Тонкослойная (планарная) хроматография

Сушка пластин после хроматографирования. После процесса разделения исследуемых веществ, пластинки сушат. Если хроматографическая система имела в своём составе только легкокипящие компоненты, то достаточно естественной сушки в течение 3-5 минут. Если же в состав системы входят высококипящие жидкости (спирты, вода, органические кислоты и т.д.), сушку пластин нужно проводить не менее 10 мин, возможно использование фена (теплый воздух), или помещать пластинку в сушильный шкаф, или использовать специальную плитку для сушки пластин.
Визуальная оценка
Обнаружение (детектирование) зон адсорбции после проведения качественной и полуколичественной ТСХ осуществляют следующими способами:
- в видимом и ультрафиолетовом свете (при определенной длине волны);
- опрыскиванием растворами обнаруживающих реагентов;
- выдерживанием в парах обнаруживающего реагента;
- погружением в растворы обнаруживающих реагентов с использованием для этих целей специальных камер.
Для идентификации тонкослойных хроматограмм требуется ультрафиолетовое освещение двух типов:
- длинноволновое, с длиной волны 365 нм, под которым разделённые вещества на пластинах флюоресцируют яркими пятнами, часто разного цвета, на тёмном фоне. Чувствительность детектирования в таком свете увеличивается с ростом интенсивности облучения;
- коротковолновое, с длиной волны 254 нм, под которым вещества, адсорбируя свет, становятся видимыми. Эти вещества выглядят как тёмные пятна на ярком зеленом фоне пластины.
Для просмотра хроматограмм используются ультрахемископы с УФ лампами с длинами волн 254 нм и 365 нм.
Используемая лампа должна удовлетворять следующим требованиям теста.
Проверка работы лампы. На пластинку силикагель G наносят 5 мкл натрия салицилата раствора 0,04 % в спирте 96 % для ламп с максимумом излучения при 254 нм или 5 мкл натрия салицилата раствора 0,2 % в спирте 96 % для ламп с максимумом излучения при 365 нм в виде пятна диаметром около 5 мм; пятно должно светиться. Проверка работы ламп проводится не реже одного раза в три месяца, а также при возникновении сомнений в правильности работы лампы с учётом срока её эксплуатации.
При проведении анализов расстояние между лампой и хроматографической пластинкой не должно превышать расстояния, используемого при проверке работы лампы.
Примечание – Используемый спирт должен быть свободен от флуоресцирующих веществ.