Tibbiyot institutlаri tаlаbаlаri uchun o‘quv аdаbiyoti r. G‘. Sultоnоv, N. M. Хоlmuhаmmеdоvа, sh. F. Karimova, U. L. Sultonho‘jaev biоkimyodаn

3. Elektroforegrammalarni turg‘unlantirish va bo‘yash. Elektoroforezdan
so‘ng qog‘oz tasmaning uchi kesib tashlanadi va ularning gorizontal holatda, bir
tekisda yog‘och ramkalarga tortiladi-da 100-150°C dagi quritgich shkafiga 20
daqiqaga oqsillarning turg‘unligi oshishi uchun qo‘yiladi.
Quritilgan elektroforegrammalar bo‘yoq bilan
to‘ldirilgan emallangan
kyuvetalarning tubiga yoyiq holda joylashtirilib, 30 daqiqa davomida bo‘yaladi.
So‘ngra bo‘yoq ishlatish uchun boshqa idishga olinadi; elektrofoegrammalar 3-4
marta 2 % li sirka kislota eritmasi bilan 5-10 daqiqa davomida yuviladi. Oqsildan holi
bo‘lgan qog‘oz qismlari rangsizlanadi. Elektroforgrammalarning bo‘yalgan
mahsulotlarini qog‘ozga yanada o‘rnashishi uchun 2 daqiqa 2 % li natriy atsetat
eritmasiga solinadi. Shundan so‘ng elektroforengrammalar havo tortgich ostida,
qorong‘ilikda, xona haroratida quritiladi.

---

170
4. Ayrim oqsil fraksiyalarning nisbatini aniqlash. Elektroforegrammalarda
hosil bo‘lgan 5 ta bo‘yalgan yo‘llar alohida bo‘laklarga bo‘linadi, har qaysi 3-5 mm li
mayda bo‘lakchalarga qirqiladi va shu onda alohida tartiblangan probirkalarga
solinadi: albuminlar, alfa
1
, alfa
2
, betta, gammaglobulinlar va nazorat probirkasi
qog‘oz tasmaning bo‘yalmagan qismi 3-10 mm qilb maydalanib solinadi.
Oqsillar bilan bog‘langan bo‘yoqlarni ajratish uchun har qaysi probirkaga,
jumladan nazorat probirkasiga 0,01M natriy gidroksid eritmasidan 3 ml dan,
albuminli probirkaga esa 9 ml dan solinadi. Probirkadagi eritmalar aralshtiriladi va
bo‘yoqlarni oqsillardan ajratish uchun 30 daqiq qoldiriladi. Ishqor eritmasi FEK ning
yashil nur filtri (500-560 nm to‘lqin uzunligidagi) da 5 mm li kyuvetada nazorat
uchun olingan eritma qarshisida ko‘riladi. Agar (-500 nm) 2 – nur filtrli
fotokolorimetrdan foydalinsa har qaysi oqsil fraksiyasi va nazorat probirkasining nur
o‘tkazish koefisienti topiladi. Jadvaldan E- optik zichllik aniqlanadi. Etajr. – Etek. =
E. (“Fermentlar” ga qarang).