Методика проведения лабораторных анализов в свп, их клинико-диагностическое значение

Перечень реактивов:
1. Кофеин.
2. Натрия бензоат.
3. Натрия ацетат 3-водный (ч.д.а. или х.ч.)
Кофеиновый реактив: 5 г кофеина, 7,5 г бензоата натрия, 12,5 г ацетата натрия раство­ряют в 90 мл воды, нагревают до 50 - 60° С, хорошо перемешивают. После охлаждения до­водят водой до 1000 мл. Раствор стабилен в тече­ние 2 нед.
4. Натрия хлорид (ч.д.а. или х.ч.), 154 ммоль/л (изотонический раствор): 0,9 г хло­рида натрия помещают в мерную колбу вмести­мостью 100 мл и доводят до метки водой.
5. НС1 концентрированная (ч.д.а. или х.ч.)
6. Сульфаниловая кислота (ч.д.а.)
Диазореактив Эрлиха I (раствор сульфаниловой кислоты 0,5%): 5 г сульфаниловой кислоты растворяют при нагревании в 300—400 мл воды, прибавляют 15 мл концентрированной НС1. Если сульфаниловая кислота полностью не растворяется, колбу помещают в теплую воду и помешивают. Только после растворения и охлаждения раствор доли­вают водой до 1 л. Реактив стабилен при хране­нии в посуде из темного стекла.
Диазореактив Эрлиха II (раствор нитрита натрия 0,5%): натрия нитрит ч.д.а. или х.ч., (0,07 моль/л): 0,5 г нитрита натрия помещают в мер­ную колбу вместимостью 100 мл и доводят водой до метки. Реактив стабилен в течение 24ч.
Диазосмесь: Перед работой смешивают 10 мл диазореактива I и 0,3 мл диазореактива II.
7. Билирубин для по­строения калибровочного графика, 800 мг/л, или 1368 мкмоль/л. Коммерческие препараты кристаллического билирубина содержат разные примеси, которые могут мешать реакции азосочетания. Рекомендуется использовать набор Био-Ла-Тест «Билирубин-эталон», со­держащий билирубин высокой степени чистоты с коэффициентом молярной экстинкции не менее 6,05-10⁴ л ∙ моль^-1 ∙ см^-1 при 453 нм и растворе­нии в хлороформе. Растворы билирубина не­стойкие, поэтому их готовят с добавлением белка в качестве стабилизатора. Коммерческие препа­раты билирубина не связаны с глюкуроновой кислотой.
8. Натрия карбонат, 0,1 моль/л: 10,6 г безводного Na₂СО₃ растворяют и доводят до 1 л водой.
9. Уксусная кислота, 4 моль/л: 25 мл ледяной уксусной кислоты доводят до 100 мл водой.