Elektron mikroskopiya usullarini tibbiyotda ahamiyati

Polarizatsiya qiluvchi mikroskop
Polarizatsiya qiluvchi mikroskop o'rganish ob'ektlarini o'zaro perpendikulyar tekisliklarda qutblangan ikkita nur hosil qilgan yorug'likda, ya'ni qutblangan yorug'likda o'rganish imkonini beradi. Buning uchun yorug'lik manbai va preparat orasiga mikroskopga joylashtiriladigan plyonkali polaroidlar yoki Nikol prizmalaridan foydalaniladi. Xususiyatlari bir hil bo'lmagan hujayralar va to'qimalarning turli tarkibiy qismlari orqali yorug'lik nurlarining o'tishi (yoki aks etishi) paytida qutblanish o'zgaradi. Izotrop deb ataladigan tuzilmalarda qutblangan yorug'likning tarqalish tezligi qutblanish tekisligiga bog'liq emas, anizotropik tuzilmalarda uning tarqalish tezligi normada bo'ylama yoki vanna nuri bo'ylab yorug'lik yo'nalishiga qarab o'zgaradi.
Guruch. 2a). Ob'ektning ko'ndalang o'qining polarizatsiyasida miyokardning mikropreparatsiyasi.
Agar struktura bo'ylab yorug'likning sinishi ko'rsatkichi ko'ndalang yo'nalishdagidan kattaroq bo'lsa, ijobiy ikki sinishi, teskari munosabatlar bilan - salbiy ikki sinishi sodir bo'ladi. Ko'pgina biologik ob'ektlar qat'iy molekulyar yo'nalishga ega, anizotrop va yorug'likning musbat ikki tomonlama sinishiga ega. Miofibrillalar, kirpiksimon epiteliyning kirpiklari, neyrofibrillalar, kollagen tolalar va boshqalar shunday xususiyatlarga ega. Polarizatsiya qiluvchi mikroskopiya - gistologik tadqiqot usullaridan biri bo'lib, mikrobiologik diagnostika usuli bo'lib, sitologik tadqiqotlar va boshqalarda qo'llaniladi. Shu bilan birga, bo'yalgan va bo'yalmagan va fiksatsiyalanmagan, to'qima kesmalarining mahalliy preparatlari deb ataladigan, mumkin. qutblangan nurda tekshiriladi.
Guruch. 2b). O'tkir koronar etishmovchilikdan to'satdan o'lim bilan polarizatsiyalangan nurda miokardning mikropreparatsiyasi - kardiyomiyositlarning xarakterli ko'ndalang chizig'i bo'lmagan joylar aniqlanadi; Ch400.
Floresan mikroskop
Floresan mikroskopining prinsipi va qo'llanilishi
(I) Floresans mikroskopining printsipi va tarkibi: floresans mikroskopi yuqori nurli rentabellikga ega nuqta nur manbai bo'lib, filtrlangan rangli tizim yorug'likning ma'lum bir to'lqin uzunligi (masalan, ultrabinafsha yorug'lik 3650 yoki binafsha Blue 4200 kabi) chiqaradi, Namunadagi lyuminestsent material turli xil ranglarning floresansini chiqaradi, keyin ob'ektiv optikasi va ko'zoynak kengayishi orqali. Bunday holda, floresan juda zaif va sezgir bo'lsa-da, asosan hujayra tuzilishi va funksiyasi va kuchli kontrastdagi kimyoviy tarkibni o'rganishda qo'llaniladi. Flüoresan mikroskopunun asosiy tarkibi umumiy optik mikroskopdan va ba'zi aksessuarlardan (floresan yorug'lik manbai, ogohlantiruvchi filtri, er-xotin yorug'lik o'lchagich ayırıcı va blokirovka qiluvchi filtrdan) iborat. Floresanli yorug'lik manbai - ultra yuqori bosimli simob lampalaridan foydalanish (501,200 W), yorug'likning turli to'lqinlarini chiqarishi mumkin, lekin har bir lyuminestsent material yorug'lik to'lqinlani to'lqinlani hosil qilish uchun maksimal floresansga ega, shuning uchun (Odatda ultrabinafsha, binafsharang, ko'k va yashil qo'zg'alish filtrini) qo'shing, shuning uchun namunadagi ogohlantiruvchi nurning ma'lum bir to'lqin uzunligi va boshqa yorug'lik emirilishi. Har bir moddani engil nurlanish bilan rag'batlantirgandan so'ng, uzoq vaqt nurli to'lqin uzunligi bilan paydo bo'ladigan flüoresans juda qisqa vaqt ichida chiqariladi. Flüoresan, o'ziga xos xususiyatga ega bo'lib, odatda, flütansın o'ziga xos xususiyatiga rioya qilish uchun, filtri blokirovka qilish (yoki bostirish) maqsadga muvofiq bo'lishi kerak. Uning roli ikkita: birinchisi favqulodda floresans oldini olish va ko'zga zarar berish uchun, yorug'lik nurini absorbe qilish va blokirovka qilish, ikkinchisi esa yagona floresans rangini ko'rsatib, tanlangan va o'ziga xos floresans berish. Ikki filtri bir-biri bilan ishlatish uchun tanlanishi kerak.

Floresan mikroskoplari ikkita nur yo'liga bo'linadi:

1. Etkazish floresan mikroskopi: eksitatsiya nurlari manbai konstruktsiyadan namunali material orqali flüoresansni qo'zg'atadi. Qorong'i ko'rish kollektorida keng tarqalgan bo'lib foydalaniladigan umumiy optik kollektor sifatida ham foydalanilishi mumkin, reflektorni namunadagi qo'zg'alish chirog'i va yonboshi o'qqa tutilishi uchun sozlash mumkin. Bu qadimgi flüoresan mikroskopdir. Ushbu uslubning afzalligi shundaki, fosforning makroyu past bo'lganida kuchliroq bo'lishiga qaramasdan, bu dezavantaj shundaki, flüoresansning kattalashishi kamayadi. Shuning uchun katta namunali materialni kuzatish yaxshiroqdir.
2. Bu zamonaviy sharoitda ishlab chiqilgan, bu namunaning sirtini tortib olishdan farqli yangi flüoresans mikroskopi turi, ya'ni yorug'lik kontsentratori va yig'uvchi floresans linzalari kabi bir xil maqsadni qo'llashdir. Ikki rangli nurli ajratgich optik yo'lga qo'shiladi, bu 45 yorug'lik uranidir. Burchakka qo'zg'atuvchi yorug'lik obyektiv linzaga kirib, namunadagi namunadir, misol tomonidan ishlab chiqarilgan flüoresansni, shuningdek, linzalarning yuzasini, yorug'lik nurlarining qopqoq oynasini bir vaqtning o'zida ob'ektiv maqsadga aylantirish uchun to'plangan Linzalar, ikkita nurli yoritgichga ajraladi, shuning uchun eksitatsiya chirog'i va floresan ajratish, qoldiq eksitatsiya chiroqlari filtrning emishi bilan bloklanadi. Agar turli xil ogohlantirgich filtrlari / ikkita rangli nurni ajratuvchi / blokli filtr kombinatsiyasi ishlatilsa, turli xil floresans reaktsiya mahsulotlariga bo'lgan ehtiyoj qondirilishi mumkin. Ushbu turdagi floresan mikroskopning afzalliklari shundaki, bu yorug'lik hatto yorug'lik, tasvir ham aniq, kattalashish qanchalik katta bo'lsa, flüoresans kuchliroq bo'ladi.