Microsoft Word Введение в спектральный и люм анализ doc

Пиридиннуклеотиды в восстановленной форме (НАД·Н, НАДФ·Н) 
флуоресцируют с максимумом 470 нм в водных растворах и 440 нм при связы-
вании с белками, в последнем случае почти в 6 раз увеличивается и квантовый 
выход. 
Флавины - витамин В
2 
(рибофлавин), ФМН (флавинмононуклеотид) и 
ФАД (флавинадениндинуклеотид) в окисленной форме обладают спектрами 
флуоресценции с максимумом в голубовато-зеленой области спектра при 530 
нм (см.Рис.13). 
Среди флавопротеинов (ФП) наибольший интерес представляют собой 
производные рибофлавина. В окисленном состоянии флавопротеины обладают 
характерным спектром поглощения и собственной желто-зеленой флуоресцен-
Рис.13. Спектры поглощения (1) и флуоресценции (2) водных 
растворов ФАД (флавинадениндинуклеотид) [1] 

---

33 
цией с максимумом в области 530 нм, обусловленной рибофлавином. При вос-
становлении флавопротеины утрачивают собственную флуоресценцию.
4
Билирубин, являющийся промежуточным продуктом распада гемоглоби-
на, в водных растворах слабо флуоресцирует в голубовато-зеленой области 500- 
550 нм, но при взаимодействии с сывороточным альбумином человека его лю-
минесценция возрастает почти в 50 раз, а максимум приходится на 515 нм.
Флуоресценция в красной области присуща прежде всего порфиринам. 
Порфириновая структура свойственна цитохромам, пероксидазе, каталазе, 
гемоглобину, миоглобину.
Спектры флуоресценции порфиринов обычно имеют 
две полосы: более интенсивную в красно-оранжевой области 600 – 650 нм и 
менее интенсивную в красной, более длинноволновой области. Однако в гемо-
порфиринах флуоресценция «потушена» атомами железа, что ограничивает 
возможности ее исследования в живых тканях. При обработке ткани некоторы-
ми веществами атом железа отрывается от простетической группы внутрикле-
точных гемопорфиринов, и тогда выявляется характерная красная флуорес-
ценция порфиринов
5
.
Значительный интерес представляют порфирины и их люминесцентные 
свойства в связи со способностью этих соединений избирательно накапливать-
4
) Неодинаковая флуоресценция пиридиннуклеотидов и флавопротеинов в восстанов-
ленной и окисленной формах лежит в основе использования флуоресцентного анализа для 
количественной оценки клеточного дыхания живых тканей. Усиление клеточного дыхания 
сопровождается изменением соотношения восстановленных и окисленных форм компонен-
тов дыхательной цепи в сторону преобладания вторых над первыми. Угнетение дыхания 
приводит к противоположному эффекту. Поэтому при усиленном дыхании клетки в ней на-
растает желто-зеленая и затухает синяя флуоресценция, тогда как при ослаблении дыхания 
характерно усиление синего свечения НАД • Н и угасание желто-зеленой флуоресценции 
ФП. 
5
) Протопорфирин является частью молекулы гемоглобина, поэтому обнаруживают-
ся в эритроцитах и в небольших количествах количествах в плазме крови, благодаря чему 
эритроциты обычно слабо люминесцируют красным светом. Но при недостаточности желе-
за, отравлении свинцом и других патологических состояниях красная люминесценция про-
топорфирина увеличивается в десятки и сотни раз. Этим свойством пользуются судебные 
медики для обнаружения отдельных эритроцитов по их порфириновой флуоресценции после 
обработки исследуемого объекта серной кислотой. 

---

34 
ся в злокачественных опухолях. Помимо диагностики это свойство порфиринов
используется сейчас в фототерапии опухолей (гематопорфирин и его производ-
ные).