Амалий машғулот Солоддан амилаза ферментини ажратиб олиш ва фаоллигини аниқлаш

Jadval 1 – SOLODDAGI AMILAZA FERMENTI FAOLLIGINI ANIQLASH

№ probirka	Tarkibi, ml	Probirkalar
		1	2	3	4	5	6
1	Solod quritilgani	-	0,1	0,2	-	-	-
2	α-amilaza	-	-	-	0,2	0,4	-
3	β-amilaza	-	-	-	-	-	1,0
4	Suv	1,0	0,9	0,8	0,8	0,6	-
5	bufer, рН 5,5	3,0	3,0	3,0	3,0	3,0	3,0
6	Kraxmal, 2%	3,0	3,0	3,0	3,0	3,0	3,0
	suyultirish, R	-	10	5	5	2,5	2,4

Volgemut bo’yicha amilazalar faolligini aniqlash

• Ishning borishi: 7 probirka olinib, shtativda raqamlab joylashtiriladi va har biriga 1 ml suv qo'shiladi. Keyin birinchi probirkaga 1 ml solod ekstrakti qo'shiladi, yaxshilab aralashtiriladi va 1 ml 1 -probirkadan 2 probirkaga o'tkaziladi. Tarkibi yaxshilab aralashtiriladi va 2-probirkadan 1 ml aralashma 3 probirkaga o'tkaziladi. Oxirgi probirkadan 1 ml aralashma to’kib tashlanadi. Shunday qilib, har bir keyingi probirkadagi solod ekstraktining tarkibi avvalgisiga nisbatan 2 baravar kam bo'lgan bir qator suyultirish olinadi.
• Shundan so'ng, har bir probirkaga kraxmalning massa ulushi 1% bo'lgan 2 ml eritma qo'shiladi va tarkibini chayqash yo'li bilan aralashtiriladi. Barcha probirkalar 37-38 ° C haroratda 30 minut davomida termostatga joylashtiriladi. Inkubatsiya oxirida har bir naychaga sulfat kislotaning massa ulushi 10% bo'lgan 1 ml eritma (reaktsiyani to'xtatish uchun) va 3 tomchi yod suvli eritmasi qo'shiladi. Tajriba natijasi 2-jadvalga kiritiladi, eritmaning hosil bo'lgan rangining birinchi harflari bilan rangni belgilanadi.
• Qaysi sinov naychalarida kraxmalning to'liq gidrolizi sodir bo'lganligi (yod bilan sariq rangga bo'yalgan) va amilaza faolligi (amilaza raqami) ikkinchisidan hisoblangan.

Volgemut bo’yicha amilazalar faolligini aniqlash bo’icha olingan natijalar

	solod ekstrakti solingan probirkalar raqamlari
	1	2	3	4	5	6	7
	1/2	1/4	1/8	1/16	1/32	1/64	1/128
Eritmaning rangi	Sariq yashil	Nastarin rang	Ko’k	Och binafsha.	Och binafsha.	binafsha	To’q ko’k

• Jadval 2 – Namunalarning inkubatsiyadan so’ng rangi