Техника приготовления мазка, окраска простым методом

Необходимые принадлежности:световой микроскоп, выращенный на питательной среде культура стафилококка, стрептококка,кишечной палочки, набор по Граму ( генциан-фиолетовый, фуксин, раствор Люголя, 96⁰этиловый спирт), иммерсионноемасло, предметные стёкла, фильтровальная бумага, петля, спиртовка, пипетки, штатив, лоток,мостик, чистая вода в колбе,физиологический раствор.


Порядок работы (шаги).

№	Выполняемые действия	Рисунок действий	Выполнил точно и до конца (балл)
1	Приготовленные и зафик-сированные препараты из культуры стафилококка, стрептококка и кишечной палочки располагают на мостик над лотком и капают краситель генциан фиоле-товый, либо прикладывают пропитанный генциан фиолетовым фильтровальную бумагу на 2 минуты		10
2	После определённого времени убирается фильтровальная бумага и капается раствор Люголя. Держать 1 мин.		10
3	Не смывая, на препарат капают 96^0этиловый спирт и оставляют до исчезновения окрашивания (30 секунд)		20
4	Препарат хорошо промывается водой		10
5	Препарат докрашивают фуксином Пфейффера( 2-3 мин)		10
6	Препарат хорошо промывается водой и сушится		10
7	На приготовленный препарат наносят иммерсионное масло и микроскопируют		20
8	Нарисовать в тетрадь бактерии, которые окрасились по Граму. Интерпретация результата.		10
Всего			100

Примечание: Ошибки при окрашивани по методу Грама, их значение и избежание повторных ошибок

1. 
   При приготовлении мазка взятие большого колличества культуры микроорганизмов приводит к не качественному их окрашиванию.
   

Основным дифференцирующим веществом при окрашивание по методу Грама является 96⁰этиловый спирт. Если недодержать спирт, то грампотрицательные бактерии не обесцветятся и останутся фиолетовыми.Если передержать, то грамположительные бактерии потеряют фиолетовое окрашивание, в итоге при окрашивании фуксином могут стать красного цвета. Поэтому при работе со спиртом нужно учитывать время