Don va don maxsulotlari biokimyosi

2-лаборатория иши
Мавзу: Ферментлар.Бошоқли дон экинлари каталаза активлигини
аниқлаш


Ишдан мақсад: Каталаза активлигини аниқлаш усулларини ўрганиш
Асосий тушунча: Маълумки нафас олиш жараѐнида моддаларнинг оксидланиши натижасида,ортиқча маҳсулот сифатида қисман водорот пероксид ҳосил бўлади. Агар ҳосил бўлган водорот пероксиднинг концентратцияси меъѐридан ошиқ бўлса,цитоплазмага заҳарли таъсир этиши мумкин.Шунинг учун ҳам ўсимлик тўқималарига каталаза ферменти ҳосил бўлган водорот перексидни сув ва кислородгача парчалаб туради.
Асбоб ва ускуналар
Буғдойнинг майсаси 3% ли водорот пероксид эритмаси,чинни ҳавонча, каталазани аниқловчи асбоб,пипеткалар,цилиндр идиш, майдаланган шиша идиши,тарози,соат,кальций карбонат-CaCO₃


ishni bajarish tartibi:
5 g solod 30 daqiqa davomida xona haroratidagi 100 sm ³ suvda,vaqti-vaqti bilan chayqatib turgan holda tutib turiladi.SHundan keyin kolbadagi suyuqlik quruq filtr orqali filtirlanadi.SHaffof eritmadan pipetka yordamida 2 ta (tajriba va nazorat uchun) 20 sm³ hajmli porsiya olinadi va har bir porsiyani 200sm³ li kolbaga solinadi.Nazorat uchun olingan porsiya fermenti inaktevatsiyalash maqsadida qaynatiladi.
Har ikkala kolbaga 20 sm³ dan distillangan suv quyiladi.Ustidan 4sm³ dan vodorot pereksidi quyib 20 daqiqa davomida fermentini harakatlanishi uchun xona haroratida tutib turiladi.Keyin namunalar ustidan 5 sm³ dan sulfat kislota fuyiladi va parchalanmay qolgan perekis vodorot kaliy permanganat eritmasi bilan titrlanadi.
Katalaza faolligi quyidagi formula orqali aniqlanadi:

Bu erda:

10. 
    katalaza faolligi
    

a—nazoratdagi eritmani titrlashga sarflangan KMnO₄ 0,1 mol/dm³ eritmasi miqdori sm³
v_ tajriba namunasini titrlashga sarflangan 0,1 mol/dm³ KMnO₄ eritmasi miqdori sm³
K- titrga tuzatma
100-eksraktning umumiy hajmi sm³
50-N2O2 ni mikromolga hisoblash koeffitsienti 20-ferment eritmasi hajmi sm³
20-fermentativ reaksiya vaqti,daqiqa
R-tahlil uchun olingan material og‗irligi