Предисловие Благодарности
Download 349.19 Kb.
|
MUNDAREJA
|
Глава 6. Средства: конструирование, кло- нирование и отбор рекомбинант- ных молекул ДНК Вставки а. Общие положения б. Вставки геномной ДНК . . . . в . Синтетические вставки . . . . г. Копирование РНК с образованием ДНК Лигирование вектора со вставкой а. Соединение концов б. Присоединение липких концов Инфекция, трансфекция и клонирова- ние а. Перенос рекомбинантных молекул из пробирки в клетку б. Клонирование Скрининг клонированных популяций рекомбинантных молекул . . . . а. Обнаружение нужного клона б. Отжиг с комплементарным поли- нуклеотидом в. Определение экспрессии гена в клетках Библиотеки а. Геномные библиотеки б. Библиотеки кДНК Некоторые стратегии клонирования генов и кДНК Глава 7. Продукты рекомбинации: характе- ристика и манипулирование . . . Макроструктура клонированной вставки а. Размер вставки б. Картирование сайтов для рестрик- тирующих эндонуклеаз . . . . в. Субклонирование г. Определение положения интере- сующего нас сегмента во вставке Тонкая структура клонированной вставки: нуклеотидная последова- тельность а. Общие принципы б. Химическое секвенирование . . . в. Ферментативное секвенирование 277 277 277 277 280 285 286 286 289 290 290 292 292 292 292 299 302 304 304 316 317 317 317 318 318 318 319 320 321 324 Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей ДНК . . . . а. Хранение информации о первич- ной структуре б. Структурный анализ в . Биологическое значение . . . . Определение положения клонирован- ных сегментов в геномах а. Молекулярная локализация . . . б. Хромосомная локализация . . . в. Нестабильность при клонировании Определение числа копий данной последовательности в геноме . . . а. Оценка числа копий с помощью гибридизации ДНК–ДНК . . . б. Оценка числа копий по кинетике реассоциации ДНК в. Оценка числа копий с помощью гибридизации в условиях насыще- ния Изменение клонированных сегмен- тов: получение мутантов а. Общие положения б. Делеционные мутанты в . Инсерционные мутанты . . . . г. Точечные мутации Изучение функций клонированных сегментов ДНК а. Характеристика внутриклеточных транскриптов, соответствующих клонированным сегментам ДНК б. Функциональное тестирование клонированной ДНК Синтез полипептидов, кодируемых клонированными сегментами эука- риотической ДНК а. Выбор системы экспрессии . . . б. Экспрессирующие векторы, ис- пользуемые в Е. coli в. Экспрессирующие векторы, ис- пользуемые в клетках дрожжей г. Экспрессирующие векторы, ис- пользуемые в клетках животных Ферментативная амплификация сег- ментов ДНК и РНК Литература 328 328 330 331 333 333 334 338 339 339 339 342 343 343 343 344 344 348 349 353 354 354 356 359 360 360 364 Download 349.19 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|