Mass-spektrometriya

MALDI Parvoz vaqti MS
MALDI-TOF rivojlanishining dastlabki bosqichlarida bu asboblar nisbatan past o'lchamlari bor edi, bu esa ularning aniqligini keskin cheklab qo'ydi. 2.11-rasmda ko'rsatilganidek, MALDI uchish vaqti asboblarining echish qobiliyatini oshirishga dramatik ta'sir ko'rsatgan yangilik kechiktirildi (DE).. Nazariy jihatdan, kechiktirilgan ekstraksiya MALDI ionlash hodisasidan so'ng darhol ionlarni sovutish va fokuslashning nisbatan oddiy vositasidir, ammo amalda dastlab nanosekundlik vaqt oralig'ida 10 000 voltni yoqish va o'chirish qiyin edi. An'anaviy MALDI asboblarida ionlar hosil bo'lgandan so'ng darhol ionlanish manbasidan tezlashtirildi. Biroq, kechiktirilgan ekstraksiya bilan ionlar analizatorga tezlashtirilgunga qadar ~ 150 nanosekund davomida "sovishi" mumkin. Ushbu sovutish davri ancha kichikroq kinetik energiya taqsimotiga ega bo'lgan ionlar to'plamini hosil qiladi, natijada ular TOF analizatoriga kirgandan so'ng ionlarning vaqtincha tarqalishini kamaytiradi. Umuman olganda, bu aniqlik va aniqlikni oshiradi. Kechiktirilgan ekstraksiyaning foydalari oqsillar (>30 000 Da) kabi kattaroq makromolekulalar bilan sezilarli darajada kamayadi.
2.11-rasm: Kechiktirilgan ekstraksiya (DE) MALDI-da qo'llaniladigan usul bo'lib, u ~150 nanosekundlik sovutish davridan keyin ionlarni ionlanish manbasidan ajratib olish imkonini beradi. Ushbu sovutish davri ionlarning kinetik energiya taqsimotini samarali ravishda toraytiradi va shu bilan uzluksiz ekstraksiya usullariga qaraganda yuqori aniqlikni ta'minlaydi.
Quadrupole parvoz vaqti MS
Quadrupole-TOF massa analizatorlari odatda elektrosprey ionlash manbalariga ulanadi va yaqinda ular MALDI bilan muvaffaqiyatli birlashtirildi. ESI quad-TOF ( 2.12-rasm ) to'rt kutupli analizatorning barqarorligini parvoz vaqtini aks ettiruvchi massa analizatorining yuqori samaradorligi, sezgirligi va aniqligi bilan birlashtiradi. To'rt kutupli belgilangan m/z bo'ylab skanerlash uchun har qanday oddiy to'rt kutupli analizator vazifasini bajarishi mumkindiapazon. Biroq, u prekursor ionini tanlab ajratish va bu ionni to'qnashuv hujayrasiga yo'naltirish uchun ham ishlatilishi mumkin. Keyin hosil bo'lgan fragment ionlari TOF reflektor massa analizatori tomonidan tahlil qilinadi. Quadrupole-TOF to'rt kutuplining ma'lum bir ionni tanlash qobiliyatidan va TOF-MSning to'liq massa diapazonida ionlarni bir vaqtning o'zida va aniq o'lchash qobiliyatidan foydalanadi. Bu bir vaqtning o'zida bitta massani skanerlashi kerak bo'lgan tandem to'rt kutupli kabi an'anaviy analizatorlardan farq qiladi. Quadrupole-TOF analizatorlari to'liq fragmentli massa spektrlarini olishda tandem to'rt kutupli asboblarga nisbatan sezilarli darajada yuqori sezuvchanlik va aniqlikni taklif qiladi.
Quadrupole-TOF asbobi to'rt kutupli yoki TOF analizatorlarini mustaqil ravishda yoki tandem MS tajribalari uchun birgalikda ishlatishi mumkin. Asbobning TOF komponenti 10 000 dan ortiq yuqori m/z chegarasiga ega. TOFning yuqori aniqlik qobiliyati (~10 000) 10 ppm darajasida yaxshi massa o'lchash aniqligini ta'minlaydi. Yuqori aniqligi va sezgirligi tufayli ESI to'rtburchakli TOF massa spektrometri proteomika va farmakokinetik muammolarni hal qilishda qo'llaniladi.
Shakl 2.12: Elektrosprey ionlashtiruvchi to'rt kutupli parvoz vaqtining massa spektrometri.