2-мавзу: ген муҳандислигининг моддий асослари

Рекомбинант ДНК молекулаларини яратиш бир неча босқичда бажарилади:

• Рекомбинант ДНК молекулаларини яратиш бир неча босқичда бажарилади:
• 1. Зарур генни ҳужайра ДНК сидаги ўрнини аниқлаш.
• 2. Уни кесиб олиш.
• Бунинг учун ДНК молекулалари рестриктаза (эндонуклеаза) ферментлари ёрдамида айрим бўлакларга майдаланади. Биргина ферментнинг ўзи ген олиш учун мўлжалланган ДНК молекуласини ва вектордаги ДНК (плазмида) ни бўлакларга ажратади.

EcoRI рестрикция ферменти

3. ДНК фрагментларини клонлаш.

• 3. ДНК фрагментларини клонлаш.
• Турли манбалардан ажратиб олинган ДНК фрагментларини плазмида ёки вирусга киритиб, сўнгра бу генетик элементларни бактерия ёки ачитқи ҳужайраларида кўпайтириш усулидир.
• 4. ДНК фрагментларини векторга жойлаштириш.
• Хромосома ва вектор ДНК лари бўлинган жойнинг учки қисми ёпишқоқ бўлиб, фермент ёрдамида унинг якка занжири тўғри холатга келади. Лигаза фермент ёрдамида хромосома ва плазмида ДНК ларининг бўлакларини учки қисми ёпишиб векторга жойлашади. Плазмида ёки вирус геномига уланган ДНК молекуласи (рекомбинант молекула) бактерия ёки ачитқи ҳужайрасига киритилади. Бундай синтетик геномли рекомбинант ДНК бактерия ёки ачитқи ҳужайрасида бўлганлиги туфайли у микроорганизмлар билан бирга бўлиниб жуда тез кўпаяди.

5. Рекомбинант ДНК ни ҳужайрага киритиш.

• 5. Рекомбинант ДНК ни ҳужайрага киритиш.
• ДНК ни ҳужайрага киритиш трасформация деб аталади
• Хар бир дурагай ДНК репликация туфайли ўзи сингари қиз молекулаларни ҳосил қилади. Ҳужайрани кўп мартаба бўлиниб, ўзи каби бир хил ҳужайраларни ҳосил қилишига клонланиш дейилади.
• Барча омиллар мавжуд бўлганида рекомбинант ДНК ни ҳосил бўлишига бир неча дақиқа сарфланади.

Фойдаланилган адабиётлар

• Артикова Р.М., Муродова С.С., Қишлоқ хўжалик биотехнологияси Дарслик. Т. “Фан ва технология” наш-ёти, 2010 йил.
• Рыбчин В.Н. Основы генной инженерии – СП.б.: Изд-во СПбГТУ, 1999.
• Пирузян Э.С. Основы генетической инженерии растений. / М.: Наука, 1986
• Сельскохозяйственная биотехнология. Сб. работ/Под ред. В.С.Щевелухи. Т.2-М: Воскресенье. 2003
• Сингер М., Берг П. Гены и геномы. //Т. 1-2. М.: Мир 1998
• Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия. // Ч.1. Новосибирск: изд-во Новосибирского университета. 1994
• Чемирис А.В., Ахунов Э.Д., Вахитов В.А. Секвенирование ДНК // М.: Наука 1999
• Генная инженерия растений. Лабораторное руководство /Под ред. Дж. Драйпера и др. – М.: Мир, 1991
• Уотсон Д., Туз Дж, Курц Д. Рекомбинантные ДНК: Краткий курс М.: Мир, 1986