9-laboratoriya ishi solod tarkibidagi amilolitik ferment faolligini aniqlash Ishning maqsadi


Download 244.33 Kb.
Pdf ko'rish
bet2/4
Sana28.03.2023
Hajmi244.33 Kb.
#1303064
1   2   3   4
Bog'liq
9-laboratoriya

Ishni bajarish tartibi

Kalibrovkali egri chiziq tuzish

Kalibrovkali grafik tuzish uchun 0,1 % li eruvchan kraxmal eritmasi ishlatiladi 
kraxmalni birlamchi eritmasini quyidagi sxema bo’yicha kamaytirib tayyorlanadi. 
- eritma № 1: 2 ml (tekshirilayotgan eritma, 1 mg/ml); 
- eritma № 2: 9 ml (tekshirilayotgan eritma) + 1 mlsuv; 
- eritma № 3: 8 ml (eritma № 2) + 1 mlsuv; 
- eritma № 4: 7 ml (eritma № 3) + 1 mlsuv; 
- eritma № 5: 6 ml (eritma № 4) + 1 mlsuv; 
- eritma № 6: 5 ml (eritma № 5) + 1 mlsuv; 
- eritma № 7: 4 ml (eritma № 6) + 1 mlsuv; 
- eritma № 8: 3 ml (eritma № 7) + 1 mlsuv; 
- eritma № 9: 2 ml (eritma № 8) + 2 mlsuv; 
- eritma № 10: 2 ml (eritma № 9) +2 mlsuv. 
Probirkalar ichidagini aralashtiriladi(probirkalarda 2 ml dan eritma qolishi kerak). 
Har bir probirkaga 2 ml dan yodni ishchi eritmasidan qo’shamiz. (0,1 n HCl da 
tayyorlanadi). Probirka ichidagini aralashtirib, hosil bo’lgan kraxmal yod kompleksini 
optik zichligini fotoelektrokolorimetrda, α = 670 nm o’lchaymiz. 


O’lchashni och rangli eritmadan boshlaymiz.Kontrol namuna uchun shu reaktivlar 
ishlatiladi. Faqat kraxmal o’rniga distirlangan suv ishlatiladi. Hosil bo’lgan natijalar 
quyidagi jadvalga yoziladi va kalibrovkali egri chiziq tuziladi. 
Ko’rsatkichlar 
Natijasi 
Kraxmal,mg/ml 
Optik zichlik 
Solod fermentlarini ajratib olish. α – amilazani solod ferment kompleksining asosiy 
eritmasidan α – amilazani inaktivlashtirish (aktivligini yo’qotish) bo’yicha ajratiladi. 100 
ml hajmdagi kolbaga 20 ml solodning asosiy eritmasidan solib, 15 minut davomida 70 
0

haroratda qizdiramiz. α – amilaza shu haroratda inoaktivlashadi. Qizdirilgan eritmani 
sovutamiz va α – amilazani aktivligini aniqlash uchun ishlatamiz. α – amilazani 
aktivligini pH 5,5....5,8 bo’ladi, sovutilgandan keyin eriitmaga 4 ml pH 5,6 fosfatli bufer 
qo’shiladi. 
α – amilaza solod sutidan (solodovaya vo`tyajka) α – amilazani nordon muhitda 
inaktivlashtirish yo’li bilan ajratiladi. 100 ml hajmli kolbaga 20 ml solodni asosiy 
eritmasi solib, muzli hammomda 10 minut davomida ushlab unga 1 ml 0,1 n li HCl 
eritmasini qo’shamiz. Hosil bo’lgan eritmani muz hammomida 15 minut qoldiramiz va 
unga 3 ml pH 6,0 fosfatli bufer qo’shamiz (α – amilaza uchun optimal pH) 

Download 244.33 Kb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling