- Амалий машғулот
- Солоддан амилаза ферментини ажратиб олиш ва фаоллигини аниқлаш
- Ishning maqsadi: α- va β -amilazalarni soloddan ajratib olish va ularning faolligini aniqlash.
- Solod nima?
- Solod - arpa, javdar, bug'doy, makkajo'xori donlarning qisman unib chiqqan va quritilgan donalari. Donda unib o’sishi jarayonida ma'lum bir sharoitda achitqilar o’zlashtira olmaydigan kraxmalni shakarlarga (asosan maltozaga) aylantirishga qodir bo'lgan fermentlar ajralib chiqadi.
- Solod qayerda ishlatiladi?
- Solod vino va pivo ishlab chiqarish sanoatida qo'llaniladi. Birinchi holatda undan a boshqa mahsulotlarning kraxmalini eritish va saqlash uchun ishlatiladi,
- Ikkinchi holatda faqat soloddan foydalaniladi; ikkala holatda ham diastaza,
- yoki begona moddalarning kraxmalini yoki solodning o'z kraxmalini eritib yuborish orqali ta’sir etadi;
- Bunda hosil bo'lgan suyuqliklar bijgiydi. ishlab chiqarishdan tashqari, solod, solodning quyultirilgan ekstraktini tayyorlash uchun ham ishlatiladi. Pivo ishlab chiqarishda solod tayyorlash uchun asosan arpa va ba'zida bug'doydan foydalaniladi, vino ishlab chiqarishda esa
- arpa bilan bir qatorda jo'xori, javdar, bug'doy va va Amerikada makkajo'xori ishlatiladi
- Quruq yoki yangi solod ishlatilishiga qarab, ular orasidagi farq ajratiladi
- quruq solod va yashil solod deb farqlanadi.
- 1. Gidrolizlangan kraxmal og'irligi bo'yicha solod amilazalari faolligini aniqlash
- Amilazalarning kraxmalga ta'sirini yoki kraxmalning kamayishi bilan, yoki uning parchalanadigan mahsulotlarini - shakarni to'plash orqali aniqlash mumkin.
- Parchalangan kraxmal massasi bilan amilazalar faolligini aniqlash usuli kolorimetrik usul deyiladi.
- Usul printsipi shundan iboratki, amilazalarning faolligi tajriba uchun olingan kraxmal va tajriba oxirida qolgan kraxmal massalari orasidagi farq yod bilan rangli reaktsiyasi orqali fotometrik tahlil orqali aniqlanadi. Tajriba davomida inkubatsiya davomiyligi va fermentlarni tayyorlash eritmasining hajmi shunday belgilanadi, ular probirkalarda (tarkibida ferment mavjud) kraxmalning to'liq gidrolizi sodir bo'lmaydi.
- Ushbu usul amilazalarning kraxmalga qo'shma ta'sirining o'ziga xosligi va faolligini aniqlashga imkon beradi. a-Amilaza α- -1,4-glikozidli birikmalarni kraxmal va tegishli polisaxaridlarda alohida tartibda gidrolizlaydi. Natijada dekstrinlar va oz miqdordagi maltoza hosil bo'ladi. β -Amilaza kraxmal va unga aloqador polisaxaridlarda α- -1,4-glikozidli bog'lanishlarni gidrolizlaydi, ketma-ket maltoza molekulalarini zanjirlarning kamaymaydigan uchlaridan ajratib turadi.
- Eng samarali gidroliz soloddan olingan ekstrakt tarkibidagi amilazalar kompleksi ta'sirida amalga oshiriladi.
- 2. Volgemut bo’yicha amilaza faolligini aniqlash
- Usul amilaza (solod, tupik, sut, qon zardobidan va boshqalar) dan tarkib topgan suyuqlikning maksimal darajada suyultirilishini topishga asoslangan bo'lib, unda standart sharoitlarda ma'lum miqdorda kraxmal to'liq parchalanadi.
- Soloddagi amilazaning faolligi 0,1% kraxmal eritmasining mililitrlari sonida ifodalanadi, uni 30 min davomida 38 ° C da 1 ml solod ekstrakti bilan gidroliz qilish mumkin. Odatda, amilaza faolligi 160 dan 320 faollik birligiga teng bo’ladi.
- Wolgemut usuli klinik amaliyotda qon va siydikning amilaza faolligini aniqlashda, pivo tayyorlashda - solodning amilaza faolligini aniqlashda keng qo'llaniladi. Qon va siydikdagi amilaza faolligining keskin o'sishi (10-30 marta) o'tkir pankreatitda, oshqozon osti bezi o'smalarida kuzatiladi
Do'stlaringiz bilan baham: |
