M. G. Safin, B. S. Alikulov, F. A. Ruziev


Spirt yordamida fraksiyalash


Download 0.5 Mb.
Pdf ko'rish
bet42/75
Sana08.01.2022
Hajmi0.5 Mb.
#254498
1   ...   38   39   40   41   42   43   44   45   ...   75
Bog'liq
enzimologiya

Spirt yordamida fraksiyalash3-fraksiyadagi oqsil miqdori Louri uslubida aniqlanadi 

va  0,005  M  magniy  atsetat  eritmasida,  shu  darajada  suyultiladiki,  bunda  undagi  oqsil 

konsentratsiyasi  15  mg/ml  bo`lishi  kerak.  Eritmaga  1  n  sovitilgan  NaOH  qo`shish 

orqali  uning  pH  ko`rsatkichi  8,6  ga  yetkaziladi.  Bundan  keyin  oqsil  eritmasini  10 

0



li  sharoitga  ko`chirib,  unga  sovitilgan  96  %  li  etil  spirit  qo`shiladi  va  aralashmadagi 



uning  konsentratsiyasi  34  %  ga  yetkaziladi.  Oqsil  eritmasini  harorati  0 

0

C  dan 



oshmasligini  ta`minlash  zarur,  aks  holda  u  denaturatsiyaga  uchraydi.  Aralashmaga 

eng  so`nggi  ulush  spirt  qo`shilgandan  keyin  20  minut  tinch  qoldiriladi  va  -15 

0

C  da 


15000  g/min  tezlikda  15  minut  sentrifigalanadi    va  ajratib  olingan  cho`kma  tashlab 


 

- 38 - 


yuboriladi  hamda  bundan  keyin  supernatantdagi  spirtning  konsentratsiyasi  64  %  ga 

yetkaziladi.  Yana  yuqoridagi  sharoitda  sentrifugalash  o`tkaziladi.  Hosil  bo`lgan 

cho`kma  3-fraksiyadagi  hajmning  1/4  qismicha    0,1  M  magniy  atsetat  qo`shib 

suspenziyalanadi.  Suspenziyalash  darajasi  oqsilning  eritmadagi    konsentratsiyasi  15 

mg/ml  darajasigacha  yetishi  kerak.  Suspenziya  15000  g/min  tezlikda  20  minut 

sentrifugalanadi   va tiniq  to`q sariq rangli  eritma  hosil bo`lishi  kuzatiladi  (4-fraksiya). 




Download 0.5 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   38   39   40   41   42   43   44   45   ...   75




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling