Учебное пособие для студентов 1-2 курсов лечебного, педиатрического, стоматологического факультетов Новосибирск 2011 Под редакцией профессора В. И. Шарапова

Лабораторная работа №2
Определение активности щелочной фосфатазы слюны...............................................................................................стр16
Лабораторная работа №3
Определение трансаминазной активности слюны......................................................................................................стр17
Лабораторная работа №4
Определение кальция в слюне титрометрическим методом с применением мурексида...................................стр18
ПРАВИЛА РАБОТЫ НА КФК-2

1.Калориметр включить в сеть за 15 мин. до начала измерений. Во время прогрева кюветное отделение должно быть открыто (при этом шторка перед фотоприемниками перекрывает световой пучек).

2. Установить необходимый светофильтр. При переключении светофильтров ручка «чувствительность» должна находится в положении «1» (красный светофильтр 670- «1», зеленый светофильтр 540- «1»), а ручка «установка 100 Грубо» в крайнем левом положении (это предохраняет прибор от перегрузки и порчи).
3. В световой поток поместить кювету с контрольным раствором по отношению к которому производят измерения.
4. Во вторую ячейку кюветодержателя поместить кювету с исследуемым раствором.
5. Закрыть крышку кюветного отделения.
6. Ручка ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ и УСТАНОВКА 100 вначале ГРУБО, затем ТОЧНО установить отсчет 100 по шкале калориметра.
7. Поворотом ручки под кюветным отделением до упора, ввести в световой поток кювету с исследуемым раствором.
8. Снять отсчет по шкале Д в единицах оптической плотности.


ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №1
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА СЫВОРОТКИ КРОВИ БИУРЕТОВЫМ МЕТОДОМ

Значение метода:

1) Нормопротеинемия 60-80г/л.
2) Гипопротеинемия:
1. Относительная (гидремия при нагрузке водой, водных отравлениях).
2. Абсолютная вследствие:
а) подавления синтеза белка (альбуминов при нарушении функции гепатоцитов, глобулинов при всех формах недостаточности РЭС).
б) потери белков преимущественно альбуминов (нарушение функции желудочно-кишечного тракта, нарушение почечного фильтра, кровоизлияния, увеличение проницаемости капилляров - отеки, обширные экссудаты, обширные выпоты в серозные полости);
в) усиление расхода альбуминов при голодании.
3) Гиперпротеинемия:
1. Относительная (обезвоживание)
2. Абсолютная вследствии усиления синтеза глобулинов (злокачественные новообразования, ряд форм лейкозов, инфекционное или токсическое раздражение РЭС).


Принцип метода: Биуретовый метод основан на образовании в щелочной среде окрашенного комплексного соединения меди с пептидными группами белка. Характерная фиолетовая окраска раствора пропорциональна числу пептидных групп.
Ход определения: К 0,1 мл сыворотки крови прибавляют 5 мл биуретового реактива (состав : СuSO4, 5H2O, NaOH, сегнетова соль). Смешивают, избегая образования пены. В контрольную
пробу к 0,1мл физ.раствора добавляют 5мл биуретового реактива. Через 30 мин измеряют оптическую плотность опытной и контрольной проб на фотоэлектроколориметре. Зеленый светофильтр в кювете толщиной 1см против контроля. Окраска стабильная в течении 1 часа.
Расчет: Концентрацию белка в сыворотке крови определяют по калибровочному графику.