Химические составляющие зеленой кожуры плодов персидского ореха

2.2.2 Разделение
С помощью острого лезвия бритвы были приготовлены тонкие срезы зеленой кожуры зрелых плодов грецкого ореха. Срезы помещали в часовое стекло с дистиллированной водой. Как упоминалось выше, использовались различные красители. Препараты изучали с помощью светового микроскопа OLYMPUS BH-2, соответствующие препараты фотографировали цифровой камерой Sony.
2.3 Подготовка проб для элементного анализа
Зеленую кожуру плодов грецкого ореха сначала хорошо высушивали при 70 °C в духовке в течение 48 ч. Затем 0,1 г сухой ткани смешивали с 7 мл 65% концентрированной азотной кислоты в пробирке из пирекса и выдерживали в течение 24 ч для обеспечения хорошего кислотного пищеварения. Затем пробирки нагревали в течение 5 ч для удаления паров желтой кислоты из пробирок и получения прозрачного беловатого кислого раствора. Конечный объем растворов доводили до 25 мл с помощью мерной колбы на 25 мл и деионизированной воды, а содержимое
Конверсия биомассы и биопереработка каждой пробирки фильтровали с использованием фильтровальной бумаги Whatman № 1 [14]. Содержимое пробирок вводили в прибор для оптической эмиссионной спектроскопии с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС), изготовленный компанией Varian, Австралия. Этот анализ был выполнен в четырех повторностях, и представлены средние значения.
3. Результаты
3.1 Цитохимия зрелой зеленой кожуры вокруг плода грецкого ореха
В клетках были обнаружены различные материалы, большинство из которых было идентифицировано с использованием различных красителей. При использовании йода Люголя было обнаружено большое количество крахмальных зерен темного цвета, рассеянных или объединенных. Древесные клетки, такие как ксилема и склереиды, также реагировали с раствором Люголя и окрашивались в оранжевый цвет (рис. 1А, В). По методу периодической кислоты-Шиффа содержимое некоторых клеток окрашивалось от розового до красного цвета. Это содержимое в основном наблюдалось в эпидермальных клетках и поверхностных областях (рис. 1C, D). Двойное окрашивание метиловым зеленым и конго красным, клетки эпидермиса, клетки склеренхимы внизу
эпидермис, рассеянные клетки склеренхимы в паренхиме и ткань ксилемы наблюдались зеленым цветом, а целлюлозные стенки - красным. Оксалат кальция также был обнаружен в высоких концентрациях (рис. 1E, F). Хлорное железо использовали для окрашивания фенольных соединений. С этим веществом содержимое некоторых клеток приобретало коричневый цвет. Клетки в среднем и внутреннем слоях, которые соприкасались с внешней стороной плода, имели более высокую степень окрашивания (рис. 1G). При окраске ванилин-соляной кислотой установлено, что концентрация дубильных веществ в клетках эпидермиса, паренхимы и ткани флоэмы была значительно выше (рис. 1З, I).