Microsoft Word 60 2012 Белясова doc

растений, которые применяются в клеточной селекции для отбора 
гибридных клеток и их клонирования (с последующим получением 
трансгенных растений), а также для генетических и физиологических 
исследований. Источниками отдельных (одиночных) клеток растений 
являются клеточные суспензии, мацерация тканей растений, а также 
изолированные протопласты после регенерации клеточной стенки. За-
ставить отдельные клетки растений делиться очень сложно. Расти-
тельные клетки, как правило, хорошо делятся только тогда, когда их 
содержание в каком-то объеме среды достаточно велико. Это связы-
вают с присутствием так называемого кондиционирующего фактора, 
который выделяется в среду делящимися клетками. Природа его до 
конца не выяснена. Методы культивирования одиночных клеток рас-
тений основаны как раз на использовании эффекта кондиционирова-
ния. Для этого одиночные клетки культивируют в присутствии ткани-
«няньки», которая может представлять собой интенсивно делящуюся 
каллусную или суспензионную культуру, отделенную от клетки 
фильтром, или «кормящий слой», «подложку», полученные из инак-
тивированных радиацией, но не убитых клеток суспензии. 

---

135 
Протопласты растений получают из клеток паренхимы листа, из 
каллусных и суспензионных культур. Для этого в гипертонической 
среде клетки обрабатывают целлюлолитическими и пектолитически-
ми ферментами. Протопласты растений существуют непродолжитель-
ное время – сразу же после удаления ферментов на поверхности мем-
браны регенерируется клеточная стенка, клетка начинает делиться и 
образует клон. Протопласты растений – ценный объект для проведе-
ния генетических манипуляций. В них можно инъецировать рекомби-
нантную ДНК, эффективно проводить агробактериальную трансфор-
мацию. Можно сливать протопласты разных видов растений с целью 
получения так называемых соматических гибридов, многие из которых 
невозможно получить с помощью традиционных методов селекции. 
Ценность методов культивирования тканей и клеток растений оп-
ределяется тем обстоятельством, что с помощью специальных мето-
дов (изменения состава среды и условий культивирования) можно ин-
дуцировать процесс вторичной дифференциации, в результате которо-
го удается регенерировать из каллуса или суспензии целое растение. 
Растения обладают уникальной способностью восстанавливать целый 
организм из отдельных фрагментов (например, черенков), органов, 
почек, клеток. В основе этого процесса лежит способность отдельной 
соматической клетки реализовывать программу развития, заложенную 
в ДНК, и давать начало целому организму (тотипотентность рас-
тительных клеток). 
Тотипотентность – это неограниченная способность дифферен-
циации: во все типы клеток, тканей и органов. Это важнейшее свой-
ство эмбриональных стволовых клеток. 
В ходе развития растения клетки отдельных органов приобретают 
свойства, характерные для соответствующих тканей. Однако несмотря 
на это, многие из них все-таки способны при определенных условиях 
редифференцироваться и давать начало новым органам или целым ор-
ганизмам. При культивировании клеток растений in vitro появляется 
возможность в значительно большей степени реализовать их тотипо-
тентность, чем в составе целого растения. Это связано с тем, что в 
культуре in vitro по сравнению с целым растением не действует жест-
кая программа развития организма, отсутствует тесная взаимосвязь и 
взаимозависимость клеток отдельных органов и тканей. Можно целе-
направленно управлять процессами дифференциации клеток.