O‘zbekiston respublikasi veterinariya va chorvachilikni rivojlantirish davlat qo‘mitasi SamarQand davlat veterinariya meditsinasi, chorvachilik va biotexnologiyalar universiteti mikrobiologiya

Dozatorlar
IFT uchun ishlatiladigan 96 chuqurchali mikroplanshet.
Wosher (yuvish mashinasi)
Termostat-Sheyker
PLANSHET SPEKTROFOTOMETRI
(RIDER)
Distillyator

IFT reagentlari

• Bog‘lanish uchun xizmat qiluvchi muxit:

Oqsillarning eruvchangligi konformatsiya/oqsilning barqarorligi antitelo va antigenning bog‘lanishi uchun mos keluvchi sharoit.

• Suyultirilgan buferlar:

Ph – fiziologik ahamiyati va ionli kuchlar

• Nospesifik bog‘lanishni pasaytiradi :

To‘sqinlik qiluvchi eritmalar – nospesifik oqsil
Yuvuvchi eritmalar – monogen bo‘lmagan yuvuvchi vosita

• Harorat

inkubatsiya

FERMENTLAR

• Xren peroksidaza

(o-fenilendiamin, tetrametilbenzidin)
2. Ishqoriy fosfataza (fosforli efirlar)
3. Beta-galaktozidaza

IFT ning komponentlari

• Antitelo: zardobdagi IgG, (affinn xromotografiya uchun tozalangan bo‘lishi mumkin)
• Antigen: bakterial va viruslarning tozalangan oqsili
• Ferment: xren peroksidazasi (XP)
• Substrat: tetrametilbenzidin (TMB), ortofenildiamin (OFD)

IFT – qo‘llaniladigan kon’yugatlar

Kon’yugat antigen va antiteloning
qo‘shilganligini kuzatishga imkon beradi.
Ferment-substrat reaksiyasi xren peroksidazasi (XP) ishqoriy fosfataza
Fluorofor - elektromagnit to‘lqinlarining qo‘zg‘alishi va nurlanish
Fluoressein izotiotsianat (FITC),
rodamin, yashil fluoressentli oqsil(GFP)

• Polistirol qattiq fazada antigen yoki antitelani adsorbsiyalash
• Test o‘tkazilyotgan namunani va navbatdagi reagentlarni qo‘shish
• Reagentlarni inkubatsiyalash
• Qo‘shilgan va qo‘shilmagan reagentlarni yuvish tufayli ajratish
• Ferment bilan belgi qo‘shilgan reagentni qo‘shish
• Ferment belgisini uchratish (rangli reaksiyani amalga oshirish) substrat quyish
• Reaksiya natijasini spektrofotometrik hisobga olish