Академии наук т. П. Побежимова, А. В. Колесниченко, О. И. Грабельных

 
Рис. 5 Схема выделения (А) и очистки на градиенте перколла 
(Б) 
митохондрий проростков растений (по 
Войников, 1991) 

---

14 
необходимо 
внимательно 
ознакомиться 
с 
предлагаемыми 
инструкциями по методической части и по работе с приборами 
(инструкции по работе с приборами приведены в конце 
методического пособия). 
Гомогенизация. Процесс гомогенизации должен быть 
достаточно быстрым. Для разрушения растительной ткани можно 
применить 
несколько 
способов: 
измельчение 
в 
ступке, 
гомогенизация в блендере при умеренных скоростях вращения, 
разрушение растительных тканей с помощью пресса, использование 
гомогенизатора Поттера. Применение пресса для разрушения 
тканей этиолированных побегов проростков растений значительно 
сокращает время проведения гомогенизации и позволяет получить 
интактные митохондрии (Андреева, 1968; Соттоказа, 1979; 
Войников, 1980; Douce, 1985).
Особые требования предъявляются к составу среды 
гомогенизации. Для предотвращения повреждения мембран 
митохондрий 
и 
создания 
изотонических 
условий 
среда 
гомогенизации должна включать осмотик (чаще всего сахарозу или 
же маннит и сорбит). Сахароза не только создает определенную 
тоничность среды, но и способствует лучшей сохранности 
митохондрий, стабилизируя митохондриальные мембраны. С целью 
нейтрализации гомогената, закисляемого органическими кислотами, 
выходящими из вакуоли, используется буферная система. 
Наиболее часто используется два типа буфера – фосфатный и трис 
(триоксиметиламинометан), имеющих слабощелочной рН. В 
подборе концентрации буфера и рН среды важно установить, 
насколько сильно происходит смещение рН при измельчении 
опытной ткани (наиболее благоприятна для митохондрий среда, 
близкая к нейтральной). Добавляемые в среду гомогенизации