12-laboratoriya mashg`uloti Mavzu: Nukleoproteidlarni achitqidan ajratib olish, ularni gidroliz qilib, gidroliz maxsulotlarini aniqlash

---

12-laboratoriya mashg`uloti 

Mavzu: Nukleoproteidlarni achitqidan ajratib olish, ularni gidroliz qilib, 

gidroliz maxsulotlarini aniqlash

. 

Achitqidan nukleoproteidlarni ajratish 

Kerakli reaktiv va asboblar: a) achitqi; b) dietil efiri; v) 0,4% NaOH; g) 5% 

sirka kislotasi; d) yaxshilab yuvib qizdirilgan shisha kukuni yoki qum. 

Hovonchaga  5g  achitqi  olib  ustiga  1  ml  dietil  efiri  va  1  ml  suv  qo‘shilib 

namlantiriladi, so‘ng  ustiga ozgina shisha  kukuni yoki  qum qo‘shib 0,4 % NaOH 

bilan oz-oz miqdorda (5-10 ml) qo‘shib yaxshilab tuyiladi. Hammasi bo‘lib 50  ml  

ishqor  sarflanadi.  Bu  jarayon  15-20  daqiqa  davom  etadi.  Hosil  bo‘lgan  massa 

filtrlanadi yoki 10 daqiqa davomida sentrifugalanadi (minutiga 2500g). Filtrat yoki 

sentrifugat stakanga quyilib ustiga tomchilatib 5% CH3COOH dan nukleoproteidlar 

to‘liq  cho‘kmaga  tushgunga  qadar  tomiziladi.  CHo‘kma  sentrifugalanib  ajratib 

olinadi. 

DNK ga xos sifat reaksiyasi. 

DNK  dezoksiribozalarga  hos  bo‘lgan    rangli  reaksiyalar  orqali  aniqlanadi. 

Ko‘pincha  difenilamin  bilan  boradigan  reaksiya  qo‘llaniladi  (C

6

H

s

-NH-C

6

H

s

). 

Difenilamin  dezoksiriboza  yoki  DNK  bilan  ko‘k  rangli,    riboza  yoki  RNK  bilan 

yashil rangli birikma hosil qiladi.  

Kerakli  asbob  va  reaktivlar:  a)  dezoksiribonukleoproteidlar    cho‘kmasi 

(avvalgi ishga qaralsin) b ) difenilamin reaktivi:  

1  gr  difenilamin  100  ml  muzlagan  sirka  kislotasida  eritiladi.  Eritmaga  2,75  g 

konsentrlangan N

2

SO

4

 qo‘shiladi (Ro= 1,836) v) 0,4%  NaOH eritmasi. 

  Dezoksiribonukleitidlar cho‘kmasining bir qismi probirkaga solinadi va 0,5-

1ml  NaOH  qo‘shiladi  (cho‘kma  eriguncha).  Eritmaga  teng  xajmda  difenilamin 

reaktivi  qo‘shildi.  Reaksiya  boshida  hosil  bo‘lgan  cho‘kma  reaktivning  keyingi 

porsiyalari  yordamida  eritiladi,  so‘ng  15-20  diqiqa  davomida  suv  xammomida 

qizdiriladi. Natijada ko‘k rang hosil bo‘ladi.