Искусственное осеменение

Замораживание спермы барана

При круглогодовом (10 мес) взятии спермы от барана реко- мендуется получать по 5–6 эякулятов в течение недели дуплетные садки с интервалами 10–15 мин и промежутками между дуплетами

– 48 ч.
Для замораживания сперму барана разбавляют двумя средами

• 
  лактозо-желточной (ЛЖ) и лактозо-желточно-гуммиарабико- трис-цитратно-глицери-новой (ЛЖГТЦГ).
  

Состав лактозо-желточной среды:

• 
  вода дистиллированная 100 мл;
  
• 
  лактоза (12 г);
  
• 
  желток свежего куриного яйца (20 мл);
  
• 
  спермосан-3 (25 тыс. ЕД).
  

Для ее приготовления в чистую стерильную колбу вносят навеску лактозы, заливают дистиллированной водой и закрывают пищевой алюминиевой фольгой или пергаментной бумагой, кипя- тят в течение 1 ч на водяной бане. После охлаждения раствора до 40 °С в него вводят спермосан-3 и желток куриного яйца.
Состав лактозо-желточно-гуммиарабико-трис-цитратно- глицериновой среды:

• 
  вода дистиллированная – 100 мл
  
• 
  лактоза – 4,5 г;
  
• 
  гуммиарабик (порошок) – 6 г;
  
• 
  трис (оксиметил)-аминометан – 600 мг;
  
• 
  лимонная кислота – 270 мг;
  
• 
  желток свежего куриного яйца – 20 мл;
  
• 
  глицерин, ч. д. а. – 17 мл;
  
• 
  спермосан-3–25 тыс. ЕД.
  

Для приготовления среды в стерильную колбу вносят навески лактозы, гуммиарабика, трис-аминометана и лимонной кислоты. Тщательно перемешивают, заливают необходимым количеством горячей кипяченной воды и закрыв колпачком из фольги или пер- гаментной бумаги, помещают в кипящую водяную баню до полно- го растворения всех компонентов. Затем в колбу вносят глицерин и раствор фильтруют через слой стерильной ваты. После чего, за- крыв колбу колпачком, раствор стерилизуют на водяной бане в те- чение 2 ч. В охлажденный до 40 °С раствор добавляют спермосан-3 и желток куриного яйца. Приготовленные среды можно использо- вать в течение 4 ч при температуре +24°…+26 °С.
Полученную от баранов сперму используют для разбавления и замораживания с оценкой по подвижности не ниже 8 баллов и кон- центрацией не менее 2,5 млрд спермиев в 1 мл.
Сперму разбавляют в два приема. Вначале к одному объему спермы добавляют 0,5 объема ЛЖ среды, имеющей температуру
+28°…+29 °С. Разбавитель вливают осторожно по стенке спермо- приемника при постоянном помешивании. После этого к одному объему получившейся разбавленной спермы добавляют один объ- ем ЛЖГТЦГ среды с температурой +24°…+26 °С.
Затем разбавленную в 3 раза сперму разливают во флаконы и выдерживают в холодильнике при температуре +2°…+5 °С в тече- ние 2 ч. После чего ее замораживают в гранулах по 0,2 см³ в лу- ночках на пластинах сухого льда или фторопластовых пластинках, укрепленных над жидким азотом.
Гранулы замороженной спермы после выборочной проверки на активность собирают в алюминиевые тубы или ссыпают в кани- стры и хранят в жидком азоте.
Для оттаивания гранул на пунктах применяют специальное устройство (оттаиватель), состоящее из внешнего и внутреннего сосудов, между стенками которых заливают горячую воду с темпе- ратурой +75°…+80 °С, а с нижней части внутреннего сосуда нахо- дится отверстие для оттока оттаявшей спермы в подставленный флакон.
Гранулы спермы для оттаивания ссыпают в кювету, через 8– 12 с оттаявшая сперма начинает стекать из нижнего отверстия во флакон.
Оттаивают не более 15–20 спермодоз и используют после про- верки (ее активность должна быть не ниже 4 баллов) в течение 15 мин.

0.