Kanakunjutdagi lipaza fermentining aktivligini aniqlash

LABORATORIYA-23
KANAKUNJUTDAGI LIPAZA FERMENTINING AKTIVLIGINI ANIQLASH.
Lipaza fermenti o’simliklarda keng tarqalgan bo’lib, ular moyli o’simliklar urug’ida ko’p bo’ladi. Unayotgan chigit tarkibida ham lipaza fermentining aktivligi eng yuqori bo’ladi.
CH₂-O-CO-R₁ CH₂-OH R₁-COOH
CH₂-O-CO-R₁ CH –OH + R₂-COOH
CH₂-O-CO-R₁ CH₂-OH R₃-COOH
Moylar glitserin yog’ kislotalari
Linza fermentining ta’sirida yog’ kislotalarining miqdori ortadi, shuning uchun ferment aktivligi muhitning nordonligi titrlash yo’li bilan topiladi.
Ishning tartibi : lipaza fermentini olish uchun 2-3 kunlik bo’rtgan kanakunjut mag’zidan 2 gramm olib, chinni xovonchada bir xil massa hosil bo’lguncha aydalangan shisha yordamida eziladi va 5 ml 0,2 M atasetat buffer (pH-4,8) qo’shib hajmi 100 ml bo’lgan kolbaga quyiladi. Kolbaga 2 ml toza paxta moyidan quyib 2 soatda 40 C ga termostatga qo’yiladi . bu vaqt davomida kolbani 3-4 marta yaxshilab chayqatib turiladi. Vaqt tugagach, kolbaga 20 ml 96 foiz li etil spirit va 20 ml efir solinadi. 2-3 tomchi fenolftalein qo’shib 0,1 N kaliy gidroksidi yordamida titrlanadi.
Kontrol ham xuddi tajribaga o’xshash tayyorlanadi, faqat inkubatsiyaga qo’ymasdan darxol titrlanadi.
Reaktivlar : 2-3 kunlik bo’rtgan kanakunjut mag’zi, atsetat buferining 0,2 M eritmasi paxta moyi, etil spirtining 96 foiz eritmasi, efir, fenolftalein KOH ning 0,1 N eritmasi.