513 Metod Shirokov Kryukov doc

 
Лабораторная работа № 5 
Тема: «микрочеренкование стерильных проростков» 
Материалы и оборудование. Ламинар-бокс, колбы с проростками, колбы с 
питательной средой, скальпели, пинцеты, ножницы, препарировальные иглы, 
спиртовка, флакон с 96 % спиртом, стерильная пленка. 
Ход работы. 
9. Подготовить ламинар-бокс и инструменты к работе. 
10. 
В ламинаре извлечь стерильные проростки из колб. 
11. 
Побеги разделить на микрочеренки (междоузлие с почкой) и 
посадить в питательную среду на глубину междоузлия. 
12. 
Колбу закрыть пленкой и перенести в культуральную комнату. 
13. 
Результаты зарисовать через 2-4 недели. Сделать выводы о 
степени пролиферации почек различных сельскохозяйственных культур. 
 
Контрольные вопросы к теме 
1. 
Какие стерилизующие растворы используются для растительных экс-
плантов? 
2. 
Какие вещества входят в состав питательных сред, и какую функцию 
они выполняют в культуре клеток и тканей in vitro? 
3. 
Как получают стерильные проростки и для чего их используют? 
4. 
Из каких областей экспланта образуется каллус? 

---

Глава 5. Культивирование растительного материала in vitro 
 
5.1. Основные принципы культивирования 
Согласно классификации Мурасиге (1977), процесс микроклонального 
размножения можно осуществлять следующими путями: 
1. Активация пазушных меристем. 
2. Образование адвентивных побегов тканями экспланта. 
3. Возникновение адвентивных побегов в каллусе. 
4. Индукция соматического эмбриогенеза в клетках экспланта. 
5. Соматический эмбриогенез в каллусной ткани. 
6. Формирование придаточных эмбриоидов в ткани первичных соматических 
зародышей (деление первичных эмбриоидов).