Molekular biologiya

replikatsiya ko'zi bir neshta joyda bo'lishi mumkin. bu replikatsya tezligini oshradi

eukaryotiklar genomi 12 Mb(12 mln bp) dan (S. cerevisiae-da ) 3 Gb(3 mlrd bp) gacha (odamlarda) katta bo'lgani uchun DNKning replikatsiyasini bir necha yuz joydan boshlashni talab qiladi.
“bp” bu DNK dagi nukleotidlar soni.
1000bp=1kb
1000 000bp=1mb
1000 000 00= 1gb

E COLI ori genlari ro’yxati

Common Vectors	Copy Number+	ori
pUC	~500-700	pMB1 (derivative)
pBR322	~15-20	pMB1
pET	~15-20	pBR322
pGEX	~15-20	pBR322
pColE1	~15-20	ColE1
pR6K	~15-20	R6K*
pACYC	~10	p15A
pSC101	~5	pSC101
pBluescript	~300-500	ColE1 (derivative) and F1**
pGEM	~300-500	pUC and F1**

Sut emizuchilarda ori geni to’iq o’rganilmagan va u juda murakkab. Shuning uchun sut emizuchlarda genomga transfatmatsiya qislish uchun virusliy vektorlar ishlatiladi. Yoki umuman ori geni yo’q plazmida sihlatiladi. Chunki sut emizuvchlar hujayrasi 2 kunda 1 marotaba ko’payadi. Odatda in vitro eksperimentlar 24 soat ichda kuzatiladi xolos. Shuning uchun ori gensiz plazmidalarni ishlatish mumkin. Yana bir usuli Simian Virus 40 (SV40) origeni SV40 T-antigeni mavjud hujayralarda replikatsiya qila oladi. Epshteyn-Barr virusining (EBV) EBNA-1 geni ORI gen o’rnini bosishi mumkin. Subu ori genlar plazmidani replikatsiya qilishini taminlashi mumkin. EBNA-1 origeni xar gal hujayra ko’payganda 5% plazmida yuqotadi. Bu esa malum voxtdan so’ng plazmida butunlay yo’qolishiga olib keladi.
SV40 ori
SV40 ori
EBNA-1

• Ген : экспрессия EBNA-1 для инициации внехромосомной репликации с помощью oriP
• SV40 ori : ori gene репликации для внехромосомной репликации
• pUC ORI (yoki ColE1 ori) : E. coli da ko’payishi uchun. Chunki barcha vektorlar e colida ko’paytirib olinadi. Keyin achitqi, o’simlik yoki xayvonga kiritiladi.