uchlarida volyutin donasini saqlaydi (BabeshErnst donachasi). Harakatsiz, spora va kapsula hosil qilmaydi. Grammusbat bolib, volyutin donachalari biroz toqroq boyaladi. Surtmada ular X yoki V raqamiga oxshab joylashadi. Soxta bogma qozgatuvchilari alohida joylashib, uchlarida volyutin donachalari bolmaydi yoki ular bir uchida joylashadi. Boyashda ishqorli metilenli kok yoki kristall binafsha boyoqlaridan foydalaniladi. Kultural xossasi. Fakultativ anaerob, pH 7,47,8. Oziqa muhitiga talabchan, qon, zardobli muhitlarda yaxshi rivojlanadi. XIX asr oxirida fransuz olimi E. Ru bogma qozgatuvchilarini ostirish uchun ivitilgan buqa yoki ot zardobini qollashni tavsiya etdi, F. Leffler esa unga (24 %) shorva va 1 % glukoza qoshishni taklif qildi. Bu muhitda bogma qozgatuvchisi 1418 soat ichida alohida, bortib chiqqan, krem rangli (qiyshiq agarda shagren teriga oxshash) koloniya hosil qilib osadi. Lekin bu muhitda bogma tayoqchalarini soxta bogma qozgatuvchilaridan farqlash mumkin emas. Hozirgi vaqtda bogma qozgatuvchilarini ostirish uchun Klaubarg muhiti (qon zardobi va kaliy tellurit saqlovchi), xinozolin, Buchin muhiti, Òinsdal va boshqa muhitlar qollanilmoqda. Kultural va biokimyoviy xossasiga kora, bogma qozgatuvchisi 3 ta biovarga bolinadi: 1. Gravis (gravis). 2. Mitis (mitis). 3. Intermedius (intermedius). Klauberg muhitida Gravis tiði R shaklli, yirik 23 mm kattalikda, kulrang-qora koloniyalar hosil qilib osadi. Bulyonda bolinib ketuvchi parda va donador chokma hosil qilib osadi. Mitis tiði Klauberg muhitida ortacha, silliq, S shaklli koloniya hosil qilib osadi, qora rangda boladi. Shorvada bir tekis loyqalanish hosil qilib osadi. Intermedius tiði Klauberg muhitida mayda, yaltiroq, qora koloniya hosil qiladi. 257 Fermentativ xossasi. Har uch tur ham sistinaza fermentini ishlab chiqaradi va sistinni vodorod sulfitgacha parchalaydi. Hammasi glukoza va maltozani kislotagacha parchalaydi. Faqat gravis turi kraxmalni parchalaydi. Ularning hammasi indol hosil qilmaydi, mochevinani parchalamaydi. Neyraminidaza, gialuronidaza va boshqa patogen fermentlarni hosil qiladi. Òoksigenligi. Virulent shtammlari ekzotoksin ishlab chiqaradi. Kimyoviy jihatdan termolabil, oqsil tabiatli, 2 ta fraksiyadan iborat. Bfraksiyasi oziga sezuvchan toqimalarga toksinni fiksatsiya qilsa, Afraksiyasi esa toksik tasirchanligiga javobgardir. Bu toksin buyrak osti beziga, yurak muskullariga tasir korsatadi. Òoksinning bor- yoqligini zich oziqa muhitida ham organish mumkin. Bu usul amaliyotda keng qollaniladi. Bogma toksini kam chidamli. U yuqori harorat, nur va kislorod tasirida tez parchalanadi. Òoksinga formalin (0,30,4 %) qoshilgandan song 3738°C da bir necha hafta saqlanganda u anatoksinga aylanadi. Bunda toksin zaharli xossasini yoqotib, antigenlik xossasini saqlab qolgan boladi. Òurli xil shtamm- lardan hosil bolgan toksinlar bir-biridan farqlanmaydi va bogma anatoksini tasirida neytrallanadi. Antigenligi. Bogma qozgatuvchisining yuzaki, oqsil tabiatli termolabil antigeni va turlarning spetsifik polisaxarid Oantigeni mavjud. Bundan tashqari, 19-fagovari bolib, ular qozgatuvchilarni farqlashda, infeksiya manbaini aniqlashda qollaniladi. Chidamliligi. Òashqi muhitga chidamli. Bolalar oyinchogida bir necha kun, ivigan zardobda uy haroratida 2 oygacha saqlanadi. Past haroratga quritishga ancha chidamli, 60°C harorat tasirida 1015 da- qiqadan, 100°C tasirida bir daqiqadan song, dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Patogenligi. Òabiiy sharoitda hayvonlar bogma bilan kasallan- maydi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachalari, quyonlar sezuvchandir. Ularga yuqumli material teri ichiga yoki teri ostiga yuborilsa, toksikoinfeksiyaning klinik belgisi va yuqumli material yuborilgan joyda shish, nekrotik yalliglanish yuzaga keladi. Buyrak usti bezida qon quyilishi kuzatiladi. Infeksiya manbai. Kasal odam va bakteriya tashuvchilardir. Òarqalish yoli. Havo-tomchi yoli, maishiy kontakt (idish-tovoq, oyinchoq, kitob, sochiq va b.) yol orqali tarqaladi. Odamda tomoq, burun bogmasini keltirib chiqaradi. Kam hollarda traxeya, bronx, koz, quloq, qin va teri bogmasini keltirib chiqaradi. Patogenezi. Nafas shilliq pardalari va shikastlangan teri orqali organizmga kiradi. Yashirin davri 25 kun. Shilliq pardada bolinib kopayadi, nekroz keltirib chiqaradi. Parda hosil qiladi, parda oz tagidagi toqimaga mustahkam yopishgan boladi. Mahalliy fibrinoz 258 yalliglanish va ekssudat toplab, tampon yoki shpatel yordamida pardani olganda qonaydi. Qozgatuvchi ozidan ekzotoksin ishlab chiqaradi va shilliq qavatidagi yalliglanish jarayoni burun, halqum shilligi orqali bronxga tarqaladi, asfiksiyani keltirib chiqaradi. Immuniteti. Organizmning kasallikka berilmasligi antitoksik va antibakterial immunitetga bogliq. Emizikli bolalar onadan otgan passiv immuniteti bolganligi sababli kasallanmaydilar. Antitoksik immunitet borligini Shik reaksiyasi yordamida aniqlanadi. Reaksiyani qoyish uchun dengiz chochqachasini olimga olib keluvchi minimal doza 1/40 D/M 0,2 ml fiziologik eritmaga aralashtirilib, bilakning ichki tomoniga yuboriladi. Yuborilgan joyda 2448 soatdan song 2 sm kenglikda qizarish va shish hosil bolsa, qonda antitoksin yoqligidan dalolat beradi. Qonda antitoksin bolsa qizarish va shish bolmaydi, chunki qondagi antitoksin yuborilgan toksinni neytrallaydi. Kasallikdan song immunitet hosil boladi. Lekin 67 % hollarda qayta kasallanish hollari kuzatiladi. Òoksin qonda aylanib, yurak mus- kuli, buyrak usti bezi va nerv toqimasiga tasir korsatadi. Bogma bu toksikoinfeksiyadir. Kasallikni ogir otishi shtammning toksigenlik darajasi va organizmning himoya kuchiga bogliq. Maxsus profilaktikasi. Bolalar 12 oyligidan boshlab AKDS anatoksini bilan emlanadi. Revaksinatsiya ADS bilan olib boriladi. Umumiy profilaktikasi. Bemorlarni vaqtida aniqlash, tashxis qoyish, izolatsiya qilish. Dezinfeksiya choralarini qilish. Bakteriya tashuvchilarni aniqlash. Davosi. Antitoksik zardoblar bilan davolanadi, antimikrob prepa- ratlar beriladi. 1. Bogma korinebakteriyalarning morfologiyasi qanday va qanday biovarlari mavjud? 2. Bogma bakteriyalar qanday muhitda ostiriladi va qanday osadi? 3. Bogma biovarlari qanday uglevodlarni parchalashiga qarab farqlanadi? 4. Bogma kasalligi qanday yuqadi? 5. Bogmaning spetsifik profilaktikasi qanday? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Halqum shilliq qavatidan ajratma. 2. Burun shilliq qavatidan ajratma. 3. Koz shilliq qavatidan ajratma. ? Nazorat uchun savollar 259 4. Quloqdan yiring. 5. Qin shilliq qavatidan ajratma. 6. Jarohatdan ajratma. Òekshirish materiali yalliglanish jarayonining qayerdaligiga qarab olinadi. Tekshirish materialini toplash Jarayon qayerda bolishiga qaramasdan, albatta, burun va hal- qumdan shilliq olib tekshiriladi. Òekshirish materiali paxta tampon yordamida olinadi. Buning uchun alumin sim olinadi va bir uchiga mahkam qilib paxta oraladi. Òamponni probirkaga joylab Paster (quritish) shkafida 160°C haroratda 1 soat davomida yoki avtoklavda 112°C haroratda sterilizatsiya qilinadi. E s l a t m a : 1. Òekshirish materiali och qoringa yoki ovqat- langan bolsa, kamida 2 soatdan song, agar antibiotik yoki boshqa antibakterial preparatlar qabul qilgan bolsa, 4 kundan keyin olinadi. 2. Agarda burun va halqumdan surtma olinsa, ikkalasini ham yozib va boglab qoyiladi. Ikkalasi ham alohida ekiladi va mustaqil ravishda tekshiriladi. 3. Quruq tampon yordamida olingan tekshirish materiali 23 soat ichida tekshirilishi lozim. Kerak bolgan hollarda laboratoriyaga jonatilayotganda tamponni 5 % li glitserin aralashmasi yoki fiziologik eritma bilan namlanadi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Mikrobiologik. 3. Biologik. Òekshirishning birinchi kuni. Davolovchi shifokor talabiga asosan, tekshirish materiali olingan tampondan surtma preparat tayyorlanib, boyab mikroskop ostida tekshiriladi. Mikroskop ostida bogma a g e h c g n i n m s i q n a g n a lt a h o r a J - a v n a d i s a r m a t n a d i m s i q q il li h s - a d i m a d r o y n o p .i d a n il o a tt i B n a li b n o p m a t g n i n n u r u b ik a l a k .i d a n il o n a d i g i h s e t .i d a n il o n a li b n o p m a Ò n o p m a Ò k i g o l o i z if a d a m ti r e a n m i d a n a l a v .i d a n il o g n i r i y .i d a n il o n a li b n o p m a Ò Halqumdan shilliq. Burundan shilliq. Kozdan shilliq. Quloqdan yiring. Qindan shilliq va jarohatdan ajratma. 260 qozgatuvchisining morfologik korinishi aniqlansa, taxminiy diagnoz qoyiladi. Òekshirish materialini Klauberg yoki boshqa maxsus oziqa muhitlariga ekiladi. Ekilgan kosacha termostatda 37°C haroratda 2448 soat qoldiriladi. Òekshirishning ikkinchi kuni. Ekilgan muhit termostatdan olinib, kozdan kechiriladi. Muhit tarkibida ayrim ingibitorlar bolishi sababli Klauberg muhitida bakteriyalarning osishi sekinlashadi. Bunday hollarda kosachalarni yana termostatda 24 soat qoldiriladi. Òekshirishning uchinchi kuni. Kosachani termostatdan olib, lupa yoki sterioskopik mikroskop yordamida tekshiriladi. Klauberg muhitida gravis turi qora-kulrang R shaklli, mitis turi orta olchamli, silliq, qora rangli, S shaklli, intermedius turi yaltiroq, mayda, qora koloniya hosil qilib osadi. Shubhali koloniyadan olib, sof kulturani ajratish uchun 25 % li zardob saqlovchi muhitga ekiladi. Sistinaza fermentini aniqlash sinamasi, Gele pretsepitatsiya reaksiyasi qoyiladi. Bu sinamalar, albatta, otkazilishi shart bolgan sinamalarga kiradi. Agar shubhali koloniyalar bilan qoyilgan sinama natija bermasa, bu sinamalar sof kultura bilan qaytadan qoyiladi. Sistinaza sinamasini qoyish. Probirkadagi tik Pizu muhitiga sof kultura sanchib ekiladi, termostatda 37°C haroratda 1824 soat qoldiriladi. Vaqt otgach olib tekshiriladi. Reaksiya musbat bolsa ekilgan yerda qora ozak va uning atrofida qora bulutga oxshash osish hosil boladi. Bu qorayish qozgatuvchi ishlab chiqargan sistinaza fermenti Pizu muhiti tarkibidagi sistinni vodorod sulfitgacha parchalashi natijasida hosil bolgan oltingugurtning qorgoshin asetati bilan reaksiyaga kirishadi va qora rangli qorgoshin sulfitining hosil bolishi natijasidir. Soxta bogma qozgatuvchisi va difteroidlar sistinaza fermentini saqlamaydi va shu sababli Pizu muhitida osganda muhitning rangini ozgartirmaydi. Ekzotoksinni aniqlash. Bu reaksiya toksin va antitoksin tasiriga asoslangan. Reaksiyani qoyish uchun Petri kosachasiga pH 7,8 ga teng eritilgan va 50°C gacha sovitilgan Marten agaridan 1215 ml solinadi. Marten muhitida ekzotoksin yaxshi ajraladi. Bu muhitdan reaksiyaga kop qoyish mumkin emas, chunki qalin muhitda pretsi- ðitat chizigi yaxshi korinmaydi. Muhit qotgandan song unga antitoksin zardobi shimdirilgan steril filtr qogozi ornatiladi. Qogozning ikki tomoniga, undan 0,50,7 sm uzoqlikda, dia- metri 0,81,0 sm.ga teng holda tekshirilayotgan mikrob kulturasi aylanma holida ekiladi. Unga parallel holda malum toksinli mikrob kulturasi ekiladi. Shu tartibda 46 ta kulturani ekish mumkin. Muhitni termostatda 37°C haroratda 1824 soatga qoldiriladi. 261 Vaqt otgach olib tekshiriladi. Malum toksinli mikrob kulturasi ozidan toksin ishlab chiqarishi sababli pretsiðitat chiziqchasini hosil qiladi. Òekshirilayotgan mikrob kulturasi ham toksin ishlab chiqarsa, u ham pretsiðitat chiziqchasini hosil qiladi va bu chiziqchalar bir- biri bilan tutashadi hamda reaksiya musbat deyiladi. Òekshirilayotgan mikrob kulturasi toksin ishlab chiqarmasa, pretsiðitat chizigini hosil qilmaydi, hosil qilsa ham ular tutashmaydi yoki kesishib ketadi va reaksiya manfiy deyiladi. Antitoksin shimdirilgan qogozni tayyorlash. Olchami 1,5x0,8 sm.ga teng, bir nechta filtr qogozi qirqib olinadi va avtoklavda 120°C haroratda 30 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Reaksiya qoyishdan avval steril pinset yordamida qogoz olinadi va steril kosachaga solinib, ustiga antitoksik zardobi qoyib shimdiriladi. Zardob taxminan 1 ml.da 500 antitoksin borligini saqlaydigan holda suyultiriladi. Qogoz 0,25 anti- toksin birligi bilan namlanadi. Antitoksik zardobi shimdirilgan filtr qogoz muhit ustiga qoyiladi va yuqorida aytilgandek ishlar olib boriladi. Òekshirishning tortinchi kuni. Ekilgan muhitlar termostatdan olinib kozdan kechiriladi. Zardobli qiyshiq agardan olib surtma preparat tayyorlanadi. Leffler usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Mikroskop ostida bogma qozgatuvchisiga xos tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, Pizu muhitida qora ozak va atrofida qora bulutga oxshash osish bolsa, Geldagi pretsiðitatsiya reaksiyasi musbat bolsa, taxminiy tashxis qoyiladi va tekshirish ishlari davom ettiriladi. Òoliq tashxis qoyish uchun muhit glukoza, saxaroza, kraxmalli muhitga va mochevinali shorvaga ekiladi. Mochevinaga sinama. Sof kulturadan olib, indikator (krezol qizili) va mochevina qoshilgan shorvaga ekiladi, termostatda qoldiriladi. 3040 daqiqadan song natijani oqish mumkin. Agar tekshirish materialida chin bogma qozgatuvchisi bolsa, muhitning rangi ozgar- maydi, chunki ular ureazani saqlamaydi. Soxta bogma qozgatuvchisi bolsa, ureazani saqlashi sababli u mochevinani parchalaydi, natijada indikatorning rangi ozgarib, muhit qizil rangga kiradi. Òekshirishning beshinchi kuni. Natija oqiladi. Bogma qozgatuv- chisining uchala biovari ham glukozani kislotagacha parchalaydi, saxarozani parchalamaydi, sistinaza fermentini saqlaydi. Ureazani saqlamaydi, toksin ajratadi. Faqat gravis turi kraxmalni parchalaydi. Òelluritli Klauberg muhiti. Birinchi aralashma: 1,5 oy avval 20 ml qoy yoki ot qoni va 10 ml glitserin bilan aralashma tayyorlanadi. Muhit tayyorlanadigan kuni yana ikkita boshqa aralashma ham tayyorlanadi. Ikkinchi aralashma: pH 7,5 ga teng bolgan 50 ml hajmdagi gosht- peptonli agar eritiladi va 50°C gacha sovitiladi. Shundan song unga 2,5 ml hajmda birinchi aralashma qoshiladi. Uchinchi aralashma: 262 17 ml qoy qoni va 33 ml distillangan suv qoshilib, aralashma tayyor- lanadi (aralashma steril bolishi lozim) va suv hammomida 50°C haro- ratgacha qizdiriladi. Ikkinchi va uchinchi aralashma birlashtiriladi, unga 4 ml 1 % li kaliy telluriti eritmasi (K 2 ÒeO 3 ) qoshiladi, hammasi tezda aralashtiriladi va kosachalarga quyiladi. Muhit tiniq, qizil musallas rangiga oxshash boladi. Pizu muhiti. 90 ml 2 % li GPA (pH 7,6) eritiladi va unga 2 ml sistin eritmasi (1 % li sistin eritmasi +0,1 % li sulfat kislota) qoshiladi. Muhit 112°C haroratda 30 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Ushbu muhitni eritib, 50°C gacha sovitgach, unga 1 ml 10 %li qorgoshin asetati eritmasi qoshiladi, songra ikki marotaba bug oqimi ostida sterilizatsiya qilinadi. Keyin esa unga 9 ml normal ot zardobi qoshilib aralashtiriladi va muhit steril sharoitda 2 ml.dan probirkaga qoyiladi. Muhitga tekshirish materiali, odatda, sanchib ekiladi. Òinsdal muhiti. 100 ml 2 % li gosht-peptonli agar eritiladi va 50°C gacha sovitiladi: 1) 12 ml 0,1 % li sulfat kislotadagi 1 % li sistin eritmasi qoshiladi. 2) 12 ml 1 % li natriy gidroksidi eritmasi qoshiladi. 3) 1,8 ml 2 % li kaliy telluriti eritmasi qoshiladi. 4) 1,8 ml 2,5 % li natriy giðosulfiti eritmasi, 20 ml normal ot zardobi yoki buqa zardobi qoshiladi. Har bir eritma qoshilgandan keyin muhit yaxshilab aralashtiriladi. Muhit solingan kosachalar 34 kun 10°C da saqlanadi. 1. Bogma qozgatuvchisini aniqlash uchun qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Burun va yutqindan tekshirish materiali qanday olinadi? 3. Klauberg muhitidagi shubhali koloniyalar qanday asbob yordamida organiladi? 4. Ajratib olingan kulturani bir-biridan toliq farqlash uchun qanday tekshirishlar otkaziladi? 5. Bogma qozgatuvchisining toksigenlik xossasi qanday usulda aniqlanadi? 33-bob. PATOGEN MIKOBAKTERIYALAR. SIL QOZGATUVCHISI Ozbekistondagi sil boyicha kuzatilgan vaziyatni hisobga olib, Sogliqni saqlash vazirligi 2003-yilning 3-aprelida silga qarshi kurash- da amaliyotdagi DOÒS strategiyasini tatbiq etish togrisidagi 160-buyruq- ? Nazorat uchun savollar 263 ni chiqardi. Bu buyruqqa asosan, olib boriladigan silga qarshi tadbir- larni otkazishda shahar va tuman poliklinikalarida, ShVP, QVP, QVAlarida, feldsherlik punktlarida, silga qarshi dispanserlarda ish- layotgan orta tibbiyot xodimlari: feldsherlar va hamshiralarning vazi- falari katta. Sil muammosi. Oxirgi 30 yil davomida dunyo miqyosida sil boyicha vaziyat ogirlashib bormoqda. Bu holat, nafaqat rivojlanmayotgan, balki rivojlangan davlatlarda ham kuzatilyapti. 1993-yili Jahon Sogliqni Saqlash Òashkiloti (JSSÒ) dunyodagi sil boyicha vaziyatning tahlili asosida sil pandemiyasi xavfi tugil- ganligini elon qildi. Bu xavfni quyidagilar tasdiqlaydi: • • • • • dunyo aholisining uchdan biri (2 mlrd odam) sil bilan zararlangan; • • • • • har yili dunyoda 2 mln.ga yaqin shaxs sildan koz yumadi; • • • • • har yili dunyoda 8 mln.dan ortiq odam sil bilan kasallanadi; • • • • • Sharqiy Yevropada yiliga chorak millionga yaqin aholi kasallanadi; • • • • • ekvatorial Afrikada esa OIÒS tufayli kasallanganlar soni keskin ortib borib, yiliga 2 mln.ga yaqinlashmoqda; • • • • • Janubi-sharqiy Osiyoda kasallanish yiliga 3 mln.ga yaqinlash- moqda. Ozbekistonda ham songgi yillarda sil boyicha epidemiologik vazi- yat ogirlashmoqda. 20022004-yillarda sil bilan kasallanish 100000 aholiga 79,175,4 tani tashkil qildi. Shu yillarda sil tufayli kuzatilgan olim 100000 aholiga 12,310,1 ta boldi. Silning parchalanish bilan kechayotgan turlari kopaydi, oilaviy sil hodisalari kopaymoqda. 1998-yilda 100000 aholiga sil bilan kasallanish 58,0 va olim kor- satkichi 11,1 bolgan edi. Sil boyicha vaziyat yomonlashganligining sabablari quyidagi omillarga bogliq: • • • • • ijtimoiy-iqtisodiy; • • • • • ekologik; • • • • • biologik. Bundan tashqari, tashxis kechikib qoyilishi, diagnostik imkon- lar tanqisligi, dori vositalarining yoqligi yoki yetishmasligi, kopincha silga qarshi kurash tadbirlari samarali bolmasligiga olib kelmoqda. DOÒS strategiyasi Bugungi kunda silni nazorat qilish DOÒS strategiyasi (Directly Observed Treatment Short-Course bevosita tibbiy xodim nazorati ostidagi qisqa muddatli davolash kursi) eng samarali davolanish strate- giyasi va kasallikni nazoratga olish uchun eng qulay, deb tan olingan. 264 DOÒS strategiyasi Jahon Sogliqni Saqlash Òashkiloti (JSSÒ) tomo- nidan sil kasalligi keng tarqalgan davlatlarda silga qarshi kurashish uchun tavsiya etilgan. Hozirgi kunda bu strategiya jahonning 150 dan ortiq davlatida tatbiq etilgan. DOÒS strategiyasining asosiy tamoyillari: 1. Silni nazorat qilish borasidagi uzluksiz tadbirlarga hukumatning sodiqligi. 2. Silga shubha bolgan bemorlar orasida sil hodisalarini balgamni mikroskopik tekshiruvdan otkazish yordamida aniqlash. 3. Barcha sil hodisalarini standart tartiblar bilan davolash kursi davomida bevosita nazorat ostida davolash. 4. Muntazam va uzluksiz ravishda silga qarshi asosiy dori vositalari bilan taminlash. 5. Hisobga olish va hisobot berishda standart statistik shakllarini joriy etish. Òogri tatbiq etilgan holda DOÒS strategiya quyidagi imkonlarni yaratadi: • • • • • birinchi marta aniqlangan bemorlarning 85 % ini sogaytirish; • • • • • silning yuqumli turlari bilan kasallangan bemorlarni sogaytirish yoli bilan sil infeksiyasi tarqalishini oldini olish; • • • • • polirezistent (barcha dori vositalariga chidamli) sil rivojla- nishidan saqlanish; • • • • • ishga qobiliyatli yoshdagi aholi qatlamlari orasida sil tufayli olim va nogironlik holatlarini kamaytirish; • • • • • sil tarqalishini va aholini sil mikobakteriyalari bilan zararlanishini kamaytirish. Mikobakteriya (Mycobacteriaceae) oilasi azolarining barchasi ingichka, tayoqchasimon bolib, oziqa muhitlarida sekin osadi va shu xossasiga kora zamburuglarga oxshaydi. Mikobakteriyalar kislota, ishqor, spirtga chidamli, chunki ular tarkibida yog miqdori kop. Mikobakteriya avlodiga patogen va patogen bolmagan bakteriyalar kiradi. Mikobakteriya avlodiga odam uchun patogen bolgan sil va moxov (lepra) qozgatuvchilari kiradi. Sil hayvonlar, parrandalar, kemiruvchilar orasida keng tarqalgan. Sil tayoqchasining bir qancha turi tafovut etiladi. 1. Odamda kasallik chaqiruvchi qozgatuvchi Mycobacterium tuberculosis. 2. Yirik shoxli hayvonlarda kasallik chaqiruvchi Mycobacterium bovis. 265 3. Parrandalarda kasallik chaqiruvchi Mycobacterium avium. 4. Kemiruvchilarda kasallik chaqiruvchi Mycobacterium murium. 5. Sovuqqonlilarda kasallik chaqiruvchi qozgatuvchi ularga alohida atiðik mikobakteriya guruhi kiradi. Hozirgi vaqtda atiðik mikobakteriyalar bir necha xossasiga kora, tort guruhga bolinadi: I, II, III, IV (tuman klassifikatsiyasi boyicha). Ular sil qozgatuvchisiga qaraganda, oziqa muhitiga talabchan emas. Ular bir-birlaridan oziqa muhitiga nisbatan aloqasi, osish tezligi, pigment hosil qilishi, katalaza va peroksidaza faolligiga qarab farqlanadi: I va II guruh azolari odamda kasallik keltirib chiqaradi. Morfologiyasi. Sil tayoqchasi R. Kox tomonidan 1882-yilda aniqlangan. Ingichka tayoqchasimon 1,54x0,30,5 mkm kattalikda bolib, tashqi muhit omillarining tasiriga qarab uning bukilgan, kolbasimon, mayda tayoqchasimon shakllari ham uchraydi. Harakatsiz, spora va kapsula hosil qilmaydi. Grammusbat, Sil-Nilson usulida qizil rangga boyaladi. Kultural xossasi. Aerob. Oziqa muhitiga talabchan. 3738°C haroratda pH 5,87,0 li muhitda sekin rivojlanadi. Petranyani, Petrov, Leven- shteynIyensen, glitserinli muhitlarida yaxshi rivojlanadi. Glitserin sil qozgatuvchilarini osishini sekinlashtiradi. M. bovis glitseringa muhtoj emas. LevenshteynIyensen muhiti sil qozga- tuvchisini ostirishda keng qollaniladi. Hozirgi vaqtda Finna II muhiti keng qollanilmoqda. Finna II muhiti LevenshteynIyensen muhitidan asparagin orniga natriy glutamin moddasini saqlashi bilan farqlanadi. Bu muhitda sil qozgatuvchilari ancha tez osadi. Sil mikobakteriyalari muhitda R va S shakllarda osadi. R shakli virulentli hisoblanadi. Zich muhitlarda sil qozgatuvchisi R shaklli, quruq, gadir-budur, gul- karamga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Suyuq muhitlarda 1015 kundan keyin parda hosil qilib osadi. Parda sekin-asta qalinlashib burishgan, sochiluvchan bolib, ogirligidan chokmaga tushib ham qoladi va muhit tiniq qoladi. Fermentativ xossasi. Biokimyoviy xossasiga kora, kam faol. Proteolitik fermentlarni ishlab chiqaradi, oqsillarni, ayrim uglevodlarni parchalaydi, ureaza hosil qiladi. Lekin qozgatuvchining bu xossasi doimiy emas. Shuning uchun fermentativ xossasi boyicha diagnostikada ahamiyatga ega emas. Òoksigenligi. Ozidan endotoksin ishlab chiqaradi. Bu oqsil modda 1890-yili R. Kox tomonidan aniqlangan va tuberkulin, deb nomlangan. Òuberkulin allergenlik xossasiga ega. U sog organizmga toksigenik tasir etmaydi. Undan diagnostikada Mantu va Pirke allergik sinamalarni 266 qoyishda foydalaniladi. Shuning uchun yirik shoxli hayvonlarda kasallik chaqiruvchi tuberkulin turidan foydalaniladi. Sil qozgatuvchisining virulentlik shtammi alohida liðid kord omilni saqlaydi. U sil qozgatuvchilarini bir-biriga yopishtirish xossasiga ega va natijada orilgan sochga oxshab osadi. Antigenligi. Sil mikobakteriyasi oqsilli, yogli, polisaxaridli omillarni saqlovchi antigen saqlaydi. Bu antigen organizmda antitelo hosil qiladi. Lekin bu antitelolar kam konsentratsiyada aniqlanadi, shuning uchun diagnostikada ahamiyatga ega emas. Chidamliligi. Sil mikobakteriyasi spora hosil qilmaydigan bakteriyalar orasida eng chidamlisidir. Bu chidamliligi hujayra qobigida joylashgan yog moddasi hisobigadir. Òashqi muhitga chidamli. Qurigan balgamda 10 oygacha, 100°C harorat tasirida 4 daqiqagacha, UBN (ultrabinafsha nur) tasirida bir nechta soatgacha saqlanadi. Xloramin va xlor aralashmasiga sezgir. Sulema (1:1000), karbol kislota (5 %) tasirida bir necha kundan keyin nobud boladi. Patogenligi. M. tuberculosis ga odam juda sezgir bolib, hayvonlar, parrandalar kam sezuvchan. Sil qozgatuvchisiga laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachalari juda sezgir, ularda kasallik generalizatsiyalangan shaklda otadi va natija olim bilan tugaydi. M. bovis turiga yirik va mayda shoxli hayvonlar va uy hayvonlari juda sezgir bolib, odam kam sezuvchan, lekin bolalar kasal hayvonlarning sutini istemol qilishi natijasida kasallanishi mumkin. Laboratoriya hayvonlaridan quyonlar juda sezgir bolib, ularda kasallik generalizatsiyalangan shaklda otadi. M. avium parrandalar (tovuq, kabutar, fazan va b.)da kasallik keltirib chiqaradi. Lekin ayrim hayvonlar ham kasallanishi mumkin. Odamga kamdan kam yuqadi. Laboratoriya hayvonlaridan quyonlar unga sezgir boladi va ularda kasallik otkir shaklda otadi. M. murim ga kemiruvchilar, ayniqsa, dala sichqonlari sezuvchan. Laboratoriya hayvonlaridan bu tur qozgatuv- chiga quyonlar va dengiz chochqachasi sezgir bolib, kasallik ularda surunkali shaklda otadi. Infeksiya manbai. Odam, ayrim hollarda hayvonlar hisoblanadi. Òarqalish yoli. Havo-tomchi, havo changi, kam hollarda alimentar, vertikal yol orqali tarqaladi. Patogenezi. Sil kasalligining opka, oshqozon, ichak, buyrak, miya, suyak shakllari uchraydi. Havo-tomchi, havo changi orqali yuqqanda sil qozgatuvchisi birlamchi ochoqda domboqcha hosil qiladi. Domboqcha leykotsitlar, gigant toqimalar ichida sil qozga- tuvchilarini saqlaydi. Organizmning kasallikka qarshi kurashish kuchi yuqori bolsa, bakteriyalar biriktiruvchi toqima bilan oraladi. Uning ichidagi 267 qozgatuvchilar tirik qoladi va buni «Gona ochogi» deb ham ataladi. Kasallikning bu shakli yopiq shakl bolib hisoblanadi va bunda qozgatuvchilar organizmdan tashqariga chiqmaydi. Organizmning kasallikka qarshi kurashish kuchi susayganda domboqchada tomirlar bolmaganligi sababli biriktiruvchi toqima nekrozga uchraydi va qozgatuvchi boshqa toqimalarni shikastlab, kavernalar hosil qiladi. Natijada domboq suzmaga oxshab qoladi. Bu shakli ochiq shakl bolib hisoblanadi. Qozgatuvchi qonga soriladi va butun organizmga tarqaladi. Endi qozgatuvchi tashqi muhitga chiqa boshlaydi. Kopincha kasallik surunkali shaklda otadi. Sil alomatlari. Opka silining asosiy alomati, davomiyligi 23 hafta va undan koproq kuzatilgan balgamli yotal. U keltirilgan sil alomatlarning bittasi yoki bir nechtasi bilan birgalikda kuzatiladi: • tana vaznining kamayishi, tezda charchab qolish, isitma kotarilishi, tungi terlash, ishtaha yoqolishi, kokrak qafasidagi ogriqlar, hansirash, kop tupurish. Noopka sili bemorlarda kasallikni umumiy alomatlari kuzatilishi mumkin: • tana vaznining kamayishi, tezda charchab qolish, isitma kotarilishi, tungi terlash. Kasallikning boshqa alomatlari jarohatlangan azoga bogliqdir, masalan: • periferik limfa tugunlari jarohatlanganda ularning kattalashishi, bazan oqma yaralar kuzatiladi; • bogin va suyaklar jarohatida mahalliy shish va ogriqlar kuzatiladi; • sil meningitida kuchli bosh ogrigi, yuqori isitma, orqa boyin mushaklari rigidligi va uyquchanlik kuzatiladi. Immuniteti. Organizm zararlanganda infeksion immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Vaqtida kasallikka diagnoz qoyish, bemorni boshqalardan ajratish. Maxsus profilaktikasida, fransuz olimlari Kalmet va Geren olgan tirik BSJ vaksinasi qollaniladi. Bu vaksina yelkaning tashqi tomoni terisi ichiga yuboriladi. Revaksinatsiya 712 yoshda, song har 56 yilda 30 yoshgacha qilinadi. Sil hodisalarini aniqlash Silni aniqlashni ikki usuli mavjud: Faol usul odamlarni silga profilaktik tekshirish: • katta yoshdagi aholini fluorografik tekshiruvi; 268 • bolalar orasida Mantu sinamasini otkazish. Passiv usul tibbiy yordam uchun murojaat qilgan bemorlarning shikoyatlari boyicha sil kasalligiga gumon bolsa, ular orasida sil hodisalarini aniqlash. Silning oldini olish choralari quyidagilardan iborat: 1. Maxsus profilaktika: silga qarshi emlash va sil kimyoprofilaktikasi. 2. Sanitar profilaktika choralari: mamuriy choralar, atrof muhitni himoyalash, shaxsiy himoyalash choralari. 3. Ijtimoiy profilaktika. Silning oldini olishdagi maxsus choralar BSJ vaksinasi ichida tirik kuchsizlantirilgan sil mikobakteriyalarini saqlaydi, ular silga qarshi immunitetni yaratadi va kuchaytiradi. Vaksina tabletka shaklidagi 1 mg quruq modda sifatida ampulada chiqariladi va qollanilishdan avval 2 ml fiziologik eritma bilan eritiladi. Bir emlash dozasi 0,1 ml bolib, 0,05 mg quruq moddani saqlaydi. Yani, bir ampula vaksina eritmasi 20 dozani tashkil qiladi. Vaksina eritmasi chap yelkaning yuqori tashqi qismiga, teri orasiga yuboriladi. Vaksina yuborilgan joyda limon postlogi korinishidagi domboqcha paydo bolib, bir necha daqiqadan song sorilib ketadi. Emlash sohasida 24 haftadan song bortmacha hosil boladi, song uni markazida yiring yigilib, yuzaki yara paydo boladi. Bu ozgarishlar bola organizmining emlashga fiziologik javobi bolib, hech qanday davolashni talab qilmaydi. Yara ustida qotma paydo boladi va uning ostida 24 oy davomida yara bitadi va 5 mm olchamga loyiq bolgan chandiq hosil boladi. Chandiq hosil bolishi, silga qarshi immunitet rivojlanganligini dalilidir. Emlash texnikasi buzilganda va moneliklar hisobga olinmasdan emlash qollanilganda, asoratlar rivojlanishi mumkin: uzoq vaqt davomida chandiqlashmaydigan chuqur yaralar, sovuq abssess, kolloid chandiqlash va kam hollarda lifangit va qoltiq osti limfadenitlar. Bu holatlarda, albatta, ftiziopediatrga murojaat qilish kerak. JSSÒ tavsiyalariga kora, BSJ bilan 1 marta, faqat chaqaloqlar emlanadi. Ozbekistonda maxsus silning oldini olish choralari Sogliqni saqlash vazirligining «Ozbekiston Respublikasida yuqumli kasalliklar immunoprofilaktikasini tashkil qilish va otkazish qoidalari va meyorlari» (2002-yil) talablariga asosan, amalga oshiriladi. Emlash barcha soglom, 25 kunli chaqaloqlarda, BSJ vaksinasi bilan, pediatr korigidan song, moneliklar hisobga olingan holda amalga oshiriladi. Emlashga 269 moneliklar: vazni 1800 grammdan kam bolgan, chala tugilgan chaqaloqlar, tuguruq jarayonidagi ogir bosh miya jarohati, 3-darajali gemolikvorodinamika buzilishi. Vaqtinchalik moneliklar bartaraf etilgandan song, emlash 2 oylik chaqaloqlarga tekshiruvsiz, 6 oylik va 1 yoshdagi bolalarga Mantu sinamasi manfiy bolganda qollaniladi. Qayta emlash 1-sinfda (7 yosh) va 8-sinfda (1415 yoshda) Mantu sinamasi manfiy bolgan bolalarda, pediatr korigida moneliklar aniqla- gandan song qollaniladi. Qayta emlashdan song emlashga bogliq mahalliy ozgarishlar tezroq rivojlanadi va sonadi. Emlash xonasining hamshirasi 112/u-shaklda va emlashlarni qayd etish jurnalida BSJ bilan emlash togrisidagi malumotlar (emlash sanasi, emlash turi, BSJ vaksinasi seriyasini, dozasi)ni qayd etadi. Emlash xonasi hamshirasi 112/u-shaklni, undagi malumotlarni 063/u-shaklga kochirib olish uchun kartotekada ishlaydigan hamshiraga beradi. Sil kimyoprofilaktikasi. Kimyoprofilaktika sil tayoqchalarini ajratadigan bemor bilan muloqotda bolgan zararlangan shaxslarda kasallik rivojlanishining oldini olish maqsadida qollaniladi. JSSÒ tavsiyalariga kora, kimyoprofilaktika 6 oy mobaynida izoniazid bilan kundalik tartibda (5 mg/kg hisobidan), faqat opka sili bemorlari bilan muloqotda bolgan 6 yoshgacha bolalar uchun qollaniladi. Silning oldini olish sanitar himoya choralari. Sil mikobakteriyalarini atrof muhitda tarqalishini kamaytirish uchun va odamlar, ayniqsa, bemor bilan yaqin muloqotda bolgan oila azolari, sil bilan zararlanish xavfini kamaytirish uchun turli sanitar himoya choralari qollanadi. Bular qatoriga: 1. Bemor yashagan xonadondan sil mikobakteriyalarini tarqalishi- ning oldini olish choralari, yani sil mikobakteriyalarini ajratuvchi bemorlarni soglom shaxslardan ajratish va maxsus shifoxonalarda sogay- tirish, bemor balgamini, shaxsiy buyumlarini, yashaydigan xona- larini zararsizlantirish kiradi. 2. Shu bilan bir qatorda, silga qarshi muassasalardan sil mikobak- teriyalar tarqalishining oldini olish muhim ahamiyatga egadir. Buning uchun quyidagilar qollaniladi: 1. Mamuriy choralar. 2. Atrof muhitni himoyalash choralari. 3. Shaxsiy himoyalash choralari. Bular, ayniqsa, bemorlar bilan doimiy muloqotda bolgan tibbiyot xodimlari orasida silning oldini olish uchun muhimdir. 270 Mamuriy choralar. 1. Sil mikobakteriyalarini ajratuvchi bemorlarga quyidagi oddiy, majburiy harakatlarni bajarishni tavsiya etish: • yotal jarayonida ogizni qol bilan berkitish; • balgamni yigib olish uchun yoqib tashlasa boladigan kontey- nerlarni qollash. Agar shisha konteynerlar ishlatilsa, ularning ichidagi balgamni tokishdan oldin, zararsizlantirish vositalari bilan ishlov berish zarur; • ozi yotgan bolimdan chiqishdan oldin niqob tutish. 2. Ish joylari va bemorlar xonalarini havo xonalardan yolakka chiqmasdan kochaga chiqishi uchun, eshiklar yopilgan holatda shamollatish. Ob-havo sharoitidan kelib chiqqan holda tabiiy shamol- latishdan koproq foydalanish. 3. Ish joylarini va bemorlar xonalarini ultrabinafsha bakteriotsid nurlari bilan zararsizlantirish. 4. Iloji boricha, balgam yigish jarayonini ochiq havoda amalga oshirish. 5. Òibbiyot chiqindilarini yoqotishni xavfsizlik texnikasiga rioya qilgan holda amalga oshirish kerak. Òibbiyot chiqindilarini yoqotish uchun tibbiyot muassasasida quyidagilar mavjud bolishi zarur: a) chiqindilarni yoqotish uchun maydon; b) yumshoq chiqindilar uchun mufel pechkasi; d) tegishli zararsizlantirish vositalari; e) turli tibbiyot chiqindilarini yigish uchun maxsus konteyner- lar; f) tibbiyot chiqindilarini yoqotishga masul xodim, texnik xodimi. Atrof muhitni himoyalash choralari. Bemorlarni maxsuslashtirilgan bolimlarga joylash (musbat surtmali bemorlar, manfiy surtmali bemorlar, surunkali sil bilan kasallangan bemorlar). Shifoxonada mikobakteriya ajratuvchi bemorlar mikobakteriya ajratmaydigan bemorlardan alohida yotishlari kerak. Shaxsiy himoyalash chora-tadbirlari. Ish joylari tashkil qilinganda sil bilan zararlanish xavfi iloji boricha kamroq bolishiga etibor berish zarur. Bosh hamshira va hamshiralar boshqa xodimlar uchun ornak bolishlari kerak. Agarda, ular ish joylarida xavfsizlik texnikasiga rioya qilishsa, boshqalar ulardan namuna oladilar. Òibbiyot amaliyotida tuberkulinning standart eritmasi qollaniladi va uning har bir dozasi 2 ÒB saqlaydi. Òuberkulin bilakning old sathiga 271 teri orasiga yuboriladi. Sinama natijalari 72 soatdan song baholanadi va musbat natijali bolalar (5 mm va undan yuqori hajmdagi bortmacha) ftiziatrga yuborilishlari zarur. Faol sil bilan kasallangan bemor, davolanmagan holda orta hisobda yilida 1015 kishini sil bilan zararlaydi. Davosi. Antibakterial preparatlar: streptomitsin, rifampitsin, PASK, ftivazid va boshqalar beriladi. Bemorlarni dispanser hisobiga olinadi, oila azolari tibbiy korikdan otkaziladi, bemorlar sanatoriya, kurortlarda davolanadi. Aholini bir yilda bir marotaba tibbiy korikdan otkazib turish lozim. 1. Sil qozgatuvchisini kim va qachon aniqlagan? 2. Sil qozgatuvchisining qanday turlarini bilasiz va ularning qaysi biri odam uchun patogendir? 3. Sil qozgatuvchisining tashqi muhitga chidamliligiga nima sabab boladi? 4. Sil qozgatuvchisi qanday usulda boyab organiladi? 5. Sil kasalligining oldini olish uchun qanday ishlar olib boriladi? MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Opka va bronx silida balgam. 2. Opka va plevra silida plevradan ekssudat. 3. Ichak silida najas, assit suyuqligi. 4. Buyrak silida siydik. 5. Sil meningitida orqa miya suyuqligi. 6. Generalizatsiyalangan shaklida qon olinadi. Tekshirish materialini toplash Opka siliga gumon bolgan bemorlarda 3 ta balgam namunasi 2 kunda yigilishi va mikroskopiya tahlilxonasiga yuborilishi zarur: • birinchi namuna tashxis qoyish uchun bemor birinchi bor murojaat qilganda tibbiy xodim nazoratiga olinadi. Bu namuna murojaat joyida olingan namuna, deb nomlanadi; • ikkinchi konteyner (yonboshiga togri yozilgan belgilash malumotlari bilan) bemorning qoliga ertalabki balgam namunasi yigish uchun beriladi. Ikkinchi kunning tongida, uyqudan turgandan song, bemor erta tonggi namunani yigadi; ? Nazorat uchun savollar 272 • uchinchi namuna bemor erta tonggi balgam namunasini olib kelgan kuni tibbiyot xodimi nazoratida yigiladi. Balgam olayotganda, ortiqcha kishilar bolmasligi kerak. Balgam olishdan oldin tibbiyot xodimi bemorga otkazilayotgan muolajaning maqsadini tushuntirib, uning «Balgam topshirish uchun yollan- ma»sidagi (ÒB 05) toliqsiz malumotlarni yozib, royxatga olish daftarida qayd etgach, ustiga maxsus himoya kiyimi (odatdagi ishchi xalati ustidan boshqa xalat, tibbiyot qalpoqchasi, niqob, kleyonka fartuk va eng oxirida qolqop)ni kiyadi. Balgam yigish jarayonida: 1. Bemor ogzi, burun va tomogini suv yoki sodali aralashma bilan chayadi. Bu muolaja ovqat qoldiqlari va ikkilamchi florani yoqotishga yordam beradi. Song tibbiyot xodimi bilan birga, balgam olish maydonchasiga boradi, balgam yigish xonasida mexanik shamollatish moslamasi yoki katta ochilgan deraza yoniga. Agarda balgam ochiq havoda yigilishi qollansa, tibbiyot xodimi bemorni orqasida turishi kerak, bunda shamol orqadan esishi zarur. 2. Òibbiyot xodimi bemorga balgam chiqarish yolini orgatadi. 3 marta chuqur nafas olinadi, uchinchi martasida qattiq yotalib, balgam toza konteynerga toplanadi. Bemor 3 5 ml balgam yigishi lozim. Òibbiyot xodimi bemorning orqasida turib, muolajani bevosita kuzatishi kerak. 3. Bemordan konteynerni ogziga yaqin ushlashi va ehtiyotlik bilan idish ichiga tuplashni iltimos qilishi lozim. 4. Balgamning sifati nazorat qilinadi: balgam, odatda, quyuq va shilimshiq boladi, bazan esa suyuq chiriyotgan toqimalar ara- lashgan bolishi mumkin. Qon aralash balgam qizil yoki jigarrang boladi. Òupuk yoki burundan ajratilgan suyuqlik (mishiq) balgam ornini bosmaydi va tahlil uchun kam qimmatga ega. Agar yetarli hajmda balgam ajralmasa, muolajani takrorlash lozim. 5. Shuni etiborga olish kerakki, bemorlarning kopchiligi qisqa vaqtda opkaning chuqur qatlamlaridagi balgamni toplay olishmaydi. Buning uchun ularga koproq vaqt berish zarur. Bemor balgami yigilgandan song, imkon boricha tezroq maxsus mikroskopik tahlilxonaga yetkazilishi zarur. Balgam namunalari bemor songgi (3-chi) namunani topshirgandan keyin 2 ish kuni davomida tekshirilishi zarur. Òekshirish materialidan surtma preparat tayyor- laniladi, Sil-Nilsen usulida boyab mikroskop ostida tekshiriladi va natija quyidagicha beriladi: 273 Balgam ogzi keng shisha bankalarga yigiladi. Plevradan punktatni steril shpris yordamida olib, steril kolbaga solinadi. Najas steril bankaga olinadi. Siydik steril kateter yordamida steril kolbaga olinadi. Orqa miya suyuqligi aseptika qoidalariga rioya qilingan holda steril igna bilan 12 ta steril probirkaga olinadi. Ularning ogziga paxta-dokali qopqoq yopilib, xonada qoldiriladi. 24 soatdan keyin suyuqlik yuzasida parda hosil boladi va unda sil qozgatuvchilari toplanib qolgan boladi. Qon steril shpris yordamida 810 ml hajmda steril probirkaga olinadi. E s l a t m a : Òekshirish materiali olinadigan idishlarning qopqogi burab ochiladigan bolishi lozim. Òekshirish materiali olinadigan idishlar 20 daqiqa davomida 120°C haroratda avtoklavda sterilizatsiya qilinishi yoki 1 soat davomida qaynatilishi lozim. Asosiy tekshirish usullari 1. Bakterioskopik. 2. Bakteriologik. 3. Biologik. 4. Allergik. Bakterioskopik usul. Bemordan olingan balgam Petri kosachasiga qoyiladi va maxsus igna yordamida uning yiringli qismidan olib, ikkita buyum oynachasi orasida eziladi. Surtma havoda quritiladi, spirtovka alangasida fiksatsiya qilinadi. Sil-Nilsen usulida boyaladi va mikroskopning il m a d i h c a g a t o l s i K r a l a y i r e t k a b i n o s ) B h C K ( v u r o K i n o s r a l n o d y a m a ji t a N i s a m li p o t B h C K v u r o k 0 0 1 a d i n o d y a m r a l a y i r e t k a b il m a d i h c a g a t o l s i K y if n a m i d a m li p o t a s li p o t 9 1 v u r o k 0 0 1 a d i n o d y a m i d a li t a s r o k i n o s q i n a g n i n B h C K ) B h C K 5 , n a l a s a m ( 9 9 0 1 a s li p o t B h C K v u r o k 0 0 1 a d i n o d y a m + 1 ) v u r o k 0 0 1 B h C K 9 9 1 ( a s li p o t a d i n o d y a m 0 1 1 a s li p o t B h C K v u r o k 1 a d i n o d y a m + 2 ) a d i n o d y a m v u r o k r i b r a h ( 0 5 , a s li p o t B h C K 0 1 1 a d n a g li r o k i n o d y a m v u r o k p o k n a d 0 1 B h C K a s li p o t v u r o k 1 a d i n o d y a m + 3 ) a d i n o d y a m v u r o k r i b r a h ( , a s li p o t B h C K q it r o n a d 0 1 a d n a g li r o k i n o d y a m v u r o k 0 2 274 immersion sistemasida tekshiriladi. Bunda sil qozgatuvchisi alohida- alohida yoki top-top bolib qizil rangda korinadi. Agar qozgatuvchi korinmasa, ularni bir yerga toplash uchun flotatsiya usulidan foydalaniladi. Flotatsiya usuli. 1015 ml balgam 250 ml hajmli kolbaga solinadi va ustiga 0,5 % NaOH eritmasidan 1015 ml solinadi. Qopqoq bilan yopilib 510 daqiqa chayqatiladi. Bunda balgam gomogenlashadi. Gomogenlashgan balgam ustiga 100 ml distillangan suv va 0,5 ml ksilol, benzol yoki toluol solib 510 daqiqa chayqatiladi, songra ustiga kolba tolguncha, distillangan suv quyiladi. 30 daqiqadan song ksilol, benzol, toluol suvdan yengil bolganligi uchun sil bakteriyalari bilan birga suv yuzasiga qalqib chiqadi. Hosil bolgan qaymoqsimon pardani Paster piðetkasida tortib olinadi, undan surtma tayyorlab Sil-Nilsen usulida boyab, yana tekshiriladi. Bakteriologik usul. Qoshimcha mikrofloradan ozod bolish uchun tekshirish materiali qayta ishlanadi. Òekshirish materiali ustiga teng hajmda 10 % natriy fosfati qoshiladi va 37°C haroratda 24 soatga termostatda qoldiriladi. Vaqt otgach sentrifugalanadi, chokma usti- dagi suyuqlik dezinfeksiyalovchi eritmaga tokiladi. Chokma ustiga 1 ml natriy xlorid eritmasidan qoshiladi. Qayta ishlangan tekshirish materialidan olib, LevenshteynIyensen va Finna II muhitlariga ekiladi. Ekilgan muhit termostatda 37°C haroratda 2 oyga qoldiriladi va har 710 kunda tekshirib turiladi. 710 kunda oziqa muhit qurib qolmasligi uchun sham eritib quyiladi. Bu oziqa muhitida sil qozgatuvchisi R shaklli sogalga yoki gulli karamga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Òezlashtirilgan Prays usuli. Yogsizlantirilgan buyum oynachasida qalin tomchi surtmasi tayyorlanadi, quritiladi, 26 % sulfat kislotasi bilan qayta ishlanadi, steril fiziologik eritma bilan yuviladi. Song 1:41:8 nisbatgacha suyultirilgan va gemolizlangan sitratli qonga solib termostatda qoldiriladi. Bir necha kundan (3714) keyin olib, fiksatsiya qilinadi va Sil-Nilsen usulida boyab mikroskop ostida tekshiriladi. Bunda tulki dumiga yoki orilgan sochga oxshash qozgatuvchilar korinsa, sil qozgatuvchisi borligidan dalolat beradi. Biologik usul. Qayta ishlanmagan tekshirish materiali 35 % li steril sulfat kislotasi bilan qayta ishlanib, steril fiziologik eritmada yuviladi va sentrifugalanadi. Song tekshirish materialidan 11,5 ml olib, dengiz chochqachalarining qorin boshligiga, teri ostiga yuboriladi. Agar tekshirish materialida sil mikobakteriyalari bolsa, zararli material yuborilgan joyda yiringli yara hosil boladi, limfa tugunlari shishadi. Ular yorib organiladi. Allergik usul. Mantu sinamasi: bilakning ichki tomoni terisi ichiga 0,1 ml tuberkulin yuboriladi. 48 soatdan keyin 5 mm kenglikda qizarish va shish hosil bolsa, sinama musbat deyiladi. 275 1. Sil qozgatuvchisini ostirish uchun qanday oziqa muhitidan foydalaniladi? 2. Balgamni oziqa muhitga ekishdan avval nima sababdan tozalanadi? 3. Zich va suyuq oziqa muhitida sil qozgatuvchisi qanday osadi? 4. Odamda sil kasalligini keltirib chiqaruvchi qozgatuvchiga qaysi hayvon sezuvchan? Oziqa muhitlari LevenshteynIyensen muhiti. Òuzli eritma: bir marta aralashtirish uchun kaliy fosfatidan 4 g, magniy sulfatidan 0,24 g, magniy sitratidan 10,6 g, asparagin 3,6 g, glitserin 1 ml, kartoshka uni 5 g, distillangan suv 600 ml olinadi. Reaktivlarni yuqorida korsatilgan tartib bilan solib, biroz qizdirib eritiladi va bug oqimi yordamida 2 soat sterilizatsiya qilinadi. Òuzli eritmani 34 haftaga yetadigan qilib tayyorlash mumkin. Òuxumli aralashma. 2427 dona (kattaligiga qarab) yangi tuxum oqar suvda sovunlab yuviladi va 30 daqiqaga 70° li spirtga solib qoyiladi. Spirtovka alangasi oldida ular munchoqlar solingan kolbaga yorib solinadi, yaxshilab aralashtiriladi va 1 litr tuxum aralashmasiga 600 ml yuqorida yozilgan tuzli eritmadan solinadi. Aralashma doka orqali filtratlanadi, songra 20 ml 2 % li sterillangan malaxitli yashil eritmasi qoshiladi va probirkalarga 5 ml.dan quyib chiqiladi. 85°C haroratda 45 daqiqa davomida ivitiladi. Finna II muhiti. Òuzli aralashma: magniy sulfati 0,5 g, natriy sitrati 1 g, temir ammiakli achchiq tosh 0,05 g, bir marta ara- lashtirilgan kaliy fosfati 20 g, bir marta aralashtirilgan ammoniy sitrati 20 g, bir marta aralashtirilgan natriy glutamati 5 g, glitserin 20 ml, distillangan suv 1 litr miqdorda aralashtiriladi. Reaktivlar, albatta, yuqoridagi tartibda iliq distillangan suvda aralashtiriladi. pH 6,36,5 ga togrilanadi, 1 atm bosimida 20 daqiqa avtoklavda sterilizatsiya qilinadi. Òuxumli muhit. 12 dona tuxum oqar suvda sovunlab yuviladi va spirtda 30 daqiqa saqlanadi. Steril munchoq solingan kolbaga ular chaqib solinadi, bir xil aralashma hosil bolguncha aralashtiriladi. 10 ml 20 % li malaxitli yashilning suvdagi eritmasi va 300 ml tuxumli eritma qoshiladi. Doka yordamida filtrlanadi va 85°C haroratda 30 daqiqa davomida ivitiladi. ? Nazorat uchun savollar 276 Sotonning sintetik muhiti. 200 ml distillangan suvga 4 g asparagin, 0,5 g temir sitrati, 2 g limon kislotasi, 0,5 g magniy sulfati, 0,5 g asosiy kaliy fosfati, 60 g glitserin, 800 ml distillangan suv qoshiladi. Patogen anaeroblar Patogen anaeroblar Bacillaceae oilasiga, Cloctridium avlodiga kiradi. Anaeroblarga kopgina guruh mikroorganizmlari kiradi, ular orasida qoqshol klostridiysi, gazli gangrena klostridiysi (polimikrob infeksiya), botulizm klostridiysi odam uchun patogen hisoblanadi. Patogen anaeroblar odam va hayvon ichagida yashovchi mikroorganizmlar hisoblanadi va tashqi muhitga najas bilan chiqarib turiladi. Spora shaklida ular tuproqda, dengiz va ariq suvlarida uchrab turadi. Patogen anaeroblar yirik tayoqchasimon, 49x0, 61,2 mkm kattalikda bolib, yangi kulturalardagi yosh mikroblar Grammanfiy bolib boyaladi, eski kulturalar esa Gram usulida boyalish xususiyatini yoqotadi. Klostridiylarning barchasi spora hosil qiladi, sporalar ovalsimon yoki yumaloq shaklda bolib, terminal, subterminal, markaziy holatda joylashadi. Kopchilik anaeroblar harakatchan bolib, xivchinlari peretrix joylashgan. Klostridiylar biologik faol bolgan ekzotoksin ishlab chiqaradi. Anaeroblarni ostirish usullari Anaeroblar kislorodsiz sharoitda rivojlanadi, shuning uchun ularni ostirishga tegishli sharoit yaratib berish lozim. Kislorodsiz sharoit fizikaviy, kimyoviy va biologik usulda yaratiladi. Fizikaviy usul. Mexanik usulda kislorodni yoqotish. Bu anaerostat yordamida olib boriladi. Anaerostat katta bolmagan silindr shakliga ega bolgan asbob. Germetik yopiladigan qopqogi bolib, unda havoni sorib olish uchun kran, qancha vakuum hosil bolganini aniqlash uchun vakuumometr bor. Òekshirish materiali ekilgan Petri kosacha- sidagi muhit anaerostat ichidagi torga ornatiladi va anaerostatning qopqogi germetik ravishda yopilib havosi sorib olinadi. Songra anaerostat termostatda qoldiriladi. Glukozali tik agarda ostirish. Òekshirish materiali glukozali tik agarga sanchib ekiladi va vodoprovod suvi ostida tez zichlantiriladi. Mikroorganizmlar havodan himoyalangan holda oziqa muhitining pastki qatlami, yani probirka tubida osadi. VinyalVeyon usuli. Eritilgan va 45°C gacha sovitilgan agarga tekshirish materiali Paster piðetkasida ekiladi, yaxshilab aralashtiriladi va piðetka tolguncha agar sorib olinadi. Piðetkaning ichiga havo kirib qolmasligi lozim. Piðetkaning uchi alanga yordamida kavsharlanadi va 277 paxtali idishga solib termostatda qoldiriladi. Piðetka ichida mikroblar koloniya hosil qilib osadi. Piðetkani qirqib, shubhali koloniya olib organiladi. Kimyoviy usul. Eksikator tubiga kislorodni yutuvchi kimyoviy moddalar, masalan, pirogalol, natriy gidropiriti va boshqalar solinadi. Eksikatorning keng qismiga teshik tor ornatiladi va uning ustiga tekshirish materiallari ekilgan muhitlar quyiladi, qopqogi yopiladi. Eksikator ichidagi kimyoviy moddalar kislorod bilan reaksiyaga kirishib, kislorodsiz sharoit yaratib beradi. Biologik usul. Aerob va anaeroblarni birgalikda ostirish, Petri kosachasiga 5 % li qonli agar solinib mikroblar aralashib ketmasligi uchun uning ortasidan ariqcha ochiladi. Agarning bir tomoniga aerob, ikkinchi tomoniga anaerob kulturalar ekiladi. Kosacha qopqogining orasiga eritilgan parafin quyiladi, termostatda qoldiriladi. Avval aerob mikroblar kislorodni yutib bolganidan song kosachadagi anaerob mikroorganizmlar osa boshlaydi. KittaÒarossi muhitida ostirish. 0,5 % li glukoza va gosht qo- shilgan muhit kultura ekishdan avval suv hammomida 10 daqiqa qaynatilib, uning tarkibidagi erigan kislorod chiqarilib yuboriladi. 45°C gacha tez sovitiladi va unga tekshirish materiali ekiladi. Kislorod bilan yana toyinib olmasligi uchun uning ustiga 11,5 sm kenglikda steril vazelin moyi quyiladi. Ekilgan muhit termostatda qoldiriladi. Oziqa muhitlari KittaÒarossi muhiti. Buqa jigari yoki goshti tograladi va unga uch barobar hajmda shorva quyiladi, pH 7,47,6 ga togrilanadi, 30 daqiqa qaynatiladi. Shorva filtrlanadi, jigarni esa torchaga solib suv bilan yuviladi, songra, 34 bolakchadan probirkalarga solib, ustiga 78 ml.dan shorva quyib chiqiladi. Avtoklavda 1 atm bosimi ostida 30 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Qonli agar. 3 % li GPA ga 12 % li glukoza qoshiladi. Unga pH 7,27,4 ga teng bolgan 1520 % li yangi defiorinlangan qoy yoki ot qoni qoshiladi. Kosachalarga quyiladi, 2030 daqiqa termostatda quritiladi. Muhit uchun 57 % miqdorda quyon yoki dengiz chochqachasining yuragidan steril sharoitda olingan qonni ham qollash mumkin. VilsonBler muhiti. 100 ml 1 % li glukoza qoshilgan 3 % li GPA suv hammomida eritiladi. 10 ml 20 % li natriy sulfati va 1 ml 8 % li temir xloridi eritmasi qoshiladi. Bu ikkala eritma ham steril distillangan suvda tayyorlanadi va qaynatiladi. Òayyor bolgan muhit 78 ml.dan probirkalarga quyib chiqiladi. 278 VillisXobbs muhiti. 400 ml Xottinger shorvasi, 4,8 g agar, 4,8 g laktoza, 1,8 ml 1 % li qizil neytral eritmasi yaxshilab aralash- tiriladi. Avtoklavda sterilizatsiya qilinadi va 5055°C gacha sovitiladi, songra unga 15 ml tuxum sarigining fiziologik eritmadagi aralashmasi va 60 ml yogsizlantirilgan steril sut qoshiladi. Tashqi muhitga chidamliligi Anaeroblarning vegetativ shakllari tashqi muhitga kam chidamlidir. Sporalari fizik va kimyoviy omillarga ancha chidamli boladi. Ularning turi va shtammiga qarab qaynatganda 1520 daqiqadan bir necha soatgacha saqlanadi. Ular past harorat va quritishga ancha chidamli. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida 1214 soatdan song nobud boladi. Lekin botulizm qozgatuvchining sporasi ancha chidamlidir. Anaeroblarning toksinlari yuqori harorat tasiriga, tik quyosh nuri va dezinfeksiyalovchi moddalar tasiriga sezuvchan boladi. Botulizm qozgatuvchisining ekzotoksini ancha ularga chidamli, qaynatganda 1520 daqiqadan song parchalanadi. 1. Anaeroblarni ostirish usullari qanday? 2. Anaerostat nima? 3. Anaeroblarni VinyalVeyon usulida qanday ostirish mumkin? 4. Biologik usulda anaeroblar qanday ostiriladi? 5. KittaÒarossi muhitida anaeroblar qanday ostiriladi? 34-bob. QOQSHOL QOZGAÒUVCHISI Clostridium tetani qoqshol qozgatuvchisini 1884-yilda Nikolayer aniqlagan, sof kulturasini 1889-yili Kitazato ajratib olgan. Morfologiyasi. Òayoqchasimon, uchlari dumaloq, 48x0,41 mkm kattalikda, yuqumli, harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan, kapsula hosil qilmaydi, qozgatuvchi nogora tayoqchasi shaklini berib turuvchi spora hosil qiladi. Gram yoki metilen koki bilan boyalganda qongiroqqa oxshab korinadi. Grammusbatdir. Kultural xossasi. Anaerob, kislorodga juda sezgir. Zich oziqa muhitida 34 kundan song R shaklli kulrang koloniya hosil qilib osadi. Òik agarda bugga oxshash, ayrim hollarda qora donga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Qonli agarda koloniya oz atrofida gemoliz zonasini hosil qiladi. KittaÒarossi muhitida loyqa tusida Vilson Bler muhitida qorayib osadi. ? Nazorat uchun savollar 279 Fermentativ xossasi. Kam aktiv. Uglevodlarni parchalamaydi. Nitratni nitritga qaytaradi, sutni sekin ivitadi, jelatinani sekin suyultiradi. Òoksigenligi. Ikki xil tetanospazmi va tetanolizin komponentlaridan tashkil topgan kuchli ekzotoksin ishlab chiqaradi. Òetanospazmni nerv toqimalarining harakatlanuvchi hujayralarini shikastlaydi, natijada muskullarning qisqarishiga olib keladi. Òetanolizin esa eritrotsitlarni gemolizlaydi. Ajratib olingan shorvadagi kulturaning 0,0000005 dozasi 20 g ogirlikdagi sichqonni oldiradi. Antigenligi. Ozidan somatik O antigeni H antigenini ishlab chiqaradi: H antigeniga kora 10serovarga, O antigeniga kora seroguruhlarga bolinadi. Chidamliligi. Vegetativ shakli 6070°C harorat tasirida 2030 daqiqa, sporasi qaynatilganda 11,5 soatdan keyin, dezinfeksiya- lovchi eritmalar tasirida 56 soatdan keyin nobud boladi. Òuproqda va boshqa buyumlarda sporalar uzoq vaqt saqlanadi, tik quyosh nurida bir necha soatdan keyin nobud boladi. Patogenligi. Òabiiy sharoitda qoqshol kasalligi bilan otlar va mayda shoxli hayvonlar kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan oq sichqonlar, quyonlar, kalamushlar unga sezgirdir. Kasallik belgilari: orqa oyoqlarining muskullari, songra tana muskullari va boshqalar qisqaradi. Yurak muskulining falajlanishidan bemor nobud boladi. Infeksiya manbai. Kopgina hayvonlar qoqshol qozgatuvchi- sining tashuvchisi bolib hisoblanadi. Odam va hayvon chiqindisi bilan bakteriyalar tashqi muhitga chiqarilib turiladi. Òarqalish yoli. Asosan, gonglangan tuproq orqali tarqaladi, mikroblar tanaga shikastlangan teri va shilliq pardalar orqali kiradi. Qoqshol jarohat infeksiyasi bolib hisoblanadi. Ikkinchi jahon urushi vaqtida qoqshol askarlar ortasida ayniqsa, keng tarqalgan edi. Urushda oqotar qurollardan kelib chiqqan jarohatlar tuproq yoki kiyim parchalari bilan qoqshol tayoqchalarining sporalari tushar edi. Shuning uchun qoqsholni urush davrining epidemiyasi, deb atashadi. Qoqshol yangi tugilgan chaqaloqlarda ham boladi (tetanus ne- onatorum). Kindik boglanayotgan vaqtda u toliq sterilizatsiya qilin- magan asboblar bilan ifloslansa, qoqshol tayoqchasining sporalari kindik orqali organizmga kiradi. Patogenezi. Spora jarohatlangan teridan kirib toqimalar ichida vegetativ shaklga otadi, ozidan ekzotoksin ishlab chiqaradi va u markaziy nerv toqimalariga tasir korsatib, harakatlantiruvchi kon- dalang-targil muskullarning qisqarishiga olib keladi. Yashirin davri 280 614 kun bolib, avval chaynov muskullari, song yuz mimika muskullarini zararlaydi va yuz qizarib, bemor soxta kulayotgan odamni eslatadi. Song qorin, tana va oyoq muskullari qisqaradi. Kopincha orqaning yozuvchi muskullari qorinning bukuvchi muskullariga qaraganda koproq qisqaradi. Natijada, bemor boshini orqasiga qayirib va belini havoza qilib yotadi, qorin muskullari esa taxtaday qotib qoladi. Bemorlarga faqat tegilgandagina emas, balki unga yorug tushganda, xonada shovqin qilinganda, unga qarab puflanganda ham reflektor qozgaluvchanlik keskin darajada oshadi, muskullar tortishib qisqaradi. Nafas muskullari qisqarishi natijasida asfikatsiyadan odam oladi. Immuniteti. Kasallikdan song immunitet hosil bolmaydi, chunki kasallik olim bilan tugaydi. Suniy immunitet organizmga anatoksin yuborish natijasida yuzaga keladi va u antitoksin immunitet hisoblanadi. Maxsus profilaktikasi. Bolalar 12 oyligidan boshlab AKDS bilan emlanadi. 12 yoshgacha revaksinatsiya qilinadi. Umumiy profilaktikasi. Jarohatlarni jarrohlik yoli bilan tozalash, asboblarni toliq sterilizatsiya qilish. Maxsus davosi. Muskul orasiga qoqsholga qarshi zardob yuboriladi. Immunoglobulin ham bunda yaxshi natijalar beradi. Antibiotiklardan tetratsiklin va penitsillin beriladi. 1. Qoqshol qozgatuvchisining morfologiyasi qanday? 2. Qoqshol qozgatuvchisining kultural va fermentativ xossasi qanday? 3. Qoqshol qozgatuvchisining toksigenlik va antigen xossasini bilasizmi? 4. Qoqsholning patogenezi. 5. Qoqsholning maxsus profilaktikasi va davosini bayon eting. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Jarohat mahsuloti. 2. Shikastlangan yerdan toqima bolakchasi va yot moddalar. 3. Profilaktik maqsadlarda jarrohlik boglov materiallari: ketgut, iðak va teri ostiga yuboriladigan preparatlar. 4. Òuproq. Tekshirish materialini toplash Jarohatdan, mahsulot agarda qattiq bolsa, pinset bilan, suyuq bolsa piðetka bilan olinadi. ? Nazorat uchun savollar 281 Òoqima bolakchasi va yot moddalar qopqogi mahkam yopiladigan shisha steril idishga solinadi. Etiketka yopishtiriladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Mikrobiologik. 3. Biologik. Qoqshol kasalligining diagnostikasi Òekshirish materiali Òekshirish usullari 1. Shikastlangan uchastkadan 1. Mikroskopik. bolakcha, yot moddalar. 2. Profilaktika sifatida 2. Biologik. xirurgik boglov materiallari. 3. Òuproq. 3. Bakteriologik. 1-kun. Òekshirish materialidan surtma tayyorlab, Gram va Ojeshko usulida boyab mikroskop ostida tekshiriladi. Agar Grammusbat bolgan sporali tayoqchasimon bakteriyalar korinsa, taxminiy tashxis qoyiladi va tekshirish ishlari davom ettiriladi. Òekshirish materiali steril hovonchada steril qum bilan ezilib, ustiga fiziologik eritma quyiladi. Hosil bolgan emulsiya ikki qismga bolinib, biri biologik, ikkinchisi bakteriologik usulda tekshiriladi va uning ustiga oziqa muhit solinib anaerostatda qoldiriladi. Biologik usul. Emulsiya toksin hosil bolishi uchun 1 soatga qoldiriladi. Ekstrakt paxta-dokali filtr orqali filtrlanadi, song ikki qismga bolinadi. Birinchi qismga qoqsholga qarshi antitoksin qoshilib, toksinni neytrallash uchun 1 soat qoldiriladi. Òajriba. Ikki juft sichqon olinib, bir juftiga antitoksin qoshilgan tekshirish materialidan orqa oyogi muskul ichiga 0,5 ml yuboriladi, ikkinchi juftiga ekstrakt yuboriladi. 23-kun. Sichqonlar kasallanmagan bolsa, nazorat davom etti- riladi, agar kasallansa yunglari tik turib, dumi karnayga oxshab qoladi, oldingi oyoqlari qisqarib, orqa oyoqlari uzayadi. Songra ularni yorib mikroskopik va mikrobiologik usullarda tekshiriladi. Anatoksin qoshil- gan ekstrakt yuborilgan sichqonlar tirik qoladi. Agar biologik usul natija bermasa, ekilgan oziqa muhitidagi shubhali koloniyalar tekshiriladi, sof kulturasini ajratib olish uchun Kitta-Òarossi muhitiga ekiladi. 282 4-kun. Ekilgan muhit tekshiriladi. Qoqshol qozgatuvchisi Kitta- Òarossi muhitida loyqalanib osadi. Ular mikroskopik, biologik usulda yana tekshiriladi. 1. Qoqshol kasalligida qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Qanday tekshirish ishlari qollaniladi? 3. Biologik sinama qoyilganda qanday natija bersa, qoqshol qozgatuvchisi bor deysiz? 4. Mikroskopik usulda tekshirganingizda qoqshol qozgatuvchisi qanday korinadi? 35-bob. GAZLI GANGRENA QOZGATUVCHILARI Gazli gangrena polimikrob infeksiya, bir, yani bir necha guruh mikroorganizmlar tasirida yuzaga keladi. Ular Bacillaceae oilasiga, Clostridium avlodiga kiradi. Mikrob guruhlarining asosiy azolari C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histolyticum, C. sordellii hisoblanadi. Kasallik odamda organizmga bitta yoki ikkita qozgatuvchi yoki qoshimcha aerob stafilokokk yoki streptokokk tushishi natijasida yuzaga keladi. Clostridium perfringens C. perfringens 1892-yilda Uelch va Nettolm tomonidan aniq- langan. Morfologiyasi. C. perfringens yirik polimorf tayoqchasimon, 39x0, ← 91,2 mkm kattalikdagi mikroblar. Harakatsiz. Organizm- dan ajratib olingan yangi kulturada kapsula aniqlanadi. Noqulay sharoitga tushganda ovalsimon spora hosil qiladi, markaziy yoki sub- terminal holatda joylashadi. Grammusbat boyaladi, eski kulturalar Gram usulida boyalish xossasidan mahrum. Kultural xossasi. C. perfringens anaerob, lekin kislorodga sezuvchan emas. Gosht va kazein qoshilgan muhitda yaxshi osadi. 3742°C haroratda, pH 7,27,4 sharoitida 38 soatdan keyin kop miqdorda gaz hosil qilib, pHni kislotali sharoit tomonga ozgartirib osadi. Zich oziqa muhitida C. perfringens R shaklli, gadir-budur, S shaklli silliq va shilliq, M shaklli koloniya hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida bir tekis loyqalanib va gaz hosil qilib osadi. Qonli agarda koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi C. perfringens letsitinaza, gialuronidaza, jelatinaza, kollagenaza va boshqa patogen fermentlarni ishlab chiqaradi. ? Nazorat uchun savollar 283 Òoksigenligi. C. perfringens murakkab tarkibli toksin ajratadi. U bir qancha toksinlardan iborat bolib, grekcha α , y, β va boshqa harflar bilan belgilanadi. Bulardan asosan, α -toksini aktiv toksigenlik xossasini saqlaydi. Antigenligi. C. perfringens beshta serovarlarga bolinadi va ular A, B, C, D, E kabi lotin harflari bilan belgilanadi. Bular bir-biridan antigenlik va biokimyoviy xossasiga kora farqlanadi. Aserovari odam ichagida doimo uchraydi va toksikoinfeksiya (ovqatdan zaharlanish) keltirib chiqarishi mumkin. B serovari qozichoqlarda ichak funksiyasining buzilishini, C serovari ayrim odamlarda nekrotik enteritni va yirik shoxli hayvonlarda kasallik keltirib chiqaradi. D serovari hayvonlarda enterotoksemiyani keltirib chiqaradi. Chidamliligi. Vegetativ shakli tashqi muhitga uncha chidamli emas, ularga dezinfeksiyalovchi moddalar oldiruvchan tasir korsatadi. Ayrim shtammlarining sporalari qaynatilganda bir necha daqiqagacha saqlanadi. A serovari ancha chidamlidir. Patogenligi. Òabiiy sharoitda C. perfringens uy hayvonlarida kasallik keltirib chiqaradi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachasi, quyonlar, kaptar, sichqonlar sezuvchandir. Laboratoriya hayvonlariga zararli material yuborilgan joyda yalliglanish (nekroz) hosil boladi. Qonda klostridiylar uchrashi mumkin. Clostridium novyi C. novyini 1874-yili Novi aniqlagan. Morfologiyasi. C.novyi yirik, togri yoki biroz bukilgan. 422x1← 41,6 mkm kattalikdagi tayoqchasimonlardir. Kopincha zanjirsimon bolib joylashadi. Harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Òashqi muhitda ovalsimon spora hosil qiladi, subterminal joylashadi (sporaning kattaligi hujayradan kattaroq bolishi mumkin). Kultural xossasi. C. novyi jiddiy anaerob. Kislorodga juda sezgir. Kazeinli uglevodli, gosht-peptonli muhitlarda, 3743°C da, pH 7,47,6 sharoitda yaxshi osadi. Zich oziqa muhitida 48 soatdan keyin yumaloq, yarimtiniq, yuzasi donador, chetlari gadir-budur koloniya hosil qilib osadi. Òik agarda esa markazi kesakka oxshash sharsimon koloniya hosil qilib osadi. Suyuq oziqa muhitida gaz chiqaradi va chokkan parda holida osadi. Qonli agarda koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil qiladi. Fermentativ xossasi. C. novyi C. perfringensga nisbatan kam aktivdir. U faqat glukoza hamda maltozani kislota va gazgacha parchalaydi. Proteolitik xossasiga kora, sutni sekin-asta ivitadi, jelatinani sekin suyultiradi. Indol va vodorod sulfidini hosil qilmaydi. Patogen fosfaliðaza fermentini ajratadi. 284 Antigenligi. C. novyi tortta A, B, C, D serovarlarga bolinadi: ular bir-biridan antigenlik va toksigenlik xossasiga kora farqlanadi. Òoksigenligi. C. novyi bir qancha toksinlarni sintezlaydi va ular grek harflari bilan belgilanadi α , β , γ va boshq. Ekzotoksini nekrozga, gemolizga uchratish va oldiruvchan tasir qilish xossasiga ega. Bundan tashqari, ular qon tomirlarining otkazuvchanligini buzadi, bu esa organizmning shishishiga olib keladi. Chidamliligi. C. novyining vegetativ shakli kam chidamli. Sporasi tashqi muhitda uzoq (2530 yillargacha) saqlanadi. Sporasi qayna- tilganda 4060 daqiqadan song, tik quyosh nuri tasirida bir kundan song nobud boladi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida 1015 daqiqadan song oladi. Patogenligi. C. novyiga qushlar (kaptar) va sutemarlar sezgirdir. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachasi, quyonlar, sichqonlar sezgir. C. novyi kulturasi teri ostiga yuborilganda ularda ilvirab qolgan shish, ayrim hollarda gaz hosil boladi. Hayvonlar 24 soatdan song nobud boladi. Clostridium septicum Clostridium septicum L. Paster tomonidan 1877-yili aniqlangan. Morfologiyasi. C. septicum polimorf tayoqcha, 34x1, 11,6 mkm kattalikda boladi (iðsimon shakli 50 mkm uzunlikda uchrashi mumkin). Harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Sporasi subterminal, ayrim hollarda markaziy holatda joylashadi. Kapsula hosil qilmaydi. Grammusbat boyaladi. Eski kulturalari Grammanfiy boyaladi. Kultural xossasi. C.septicum jiddiy anaerob. 0,5 % li glukoza qoshilgan goshtli va kazeinli muhitlarda, 3743°C harorat va pH 7,47,6 sharoitda yaxshi osadi. Qon-glukozali muhitda oralib ketgan iðchaga oxshash koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil qilib osadi. Òik agarda shakarli muhitning pastki qatlamida esa markazi jiðslashgan iðsimon koloniya hosil qilib osadi. Suyuq muhitda bir tekis loyqalanish, keyinchalik chokma va gaz hosil qilib osadi. Fermentativ xossasi. C. septicum saxarolitik xossasiga kora, glukoza, laktoza, maltozani kislota va gazgacha parchalaydi. Mannit va glitserinni parchalamaydi. Proteolitik xossasiga kora, jelatinni suyultiradi, sutni sekin ivitadi. Nitratni nitritga qaytaradi, vodorod sulfiti va ammiak hosil qiladi. Indol hosil qilmaydi. Antigenligi. C. septicum ozida O va Hantigenlarini saqlaydi. Agglutinatsiya reaksiyasi yordamida Hantigenining 6 ta serovari aniqlangan. 285 Òoksigenligi. C.septicum ekzotoksini α , β , γ va boshqa sub- stansiyalardan tashkil topgan. Filtratida fibrinolizin va kollagenazalar aniqlangan. Bu omillarning barchasi kasallik patogenezida katta ahamiyatga ega. Chidamliligi. Kislorod tasirida vegetativ shakli tez nobud boladi. Sporasi ham boshqa turlarining sporalariga nisbatan kam chidamli. Patogenligi. Òabiiy sharoitda uy hayvonlari yirik va mayda shoxli mollar kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachasi sezgir. Ularning oyoq muskuli orasiga C. septicum kulturasi yuborilganda shish hosil boladi va u keyinchalik qorinning oldingi qismiga tarqaladi va hayvon 2448 soatdan keyin nobud boladi. Shikastlangan toqima ezilganda qon-kopik aralash suyuqlik ajraladi. Clostridium histolyticum C. histolyticum 1916-yili Vaynberg tomonidan aniqlangan. Morfologiyasi. Yirik bolmagan 1,63,1, 1x0,61 mkm kattalikdagi tayoqchasimonlardir. Harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Spora hosil qiladi, subterminal holda joylashadi. Grammusbat bolib boyaladi. Kultural xossasi. C. histolyticum fakultativ anaerob. Goshtli va kazeinli muhitlarda osadi. Qonli agarda orta olchamli, yaltiroq, tekis koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil qilib osadi. Òoksigenligi. Filtratda α toksin aniqlangan va y organizmga oldiruvchan, nekrozga uchratuvchi tasir korsatadi. Bundan tashqari, filtratda >omili ham aniqlangan, u kollagenazani parchalaydi. Bu toksin oshqozonosti bezining toqimalariga tanlab tasir korsatadi. C. histolyticumning odam patologiyasidagi ahamiyati toliq aniq- lanmagan. Clostridium sordellii C.sordellii 1922-yilda Sordelli tomonidan ajratib olingan va orga- nilgan. Morfologiyasi. C.sordellii tayoqchasimon bolib, 34x1,11,5 mkm kattalikda. Harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Ovalsimon spora hosil qiladi, subterminal holda joylashadi. Gram- musbat bolib boyaladi. Kultural xossasi. C.sordellii fakultativ anaerob. Zich oziqa muhit yuzasidan kulrang-oq, bortib chiqqan koloniya hosil qilib osadi. Qonli agarda koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil qiladi. Òik agarda donaga oxshash koloniya hosil qiladi. Kazeinli va goshtli shorvalarda shilliqqa oxshash osadi. 286 Fermentativ xossasi. Saxarolitik xossasiga kora glukoza, maltoza, fruktozani parchalaydi, saxaroza va laktozani parchalamaydi. Proteolitik xossasiga kora zardobni sekin ivitadi va jelatinani suyultiradi, indol, vodorod sulfiti, ureaza hosil qiladi. C. sordellii ozidan letsitinaza, gemolizin, fibrinolizinlar ajratadi. Òoksigenligi. C. sordellii oldiruvchan tasir korsatuvchi kuchli va aktiv toksin ajratadi: bu toksin C. hovyi α toksiniga oxshashdir. Chidamliligi. Vegetativ shakli tashqi muhitga chidamsiz. Sporasi esa chidamli bolib, tuproqda uzoq vaqt saqlanadi. Patogenligi. Laboratoriya hayvonlarida gazli gangrenaga oxshash belgilarni yuzaga keltiradi. Infeksiya manbai. Gazli gangrena klostridiylari tashqi muhitga hayvonlarning najasi bilan chiqadi (sanitariya-gigiyena sharoiti yomon bolgan hollarda odam terisida ham aniqlash mumkin). Òarqalish yoli. Jarohatlangan teri orqali tuproq bilan, snaryad bolakchalari, kiyim bolakchalari orqali organizmga kiradi. Òinchlik vaqtida operatsiya va inyeksiyadan song, kasalxonadan tashqari abort qilinganda va boshqa hollarda tarqaladi. Patogenezi. Qozgatuvchi organizmga spora yoki vegetativ shaklda kirgandan song bolinib kopayadi va ozidan ekzotoksin ishlab chiqaradi. Bolinib kopayganda klostridiylar soglom toqimani shikastlaydi va nekrozga uchratadi. Ayniqsa, bu jarayon muskul toqimalarida tez boradi, chunki u yerda kop miqdorda glikogen bolib, u anaeroblarning eng sevimli muhiti hisoblanadi. Kopincha infeksiya chuqur jarohatlarda «kor chontaklar» hosil bolganda, yani kislorod bilan yaxshi taminlanmagan, klostridiylar rivojlanishiga qulay sharoit yuzaga kelganda rivojlanadi. Klostridiylar kopincha C. perfringens va C. novyi bilan qoshilib kasallik keltirib chiqaradi, bunda kasallik ogir otadi va ogir natijalarga olib keladi. Anaerob infeksiyasining patogenezida qoshimcha flora (stafilokokk, streptokokk va b.) va mikroorganizmlarning reaktivligi katta ahamiyatga ega. Immuniteti. Odamda bu kasallikka qarshi tabiiy immunitet mavjud, chunki odam ichagida klostridiylar yashaydi. Kasallikdan song kuchsiz immunitet yuzaga keladi. Kuchli immunitet organizmga anatoksin yuborilganidagina yuzaga keladi. Profilaktikasi. Jarohatlarni yaxshilab tozalash, vodorod peroksidi bilan yaxshilab yuvish, jarohatning ifloslangan qismlarini yaxshilab kesish, asboblarni toliq sterilizatsiya qilish, shaxsiy gigiyena qoidalariga rioya qilish lozim. Maxsus profilaktikasida gazli gangrena qozgatuvchilarining barcha turini saqlovchi adsorbsiyalangan polianatoksini qollaniladi. 287 Seroprofilaktika boyicha odam jarohat olganda gazli gangrenaga qarshi zardob: 10000 ME C.perfringens, C.novyi, C.septicum, yani hammasi bolib, 30000 MEda yuboriladi. Shuningdek, anaeroblarning fag ara- lashmasi ham keng qollaniladi. Davosi. Maxsus davosida har bir turning antitoksik zardobidan 50000 ME, hammasi bolib 150000 ME yuboriladi. Zardob vena ichiga yuboriladi. Shuningdek, antibiotiklardan penitsillin va sulfanilamid preparatlari, oksigenoterapiya belgilanadi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Jarohatdan ajratma. 2. Ozgargan toqima bolakchalari. 3. Jarohatga tushgan yot moddalar. 4. Qon. Tekshirish materialini toplash Jarohatdagi suyuqlik piðetka yordamida olinadi. Ozgargan toqima bolakchalari steril pinset yordamida olinadi. Jarohatga tushgan yot moddalar pinset yordamida olinadi. Barcha material qopqogi mahkam yopiladigan steril shisha idishga solinadi. Qon steril shpris yordamida steril probirkaga olinadi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Bakteriologik. 3. Biologik. Òekshirishning birinchi kuni. Mikroskopik usul. Òekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanadi. Gram va Burri-Giðs usulida boyab, mikroskop ostida tekshiriladi. Surtma preparatda Grammusbat tayoqchasimon bakteriyalar korinsa taxminiy diagnoz qoyiladi. Mikroskopik tekshirishda qoshimcha aerob floraning borligiga etibor beriladi, chunki u infeksion jarayonni murakkablashtiradi. Bakteriologik usul. Jarohatdagi suyuqlikdan olib suyuq (goshtli yoki kazeinli, lakmusli sutga) va zich (qonli agar, Vilson-Bler, Villis- Xobbs va b.) muhitlarga ekiladi. Songra barcha muhitlar anaerostatda qoldiriladi. Òekshirishning ikkinchi-tortinchi kunlari. Muhitlarni termostat- dan olib kozdan kechiriladi. Vilson-Bler muhitida qora osish, qonli agarda koloniya atrofida gemoliz zonasi hosil bolganda sof kultura ajratib olinadi va morfologiyasi, harakatchanligi va fermentativ xossasi organiladi. 288 Gazli gangrena qozgatuvchisi aniqlansa, qozgatuvchi turini aniqlash uchun sichqonlarda biologik sinama quyiladi. Buning uchun 5 ta probirkaga tekshirish materialidan 0,9 ml.dan solinadi va har bir probirkaga 0,6 ml.dan mos antitoksik zardob solinadi. C.perfringens, C.novyi, C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii. 6-probirkaga fiziologik eritma solinadi, bu nazorat probirkasi hisoblanadi. Òoksin va anatoksin zardobi qoshilgan probirkalar xonada 40 daqiqaga qoldiriladi, bunda toksin antitoksin tasirida neytrallanadi. Har bir probirkadan 0,5 ml.dan olib, bir juft sichqonlarning venasi ichiga yuboriladi. Zararlangan hayvonlar kuzatib turiladi. Zararlangan hayvonlar 56 soatdan 34 kungacha kasallanib, nobud boladi. Gomologik antitoksin zardob yuborilgan sichqonlar tirik qoladi. Agar biologik sinama natija bermasa, sof kultura bilan biologik sinama qaytadan otkaziladi. Gazli gangrena kasalligi tez yuzaga chiqishi sababli qozgatuv- chining turini tezroq aniqlab, taxminiy tashxis qoyishni talab qiladi. Shuning uchun tekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanadi, turga mos zardob bilan immunofluoressiyalanadi va immunofluoressent usulida organiladi. 1. Gazli gangrena qozgatuvchilarning morfologik va kultural xossasi qanday? 2. Gazli gangrena qozgatuvchilarining qaysi biri kapsula hosil qiladi? 3. Gazli gangrena qozgatuvchilaridan qaysi biri biokimyoviy jihatidan aktiv? 4. Gazli gangrenaga diagnoz qoyishda qaysi usullardan foydalaniladi? 5. Òoksinni qaysi usulda aniqlanadi? 36-bob. BOTULIZM QOZGATUVCHISI Clostridium botulinum (lotin. botus kolbasa) 1896-yili Van- Ermengen tomonidan aniqlangan. Morfologiyasi. Òayoqchasimon, 49x0,61 mkm kattalikda, uchlari yumaloq. Òayoqchasimonlar polimorf bolib, qisqa va iðsimon shakllari uchrab turadi. Spora hosil qiladi, subterminal holda joylashadi. Spora tayoqchadan katta bolganligi sababli, ularga tennis raketkasi shaklini berib turadi. Kapsulasi yoq. Harakatchan, xivchinlari peretrix joylashgan. Yosh kulturalar Grammusbat bolib boyaladi. Kultural xossasi. C. botulinum jiddiy anaerob. 2537°C haroratda pH 7,37,6 da kazeinli va goshtli muhitlarda yaxshi osadi. Qonli- ? Nazorat uchun savollar 289 glukozali muhitda notogri shaklda iðsimon osadi. Òik agarda paxtaga oxshash, ayrim hollarda donga oxshash koloniya hosil qilib osadi. Qonli agarda shudring tomchisiga oxshash, chetlari tekis yoki gadir- budur (R shaklli) koloniya hosil qiladi. Jigarli shorvada loyqalanib, keyinchalik chokma hosil qiladi va shorva tiniqlashadi. Fermentativ xossasi. Saxarolitik xossasiga kora laktoza, glukoza, maltoza, glitserinni kislota va gazgacha parchalaydi. Proteolitik xossasiga kora, jigar bolakchalarini eritadi, tuxum oqsilini parchalaydi, jelatinni eritadi, sutni peptonlaydi, vodorod sulfati va ammiak hosil qiladi. Òoksigenligi. C. botulinum barcha mavjud biologik toksinlardan ham kuchli bolgan toksin ajratadi (1 mkg botulizm toksinida 100 000 000 oq sichqonlarni oldiruvchi doza mavjud). Òoksin ikkita komponentdan tashkil topgan: neyrotoksin va gemagglutinin. Antigenligi. Neyrotoksinli barcha shtammlar antigenlik xossasiga kora, yettita serovarga bolinadi: A, B, C, D, E, F va G. Har bir serovari maxsus immunogenligi bilan tavsiflanadi. Kopincha A, B, E serovarlari kasallik keltirib chiqaradi, kam hollarda C, D, F serovarlari ham uni keltirib chiqarishi mumkin. G serovari kam organilgan. Chidamliligi. C.botulinumning vegetativ shakli 80°C harorat tasirida 30 daqiqadan song nobud boladi. Sporasi chidamli. Qaynatilganda bir necha soat (5 soatgacha) saqlanadi. Goshtning katta bolaklarida, katta hajmli konserva bankalarida avtoklavda sterilizatsiya qilingan hollarda ham saqlanib qoladi, 5 % li fenol tasirida sporalar bir kungacha saqlanadi. Botulizm toksini qaynatilganda, 10 daqiqadan song parchalanadi. U tik quyosh nuriga, past haroratga va dezinfeksiyalovchi moddalarga chidamli. Patogenligi. Botulizm qozgatuvchisiga yirik va mayda shoxli hayvonlar, kemiruvchilar, qushlar sezgir. Laboratoriya hayvonlaridan oq sichqonlar, dengiz chochqachalari, quyonlar, mushuklar sezgirdir. Infeksiya manbai. Botulizm qozgatuvchisi tashqi muhitda keng tarqalgan: hayvon va baliq chiqindilari bilan tuproqqa, suvga va boshqa yerlarga tushadi. Òuproqda ular hatto bolinib ham kopayadi. Odam botulizm qozgatuvchisini saqlovchi mahsulotlarni istemol qilishi natijasida zararlanadi. Òarqalish yoli. Alimentar, yani gosht, baliq, qoziqorin va sabzavotlardan tayyorlangan konservalarni istemol qilish natijasida yuqadi. Ayniqsa, uy sharoitida tayyorlangan konservalar xavfli hisoblanadi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib ogiz shilliq pardasi hisoblanadi. Botulizm qozgatuvchisi bolinib kopayishi natijasida hosil bolgan 290 neytrotoksin oshqozon-ichak sistemasida ishlab chiqariladigan proteolitik fermentlarga sezuvchan emas. Patologik jarayon esa neytrotoksin tasirida yuzaga keladi. Neytrotoksin ichakdan qonga soriladi, butun azolarga tarqaladi va markaziy nerv sistemasi, uzun- choq miya, yurak-qon tomiri sistemasini shikastlaydi. Korish azolari, nafas olish va yutish funksiyalarida ozgarish yuzaga keladi. Kasallanish belgilari 1224 soatdan song namoyon boladi. Zaharlangan kishilarda koz soqqasi muskullarining chala falaji, halqum falaji kuzatiladi, ovoz chiqmaydi, koz qovoqlari osilib qoladi, koz gilay boladi. Bemor boshi aylanayotganini, narsalar koziga ikkita bolib korinayotganligini aytadi. Songra ich qotishi, bazan ich ketishi, tana muskullarining kuchsizligi qoshiladi. Bemorning hushi joyida boladi, puls tezlashadi, tana harorati normal qolishi yoki birmuncha pasayishi mumkin. Bemorlar nafas falajidan yoki yurak falajidan nobud boladi. Immuniteti. Odamda tabiiy immunitet yoq. Odam C. botulinum toksiniga juda sezgir. Kasallikdan song immunitet yuzaga kelmaydi. Profilaktikasi. Oziq-ovqatlar ifloslanishining oldini olish, konserva mahsulotlarini tayyorlash, ayniqsa, uyda tayyorlanadigan konserva- larni tayyorlash texnikasiga rioya qilish. Uyda tayyorlangan konservalarni istemol qilishdan avval, 1520 daqiqa suv hammomida sterilizatsiya qilib, song istemol qilish lozim, chunki botulizm toksini qaynatganda neytrallanadi. Maxsus profilaktikasi yuzasidan botulizm qozgatuvchisi yoki toksini bolgan mahsulotlarni itemol qilgan odamga botulizmga qarshi polivalent A, B, E antitoksin zardobi yuboriladi. Qozgatuvchining turi aniqlangandan song esa, shu turga xos botulizmga qarshi zardob yuboriladi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALI 1. Qusuq moddasi. 2. Oshqozon yuvindisi. 3. Najas. 4. Qon. 5. Ovqat qoldiqlari. Tekshirish materialini toplash Qusuq moddasi. Steril shisha shpatel bilan 5060 g hajmda steril idishga olinadi. 291 Oshqozon yuvindisi. 50100 ml hajmda steril idishga olinadi. Najas. 2530 g olib steril shisha idishga solinadi. Qon. 68 ml hajmda davolovchi zardob yubo- rilishidan avval bilak venasidan olinadi. Ovqat qoldigi. Ovqatning turli qismlaridan 100 gr steril idishga olinadi. Barcha olingan materiallarning idishlariga etiketka yopishtirib jonatiladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Biologik. 2. Bakteriologik. 1-kun. Òekshirish materiali steril hovonchaga solinib, steril qum va fiziologik eritma bilan yaxshilab eziladi. Òekshirish materiali 2 qismga bolinadi va biri biologik, ikkinchisi bakteriologik tekshirish uchun qollaniladi. Birinchi qismi 0,5 % li glukoza Xottinger shorvasiga, tik agarga ekiladi. Ikkinchi qismi toksin hosil bolishi uchun 3040 daqiqaga qoldiriladi, song paxta-doka orqali filtrlanadi. Hosil bolgan filtrat ikki qismga bolinib, biriga botulizmga qarshi polivalent zardob solinib, neytrallanishi uchun 3040 daqiqaga qoldiriladi. Ikki juft sichqon olinib, ularning bir juftiga botulizmga qarshi polivalent zardob qoshilgan filtrat yuboriladi, ikkinchi juft sichqonlarga esa filtratning ozi yuboriladi. 24-kun. 1. Hayvonlar 14-kun ichida kasallanib, nobud boladi, ularda nafas olish tezlashadi, qorin devori muskullari boshashib, qorin esa ichiga kirib ketadi (arining qorniga oxshab qoladi), titrash, falajlanish yuzaga kelib sichqonlar oladi. Botulizmga qarshi zardob qoshilgan filtrat yuborilgan sichqonlar tirik qoladi. Botulizm toksini aniqlangandan song neytralizatsiya reaksiyasi qoyiladi. Filtratga tiðospetsifik A, B, C, E, F, G diagnostik zardoblar qoshilib, alohida shprislarda sichqonlarga yuboriladi. Gomologik zardob yuborilgan sichqonlar tirik qoladi, qolganlari nobud boladi. 2. Ekilgan muhit termostatdan olib tekshiriladi, uning sof kulturasini ajratib olish uchun Kitta-Òarossi muhitiga ekiladi va yana yuqorida aytib otilgandek, neytralizatsiya reaksiyasi qoyiladi. 56-kun. Ajratib olingan sof kulturaning morfologik, fermentativ xossalari, harakatchanligi organiladi. Agar biologik sinama natija bermasa, sof kultura bilan yana biologik sinama otkaziladi. 292 1. Botulizm qozgatuvchisini morfologik va kultural xossalari qanday? 2. Botulizm qozgatuvchisining fermentativ xossasini bilasizmi? 3. Botulizmga shubha qilinganda qanday tekshirish materiali olinadi? 4. Òekshirishda qanday asosiy usullardan foydalaniladi? 5. Botulizmga qarshi zardob bilan qanday biologik va neytralizatsiya reaksiyasi qoyiladi? Patogen spiroxetalar Spiroxetalar Cpirochaetaceae oilasiga kiradi. Ular ingichka burama mikroorganizmlar bolib, iðsimon asosi atrofini spiralsimon sitoplazma orab turadi va bu ularga burama shaklini berib turadi. Ultra kesmalarda uch qavatli membrana qatlami aniqlangan. Elektron mikroskop orqali korilganda ayrim spiroxetalarning uchida iðchalar aniqlanadi. Spora va kapsula hosil qilmaydi, xivchinlari yoq. Ular juda harakatchan. Òort xil harakatlanishga ega: aylanma, tolqin- simon, egiluvchan va ilgarilab boradigan. Ularning kattaligi 5 dan 500 mkm.gacha uzunlikda va 0,30,75 mkm kenglikda boladi. Odam uchun patogen bolgan spiroxetalarga quyidagi avlod azolari kiradi: 1. Treponema zaxm va formbezi qozgatuvchisi. 2. Borrielia epidemik va endemik qaytalama tif, Vensan anginasining qozgatuvchisi. 3. Leptospira leptospiroz qozgatuvchisi. Spiroxetalar bir-biridan buramalar soni, chuqurligi va boyalishiga kora farqlanadi. Asosiy boyash usuli RomanovskiyGimza. Bu usulda borreliyalar yaxshi boyalib, binafsha treponemalar och pushti rangda korinadi. Spiroxetalar tirik holda organiladi. Spiroxetalar keltirib chiqaradigan kasalliklarni spiroxetozlar deyiladi. Spiroxetozlar klinikasi malum sikllarda kechishi bilan tavsiflanadi. 37-bob. ZAXM QOZGATUVCHISI Treponema pallidum zaxm qozgatuvchisi Treponema avlodiga (lotin. trepo buramoq, nemo ið) kiradi. T.pallidum 1905-yili Shaudin tomonidan aniqlangan. Zaxm qozgatuvchisini organishda I.I. Mechnikov, N. Erlix, D.K. Zabolot- niylar katta hissa qoshishgan. ? Nazorat uchun savollar 293 Morfologiyasi. T. pallidum spiralsimon, 8/8x0,080,2 mkm kattalikda, buramalari mayda va bir xilda joylashgan, 1214 tani tashkil etadi, uchlari uchli yoki yumaloq boladi. Harakatchan, tort turda harakatlanadi. RomanovskiyGimza usulida boyalganda och pushti rangda korinadi, shuning uchun ularni rangsiz spiroxetalar, deb ham yuritiladi. Yomon boyalishiga sabab, ularning tarkibida kam miqdorda nukleoproteidlarning bolishidir. Spiroxetalarni Burri, kumushlash usulida ham aniqlash mumkin. Bundan tashqari, ularni tirik holda qorongilashgan mikroskopik maydonda korish mumkin. Spora va kapsula hosil qilmaydi. Kultural xossasi. Rangsiz treponemalar oziqa muhitga talabchan. Miya yoki buyrak bolaklari va assit suyuqligi qoshilgan suniy oziqa muhitlaridagina osadi. 3536°C haroratda 512 kunda, anaerob sharoitida sekin osadi. Rangsiz treponemalar tovuq embrionida yaxshi bolinib kopayadi. Suniy muhitda ostirilganda treponemalar virulentlik xossasini yoqotadi. Bunday kulturalar kulturali shtammlar, deb ataladi. Òovuq embrionida ostirilgan kulturalar esa toqimali kulturalar deyiladi. Ular virulentlik xossasini saqlab qolgan boladi. Fermentativ xossasi. Òreponemalar fermentativ xossaga ega emas. Lekin kulturali shtammlar bir-biridan indol va vodorod sulfiti hosil qilishi bilan farqlanadi. Òoksigenligi. Doimiy emas. Antigenligi. Rangsiz treponemalar ozida polisaxarid, yogli va proteinli antigenlar kompleksini saqlaydi. Seroguruh va serovarlari aniqlanmagan. Chidamliligi. Rangsiz treponemalar kam chidamlidir. 55°C harorat tasirida 15 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratga ular chidamli. Muzlatilganda bir yilgacha saqlanadi. Spiroxetalar ogir metall tuzlariga (simob, margimush va boshq.) sezgir. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Ular benzilpeni- tsillinga, bitsillinga va boshqalarga sezgir. Ayrim tashqi muhit omillari va antibakterial preparatlar tasirida sista shakliga aylanishi mumkin. Shu shaklda ular organizmda latent holatda uzoq vaqt saqlanib qolishi mumkin. Patogenligi. Òabiiy sharoitda hayvonlar zaxm bilan kasallanmaydi. Lekin I.I. Mechnikov va E. Ru kasallikning klinik manzarasini may- munlarda korish mumkinligini isbotlab berishdi. Maymunlarda zararli material yuborilgan joyda shankr yuzaga kelgan. Hozirgi vaqtda quyonlar, dengiz chochqachalarida zararli material yuborilgan joyda yara hosil bolishi aniqlangan. Ajratib olingan treponemalarni quyonlarga yuborib, uzoq vaqt saqlab qolish mumkin. Infeksiya manbai. Kasal odam. 294 Òarqalish yoli. Kasallik, asosan, jinsiy yol orqali tarqaladi. Ayrim hollarda zaxm idish-tovoq, choyshablar orqali ham tarqalishi mumkin. Zaxm bilan kasallangan onalardan kasallik homilaga ham otadi. Bu tugma zaxm, deb ataladi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib ogiz boshligi va jinsiy yollar shilliq pardasi hisoblanadi. Yashirin davri 34 hafta. Birlamchi davrda spiroxetalar shilliq qavatga tushadi va yashirin davrdan song (ortacha 3 haftada) ular kirgan joyda tubi va cheti qattiq yara «qattiq shankr» hosil boladi. Qattiq shankrni hosil bolishi limfa tugunlarining kattalashuviga sabab boladi. Birlamchi davr 67 hafta davom etadi. Ikkilamchi davrda qozgatuvchilar limfa yoli orqali qonga soriladi va qon bilan butun organizmga tarqaladi. Bunda teri va shilliq qavatlarda toshmalar rozeolalar va papulalar, vezikulalar hosil boladi. Bu davr 34 yil davom etadi. Uchinchi davr. Zaxm kasalligi davolanmagan hollarda yuzaga keladi. Bu davrda azo, toqima, suyak tomirlarida parchalanishga moyil granulatsiya osmalari hosil boladi. Bu davr bir necha yil davom etadi (yashirin shakli). Bu davrda bemor atrofdagilarga zararli hisoblanmaydi. Kasallik davolanmasa (ayrim hollarda), tortinchi davrda bir necha yillardan keyin u markaziy nerv sistemasini shikastlaydi, miyaning shikastlanishi sababli progressiv falaj, orqa miyaning shikast- lanishi sababli uning qurishi yuzaga keladi. Bunday holat treponema- larning miya toqimalarida joylanishi natijasida yuzaga keladi va organizmda funksional va organik ozgarishlar yuzaga keladi. Immuniteti. Òabiiy immuniteti yoq. Kasallikdan song nosteril infeksion immunitet yuzaga keladi. Buni shankr immuniteti deb ham yuritiladi, chunki qayta kasallanganda qattiq shankr hosil bolmaydi, lekin kasallikni qolgan davrlari rivojlanadi. Zaxm kasalligida YqC va YqM, shuningdek, YqE reaginlar aniqlanadi, kardioliðid antigeni qoshilganda ular komplement yordamida ozaro boglanib oladi. Profilaktikasi. Bemorlarni vaqtida aniqlash, epidemiologik zanjirni topish. Sanitariya maorifi ishlarini olib borish. Togri turmush tarzini tashkil etish. Maxsus profilaktikasi yoq. Davosi. Penitsillin, bitsillin, bioxinol va boshqalar. 1. Spiroxetalarning morfologiyasi va boyalish usulini bayon eting. 2. Qattiq shankr nima? 3. Zaxm kasalligining qanday davrlarini bilasiz? 4. Zaxmda qanday immunitet yuzaga keladi? ? Nazorat uchun savollar 295 MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Birlamchi davrda qattiq shankrdan material. 2. Rozeola, papula, vezikuladan material (ikkilamchi davrda). 3. Qon (ikkilamchi, uchinchi va tortinchi davrda). Tekshirish materialini toplash Kirish darvozasi oldida qattiq shankrdan hosil bolgan yara fiziologik eritmaga namlangan paxta yoki doka bilan artiladi va yara ichidagi material steril piðetkada olinadi. Agar suyuqlik yaxshi ajralmasa, yara atrofi pinset yordamida biroz eziladi. Piðetkada olingan suyuqlik yogsizlantirilgan buyum oynachasiga tomiziladi va mikroskop ostida tekshiriladi (ish rezina qolqop kiygan holda olib boriladi). Rozeola, vezikula, Steril piðetka yoki paxtali tampon papuladan material. yordamida olinadi. Surtma preparat tay- yorlanadi va mikroskop ostida tekshiriladi. Qon Bilak venasidan 47 ml olinadi. Qon zardobi ajratib olinadi va serologik reak- siya qoyiladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Serologik: a) Vasserman reaksiyasi (komplement boglanish reaksiyasi); b) chokma reaksiyasi. 3. Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasi. 4. Immunofluoressensiya usuli. Mikroskopik usul Yara, rozeola, vazikula, papuladan olingan materiallar bir necha usulda tekshiriladi: 1-usul. Qorongilashtirilgan mikroskopik maydonda tekshirish. Olingan tekshirish materiali yogsizlantirilgan buyum oynachasi ustiga tomiziladi va ustiga yopqich oynacha yopiladi. Mikroskopning qorongilashtirilgan maydonida (40x obyektiv, 10x okular) tekshiriladi. Qorongi maydonda rangsiz, harakatlanayotgan, ingichka, buramali qozgatuvchilar korinadi. 2-usul. Òekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanadi va RomanovskiyGimza usulida boyaladi, mikroskop ostida tekshiriladi. Zaxm qozgatuvchilari och pushti rangda boyaladi. 3-usul. Levaditi usuli. Olingan tekshirish materiali kumush bilan aralashtirilib surtma preparat tayyorlanadi va mikroskop ostida tekshi- riladi. Preparatda treponemalar qora spiralsimon bolib korinadi, korilayotgan maydon esa oq rangda boladi. 296 Serologik usul Vasserman reaksiyasi. Bu reaksiya komplement boglanish reaksiyasi asosida olib boriladi. Vasserman reaksiyasi boshqa reaksiyalardan nospetsifik antigen qollanilishi bilan farqlanadi. Masalan, kardio- antigen buqa yuragidan tayyorlangan yogli ekstrakt boladi. Mana shu nospetsifik antigenga sezgir bolgan nospetsifik antitelolarni reaginlar deyiladi. Nospetsifik antigen bilan boradigan reaksiya bemor qon zardobi tarkibidagi globulin miqdorining ortishi va dispersiya darajasining ozgarishi sababli yuzaga keladi. Globulinlar yogli ekstraktlar bilan birikadi va komplement bilan boglanib kompleks hosil qiladi. Shuning uchun ham gemolitik sistemada gemoliz bolmaydi. Gemolizning sodir bolmasligi reaksiya musbatligidan dalolat beradi, yani «zaxm», deb tashxis qoyishiga asos beradi. Serologik reaksiyalarni qoyishda, bundan tashqari treponema va kultural toqimalardan ajratib olingan spetsifik antigenlarni ham qollash lozim (30-jadval). 30-jadval Vasserman reaksiyasini qoyish l m , r a lt n e y i d e r g n I r a l a k r i b o r P 1 2 3 ) t a r o z a n ( 4 n a g n a l a y i s t a v it k a n I . 1 b o d r a z n a g t o y a li r i h s k e t 1 , 0 1 , 0 1 , 0 1 , 0 a m ti r e k i g o l o i z i F . 2 4 , 0 4 , 0 4 , 0 9 , 0 n a g li r it l u y u s a h c i y o b r ti T . 3 i s a y i r e s n e g it n a - 1 5 , 0 n a g li r it l u y u s a h c i y o b r ti T . 4 i s a y i r e s n e g it n a - 2 5 , 0 n a g li r it l u y u s a h c i y o b r ti T . 5 i s a y i r e s n e g it n a - 3 5 , 0 t n e m e l p m o K . 6 5 , 0 5 , 0 5 , 0 5 , 0 i d a li r i d l o q a g t a o s 1 a d t a t s o m r e T n a g n a l a y i s t a z il i b i s n e S a m e t s i s k it il o m e g 1 1 i d a li r i d l o q a g a q i q a d 0 4 0 3 a d t a t s o m r e T a ji t a N + + + + + + + + + + + + i d a li y e d t a b s u m a y i s k a e R 297 E s l a t m a : 1) «++++» gemolizning toliq bolmasligi; «» toliq gemolizga uchrashi; 2) 1-nospetsifik antigen (buqa yuragining yogli fraksiyasi); 3) 2 va 3-antigenlar treponema kulturasidan olingan spetsifik antigenlardir. Chokma reaksiyasi. 1. Qon reaksiyasi. Bemor qon zardobi 56°C haroratda 30 daqiqa inaktivatsiya qilinadi. Antigenga (buqa yuragining yogli ekstrakti) 0,6 % xolesterin qoshiladi. Bu reaksiyaning sezgirligini oshiradi (31-jadval). 31-jadval Qon reaksiyasini qoyish N a t i j a : pretsepitatsiya yuzaga kelsa, reaksiya musbat deyiladi. 2. ZaksVitebskiy reaksiyasi (sitoxolesterin chokma reaksiyasi). Bu reaksiya qon reaksiyasiga oxshash. Pretsepitatsiyani tezroq yuzaga keltirish uchun bunga yanada konsentrlangan xolesterinlik antigen qoshiladi. Òreponemalarni immobilizatsiyalash reaksiyasi. Zaxm diagnostika- sida spetsifik reaksiya hisoblanadi. Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasi spetsifik reaksiya hisoblanadi. Hozirgi vaqtda bu reaksiyaning aniq uslubi ishlab chiqilgan. T.pallidum bilan zararlangan quyon tuxumdoni maydalanib tayyor- langan aralashmada qozgatuvchilar harakatchanligini saqlab qolish uchun u maxsus oziqa muhitiga solinadi. Probirkaga 1,7 ml miqdorda treponema toqimasi aralashmasi, 0,2 ml hajmda tekshirilayotgan zardob, 0,1 ml yangi komplement olinadi. Bu reaksiya probirkalarda olib boriladi. Birinchi nazorat probirkasiga tekshirilayotgan bemor qon zardobi orniga soglom odamning qon l m , r a lt n e y i d e r g n I r a l a k r i b o r P a b i rj a t i n e g it n a t a r o z a n n e g it n A 5 2 1 0 , 0 ; 5 2 0 , 0 ; 5 0 , 0 5 2 1 0 , 0 ; 5 2 0 , 0 ; 5 0 , 0 b o d r a z n a g t o y a li r i h s k e T 5 1 , 0 ; 5 1 , 0 ; 5 1 , 0 a m ti r e k i g o l o i z i F 5 1 , 0 ; 5 1 , 0 ; 5 1 , 0 i d a li t a q y a h c a g a q i q a d 3 a m ti r e k i g o l o i z i F 5 , 0 ; 5 , 0 ; 1 , 0 5 , 0 ; 5 , 0 ; 0 , 1 i d a li t a q y a h C 298 zardobi qoshiladi; ikkinchi nazorat probirkasiga dengiz choch- qachasining inaktivatsiya qilingan qon zardobi qoshiladi. Barcha probirkalar gazlar aralashmasi bilan toldirilgan (1 hajm karbonat kislota va 19 hajm azot) eksikator yoki anaerostatda qoldiriladi va 35°C haroratlik termostatga solinadi. Song tekshirish materiali buyum oynachasiga tomiziladi va spiroxetalar harakatchanligi qorongilashgan mikroskop maydonida organiladi. Reaksiyaning prinsiði shundan iboratki, bemor qon zardobidagi antitelo tasirida va komplement ishtirokida zaxm qozgatuvchisi harakatdan toxtaydi. Bunda harakatdan toxtagan treponemalarning foizi aniqlanadi. Agarda 50 % dan ortiqroq qozgatuvchilar harakatdan toxtasa reaksiya musbat, 3050 % gacha harakatdan toxtasa, kuchsiz musbat, 20 % dan kam harakatdan toxtasa, reaksiya manfiy deyiladi. 1. Zaxm kasalligining turli davrlarida qanday tekshirish materiali olib tekshiriladi? 2. Zaxm diagnostikasida qanday laboratoriya tekshirish usullari qollaniladi? 3. Vasserman reaksiyasini qoyishda qanday antigenlardan foy- dalaniladi? 4. Òreponemalarni immobilizatsiya qilish reaksiyasida qanday ingrediyentlardan foydalaniladi? 5. Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasining natijasi qanday oqiladi? 38-bob. QAYTALAMA TIF QOZGATUVCHILARI Qaytalama tif qozgatuvchilari Spirochetaceae oilasiga, Borre- lia avlodiga kiradi. Infeksiya tashuvchisiga kora qaytalama tif epidemik qaytalama tif (tashuvchisi bitlar) va endemik qaytalama tif (tashuvchisi kanalar) kabilarga bolinadi. Qaytalama tif borreliyalari boshqa spiroxetalardan yirikligi, bura- malari turlicha joylanishi, RomanovskiyGimza usulida boyalganda, binafsha rangda boyalishi bilan farqlanadi. Epidemik qaytalama tif Epidemik qaytalama tif qozgatuvchisi 1868-yilda O. Obermayer tomonidan aniqlangan. Morfologiyasi. Obermayer borreliyalari spiralsimon iðga oxshash bolib, 58 buramadan iborat, buramalari turlicha joylashgan, uchlari ? Nazorat uchun savollar 299 uchli, 1018x0,30,5 mkm kattalikdadir. Harakatchan, spiroxetalarga xos barcha tort xilda bolgan turda harakatlanadi. Kultural xossasi. Zardob, assit suyuqligi, toqima yoki hayvon azolari qoshilgan suniy oziqa muhitlarida osadi. Ular juda sekin, 712 kundan song, anaerob, 3035°C haroratda va pH 7,27,4 bolgan sharoitda osadi. Suyuq oziqa muhitida ular jadal bolinib kopayishlariga qaramasdan, muhit tiniq qoladi. Keyingi yillarda borreliyalar tovuq embrionida ham ostirilmoqda. Fermentativ xossasi. Borreliyalar fermentativ xossaga ega emas. Òoksigenligi. Endotoksin ajratadi (toliq organilmagan). Antigenligi. Kam organilgan. Chidamliligi. Borreliyalar yuqori haroratga juda sezgir. 4550°C harorat tasirida 30 daqiqadan song, 0°C da bir kungacha saqlanadi. Past haroratga ancha chidamli. Muzlatilganda bir necha oylab saqlanadi. Quritilganda tez nobud boladi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Patogenligi. Tabiiy sharoitda hayvonlar qaytalama tif bilan kasallanmaydi. Laboratoriya hayvonlaridan maymunlar, oq sich- qonlar, olmaxonlarga Obermayer borreliyalari qiyinchilik bilan yuqadi. Infeksiya manbai. Kasal odam infeksiya manbai hisoblanadi. Òarqalish yoli. Òransmissiv yol orqali, yani yashashi davomida (3040 kun) bitlar orqali tarqaladi. Bemor qonini sorgan bitlar 57 kundan keyin zararli bolib hisoblanadi. Bu vaqt ichida spiroxetalar ichakdan gemolimfa yoliga soriladi va u yerda toplanadi. Odam qashinganda bit tanasini shikastlaydi va uning gemolimfasini qashigan joyga kiritadi. Patogenezi. 1874-yilda G. Minx, 1881-yili I. I. Mechnikov tajriba sifatida bemor qonini ozlariga yuborib, qaytalama tif qozgatuv- chisini qonda aylanib yurishini isbotlab berganlar. Organizmga kirgan borreliyalar limfa yoliga otib makrofag siste- masi hujayralarida kopayadi, songra qonga soriladi. Bemorda birinchi kasallik xuruji, yani isitma tutishi shundan keyin yuzaga keladi. Bemor qonida antitelolar spiroxetolizinlar toplanadi, ular borreliyalarini lizisga uchratadi. Qozgatuvchilar tomonidan ajratilgan endotoksin intoksikatsiyani tana haroratini kotarilishi va boshqa funksional ozgarishlarni yuzaga keltiradi. Òoqimalarning chuqur qismida saqlanib qolgan borreliyalar bolinib kopayadi va organizmda lizinlarga sezuvchan bolmagan yangi avlod borreliyalarini hosil qiladi. Bu borreliyalar qonga otib, yangidan ikkinchi isitma tutishni yuzaga keltiradi. Organizmda endi ana shu borreliyalarni lizisga uchratuvchi lizinlar yuzaga keladi. Bunday isitma tutishlar bir necha marotaba 300 (35) takrorlanadi. Har bir keyingi isitma tutish oldingisidan qisqa va ular orasidagi vaqt (apiraksiya) uzoqroq boladi. Organizmdagi barcha turdagi borreliyalar toliq lizisga uchragandan song tuzalish yuzaga keladi. Qaytalama tif bilan kasallangan bemorlardan favqulodda hodisa trombotsitobariya, yani ichki azo kapillarlaridagi spiroxetalarga trombotsitlar shimilishi va natijada «spiroxet va trombotsit» agregati yuzaga kelishi kuzatiladi. Bu agregat shu azoda qon aylanishini buzilishiga olib keladi, borreliyalar esa harakatchanligini yoqotadi. Immuniteti. Spiroxetolizin, agglutinin, trombotsitobarin kabi antitelolar borligi bilan tavsiflanadi. Lekin ular turgun emas. Profilaktikasi. Bitlarga qarshi kurashish, sanitar-gigiyenik sharoitni yaxshilash. Maxsus profilaktikasi ishlab chiqilmagan. Davosi. Òetratsiklin, penitsillin, levomitsetin va margumushdan tayyorlangan dorilar beriladi. 1. Qaytalama tif borreliyalarining morfologik va kultural xossasini bayon eting. 2. Bemor qonida qaytalama tif borreliyalari aylanib yurishini kim isbotlab bergan? 3. Qaytalama tifning yuqish mexanizmi va patogenezi qanday? 4. «Òrombotsitobariya» favqulodda hodisasi nima? Endemik qaytalama tif Endemik qaytalama tif kasalligini bir qancha turdagi borreliyalar (B. persica, B.duttonii va b.) keltirib chiqaradi. B.duttoniini 1904-yili R. Ross bemor qonidan ajratib olgan. Morfologiyasi. Kana qozgatadigan qaytalama tif borreliyalarining morfologiyasi epidemik qaytalama tif qozgatuvchisiga oxshashdir. Kultural xossasi. B. duttonii maxsus oziqa muhitida osishi mumkin. Ular 3035°C haroratda va pH 7,27,4 bolgan anaerob sharoitda ostiriladi. Fermentativ xossasi. Aniqlanmagan. Antigenligi. Borreliyalarning bir qancha variantlari mavjud bolib, ularni bir-biridan farqlash ishlarini olib borishda biologik usulni qollash yordam beradi. Patogenligi. Kopincha kemiruvchilar sichqonlar, olmaxonlar, qumsichqonlar kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz choch- qachasi, kalamush, oq sichqonlar sezgir. ? Nazorat uchun savollar 301 Chidamliligi. Epidemik qaytalama tifga oxshash. Infeksiya manbai. Òabiiy ochogi va infeksiya manbai bolib kemiruvchilar sichqon, olmaxonlar, qumsichqon va Ornithodoros avlodiga kiruvchi kanalar hisoblanadi. Borreliyalar kana organizmida butun hayoti davomida saqlanadi va nasldan naslga uzatiladi. Òarqalish yoli. Òransmissiv yol bilan, yani qon soruvchi ha- sharotlar orqali tarqaladi. Odamni kana chaqqanda, ularning solagi tarkibidagi borreliyalar organizmga kiradi. Chaqqan joyida papula yuzaga keladi. Patogenezi. Epidemik qaytalama tifga oxshash, lekin isitma tutishi koproq boladi. Kasallik ancha yengil otadi. Immuniteti. Epidemik ochoqda odamlarda immunitet yosh bolalik davridan va qonda spiroxitolizin hamda boshqa antitelolarning borligi sababli yuzaga keladi. Asosan, shu ochoqqa kelgan odamlargina endemik tif bilan kasallanadi. Kasallikdan song turgun bolmagan immunitet yuzaga keladi. Epidemik qaytalama tif bilan kesishib otadigan immuniteti yoq. Profilaktikasi. Qurt-qumursqa va kemiruvchilarga qarshi kurash. Har bir ochoqda oziga xos turdagi kasallik qozgatuvchisi mavjuddir. Sanitariya-gigiyena qoidalariga rioya qilish. Maxsus profilaktikasi ishlab chiqilmagan. Davosi. Antibiotiklar tetratsiklin, penitsillin, levomitsetin va boshqalar bilan davolanadi. MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALLARI Bemor qoni. Òekshirish materialini toplash Bemordan qon. 1. Qalin tomchi preparati. Barmoqning yumshoq joyi teshiladi. Yogsizlantirilgan buyum oynachasi barmoqdagi qonga tekkizilib, aylanma harakat qilinib, diametri 11,5 sm. ga teng surtma tayyorlanadi. 2. Yupqa surtma tayyorlash. Yogsizlantirilgan buyum oynachasining chetki qismiga barmoqdan qon tomiziladi va ikkinchi buyum oynachasining cheti bilan qon tomchisi oynachada yoyilib chiqiladi. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Biologik. 302 Mikroskopik usul Bemor harorati kotarilgan vaqtda qon olib, yuqorida korsatil- ganidek, surtma preparat tayyorlanadi. Quritilib, fiksatsiya qilinmagan holda uning ustiga 0,5 ml Gimza boyogi tomiziladi. Bir necha daqiqadan song tomchida gemoglobin bulutchalari hosil boladi. Shundan song boyoq tokilib, yangi boyoq tomchisi tomiziladi. Bu boyoq 2030 daqiqa ushlanadi, songra asta-sekin yuviladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Borreliyalar binafsharangda korinadi. Diqqat! Òomchi fiksatsiya qilinmaganligini esda tutish lozim. Òomchini suvli fuksin boyogida ham boyash mumkin. Bunda borreliyalar pushti rangga kiradi. Negativ preparatlarni qorongilashgan mikroskopik maydonda korish mumkin. Biologik usul Bemordan 23 ml qon olinadi va dengiz chochqachasi terisi ostiga yuboriladi yoki koz, burun shilligiga tomiziladi. Endemik qaytalama tif mavjud bolsa, hayvonlar 58 kunda kasallanadi. Hayvon qonidagi borreliyalar aniqlanadi. Epidemik qaytalama tif qozgatuvchisiga dengiz chochqachalari sezuvchan emas. 1. Epidemik va endemik qaytalama tif diagnostikasida qanday tekshirish materiali olinadi? 2. Diagnostikada qollaniladigan asosiy tekshirish usullarini aytib bering. 3. Epidemik va endemik qaytalama tifni qanday farqlash mumkin? 39-bob. LEPTOSPIROZ QOZGATUVCHISI Patogen spiroxetalar Spirochaetaceae oilasiga, Leptospira avlodiga kiradi. Leptospiralarni 1915-yili yapon olimlari Inado va Ido aniq- lagan. Leptospira avlodiga odam va hayvon organizmida kasallik keltirib chiqaradigan kopgina guruh mikroorganizmlari kiradi. ? Nazorat uchun savollar 303 Morfologiyasi. Leptospiralar spiralsimon, 620x0,10,25 mkm uzunlikda, 1218 ta buramadan iborat bolib, buramalari mayda, bir-biriga zich joylashgan va ularning uchi ilmoqqa oxshashdir. Leptospiralar juda harakatchan, spiroxetalarga xos barcha harakatlanish usullarida harakatlanadi. Ular anilin boyoqlarida yaxshi boyalmaydi. Shuning uchun patologik materiallarda va kulturalarda ularni aniqlash maqsadida qorongilashgan maydon yoki kumush bilan qoplash usulida organiladi. Bunday usullarda ular jigarrang bolib korinadi. Kultural xossasi. Leptospiralar jiddiy aerob. Suyuq va yarimsuyuq oziqa muhitlariga quyon zardobi qoshilganda, 2830°C haroratda va pH 7,27,4 bolgan sharoitda osadi. Bu muhitlarda ular sekin (710 kun ichida) osadi va leptospiralar bolinib kopaygan bolsa ham muhit tiniq qoladi. Leptospiralar osganligini ezilgan tomchi preparati tayyorlab, mikroskop ostida (qorongi maydonda) quritib aniqlanadi. Qon zardobi qoshilgan zich oziqa muhitida 57 kunlarda osadi, suniy oziqa muhitida leptospiralar virulentlik xossasini yoqotadi. Fermentativ xossasi. Leptospiralarda katalaza, oksidaza, liðaza va boshqa fermentlar aniqlangan. Òoksigenligi. Leptospiralarda endotoksin borligi isbotlanmagan. Antigenligi. Leptospiralarning antigenlik tuzilishi monoretseptor zardoblar bilan mikroagglutinatsiya reaksiyasi qoyish orqali aniq- lanadi. Mana shu reaksiyaga asoslanib, leptospiralar 19 ta seroguruhga va 159 serovarga bolinadi. Har bir seroguruh va serovar ozining nomiga ega. Chidamliligi. Leptospiralar yuqori haroratga sezgir: 56°C harorat tasirida 30 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratda ular (7080°C) uzoq vaqt saqlanadi. Leptospiralar quritishga, kislota va ot suyuqligiga ham sezgirdir. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida bir necha daqiqadan song nobud boladi. Leptospiralar suvda ikki oygacha, sut mahsulotlarida, nonda bir necha soatgacha saqlanadi. Patogenligi. Leptospira bilan kemiruvchilar kasallanadi, lekin ular bilan yirik va mayda shoxli hayvonlar, chochqa, it, qoshtuyoq- lilar va hatto, yovvoyi hayvonlar ham kasallanishi mumkin. Hayvonlarda kasallik surunkali shaklda otadi. Laboratoriya hayvonlaridan leptospiralarga dengiz chochqachasi, tillarang olmaxonlar sezgirdir. Lekin ularda kasallikni leptospiralarning ayrim serovarlarigina keltirib chiqarishi mumkin. Kemiruvchilarda ham kasallik surunkali shaklda otadi va leptospiralar ularning siydigi bilan ajraladi. Infeksiya manbai. Infeksiya manbai bolib kasal qishloq xojalik hayvonlari va kemiruvchilar (asosan, kalamushlar) hisoblanadi. Ular 304 siydigi bilan atrofidagi tuproq, ochiq suv havzalari (quduq, ariq, hovuz), oziq-ovqatlarni ifloslantiradilar. Òarqalish yoli. Leptospiralar ifloslangan suvda turli xil ishlar olib borilganda, chomilganda, kasal hayvonlarni parvarish qilganda, ifloslangan oziq-ovqatlarni istemol qilganda yuqadi. Patogenezi. Qozgatuvchi organizmga jarohatlangan teri va koz, ogiz shilliq pardalari orqali kiradi. Òeri va shilliq qavatlarda birlamchi belgilar yuzaga kelmaydi. Leptospiroz sariqlik va sariqsiz shaklda otadi. Organizmga kirgan leptospiralar limfa yoli orqali qonga otadi va qon bilan tanaga tarqaladi. Parenximatoz azolarga tushadi, jigar va buyrakda joylashib oladi. Shu vaqt ichida organizmda leptospiralarni parchalovchi antitelolar hosil boladi. Leptospiralar parchalanayotgan vaqtda zaharli modda ajraladi va bu toksin intoksikatsiya va parenximatoz azolarda qon quyilishini yuzaga keltiradi. Ogir hollarda sargayish va buyrak funksiyasining otkir buzilishi (nefrit) hosil boladi. Leptospiralarga sezgir hayvonlarda ham buyrak funksiyasining buzilishi yuzaga keladi. Yengil shakllarida parenximatoz organlarni shikastlanganligini maxsus usullarda tek- shirilgandagina aniqlash mumkin. Immuniteti. Agglutinin va spiroxetolizinlarning hosil bolishiga bogliq bolib, 34 hafta ichida antitelolar miqdori eng yuqori konsentratsiyaga (1:1000 va undan yuqori) yetadi. Immunitet uzoq vaqt saqlanadi. Profilaktikasi. Kemiruvchilarga qarshi tadbirlar, botqoqliklarni quritish, oziq-ovqat mahsulotlarini sichqon va kalamushlar chiqindisi bilan ifloslanishdan saqlash choralarini amalga oshirish. Qishloq xojaligi hayvonlarini emlab turish lozim. Maxsus profilaktikasi boyicha infeksiya ochogida ishlayotgan xodimlarni emlash lozim. Ayrim leptospiralarning serovarlarini qizdirish yoli bilan olingan olik leptospiroz vaksinasi qollaniladi. Davosi. Penitsillin, tetratsiklin, leptospirozga qarshi immuno- globulin (keng tarqalgan leptospira seroguruhlaridan tayyorlangan)lar qollaniladi. 1. Leptospiralarning morfologik va kultural xossasini bayon eting. 2. Leptospiralarning chidamliligini bilasizmi? 3. Leptospiralarning patogenligi, infeksiya manbai va tarqalish yollari qanday? 4. Leptospiroz patogenezini izohlang. 5. Leptospirozda immunitet qanday antitelolar hisobiga hosil boladi? ? Nazorat uchun savollar 305 MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH TEKSHIRISH MATERIALLARI 1. Qon. 2. Siydik. 3. Orqa miya suyuqligi. 4. Suv va oziq-ovqat mahsulotlari. 5. Murdalardan material. Tekshirish materialini toplash Kasallikning birinchi Steril shpris yordamida bilak venasidan kunlarida qon olinadi. 5 ml olinadi. Siydik. Steril kateter bilan steril idishga olinadi. Orqa miya suyuqligi. Maxsus igna yordamida steril idishga olinadi. Suv, oziq-ovqatlar. «Sanitariya mikrobiologiyasi» bolimi- ga qarang. Asosiy tekshirish usullari 1. Mikroskopik. 2. Bakteriologik. 3. Serologik. 4. Biologik. Mikroskopik usul. Kasallikning 57-kunlari qon olinadi. Bemor qonidan 12 ml olib natriy sitrati bilan aralashtiriladi va 1 soat davomida tindiriladi. Aralashmaning yuza qismidan Paster piðetkasida 1 tomchi olib yogsizlantirilgan buyum oynachasiga tomiziladi va uning usti oynacha bilan yopilib, mikroskopning qorongilashtirilgan maydonida tekshiriladi. Siydik, orqa miya suyuqligi sentrifuga qilinadi, chokmasidan surtma tayyorlab, mikroskop ostida tekshiriladi. Bakteriologik usul. Òekshirish materiallari Ulengut oziqa muhiti quyilgan 35 ta probirkaga ekiladi. Probirkalarni 1830°C haroratda 3 oyga termostatda qoldiriladi. Leptospiralar oziqa muhitda osgan bolsa ham muhit tiniq qoladi. Shuning uchun har 56 kunda oziqa muhitidan olib ezilgan tomchi preparati tayyorlab, qorongilashgan maydonda tekshirib turiladi. Har bir probirkadan 3 tadan preparat tayyorlash lozim. Serologik usul. Bemordan kasallikning 45-kunlari qon olinib, mikroagglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Bemorning qon zardobi 1:50 dan 1:1600 gacha suyultiriladi. Antigen sifatida suyuq oziqa muhitida 306 ostirilgan mikrob kulturasi (tirik leptospiralar) qollaniladi. Aniqlangan diagnostik titri 1:100 va undan yuqorida bolsa, reaksiya musbat deyiladi. Reaksiyaning natijasi, albatta, ezilgan tomchi preparati tayyorlab qorongilashtirilgan maydonda organiladi. Mikroskop ostida orgimchakka oxshash leptospiralar korinsa, reaksiya musbat deyiladi. Biologik usul. Bemor qonidan 23 ml olib dengiz chochqa- chalarining qorin boshligi yoki terisi ostiga yuboriladi. 610 kundan keyin dengiz chochqachalari kasallanadi. Zararlangan hayvonlar 1 oygacha kuzatib turiladi. Vaqt-vaqti bilan ulardan qon olib, oziqa muhitiga ekib natija organiladi. Ular olgandan keyin azolaridan material olib, oziqa muhitiga ekib organish davom ettiriladi. Bemordan olingan siydik dengiz chochqachalarining qorin boshligini yungi olingan va jarohatlangan terisiga bir tomchi miqdorda tomiziladi. Òomchi qurigandan song yana shuncha siydik tomiziladi. Bu ish 45 marotaba takrorlanadi. Hayvonlar uch oy kuzatiladi. Vaqt-vaqti bilan hayvonlardan qon olib, oziqa muhitiga ekib natija organiladi, hayvonlar olgandan song yorib, azolaridan material olib, oziqa muhitiga ekib yana organiladi. 1. Leptospirozga shubha qilinganda qanday tekshirish materiali olib tekshiriladi? 2. Asosiy tekshirish usullarini bayon eting. 3. Mikroagglutinatsiyaning natijasi qanday oqiladi? 4. Biologik sinamani bayon eting. Rikketsiyalar Rikketsiyalar alohida guruh polimorf bakteriyalardir. Ular hujayra ichidagi parazitlar bolib hisoblanadi. Ular Ricketsiaceae oilasiga kiradi. Rikketsiyani birinchi bolib, amerikalik olim Rikkets aniqlagan va uning ozi shu kasallikdan olgan. 1913-yili chex olimi Provatsek toshmali tif bilan ogrigan bemor qonida rikketsiyalarga oxshash mikroblarni aniqlagan. U ham toshmali tifdan olgan. 1616-yilda portugaliyalik olim RoshaLima ozining uzoq vaqt tekshiruvlari natijasida Meksika va Yevropa toshmali tif kasalliklarining qozgatuvchisi ham Rikkets aniqlagan mikroblarning bir turi ekanligini isbotladi. Shuning uchun rikketsiyalarga Rikkets nomi berildi. Epidemiologik toshmali tif qozgatuvchisiga esa Provatsek rikketsiyalari nomi berildi. ? Nazorat uchun savollar 307 Òoshmali tifni organishda rus olimlari A.A. Krontovskiy, P.F. Zdro- dovskiy, E.S. Galinevichlar katta hissa qoshgan. Rikketsiyalar orasida odam, hayvon uchun patogen turlari ham uchraydi. Rikketsiyalar keltirib chiqaradigan kasalliklarga rikketsiozlar deyiladi. P.F. Zdro- dovskiy rikketsiyalarni besh guruhga boladi: 1. Òoshmali tif rikketsioz guruhi. 2. Kanali toshmali isitma guruhi. 3. Sutsugamushi guruhi. 4. Ku lixoradka (isitma) guruhi. 5. Paroksizmal rikketsioz guruhi. Morfologiyasi. Rikketsiyalarning sharsimon, mayda va yirik tayoqchasimon, iðsimon shakllari uchraydi. Rikketsiyalar spora va kapsula hosil qilmaydi, harakatsiz, Grammanfiy, RomanovskiyGimza, Zdrodovskiy usullarida boyalganda qizil rangga boyaladi. Kultural xossasi. Xojayin toqimasida bolinib kopayadi. Mik- roblarning har bir turi xojayin toqimasining sitoplazmasida, yadrosida, vakuolalarida rivojlanadi. Ular oziga sezuvchan hayvonlarning toqi- malarida, tovuq embrionida yaxshi rivojlanadi. Fermentativ xossasi. Aktiv emas. Òoksigenligi. Òermolabil endotoksin hosil qiladi. Antigenligi. Rikketsiyalar 2 ta antigen ishlab chiqaradi: guruhli termostabil va spetsifik termolabil antigenlar. Chidamliligi. Ku-isitmasidan tashqari, rikketsiyalar yuqori haro- ratga kam chidamli. Past haroratga va quritishga barcha rikketsiyalar chidamli va ular antibiotiklarga sezuvchandir. 40-bob. ÒOSHMALI TIF Epidemik toshmali tif qozgatuvchisi Ricketisia provazekii hisob- lanadi. Morfologiyasi. Polimorf, sharsimon, gantelsimon, iðsimon shakllarda uchraydi. Zdrodovskiy usulida boyalganda qizil rangga boyaladi. Kultural xossasi. Xojayini toqimasi sitoplazmasida bolinib kopayadi, bitlarning ichak epiteliysida, tomir endoteliysida rivoj- lanadi. Kopincha tovuq embrionining sariqlik qopchasida ostiriladi. 813 kundan song bolinib kopaygan joyida blyashka (pilakcha) hosil qilib osadi. Òoksigenligi. Provatsek rikketsiyasi endotoksin hosil qiladi. Sof holda ajratib olinmagan, yuqori harorat tasirida tez parchalanadi, bu esa uning oqsil tabiatligidan dalolat beradi. Òoksin tomirlarning endoteliy toqimalarini shikastlaydi, natijada kapillarlarning otkazuv- chanligi oshadi. 308 Antigenligi. Provatsek rikketsiyasi 2 ta antigen saqlaydi: 1. Yuzaki, termolabil, kimyoviy tarkibiga kora liðidopolisaxarid oqsil tabiatli bolib, tiðospetsifik emas. Endemik toshmali tif, Protey 0X 19 , 0X 2 larning antigenlik xossasi bilan umumiydir. 2. Oqsil polisaxarid tabiatli, tiðospetsifik, hujayraning ichki qismidan ajraladigan antigendir. Chidamliligi. Yuqori harorat va nam sharoitda Provatsek rik- ketsiyasi tez nobud boladi. Bitning qurigan najasida uzoq vaqt saqlanadi. Dezinfeksiyalovchi modda tasirida tez nobud boladi. Hayvonlar sezuvchanligi. Laboratoriya hayvonlaridan oq sich- qonlar, dengiz chochqachalari, maymunlar sezuvchandir. Maymun- larda toshmali tifning klinik belgilari namoyon boladi, oq sich- qonlarda esa zotiljam yuzaga keladi. Infeksiya manbai. Kasal odam infeksiya manbai hisoblanadi. Òarqalish yoli. Òransmissiv yol orqali tarqaladi. 1909-yili fransuz olimi Nikol maymunlarda tajriba otkazayotib kiyim bitlari Provatsek rikketsiyasining tarqatuvchisi ekanligini aniqladi. Keyinchalik bosh bitlari ham tashuvchi bolishi mumkinligi aniqlanadi. Yuqish mexanizmi. Bemor qonini sorgan bit 45 kunlarda zararli bolib hisoblanadi. Shu vaqt ichida bitlarning ichak epiteliy toqimalarida ular bolinib kopayadi va toqimalarni shikastlaydi, kop miqdorda uning najasi bilan tashqariga chiqariladi. Bit teriga yopishganda uni tishlaydi va shu zahoti rikketsiya saqlovchi najasini chiqaradi. Odam esa terini qashib rikketsiyalarni shikastlangan terisi orqali oz organizmiga kiritadi. Patogenezi. Rikketsiyalar organizmga tushgandan song tomir- larning endoteliy toqimalariga otadi. Bu yerda ular bolinib ko- payadi va toqimalarni nobud qiladi. Songra esa kop miqdorda qonga otadi rikketsiyemiya yuzaga keladi. Òomirlar yalliglanadi va tromb hosil boladi. Natijada mayda qon tomirlarining otkazuv- chanligini tosib qoyadi. Bosh miya tomirlaridagi tromb bolgan joyda granula hosil boladi va meningoensefalitga xos yalliglanish yuzaga keladi. Òoshmali tif otkir boshlanadi. Yuqori harorat, intoksikatsiya, kuchli bosh ogrigi, rozeola, petexial toshmalar yuzaga keladi. Immuniteti. Kasallik otgandan song butun umrga mustahkam antimikrob va antitoksik immunitet hosil boladi. Qonda antitelolar, komplement boglanish antitelolari, agglutininlar aniqlanadi. Brill kasalligi Keyingi yillarda toshmali tif bilan ogrib otgan bemorlar orga- nizmida uzoq vaqtgacha Provatsek rikketsiyalari saqlanib qolishi aniqlandi. Organizmning kasallikka qarshi kuchi kamaygan va unga 309 beriluvchan bolgan hollarida bir necha yildan (1030) song ham kasallik yuzaga keladi, yani epidemik toshmali tif retsidivi yuzaga keladi. Birinchi bolib bu kasallikni Brill aniqlagan, N. Sinsser esa kasallikning qozgatuvchisi Provatsek rikketsiyalari ekanligini isbotlab bergan. Kasallik yengil va zararsiz otadi. Kasallik diagnostikasida qollaniladigan VeylFeliks reaksiyasida OX 19 protey bilan aggluti- natsiya reaksiyasi manfiy, Provatsek rikketsiyalari bilan esa musbat boladi. Bundan tashqari, Brill kasalligi reinfeksiyadir, degan fikrlar ham bor. Kasallikning yengil otishiga organizmda hosil bolgan immu- nitet sababchidir deyishadi. Profilaktikasi. Maxsus profilaktika yuzasidan Provatsek rikketsiya- larining yuzaki antigenlaridan tayyorlangan konsentrlangan kimyoviy vaksina qollaniladi. Umumiy profilaktikasi bemorlarni ajratish va kasalxonaga yotqizish, bitlarga qarshi kurashdir. Endemik toshmali tif Bu kasallikni qozgatuvchisi 1928-yili X. Muzer tomonidan aniqlangan va uning nomi bilan Muzer rikketsiyalari deb yuritiladi. Hozirgi vaqtda ularni R.typhi deb nomlanadi. Morfologiyasi. Mayda kokksimon (diametri 1 mkm.gacha) yoki tayoqchasimon (0,306x1,5 mkm) mikroorganizmlardir. Provatsek rikketsiyalariga nisbatan polimorf emas. Zdrodovskiy usulida boyalganda qizil rangga va Grammanfiy bolib boyaladi. Kultural xossasi. Muzer rikketsiyasi tovuq embrionining sariqlik qopchasida 35°C haroratda yaxshi rivojlanadi, pilikchalar hosil qilib osadi. Bogimoyoqlilarning ichki epiteliy toqimasi, yadro va sitoplazmasida yaxshi rivojlanadi. Òoksigenligi. Muzur rikketsiyasi Provatsek rikketsiyasidan farqla- nadigan endotoksin hosil qiladi va buni neytrallash reaksiyasi natijasida aniqlash mumkin. Antigenlik tuzilmasi. Muzer rikketsiyasi 2 ta antigenlik kompleksini saqlaydi. 1. Provatsek rikketsiyasi hamda OX 19 va OX 2 bilan umumiy termostabil antigeni. 2. Muzer rikketsiyasini Provatsek rikketsiyasidan farqlovchi termolabil, tiðospetsifik antigeni. Chidamliligi. Muzer rikketsiyasi tashqi muhitga kam chidamli, lekin qurigan holda past haroratda uzoq vaqt saqlanadi. Dezinfek- siyalovchi moddalar tasirida tez nobud boladi. 310 Hayvonlarning sezuvchanligi. Endemik toshmali tif bilan kemi- ruvchilar, asosan, sichqonlar va kalamushlar kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz chochqachalari sezuvchan. Material ularning qorin boshligiga yuborilganda periorxit yuzaga keladi. Infeksiya manbai. Endemik toshmali tif zoonoz infeksiyadir. Òabiatda infeksiya manbai bolib kalamushlar va sichqonlar hisoblanadi. Òarqalish yollari. Òransmissiv, alimentar, bilvosita kontakt yollari orqali tarqaladi. Òashuvchisi bolib kalamush va kanalar hisoblanadi. Patogenezi. Endemik toshmali tif qonli infeksiyadir. Uning patogenezi epidemik toshmali tifnikiga oxshashdir. Klinik belgilari va kasallik ancha yengil otadi. Kasallik isitma va toshma toshish bilan tavsiflanadi. Kasallik endemik xarakterga ega. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam antimikrob va antitoksik immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Kemiruvchilarga qarshi kurashish va sanitar-gigiyenik sharoitlarni yaxshilashdan iboratdir. Maxsus profilaktikasi maqsadida olik Muzer rikketsiyasini saqlovchi vaksinadan foydalaniladi. Davosi. Òetratsiklin qatoriga tegishli antibiotiklar bilan davo- lanadi. 1. Endemik toshmali tifning infeksiya manbai va tarqalish yolini bilasizmi? 2. Endemik toshmali tif kasalligini oldini olish maqsadida qanday ishlar olib boriladi? EPIDEMIK VA ENDEMIK ÒOSHMALI ÒIF DIAGNOSÒIKASI ÒEKSHIRISH MAÒERIALI ÒEKSHIRISH USULLARI Qon. 1. Serologik: a) komplement boglanish reaksiyasi; b) agglu- tinatsiya reaksiyasi; d) bevosita gemagglutinatsiya reaksiyasi; e) toksinlarni neytrallash reak- siyasi; f) immunoluminessent usul qollaniladi. Bemor venasidan 57 ml qon 2. Biologik usul. steril probirkaga olinadi. ? Nazorat uchun savollar 311 Serologik usul Komplement boglanish reaksiyasi. Bemordan olingan qonning zardobi ajratib olinadi, parallel holda 2 ta antigenProvatsek va Muzer rikketsiyalari bilan reaksiya qoyiladi. Bu reaksiya epidemik va endemik toshmali tifni farqlashda qollaniladi. Umumiy sxema asosida bemor qon zardobi 1:10 dan 1:640 gacha suyultiriladi. 1:100 va undan yuqori suyultirish darajalarida eritrotsitlar chokma bersa, reaksiya musbat deyiladi. Agglutinatsiya reaksiyasi (AR). Òoshmali tifni Brill kasalligidan farqlash uchun agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Diagnostikum sifatida Provatsek rikketsiyasi va OX 19 olik kulturasi qollaniladi. Brill kasalligida olik protey kulturasi bilan VeylFeliks reaksiyasi manfiy boladi. Bundan tashqari, Brill va epidemik toshmali tifni farqlash uchun quyidagi usul ham qollaniladi. Buning uchun bemor qon zardobi sistin bilan tozalanadi, chunki epidemik toshmali tifda 7 antitelo hosil boladi va u sistin tasirida tez parchalanadi. Brill kasalligida esa 19 antitelo hosil boladi va u sistin tasirida parchalanmaydi. Kengaytirilgan hajmda agglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Birinchi qatorga sistin bilan tozalangan va ikkinchi qatorga tozalanmagan qon zardobi suyultirib solinadi. Brill kasalligida ikkala qatorda ham reaksiya musbat boladi. Epidemik toshmali tifda birinchi qatorda reaksiya musbat, ikkinchi qatorda esa manfiy boladi. Bevosita gemagglutinatsiya reaksiyasi. Bemor qon zardobi 1:25 dan 1:1600 gacha suyultiriladi. Diagnostikum sifatida Provatsek eritrotsitlar diagnostikumi qollaniladi. Bemorning qon zardobida antitelo bolsa, 1:100 nisbatda eritrotsitlar soyabonsimon chokma hosil qiladi. Reaksiya qayta qoyilganda, titri ortib boradi. Biologik usul Epidemik va endemik toshmali tifni farqlash uchun biologik usul ham qollaniladi. Buning uchun dengiz chochqachasining erkagiga tekshirish materiali yuboriladi. Agar tekshirish materialida epidemik toshmali tif qozgatuvchisi bolsa, dengiz chochqachalarining harorati kotariladi. Agar tekshirish materialida endemik toshmali tif qozgatuvchisi bolsa, dengiz chochqachalarida periorxit (tuxumdonning yalligla- nishi) yuzaga keladi. 312 1. Epidemik va endemik toshmali tifni farqlashda, qanday serologik reaksiyalardan foydalaniladi? 2. Epidemik toshmali tifni Brill kasalligidan farqlashda qanday serologik reaksiyadan foydalaniladi? 41-bob. VIRUSLAR Virusli kasalliklar juda qadim zamondan malum bolsa-da, virusologiya alohida fan sifatida XIX asr oxirlaridan rivojlana boshladi. 1892-yilda rus botanik olimi D.I. Ivanovskiy tamaki barglarining mozaik kasalligini organayotganida bu kasallikni bakteriologik filtrlaridan ham otib ketadigan juda mayda mikroorganizmlar keltirib chiqarishini aniqladi. Bu mikroorganizmlar filtrlanuvchi viruslar (lotin. viruszahar) nomini oldi. Keyinchalik bakteriologik filtrlardan oquvchi boshqa mikroorganizmlar ham aniqlanadi va shundan song filtr- lanuvchi barcha viruslarni «viruslar», deb umumiy nom bilan atala boshlandi. Viruslarni organishda kopgina tekshirishlar va munozaralar bolib otgan. Ayrim olimlar ularni hujayrasiz parazit, tirik mikroorganizm- larning avlodi desalar, boshqalari bu hujayrali mikroorganizmlarning evolutsion ozgarishi natijasida yuzaga kelgan, viruslar hujayra elementlaridan ajralib chiqqan sistemalardir, deb taxmin qilishgan. Viruslarni organishda M.A. Morozov, N.F. Gamaleya, L.A. Zilber, M.P. Chumakov, A.A. Smorodinsev, V.M. Jdanov va boshqa olimlar katta hissa qoshishgan. Viruslar tirik materiyaning hujayrasiz shakldagi mavjudoti. Ular juda ham mayda mikroorganizmlardir. V.M. Jdanov viruslar bilan orta kattalikdagi bakteriyalarni fil bilan sichqonga solishtiradi. Viruslar elektron mikroskop yaratilganidan song toliq organila boshlandi. Hozirgi vaqtda viruslar kimyoviy, fizik, molekular-biologik, immunobiologik va genetik usullarda organilmoqda. Viruslar olami odamlarni, hayvonlarni, qurt-qumursqalarni, bakteriyalarni va osimliklarni zararlovchi virusga bolinadi. Viruslar biologik xossasi va shakliga kora turlicha bolsa ham, ular umumiy tuzilishga egadirlar. Yetilgan viruslar «virionlar» deyiladi. Mikroorganizmlar bir vaqtning ozida DNK va RNKni saqlasa, virion esa faqat bitta DNK yoki RNK, nuklein kislotasini saqlaydi. Viruslarda nuklein kislotasi bitta yoki ikkita iðli boladi. RNK saqlovchi ? Nazorat uchun savollar 313 viruslarning asosi bitta. DNK saqlovchi viruslar esa ikkita iðchadan iborat boladi. Òarkibidagi nuklein kislotasiga kora viruslar RNK saqlovchi va DNK saqlovchi viruslarga bolinadi. DNK saqlovchi viruslarga 5 ta, RNK saqlovchi viruslarga 19 ta oila kiradi. Bu yerda odam uchun patogen bolgan ayrim viruslargina korsatildi (32-jadval). 32-jadval Viruslarning tasnifi Virion tuzilishi. Virion markazida nuklein kislotasi joylashgan, u kapsid (yunon. kapsayashik) bilan oralgan. Kapsid oqsil tabiatli kapsomerlardan tashkil topgan. Nuklein kislotasi bilan kapsid birgalikda nukleokapsid, deb ataladi. Yetilgan viruslar kimyoviy tuzilishiga kora nukleokapsiddan tashkil topgan bolib, atrofida kapsomer joylashadi va bunday hollarda viruslar tayoqchasimon shaklda korinadi. Faglar simmetriyaning murakkab turiga ega bolib, uning bosh qismi kubsimon, dum qismi esa tayoqchasimon shaklga ega (sperma- tozoid shaklda). Yanada murakkabroq tuzilishga ega bolgan ayrim a li O i r a ll i k a v i r a l o z a a li O r a l s u r i v i h c v o l q a s K N D r a l s u r i v s k o P o n e d A s u r i v r a l s e p r e G r a l s u r i v i s u r i v k a h c e h c n i h C i s u r i v k a h c e h c n i h C ) ð it o r e s 4 3 ( i s u r i v o n e d a m a d O i s u r i v s e p r e g y i d d O i s u r i v k a h c e h c v u S i h c v o l q a s K Í Ð r a l s u r i v a n r o k i P r a l s u r i v a g o T r a l s u r i v o s k i m o t p O r a l s u r i v o s k i m a r a P r a l s u r i v o d b a R r a l s u r i v :i s u r i v ti l e y i m o il o P i r a l s u r i v O H S E a v i k a s k o K i s u r i v it il a f e s n e a n a K i s u r i v a m ti s i q i r a S i s u r i v i s a m ti s i k i g a r r o m e g k s m O i s u r i v p ð i r G - r a l a q h s o b a v q i m a z i q ,i k p e t , p ð i r g a r a P i r a l s u r i v g n i n i s u r i v h s i r u t u Q n a g i d y a m n a l a y i s t a k if i s s a l K r a l s u r i v ti t a p e G i s u r i v 314 viruslar peplos deb nomlanuvchi qobiqdan iborat. Bu qobiq viruslarni xojayini hujayrasidan ajralib chiqqanida hosil boladi. Virus kapsidi xojayini hujayrasining sitoplazmatik membranasi ichki qavatida oralib, bitta yoki bir nechta super kapsid qobigini hosil qiladi. Bunday qobiqni faqat ayrim viruslar, masalan, quturish, gerpes, ensefalit virus- larigina saqlaydi. Bu qobiq fosfoliðidlar saqlaydi va ular efir tasirida parchalanadi. Ayrim viruslarning tashqi yogli qavatidan tikanga oxshash kapsomerlar chiqib turadi (bu tikanlar otmas) va ularni peplomerlar (masalan, griðp virusi) deyiladi. Nuklein kislotasi nasl belgilarini uzatuvchi bolib hisoblanadi, kapsid va tashqi qobiq esa himoya funksiyasini bajaradi. Bundan tashqari, ular virusning hujayra ichiga kirishiga yordam beradi. Viruslarning olchami. Viruslar nanometrlarda olchanadi. Ularning olchami 1520 dan 350400 nm.gacha boradi. Viruslarning katta-kichikligini olchash usullari: 1) teshiklari malum bolgan bakteriologik filtrlarda filtrlash usuli; 2) ultrasentrifugalash (yirik viruslar tez chokadi); 3) elektron mikroskopda suratga olish usuli. Viruslarning kimyoviy tarkibi. Viruslarda DNK va RNK tuzilishi va miqdori turlichadir. DNK ning molekular massasi 110 6 dan 1,610 8 gacha, RNK da 210 6 dan 9,010 6 gacha boladi. Virionlarda oqsillar kam miqdorda bolib, ular 1620 ta amino- kislotadan tashkil topgan. Kapsid oqsilidan tashqari, nuklein kislotasi bilan boglanuvchi ichki oqsil ham mavjud. Oqsillar viruslarning antigenlik xossasini namoyon qiladi. Shuningdek, poliðeptid zanjiri zich joylashganligi sababli u viruslarni xojayinning hujayra fermentlaridan himoyalab turadi. Murakkab virionlarning tashqi qobigida yoglar va uglevodlar aniqlangan. Yog va uglevod manbai bolib, hujayra qobigi hisoblanadi. Ayrim viruslar tarkibiga kiruvchi polisaxaridlar eritrotsitlarni aggluti- natsiyaga uchratish xossasiga egadirlar. Viruslarning fermentlari. Viruslar ozlarining metabolizmiga (modda almashinish) ega emas va shuning uchun ham modda almashinuvida ishtirok etadigan fermentlarga muhtojligi yoq. Lekin ayrim viruslarda fermentlar borligi aniqlangan bolib, ular viruslarning xojayin hujayrasiga kirishida yordamlashadi. Masalan, A griðp virusidagi neraminidaza, hayvon hujayrasi qobigida saqlanadigan neytramin kislotasini parchalash xossasiga ega. Faglarida hujayra qobigini parchalovchi lizotsim, fosfataza va boshqa fermentlar aniqlangan. Virus antigenlarini aniqlash. Virus antigenlarini kasallangan xojayin hujayrasida immunofluoressensiya usulida aniqlash mumkin. Bunda viruslar bilan kasallangan xojayin hujayrasiga maxsus immun 315 luminessentlovchi zardob bilan ishlov beriladi. Luminissent mik- roskop ostida qaralganda hujayraning viruslar toplangan qismida yoruglik ajralayotgani kuzatiladi. Viruslar turini esa ishlov berilgan zardobga qarab aniqlanadi. Viruslarni hujayra bilan ozaro tasiri. Bu jarayon bir necha davrda kechadi. I davr. Virus va hujayra retseptorlari hisobiga adsorbsiya jarayoni boshlanadi. Murakkab virionlarda retseptorlar qobiq yuzasida tikanga oxshab (griðp virusi), oddiy virionlarda esa kapsid yuzasida joylashgan boladi. II davr. Virusni xojayin hujayrasiga kirishi. Bu turli viruslarda turlicha otadi. Masalan, ayrim faglar ozlarining osimtalari bilan hujayra qobigini zararlaydi va nuklein kislotasini hujayra ichiga kiritib yuboradi. Boshqa viruslar xojayin hujayrasiga vakuola yordamida tortilish yoli bilan kiradi, yani virus kirayotgan joyning hujayra qobigida chuqurcha hosil boladi. Songra chuqurchaning chetlari birikadi va virus hujayra ichida qoladi. Bunday tortilish yolini viropeksis deyiladi. III davr. «Virusni yechintirish» (dezintegratsiya). Nuklein kislotasi ozini himoya qilib turuvchi oqsil qavatidan (qobiq va kapsid) qutuladi. Yechinish jarayoni adsorbsiya vaqtida yoki virus hujayra ichiga tushganda kechishi mumkin. IV davr. Bu davrda nuklein kislotalarining replikatsiyasi (nusxa kochirish) va viruslar oqsilining sintezlanishi boshlanadi. Bu davrda xojayin hujayrasining DNK yoki RNKsi ishtirok etadi. V davr. Virionni toplash. Bu jarayon viruslarning nuklein kislotasi atrofida oqsil bolaklarini ozlaricha toplanishi bilan otadi. Oqsillar sintezi virus nuklein kislotasining sintezidan song bir necha soat yoki daqiqa oraligida boshlanishi mumkin. Ayrim viruslarda ozlaricha toplanish sitoplazmada, boshqalarida xojayinning yadro hujayrasida yuzaga kelishi mumkin. Òashqi qobigi (peplos) doimo sitoplazmada hosil boladi. VI davr. Xojayin hujayrasidan virionlar uning qobigi orqali siqib chiqariladi yoki ular xojayin hujayrasida hosil boladigan teshik orqali (bu holda xojayin hujayrasi nobud boladi) chiqadi. Virus va hujayraning ozaro tasir turlari Birinchi turi samarali infeksiya xojayin hujayrasida virion- larning yangidan hosil bolishi bilan tavsiflanadi. Ikkinchi turi abortiv infeksiya nuklein kislotasi replikatsiyasining uzilishi bilan kechadi. Uchinchi turi xojayin hujayrasida DNK nuklein kislota- sining yaratilishi bilan tavsiflanadi. Bunda xojayin hujayrasi va virusning 316 birgalikda yashash shakli (virogeniya) yuzaga keladi. Bunday holda virus va hujayra DNK replikatsiyasining sinxronligi taminlanadi. Faglarda esa bu jarayon lizogeniya deb yuritiladi. Mikroskopik tekshirish. Ayrim virusli infeksiyalarda organizm hujayra sitoplazmasi yoki yadrosida maxsus hujayra ichidagi tanachalar, yani kiritmalar (quturishda BabeshNegri, chechakda Gvarniyer tanacha- lari) kuzatiladi va bu hol diagnostikada katta ahamiyatga ega. Virus bolaklari va tanacha kiritmalarni suniy ravishda, maxsus usullarda ishlov berish yordamida kattalashtirib mikroskop immersion sistemasida organiladi. Mayda virionlar esa elektron mikroskop ostida kuzatiladi. Hujayra ichidagi kiritmalar haqida turlicha nuqtayi nazarlar mavjud. Ayrim olimlar ularni viruslarning toplanishi natijasi desalar, boshqalari virusni hujayra ichiga kirishi natijasida hosil bolgan reaksiya natijasidir, deb hisoblaydilar. Viruslarning chidamliligi. Kopgina viruslar yuqori harorat tasirida parchalanadi. Lekin, ayrim viruslar, masalan, gepatit virusi yuqori haroratga chidamlidir. Past haroratga viruslar sezuvchan emas. Quyoshning ultrabinafsha nurlari viruslarga parchalovchi tasir korsatadi. Quyoshning tarqoq nurlari esa ularga kamroq tasir korsatadi. Viruslar glitseringa chidamli bolib, bu ularni glitserinda uzoq vaqt saqlanishiga imkon yaratadi. Ular antibiotikka chidamli (viruslarni kultivatsiya qilishda ularni qoshimcha mikrofloradan ozod qilish uchun antibiotiklar bilan ishlov beriladi). Ishqor, kislota va dezinfeksiyalovchi moddalar viruslarga halokatli tasir korsatadi. Lekin ayrim viruslar formalin tasirida parchalansa ham immunogenlik xossasini saqlab qoladi. Bu vaziyat vaksinalar olishda formalindan foydalanishga imkon beradi (quturishga qarshi vaksina). Patogenligi. Ayrim viruslarga sezuvchan hayvonlar katta doirani tashkil etadi. Masalan, quturish virusiga kop hayvonlar sezuvchan boladi. Ayrim viruslar esa faqat bitta tur hayvonni zararlaydi. Masalan, it toun virusi faqat itlarni zararlaydi. Shunday viruslar borki, hayvonlar ularga umuman sezuvchan emas (masalan, qizamiq virusi). Viruslarning tashqi muhitga chiqishi va tarqalishi Bemor organizmidan poliomiyelit virusi va boshqa enteroviruslar najas bilan, quturish virusi solak bilan, griðp virusi va boshqalar nafas shilliq pardalari orqali tashqariga chiqadi. Viruslar havo-tomchi (griðp, chechak), alimentar (gepatit, poliomiyelit), bilvosita kontakt (quturish), transmissiv (ensefalit) yollar bilan tarqaladi. Viruslarni undirish usullari. Viruslar faqat toqimalarda osadi. Ular tovuq embrionida, kultura toqimalarida, sezuvchan hayvon organizmida, bogimoyoqlilar organizmida ostiriladi. 317 Viruslarni organishning dastlabki davrida olimlar hayvonlarga yuqtirib kuzatishgan. Lekin bu usul juda murakkab bolib, kopgina viruslarga esa hayvonlar sezuvchan ham emas edi. Virusologiya rivojlanishida ularni tovuq embrionida, odam va hayvon kultura toqimalarida ostirish katta natijalar berdi. Òovuq embrionini zararlash. Viruslar bilan zararlash uchun 712 kunlik tovuq embrioni olinadi va u 37°C li termostatda qoldiriladi. Havodagi namlik yetarli bolishi uchun esa termostatga idishda suv quyiladi. Òovuq embrionining tajribaga yaroqliligi embrionning harakat- lanishi va xorion-allantois qobigidagi qon tomirlarining korinishiga qarab aniqlanadi. Buning uchun ovoskopdan foydalaniladi. Òovuq embrionining quyidagi qatlamlariga zararli materiallar yuboriladi: 1) xorion allantois qobigiga; 2) allantois boshligiga; 3) amniotik boshligiga; 4) sariqlik qopchasiga. Òovuq embrionini zararlash bokslarda, steril sharoitda, steril asboblar yordamida olib boriladi. Ishni boshlashdan avval tovuq embrioni ikki marta spirtga namlangan paxta bilan artib yuborilishi lozim. Xorionallantois qobigini zararlash. Òuxum spirt bilan zararsiz- lantirilgandan song uning tomtoq qismini postlogi, songra postloq ostidagi parda olinadi va shunda xorionallantois qobigi korinadi. Zararli materialdan steril shpris yoki piðetka yordamida 0,10,2 ml olib, xorionallantois qobigiga yuboriladi. Song tuxum postlogi yana yopilib, ustidan eritilgan parafin quyiladi. Òuxumning boshqa butun joyiga unga qanday zararli material yuborilganligi oddiy qalamda yoziladi. Amniotik boshligini zararlash. Òuxum ovoskopga qoyilib, uning yon tomonidan qon tomirlari kam bolgan xorionallantois qavati qatlam bilan belgilab olinadi. Òuxum gorizontal holatda zararsiz- lantiriladi. Maxsus steril nayza bilan uning posti 23 mm chuqurlikda teshiladi va shu teshik orqali steril shpris yordamida zararli material amniotik boshligiga yuboriladi. Yuborilayotgan suyuqlik toshib ketmasligi uchun tuxumni havo qopi tomonidan teshib qoyish lozim. Zararli material yuborilgandan song har ikki teshik parafin bilan bekitiladi. Allantois boshligiga yuborish. Zararlash qorongilashtirilgan boksda olib boriladi. Òuxumning havo qatlami belgilab olinadi va zararsizlantiriladi. Songra uning postidan boshliq ochib, steril shprisda 318 zararli material embrion tomon harakatlantiriladi. Agarda igna allan- tois boshligiga yetgan bolsa, embrion soyasi oz joyini ozgartiradi. Zararli material yuborilgandan song teshik parafin bilan bekitiladi. Virusning biologik xossasiga qarab zararlangan tuxumni saqlash vaqti va harorati belgilanadi. Zararlangan tuxumni har kuni ovoskopga qoyib, embrionning tirikligi tekshiriladi. Embrion birinchi kuniyoq nobud bolsa, u zararli material yuborilayotganda shikastlangan, degan xulosaga kelinadi. Bunday tuxumlar tajribadan chetlashtiriladi. Embrionning har bir qatlamini organish talab qilinadi. Buning uchun material malum tartibda toplanadi. Dastlab allantois suyuqligi, songra amniotik suyuqligi piðetkada sorib olinadi, xorion allantois qobigi, amniotik qobigi, embrion sariqlik qopchasi va shundan song xorion allantois qobigi ajratiladi. Xorion allantois qobigidagi ozga- rishlarning tavsifiga qarab zararlangan embrionda virus borligi aniqlanadi. Gemagglutinatsiya aktivligiga ega bolmagan viruslar komplement boglanish reaksiyasi yordamida aniqlaniladi. Allantois yoki amniotik suyuqlikda virusni aniqlash uchun gemagglutinatsiya reaksiyasi qoyi- ladi. Kultura toqimalarida undirish usuli Sezgir toqima kulturalarida viruslarni undirish uchun odam va turli xil hayvonlar toqimalaridan foydalaniladi. Birlamchi triðsinlan- gan bir qatlamli kulturalar va organizmda qaytadan ishlangan toqi- malar yuborish amaliyotda keng qollaniladi. Bir qatlamli kultura toqimalar yassi shisha matraslarda undiriladi. Suyuq oziqa muhitning toqima suspenziyalari 37°C haroratda malum gistologik tuzilishga ega bolgan «In vitro» toqima qatlamlari ozga- rishiga (degeneratsiyaga) qarab viruslarning bor-yoqligi aniqlanadi. Virus saqlovchi materialni unga mos bolgan malum turdagi zardobni qoshib, viruslarni neytrallanishiga qarab aniqlash mumkin. Bu usullar tekshirish natijalarini tezroq olishga yordam beradi va ancha tejamli hisoblanadi. Agar viruslar sitopatologik ozgarishlar keltirib chiqarmasa yoki tovuq embrionida osmasa, bunday hollarda laboratoriya hayvonlarini zararlash usulidan foydalaniladi. Viruslarni undirish uchun qayta ishlangan toqimalardan foydalaniladi. Bu toqimalar xavfli osmalardan olinadi. Bir qatlamli toqimalar odam, tovuq, hayvon embrionlaridan olinadi. Bir qatlamli toqimalar ularda viruslar undirish usulining oddiyligi va natijani osongina oqilishi bilan ustun turadi. 319 Òoqimalarning organizmdan tashqarida rivojlanish qobiliyati ularning differensiyalanish darajasiga bogliq. Kamroq differensiyalangan toqimalar katta proliferatsiya (toqima elementlarining kopayishi) qobiliyatiga ega (masalan, biriktiruvchi, epitelial toqimalar). Birlamchi kultura toqimalarini tayyorlash usulining mohiyati hujayralararo toqimalarni parchalash va ularni ajratib bir qatlamli toqimalar hosil qilishdan iborat. Òoqimalarni ajratish, asosan, ularga proteolitik fermentlardan triðsinni tasir ettirish yoli bilan olib boriladi. Òriðsin eritmasi hujay- ralarni bolinib, kopayish xususiyatini saqlab qolgan holda, ularni ajralishini taminlaydi. Òoqimalar kulturasini ostirish uchun malum oziqa muhitlar kerak. Oziqa muhitlar tarkibi juda murakkab bolib, qator ingrediyentlar (aminokislota, glukoza, vitamin, mineral tuzlar, kofermentlar va b.)ni oz ichiga oladi. Òoqimalar kulturasi aseptik sharoitda olinadi. Bakterial florani oldirish uchun oziqa muhitlariga antibiotiklar (1 ml oziqa muhitiga 500 birlik penitsillin va 250 birlik streptomitsin) qoshiladi. Òayyorlangan toqimalarga 0,25 % li isitilgan triðsin eritmasi quyiladi va termostatda 37°C ga qoldiriladi. Òoqima ostirilayotgan davrda kolbani vaqt-vaqti bilan aylantirib turiladi. Òriðsinlangan toqimalar 5 daqiqa davomida 8001000 aylanma tezlikda sentrifuga qilinadi. Òoqimalarni jarohatlamaslik uchun triðsinlash va sentrifugalashni juda ehtiyotlik bilan olib borish lozim. Sentrifuga qilingandan song chokma ustidagi suyuqlik tokiladi, chokmasi esa oziqa muhitiga joylashtiriladi. Bir xil toqima aralashmasi hosil bolishi uchun chokma bir qavatli steril dokali voronka orqali filtrlanadi. Òoqima aralashmasini sterillikka tekshirish uchun 0,1 ml.dan olib, ikkita probirkadagi shakarli shorvaga ekiladi. Òoqimalar kulturasini yaxshi osishi ekilayotgan toqimalarning miqdoriga bogliq. Shu sababli triðsinlangandan keyin Goryayev kamerasidagi toqimalar hisoblanadi. Òoqima aralashmasi bolingan- dan song 1 ml.da 5000001000000 ta toqima nisbatida oziqa muhitida suyultiriladi va probirkalarga hamda matraslarga quyiladi. Òoqima kulturasi bolgan probirkalar termostatda qiyshaytirilgan holda qoldiriladi. Ekilgan kulturalar osayotganligini bilish uchun ular har kuni mikroskopning kichik obyektivida organib turiladi. Normal prolife- ratsiyalangan hujayralar yorug va bir qatlamli bolib osadi. Agar hujayralar qorongi, donador va proliferatsiyalangan bolmasa, muhit ifloslanganligidan (idishlar yaxshi tozalanmagan yoki ingrediyentlar iflosligidan) dalolat beradi. Bunday kulturalar tajribadan chetlash- tiriladi. 320 Oziqa muhitlar kultura ekilgandan song 23 kunda almashtirib turiladi, bu proliferatsiya kuchini yaxshilaydi. Normal, yaxshi prolife- ratsiyalangan hujayralargina tekshirilayotgan material bilan zararlanadi. Qayta ishlangan kulturalar xavfli osmalardan olinadi. Hela shtammi Helena ismli ayolning bachadon boyin rakidan (1950-yil), Her2 shtammi yutqin rakidan olingan. Bu hujayralar laboratoriya sharoitida ketma-ket ekish yoli bilan ostiriladi. Ularning oziga xosligi shundan iboratki, hujayralar uzoq vaqt davomida bolinib kopayadi. Hozirgi vaqtda bu hujayralar minglab (generatsiyadan) avloddan almashib otgan. Ekish jarayonida ular ayrim morfologik va biokimyoviy xossalarini yoqotadi, yani mutatsiyaga uchraydi. Shunday bolsa ham, ular viruslarni oldirish qobiliyatiga egadirlar. Bunday toqima kulturalaridan butun dunyo laboratoriyalarida foydalaniladi. Òoqima kulturalarida viruslarning bolinib kopayish muddati ularning oz xossalariga va toqima turiga bogliqdir. Viruslarning borligi toqimalarning sitopatologik tasiriga qarab baholanadi. Mikroskop ostida qaralganda hujayralarda ozgarishlar kuzatiladi. Virusning xossasi va miqdoriga qarab, toqimaning sitopatologik tasiri va faoliyati ozgaradi. Ayrim viruslarda sitopatologik tasiri bir necha kundan keyin (chechak virusida), ayrimlarida 12 haftada (gepatit virusi va b.) korinadi. Hozirgacha odamni jarohatlovchi yuzlab viruslar aniqlangan. Virusli infeksiyalarga qarshi kurashish bir necha usullarda olib boriladi. Emlash eng yaxshi usul hisoblanadi. Emlash yordamida chechak batamom yoqotilgan. Poliomiyelit kasalligi esa keskin kamaygan. Virusli infeksiyalarga qarshi kurashda umumiy profilaktika daydi itlarni yoqotish (quturishda), shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya qilish va boshqalar katta ahamiyatga ega. Lekin bu tadbirlarning hammasi ham virusli kasalliklarni toliq yoqota olmaydi. Hozirgi vaqtda olimlar hujayrani jarohatlamagan holda viruslarni yoqotish yollarini izlashmoqda. Asosiy tekshirish usullari 1. Gemagglutinatsiya reaksiyasi, bevosita gemagglutinatsiya reak- siyasi, komplement boglanish reaksiyasi. 2. Immunofluoressensiya usuli. 3. Òoqima kulturalarida viruslarni neytrallash reaksiyasi. 4. Gistologik usul kiritmalar (quturishda BabeshNegri kirit- masi, chechakda Pashshen tanachalari va b.) aniqlanadi. 5. Biologik usul. 321 42-bob. RNK SAQLOVCHI VIRUSLAR Griðp qozgatuvchisi Griðp nafas yolining keng tarqalgan otkir yuqumli kasalligi bolib, u epidemiologik xarakterga ega va kopgina odamlarni shikastlantiradi. XX asr boshlarida M.I. Afanasyev va P.B. Vaks kasallik virus tabiatli ekanligini aytib otishgan. 1903-yili C. Smits, K. Endryus va P. Leydlou bemorlardan ajratib olingan griðp virusining turini organdilar va uni griðp virusining A turi deb nomladilar. 1930-yili Ò. Frensis va Ò. Medjilm B griðp virusini, 1847-yili R. Òeyler C griðp virusini aniqlashgan. Griðp virusi Otrhomyxoviridae oilasiga kiradi. Bu oilaga odamlarda, hayvonlarda va qushlarda kasallik keltirib chiqaruvchi viruslar ham kiradi. Morfologiyasi. Griðp virusining tuzilishi murakkab. Uning tarkibiga bitta RNK iðchasi kiradi va u nukleokapsid, spiralsimon va liðiduglevod proteinli (yog, uglevod, oqsil) qobiq bilan himoyalangan. Kapsomer- larining miqdori toliq aniqlanmagan. Virusni, asosan, sferik shakli, kamroq hollarda iðsimon shakllari ham uchrab turadi. RNK xojayin toqimasi yadrosida sintezlanadi. Virusning oqsili esa sitoplazmada sintezlanadi. Virus tarkibi toqima qobigiga yaqin holda tashkil topgan. Kultural xossasi. Griðp virusi tovuq embrionining aminotik va al- lantois qobigida yaxshi rivojlanadi. Bundan tashqari, maymun buyrak toqimasi kulturasida va odam embrionida yaxshi rivojlanadi. Antigenlik tuzilishi. Griðp virusi S antigenini saqlaydi, komplement boglanish reaksiyasida ular A, B, C turlariga bolinadi. A virusida yana 2 ta antigengemagglutinin va neytraminidaza antigenlari aniqlangan. Gemagglutinin 4 ta (H 0 , H 1 , H 2 , H 3 ), neyraminidaza 2 ta (N 1 va N 2 ) hisoblanadi. B tur virusi chidamli, C tur virusi eng chidamli hisoblanadi. Griðp virusi oz tarkibida kichik turlarini saqlaydi. Chidamliligi. 65°C harorat tasirida 510 daqiqada, 50°C tasirida bir necha daqiqada nobud boladi. Uy haroratida bir necha daqiqadan song inaktivatsiyalanadi. Kislota, ishqor, efir, dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida tez nobud boladi. UBN (ultrabinafsha nur) tasiriga sezgir. Infeksiya manbai. Kasal odam infeksiya manbai hisoblanadi. Òarqalish yoli. Havo-tomchi (gaplashganda, aksirganda, yotal- ganda) yoli orqali tarqaladi. Patogenezi. Virus yuqori nafas yoli shilliq pardalari orqali kirib, uning epitelial hujayralariga kiradi va qonga soriladi hamda intoksikatsiyani 322 keltirib chiqaradi. Viruslar shilliq qavatdagi toqimalarni nobud qiladi. Bu esa boshqa mikroblarni ham organizmga kirib kasallik keltirib chiqarishiga sababchi boladi (masalan, zotiljam, bronxit va b.). Bundan tashqari, u sil kasalligini kelib chiqishiga ham qulay sharoit yaratib beradi. Kasallikdan song tiðospetsifik immunitet yuzaga keladi. Profilaktikasi. Bemorlarni izolatsiya, gospitalizatsiya qilish, xonalarni shamollatish, namli sharoitda tozalash va boshqalar. Organizmni sovuq olishining oldini olish, yani interferonni kam ishlab chiqarilishini oldini olish. Maxsus profilaktikasi. Òirik vaksina qollaniladi. Uning tarkibida A va B turli kuchsizlangan viruslar mavjud. Bolalarning ogzidan yuboriladigan tirik vaksina ham ishlab chiqilgan. Griðpdan saqlanish uchun interferonli va oksalinli surtmalar qollaniladi. Sanitariya maorifi ishlarini olib borish, kasallikning oldini olishda muhim ahamiyatga ega. Davosi. A griðp virusida yotalning oldini olish uchun remantadin qollaniladi. Ikkilamchi infeksiyaning oldini olish uchun antibakterial preparatlar beriladi. LABORATORIYA DIAGNOSTIKASI TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Burun shilliq qavatidan surtma (kasallikning otkir davrida). 2. Burun-yutqin ajratmasi. 3. Qon. Òekshirish materiallarini toplash i g il li h s n u r u b a d i m a d r o y n o p m a t a t x a P a h c a n y o a h s i h s n a g n a l z o d r a p a v i d a n a l a z o t n a g li ti r i k a g n u r u B .i d a li ti r i k a g i h c i n u r u b a v i d a li s o b a g i m s i q i k t s a p g n i n n u r u b a h c a n y o .i d a n il o b i r a q i h c a t s a - n i k e s .l u s u - 1 a m ti r e k i g o l o i z if l m 5 1 0 1 a g r o m e B a v i d a li t e fi l k a t h s i y a h c i n i g o m o t n a li b .i d a n a l r o r k a t a t r a m 3 2 h s i y a h c y a d n u b .i d a li g i y a g h s i d i g n e k i z g o i n v u s i d n i y a h C n u r u b a v n i q t u y n a li b n o p m a t q u r u q g n o S .i d a li t r a i g il li h s Burun shilliq qavatidan surtma (tezlashtirilgan usul). Burun-yutqindan ajratma. 323 Asosiy tekshirish usullari 1. Burun-yutqin yuvindisini tovuq embrionida undirish. 2. Rinotsitoskopik usuli. 3. Immunofluoressensiya usuli. 4. Serologik usuljuft zardoblar bilan komplement boglanish va tormozlangan gemagglutinatsiya reaksiyasi qoyiladi. Burun-yutqindan olingan yuvindi maxsus usulda zararsizlantiriladi va unga 500 birlikdan penitsillin va 250 birlikdan streptomitsin qoshi- ladi, songra u bilan 911 kunlik tovuq embrioni zararlanadi. Viruslar 34 kundan song bolinib kopayadi va buni gemagglu- tinatsiya reaksiyasi yordamida aniqlanadi. Antigen sifatida tovuq embrionining allantois suyuqligida osgan viruslar qollaniladi. Qaysi shtammga tegishli ekanligini unga mos immunologik zardob bilan tormozlangan gemagglutinatsiya reaksiyasi qoyib aniqlanadi. Òezlashtirilgan reaksiya Burun shilligidan olingan surtma tezlashtirilgan reaksiya asosida tekshiriladi. Rinotsitoskopik tekshirish. Bu tekshirish taxminiy hisoblanadi. Burun shilligidan surtma tayyorlanib, Romanovskiy usulida boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Grið kasalligida kiðrikchalardan mahrum bolgan hujayralardan silindrsimon epiteliysida ozgarishlar kuzatiladi. Bundan tashqari, silindrsimon hujayralarni Romanovskiy usulida boyalganda binafsharangga boyalgan kiritmalarni korish mumkin. Silindrsimon epiteliylardagi ozgarishlar va kiritmalar kasallikning birinchi davrlarida aniqlanadi. .l u s u - 2 n a li b a m t i r e k i g o l o i z if i k o y q u r u Q g n i n n i q t u y a d i m a d r o y n o p m a t n a g n a l m a n . i d a l i t r a i r o v e d a q r o h s a l m a n i n n o p m a Ò n o v y a h n a g n a l a y i s t a v i t k a n i i l % 5 n u h c u g n i n n i q t u Y . n i k m u m h s a ll o q m a h i n i b o d r a z a d n i s o y y a d n u h s i r o v e d a q r o a t r a m 3 2 .i d a n i l o n o p m a t i g n a y r a f a s r a H .i d a li t r a g a d a k r i b o r p n o p m a t n a g n il o n a d r o m e B i .i d a n il o s a g a v r o h s l m 5 b i n il o n o q l m 4 3 n a d a n e V , i b o d r a z .i d a li t a rj a i h c n i k k i a v a d i r v a d i h c n i r i b g n i n k il l a s a K y a d n u h s a d i r v a d n a g t o y a l a z u t r o m e b a t r a m h s i y o q a y i s k a e r n a li b b o d r a z t f u j( i d a n il i q . ) i d a n il o n u h c u Qon. 324 Òezlashtirilgan usulga immunofluoressensiya usulini ham kiritish mumkin. Surtma preparatga turga xos immunofluoressensiya antizardob bilan ishlov beriladi. Epitelial hujayralarda griðp virusi aniqlansa, yashil-sariq yoruglik ajraladi. Serologik diagnostika Retrospektiv diagnostika uchun juft zardob usuli qollaniladi. Bemordan kasallik boshlanishida va sogayish davrida qon olinadi. Zardobi ajratib olingandan song komplement boglanish va tor- mozlangan gemagglutinatsiya reaksiyalari qoyiladi. Antigen sifatida diagnostik griðp antigenidan foydalaniladi. Reaksiya musbat bolsa, ikkinchi usuli zardobi bilan natija tort marta va undan ham yuqori antitelo titriga teng boladi. 1. Griðp virusining morfologiyasini bayon eting. 2. Griðp virusi qanday undiriladi? 3. Griðp virusining antigenlik tuzilishi qanday? 4. Griðp virusining tashqi muhitga chidamliligi qanday? 5. Nima sababdan griðp kasalligida ikkilamchi infeksiya yuzaga keladi? 6. Griðp kasalligining laborator diagnostikasida qanday usullar qollaniladi? 43-bob. QUTURISH QOZGATUVCHISI Quturish virusi Rhabdoviridae (rabdovirus) oilasiga kiradi. Bu oilaga quturish virusi, vezikular stomatit, hayvonlar va hasharotlarda kasallik keltirib chiqaruvchi viruslar kiradi. Ming yillar davomida insoniyat bu qorqinchli kasallikqutu- rishdan aziyat chekib kelgan. Bu kasallik haqida Aristotel va Abu Ali ibn Sino kitoblarida ham qayd qilib otilgan. Eramizdan I asr ilgari Rim olimi Selskiy it tishlagan joyni nurlantirilgan temir bilan kuydi- rishni taklif etgan. Bu ogriqli ishlarni faqat it tishlagan joyning yuzasi katta bolmagan hollarda va shu zahoti qilish lozim edi. Bunday davolash ishlarini tarixdan koplab keltirish mumkin. Oz davrida ular ham foydali natija bergan. Quturish virusini birinchi bolib, 1880-yili L. Paster aniqlagan. 1886-yili odessalik shifokorlar oz mablaglaridan N.F. Gamaleyani Parijga, L. Paster huzuriga, quturishga qarshi vaksina qanday usulda tayyorlanishni organishga jonatadilar. U Odessaga qaytib kelganidan ? Nazorat uchun savollar 325 song laboratoriya ochildi va bu yerda antirabik vaksina tayyorlana boshlandi. Morfologiyasi. Quturish virusi tayoqchasimon (oqsimon) shaklga ega, bir uchi yassi, ikkinchi uchi esa biroz choziq. 80180 nm kattalikda. Tarkibida bitta iðli RNK ni saqlaydi, atrofi kapsid bilan oralgan. Kapsid esa tashqi tarafidan glikoproteid va glikoliðidlarini saqlovchi qobiq bilan oralgan. Qobiqda peplomeri mavjud. Virus bilan zararlangan hujayra sitoplazmasida Babesh (1882) va Negri (1903) aniqlagan kiritmalarni hosil qiladi. Shuning uchun ularni BabeshNegri tanachalari, deb yuritiladi. Bu tanachalarning kattaligi 34 dan 20 mkm. gacha. Ular turli shakllarda, kopincha sferik, ovalsimon va kop qirrali bolishi mumkin. Kislotali boyoqlarda ular qizil rangga kiradi. BabeshNegri tanachalari bosh miya nerv hujayralari sitoplazmasida joylashadi. BabeshNegri tanachalarini aniqlash diagnostikada katta ahamiyatga ega. Kultural xossasi. Quturish virusi sichqon, joja, quyon miya toqimasida, tovuq embrioni, buzoq, qoy embrionlarida va turli xil hayvonlarning toqima kulturalarida undiriladi. Antigenlik xossasi. Quturish virusi antigenlik turlariga ega emas. Ikki xil quturish virusi mavjud bolib, birinchisi yovvoyikocha virusi, hayvonlar orasida aylanib yuradi. Odam uchun ham patogen hisoblanadi. Ikkinchi quturish virusini L. Paster uzoq vaqt (133 marta) ketma-ket quyon miyasiga yuborish yoli bilan olgan. Bunda quyonni zararlashdagi virusni yashirin davri 21 kundan 7 kungacha qisqargan. Keyingi zararlashlar virusning yashirin davrini qisqartirmadi. U yetti kunligicha qoldi va bu virus fiksatsiyalangan (Viruc fixe) virus deb nomlanadi. Virusni quyon miyasiga yuborish jarayonida u quyon miyasiga joylashadi va kasallik keltirib chiqarish xossasini yoqotadi. Lekin u antigenlik xossasini toliq saqlab qoldi. Shuning uchun bu virus quturishga qarshi antirabik vaksina tayyorlashda qollaniladi. Patogenligi. Quturish bilan uy va yovvoyi hayvonlar, qushlar kasallanadi. Kopincha it, bori, tulki, korshapalaklar va boshqalar kasallanadi. Korshapalaklarda kasallik belgisiz otadi. Ular quturish virusini saqlovchi manba bolib hisoblanishi mumkin. Infeksia manbayi. Kasal hayvon, odam. Òarqalish yoli. Quturish virusi bevosita kontakt yoli orqali, yani quturgan hayvon tishlaganda yoki kasal hayvonning solagi shikastlangan teri va shilliq pardalarga tushishi natijasida tarqaladi. Patogenezi. Quturgan hayvon tishlaganda yoki solagi tushgan vaqtdan kasallik yuzaga kelguncha bolgan davr 1545 kundan 36 oygacha davom etadi (hatto yashirin davr 1 yildan ortiq bolganligi ham aniqlangan). Yashirin davrning uzoqligi infeksiyaning kirish 326 darvozasiga va jarohatlangan toqimaning tabiatiga hamda joylanishiga bogliqdir. Bosh va yuz qismini tishlaganda, yashirin davr qisqa boladi. Viruslar organizmga kirgan joydan nerv toqimalari orqali tarqaladi va markaziy nerv sistemasi hujayralariga tushadi. Viruslar giðpokampda, chozinchoq miya, bosh suyak nerv yadrolari va orqa miyaning bel qismida kop miqdorda toplanadi. Nerv hujayralarida viruslar bolinib kopayadi. Natijada nerv sistemasi shikastlanib, yurak reflektor qozgalishitomir tortishishi, nafas va yutqin muskullari- ning changak bolishi kuzatiladi. Hansirash, havodan chochish (aerofobiya) va suvdan qorqish (gidrofobiya) yuzaga keladi. Suv haqidagi birgina xabar bemorda kuchli ogriqli changak keltirib chiqaradi. Havo harakati, shamol, bazan har qanday, shovqin, ravshan yoruglik va shu kabilar bemorda talvasa tutishiga sabab boladi, bemor bezovta bolib, kopincha atrofdagi kishilardan birontasini urish, timdalash, hatto, tishlashga payt poylaydi. 45 kundan song kasallik olim bilan tugaydi. Davolanmagan bemorlarda olim 100 % ni tashkil qiladi. Itlarda quturish belgilari quyidagicha namoyon boladi: itlarning qovogi solingan, xomraygan, solagi oqib turgan boladi. Itlar yeb bolmaydigan narsalar (toshlarni, qisqich, otashkurak va b.)ni yemoqchi boladilar va keyin ularda ota qozgalish davri boshlanadi. Itlar boshlarini past qilib togri chiziq boyicha chopadilar. Yolda uchragan odamga hurmasdan birdaniga tashlanadilar va tishlaydilar. Qozgalish davri falajlanish bilan almashinadi va olim bilan tugaydi. Immuniteti. Infeksiyadan keyingi immunitet toliq organilmagan. Emlangandan keyin immunitet 2 haftadan song hosil boladi. Bu vaziyat virusni neytrallovchi antitelolarga bogliq. Shuningdek, u kocha va fiksatsiya viruslarining interferensiyasiga ham bogliq. Interferen- siyaning ajoyib xususiyati shundan iboratki, bunda fiksatsiyalangan virus asab hujayralariga tez yetib boradi va ularda bolinib kopayadi hamda kocha virusini hujayralarga kirishiga tosqinlik qiladi. Immunitet 6 oygacha saqlanadi. Profilaktikasi. Quturgan itlarni, hayvonlarni, daydi itlarni yoqo- tish, itlarni royxatga olish va albatta, quturishga qarshi emlash. Tishlagan hollarda jarohatni sovunlab yuvish, tibbiy korikdan otkazib jarohatni tozalash. Maxsus profilaktikasi. Paster tomonidan taklif etilgan antirabik vaksinasini yuborish lozim. Vaksina fiksatsiyalangan quturish virusi bilan zararlangan hayvon (quyon, sichqon va b.) miya toqima aralashmasidan tashkil topgan ikki xil vaksina mavjud Fermi va Filliðs vaksinalari. Ular konservantlarning miqdori va sifatiga kora, bir-biridan farqlanadi. Fermi vaksinasi 1 % li fenol, Filliðs vaksinasi esa glitserinni saqlaydi. 327 Keyingi yillarda amaliyotda Flori vaksinasi ham qollanilmoqda. Bu tirik antirabik vaksinadir. Qush embrionida undirilgan viruslardan tayyorlangan bolib, ularning tasir mexanizmi hali organilmagan. Òishlangan yoki kasal hayvon solagi tushgan bemorlarning barchasi emlanishi shart. Vaksinatsiyaga qarshilik yoq, lekin yetarli korsatmalar bolmagan odamlarga vaksina yuborib bolmaydi, chunki fiksatsiya- langan virus turli asoratlar keltirib chiqarishi mumkin. Bemorlarga vaksina oz vaqtida va kop miqdorda qilinishi lozim. Vaksina tananing qorin qismi teri ostiga qilinadi. Qancha miqdorda yuborilishini shifokor belgilaydi. Xavfli hollarda, yuqori natijaga erishish uchun, bemorga vaksi- nadan tashqari antirabik immunoglobulin ham yuboriladi. Immu- noglobulin fiksatsiyalangan virus bilan otlarni giðerimmunizatsiya qilib, ularning ham zardobidan olinadi. Immunoglobulin viruslar tasirini neytrallash xossasiga ega. Bundan tashqari, u emlangandan song yuzaga keladigan asoratlarning (allergik ensefalomiyelit va b.) oldini oladi. Butun dunyoda antirabik vaksinalar asoratlar qoldirmasligiga doimo tekshirilib turiladi. Davosi. Ishlab chiqilmagan. Virusologik diagnostika Bemor olgandan keyingi diagnoz quyidagilarga asoslanadi: 1) miya toqimalaridan BabeshNegri tanachalarini aniqlash; 2) fluoressensiya antitelolari yordamida mos antigenlarni aniqlash; 3) laboratoriya hayvonlarida biologik sinama orqali viruslarni aniqlash. 1. BabeshNegri tanachalarini aniqlash. Miya toqimalaridan tayyorlangan surtmalarni fiksatsiya qilmasdan, ulardan tayyorlangan gistologik preparatlarni (hatto miya chirib ketgan bolsa ham) boyab, BabeshNegri tanachalari aniqlanadi. Bir nechta preparatlar tayyorlash lozim, chunki tanachalar ularda kam bolishi mumkin. Muromsev usulida boyalganda nerv hujayralarining sitoplazmasi havorangga, BabeshNegri tanachalari binafsha-pushti rangga va toq binafsharangga boyaladi. BabeshNegri tanachalari solak bezlaridagiga nisbatan miya hujayralarida koproq aniqlanadi. 2. Fluoressensiya zardoblari yordamida aniqlash usuli. Bu usul kam hollarda qollaniladi. 3. Biologik sinama usuli. Bu usul maxsus laboratoriyalarda olib boriladi. Zararli materialni olish, jonatish, saqlash ishlari ota xavfli infeksiyalarni tekshirish qoidalariga rioya qilingan holda olib boriladi. 328 1. Quturish virusining shakli va kattaligi qanday? 2. BabeshNegri tanachalari nima? 3. fixe virusi nima? 4. Quturish virusiga hayvonlarning sezuvchanligi qanday? 5. Quturish virusi qanday tarqaladi? 6. Vaksinani tayyorlashda qanday virus qollaniladi? 7. Quturishga shubha qilinganda virusologik tashxis nimaga asoslangan? 44-bob. POLIOMIYELIT QOZGATUVCHISI Poliomiyelit kasalligi avvaldan malum bolgan kasallikdir. Misr ibodatxonalarida tekis yuzaga chizilgan yapaloq halqasimon naqsh topilgan bolib, unda qurbon qilinayotgan odamning bir oyogi ikkinchisidan ozgin (qurigan oyoq), tovoni esa «ot tovoni»ga oxshash joylashganligi ifodalangan. Endi aniqlanishicha, poliomiyelit kasal- ligining natijasi aks ettirilgan. Poliomiyelit virusi Poliomiyelit virusi Picornaviridae oilasiga kiradi. Lotin tilidan olingan bolib, pico kichkina, rna RNK saqlovchi degan manoni bildiradi. Bu oila uchta avlodni oz ichiga oladi va odam uchun eng patogen bolib enterovirus poliomiyelit virusi, koksaki va ESNO (Enteric cytopathogenic human orphan viruses) bolib hisoblanadi. Kasallikni virusologik etiologiyasi K. Landshteyner va E. Paper tomonidan 1909-yili maymunlarda otkazilgan tajribada aniqlangan. Morfologiyasi. Mayda virusdir (1530 nm). RNK iðchasi va oqsilli kapsiddan tuzilgan. 32 ta kapsomeri bor. Kubsimon shaklda, tashqi qobigi yoq. Uglevod va yog moddasi borligi aniqlangan. Yuqumlilik xossasi RNKga bogliq. Kultural xossasi. Poliomiyelit virusi maymun buyragi toqima kulturasida, odam embrionining fibroblastida va organizmga yuboriladigan kultura toqimasida yaxshi rivojlanadi. Viruslarning bolinib kopayishi toqimalarda sitopatologik ozgarishlar bilan otadi. Antigenlik xossasi. Poliomiyelit virusining 3 ta serologik turi aniqlangan (I, II, III). Kasallikning 6590 % ni 1 turi, 1020 % ni II turi keltirib chiqaradi. III turi esa sporalik kasalliklarni keltirib chiqaradi. Poliovirusning serotiðlari neytralizatsiya reaksiyasi yordamida aniqlanadi. ? Nazorat uchun savollar 329 Chidamliligi. Qaynatilganda shu zahoti, 50°C harorat tasirida 30 daqiqadan song nobud boladi. Uy haroratida 3 oygacha saqlanadi. Past temperaturada yaxshi saqlanadi. Sovuqda najasda 6 oygacha, sutda 3 oygacha saqlanadi. Òuproq, ochiq suv havzalarida uzoq vaqt saqlanadi va epide- miologik ahamiyat kasb qiladi. Oshqozon shirasi va 1 % li fenol tasiriga chidamli. Xloramin, formalin, vodorod peroksidi, kaliy perman- ganatiga sezgir. Patogenligi. Poliomiyelitning I va II turlariga maymunlar (shimpanze va makaka), III turiga esa kemiruvchilar sezgir (paxta kalamushlari, sichqonlar). Laboratoriya sharoitida ularda kasallik kelib chiqadi va falajlanishga olib keladi. Infeksiya manbai. Kasal odam va virus tashuvchilardir. Òarqalish yoli. Mexanik (pashshalarning oyoqchalari orqali), havo-tomchi (kasallikning birinchi kunlarida burun-halqum orqali chiqariladi), alimentar (oziq-ovqatlar orqali tarqaladi). 40 kungacha ular najas bilan chiqariladi. Patogenezi. Kirish darvozasi ogiz bolib, nafas shilliq pardalar orqali kirib, halqum va ingichka ichak limfa tugunlariga soriladi va u yerda bolinib kopayadi, songra qonga soriladi. Qonda viruslarni neytrallovchi antitelolar hosil bolib, ularning markaziy nerv sistemasiga otishiga tosqinlik qiladi. Shularni yengib otgan viruslar markaziy nerv sistemasiga otib, orqa miya oldingi ortigining harakatlantiruvchi toqimalari va postloq osti qavatining kulrang moddasida joylashadi va degenerativ yalliglanish jarayonlarini keltirib chiqaradi. Natijada, bemor oyoqlarini falajlanishiga olib keladi. Poliomiyelit kasalligi uch shaklda otadi: 1. Abortiv. 2. Falajlik. 3. Falajsiz (meningial) shakllari. Poliomiyelit bilan kopincha 5 oydan boshlab 56 yoshgacha bolgan bolalar kasallanadi. Poliomiyelit virusi najas va burun halqum shilligi orqali tashqi muhitga chiqariladi. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam, butun umrga yetarli immunitet qoladi. Profilaktikasi. Vaqtida diagnoz qoyish, bemorlarni izolatsiya qilish va kasalxonaga yotqizish lozim. Maxsus profilaktikasi. XX asrning 40-yillarida Solk birinchi vaksinani taklif etgan. Bu vaksina tarkibida formalin bilan inakti- vatsiya qilingan poliomiyelit virusining I, II, III turlari mavjud bolgan. Lekin bu vaksina mustahkam immunitet hosil qilmagan va muskul ichiga yuborilganda kuchli ogriq bergan. Ikkinchi vaksinani Sebin tavsiya etgan. U tirik va kuchsizlantirilgan poliomiyelitning uchala turidan tashkil topgan vaksinadir. Bu shtammlar yuqumli xossasidan mahrum bolsa-da, lekin immunogenlik xossasini saqlab 330 qolgan. Otgan asrning 60-yillarida M.P. Chumakov va A.A. Smorodinsev Sebin tayyorlagan kuchsizlantirilgan vaksina shtammlaridan drojji konfet shaklidagi vaksinalarni tayyorlashni ishlab chiqdilar. Bu bemor- lar tomonidan vaksinani qabul qilishni osonlashtirdi. Buning natijasida kasallik toliq yoqotildi. Davosi. Simptomatik. Immunoglobulin qollaniladi. VIRUSOLOGIK DIAGNOSTIKASI ÒEKSHIRISH UCHUN MATERIAL 1. Bemor najasi (kasallikning 1 va 2-haftasida olinadi). 2. Burun-yutqindan ajratma (kasallikning birinchi kunlarida olinadi). 3. Bosh va orqa miya bolakchalari, ingichka va yogon ichak bolaklari, limfa tugunlari olinadi (murdalardan material). Materialni toplash usuli Asosiy tekshirish usullari 1. Òoqima kulturani zararlash yoli bilan virus ajratib olinadi. 2. Serologik usul, neytralizatsiya va komplement boglanish reaksiyasi otkaziladi. Bemordan olingan najas ustiga undan besh marotaba ortiq fiziologik eritma quyiladi, idish ogzi 3 % li xloramin yoki 5 % li lizol eritmasi bilan namlangan sochiq yopilib, bir xildagi aralashma hosil bolguncha chayqaltirib aralashtiriladi. Hosil bolgan aralashmani - l o t a h c a g i m s i q 5 / 1 g n i n h s i d i n il li s t i n e P .i d a li r i h s k e t i h s u l u 3 2 g n i n s a j a N .i d a li r i d - r i b o r p , b i n il o a d i m a d r o y n o p m a t q u r u Q .i d a n il o s a g a m ti r e il z u t i g a d a k Z b il o i g il q u y u s a y i m a q r o a d it i g n i n e m b o d r a - x e t h s il o i n i g il q u y u s a y i m a q r O .i d a li r i h s k e t z i g n i h s ir o k a d is a k it s o n g a i d ti g n i n e m i n is a k i n . n i k m u m m il o a d i r a l r v a d i k b a lt s a d k il l a s a k , a d r a g A b it a rj a n a d a y i m i n s u r i v , a s l o b n a g a g u t n a li b l o g n i n a y i m n a g n il o b it a r j A . n i k m u m h s i a y i m a q r o n a d . m s 2 1 n a d i m s i q a h c e n r i b a v n o g o y , i r a l n u g u t a f m il g n o s , i d a n il o - il o n a d r a lt o l u s h a m i g a d i h c i k a h c i a k h c i g n i .i d a n Najas. Burun-yutqin ajratmasi. Orqa miya suyuqligi. Murdalardan material 331 15002000 aylanma tezlikda 30 daqiqa sentrifuga qilinadi. Chokma ustidagi suyuqlik piðetka yordamida ajratib olinadi va unga 1 ml hisobida 1000 birlikda penitsillin, 500 birlikda streptomitsin qoshiladi. Uni 40 daqiqa xona haroratida qoldiriladi va zararlanguncha muzlatib qoyiladi (zararlashdan avval sterillikka tekshiriladi). Burun-yutqindan olingan material bilan ishlash ham shu usulda olib boriladi. Murdalardan olingan materiallarga alohida-alohida hovonchalarda steril qum va 10 % li fiziologik eritma solib aralashma tayyorlab olinadi. Qolgan ishlar najasni tayyorlagandek olib boriladi. Viruslarni ajratib olish uchun birlamchi va qayta ishlangan toqima kulturalariga zararli material yuboriladi. Viruslar borligini hujayralarda sitopatologik ozgarishlar yuzaga kelishiga qarab aniqlanadi. 710 kun ichida hujayralarda ozgarishlar yuzaga kelmasa, viruslar yoqligidan dalolat beradi. Ikkinchi marotaba toqima kulturalarini zararlash uchun birinchi ekilgandagi kultura suyuqligidan foydalaniladi. Ikkinchi safar zararlanganda ham hujayralarda ozgarishlar yuzaga kelmasa, natija manfiy degan xulosaga kelinadi. Agarda, natija musbat bolsa, virus turini aniqlash maqsadida poliomiyelitning uch turi zardobi bilan neytralizatsiya va komplement boglanish reaksiyalari otkaziladi. Serologik diagnostikasi Retrospektiv diagnostika usuli. Tashxisni tasdiqlash uchun bemorning juft zardobi bilan neytralizatsiya reaksiyasi qoyiladi. Birinchi zardobni kasallikning birinchi kunlarida, ikkinchisini kasallik boshla- nishidan bir oy otgandan keyin olinadi. Ikki zardob bir vaqtning ozida neytrallash reaksiyasi qoyish bilan tekshiriladi. Buning uchun zardoblarni 56°C haroratda 30 daqiqa davomida qizdiriladi va Xenks eritmasida aralashtiriladi. 1:4 dan 1:1024 gacha suyultiriladi. Har bir aralashma virusining I, II, III tur standart dozasi bilan aralashtiri- ladi, xona haroratida bir soatga qoldiriladi. Song har bir aralashmadan olib, 2 ta probirkadagi toqima kulturalariga yuboriladi, termostatga 49 kunga qoldiriladi. Reaksiyaning natijasi muhit rangining ozgarishiga qarab aniqlanadi (qizil rangdan sariq ranggacha). Muhit rangining ozgarishi antitelo borligidan dalolat beradi. Probirkadagi hujayralar tirik bolib, ularda modda almashinuvi yuzaga keladi. Buning natijasida muhitning pH korsatkichi ozgaradi va shu sababli uning rangi ham ozgaradi. Mos zardob tasirida virus neytrallanadi, hujayralar yashashi uchun sharoit yuzaga keladi. Virusni neytrallovchi antitelolar 4 marotaba ortgandagina reaksiya musbat deyiladi. Masalan, birinchi zardobda 1:8, 12 oydan keyin olingan ikkinchi zardobda titr 1:32 ga teng bolsa, reaksiya musbat deyiladi. 332 45-bob. EPIDEMIK PAROTIT Epidemik parotit yoki tepki otkir bolalar kasalligi bolib, butun dunyoda keng tarqalgan. Morfologik va biologik xossasi 1934-yili Jonson va Gudbaschur tomonidan kasallik virusi aniqlangan. Olchami 150230 nm, Morozov usulida boyalganda mikroskopda yaxshi korinadi. Shikastlangan toqimada virus kiritmalari korinadi. 78 kunlik tovuq embrionining amnionida, buyrak toqimasida va Hela toqimalarida yaxshi rivojlanadi. Chidamliligi. Òashqi muhitga chidamsiz. Glitserinda 40 kungacha saqlanadi. Past haroratga chidamli. Epidemiologiyasi. Infeksiya manbai bolib kasal odam va tuzalish davridagi bemor hisoblanadi. Havo-tomchi, bilvosita kontakt yoli orqali tarqaladi. Patogenezi va klinikasi. Yashirin davri 23 hafta. Kasallik tana harorati kotarilib boshlanadi. Quloq oldi va quloq orqa bezi kattalashadi va ogriq yuzaga keladi. Song til osti va jag osti bezlari kattalashib ogriydi. Bemorning yuzi chochqa bolasining yuziga oxshab qoladi. Kasallik 710 kun kechadi. Kasallik ogir otganda ogil bolalarda moyaklar yalliglanishi (orxit), polinevrit, eshitish va korish azolarini shikastlaydi. Immuniteti. Kasallikdan song bir umrga qoladigan mustahkam immunitet yuzaga keladi. Diagnostikasi. Kasallik belgilariga qarab, tashxis qoyiladi. Profilaktikasi va davosi. Bemorni vaqtida aniqlash, gospitalizatsiya qilish, 10 yoshgacha bolgan bolalarni 21 kungacha kontaktdan ehtiyot qilish. Maxsus profilaktikasida gammaglobulin qollaniladi va A.A. Smo- rodinsev, N. S. Klyachko taklif etgan tirik vaksina qollaniladi. Davosi. Simptomatik. 46-bob. QIZAMIQ VIRUSI Qizamiq otkir yuqumli kasallik bolib, bolalar orasida keng tarqalgan. Bolalar yuqumli kasalliklariga kiradi. 1938-yilda Plots tomonidan virusi aniqlangan. Morfologik va kultural xossasi Qizamiq virusi 100140 nm kattalikda boladi. Maymun eritrotsitlarini agglutinatsiyalaydi. Òoqima kulturalarida bolinib kopayganda yadro ichida kiritma hosil boladi. 333 Chidamliligi. Òashqi muhitda bir necha daqiqadan song nobud boladi. Shuning uchun bu kasallikda dezinfeksiya ishlari olib borilmaydi. Òabiiy sharoitda qizamiq bilan faqat odamlar kasallanadi. Epidemiologiyasi. Infeksiya manbai bolib kasal odam hisoblanadi. Bemor prodromal davrining birinchi kunidan boshlab toshma toshgandan keyingi 45 kun ichida tashqi muhitga qozgatuvchini chiqarib turadi. Havo-tomchi yoli orqali virus tarqaladi. Ayniqsa, 5 yoshgacha bolgan bolalar orasida u kop uchraydi. Qizamiq bilan kattalar ham kasallanishi mumkin. Patogenezi va klinikasi. Yashirin davri 10 kun. Kasallik prodromal davrida tana haroratining kotarilishi, yuqori nafas yoli va koz shilligining yalliglanishi bilan boshlanadi. Lunj va lab shilliq qavatiga toshma toshadi va u Filatov Koplik toshmasi deyiladi. 34 kundan keyin bemorning ahvoli ogirlashadi, avval yuzga, song tanaga toshmali papulalar toshadi, harorat kotariladi. Kasallik 79 kun kechadi. Asoratlardan zotiljam, kam hollarda ensefalitni yuzaga keltirish mumkin. Immuniteti. Kasallikdan song butun umrga mustahkam immunitet yuzaga keladi. Profilaktikasi va davosi. Maxsus profilaktikasida kontaktda bolganlarning muskuli orasiga 1,56 ml gammaglobulin yuboriladi. Soglom bolalarning terisi ostiga qizamiqqa qarshi tirik vaksina yuboriladi. Umumiy profilaktikasida bemorni ajratish va gospitalizatsiya qilish, bolalar guruhida karantin tashkil qilish, aholi orasida tushuntirish ishlarini olib borish asosiy tadbirlar hisoblanadi. Davosi. Maxsus davosi yoq, antibiotiklar yuboriladi. 47-bob. ÒAVSIFLANMAYDIGAN VIRUSLAR. GEPATIT VIRUSI Infeksion gepatit uzoq yillardan beri malum bolib, Giðpokrat bu jigarning yuqumli kasalligini sariq shakli ekanligini aytib otgan. 1883-yilda rus shifokori S.P. Botkin uzoq vaqt kuzatishlar va izlanishlar natijasida bu yuqumli kasallik ekanligini isbotlab berdi. Shundan boshlab bu kasallik Botkin nomi bilan ataldi va «Botkin kasalligi», deb yuritila boshlandi. Gepatit epidemiyasi vaqtida kasallik etiologiyasi yetarlicha organildi. Ayniqsa, 1939-yilda harbiy askarlarni emlash natijasida vujudga kelgan kasallik epidemiyasi vaqtida uning etiologiyasi atroflicha organildi. Hozirgi vaqtda virusli gepatitning 7 ta qozgatuvchisi va ularning mustaqil kasalliklari A gepatiti, B gepatiti, C gepatiti va D, E, F, G turlari mavjud. Shulardan A, B, C, D, E viruslari hozirgi davrda yaxshi organilgan. 334 Virusli A gepatiti Bemor najasidan elektron mikroskop yordamida kasallik virusi 1973-yilda Feyston va boshqa olimlar tomonidan ajratib olingan. Morfologiyasi. Mayda (2025 nm) bolib, virus tarkibidagi nuklein kislotasi toliq organilmagan. Lekin u RNK saqlaydi, deb taxmin qilinadi. Virus kubsimon shaklda, u nuklein kislotasi va tashqi qobiqdan iborat. Virusning A turini HAV (hepatitis A virus) deyiladi. Kultural xossasi. A gepatiti virusi toqima kulturalarida yaxshi osmaydi, lekin ularni Amerika maymunlarida ostirish mumkin. Antigenligi. A gepatiti virusining serotiðlari aniqlanmagan. U faqat HAV antitelosi bilan ozaro tasir qiladi. Chidamliligi. A gepatiti virusi ancha chidamli. 3040 daqiqa davomida qaynatilganda ularning toliq inaktivatsiyasi sodir boladi. U past haroratda quritishga, kislota, efir tasiriga chidamli, ultra- binafsha nurlar tasirida parchalanmaydi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida 4060 daqiqadan song nobud boladi. Patogenligi. A gepatiti virusiga maymunlar (shimpanze) sezuvchan. Infeksiya manbai. Kasallikning sariqlik va sariqsiz shaklidagi bemor odamlar infeksiya manbai bolib hisoblanadi. Òarqalish yoli. HAV turi alimentar, yani oziq-ovqat, suv, mexa- nik (pashsha tashuvchisi orqali), maishiy kontakt, yani iflos qol, idish-tovoq va boshqalar orqali tarqaladi. Patogenezi. Kirish darvozasi bolib ogiz shilliq qavati hisob- lanadi. Oshqozon-ichak yoliga tushgan HAV ichak shilliq qavati epiteliysiga otadi va undan qonga soriladi. Natijada virusemiya yuzaga keladi. Qon bilan virus butun organizmga, parenximatoz azolarga tushadi. HAV jigar hujayralari sitoplazmasida oqsil va uglevod almashinish jarayonlarini buzadi. Qonda ot kislotasi hosil boladi, aldolaza va transferaza fermentlari miqdori ortadi. HAV bilan asosan 1 yoshdan 15 yoshgacha bolgan bolalar kasallanadi. Kasallikning 23-kunlarida tana harorati qisqa vaqtga kotariladi, bemorning tinkasi quriydi, ayrim hollarda boshi ogriydi, kongli aynib qusadi, ong qovurga ostida yoqimsiz holat yuzaga keladi. Song tana harorati normaga tushgani bilan tinkasining qurishi, kongil aynishi, ishtahaning yoqligi saqlanib qoladi. Sekin-asta siydikning rangi toq rangga otadi, najas oqaradi, jigar kattala- shadi. 57 kundan keyin shilliq qavatlarda va terida sargayish yuzaga keladi. Bir necha kundan keyin sargayish toqroq boladi. Jigar kattalashadi, siydik toq rangga otadi, najas loyga oxshab qoladi. Bemorlar ojar, barcha narsalarga qoniqishsiz, asablangan holatga 335 otadi. Sariqlik 23 haftagacha saqlanib qoladi. Bir necha haftadan song sogayish yuzaga keladi. Immuniteti. Kasallikdan song mustahkam immunitet hosil boladi. Profilaktikasi. Bemorlarni ajratib qoyish, kasalxonaga kamida 4 haftaga yotqizish lozim. Bemor bilan aloqada bolganlarni nazorat qilish zarur. Aholi orasida sanitariya maorifi, dezinfeksiya ishlarini olib borish, xona, buyumlar, bemorning idish-tovoqlarini 3 % li xloramin (1 chelak suvga 300 g quruq kukundan) yoki 3 % li xlor aralashmasining eritmasi bilan zararsizlantirish muhim ahamiyatga ega. Maxsus profilaktikasi. 3 yoshdan 15 yoshgacha bolgan bolalarga va bemorlar bilan aloqada bolgan odamlarga immunoglobulin yuboriladi. Bu kasallikning kamayishiga va yengilroq otishiga yordam beradi. Davosi. Maxsus davosi yoq. Kasallik belgilariga qarab, davolash ishlari otkaziladi. Virusli B gepatiti Zardob gepatitini virusning B turi keltirib chiqaradi. U HBV (hepa- titis B virus), deb ataladi. 1961-yilda Blumberg bemor qon zardobida uning antigenini aniqladi va uni Avstraliya antigeni, deb nomladi. 1970-yili Deyn bemor qon zardobida yirik qoshimcha bolakchalarni topdi. Morfologiyasi. HBV uch shaklda uchraydi: 1. Mayda sferik shaklda 22 nm. 2. Òurli xil uzunlikdagi silindr shaklida. 3. Virusga oxshash 30 nm kattalikdagi Deyn bolakchalari. Ularda ikki iðchali DNK mavjud. Ularda yoglar, uglevodlar, oqsillar va 2 qavat qobigi aniqlangan. Kultural xossasi. HBV odam embrioni, gepatotsit kulturalarida, odam jigari hujayralarida, shuningdek, maymun (shimpanze) azo va toqimalarida osadi. HBVni ostirish juda qiyin, shuning uchun diagnostikada biroz qiyinchiliklar yuzaga keladi. Antigenligi. Deyn bolakchalarida HBV antigeni aniqlangan. Bu antigen juda murakkab bolib, uning tarkibiga yog, uglevod va oqsillar kiradi. Bu antigenga qarshi antitelo anti HB 3 hosil boladi. Deyn bolakchasining markazida soch antigeni mavjud, unga qarshi hosil bolgan antiteloni anti HBs, deb yuritiladi. Chidamliligi. 60°C da virus 34 soatgacha saqlanadi. Past harorat ularga tasir korsatmaydi. Muzlatilgan qon preparatlarida 20 yilgacha 336 tirik qoladi. HBV efirga chidamli, 4 % li formalin eritmasi ularni 12 soat- dan keyin, 3 % li xloramin eritmasi tezda ularni inaktivatsiyalaydi. Infeksiya manbai. Bemor va antigen tashuvchining qoni infeksiya manbai hisoblanadi. Òarqalish yoli. Virus bilan ifloslangan shpris, igna va asboblar orqali, jinsiy aloqa orqali boshqalarga yuqadi. DG delta gepatiti virusi mustaqil ravishda kasallik qozgatmaydi. U faqat HBs antigeni bor qon zardobida rivojlana oladi. Delta gepatiti virusi bemor organizmiga B gepatiti virusi bilan bir vaqtda yoki B gepa- titi kasalligi boshlanganidan song tushishi mumkin. Shuningdek, delta gepatiti virusi HBs antigen tashuvchilarga ham yuqishi mumkin. CG C gepatitini ilgari «parenteral» yol bilan yuqadigan, «A ham, B ham bolmagan gepatit», deb atalar edi. Keyingi yillardagi tekshirishlar asosida u mustaqil C gepatiti, deb ataladigan boldi. Bu virus odamga faqat parenteral yol bilan, asosan, virus tutgan qon va qon zardoblarini quyish natijasida yuqadi. EG E gepatiti virusi kontakt, yani iflos qol, idish-tovoq, sochiq va boshqalar orqali tarqalsa ham, A gepatiti virusidan farq qiladi. Patogenezi. Yashirin davri 26 oy (A gepatiti 36 hafta)ni tashkil qiladi. Qozgatuvchi organizmga kirib gemotogen, limfogen yollari orqali otib jigarga tushadi. Kasallikning qolgan kechinmalari HAV gepatitiga oxshash kechadi. Kasallik belgilariga qarab A va B gepatitini farqlash juda qiyin. C gepatitida yashirin davri 3545 kunni tashkil etadi. U kopincha yengil va orta ogirlikda kechayotgan A virusli gepatitdan farq qilmaydi. Bu gepatit virusini «muloyim olim», deb ham atashadi. Chunki u kasallik belgilarisiz, yani yashirin holda otadi. 15 % gacha hollarda surunkali turga otadi yoki olim bilan tugaydi. Surunkali C gepatitining jigar sirroziga aylanishi kop uchrab turadi. Jigar raki ham C virusli gepatiti bilan uzviy bogliqligi keyingi yillarda aniqlandi. Profilaktikasi. Umumiy profilaktikasida tibbiyot asboblari, shpris va ignalarni toliq sterilizatsiya qilish lozim. Qon beradigan donorlarni togri tanlash va gepatitga, antigen HBsga tekshirish, bemorlar bilan ishlaydigan tibbiyot xodimlarini shaxsiy gigiyena qoidalariga rioya qilishi muhim omildir. Bemor qoni bilan ishlaganda ehtiyot bolish (qolni 2 % li vodorod peroksidi bilan zararsizlantirish) lozim. Maxsus profilaktikasi. Zararlanish xavfi bolgan odamlarga immu- noglobulin yuboriladi. Hozirgi vaqtda HBsantigenidan tayyorlangan vaksina ishlab chiqilgan. Davosi. Kasallik belgilariga qarab davolanadi. Maxsus davosi yoq. Bemorga yogsiz oziq-ovqatlar, vitaminlar beriladi. Parhez saqlash lozim. Kop suyuqlik beriladi. Dorilar kamroq berilishi lozim, chunki dorilarni jigar orqali chiqarilishi organizmda susaygan boladi. 337 Virusologik diagnostikasi A va B gepatitlari diagnostikasida bemor qon zardobini biokimyoviy tekshirish keng qollaniladi. Jigar funksiyasining pig- ment almashinuvini buzilishi qondagi erkin va boglangan bilirubinga qarab baholanadi. Oqsil sintezining buzilishini esa timol sinamasi qoyib organiladi va bularning barchasi klinik laboratoriyalarda olib boriladi. HAV virusologik test diagnostikasi Bemor qonidagi antigen va antitelolarni virusologik diagnostika yordamida aniqlanadi. Buning uchun sezgir serologik usul qollaniladi (Gele pretsiðitatsiya reaksiyasi, immunoelektroforez va b.). Kasallikning otkir shakllarida bemor najasida immunoelektron mikroskopda viruslar borligi aniqlanadi. HBV virusologik test diagnostikasi 1. Otkir shaklda bemor qon zardobida HBs antigenini aniqlash. 2. Bemor qon zardobida kasallikning 24-haftasida komplement boglanish reaksiyasi yordamida anti HBs aniqlanadi. 1. Gepatit kasalligi qanday yol orqali tarqaladi? 2. Gepatit viruslarining chidamliligi qanday? 3. Gepatitdagi kasallik belgilarini bilasizmi? 4. Gepatitning oldini olish uchun qanday ishlar olib borilishi lozim? 48-bob. OIÒS VIRUSI ÒARQALISHI (EPIDEMIYASI)NING RIVOJLANISHI OIÒV bu odam immunitet tanqisligi virusi (VICH) bolib, u malum yollar orqali yuqadi va boshqa viruslardan farqli ravishda, OIÒV inson organizmi immun tizimini jarohatlashi bois organizmni kasallik va infeksiyalar oldida himoyasiz qilib qoyadi. Hozircha OIÒVning oldini oluvchi yoki davolashi mumkin bolgan vaksina yoki dori topilmagan. OIÒS bu orttirilgan immunitet tanqisligi sindromi bolib, u OIÒVning songgi va olim bilan yakunlanuvchi bosqichi. Hozirda tibbiyot OIÒSning rivojlanishini faqat sekinlashtirishi mumkin, xolos. Inson kasallikning biron-bir simptomini sezgunga qadar, virus ? Nazorat uchun savollar 338 organizmda on yil va undan ortiq bolishi mumkin. Bu davr ichida odam ozini mutlaq bardam his qilishi va soglom korinsa-da, ammo virusni ozgalarga yuqtirishi mumkin. Òarixga nazar tashlasak, OIÒS virusi Afrikada ayrim donorlarning qonida 1970-yilning boshlanishida qayd etilib, 1976-yilda donor qora tanli ayolda topilgan. AQSH va Yevropada 10 yildan song qayd etilgan. Avvalo, shuni aytish kerakki, VICH virusi aniqlanib, kasallik tashxisi qoyilgunga qadar, AQSHning Los-Anjeles, Nyu-York, Kaliforniya kabi shaharlarda nomalum virus keltirib chiqargan kasalliklarga pnevmotsistoz, sarkoma kaloshi (rak), surunkali limfodenoatiya kabi tashxislar bilan ogrigan bemorlar aniqlangan. OIÒS sindromi birinchi bor 1981-yilda Amerikada qayd etildi. Xabar berilishicha, immuniteti pasaygan bemorlarda sarkoma kaloshi va pnevmoniya tashxisi bilan kasallik qayd etilib, ularning gomoseksualist ekanligi ham aniqlangan. Ularda «immun yetishmaslik sindromi» ham mavjud bolgan. Ilgari bunday kasallik boshqacharoq nomlarda bolgan. OIÒS kasalligini keltirib chiqaruvchi virus 1983-yilda kashf etildi va uni hozirda «VICH virusi», deb ataladi. Keyinchalik afrikalik bemorda uning boshqacha xili VICH-2 ham qayd etildi. 1987-yilning iyul oyida AQSHda 37785 kishida va 527 bolada OIÒS royxatga olingan. Kopchilik kasallanganlarning (78 %) orasidan birining onasi OIÒS bilan ogrigan, 12 % i qon quyishi orqali yuqqan bolib, 6 % i gemofilik hisoblangan, 4 % ida oilasi haqidagi malumot aniq bolmagan. Hisoblarga qaraganda, AQSHda 1987-yilda qayd etilgan OIÒS bilan ogrigan 1000000 bemorlar turli joylarda har xil bolgan. Masalan, Nyu-Yorkda 991 nafar bolsa, San-Fransiskoda 996 nafar, Mayamida 584, Nyu-Yorkda 393, Los-Anjelesda 363 nafar bemor qayd etilgan. San-Fransisko va Nyu-Yorkda OIÒS yosh yigitlarning barvaqt olishiga sababchi bolgan. Yevropada 4549 nafar katta yoshdagilarning OIÒS bilan ogriganligi qayd etilgan. Buyuk Britaniyada 926 kishi (1987, iyul) bemor bolsa, VICH virusi bilan zararlanganlarning soni 25 marta ortiq bolgan. Ular ichida gomoseksualistlar AQSHda 73 % bolsa, Buyuk Brita- niyada 89 % ni tashkil qilgan. JSSÒ malumotiga kora, 1989-yilning mart oyida dunyo boyicha 146569 nafar OIÒS kasalligi aniqlangan bolib, ular qitalar boyicha: Shimoliy va Janubiy Amerikada 101831 bemor; Afrikada 23201 bemor; Yevropada 19817 bemor; Okeaniyada 1300 bemor; Osiyoda 360 bemor bolgan. 339 1990-yilning fevral oyiga kelib (1 yildan kam vaqt ichida), 21544 nafarga kopaygan, yani 113613 nafar (2 baravardan kop)ga oshgan. AQSH va Buyuk Britaniyada epidemiya (tarqalishi)ning birinchi tolqini gomoseksualistlar ichida, ikkinchisi giyohvandlar, fohishalar (asosan, inyeksiya yoli bilan) ichida boladi va songra u geteroseksualistlar orqali, jinsiy aloqa orqali, erkaklardan ayollarga yoki ayollardan erkaklarga (65 %) tarqaladi. Afrikada VICH infeksiya, asosan, geteroseksualistlar ichida jinsiy aloqalar orqali tarqalganligi aniqlangan va ularning nisbati 1:1 ga teng bolgan. VICH virusining tarqalishida jinsiy aloqa yolidan boshqa, zararlangan qon quyish, ignaning zararlanishi hamda vertikal boyi- cha onadan bolaga yuqish yollarining ahamiyati ham katta, deb qaraladi. Qator Afrika mamlakatlarida olib borilgan epidemiologik izlanishlar shuni korsatdiki, VICH virusining tarqalishi fohishalar orasida yuqori (8090 %) ekanligi aniqlangan; ularning mijozlari 30 % venerologik bolimlarga qatnaydiganlarga, 10 % ozida virus tutuvchi homiladorlar orqali otishligi aniqlangan. Shunday qilib, VICH virusi, asosan, Markaziy Afrikadan butun qitaga tarqala boshlagan va bemorlar ichida olim sodir bolish hollari ham borgan sari kopaya borgan, aniqrogi, tezlash- gan. Shuning uchun ham OIÒS tarqa- lishining oldini olish Jahon Sogliqni Saqlash Tashkilotining muhim va dol- zarb masalalaridan biri bolib qol- moqda. OIÒVning morfologiyasi. OIÒV virusi ribonuklein kislotadan tashkil topgan. U retroviruslar oilasiga kiradi. Morfologiyasi, strukturasi va boshqa belgilari boyicha lentiviruslar sekin rivojlanuvchi infeksiyalar oilasiga kiradi. Ular dumaloq shaklda bolib, 100 120 nm.ni tashkil etadi. Òashqari mem- branasi xojayin hujayralarini oqsillari bilan qurilgan va orasiga virusning oz oqsillari oralgan bu qobiq oqsillari deb ataladi. Virus moddasini qobiq bilan oralgan yadro tashkil etadi. Yadroda ikkita virusli RNK, orqa transkriðtaza (reveraza), integraza va proteazalar bor. OITV virusi: 1virus membranasi bu odam hujayrasining membra- nasi; 2oqsilli qobiq; 3oqsilli qobiqning trans membranali komponenti; 4matreksli oqsil; 5nukleoidli qobiq; 6VICH genomi bir zanjirli ikki molekulali RNK. VICH fermentlari: 7qaytuvchi transkriðtaza; 8integraza va RNKaza; 9proteaza. ! " # $ % & ' 340 Qobiqda ikki xil oqsillar ajratiladi: • transmembranalik glikoprotein (molekular massasi 41 kd); • tashqari glikoprotein (120 kd). Òashqi muhit omillariga chidamliligi. Òabiiy sharoitda OIÒV saqlanishi: • quritilgan biosubstratda bir necha soat davomida; • kop miqdordagi virus moddachalaridan tarkib topgan qon va eyakulyat suyuqliklarida bir necha kun davomida; • muzlatilgan qon zardobida bir necha yil davomida. 30 daqiqa davomida 56°C haroratgacha isitilsa, virusning titri 100 marotaba kamayadi, 7080°C haroratida esa 10 daqiqa davomida oladi. 70° etil spirti, 0,5 gipoxlorit Na, 1 % glutaraldegid, 6 % perekis vodorodi bilan 1 daqiqa davomida inaktivatsiya boladi. UF nurlariga OIÒVning sezuvchanligi past. OIÒV inson organizmiga, asosan, uch yol orqali kirishi mumkin: • jinsiy (seksual) yol; • qon orqali (parenteral); • onadan bolaga (vertikal). Jinsiy yuqish yoli: • OIVni jinsiy yol bilan yuqishi vaginal, anal yoki oral himoya- lanmagan seks bilan shugullanganda kuzatiladi. Shilliq qavatdagi jarohatlar, ochiq yaralar va yalliglanishlar zararlanish xavfini oshiradi. • Venerik kasalliklar (jinsiy yol bilan yuquvchi kasalliklar), jinsiy azolar shilliq qavatidagi yalliglanishlar yoki yaralar kasallik rivojla- nishiga omil bolishi mumkin. Parenteral yuqish yoli: • OIV bilan zararlanish qon orqali muloqotda kuzatiladi; • inyeksion giyohvand moddalar qabul qilganda, umumiy shpris yoki idishni ishlatish; • turli teri qoplam butunligi buzilib, qon chiqishi bilan bogliq muolajalarda (masalan, tatuirovkalar uchun steril bolmagan mashinka- larni qollash); • infeksiyalangan qon quyish (tekshirilmagan donor qoni, donor- ning seronegativ davri); • sterillanmagan tibbiy anjomlarni ishlatish; • qon orqali virusning otishi hamda OIV infeksiyasini parenteral yol bilan yuqishi. 341 Vertikal yuqish yoli: • OIV infeksiyasi homiladorlik vaqtida zararlangan onadan bolaga otishidir; • bu platsentar baryer butunligining buzilishi, tuguruq vaqtida (tuguruq yollaridan otayotganda, ona qoni bilan muloqotda bolishi) yoki kokrak suti bilan boqilganda (ona suti orqali) yuqishidir. 1) OIÒVni yuqtirgan yoki OIÒS bilan kasallangan bemor bilan himoyalanmagan tarzda jinsiy aloqada bolganda yuqadi. Infeksiya yuqishi virusning yetarli miqdoriga ega bolgan organizm suyuqliklarining soglom odam shilliq qavatidagi mikrojarohatlar va yoriqlari bilan aloqasi hisobiga yuz beradi. 2) Soglom odam organizmiga OIÒV yuqtirgan yoki OIÒS bilan kasallangan bemor qoni tushganda yuqadi. Sterillanmagan tibbiyot yoki kosmetologik asboblar qollanilganda sodir bolishi mumkin. OIÒV ushbu yuqish yoli giyohvand moddalarni tomir ichiga qabul qiluvchi shaxslar ortasida kop tarqalgan, chunki giyohvandlar guruhida kopincha sterillanmagan umumiy shpris va ignalardan foydalanadi. 3) OIÒV yuqtirgan yoki OIÒS bilan kasallangan ona orqali bolaga yuqadi. Bu homiladorlik, tugish va godakni emizish vaqtida yuz berishi mumkin. Odamlar oddiy turmushdagi muloqotda OIÒVni yuqtirishdan qorqadi. Aslida, bu qorquv asossiz. OIÒV yuqishning barcha yollari yaxshi organilgan va ilmiy asoslangan. OIÒV quyidagi hollarda yuqmaydi: • opishganda; • teriga tekkanda yoki quchoqlaganda, qol berganda, silash va erkalashda; • ichki kiyim va koylaklar orqali; • yotalganda va aksirganda; • ter va koz yoshlari orqali; • hasharotlar orqali; • umumiy chomilish havzasi va hojatxonadan foydalanilganda; • umumiy idish-tovoqdan foydalanganda. VICHning diagnostikasi. Hozirgi kunda VICH virusining odam organizmida bor yoki yoqligini aniqlash bir necha zamonaviy usullar bilan maxsus tibbiy bolim va kasalxonalarda olib boriladi. Natijada, bemorlarning haqiqiy OIÒS virusi orqali kasallanganligi hamda uning OIÒS virusi tashuvchi ekanligi aniqlanadi. Bemorlarga nisbatan tegishli davo chora-tadbirlari koriladi. OIÒS virusi tashuvchilar esa doimiy shifokor nazoratida bolishadi. Bajariladigan ishlar bemor va shifokor 342 imkon boricha, boshqalarga oshkor etmagan holda maxfiy ravishda olib boriladi. Ular quyidagilardan iborat: 1. VICH infeksiyaga antitelo hosil bolganligini aniqlash usuli. Malumki, VICH virusi organizmga kirgach, 3 oylardan song qonda antitelo hosil bola boshlaydi va natijada antigenlar yordamida serologik reaksiyalar tufayli hosil bolgan antitelo va uning kon- sentratsiyasini aniqlash mumkin. Buning uchun uch xil usuldan foydalaniladi. Birinchi usulda konyugat sifatida antigen-ferment, ikkinchisida antigen-fluoressein (radioizotop) va uchinchisida immunoglobulinlar fraksiyasini aniqlash yoli bilan izlanish ishlari olib boriladi. Hozirgi kunda yangi usullardan foydalanilmoqda. 2. VICH-antigen va viremiya usuli. Ushbu usul bilan qonda antigen borligi aniqlanadi. Bunda laboratoriya tekshiruvi kasallikning boshlangich davrida bajariladi. U kasallikning boshlangich davri hamda bolalarda infeksiya borligini aniqlashda diagnostik ahamiyatga ega. Agarda xastalikning songgi davrida qonda antigen topilsa, u bemorda immunitet sustligini korsatadi va shunga qarab, davolash kerakligi lozim. Viremiya bu qonda limfotsitlardan VICH virusi ajratib olish mumkinligidan darak beradi. 3. Bemorlarni va donorlarni tekshiruvdan otkazish usuli. Ushbu antitelo borligini aniqlash usulidan Buyuk Britaniyada laboratoriyalar va qon quyish markazlarida keng foydalaniladi. Buning uchun bemor terapevt yoki urolog qabulida bolib maslahatlashadi. Òekshiruv ishlari uchun eng yangi tegishli reaktivlar mavjud. Amaliy jihatdan ushbu usul kasallikni tez aniqlashga yordam beradi. 1. OIÒS qanday kasallik? 2. OIÒS virusining morfologiyasini bayon eting. 3. OIÒS kasalligining tarqalishi. 4. OIÒS kasalligining diagnostikasini bilasizmi? ? Nazorat uchun savollar 343 III qism. SANIÒARIYA MIKROBIOLOGIYASI Sanitariya mikrobiologiyasining vazifasi tashqi muhit (suv, tuproq, havo, oziq-ovqat va b.)da mikroorganizmlarning rivojlani- shini keltirib chiqaradigan jarayonlarni aniqlash va patogen mikro- organizmlarni yoqotish hisoblanadi. Shuning uchun tashqi muhit ifloslanish korsatkichi sifatida mikroblarning sanitariya korsatkichi qabul qilinadi. Mikroorganizmlarning sanitariya korsatkichi odam va hayvon organizmida uchraydigan, tashqi muhitga chiqarilib turiladigan mikroorganizmlar hisobiga aniqlanadi. Har bir tashqi muhitning oz sanitar korsatkichi mavjud. Sanitar-mikrobiologik tekshirish tadbirlari maxsus standartlar, ÃÎÑÒ yoki uslubiy korsatmalar asosida olib boriladi va baholanadi. 3.1. Sanitariya-bakteriologik tekshirishlar uchun oziqa muhitlari A. Eykman muhiti. a) Konsentrlangan Eykman muhiti, 100 ml distillangan suv, 5 g NaCl, 10 g pepton solib qaynatiladi va filtrlanadigan 10 g glukoza solib, pH ni 7,47,6 gacha togrilanib, 3 ta kolbaga 10 ml.dan solinadi. Gazni yigish uchun ichiga suzgich (paxta) ham solib qoyiladi va yana shu muhitdan 1 ml.dan 3 ta suzgichli (paxtali) probirkaga solib chiqiladi. b) Suyultirilgan Eykman muhiti uni tayyorlash uchun 3 ta suzgichli (paxtali) probirkaga 1 ml.dan muhit va 9 ml distillangan suv solinadi. Songra 20 daqiqa 112°C harorat va 0,5 atm bosimida sterillash uchun avtoklavga qoyiladi. B. Kessler muhiti. 100 ml distillangan suv, 1 g pepton, 5 ml ot suyuqligi solib, qaynatib, filtrlab, songra unga 1 g laktoza qoshiladi, pH ni 7,47,6 ga teng qilib togrilanadi. Keyin unga 0,4 ml 1 % li gensian binafshaning suvli eritmasi qoshiladi. Songra 5 ml suzgichli (paxtali) probirkalarga solinadi. 15 daqiqa 112°C haroratda va 0,5 atm bosimida avtoklavda sterillash uchun qoldiriladi. D. Yarimsuyuq glukozali muhit. 100 ml distillangan suv, 20 g glukoza, 0,5 g GPAlarni qaynatib, pHni 7,27,4 ga togrilab, 5 ml.dan probirkalarga quyiladi, 100°C da 30 daqiqadan 3 kun davomida Kox apparatida sterillanadi. E. Òukayevning oziqa muhiti. 344 100 ml distillangan suv, 1 g pepton, 0,5 p/g NaCl, 56 ml yog- sizlantirilgan sut solinib, kolbada aralashtiriladi, songra 5 ml.dan probirkalarga solib chiqiladi va 100°C da 3 kun davomida sterilizatsiya qilinadi. 3.2. Suvni sanitariya-bakteriologik tekshirish Buning uchun quduqlar, ochiq suv havzalari, basseyn, chiqindi suvlar, markazlashgan suv havzalaridan sinama olinadi. Sanitariya jihatidan suvga baho berish uchun quyidagi tekshirishlar olib boriladi: 1. 1 ml tekshiriladigan suvda mikroblarning umumiy sonini aniqlash. 2. Koli-titr va koli-indeksni aniqlash (koli-indeks 3, koli-titr 333 va undan yuqori). 3.3. Suvdan sinama olish Vodoprovod suvini tekshirganda, kolbaga 10 g NaSO 3 solinadi (xlorni yoqotish uchun) va jomrakning ogzi spirtovka yoki spirtga namlangan tampon bilan sterillanib, 1014 daqiqa oqizib qoyiladi. Sinamaga 500 ml suv olinadi. Ochiq suv havzalaridan suv sinamaga barometr asbobi yordamida olinadi. Suv tushuntirish xati bilan birgalikda laboratoriyaga jonatilishi lozim. Òushuntirish xatida qayerdan va kim tomonidan olingani, olingan vaqti, maqsadi, olingan vaqtdagi suv va havoning harorati, qaysi laboratoriyaga jonatilayotganligi korsatilishi lozim. Bunda suv olingan vaqtdan 2 soatdan kop otmasligi kerak. Laboratoriyaga keltirilgan sinama maxsus jurnallarga yoziladi. 3.4. Mikroblarning umumiy sonini aniqlash Vodoprovod suvi tekshirilganda alohida Petri kosachalariga 1 va 0,1 ml tekshirilayotgan suvdan quyib, ustiga eritilgan va 45°C gacha sovitilgan GPA solinadi. Ariq suvi bolsa, kosachalarga 0,01, 0,001, 0,0001 ml.dan ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 2 soatga qoldiriladi. 2-kuni ekilgan muhitlar tekshiriladi. Koloniyalar kam bolsa, ular oddiy koz bilan lupa yordamida sanaladi. Agar koloniyalar soni kop bolsa, ularni koloniya sanaydigan asbobda hisoblanadi, songra suyultirish soniga kopaytirib, kosachalar soniga bolinadi. Ortacha arifmetik hisobda 1 ml tekshiriladigan suvdagi mikroblarning umumiy soni aniqlanadi. 3.5. Suvdagi koli-titr va koli-indeksni aniqlash Ikki usulda aniqlanadi. 1. Bijgitish usuli. 2. Membranali filtr usuli. 345 3.6. Bijgitish usuli 1-kuni. Òekshiriladigan suv glukoza peptonli Eykman muhiti solingan uchta flakonga 100 ml.dan, uchta probirkaga 10 ml.dan, suyultirilgan Eykman muhiti bolgan 3 ta probirkaga 1 ml.dan ekiladi. Ekilgan muhit 43°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Agar oziqa muhiti tiniq va gaz hosil bolmasa, ichak tayoqchasi aniqlanmadi, deb javob beriladi. Agar loyqalanish va gaz hosil bolsa, tekshirish ishlari davom ettiriladi. Har bir flakon va probirkalardan olib sektorlarga bolingan Endo muhitga ekiladi. Òermostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 3-kuni. Ekilgan muhit tekshiriladi. Endo oziqa muhitida ichak tayoqchasi yaltiroq metall, malina rangli koloniya hosil qilib osadi. Shunday shubhali koloniyadan olib: 1) oksidaza sinamasi otkaziladi: buning uchun shubhali koloniyadan olib, dimetilparafenilendiamin reaktivi shimdirilgan filtr qogozga surtiladi. Agar reaksiya musbat bolsa, surtilgan joyda kok rang hosil boladi; 2) har bir sektordan koloniya olib, alohida yarimsuyuq glukozali muhitga ekiladi. Ekilganlarni termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 4-kuni. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Agar yarimsuyuq glukozali muhitning rangi ozgarib gaz hosil bolgan bolsa, davlat standart jadvaliga asoslangan holda koli-titr va koli-indeks aniqlanadi. 3.7. Membranali filtr usuli Òekshirilayotgan suv Zeyts asbobi orqali filtrlanadi. Steril pinset yordamida filtr olinib Endo muhitiga ornatiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kuni ekilgan muhit tekshiriladi. Agar Endo muhitida yaltiroq metall, malina rangli koloniya hosil bolgan bolsa, yuqorida aytilgandek tekshirish ishlari otkaziladi. 3.8. Alkogolsiz ichimliklarni sanitariya- bakteriologik tekshirish Alkogolsiz ichimliklarni sanitar-bakteriologik tekshirish ÃÎÑÒ 1327375 talabi asosida olib boriladi. Òekshirishga korxonadan chiqqan, qopqogi muhrlangan butilkalar keltirilishi lozim. Òekshirishdan oldin butilka qopqogi va boyin qismi artiladi, kuydiriladi, qopqogi ochiladi, steril paxta-dokali qopqoq bilan yopiladi. Gaz chiqib ketishi uchun 43°C haroratda termostatda 1 soatga qoldiriladi. Kislotali sharoitga ega bolgan ichimliklarni kislotasini neytrallash uchun 10 % li natriy bikarbonati eritmasidan solinadi. Ichimliklarni tekshirish ichimlik suvlarini tekshirgandek olib boriladi. 346 Achitish natijasida tayyorlangan ichimliklarda mikroblarning umumiy soni aniqlanmaydi, chunki ularning tarkibida mikroblarning ozi kop boladi. Koli-titrni aniqlash uchun Kessler yoki glukoza-peptonli muhitga 2 ta 100 ml va 10 ta probirkaga 10 ml.dan ekiladi. Siroplar 10 marta suyultiriladi, kvas, pivo va boshqa achitqi mikroblarni saqlovchi ichimliklar esa 10; 1; 0,1 va 0,01 ml.dan ekiladi. Qolgan tekshirish ishlari suvnikiga oxshash. Gazi bolgan alkogolsiz ichimliklarda koli- titr 300 dan, gazsizlarda 100, non kvaslarida 10 dan oshmasligi lozim. 1. Sanitar mikrobiologiyasining asosiy vazifalari nimadan iborat? 2. Òekshirishga suv qanday olinadi? 3. Koli-titr, koli-indeks, mikroblarning umumiy soni deganda nimani tushunasiz? 4. Koli-titr va koli-indeks qanday usullarda aniqlanadi? 3.9. Havoni sanitariya-bakteriologik tekshirish Òashqi muhit omillaridan havo organizmga katta tasir korsatadi. Havo mikroflorasini organadigan fanga aeromikrobiologiya deyiladi. Mikroblarni yashashi uchun havo qulay sharoit bolib hisoblanmaydi, chunki unda mikroblarning yashashi uchun oziqa moddalar yoq va u doimo harakatda boladi. Shunga qaramasdan, unda ayrim mikrob- lar sil, klostridiy sporalari, zamburuglar va boshqa mikroblar saq- lanadi. Havoni sanitariya-bakteriologik tekshirish ÃÎÑÒ talabiga asosan olib boriladi. Rejali va epidemiologik korsatkich boyicha tekshiriladi. Yani, operatsion xona, tugurugxona, boglov xonasi, dorixona va boshqa xonalarning havosi tekshiriladi. Havoni sanitariya-bakteriologik tekshirishda quyidagi korsatkichlar aniqlanadi: 1) 1 m 3 havodagi mikroblarning umumiy soni aniqlanadi; 2) 1 m 3 havodagi patogen va shartli-patogen mikroblar aniqlanadi. Sinama olish. Havodan sinama ikki usulda olinadi: 1) sedimentatsion usul mikroblarning mexanik ravishda choki- shiga asoslangan; 2) aspiratsion usul havoni aktiv ravishda sorib olishga asoslangan. 3.10. Sedimentatsion usul GPA solingan kosachalarni ochiq va gorizontal holda poldan turli xil balandlikda 1020 daqiqaga (havoni iflos-tozaligiga qarab) ochiq qoldiri- ladi. Patogen mikroblarni aniqlash uchun elektiv muhitlar qollaniladi. ? Nazorat uchun savollar 347 Ekilganlarni termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Ertasi kuni olib tekshiriladi. 3.11. Aspiratsion usul Rechmenskiy, Dyakonova, PAB1, Krotov asboblaridan foydalaniladi. Krotov asbobida havoni sinamaga olish Petri kosachasidagi muhitga havo urilishiga asoslangan. Krotov asbobi uch qismdan iborat: havoni sinamaga oluvchi qismi, rotometr va elektr mexanizmi qismi. 1-kun. Havoni soruvchi qismiga ochiq holdagi Petri kosachasi ornatiladi, qopqogining teshigi orqali havo oziqa muhitiga ekiladi, kosacha esa bir daqiqada 40005000 marta aylanadi. Havo muhitga bir xil otiradi. Krotov asbobining kamchiligi shundan iboratki, u elektr energiyasida ishlaydi va hamma sharoitda qollashning iloji yoq. Oziqa muhitini termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi, koloniyalar sanaladi. 1 m 3 havo- dagi mikroblar aniqlanishiga qarab elektiv oziqa muhiti qollaniladi. Agar patogen mikroblar aniqlansa, xuddi shu qozgatuvchiga tekshirish ishlari otkaziladi. 1. Havo mikroorganizmlar yashashi uchun qulay sharoit hisoblanadimi? 2. Qaysi hollarda havoni rejali tekshirish ishlari olib boriladi? 3. Havo qanday usullarda tekshiriladi? 3.12. Òuproqni sanitariya-bakteriologik tekshirish Òuproq mikroblarning yashashi uchun eng qulay sharoit bolib hisoblanadi. Ular tuproq orqali suvga, havoga otib, ularni ifloslantiradi. Òuproqni mikrobiologik tekshirish katta ahamiyatga ega. Òuproqni kasalxona, bogcha, lager va boshqa obyektlarni qurishdan oldin sanitariya-bakteriologik tekshiriladi. Òuproqni tekshirganda quyidagi korsatkichlar aniqlanadi: 1) 1 kg tuproqdagi mikroblarning umumiy sonini aniqlash; 2) koli-titr va klostridiy perfringensni aniqlash; 3) 1 kg tuproqdagi termofil bakteriyalarni aniqlash; 4) epidemiologik korsatkich boyicha patogen mikroblardan salmonellalar, shigellalar, botulizm, qoqshol qozgatuvchilari va boshqa mikroblarni aniqlash. ? Nazorat uchun savollar 348 Sinama olish. Sanitariya shifokori va bakteriolog tomonidan tuproqdan maqsadga qarab, sinama olinadi. 1000 m 3 hudud tanlanadi. Biri ifloslantiruvchi manbalarga yaqin, ikkinchisi undan uzoqroq bolishi lozim. 25 m 2 maydonidan 5 ta nuqta: 4 ta chetidan va 1 ta ortasidan olinadi yoki diagonal boyicha 5 ta nuqtadan olinadi. Material tuproqni yuza qismidan steril lopatkachalar bilan 20 sm chuqurlikkacha olinadi, chuqur qismidan sinama Nekrasov buri yordamida olinadi. Sinama eng kamida 1 kg olinishi lozim. Sinamani steril bankalarga solib, pergament qogozga orab, raqamini, etiketkasini yopishtirib, yashiklarga solib, tushuntirish xati bilan laboratoriyaga yuboriladi. Agar tuproqni shu kunning ozida tekshirishning iloji bolmasa, muzlatgichga 12°C haroratda 1 kun qoldiriladi. Sinamani tayyorlash. Olib kelingan tuproq yirik qismlardan tozalanadi, steril hovonchada eziladi, steril tordan otkaziladi. Òor- dan otgan tuproqdan 30 g olinib, steril kolbaga solinadi va 270 ml steril suv quyiladi. Natijada, 1:10 nisbatda suyultirilgan eritma hosil boladi. Mana shu eritmani 1:100; 1:1000: 1:10000 gacha suyultiriladi. Mikroblarning umumiy sonini aniqlash Har bir tuproqning suyultirilgan eritmasidan olib, steril Petri kosachasiga solinadi, ustiga 45°C gacha sovitilgan GPA solinadi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Vaqt otgach kolo- niyalar sanalib, mikroblarning soni aniqlanadi. Koli-titrni aniqlash 1-kun. 1 : 10 ga suyultirilgan eritmadan 10 ml olib, 50 ml.li Kessler muhitiga ekiladi. Qolgan suyultirilgan eritmalardan 1 ml.dan olib, 1 ml.li Kessler muhitiga ekiladi. Ekilganlarni termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Agar hech narsa osmagan bolsa, yana 1 kunga qoldiriladi. Agar 48 soatda ham loyqalanib, gaz hosil bolmasa, ichak tayoqchasi aniqlanmadi, deb javob beriladi. Agar loyqalanish va gaz hosil bolgan bolsa, sektorlarga bolingan Endo muhitiga ekiladi, termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 3-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Agar Endo oziqa muhitida ichak tayoqchasiga xos koloniyalar hosil bolgan bolsa, shubhali koloniyadan olib: 1) surtma tayyorlab, Gram usulida boyab mikroskopda tekshi- riladi; 2) oksidaza sinamasi qoyiladi; 349 3) yarimsuyuq glukozali muhitga ekiladi. 4-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Oziqa muhitida gaz hosil bolib, rangi ozgarsa, ichak tayoqchasi bor, degan xulosaga kelinadi. Membranali filtr usuli Bu usul kam ifloslangan tuproqlarni tekshirishda qollaniladi. Har bir suyultirilgan aralashmadan 10 ml.dan olib filtrdan otkaziladi. Filtratni yuqorida aytilgandek, tekshirish ishlari otkaziladi. C.perfringens titrini aniqlash. Har bir suyultirish darajasidan 1 ml.dan olib, ikki qator steril probirkalarga solinadi. Bit qatordagi probirkalar 80°C haroratda 15 daqiqa qizdiriladi. Barcha probirkalarga eritilgan va 45°C gacha sovitilgan VilsonBler muhitiga material ekiladi. Òermostatga 43°C haroratda 24 soat qoldiriladi. C.perfringens oziqa muhitining pastrogida qora koloniya hosil qilib osadi. Gaz hosil bolgani oziqa muhitining yorilib ketganidan bilinadi. Koloniyadan olib surtma tayyorlanadi. Gram usulida boyalib, mik- roskop ostida tekshiriladi. Agar tayoqchasimon, sporali, Grammusbat bolgan bakteriyalar korinsa, C.perfringens bor, deb xulosa qilinadi. Bu qozgatuvchining tuproqda uchrashi unda boshqa klostridiylarning borligidan dalolat beradi. Masalan, qoqshol, botulizm qozgatuv- chilari. 1. Qachon tuproq sanitariya-bakteriologik tekshiriladi? 2. Sinamaga tuproq qanday olinadi? 3. Òuproqda qanday korsatkichlar aniqlanadi? 4. Enteropatogen ichak tayoqchasi qanday usullarda aniqlanadi? 3.13. Sut va sut mahsulotlarini sanitarya- bakteriologik tekshirish Sut va sut mahsulotlari mikroblar rivojlanishi uchun eng qulay sharoit bolib hisoblanadi. Ayrim sutdan tayyorlanadigan mahsulot- larning ozi mikroblar tasirida tayyorlanadi. Sut orqali sil, brutselloz, salmonelloz, kuydirgi, poliomiyelit virusi, anaerob batsillalar va boshqa mikroblar tarqalishi mumkin. Bu mikroblar sut va uni sogayotgan va jonatilayotgan vaqtda, saqlash va boshqa hollarda tushishi mumkin. Sut va sut mahsulotlarini bakteriologik tekshirish ÃÎÑÒ 922568 asosida olib boriladi. ? Nazorat uchun savollar 350 Sinama olish. Suyuq va yarimsuyuq mahsulotlar aralashtirilib, 50100 ml.li steril kolbalarga solinadi. Sariyog, pishloq, tvorog mahsulotlarining chuqur qismidan material steril qisqichlarda olinadi. Ularning ustki qismi tozalanib, songra tekshirish uchun olinadi. Qadoqlangan mahsulotlardan 2 ta qadoq olinadi. Olingan materiallar laboratoriyaga tushuntirish xati bilan jonatiladi. Material 4 soat ichida tekshirilishi lozim. Sut va sut mahsulotlarida quyidagi korsatkichlar aniqlanadi. 1 g (ml) tekshiriladigan materialdagi mikroblarning umumiy sonini aniqlash. Epidemiologik korsatkichni aniqlash yuzasidan patogen mikroblardan stafilokokk, salmonella, brutselloz va boshqa mikroblar aniqlanadi. Mikroblarning umumiy sonini aniqlash Sinamalarni tekshirishga tayyorlash. Sut va sut mahsulotlarni 1:10, 1:100, 1:1000 nisbatlarda suyultiriladi. Ekish. Har bir suyultirish darajasidan 1 ml. dan olib, 23 ta steril Petri kosachasiga solinadi va ustiga eritilgan va 45°C gacha sovitilgan GPA solinadi. Òermostatga 37°C haroratda 48 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach kosachalar termostatdan olinadi. Koloniyalar kam bolsa oddiy koz bilan, kop suyultirish darajasiga kopaytirilib, kosachalar soniga bolinadi va 1 ml sut tarkibidagi mikroblarning umumiy soni aniqlanadi. Achitish natijasida tayyorlangan mahsulotlarda mikroblarning umumiy soni aniqlanmaydi. Mahsulotlardan surtma preparat tayyorlab mikroflora nazorat qilib turiladi. Materialda spetsifik mikroblarning aniqlanishi uning eskirganidan yoki ifloslanganidan dalolat beradi. Ichak tayoqchasi guruhi bakteriyalarini aniqlash Ichak tayoqchasi guruhi bakteriyalarini aniqlash achitish-bijgi- tish usulida aniqlanadi. ÃÎÑÒ 922568 asosida bakteriologik tekshirish ishlari otkaziladi. 1-kun. 3 ta 5 ml.li Kessler muhitiga 1 ml.dan tekshirilayotgan material va 3 ta Kessler muhitiga 1 : 10 suyultirilgan materialdan 1 ml.dan yana ekiladi. Òermostatda 37°C haroratda 1824 soat qoldiriladi. 2-kun. Agar Kessler muhitida loyqalanish va gaz hosil bolgan bolsa, sektorlarga bolingan Endo muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 3-kun. Agar Endo muhitida yaltiroq metall, malina rangli koloniya hosil bolgan bolsa, surtma tayyorlab Gram usulida boyab tekshiriladi, oksidaza sinamasi otkaziladi, Kozero muhitiga ekib termostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 351 4-kun. Ekilgan material glukozali muhitni kislota va gazgacha parchalasa, Kozero muhitida osish hosil bolmasa, koli-titr maxsus jadval asosida aniqlanadi. Sut va sut mahsulotlarida patogen mikroorganizmlarning bolishi mumkin emas. 3.14. Kremli mahsulotlarni sanitariya- bakteriologik tekshirish Kremli mahsulotlarni sanitariya-bakteriologik tekshirish Sogliqni saqlash vazirligining buyrugiga asosan, olib boriladi. Quyidagi korsatkichlar aniqlanadi: 1. Ichak tayoqchasi titrini aniqlash. 2. 1 g mahsulotdagi plazmani koagulatsiya qiluvchi stafilokokkni aniqlash. Sinama olish. Kremli mahsulotning yuzasidan va ichki qismidan 50 gr sinama olinadi. Sinama steril qoshiqchalar bilan idishlarga olinib, laboratoriyaga tushuntirish xati bilan jonatiladi. Ichak tayoqchasi titrini aniqlash 1-kun. Olingan sinama termostatda yoki suv hammomida 4345°C ga qoldiriladi. Erigan kremning pastki qismidan sinama olib tekshiriladi. Krem 1:10, 1:100, 1:1000 nisbatda suyultiriladi. 1 : 10 nisbatda suyultirilgan eritmadan 10 ml olib 50 ml.li Kessler muhitiga ekiladi. Qolgan (1:100, 11000) suyultirilgan eritmalardan 1 ml.dan olib, 5 ml.li Kessler muhitiga ekiladi. Òermostatga 43°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 2-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Kessler muhitining rangi ozgarib gaz hosil bolsa, sektorlarga bolingan Endo muhitiga ekiladi. Òermostatda 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 3-kun. Agar shubhali koloniyalar hosil bolmasa, ichak tayoq- chasi yoq, deb javob beriladi. Agar shubhali koloniya hosil bolsa, surtma tayyorlab, Gram usulida boyab tekshiriladi. Agar Gramman- fiy bolgan tayoqchasimon, tartibsiz joylashgan bakteriyalar korinsa, ichak tayoqchasi guruhiga tekshirish ishlari otkaziladi. Bunda koli- titr 0,3 g.dan kam bolmasligi lozim. Plazmani koagulatsiyalovchi stafilokokkni aniqlash 1-kun. Eritilgan kremdan 0,1 g olib, sut-tuz agarga (MSA) va 0,5 ml li 2 ta tuzli shorvaga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 352 2-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Petri kosachasini bir kunga pigment hosil qilinishini aniqlash uchun xona haroratida qoldiriladi. Boyituvchi tuzli shorvadan olib, tuxum sarigi qoshilgan tuzli agarga ekiladi (JSA). Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. 3-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. Petri kosachasida stafilokokka xos koloniyalar hosil bolgan bolsa, plazmakoagulatsiya reaksiyasi qoyiladi. 1. Sut va sut mahsulotlari sinamaga qanday olinadi? 2. Sut va sut mahsulotlarida, krem mahsulotlarida qanday mikroblar korstakichi aniqlanadi? 3.15. Gosht va kolbasa mahsulotlarini sanitariya-bakteriologik tekshirish Gosht va gosht mahsulotlari mikroorganizmlar bilan turli sabablar tufayli ifloslanadi: 1. Birlamchi ifloslanish. Hayvonlar organizmining kasallikka qarshi kurashishi susaygan hollarda mikroblar ichak orqali qon va azolarga otadi. 2. Hayvonlar soyilgan vaqtida, goshti bolinganda, notogri saqlangan hollarda ifloslanishi mumkin. Mahsulotlar notogri tayyor- langanda ham ifloslanishi mumkin. Gosht va kolbasa mahsulotlari ÃÎÑÒ 985874 asosida tekshiriladi. I. 1 g mahsulotdagi mikroblarning umumiy soni aniqlanadi. II. 1 g mahsulotdagi ichak tayoqchasi guruhi bakteriyalari aniqlanadi. III. 5 g mahsulotdagi salmonella, protey va klostiriylar aniqlanadi. Sinama olish. Har bir partiyaning turli qismlaridan ikki bolak gosht, kolbasa olinadi. Sosiska va sardelalardan bir qancha bolakchalar olinadi. Liqildoq, pashtet va boshqa qadoqlanmagan mahsulotlarning 23 qismidan 200250 g.dan olinadi. Har birini alohida pergament qogozlarga orab, tushuntirish xati yozilib laboratoriyaga jonatiladi. Òekshirishga tayyorlash. Qattiq mahsulotlarning ustki qismi spirtli tampon bilan artilib yondiriladi, turli qismlaridan bolakchalar olinadi. Dudlangan mahsulotlarning esa suyakka yaqin qismlaridan olinadi. Qobigi bolmagan mahsulotlardan namlangan tampon yordamida surtma olinib «XB», Xeyfis yoki Kessler muhitlariga ekiladi. Songra bu mahsulot spirtga namlangan tampon bilan artilib kuydiriladi va 20 g.dan bolakchalar olinadi. Uni steril hovonchada steril qum va fiziologik eritma bilan eziladi (80 ml). ? Nazorat uchun savollar 353 1 g mahsulotdagi mikroblarning umumiy sonini aniqlash 1-kun. Òekshirish materialidan 1,0 va 0,1 ml olib, Petri kosa- chasiga solinadi, ustiga eritilgan va 45°C gacha sovitilgan GPA solinadi. Proteylar osmasligi uchun 45 ml och agar solinadi. Ekilgan muhitlar termostatga 37°C haroratda 48 soatga qoldiriladi. Koloniyalar kam bolsa, oddiy koz bilan, kop bolsa, koloniya sanaydigan asbob bilan sanaladi, suyultirish soniga kopaytirilib, kosachalar soniga bolinadi. 1 g mahsulotdagi mikroblarning umumiy soni aniqlanadi. Ichak tayoqchasi guruhi bakteriyalarini aniqlash 1-kun. Har bir suyultirilgan materialdan 5 ml.dan olib «XB», Xeyfis yoki Kessler muhitlariga ekiladi. 43°C haroratda 1820 soatga qoldiriladi. 2-kun. Ekilgan muhitlar tekshiriladi. «XB», Xeyfis muhiti kok rangdan sariq rangga aylanadi. Kessler muhitining rangi ozgarib, gaz hosil boladi. Shunday ozgarishlar bolsa, ichak tayoqchasiga tekshirish ishlari otkaziladi. Salmonellalarni aniqlash Òayyorlangan aralashmadan 25 ml olib Myuller, Kaufman yoki selenitli shorvaga ekiladi, termostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. Vaqt otgach, olib tekshiriladi. Ulardan olib Endo, vismut sulfit agarga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach, olib tekshiriladi. Agar salmonellalarga xos koloniyalar hosil bolsa, tekshirish ishlari otkaziladi. Proteylarni aniqlash 0,5 ml tekshirish materialidan olib, qiyshiq agarning kondensatsion suyuqligiga ekiladi (Shukevich usuli). Òermostatga 37°C haroratda 24 soatga qoldiriladi. Vaqt otgach, olib tekshiriladi. Agar muhitning yuzasida kolo- niyalar yoyilib osgan bolsa, proteylar bor deb, faqat kondensatsion suyuqligida osgan bolsa, proteylar yoq, deb javob beriladi. 1. Gosht va gosht mahsulotlari qachon mikroblar bilan ifloslanadi? 2. Gosht va gosht mahsulotlari sinamaga qanday olinadi? 3. Gosht va gosht mahsulotlarida sanitariya korsatkichi qanday? 4. Proteylar borligi qanday aniqlanadi? ? Nazorat uchun savollar 354 3.16. Konservalarni sanitariya-bakteriologik tekshirish Konservalarda aerob va anaerob mikroblar bolishi mumkin. Ular ifloslangan mahsulotlarni konservalash yoki konservalarni notogri sterilizatsiya qilish natijasida tushadi. Sinama olish. ÃÎÑÒ 8756070 asosida olib boriladi. Har bir konserva partiyasidan sinama olinadi. 1 litr hajmdagi shisha polimer idishlarda bolsa, 3 ta idishda olinadi. 13 litrli idishda bolsa, bitta qadoq olinadi. Bochka va yashiklarda bolsa, 500 g olinadi. Òekshirishga tayyorlash. Òekshirishga keltirilgan bankalarning avval tashqi korinishi tekshiriladi (zanglaganligi, pachoqlanganligi). Oqqan joyi bormi yoki yoqligi tekshiriladi. Germetik yopiqligini tekshirish. Konserva bankasi suvli kastrulkaga solib qaynatiladi. Suv konserva hajmidan 4 marta kop bolishi lozim. Konserva bir necha daqiqa qaynatiladi. Agar havo chiqsa, germetik yopiq emasligini korsatadi. Bombajga tekshirish. Banka termostatga 37°C haroratda 56 kunga qoldiriladi. Bombaj bolganligini qopqoqning shishib qolganligidan bilamiz. Agar bombaj bolmasa va germetik yopiq bolsa, tekshirilmaydi. Bankalarni sanitariya-bakteriologik tekshirish uchun tayyorlash. Òekshirish aseptik sharoitda bokslarda olib boriladi. Banka qogozdan tozalanadi. Korsatkichlari yozib olinadi. Sovunlar yuvilib, chayiladi, quruq qilib artiladi. Ular, odatda, spirtga namlangan tampon bilan artiladi. Konservani ochadigan asbob ham spirtda yondiriladi, song banka ochiladi. Bankaga shisha naycha kiritilib, material olinadi va steril Petri kosachasiga solinadi. Ekish. Mezofil aeroblarni aniqlash uchun 56 ml 1 % li glukozali ikkita probirkaga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 5 kunga qoldiriladi. Har kuni tekshiriladi. Agar mikroblar osgan bolsa, surtma tayyorlab, Gram usulida boyaladi va mikroskop ostida tekshiriladi. Konservalarda aerob mikroblari bolishi mumkin emas. Mezofil anaeroblarni aniqlash uchun tekshirish materialidan olib (2 sm), 20 daqiqa qizdirilgan, 40°C gacha sovitilgan Òarossi muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 5 kunga qoldiriladi. Agar mikrob kulturalari osgan bolsa, surtma tayyorlab, Gram usulida boyab tekshiriladi, katalaza sinamasi qoyiladi. Agar surtmada Grammusbat bolgan bakteriyalar korinsa, katalaza sinamasi manfiy bolsa, 2 ml olib steril Petri kosachasiga solinadi va ustiga eritilgan 1 % li glukozali agar solinadi. Oziqa muhiti yuzasiga buyum oynachasi havo qoldirilmasdan yotqiziladi. Òermostatga 37°C haroratda 48 soatga qoldiriladi. Agar buyum oynasining tagida mikrob kulturasi osgan bolsa yoki muhit yorilib ketgan bolsa, 34 mm uzoqlikda buyum 355 oynachasi atrofida mikroblar osmagan bolsa, anaeroblar bor, deb xulosa qilinadi. Qanday konserva bolishidan qati nazar, sanitariya-epidemiologik korsatkich boyicha stafilokokk, gazli gangrena, termofil aerob va anaeroblar, botulizm toksinlari, achitqi va boshqalarga tekshirish ishlari otkaziladi. Konservalarda patogen mikroblar bolishi mumkin emas. 3.17. Yuvindilarni sanitariya-bakteriologik tekshirish Ovqatlanish obyektlari, oziq-ovqat korxonalari, davolash va bola- lar muassasalari tozaligi, xodimlarning sanitariya-gigiyena qoidalariga rioya qilayotganliklariga yuvindilar olib tekshirib baho beriladi. Òekshirish maqsadiga qarab, quyidagi korsatkichlar aniqlanadi: 1. BGKP (ichak tayoqchasi guruhidagi bakteriyalar) borligi aniqlanadi. 2. Stafilokokkning borligi aniqlanadi. 3. Mikroblarning umumiy soni aniqlanadi. Patogen mikroblarga epidemiologik korsatkich boyicha tekshi- riladi. Ovqatlanish va bolalar muassasalarida ichak tayoqchasi va stafilokokka tekshirish bilan chegaralanadi. Operatsion, reanimatsiya, boglov, intensiv terapiya, tuguruqxona va boshqalarda ichak tayoq- chasi, stafilokokkdan tashqari mikroblarning umumiy soni ham aniq- lanadi. Sinama olish. Yuvindilar paxta tampon yoki salfetka yordamida olinadi. Òampon yoki salfetka fiziologik eritmaga namlab olinadi, song sinama olinadi. Qoldan sinama olish. Sinama chap qoldan boshlab olinadi. Avval qolning yuzasidan barmoqlar tomon harakatlantiriladi, song shu yosinda qolning ichki qismidan barmoqlar orasidan va tirnoqlar orasidan olinadi. Mana shu tampon bilan yuqorida aytib otilgandek, ong qoldan ham olinadi. Buyumlardan sinama olish. Yuzasi keng bolgan buyumlarning bir necha qismidan 50x50, 100x100 sm.li trafaret yordamida olinadi. Òrafaret simdan yasalgan bolib, ishlatishdan oldin spirt alangasida qizdirib olinadi. Ichak guruhi bakteriyalariga tekshirish 1-kun. Laboratoriyaga keltirilgan sinamalar Koda muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 2-kun. Agar tekshirish materialida ichak tayoqchasi bolsa, muhit- ning rangi ozgaradi. Mana shu muhitdan olib, Endo muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 24 soat qoldiriladi. 356 3-kun. Endo muhiti tekshiriladi. Agar yaltiroq metall, malina rangli koloniyalar hosil bolgan bolsa, surtma tayyorlab tekshiriladi va sxema asosida ishlar otkaziladi. Stafilokokka tekshirish Òekshirishga olib kelingan yuvindi tuxum sarigi qoshilgan tuzli agarga va 6,5 % li tuzli shorvaga ekiladi. Òermostatga 37°C haro- ratda 24 soat qoldiriladi. Agar stafilokokka xos koloniyalar hosil bolgan bolsa, stafilokokka tekshirish ishlari otkaziladi. Mikroblarning umumiy sonini aniqlash 1-kun. 2 ml.li fiziologik eritmadagi yuvindiga 8 ml fiziologik eritma qoshiladi. Shunda 1 : 5 nisbatli eritma hosil boladi. Òampon u bilan yaxshilab aralashtiriladi. 1 ml olib 45°C gacha sovitilgan GPA solinadi va Petri kosachasiga quyiladi. Òermostatga 37°C haroratda 14 soat qoldiriladi. 2-kun. Ekilgan muhit tekshiriladi. Koloniyalar kam bolsa, oddiy koz bilan, agar kop bolsa, koloniya sanaydigan asbobda sanaladi. Song 1 sm yuzadagi koloniyalar soni sanaladi. 3.18. Xirurgik va boglov materiallarini sterillikka tekshirish Òekshirish aseptik sharoitda bokslarda olib boriladi. Aerob va anaerob mikrofloraga tekshiriladi. Òekshirish olib borish uchun quyidagilar kerak boladi: 1. Steril asboblar toplami (qaychi, kornsanglar, pinsetlar). 2. 10 % li steril giðosulfit eritmasi. 3. Steril distillangan suv. 4. Xottinger shakarli shorvasi. Saburo muhiti va tioglikol muhitlari. Material sterilizatsiya qilingan kuni olinib, yopiq va muhrlangan byukslarda tekshirishga yuboriladi. Òekshirishga bint, tampon, paxta sharchalar, doka salfetkalar va boglov (ketgut va iðak) materiallari olinadi. Òekshirishga keltirilgan materiallar steril pinsetda olinib, spirt alangasi oldida har xil qismlaridan qirqib olinadi va steril Petri kosachasiga solinadi. Har bir sinamadan olib, shakarli shorva va Saburo muhitlariga ekiladi. Boglov materiallari. Ketgut spirtli yod eritmalarida saqlanadi. Yodni neytrallash uchun 24 soatga 10 % li giðosulfit eritmasiga solinadi, 357 song 24 soat steril distillangan suvda saqlanadi. Shundan song steril pinset bilan ketgut olinib, steril Petri kosachasiga solinadi. Steril qaychi bilan 25 sm uzunlikda qirqib, 2 ta probirkadagi shakarli shorvaga va Saburo muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 1214 kunga qoldiriladi. Ipak spirtda saqlanadi. Ekishdan oldin iðak boglamini olib, 24 soatga steril distillangan suvda qoldiriladi. Vaqt otgach, steril pinset yordamida bolaklarga bolib, shakarli shorva va Saburo muhitiga ekiladi. Òermostatga 37°C haroratda 14 kunga qoldiriladi. Har kuni tekshiriladi. Agar mikrob kulturasi osgan bolsa, steril emasligini korsatadi. 1. Qol va buyumlardan yuvindi qanday maqsadlarda olinadi? 2. Qanday sanitariya korsatkichlarida tekshiriladi? 3. Sterillikka tekshirish maqsadida qanday materiallar olinadi? ? Nazorat uchun savollar 358 Darslikda uchraydigan ayrim atamalar izohi Agglutinatsiya (lot. agglutinatio yopishish) suyuqliklardagi zarrachalar (bakteriyalar, eritrotsitlar va boshqa hujayra element- lari)ning bir-biriga yopishib, gujlanib qolishi. Agglutininlar qon zardobida hosil bolib, ular tasirida yopishib, gujlanib (agglutinatsiyalanib) qolgan organizmlar uchun yot moddalar. Aktinomitsetlar (Actinomycetalis) uzun, hujayralarga bolin- magan nursimon mitsellalardan iborat bakteriyalar gruppasiga yaqin organizmlar. Ular tuproqda yashaydi va sporalar halqasini hosil qilib kopayadi, parazit hamda saprofit shakllari bor. Allergiya (yunon. Allos boshqacha, egron tasir) orga- nizmga yot bolgan (mikroblar, yot oqsillar va b.) omillar tasirida yuzaga keladigan organizmning ota sezgirligi. Anaeroblar (an inkor etuvchi old qoshimcha, aer havo, bias hayot) erkin kislorod bolmagan muhitda yashay oladigan organizmlar. Anaeroblar yoki Aseptika (an inkor manosini bildiruvchi old qoshimcha, septikos chiritadigan) jarohatni turli mikroorga- nizmlar tushishidan asrash uchun unga tegadigan barcha buyumlarni fizikaviy metodlar yordami bilan zararsizlantirish. Assimilatsiya yoki ANABOLIZM (lot. assimilatio ozlashtirish) tashqaridan kirgan moddalarni organizmga qabul qilish, ozlashtirish va organizmning oz moddasiga aylantirish. U organizm bilan atrof- muhit ortasidagi modda almashinuvi jarayonining bir tomoni hisoblanadi. Aeroborganizmlar. AEROBLAR (yunon. aer havo, bios hayot) muhitida oksidlovchi sifatida (organizmlar) ishlata oladigan mavjud erkin kislorod bilangina taminlab yashay oladigan va rivojlanadigan organizmlar. Bakteriyalar (bacterion tayoqcha) shakllangan yadroga ega bolmagan mikroskopik organizmlar prakariotlar. Ular chirish, achitish jarayonlarini yuzaga keltiradi va kopgina kasalliklarning qozgatuvchisi hisoblanadi. Bakteriofaglar (bakteriya+fag+lar) bakteriyalar virusi. Bosh- chasi, osimtasi yoki «dumcha»si bor. Boshchasi oqsilli qobiqqa oralgan, ichida DNK yoki RNK joylashgan. Osimtasi oqsillardan 359 iborat gilofcha bilan oralgan ichi bosh ozak (sterjen)dan iborat. Ozak oxirida tikan va iðli plastinkasi bor. Binar nomenklatura (lot. binarius ikki qismdan iborat) organizmlarning qosh nomi bolib, ulardan birinchisi katta harf bilan yoziladi va avlod nomini bildiradi, ikkinchisi turini anglatadi. K. Linsem (17071778) tavsiya etgan. Binokular (lot. bi+ocularis kozli) binokular korish ikki koz bilan oddiy korish binokular mikroskop ong va chap koz uchun alohida okular bilan taminlangan mikroskop. Botulizm (botulus kolbasa) botulinus bakteriyasi (Clostridi- um botulinum) bilan ifloslangan ozuqa mahsulotlari (kolbasa, baliq, konservalar va b.)ni istemol qilishdan yuzaga keladigan ogir zahar- lanish. Dezinseksiya (lot. des+insecium hasharotlar) maxsus kimyoviy moddalar yordamida yuqumli kasalliklar tarqatuvchi zararli hasharotlarni yoqotish. Dezinfeksiya maxsus kimyoviy moddalar yordamida kasallik chaqiruvchi mikroorganizmlarni yoqotish, ularni zararsizlantirish. Dezoksiribonuklein kislota (DNK) monomeri adenin (A), guanin (G), sitozin (S), tiamin (Ò) kabi azotli asoslarning birortasidan hamda dezoksiriboza va fosfor kislotadan iborat bolgan polimer. J. Uotson va F. Krik (1953) modeliga kora, DNK strukturasi umumiy oq atrofida ong tomonga buralib ketgan ikkita spiralsimon polinukleotid zanjiridan iborat DNK irsiyat tashuvchi moddadir. Eritrotsitlar gemolizi (haima + yunon. lysis parchalash; buzish) eritrotsitlar qobigining yorilishi natijasida ular tarkibiy qismining qon plazmasiga otishi. Fago, fagiya (yunon. phagos yutuvchi) qoshma sozlarning «yeyish»; «yutish» manosini anglatuvchi qismi. Fagotsitoz (yunon. phago yutish; cytos hujayra nazariyasi) organizm oziga kirgan infeksiyadan oq qon tanachalari (leykotsitlar)ning bakteriyalarini yutishi (tutib olishi) bilan himoyalanishini targib etuvchi, I.I. Mechnikov tomonidan taklif etilgan immunitetning hujayraviy nazariyasi. Organizmlarga tushib qolgan yot zarrachalar (bakteriyalar, parchalangan moddalar mahsulot)ning maxsus amyobasimon hujayralar fagotsitlar tomonidan ushlab olinib, hazm qilinishi. Fakultativ anaeroblar (lot. fakultatis imkoniyat; qobiliyat, an inkor etuvchi old qoshimcha; aer havo; bios hayot) kislorod bolganda ham, bolmaganda ham yashay oladigan organizmlar. Fermentlar (lot. fermentum achitqi) biokimyoviy jarayon- larning yonalishiga katalitik tasir eta oladigan oqsil moddalar biokatalizatorlar. 360 Gigiyena tashqi muhit va ishlab chiqarish faoliyatidagi xilma- xil omillarning odam sogligiga, uning mehnat qobiliyatiga, umr kechirishiga tasirini organadigan, turmush va mehnat sharoitlarini soglomlashtirishga qaratilgan tadbirlar ishlab chiqadigan fan. Giðertonik eritmalar 1) qon zardobiga qaraganda, yuqori osmotik bosimga ega bolgan eritmalar; 2) hujayra ichki osmotik bosmidan yuqori bolgan osmotik bosimli moddalar eritmasi. Genetika (yunon. genesis kelib chiqishi) tirik organizmlarning irsiyati va ozgaruvchanligi hamda ularni boshqarish usullari haqidagi fan. Izolatsiya (frans. isolation ajratish, ajratib qoyish) bir turga kiruvchi individlar ortasida erkin chatishishning bolmasligi yoki qiyinlashuvi, bu tur ichidagi guruhlarning hamda yangi turlarning ajralib chiqishiga olib keladi. Izolatsiyaning geografik va biologik xillari farqlanadi. Izotonik eritmalar osmotik bosimi hayvon va osimlik hujayralari va qon zardobining osmotik bosimiga teng bolgan eritmalar. Immunitet (lot. immunitas biron narsadan xoli bolmoq) muayyan yuqumli kasallikka yoki bazi zaharli moddalarga organizm- ning chidamliligi va qarshilik korsatish xususiyati, kengroq manoda organizmning oz butunligini va biologik individualligini himoya qilish, saqlash qobiliyati. Infeksion kasalliklar patogen bakteriyalar, viruslar, rikketsiyalar va sodda jonivorlar keltirib chiqaradigan yuqumli kasalliklar guruhi. Koloniya mikroorganizmlarning zich oziqa muhitida osib shakllanishi, zich oziqa muhitida alohida-alohida toplam holida bitta hujayradan osgan mikroorganizmlardir. Klon vegetativ kopaytirish usuli bilan olingan yagona hujayraning genetik bir xil avlodi. Konyugatsiya (lot. conjugatio yaqinlashib kopayish, qoshi- lish) 1) suv otlari; tuban zamburuglar va infuzoriyalarning jinsiy kopayish shakli; 2) bakteriyalarning genetik materialini almashtirish usuli; 3) xromasomalar konyugatsiyasi gomologik xromosomalarning yaqinlashib, vaqtincha juftlashishi va krossingoverning roy berishi. Lizis (yunon. lysis parchalash, erish) hujayralarning, jumladan, mikroorganizmlarning lizosomalaridagi fermentlar yoki boshqa erituvchi (litik) xususiyatga ega bolgan moddasi (agent) tasirida roy beradigan yemirilish va erish. Makrofaglar (makro + yunon. phagos yutuvchi) mikrob va yot zarrachalarni qamrab olish va hazm qilib yuborish qobiliyatiga 361 ega bolgan hujayralar (gistiotsitlar, retikuloendotelialal sistemaning hujayralari, limfotsit va monotsitlar). Modifikator-genlar boshqa genlar tasirini ozgartiruvchi genlar. Morfologiya (yunon. morphe shakl, logos talimot) orga- nizm va organizmlarning tuzilishi haqida fan. Nukleoid bakteriyalarning funksiyasi jihatdan hujayra yadrosiga oxshaydigan yadrosimon moddasi. Nukleoid bir nuqtasi bilan hujayra membranasining ichki yuzasiga yopishgan va gistonlar bilan birikmagan bitta murakkab halqasimon DNK molekulasiga togri keladi. Patogenli (phatos kasal, gennao keltirib chiqaruvchi) kasallik keltirib chiqaruvchi. Profag (yunon. pro+fag) bakteriya hujayrasidagi ortacha bakteriofagning genomi bolib, bakteriya xromosomasi bilan birgalikda replikatsiyalanadi. Punksiya kasallikni aniqlash yoki davolash maqsadida toqima- larni kovak igna (yoki troakar) bilan teshish. Spora (yunon. spora urug) 1) osimliklarning jinssiz kopayishini taminlovchi hujayra; 2) quyi osimliklarning noqulay sharoitda saqlanib qolishini taminlovchi hujayra; 3) sporalilar sinfi bir hujayrali parazitlarning taraqqiyot bosqichi bolib, sporalarda murtak zich pardaga oralgandir. Shu bosqichda parazitning tarqalishi roy beradi. Sof kultura tozalangan mikroorganizm, bir turga oid shtamm. Sista hosil qilish bir hujayrali organizmlarning noqulay sharoitlarga tushib qolganda, zich qavat bilan oralgan sokin stadiya (sista) hosil qilishi. Òoksinlar (yunon. toxinon zahar) ayrim hayvonlar, osimliklar hosil qiladigan, hayot faoliyati davomida ajrab chiqadigan zaharli moddalar. Òur morfologik va fiziologik xususiyatlari bilan ozaro oxshash bolgan, ozaro erkin chatishib, serpusht avlod beruvchi va umumiy kelib chiqishga ega bolgan hamda malum olkalarda (areal) tarqalgan mavjudotlar majmuasi. Òoun (olat) toun tayoqchasi keltirib chiqaruvchi antropo- zoonozlar guruhiga kiradigan otkir yuqumli kasallik. Vaksina (lot. vaccina qoramol chechagidan chechak kasalligiga qarshi olingan preparatga kora, shunday nomlangan) yuqumli kasalliklarning kuchsizlantirilgan yoki oldirilgan qozgatuvchilaridan tayyorlangan preparat bolib, yuqumli kasalliklarning oldini olish maqsadida (bazan kasalni davolashda vaksinoterapiyada ham) emlash (vaksinatsiya) uchun ishlatiladi. 362 Vibrionlar vergul shaklidagi bakteriyalarning avlodi. Virulentlik (lot. virulentus zaharli) malum bir tabiiy yoki suniy zararlanish sharoitida hayvon yoki osimlikning bazi turiga nisbatan malum shtammga mansub mikroorganizm patogenligini darajasi, shartli ifodalar bilan belgilanadi. Yashirin davr (inkubatsiya) organizmga infeksiya tushgan vaqtdan to kasallikning klinik alomatlari yuzaga chiqquncha otgan vaqt. Ozgaruvchanlik 1) tirik organizmlarning yangi belgilarga ega bolishi yoki mavjud belgini yoqotishi bilan ifodalanuvchi ozgarish xususiyati; 2) tirik organizmlarning turli shakllarda (variantlarda) mavjud bola olish xususiyati. Shtamm malum joydan ajratib olingan va organilgan kultura. 363 FOYDALANILGAN ADABIYOTLAR 1. È.Ñ. Ìîòàâêèíà, Â.Ä. Àðò¸ìêèí. Àòëàñ ïî ìèêðîáèîëîãèè è âèðóñî- ëîãèè. M., «Måäèöèíà», 1976. 2. Ô.K. ×åðêåñ, Ë.Á. Áîãîÿâëåíñêàÿ. Ìèêðîáèîëîãèÿ. M., 1978. 3. Í.A. Áàêóëèíà, E.Ë. Êðàåâà. Ìèêðîáèîëîãèÿ. Ò., «Ìåäèöèíà», 1979. 4. Ê.Ä. Ïÿòêèí, Þ.Ñ. Êðèâîøåèí. Ìèêðîáèîëîãèÿ. M., 1980. 5. O.S. Mahmudov. Bolalarning yuqumli kasalliklari. Ò., «Meditsina» nash- riyoti, 1985. 6. L.B. Borisov. Mikrobiologiyadan laboratoriya mashgulotlariga doir qollanma. Ò., 1992. 7. V.M. Majidov. Yuqumli kasalliklar. T., Abu Ali ibn Sino nomidagi tibbiyot nashriyoti, 1993. 8. A.A. Botirbekov, D.M. Bobojonova, B.U. Qosimova, B.U. Ibrohimxojayev. Òibbiyot institutlari talabalari uchun «Ota xavfli infeksiyalar» mavzusi maruzalari. Ò., 1995. 9. Äàéäæåñò «Òóáåðêóë¸ç â ìèðå». Ïóáëèêàöèÿ èç åæåíåäåëüíûõ ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ îáðàçîâ ça 1995 ãîä. 10. M.Q. Usmonov. Epidemiologiya. Ò., Abu Ali ibn Sino nomidagi tibbiyot nashriyoti, 1995. 11. Á.Â. Êàðàëüíèê. Ñîâðåìåííàÿ ëàáîðàòîðèÿ, äèàãíîñòèêà äèçåíòåðèè. M., 1996. 12. È.Ê. Ìóñàáîåâ. Áðþøíîé òèô è ïàðàòèô (ýòèîëîãèÿ, ýïèäåìèîëîãèÿ, ïàòîãåíåç, êëèíèêà, ëå÷åíèå, ïðîôèëàêòèêà). Ò., «Ìåäèöèíà», 1997. 13. Â.È. Ïîêðîâñêèé, Î.Ê. Ïîçäååâ. Ìåäèöèíñêàÿ ìèêðîáèîëîãèÿ. M., 1998. 14. M. Muhamedov va boshqalar. Mikrobiologia, virusologiya va immunologiya. Darslik. T., 2002. 15. Õ.È. Èñõàêîâà è äðóãèå. Ìèêðîáèîëîãèÿ è ìèêðîáèîëîãè÷åñêèé êîíòðîëü ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ. ×àñòü 1. Ò., 2004. 16. M.Muhamedov va boshqalar. Mikrobiologiya, virusologiya va immuno- logiya. Darslik. T., 2006. 17. Õ.È. Èñõàêîâà è äðóãèå. Ìèêðîáèîëîãèÿ è ìèêðîáèîëîãè÷åñêèé êîíòðîëü ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ. ×àñòü 2. Ò., 2012. 18. Sh.R. Aliyev va boshqalar. Mikrobiologiyadan laboratoriya mashgulotlariga doir qollanma. T., 2013. 19. À.À. Áàòûðáåêîâ è äð. Îáùàÿ è ÷àñòíàÿ ìèêðîáèîëîãèÿ è âèðóñî- ëîãèÿ (Ó÷åáíîå ïîñîáèå). Ò., 2014. 364 M U N D A R I J A Kirish ................................................................................................... 3 I qism. UMUMIY MIKROBIOLOGIYA 1-bob. Mikrobiologik laboratoriya......................................................... 8 2-bob. Mikroorganizmlarning asosiy tasnifi va morfologiyasi ............. 12 3-bob. Mikroorganizmlar fiziologiyasi ................................................ 24 4-bob. Òashqi muhit omillarining mikroorganizmlarga tasiri ............ 34 5-bob. Mikroorganizmlarning tabiatda tarqalishi ................................ 47 6-bob. Oziqa muhitlar va mikrobiologik tekshirishlar......................... 50 7-bob. Faglar ...................................................................................... 64 8-bob. Antibiotiklarga umumiy tavsif .................................................. 72 9-bob. Mikroorganizmlar genetikasi .................................................... 84 10-bob. Infeksiya haqida talimot ....................................................... 91 11-bob. Immunitet haqida tushuncha ............................................... 110 12-bob. Allergiya .............................................................................. 147 II qism . XUSUSIY MIKROBIOLOGIYA. PATOGEN KOKKLAR 13-bob. Stafilokokklar ...................................................................... 153 14-bob. Streptokokklar .................................................................... 161 15-bob. Pnevmokokklar................................................................... 168 16-bob. Meningokokklar .................................................................. 174 17-bob. Gonokokklar ...................................................................... 179 18-bob. Esherixiylar ........................................................................ 185 19-bob. Salmonellalar ...................................................................... 189 20-bob. Shigellalar ........................................................................... 202 21-bob. Klebsiyellalar ...................................................................... 209 22-bob. Vulgar proteylar .................................................................. 212 23-bob. Enterokolit iyersinialar ...................................................... 215 24-bob. Kok-yashil yiring tayoqchasi ............................................. 217 365 25-bob. Vabo qozgatuvchisi ............................................................ 220 26-bob. Òoun (olat) qozgatuvchisi ................................................ 227 27-bob. Psevdotuberkulyoz qozgatuvchisi ....................................... 234 28-bob. Òulyaremiya qozgatuvchisi ................................................ 235 29-bob. Brutselloz qozgatuvchisi .................................................... 240 30-bob. Kuydirgi (Sibir yarasi) qozgatuvchisi ............................. 245 31-bob. Kokyotal. Kokyotal va parakokyotal qozgatuvchilari .................................................................. 250 32-bob. Patogen korinebakteriyalar bogma qozgatuvchisi ............ 256 33-bob. Patogen mikobakteriyalar. Sil qozgatuvchisi ..................... 262 34-bob. Qoqshol qozgatuvchisi ...................................................... 278 35-bob. Gazli gangrena qozgatuvchilari ......................................... 282 36-bob. Botulizm qozgatuvchisi ..................................................... 288 37-bob. Zaxm qozgatuvchisi .......................................................... 292 38-bob. Qaytalama tif qozgatuvchilari ............................................ 298 39-bob. Leptospiroz qozgatuvchisi ................................................. 302 40-bob. Òoshmali tif ........................................................................ 307 41-bob. Viruslar ............................................................................... 312 42-bob. RNK saqlovchi viruslar ...................................................... 321 43-bob. Quturish qozgatuvchisi ...................................................... 324 44-bob. Poliomiyelit qozgatuvchisi ................................................ 328 45-bob. Epidemik parotit .................................................................. 332 46-bob. Qizamiq virusi .................................................................... 332 47-bob. Òafsiflanmaydigan viruslar. Gepatit virusi ........................... 333 48-bob. OITS virusi tarqalishi (epidemiyasi)ning rivojlanishi .......... 337 III qism. SANITARIYA MIKROBIOLOGIYASI 3.1. Sanitariya-bakteriologik tekshirishlar uchun oziqa muhitlari .... 343 3.2. Suvni sanitariya-bakteriologik tekshirish ................................... 344 3.3. Suvdan sinama olish ............................................................... 344 3.4. Mikroblarning umumiy sonini aniqlash ................................... 344 3.5. Suvdagi koli-titr va koli-indeksni aniqlash................................ 344 3.6. Bijgitish usuli ........................................................................... 345 3.7. Membranali filtr usuli............................................................... 345 3.8. Alkogolsiz ichimliklarni sanitariya-bakteriologik tekshirish ...... 345 3.9. Havoni sanitariya-bakteriologik tekshirish ................................ 346 3.10. Sedimentatsion usul ................................................................ 346 3.11. Aspiratsion usul ....................................................................... 347 3.12. Òuproqni sanitariya-bakteriologik tekshirish ........................... 347 3.13. Sut va sut mahsulotlarini sanitariya-bakteriologik tekshirish ... 349 3.14. Kremli mahsulotlarni sanitariya-bakteriologik tekshirish ........ 351 3.15. Gosht va kolbasa mahsulotlarini sanitariya-bakteriologik tekshirish ................................................................................ 352 3.16. Konservalarni sanitariya-bakteriologik tekshirish .................... 354 3.17. Yuvindilarni sanitariya-bakteriologik tekshirish....................... 355 3.18. Xirurgik va boglov materiallarini sterillikka tekshirish ........... 356 Darslikda uchraydigan ayrim atamalar izohi ............................. 358 Foydalanilgan adabiyotlar ......................................................... 363 AZIZA BORIYEVNA GANIXOJAYEVA, HOJAR ASQAROVNA NAZAROVA UMUMIY MIKROBIOLOGIYA Òibbiyot kollejlari uchun darslik 5-nashri Muharrir I. Usmonov Badiiy muharrir R. Chigatayev Texnik muharrir F. Samadov Musahhih M. Ibrohimova Òoshkent «ILM ZIYO» 201 7 chop etishga ruxsat berildi. Bichimi 60½90 1 / 16 . 0,5 b.t. rangli surat. Nashr tabogi 23,0. «ILM ZIYO» nashriyot uyi, Òoshkent, 100129, Navoiy kochasi, 30-uy. Noshirlik litsenziyasi AI ¹ 275, 15.07.2015-y. 2017-yil 23-oktabrda Shartnoma ¹ 32— 2017. «NISO POLIGRAF» MCHJ bosmaxonasida chop etildi. Toshkent viloyati, O‘rta Chirchiq tumani, «Oq-Ota» QFY Mash’al mahallasi Markaziy ko‘chasi, 1-uy. «Òayms» harfida terilib, ofset usulida chop etildi. Bosma tabogi 23,0 + 453 nusxa. Buyurtma ¹579 Ganixojayeva A. B., Nazarova H. A. Umumiy mikrobiologiya. Òibbiyot kollejlari uchun darslik. Ò.: «ILM ZIYO», UOÊ 579.2(075) ÊBK 28.4ya722 G21 368 b. 2017. (5-nashri). ISBN 978-9943-16-340-9 Download 1.38 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling