57. Монослойные и суспензионные клеточные культуры. Типы культуральных систем для непроточных и проточных культур.
Монослойные культуры
Это культуры, которые растут в один слой и если их вовремя не пересадить, то погибают. В случае монослойных культур необходимо проводить систематические пассажи клеток, используя для этого культуры предыдущего рассева или музейные клетки, сохранившиеся в условиях консервации.
Первичные клетки, которые делятся в культуре, могут претерпевать так называемое контактное торможение движения. Когда две клетки приближаются друг к другу, то в зоне контакта прекращаются специфические движения клеточной мембраны. Первичные клетки, следовательно, не могут расти друг над другом, и в большинстве случаев достижение полного монослоя сопровождается прекращением клеточных делений.
Большинство клеток млекопитающих могут расти только в виде монослоя, будучи прикрепленными к субстрату, другим клеткам или стеклу.
Монослойные культуры имеют ряд преимуществ, являющихся предпосылками их широкого использования:
1. выделение секретируемого продукта многими клетками осуществляется эффективнее в случае их прикрепления к субстрату;
2. возможность быстрой и легкой замены питательной среды; возможность сопоставления времени и количества среды с периодом роста клеток или временем наработки продукта;
3. обеспечение наибольшей гибкости исследований, поскольку в монослой могут быть введены любые типы клеток;
4. достижение искусственно высокой плотности клеток с использованием перфузионной техники;
5. возможность использования одной и той же аппаратуры с разным отношением клетки-среда, легко изменяемым в ходе эксперимента.
Однако при использовании монослойных культур выявляются и недостатки:
1. сложность масштабирования;
2. отсутствие информативности визуального анализа;
3. трудности с определением и поддержанием таких параметров, как кислотность и содержание О2 и обеспечением гомогенности культуры клеток;
4. необходимость значительных пространств.
Do'stlaringiz bilan baham: |