Предисловие Благодарности

Глава 4. Инструментарий: ферменты . . .

1. 
   Нуклеазы
   

а. Общие свойства
б. Нуклеазы, специфичные в отноше- нии одноцепочечной ДНК . . .
в. Нуклеаза Bal 31 г. РНКазы Н

2. 
   Эндонуклеазы рестрикции . . . . а. Три типа эндонуклеаз рестрикции б. Типичная рестриктирующая эндо-
   

нуклеаза типа II
в. Различные группы рестриктиру- ющих эндонуклеаз типа II . . .
г. Картирование сегментов ДНК с помощью рестриктирующих эн- донуклеаз типа II
д. Защита ДНК посредством мети- лирования

3. 
   Фосфомоноэстеразы
   
4. 
   Полинуклеотидкиназа
   
5. 
   ДНК-лигаза
   
6. 
   ДНК-полимераза I
   

а. Полифункциональный фермент б. Ник-трансляция
в. Заполнение брешей

7. 
   РНК-зависимые ДНК-полимеразы (обратные транскриптазы) . . . .
   
8. 
   Терминальная дезоксинуклеотидил- трансфераза
   

а. Полимеризация без матрицы б. Синтез липких концов

9. 
   роlу(А)-полимераза
   

Глава 5. Инструментарий: системы хозяин- вектор

1. 
   Е. соli-системы: клетки-хозяева . . .
   

185
189


195


196
196
197
198
202
203
204
204
207
211
211
211


212
213
214
214
214


215


216
218


218
221
221
222
222
222
222
223


223


224
224
224
226


227
228

а. Разносторонность хозяина . . . б. «Гостеприимство» хозяина . . . в. Доступность хозяина

г. Некоторые примеры

2. 
   Е. соli-системы: плазмидные векторы а. Модульная структура плазмид б. Конструирование векторов для
   

отбора
в. Плазмидный вектор pBR322 г. Другие векторы, используемые для
разных целей

3. 
   Е. соli-системы: фаговые векторы а. Некоторые различия между плаз- мидами и фаговыми векторами
   

б.Фагλ
в. Векторы, сконструированные на основе фага λ.
г. Упаковка λ-векторных молекул в фаговые частицы
д. Фаг М13
е. Векторы, сконструированные на основе фага М13

4. 
   Е. соli-системы: плазмидно-фаговые векторы
   

а. Космиды б. Фазмиды

5. 
   Другие прокариотические системы хозяин-вектор
   

а. Грамотрицательные организмы б. Грамположительные организмы в. Челночные векторы

6. 
   Эукариотические системы хозяин- вектор: дрожжи
   

а. Универсальность и удобство б. Векторы, способные реплициро- ваться в клетках дрожжей . . .
в. Стабильная трансформация при рекомбинации с дрожжевым ге- номом

7. 
   Эукариотические системы хозяин- вектор: животные
   

а. Трансформация клеток животных б. Векторы на основе SV40 . . . . в. Векторы на основе вируса папил- ломы крупного рогатого скота
г. Векторы на основе ретровирусов

8. 
   Эукариотические системы хозяин- вектор: растения
   

а. Общие положения
б. Плазмида pTi-A, индуцирующая образование опухолей
в. Конструирование векторов реком- бинантных ДНК с использова- нием pTi


228
228
228
229
229
229


232
234


236
237


237
238


240


241
242


243


246
246
247


249
249
249
250


252
252


252
254


256
256
260


265
267


273
273


273
275