Elektron mikroskopiya usullarini tibbiyotda ahamiyati

Floresan mikroskop(ML-2, ML-3) lyuminestsent ob'ektlarni o'rganish uchun mo'ljallangan, bunga ikkinchisini UV nurlanishi bilan yoritish orqali erishiladi. Preparatlarni ko'rinadigan qo'zg'atilgan floresansi (ya'ni, aks ettirilgan yorug'lik) nurida kuzatish yoki suratga olish orqali gistokimyo, gistologiya, mikrobiologiya va immunologik tadqiqotlarda qo'llaniladigan sinov namunasining tuzilishini aniqlash mumkin. To'g'ridan-to'g'ri lyuminestsent bo'yoqlar bilan bo'yash yorug'lik mikroskopida ko'rish qiyin bo'lgan hujayra tuzilmalarini aniqroq aniqlash imkonini beradi.
Rentgen mikroskopi rentgen nurlaridagi ob'ektlarni o'rganish uchun ishlatiladi, shuning uchun bunday mikroskoplar mikrofokusli rentgen nurlanish manbai, rentgen tasvirini ko'rinadiganga o'zgartirgich - osiloskop trubkasida ko'rinadigan tasvirni hosil qiluvchi elektron-optik konvertor bilan jihozlangan. yoki fotografik plyonkada. Rentgen mikroskoplari 0,1 mkm gacha bo'lgan chiziqli ruxsatga ega, bu sizga kashf qilish imkonini beradi. nozik tuzilmalar tirik modda.
Elektron mikroskop yorug'lik mikroskoplarida farqlanmaydigan o'ta nozik tuzilmalarni o'rganish uchun mo'ljallangan. Yorug'likdan farqli o'laroq, elektron mikroskopda o'lchamlari nafaqat diffraktsiya hodisalari, balki elektron linzalarning turli xil aberratsiyalari bilan ham aniqlanadi, ularni tuzatish deyarli mumkin emas. Mikroskopning maqsadi asosan elektron nurlarning kichik teshiklaridan foydalanish tufayli diafragma bilan amalga oshiriladi.
Mikroskopning asosiy komponentlari
M.ning koʻp turlarida (teskari boʻlganlar bundan mustasno, pastga qarang) linzalarni biriktirish moslamasi preparat oʻrnatiladigan obʼyekt stolining tepasida, stol ostiga esa kondensator oʻrnatilgan. Har qanday M. trubkasi (naycha) boʻlib, unga okulyar oʻrnatiladi; Qoʻpol va nozik fokuslash mexanizmlari (preparatning, obʼyektivning va okulyarning nisbiy holatini oʻzgartirish orqali amalga oshiriladi) ham M.ning majburiy aksessuari hisoblanadi. Bu tugunlarning barchasi tripod yoki M korpusga o'rnatiladi.
Amaldagi kondensatorning turi kuzatish usulini tanlashga bog'liq. Yorqin maydonli kondanserlar va fazali yoki interferentsiya kontrasti usuli bilan kuzatish uchun kondensatorlar bir-biridan juda farq qiladigan ikki yoki uch linzali tizimlardir. Yorqin maydonli kondensatorlar uchun raqamli diafragma 1,4 ga yetishi mumkin; ular diafragma ìrísí diafragmasini o'z ichiga oladi, bu ba'zan preparatning qiyshiq yoritilishini olish uchun yon tomonga siljishi mumkin. Fazali kontrastli kondanserlar halqali diafragmalar bilan jihozlangan. Linzalar va nometalllarning murakkab tizimlari qorong'u maydon kondensatorlaridir. Alohida guruh epikondenserlardan iborat bo'lib, ular aks ettirilgan yorug'likda qorong'u maydon usuli bilan kuzatishda zarur bo'ladi, halqali linzalar tizimi va linzalar atrofida o'rnatilgan nometall. UV mikroskopida ultrabinafsha nurlar uchun shaffof bo'lgan maxsus oyna-linzalar va linzali kondensatorlar qo'llaniladi.
Ko'pgina zamonaviy mikroskoplardagi linzalar bir-birini almashtiradi va kuzatishning o'ziga xos shartlariga qarab tanlanadi. Ko'pincha bir nechta linzalar bir aylanadigan (aylanuvchi deb ataladigan) boshga o'rnatiladi; bu holda linzalarni o'zgartirish oddiygina boshni burish orqali amalga oshiriladi. Xromatik aberatsiyani tuzatish darajasiga ko'ra (qarang Xromatik aberatsiya ) mikro linzalar Akromatlar va apochromatlar bo'linadi (qarang Akromat). Birinchisi dizayndagi eng oddiylari; ulardagi xromatik aberatsiya faqat ikkita to'lqin uzunligi uchun tuzatiladi va ob'ekt oq yorug'lik bilan yoritilganda tasvir biroz rangli bo'lib qoladi. Apokromatlarda bu aberratsiya uchta to'lqin uzunligi uchun tuzatiladi va ular rangsiz tasvirlarni beradi. Axromatlar va apoxromatlarning tasvir tekisligi biroz qiyshiq (qarang Maydon egriligi ). Koʻzning akkomodatsiyasi va M.ni qayta fokuslash yordamida butun koʻrish maydonini koʻrish imkoniyati vizual kuzatishdagi bu kamchilikni qisman qoplaydi, lekin u mikrofotografiyaga katta taʼsir qiladi — tasvirning oʻta chekka qismlari xiralashgan. Shuning uchun qo'shimcha maydon egriligini tuzatishga ega mikroob'ektivlar keng qo'llaniladi - planaxromatlar va planapoxromatlar. An'anaviy linzalar bilan birgalikda maxsus proyeksiya tizimlari qo'llaniladi - ko'zoynaklar o'rniga kiritilgan va tasvir yuzasining egriligini to'g'rilaydigan gomallar (ular vizual kuzatish uchun yaroqsiz).
Bundan tashqari, mikroob'ektivlar farqlanadi: a) spektral xarakteristikalar bo'yicha - spektrning ko'rinadigan hududi uchun linzalar uchun va UV va IQ mikroskoplari uchun (linzalar yoki oyna-linzalar); b) ular uchun mo'ljallangan quvur uzunligi bo'ylab (M. dizayniga qarab), - linzalar uchun 160 mm trubka uchun, 190 mm trubka uchun va shunday deb ataladi. "naychaning uzunligi - cheksizlik" (ikkinchisi "cheksizlikda" tasvirni yaratadi va tasvirni okulyarning fokus tekisligiga aylantiruvchi qo'shimcha - naycha deb ataladigan ob'ektiv bilan birgalikda ishlatiladi); c) linzalar va preparat o'rtasidagi muhitga ko'ra - quruq va immersion ichiga; d) kuzatish usuliga ko'ra - oddiy, faza-kontrast, interferentsiya va boshqalarga; e) preparatlar turlari bo'yicha - qoplamali va qoplamasiz preparatlar uchun. Alohida turdagi epi linzalar (an'anaviy linzalarning epikondenser bilan birikmasi). Linzalarning xilma-xilligi mikroskopik kuzatish usullarining xilma-xilligi va mikroskoplarning dizayni, shuningdek, turli xil ish sharoitlarida aberatsiyalarni tuzatish talablarining farqlari bilan bog'liq. Shuning uchun har bir linzadan faqat u yaratilgan sharoitlarda foydalanish mumkin. Masalan, uzunligi 190 mm boʻlgan M.da 160 mm trubka uchun moʻljallangan linzadan foydalanish mumkin emas; Qopqoqli linzalar bilan slipsiz slaydlarni kuzatish mumkin emas. Me'yordan har qanday og'ishlarga juda sezgir bo'lgan katta diafragma (A > 0,6) quruq linzalari bilan ishlashda dizayn shartlariga rioya qilish ayniqsa muhimdir. Ushbu maqsadlar bilan ishlashda qoplamaning qalinligi 0,17 mm ga teng bo'lishi kerak. Suvga cho'mdiruvchi linzadan faqat u mo'ljallangan immersion bilan foydalanish mumkin.
Amaldagi ko'zoynak turi bu usul kuzatish ob'ektiv M. tanlash bilan belgilanadi kichik va o'rta kattalashtirish akromatlar bilan, Gyuygens okulyarlar ishlatiladi, apochromatlar va yuqori kattalashtirish akromatlar bilan - deb atalmish. kompensatsiya ko'zoynaklari shunday hisoblanganki, ularning qoldiq xromatik aberatsiyasi linzalarnikidan farq qiladi, bu esa tasvir sifatini yaxshilaydi. Bundan tashqari, tasvirni ekranga yoki fotografik plitaga proyeksiyalovchi maxsus fotoko‘z va proyeksiyali okulyarlar mavjud (bu yuqorida tilga olingan gomallarni ham o‘z ichiga oladi). Alohida guruh UV nurlari uchun shaffof bo'lgan kvarts ko'zoynaklaridan iborat.
M.ning turli aksessuarlari nazorat sharoitlarini yaxshilash va tadqiqot imkoniyatlarini kengaytirish imkonini beradi. Har xil turdagi yoritgichlar eng yaxshi yorug'lik sharoitlarini yaratish uchun mo'ljallangan; ob'ektlar hajmini o'lchash uchun ko'z mikrometrlari (qarang Ko'z mikrometri ) ishlatiladi; binokulyar naychalar preparatni ikkala ko'z bilan bir vaqtning o'zida kuzatish imkonini beradi; mikrofotosurat uchun mikrofoto qo'shimchalari va mikrofoto sozlamalari ishlatiladi; chizma qurilmalari tasvirlarni eskiz qilish imkonini beradi. Miqdoriy tadqiqotlar uchun maxsus qurilmalar qo'llaniladi (masalan, mikrospektrofotometrik nozullar).
M.ning konstruksiyasi, jihozlari va asosiy boʻlinmalarining xarakteristikalari qoʻllanish sohasi, muammolar doirasi va u moʻljallangan obʼyektlarning tabiati bilan yoki usul (usullar) bilan belgilanadi. u ishlab chiqilgan kuzatuv yoki ikkalasi tomonidan. Bularning barchasi ob'ektlarning qat'iy belgilangan sinflarini (yoki hatto ularning ba'zi o'ziga xos xususiyatlarini) yuqori aniqlik bilan o'rganish imkonini beradigan har xil turdagi ixtisoslashtirilgan ko'rsatkichlarni yaratishga olib keldi. Boshqa tomondan, deb atalmish bor. universal M., bu bilan siz mumkin turli usullar turli ob'ektlarni kuzatish.
Biologik M. keng tarqalgan. Ular botanika, gistologik, sitologik, mikrobiologik va tibbiy tadqiqotlar, shuningdek, biologiya bilan bevosita bogʻliq boʻlmagan sohalarda — kimyo, fizika va boshqalarda shaffof obʼyektlarni kuzatishda qoʻllaniladi.Biologik M.ning bir-biridan farq qiluvchi koʻplab modellari mavjud. ularning konstruktiv dizayni va o'rganilayotgan ob'ektlar doirasini sezilarli darajada kengaytiradigan aksessuarlarda. Ushbu aksessuarlarga quyidagilar kiradi: uzatiladigan va aks ettirilgan yorug'lik uchun almashtiriladigan yoritgichlar; yorqin va qorong'i maydonlar usullari bo'yicha ishlash uchun almashtiriladigan kondensatorlar; fazali kontrastli qurilmalar; ko'z mikrometrlari; mikrofoto qo'shimchalar; oddiy (ixtisoslashtirilmagan) M.da lyuminestsent va polarizatsiya qiluvchi mikroskopiya texnikasidan foydalanish imkonini beruvchi yorugʻlik filtrlari va qutblanish moslamalari toʻplami. Biologik M. uchun yordamchi uskunalarda preparatlar tayyorlash va ular bilan, jumladan bevosita kuzatish jarayonida turli operatsiyalarni bajarish uchun moʻljallangan mikroskopik texnologiya vositalari (qarang Mikroskopik texnologiya) muhim rol oʻynaydi (qarang: Mikromanipulyator, Mikrotom).
Biologik tadqiqot mikroskoplari turli xil sharoit va kuzatish usullari va namunalar turlari uchun almashtiriladigan linzalar to'plami, shu jumladan aks ettirilgan yorug'lik va ko'pincha fazali kontrastli linzalar uchun epi-maqsadlar bilan jihozlangan. Maqsadlar to'plami vizual kuzatish va mikrofotografiya uchun ko'zoynaklar to'plamiga mos keladi. Odatda bunday M.da ikki koʻz bilan kuzatish uchun durbin naychalari boʻladi.
Biologiyada umumiy maqsadli M.dan tashqari kuzatish usuliga ixtisoslashgan turli M.lar ham keng qoʻllaniladi (quyida q.).
Invertli mikroskoplar ulardagi linzalar kuzatilayotgan ob'ekt ostida, kondensator esa tepada joylashganligi bilan ajralib turadi. Ob'ektiv orqali yuqoridan pastgacha o'tadigan nurlarning yo'nalishi ko'zgular tizimi tomonidan o'zgartiriladi va ular odatdagidek pastdan yuqoriga qarab kuzatuvchining ko'ziga tushadi ( guruch. sakkiz). Bu tipdagi M. oddiy M.ning obʼyekt jadvallariga joylashtirish qiyin yoki imkonsiz boʻlgan yirik hajmli narsalarni oʻrganish uchun moʻljallangan. Biologiyada bunday M.lar yordamida oziq muhitdagi toʻqima kulturalari oʻrganiladi, ular ma'lum bir haroratni saqlab turish uchun termostatik kameraga joylashtiriladi. Invert M. tadqiqot uchun ham qoʻllaniladi kimyoviy reaksiyalar, materiallarning erish nuqtalarini aniqlash va boshqa hollarda, kuzatilgan jarayonlarni amalga oshirish uchun katta hajmli yordamchi uskunalar kerak bo'lganda. Mikrofotografiya va mikrokino uchun teskari mikroskoplar mavjud maxsus qurilmalar va kameralar.
Invert mikroskopning sxemasi aks ettirilgan nurda turli sirtlarning tuzilmalarini kuzatish uchun ayniqsa qulaydir. Shuning uchun u ko'pchilik metallografik M.da qo'llaniladi. Ularda namuna (metall, qotishma yoki mineral bo'limi) sayqallangan yuzasi pastga qarab stolga o'rnatiladi va uning qolgan qismi ixtiyoriy shaklga ega bo'lishi mumkin va hech qanday talab qilmaydi. qayta ishlash. Metallografik M.lar ham mavjud boʻlib, ularda predmet pastdan joylashtirilib, maxsus plastinkaga mahkamlanadi; bunday o'lchagichlarda tugunlarning o'zaro joylashishi oddiy (teskari bo'lmagan) hisoblagichlar bilan bir xil bo'ladi.O'rganilayotgan sirt ko'pincha oldindan chizilgan bo'lib, uning strukturasi donalari bir-biridan keskin farqlanadi. Bu tipdagi M.da toʻgʻridan-toʻgʻri va qiya yoritilishi bilan yorqin maydon usuli, qorongʻu maydon usuli va qutblangan yorugʻlikda kuzatish mumkin. Yorqin maydonda ishlaganda, linzalar bir vaqtning o'zida kondensator bo'lib xizmat qiladi. Qorong'i maydonni yoritish uchun oynali parabolik epikondensatorlar qo'llaniladi. Maxsus yordamchi qurilmaning joriy etilishi metallografik M.da fazaviy kontrastni anʼanaviy linza bilan amalga oshirish imkonini beradi .
Lyuminestsent mikroskoplar o'zaro almashtiriladigan yorug'lik filtrlari to'plami bilan jihozlangan bo'lib, ularni tanlash orqali yoritgichning nurlanishida o'rganilayotgan muayyan ob'ektning lyuminestsensiyasini qo'zg'atuvchi spektrning bir qismini ajratib ko'rsatish mumkin. Ob'ektdan faqat luminesans nurini uzatuvchi yorug'lik filtri ham tanlangan. Ko'pgina ob'ektlarning porlashi UV nurlari yoki ko'rinadigan spektrning qisqa to'lqinli qismi tomonidan hayajonlanadi; shuning uchun lyuminestsent lampalardagi yorug'lik manbalari aynan shunday (va juda yorqin) nurlanishni beruvchi o'ta yuqori bosimli simob lampalardir (qarang: Gazli yorug'lik manbalari). Lyuminestsent lampalarning maxsus modellariga qo'shimcha ravishda an'anaviy lampalar bilan birgalikda ishlatiladigan lyuminestsent qurilmalar mavjud; ular tarkibida simob chiroqli yoritgich, yorug'lik filtrlari to'plami va boshqalar mavjud. yuqoridan preparatlarni yoritish uchun shaffof bo'lmagan yoritgich.
Ultraviyole va infraqizil mikroskoplar spektrning ko'zga ko'rinmas hududlarida tadqiqot qilish uchun ishlatiladi. Ularning asosiy optik sxemalari an'anaviy MMlarnikiga o'xshaydi.UV va IQ mintaqalaridagi aberatsiyalarni tuzatishda katta qiyinchilik tufayli, bunday MMlarda kondensator va ob'ektiv ko'pincha xromatik aberatsiya sezilarli darajada kamaygan yoki umuman yo'q bo'lgan oyna-linza tizimlarini ifodalaydi. . Linzalar UV (kvars, ftorit) yoki IR (kremniy, germaniy, ftorit, litiy ftorid) nurlanishiga shaffof bo'lgan materiallardan tayyorlanadi. Ultrabinafsha va infraqizil M.lar koʻrinmas tasvir oʻrnatilgan kameralar bilan taʼminlangan; Oddiy (koʻrinadigan) yorugʻlikdagi okulyar orqali vizual kuzatish, iloji boʻlsa, faqat M.ning koʻrish sohasida obʼyektni dastlabki fokuslash va yoʻnaltirish uchun xizmat qiladi, qoida tariqasida, bu M.larda koʻrinmas nurni oʻzgartiruvchi elektron-optik konvertorlar mavjud. tasvirni ko'rinadiganga aylantiring.
Polarizatsiya o'lchagichlar ob'ektdan o'tgan yoki undan aks ettirilgan yorug'lik qutblanishidagi o'zgarishlarni (optik kompensatorlar yordamida) o'rganish uchun mo'ljallangan, bu optik faol ob'ektlarning turli xususiyatlarini miqdoriy yoki yarim miqdoriy aniqlash uchun imkoniyatlar ochadi. Bunday M.ning tugunlari, odatda, aniq oʻlchashni osonlashtiradigan tarzda tayyorlanadi: okulyar shpal, mikrometr shkalasi yoki toʻr bilan taʼminlanadi; aylanuvchi ob'ektlar stoli -- burilish burchagini o'lchash uchun goniometrik oyoq bilan; ko'pincha Fedorov jadvali ob'ekt jadvaliga biriktiriladi (Fedorov jadvaliga qarang), bu kristallografik va kristall-optik o'qlarni topish uchun namunani o'zboshimchalik bilan aylantirish va egish imkonini beradi. Polarizatsiya linzalarining linzalari maxsus tanlangan, shuning uchun ularning linzalarida yorug'likning depolarizatsiyasiga olib keladigan ichki stresslar yo'q. Bu tipdagi M.da, odatda, oʻtadigan yorugʻlikda kuzatishlar uchun foydalaniladigan, yoqish va oʻchirish mumkin boʻlgan yordamchi linza (Bertran linzalari deb ataladi) boʻladi; u oʻrganilayotgan kristalldan oʻtgandan soʻng obʼyektivning orqa fokus tekisligida yorugʻlik taʼsirida hosil boʻlgan interferentsiya naqshlarini (q. Kristal optika) koʻrib chiqish imkonini beradi.
Interferentsiyali mikroskoplar yordamida interferension kontrast usuli yordamida shaffof jismlar kuzatiladi; ularning koʻpchiligi konstruktiv jihatdan oddiy M.ga oʻxshash boʻlib, faqat maxsus kondanser, obʼyektiv va oʻlchov birligi mavjudligi bilan farqlanadi. Kuzatish qutblangan yorug'likda o'tkazilsa, bunday mikroskoplar polarizator va analizator bilan ta'minlanadi. Qoʻllanish sohasiga koʻra (asosan biologik tadqiqotlar) bu M.larni ixtisoslashtirilgan biologik M. Interferometrik M.larga koʻpincha mikrointerferometrlar - ishlov berilgan metall qismlar sirtlarining mikrorelefini oʻrganish uchun maxsus turdagi M.lar ham kiradi.
Stereomikroskoplar. An'anaviy mikroskoplarda ishlatiladigan binokulyar naychalar, ikki ko'z bilan kuzatish qulayligiga qaramay, stereoskopik effekt yaratmaydi: bu holda, bir xil nurlar ikkala ko'zga bir xil burchak ostida kiradi, faqat ular prizma tizimi bilan ikkita nurga bo'linadi. . Mikroob'ektni chinakam uch o'lchovli idrok etishni ta'minlaydigan stereomikroskoplar, aslida, o'ng va chap ko'zlar ob'ektni turli burchaklarda kuzatishi uchun bitta struktura shaklida yaratilgan ikkita mikroskopdir. Bunday M. kuzatish jarayonida obʼyekt bilan har qanday operatsiyalarni bajarish zarur boʻlgan joylarda (biologik tadqiqotlar, qon tomirlari, miya, koʻzda jarrohlik operatsiyalari - mikrorurgiya, miniatyura asboblarini yigʻish, m. Transistorlar), - stereoskopik idrok bu operatsiyalarni osonlashtiradi. M.ning koʻrish sohasida orientatsiya qulayligi uning burilish tizimlari rolini oʻynaydigan prizmalarning optik sxemasiga ham kiritilgan (qarang. Burilish tizimi ); bunday M.dagi tasvir toʻgʻri, teskari emas. Xo'sh, stereo mikroskoplarda linzalarning optik o'qlari orasidagi burchak odatda qanday? 12 °, ularning raqamli diafragma, qoida tariqasida, 0,12 dan oshmaydi. Shuning uchun bunday M.ning foydali oʻsishi 120 dan oshmaydi.
Taqqoslash linzalari bitta ko'z tizimiga ega ikkita tizimli birlashtirilgan oddiy linzalardan iborat. Kuzatuvchi bir vaqtning o'zida ikkita ob'ektning tasvirini bunday linzalarning ko'rish maydonining ikki yarmida ko'radi, bu ularni rangi, tuzilishi, elementlarning taqsimlanishi va boshqa xususiyatlar bo'yicha to'g'ridan-to'g'ri taqqoslash imkonini beradi. Taqqoslash belgilaridan sirtga ishlov berish sifatini baholashda, darajani aniqlashda (mos yozuvlar namunasi bilan solishtirish) keng qo'llaniladi.Bu turdagi maxsus markerlar kriminologiyada, xususan, o'rganilayotgan o'q qaysi quroldan otilganini aniqlash uchun ishlatiladi. .
Mikroproyeksiya sxemasi boʻyicha ishlaydigan televidenie M.da preparatning tasviri elektr signallari ketma-ketligiga aylantiriladi, soʻngra bu tasvirni katod nurlari trubkasi ekranida kattalashtirilgan miqyosda koʻpaytiradi (qarang. Katod nurlari trubkasi). (kineskop). Bunday M.da faqat elektron usulda, parametrlarni oʻzgartirish orqali mumkin elektr zanjiri ular bo'ylab signallar o'tadi, tasvirning kontrastini o'zgartiradi va yorqinligini sozlaydi. Signallarning elektr kuchaytirilishi tasvirlarni katta ekranga proyeksiya qilish imkonini beradi, an'anaviy mikroproyeksiya esa mikroskopik ob'ektlar uchun ko'pincha zararli bo'lgan juda kuchli yoritishni talab qiladi. Televizion hisoblagichlarning katta afzalligi shundaki, ular yaqinligi kuzatuvchi uchun xavfli bo'lgan ob'ektlarni (masalan, radioaktiv) masofadan o'rganish uchun ishlatilishi mumkin.
Ko'pgina tadqiqotlarda mikroskopik zarralarni (masalan, koloniyalardagi bakteriyalar, aerozollar, kolloid eritmalardagi zarralar, qon hujayralari va boshqalar) hisoblash, qotishmaning ingichka qismlarida bir xil turdagi donalar egallagan maydonlarni aniqlash, va boshqa shunga o'xshash o'lchovlarni ishlab chiqarish. Televizion o'lchagichlardagi tasvirlarni bir qator elektr signallariga (impulslarga) aylantirish ularni pulslar soni bo'yicha qayd etuvchi mikrozarrachalarning avtomatik hisoblagichlarini qurish imkonini berdi.
Hisoblagichlarni o'lchashning maqsadi - ob'ektlarning chiziqli va burchak o'lchamlarini aniq o'lchash (ko'pincha kichik emas). O'lchov usuliga ko'ra ularni ikki turga bo'lish mumkin. 1-turdagi oʻlchov M.lari faqat oʻlchangan masofa M.ning koʻrish maydonining chiziqli oʻlchamlaridan oshmagan hollardagina qoʻllaniladi. ) ob'ektning o'zi emas, balki uning okulyarning fokus tekisligidagi tasviri o'lchanadi va shundan keyingina ob'ektiv kattalashtirishning ma'lum qiymatiga ko'ra, ob'ektdagi o'lchangan masofa hisoblanadi. Ko'pincha, bu mikroskoplarda ob'ektlarning tasvirlari almashtiriladigan ko'zoynak boshlarining plitalari ustiga bosilgan namunali profillar bilan taqqoslanadi. O'lchovda Predmet jadvalining 2-turi obʼyekt va M. tanasi bilan aniq mexanizmlar (koʻproq - tanaga nisbatan jadval) yordamida bir-biriga nisbatan koʻchirilishi mumkin; bu harakatni mikrometrik vint yoki ob'ekt bosqichiga qattiq mahkamlangan shkala bilan o'lchash orqali ob'ektning kuzatilgan elementlari orasidagi masofa aniqlanadi. O'lchov o'lchagichlar mavjud, ular uchun o'lchovlar faqat bitta yo'nalishda amalga oshiriladi (bitta koordinatali metr). Ob'ekt stolining ikki perpendikulyar yo'nalishdagi harakatlari bilan M. ancha keng tarqalgan (harakat chegarasi 200-500 mm gacha); maxsus maqsadlarda M. qoʻllaniladi, unda oʻlchovlar (demak, stol va M. tanasining nisbiy harakatlari) mumkin. uch yo'nalish to'rtburchaklar koordinatalarining uchta o'qiga mos keladi. Ayrim M.larda qutb koordinatalarida oʻlchashlar olib borish mumkin; buning uchun ob'yekt jadvali aylanadigan holga keltiriladi va shkala va aylanish burchaklarini o'qish uchun Nonius bilan jihozlangan. Ikkinchi turdagi eng aniq o'lchash asboblari shisha tarozilardan foydalanadi va ulardagi o'qishlar yordamchi (o'qish deb ataladigan) mikroskop yordamida amalga oshiriladi (pastga qarang). 2-turdagi M.da oʻlchovlarning aniqligi 1-turdagi M.ga nisbatan ancha yuqori. Eng yaxshi modellarda chiziqli o'lchovlarning aniqligi odatda 0,001 mm gacha, burchaklarni o'lchashning aniqligi 1" ga teng. 2-toifa o'lchov o'lchagichlari sanoatda (ayniqsa, mashinasozlikda) keng qo'llaniladi. mashina qismlari, asboblari va boshqalarning o'lchamlarini o'lchash va nazorat qilish.
Ayniqsa, aniq o'lchovlar uchun asboblarda (masalan, geodezik, astronomik va boshqalar) chiziqli shkalalar va goniometrik asboblarning bo'lingan doiralari bo'yicha o'qishlar maxsus o'qish o'lchagichlari - shkala o'lchagichlar va mikrometrlar yordamida amalga oshiriladi. Birinchisida yordamchi shisha tarozi mavjud. Ob'ektiv linzalarini kattalashtirishni sozlash orqali uning tasviri asosiy o'lchov (yoki doira) bo'linishlari orasidagi kuzatilgan intervalga tenglashtiriladi, shundan so'ng yordamchi shkalaning zarbalari orasidagi kuzatilgan bo'linish pozitsiyasini hisoblash orqali u mumkin. to'g'ridan-to'g'ri bo'linmalar orasidagi intervalning taxminan 0,01 aniqligi bilan aniqlanishi kerak. Koʻrsatkichlarning aniqligi (0,0001 mm. tartibida) M. mikrometrlarida undan ham yuqori boʻlib, uning koʻz qismida ip yoki spiral mikrometr oʻrnatilgan. Ob'ektivni kattalashtirish o'lchangan shkalaning zarbalari tasvirlari orasidagi ipning harakati mikrometr vintining butun soniga (yoki yarim burilishlariga) mos keladigan tarzda o'rnatiladi.
Yuqorida tavsiflanganlarga qo'shimcha ravishda, yana torroq ixtisoslashgan termometrlarning sezilarli soni mavjud, masalan, yadroviy fotografik emulsiyalardagi elementar zarralar va yadro parchalanish qismlarini hisoblash va tahlil qilish uchun termometrlar (qarang: Yadro fotografik emulsiyasi), yuqori. 2000 ° S gacha bo'lgan haroratgacha qizdirilgan ob'ektlarni o'rganish uchun harorat o'lchagichlar, hayvonlar va odamlarning tirik organlarining sirtlarini o'rganish uchun kontakt linzalari (ulardagi linzalar o'rganilayotgan sirtga yaqin bosiladi va linzalar fokuslanadi. maxsus o'rnatilgan tizim).
Mikroskopning tibbiyotdagi ahamiyati
Bizning vaqtda zamonaviy texnologiyalar inson faoliyatining ko'p sohalarida faol ishlatiladi. Masalan, tibbiyotda odamni oyoqqa turg'izishga yordam beradigan ko'plab qurilmalar allaqachon mavjud. Ammo shunga qaramay, texnologiya rivojlanishida katta sakrashga qaramay, tibbiyotda o'xshashi bo'lmagan va boshqa narsa bilan almashtirib bo'lmaydigan asboblar ko'p. Bu vositalardan biri bu klinik amaliyotda ham, mikrobiologik laboratoriyada ham faol qo'llaniladigan tadqiqot biologik mikroskopidir. Hatto zamonaviy qurilmalarda ham, masalan, qon hujayralarini mikrobiologik tekshirish yoki tahlil qilish uchun, mikroskop vazifalari va imkoniyatlari yo'q. Bugungi kunda biomedikal mikroskoplar optik texnologiyaning eng keng tarqalgan turi hisoblanadi. Bu vositalar tabiiy kelib chiqish ob'ektlarini o'rganish bilan bog'liq bo'lgan har qanday tadqiqotlarda ishlatilishi mumkin. Ushbu turdagi mikroskoplar ikki turga bo'linadi: tadqiqot va biologik laboratoriyalar. Shuningdek, muntazam va ishchilar uchun. Biologik mikroskop asosan turli sohalarda qo'llaniladi tadqiqot markazlari, ilmiy muassasalar yoki kasalxonalar. Bugungi kunda uni shifoxonalarda yoki ilmiy laboratoriyalarda almashtirishning iloji yo'q. Bu mikroskoplar tajriba orttirish uchun turli ta'lim ishlarida amaliyotga muhtoj bo'lgan universitet talabalari uchun yaxshi xarid bo'ladi.
Mikroskop apparati ishlash qoidalari
Biologik yorug'lik mikroskopining diagrammasi sek. 1.
Mexanik qism yoki tripod oyoq, poydevor, naycha ushlagichi, sahna, monokulyar biriktirma (naycha), aylanadigan moslama, qo'pol fokusli tutqich (makrometrik vint) va nozik fokus tutqichidan (mikrometrik vint) iborat.
Quvur mikroskopning teleskopidir. Ko'zoynak naychaning yuqori ochilishiga erkin joylashtiriladi, o'z o'qi atrofida aylanadigan revolver moslamasi (revolver) naychaning pastki qismida joylashgan, maqsadlar ĸᴏᴛᴏᴩᴏᴇ ichiga o'rnatiladi. Revolverni aylantirib, mikroskop bilan ishlash paytida maqsadlarni tezda o'zgartirishingiz mumkin va naycha ostiga biron bir maqsad qo'yishingiz mumkin. Ob'ektiv markazda bo'lishi kerak. mikroskopning optik o'qiga o'rnatilgan. Buning uchun revolver o'z o'qi atrofida bir marta bosish paydo bo'lguncha aylantiriladi.
Mavzu jadvali o'rganilgan tayyorgarlikni unga joylashtirish uchun ishlatiladi. Preparat stolga qisqichlar (terminallar) bilan o'rnatiladi. Sahnaning o'rtasida yorug'lik nurlari o'tishi va preparatni yoritish uchun teshik mavjud. Mikroskopning ba'zi dizaynlarida sahnaning atrofidagi vintlar yordamida harakatlanishi mumkin. Bu turli xil ko'rinishlarda preparatni ko'rishga imkon beradi.
Anjir. 1 Yorug'lik biologik mikroskopining diagrammasi
Naychani yuqoriga va pastga siljitish uchun qo'pol va ingichka fokusli tutqichlar (makro- va mikrosxemalar) ishlatiladi, bu esa uni namunadan juda muhim masofada joylashtirishga imkon beradi. Vintlar soat yo'nalishi bo'yicha aylantirilganda, naycha tushiriladi va soat yo'nalishi bo'yicha teskari tomonga burilganda - ko'tariladi. Makrometrik vintni burab, ob'ektiv taxminan fokusga o'rnatiladi, ya'ni. giyohvand moddadan u ko'rinadigan masofada. Makroskaning burilishi naychani 20 mm ga siljitishga imkon beradi. Fokusni aniq sozlash uchun mikrometr vidasi. To'liq burilish naychani 0,1 mm ga siljitadi. Mikro-vintni juda ehtiyotkorlik bilan ishlatish kerak: mikro-vintni 180 ° C dan oshmaydigan bir yo'nalishda yoki boshqa tomonga burish mumkin.
Optik qism mikroskopning eng qimmatli qismidir. U maqsadlar va ko'zoynakdan iborat.
Ko'zoynak (Lotin oculus so'zidan - ko'z) umumiy metall ramkaga o'ralgan ikkita plano-konveks linzalardan iborat. Yuqori ob'ektiv ko'z (kattalashtirish), pastki qismi yig'ishdir. Linzalar orasidagi masofa ularning fokus uzunligining yarmiga teng. Kattaroq kattalashtiradigan ko'zoynaklar qisqa fokusga ega, shuning uchun ko'zoynakning uzunligi ham qisqaroq. Ob'ektivlar orasida diafragma mavjud bo'lib, u ko'rish maydonini cheklaydi va chekka yorug'lik nurlarini to'xtatadi. Mahalliy mikroskoplar uchta almashtiriladigan ko'zoynaklar bilan jihozlangan, ularning kattalashishi ko'zoynak tanasida ko'rsatilgan (x7; x10; x15).
Maqsadlar aylanadigan qurilmaning rozetkalariga vidalanadi va metall ramkaga o'ralgan ob'ektiv tizimidan iborat. Old (oldingi) ob'ektiv eng kichik va faqat kattalashtirishga imkon beradi. Ob'ektivdagi qolgan linzalar faqat olingan rasmning kamchiliklarini (sferik va xromatik aberatsiya fenomeni) tuzatadi va tuzatuvchi deb nomlanadi.
To'rtta maqsad aylanish moslamasining rozetkalariga ulangan bo'lib, kattalashtirish linzalarning barrelida ko'rsatilgan (x8; x20; x40; x90 yoki 100). Har bir maqsad o'ziga xos fokus uzunligi (slayd va oldingi ob'ektiv orasidagi masofa) bilan tavsiflanadi: x8 ob'ektivning fokus uzunligi taxminan 9 mm, x40 ob'ektiv - 0,65 mm, x90 ob'ektiv - 0,15 mm.
Linzalar quruq va immersion linzalarga bo'linadi.
Quruq linzalar (x8, x20, x40) bilan ishlashda, frontal linzalar va tayyorgarlik o'rtasida havo bor. Bunday holda, yorug'lik nurlari turli xil refraktsion indekslari (vosita oynasi, havo) bilan muhitdan o'tadi, ularning ba'zilari o'chiriladi va linzalarga kirmaydi.
Cho'kish maqsadlari bilan ishlayotganda (x90 yoki x100) yorug'likning tarqalishini bartaraf etish uchun ob'ektiv va frontal linzalar orasidagi masofa immersion (sadr) moyi bilan to'ldiriladi, yorug'lik nurlarining sinishi indekslari yorug'lik nurlarining sinishi indeksiga yaqin bo'lgan cherez oynadan o'tadi.
Mikroskopning umumiy kattalashishi ko'zoynakni kattalashtirish vaqtini ob'ektiv kattalashtirish mahsuloti sifatida aniqlanadi. Masalan, agar ishda x15 ko'zoynak ishlatilsa va x90 ob'ekt naycha ostida joylashgan bo'lsa, u holda mikroskop yordamida ko'rib chiqilayotgan ob'ektning kattalashishi x1350 bo'ladi.
Mikroskopning yorituvchi qismi ikkita linzali kondensatordan, ìrísí diafragmasidan va 120 ... 220 V tarmoq kuchlanishidan pastga tushadigan transformatordan quvvat oladigan past kuchlanishli akkor chiroqli kartridjdan iborat.
Kondensator preparatni yaxshiroq yoritishga xizmat qiladi. U yorug'lik nurlarini nurga to'playdi va sahnaning ochilishi orqali ularni namunaga yo'naltiradi. Kondensator qo'lini harakatga keltirish uchun dastagidan foydalanib, uni yuqoriga va pastga siljitish mumkin, shu bilan nurlarning yaqinlashish burchagi va natijada ob'ektning yoritilish darajasi o'zgaradi. Kondensatorning holati qanchalik baland bo'lsa, preparatning yoritilishi yaxshiroq bo'ladi.
Iris diafragmasi kondensator ostida joylashgan va kondensatorga kiradigan yorug'lik oqimini tartibga solishga xizmat qiladi.
Ref.rf-da joylashtirilgan
U metall yarim oy shaklidagi plitalardan iborat. Siz maxsus qo'l yordamida teshik ochilishini kengaytirishingiz yoki toraytirishingiz mumkin. Uni soat yo'nalishi bo'yicha aylantirib, ìrísí diafragma diafragi ortadi va shuning uchun ob'ektning yoritish darajasi oshadi.
Immersion linzalari bilan ishlaganda, preparatning yorug'lik darajasi maksimal bo'lishi kerak, shu munosabat bilan ìrísí diafragmaning pardasi ochiladi va kondensator o'ta yuqori holatiga ko'tariladi.
Quruq linzalar bilan ishlashda, qoida tariqasida, bo'yalmagan narsalar hisobga olinadi. Kontrastga erishish uchun kondansatör pastga tushiriladi va ìrísí diafragma ochilishi kamayadi.
1. Ish stolida mikroskop naycha ushlagichi bilan stol chetidan 3 ... 5 sm masofada joylashgan;
2. Mikroskopni elektr tarmog'iga ulang va to'g'ri yoritishni o'rnating (2.1.1 bo'limiga qarang);
3. Sinov namunasi sahnaga qo'yiladi va qisqichlar bilan mahkamlanadi;
4. Kerakli linzalarni naycha ostiga qo'ying va fokus uzunligini makro va mikrosxemalar yordamida o'rnating. Shunday qilib, immersiya maqsadlari bilan ishlaganda, preparatga bir tomchi immersion moyi surtiladi va naycha ushlagichi stakanga tegib turguncha makroskra bilan ehtiyotkorlik bilan tushiriladi. Keyin, ko'zoynakka diqqat bilan qarab, rasmni ko'rmaguningizcha naycha ushlagichini soat yo'nalishi bo'yicha teskari tomonga aylantirib, sekin ko'taring. Ob'ektivni diqqat markazida bo'lish mikrometr vinti bilan amalga oshiriladi. Quruq linzalar bilan ishlashda, avval x8 linza bilan tekshiriladi. Quvurlar ushlagichini makroskry yordamida ko'tarib, ko'zoynakka diqqat bilan qarab, fokus uzunligini (taxminan 9 mm) o'rnating va mikrometr vintidan foydalanib tasvir ravshanligiga erishing. Keyinchalik, dala markazida, o'rganilayotgan ob'ekt eng yaxshi ko'rinadigan qismning sahnasi yoki mikroskop slaydini siljitish orqali. Keyin aylanadigan moslamani o'z o'qi atrofida aylantirib, naycha ostiga x20 yoki x40 ob'ekt qo'yiladi. Bunday holda, x90 maqsadi naycha ostiga tushmasligi kerak. Qaytuvchi moslamada maqsadlar shunday joylashtirilganki, agar rasm x8 ob'ektli bo'lsa, u holda katta hajmli maqsadlar bilan tayyorgarlikni ko'rib chiqishda makro- va mikrometrik vintlar yordamida tasvirning ravshanligini biroz moslashtirish kerak;
5. Mikroskopiya paytida ikkala ko'zni ham ochiq tutish va ularni navbatma-navbat ishlatish juda muhimdir;
6. Ishni tugatgandan so'ng, tayyorgarlikni sahnadan olib tashlang, kondensatorni pastga tushiring, x8 ob'ektini naycha ostiga qo'ying, x90 ob'ektivini frontal obstruktsiyadan yumshoq mato yoki alkogolga namlangan doka bilan olib tashlang, linza ostiga doka mato qo'ying, naycha ushlagichini tushiring.

Xulosa
Ertangi mikroskopdan nimani kutishimiz mumkin? Qanday muammolarni hal qilishni kutish mumkin? Avvalo - tobora ko'proq yangi ob'ektlarga tarqatish. Atom rezolyutsiyasiga erishish, shubhasiz, ilmiy va texnik fikrning eng katta yutug'idir. Biroq, shuni unutmaslik kerakki, bu yutuq faqat cheklangan doiradagi ob'ektlarga taalluqlidir, ular ham juda o'ziga xos, g'ayrioddiy va juda ta'sirli sharoitlarda joylashtirilgan. Shuning uchun atom rezolyutsiyasini ob'ektlarning keng doirasiga kengaytirishga harakat qilish kerak.
Vaqt o'tishi bilan biz boshqa zaryadlangan zarrachalarning mikroskoplarda "ishlashini" kutishimiz mumkin. Biroq, buning oldidan bunday zarralarning kuchli manbalarini izlash va rivojlantirish kerakligi aniq; bundan tashqari, mikroskopning yangi turini yaratish o'ziga xos ko'rinish bilan belgilanadi ilmiy vazifalar, uning yechimiga bu yangi zarralar hal qiluvchi hissa qo'shadi. Dinamikada jarayonlarning mikroskopik tadqiqotlari takomillashtiriladi, ya'ni. to'g'ridan-to'g'ri mikroskopda yoki u bilan bog'langan qurilmalarda sodir bo'ladi. Bunday jarayonlarga namunalarni mikroskopda tekshirish (isitish, cho'zish va boshqalar) to'g'ridan-to'g'ri ularning mikro tuzilishini tahlil qilish vaqtida kiradi. Bu erda muvaffaqiyat, birinchi navbatda, yuqori tezlikda suratga olish texnologiyasining rivojlanishi va mikroskoplarning detektorlari (ekranlari) vaqtinchalik o'lchamlarini oshirish, shuningdek, kuchli zamonaviy kompyuterlardan foydalanish bilan bog'liq bo'ladi.

Foydalanilgan adabiyotlar ro'yxati
1. Kichik tibbiy ensiklopediya. -- M.: Tibbiyot entsiklopediyasi. 1991-96 yillar
2. Birinchi yordam. -- M .: Buyuk rus entsiklopediyasi. 1994 yil
3. ensiklopedik lug'at tibbiy atamalar. -- M.: Sovet entsiklopediyasi. -- 1982--1984 yillar
4. http://dic.academic.ru/
5. http://ru.wikipedia.org/
6. www.golkom.ru
7. www.avicenna.ru
8. www.bionet.nsc.ru