Microsoft Word 60 2012 Белясова doc

нантными, или гибридными. Правильнее называть их гибридными, 

---

82 
поскольку рекомбинантные ДНК могут возникать и при генетическом 
обмене in vivo в результате естественной гомологичной или сайт-
специфической рекомбинации, но эти события не принято относить к 
категории ГИ. Белки, структура которых кодируется гибридными 
ДНК, принято называть химерными. Чужеродные гены, вводимые в 
клетки методами ГИ, часто называют трансгенами, а организмы, ге-
ном которых содержит чужеродный генетический материал, включен-
ный методами ГИ, – трансгенными организмами. 
Методы ГИ обеспечивают возможность создания принципиально 
новых микробных продуцентов биологически активных веществ, а 
также животных и растений, несущих функционально активные 
трансгены. Более того, появилась возможность искусственно созда-
вать гены, кодирующие химерные полипептиды, обладающие свой-
ствами двух или более природных белков.
Ферменты генетической инженерии. Возможность проведения 
различных манипуляций с ДНК in vitro зависит от наличия препаратов 
ферментов, которые обеспечивают разрезание, модификацию и лиги-
рование (воссоединение) ДНК. В ГИ используют следующие классы 
ферментов: нуклеазы, фосфомоноэстеразы, полинуклеотидкиназы, ли-
газы, ДНК- и РНК-зависимые ДНК-полимеразы и некоторые другие. 
Нуклеазы. Эти ферменты расщепляют молекулы нуклеиновых ки-
слот: одни из них действуют на ДНК, другие – на РНК, есть ферменты, 
способные в качестве субстратов расщеплять как ДНК, так и РНК. Среди 
нуклеаз различают экзонуклеазы (расщепляют полинуклеотидные суб-
страты, имеющие свободные концы, при этом расщепление идет либо 
непосредственно с концов цепей, либо вблизи от них). Эндонуклеазам 
свободные концы не требуются, поэтому они могут гидролизовать коль-
цевые молекулы ДНК. Разрезание осуществляется по внутренним фос-
фодиэфирным связям с образованием фрагментов разной длины. Особое 
значение для ГИ имеют эндонуклеазы рестрикции, которые обладают 
двумя важными особенностями – способностью узнавать специфические 
короткие нуклеотидные последовательности в ДНК и широким разнооб-
разием этих ферментов, каждый из которых уникален в структуре узна-
ваемых сайтов. Большинство рестриктаз разрезает ДНК с обнажением 
«липких» концов (Есо RI), но есть также ферменты, разрезающие палин-
дромные последовательности с образованием «тупых» концов.