Streptomitsin dori vositasini gaz suyuqlik xromatografik usulda aniqlash

Xromatografiya asoslari
Xromatografiya [gr. xromatos? rang + grafiklar? yozish] - modda
zonasining sorbent qatlami bo'ylab ko'chma faza oqimida sorbsiya va
desorbsiya harakatlarini qayta-qayta takrorlash bilan harakatiga
asoslangan moddalarni ajratish, tahlil qilish va fizik-kimyoviy tadqiq
qilish usuli. Bunda ajratilgan moddalar ikki aralashmaydigan fazalar
orasida taqsimlanadi (har bir fazadagi nisbiy eruvchanligiga qarab):
harakatlanuvchi va harakatsiz.
Usulning mohiyati eluent oqimidagi (mobil faza - PF) sorbent qatlami
(statsionar faza - SF) bo'ylab ba'zi tahlil qilinadigan aralashmaning
moddalarining turli xil harakat tezligida yotadi. Moddalarning harakat
tezligi ular bilan teng bo'lmagan o'zaro ta'sir tufayli ikki faza o'rtasida
4

---

ajratilishi kerak bo'lgan moddalarning boshqacha taqsimlanishi bilan
bog'liq. Natijada, dastlabki aralashmani tahlil qilish mumkin bo'lgan ko'p
yoki kamroq toza moddalarni o'z ichiga olgan qatlamlarga bo'linadi.
Bajarilgan vazifalarga qarab, xromatografiya quyidagilar bo'lishi mumkin:
●
analitik,
xromatografik
asbob-uskunalar
yordamida
va
xromatografik
zonalar
parametrlari
asosida
moddalarning
fizik-kimyoviy xarakteristikalari o'rganilganda;
●
preparativ, laboratoriya sharoitida oz miqdorda sof komponentlarni
ajratib olish uchun ishlatiladi;
●
sanoat, sezilarli miqdorda sof moddalarni olish uchun ishlatiladi.
Murakkab (gibrid) usullar ham keng tarqalgan.
Hozirgi vaqtda xromatografiyaning quyidagi turlari qo'llaniladi:
1. Gaz. Eluent gaz (vodorod, geliy, azot) oqimidagi gazsimon moddalarni
ajratish va tahlil qilish amalga oshiriladi.
2. Suyuqlik. Moddalarni ajratish suyuq element oqimida (n-geksan,
dimetilformamid, asetonitril va boshqalar) amalga oshiriladi.
Amaldagi mobil va statsionar fazalar va molekulalararo o'zaro
ta'sirlarning tabiatiga qarab xromatografik tahlil variantlarini batafsilroq
tasniflash 1-3-jadvallarda keltirilgan.
Jadval 1. Xromatografiyaning faza holatlari bo'yicha variantlari
Mobil faza
Statsionar bosqich
Usul nomi
Gas
Qattiq adsorbent
Suyuqlik
Gazning adsorbsiya
gaz-suyuqlik
Suyuqlik
Qattiq adsorbent
Suyuqlikning
adsorbsiya
suyuqlik - suyuqlik
5

---

Superkritik gaz yoki
bug '
Qattiq adsorbent
Suyuqlik
Suyuqlikning
adsorbsiya
suyuqlik-suyuqlik
Kolloid tizimi
Qattiq
va
suyuq
komponentlarning
murakkab tarkibi
polifazali
xromatografiya
Jadval 2. O'zaro ta'sirlarning tabiati bo'yicha xromatografiya variantlari
Ajratish jarayonining mexanizmi
Xromatografiya varianti
Qattiq
qo'zg'almas
adsorbent
tomonidan aralashmaning tarkibiy
qismlarining turli xil so'rilishi
Adsorbsiya
Aralashma
komponentlarining
suyuqlik turlicha eruvchanligi NF
Tarqatish
NF
va
ajratilayotgan
aralashmaning tarkibiy qismlari
o'rtasidagi
ion
almashinish
konstantalari o'rtasidagi farq
Ion almashinuvi
Komponent
molekulalarining
statsionar
fazaga
turli
o'tkazuvchanligi (yuqori gözenekli
ion bo'lmagan jel).
Eksklyuziv
(molekulyar elak)
cho'kindi
Ajratilgan
komponentlarning Kimyosorbtsiya
6

---

qattiq NFda cho'ktirish qobiliyati
Vodorod
aloqalarining
shakllanishi,
alohida
komponentlarning
kimyoviy
yaqinligi va boshqalar.
Elektroxromatografiya
Tashqi
kuchlanish
ta'sirida
komponentlarning zaryadlangan
zarralari harakatining turli tezligi
Sorbent qatlami bo'ylab ajratiladigan aralashmani harakatlantirish
usuliga ko'ra, xromatografiyaning quyidagi turlari ajratiladi: frontal,
rivojlanayotgan va siljish.
Frontal versiyada sorbent qatlamiga doimiy ravishda ajratilgan
aralashma kiritiladi, u tashuvchi gaz va ajratilgan komponentlardan
iborat, masalan, 1, 2, 3, 4, bu o'zi harakatlanuvchi fazadir. Jarayon
boshlanganidan bir muncha vaqt o'tgach, eng kam so'rilgan komponent
(masalan, 1) qolganlardan oldinda bo'lib, hammadan oldin sof modda
zonasi sifatida chiqadi va uning orqasida, sorbsiya tartibida,
aralashmalar zonalari. komponentlar ketma-ket joylashgan: 1 + 2, 1 + 2
+ 3, 1 + 2+3+4.
Rivojlanish (elutsiya) usuli shundan iboratki, aralashmaning tarkibiy
qismlari (sorbatlar) sorbatlarning har qandayidan yomonroq so'rilgan
modda (eluent) oqimi orqali sorbsiya qatlami orqali o'tkaziladi. Tahlilni
ishlab chiqish jarayonida tahlil qilinayotgan aralashmaning ajratilgan
komponentlari xromatografik kolonnani alohida zonalarda eluent
oqimida qoldiradi, ular orasida (etarli darajada aniq ajralish bilan) sof
elyuent ustuni tark etadi. Bu xromatografiyaning eng ko'p qo'llaniladigan
variantidir.
7

---

O'zgartirish usuli aralashmaning har qanday tarkibiy qismlaridan ko'ra
kuchliroq so'rilgan moddaning (o'zgartiruvchi) oqimi bilan ajratiladigan
aralashmani o'tkazishdan iborat. Siqilish tahlili jarayonida tarkibiy
qismlarning bir-biriga ulashgan alohida zonalari hosil bo'ladi, ular
orasida ularning aralashmasi zonalari bo'ladi. Komponentlarning elutsiya
tartibi ularning fizik-kimyoviy xususiyatlarini tavsiflaydi va tarmoqli
kengligi (balandligi emas!) Ushbu komponentning kontsentratsiyasiga
mutanosibdir. Ajratish usuli sifatida joy almashish tahlili juda cheklangan
qo'llanilishiga ega va miqdoriy tahlilda kamdan-kam qo'llaniladi.
Aralashmalarning tarkibini xromatografik aniqlashning ikkita asosiy usuli
mavjud:
1) chiqish egri usuli (asosan ustun va kapillyar xromatografiyada
qo'llaniladi); o'tgan moddaning vaqtiga yoki hajmiga bog'liq holda
ustundan chiqadigan oqimning xususiyatlarini doimiy ravishda
aniqlashga asoslangan;
2) sorbsion qatlam uzunligi bo‘yicha aralashma xossalarining
o‘zgarishini aniqlashdan iborat qatlam usuli.
Birinchi variantda mobil fazada erigan namuna ustunning yuqori qismiga
kiritiladi.
So'ngra
ajratiladigan
moddalar
kolonka
oxirida
aniqlanmaguncha mobil faza yordamida elutsiya qilinadi.
A va B moddalarning ajralish misolidan foydalanib, elyusiya tamoyilini
tushuntiramiz.
Namuna ustunga kiritilgandan so'ng, uning tarkibiy qismlari mobil va
statsionar fazalar o'rtasida taqsimlanadi. Agar mobil faza doimiy
ravishda
eluent
shaklida
kirsa,
moddalar
kolonna
bo'ylab
harakatlanuvchi va statsionar fazaning yangi qismlari o'rtasida
taqsimlanadi. Statsionar fazada kuchliroq saqlanadigan birikmalar
zaifroq o'zaro ta'sir qiladiganlarga qaraganda ajratish uchun ko'proq
vaqt talab qiladi. Ideal holda, moddalar tegishli elyusiya vaqtidan keyin
ajratiladi va ustun oxirida alohida aniqlanadi.
Xromatogramma detektor signalining elutsiya vaqtiga bog'liq bo'lgan
yozuvidir.
8

---