1. Эпизоотология как наука, ее достижения и задачи на современном этапе Эпизоотология

Глазную туберкулиновую пробу применяют для диагностики туберкулеза у лошадей. У крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной пробой для дополнительного выявления больных в неблагополучных хозяйствах.
Туберкулинизацию глазным методом проводят двукратно с интервалом в 5 – 6 суток. Туберкулин в количестве 3 – 5 капель наносят пипеткой на слизистую оболочку нижнего века или на поверхность роговицы. Учет реакции проводят после первого введения туберкулина через 6, 9, 12 и 24 часа, после второго – через 3, 6, 9 и 12 часов. Реакция признается положительной, если возникает выделение из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, сопровождающая гиперемией и отеком конъюнктивы.
Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя. Туберкулин вводят после проведения внутрикожной пробы только взрослым животным, за исключением коров в течение одного месяца до и после отела. Перед введением туберкулина у животных измеряют температуру. Она должна быть не выше 39,5⁰С. Животному вводят туберкулин в яремную вену в дозе 1 мл 50% раствора туберкулина на 100 кг массы тела. Учет реакции ведут измерением температуры тела через 3, 6 и 9 часов. Реагирующим считается при повышении температуры тела на один и более градусов выше 39,5⁰С.
Симультанную аллергическую пробу применяют для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота и свиней при дифференциации парааллергических реакций к птичьим и атипичным микобактериям. Для этого используют одновременные введения животным 2 аллергенов: ППД-туберкулина для млекопитающих в стандартном растворе и ППД-туберкулина для птиц или комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ) и определения достоверности различия в интенсивности (степени проявления) реакций на эти аллергены. Проведение симультанной пробы допускается не раннее, чем через 30 дней после последней туберкулинизации животных. Туберкулины вводят внутрикожно в симметричные участки тела животных (шеи, уха и т.д.) в дозе 0,2 мл. Учет и оценку реакций проводят у крупного рогатого скота через 72 часа, у свиней – через 48 часов по общепринятым методом учета туберкулинизации. По интенсивности реакций оценивают результаты исследований групповым методом.
Пальпебральный метод туберкулинизации крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной туберкулиновой пробой для дифференциации специфических и параспецифических реакций при первичной постановке диагноза. Учет и оценку реакции проводят через 72 часа после введения препарата. Реакция считается положительной если на месте введения препарата образуется ощутимая припухлость.
Бактериологическое исследование проводят микроскопическим, культуральным и биологическим методами.
Для микроскопии готовят мазки, окрашивают по Цилю-Нильсену и просматривают под микроскопом. Микобактерии можно обнаружить при микроскопии при содержании 100 тыс и более бактерий в 1 мл исследуемого материала. Результаты микроскопии не дают основания для постановки диагноза на туберкулез у животных, кроме птиц.
Бактериальные исследования проводят для выделения культуры микобактерий и определения вида возбудителя. Такое исследование дает положительные результаты при наличии 20 – 100 микобактерий в 1 мл материала. Перед посевом на питательные среды патматериал обрабатывают специальными методами в соответствующих растворах кислот. Посевы делают на специальные плотные яичные среды Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-3Л, Финн-2, Гельберга, Петраньяни. Посевы инкубируют при температуре 37 – 38⁰С в течение 3 месяцев. Их просматривают еженедельно. Рост микобактерий бычьего вида обнаруживается на 20 – 60 сутки, человеческого на 20 – 30, птичьего – на 1 – 20, атипичных микобактерий – на 3 – 30 сутки. При этом изучают сроки и характер роста, характеристику колоний, тинкториальные и морфологические свойства микобактерий. Для дифференциации микобактерий их в дальнейшем пересевают на различные питательные среды и выращивают при различных температурных режимах: 20 - 22⁰, 37 - 38⁰ и 45⁰С.
В основном для определения видовой принадлежности микобактерий используют биологическую пробу. Для этого заражают морских свинок, кроликов и кур. Видовую принадлежность определяют по следующим данным:
-при развитии генерализованного процесса у морских свинок и кроликов – бычий вид;
-при отсутствии поражений или незначительных изменениях у кроликов и генерализованном процессе у морских свинок – человеческий вид;
-при наличии поражений у кур и септическом процессе у кроликов – птичий вид.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР). ПЦР является молекулярно-генетическим экспресс-методом исследования, основанным на обнаружении в материале специфических фрагментов ДНК, характерных только для определенного вида возбудителя. Применяют при постановке диагноза на туберкулез, для определения видовой принадлежности возбудителя, отсутствии видимых изменений или возникших затруднениях при постановке диагноза.
Диагноз на туберкулез у млекопитающих животных считается установленным в следующих случаях:
-при обнаружении патологических изменений характерных для туберкулеза;
-при получении положительного результата ПЦР и из исследуемого материала выделена культура микобактерий бычьего, человеческого или птичьего вида со свойствами, характерными для этих возбудителей болезни;
-при получении положительного результата биологического исследования на туберкулез.
У свиней:
-при положительных результатах ПЦР и выявлении бактериологическими исследованиями возбудителя туберкулеза бычьего или человеческого вида.
У птиц считается установленным:
-при обнаружении характерных патологических изменений, с подтверждением диагноза микроскопическими исследованиями (обнаружением микобактерий в мазках из патматериала);
-при отсутствии видимых изменений, но при положительных результатах ПЦР;
-при выделении культуры микобактерий птичьего вида (от попугаев - птичьего или человеческого вида).