Universum: химия и биология

Материалы и методы исследования 
Объект исследования 
Объектом исследований являлись местные 
штаммы азотфиксирующих и солеустойчивых циано-
бактерий N. calcicola 25 выделенные из засоленных и 
загрязненных пестицидами сероземных почв Кашка-
дарьинской области Узбекистана [1, 7]. 
Культивирование цианобактерий 
Цианобактерии культивировали на минеральной 
питательной среде ВG -11
0
. Жидкую среду ВG -11
0
наливали в стеклянные колбы (300 – 500 мл) таким об-
разом, чтобы занимаемый объем был не более 1/3 – 1/4 
объема колбы. Сосуды с засеянным материалом 
помещали на свет с люминесцентными лампами, при 
2500 -3000 лк, температуре 28
о
С и концентрации СО
2
– 2%. 
Определение сухого веса (влажности)
биомассы клеток цианобактерий и выделение бел-
кового экстракта культуры 
Определение сухого веса биомассы клеток прово-
дилось согласно методике [2]. Стеклянные бюксы по-
мещались в сушильный шкаф и сушились в течение 2 ч 
при температуре 110С. Затем бюксы вынимали пин-
цетом из сушильного шкафа и переносили в эксикатор 
с безводным CaCl
2
. Через 1 ч бюксы взвешивали с точ-
ностью до 0,1 мг. Высушивание и взвешивание повто-
ряли с соблюдением указанной последовательности 
операций, пока масса не достигала постоянного значе-
ния, то есть колебания в ее определениях не превы-
шали ± 0,1 мг. Полученную таким образом сухую 
биомассу цианобактерий хорошо измельчали в ступке 
с добавлением стеклянной крошки в соотношении 1:3. 
После механического измельчения сухой биомассы 
водорослей, для получения белкового экстракта в по-
рошок цианобактерий добавляли Трис-HCl буфер (рН-
7,6) содержащий 0,15 М NaCl и 0,01 М фенилметан 
сульфонил фторида (ФМСФ) в объеме 1: 3 (V/V) и 
непрерывно экстрагировали в течение 4 часов.