Вирусларни қисман тозаланган препаратини олиш Вирусларни ажратиб олишдаги 1-ишлар
Download 6.93 Kb.
|
вирусларнинг қисман тозаланган препаратини олиш
- Bu sahifa navigatsiya:
- Босқичлари
- Вирусларни қисман тозаланган препаратини олиш
- Керакли материаллар.
- Ишнинг бориши
Вирусларни қисман тозаланган препаратини олишВирусларни ажратиб олишдаги 1-ишлар
Босқичлари:
Методлари: Вирусларни қисман тозаланган препаратини олишИшдан мақсад.Юқори ион кучига чидамли вирусларни аммонийсульфати ёрдамида қисман тозалаш методи билан таништириш.Керакли материаллар.
Ишнинг бориши:Вирус билан касалланган ўсимлик барги 1:1 нисбатдаги 0,1М ФБ (рН 7,5) билан гомогенизация қилинади. 1- босқич касалланган ўсимлик барги Фосфат буфери 2- босқич Ишлов берилади 20% аммоний сулфат 3- босқич 30 минут давомида совутгичда тутилади 3 минг айл/тезлигида 20 минут давомида центрифуга қилинади. Чўкма ости суюқлиги ташланади Чўкма усти суюқлиги 25% аммоний сулфат 4- босқич Шундан сўнг 60 минут кристаллар ҳосил бўлиши учун сақланади. Вирусли идиш вирус тўлиқ кристалланиши ва чўкиши учун кечасига совутгичда қолдирилиб кетилади. сифон ёрдамида чўкма усти суюқлиги ажратилади. 6 - 8 минг айланиш тезлигида 15- 20 минут центрифуга қилинади 5- босқич ташланади Чўкма усти суюқлиги чўкма усти суюқлиги чўкма ости суюқлиги Кейинги босқичучун юборилади чўкма ости суюқлиги 100мл 0,01М фосфат буферига, рН 7,5 эритилади. 6- босқич 7- босқич Диализ қопчасига вирусли суспензияни солингандан сўнг уни 3- 5 литрли сув ёки буфер эритмаси тўлатилган идишга тушириб қўйилади. Сувли идиш магнитли айлантиргичга ўрнатилади. Диализ 24 соат давомида олиб борилиб, шу даврда 3 марта диализ суви (буфер) алмаштирилади. 8- босқич препарат 10 минут 15-18 минг айл/тезлигида центрифуга қилинади чўкма усти суюқлиги ташланади чўкма усти суюқлиги 9-босқичга юборилади 9- босқич чўкма усти суюқлиги чўктирилади 25% аммоний сулфат 20-30 минутдан сўнг 20 минут давомида 6минг айл/тезлигида центрифуга қилинади. диализат сентрафугат ташланади Филтр қоғозда қуритилади 10- босқич 11- босқич Вирусли чўкма Вирусли чўкма чўкмани 20 мл 0,01М фосфат буферида (рН 7,0- 7,5) эритилади 15-18 минг айланиш тезлигида центрифуга қилиниб, эримаган қисмидан ажратиб ташланади. Download 6.93 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling