Антагонизм в мире микробов Антагонизм. Основные понятия

Некоторые примеры антагонизма
! отношения молочнокислых и гнилостных бактерий; молочнокислые бактерии подавляют рост грамотрицательных энтеробактерий различных видов, в т. ч. условнопатогенных, населяющих кишечник человека и животных
! активное подавление синегнойной палочкой чумной палочки
! угнетение роста дрожжей актиномицетами, продуцирующих нистатин
! угнетение бацилл сибирской язвы, коринебактерий дифтерии и других гемолитическими стрептококками
! споры головни зерновых культур, попадая в почву, подвергаются воздействию почвенных антагонистов и быстро теряют жизнеспособность
! бактериофаги, относящиеся к вирусам, обладают способностью растворять бактерии
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
Методы определения антагонистической активности основаны на выявлении зон подавления роста чувствительных бактерий при смешанном культивировании на плотных средах или на определении соотношения количества колоний антагониста и индикаторных бактерий, выросших после высева смеси в жидкой среде.
На плотных средах применяют метод штрихового посева и метод макроколоний.
Метод штрихового посева, при котором заведомо известный или предполагаемый антагонист засевается полосой по диаметру чашки с питательным агаром по его поверхности или в специально вырезанную «канавку», в которую помещают взвесь бактерий испытуемого штамма в полуостывшем агаре. Микробы, проверяемые по чувствительности к антагонистическому действию, засеваются перпендикулярными штрихами, как показано на рис. 1. Степень чувствительности в этом случае определяется по величине расстояния от центральной полосы культуры антагониста до начала выраженного роста бактерий, засеянных перпендикулярными штрихами.
Метод макроколоний используют обычно при испытании бактериоциногенной (антагонистической) активности нескольких штаммов бактерий, проверяемой одним индикаторным штаммом, к-рый засевается вторым слоем в смеси с полужидким агаром после предварительной обработки хлороформом бактерий, развившихся в виде макроколоний (рис. 2).
Определение антагонистической активности бактерий в жидкой среде осуществляется путем посева двух изучаемых видов в определенных количественных соотношениях с последующим высевом на плотную среду совместно инкубируемых бактерий через определенные интервалы. Высев производят с таким расчетом, чтобы на чашке выросли изолированные колонии, доступные количественному учету. По отношению числа выросших колоний тест-микроба (индикаторной культуры) к числу колоний микроба-антагониста определяют индекс антагонистической активности.
Антагонистическую активность можно определять по способности задерживать рост индикаторных бактерий культуральной жидкостью, в которую выделяются бактериоцины в процессе роста микроба-антагониста. Для этой цели используют метод «лунок». При соблюдении стерильности на пластинке агара в чашке Петри металлическими или стеклянными цилиндриками определенного диаметра (6-8 мм) выбирается столбик агара и удаляется. На его месте образуется углубление - лунка, в которую помещается испытуемая на антагонистическую активность культуральная жидкость. На одной чашке можно разместить 6-8 лунок. Перед внесением в лунки испытуемого субстрата поверхность агара орошается суспензией индикаторных бактерий, дающих равномерный газон (рост) при отсутствии антагонистического действия или рост на различных расстояниях от края лунки с культуральной жидкостью. Внося в лунки различные разведения исходной жидкости, можно определить титр антагонистической активности в условных единицах.