Nukleoproteinlarni 5-10 LI sulfat kislota yordamida bir soat davomida
Download 194.39 Kb. Pdf ko'rish
|
8-laboratoriya.Molekulyar
- Bu sahifa navigatsiya:
- Darsning maqsadi
- Reaktivlar
- Biomateriallar
- 8-LABORATORIYA MASHG’ULOTI Achitqi nukleoproteidlarni ajratish
|
Nazariy qism. Nukleoproteinlarni 5-10 % li sulfat kislota yordamida bir soat davomida gidrolizlaganda ular oqsil va nuklein kislotagacha parchalanadi. Nuklein kislota keyinchalik alohida nukleotidlarga va birinchi galda purin, pirimidin asoslariga hamda fosfat kislotaga aylanadi. Nukleoproteidlarni erkin holdagi parchalanish mahsulotlarini, shuningdek pentozani maxsus reaksiyalar yordamida aniqlash mumkin. Purin asoslarini kumush tuzlarini cho‘kmasini hosil qilish, fosfat kislotani ammoniy molibdat, pentozani orsin va flyuroglisin bilan yuz beradigan sifat reaksiyasi yordamida aniqlash mumkin. Jigar, taloq, oshqozon osti bezi, buyraklar va achitqi nukleoproteidlarga boy hisoblanadilar. Ular ishqoriy eritmalarda erib, kislotali eritmalarda cho’kmaga tushadi. Dezoksiribonukleotidlar tuzli eritmalarda ham yaxshi eriydi. Darsning maqsadi: Achitqi va jigar tarkibida uchraydigan nukleoproteidlarni cho’ktirish ususlida ajratib olish va ularga xos tajribalar o’tkazish. Kerakli asbob: chinni hovoncha, pipetka, laboratoriya sentrifugasi, sentrifuga tarozisi, yog‘och tayoqcha, stakan, silindr, shisha tayoqcha, sentrifuga probirkalari, oddiy kimyoviy probirkalar, o‘lchagich silindr,mayda shisha bo‘lakchalari. Reaktivlar : 1 N NaCl ning eritmasi;difenilaminli reaktiv (tayyorlash: 1,0g difenilamin 100 ml 1 % li muzsirka kislotada eritilib, ustiga 2,8 ml konsentrlangan sulfat kislotasi qo‘shiladi); 0,4 % li natriy ishqori eritmasi; 5 % li sirka kislota eritmasi; efir (dietil efir); 5% li sirka kislota eritmasi.. Biomateriallar: achitqi. 20-rasm. Nukleoproteidlarni achitqidan ajratib olish Ishning bajarilishi: 5 g achitqi 1 ml dietil efiri va 1 ml suv bilan ho’llanadi va forfor havonchada shisha kukuni qo’shib, 0,4%- li natriy ishqori bilan eziladi (bunda natriy ishqoridan sekin-astalik bilan 5-10 ml chamasi solib turiladi). Hammasi bo’lib, 50 ml ishqor sarf bo’ladi. Achitqini 15-20 minut davomida to’xtovsiz ezib turiladi. Havonchadagi hosil bo’lgan massa filtrlanadi yoki 10 minut davomida sentrifugirlanadi (2500 G). Filtrat yoki sentrifugat stakanga quyiladi va unga tomchilatib 5%-li sirka kislotadan nukleoproteidlar to’liq cho’kmaga tushguncha tomizilib turiladi (Odatda 10-15 ml eritma sarflanadi). Cho’kma sentrifugalash usuli bilan ajratib olinadi. (20-rasm.) 8-LABORATORIYA MASHG’ULOTI Achitqi nukleoproteidlarni ajratish 21-rasm. Nazorat uchun savollar. 1.Purin asoslarini qanday aniqlash mumkin? 2. fosfat kislotaniqanday aniqlash mumkin? 3. pentozani aniqlash mumkin. 4. Nukleoproteinlarni oqsil va nuklein kislotagacha parchalashda qaysi reaktivdan foydalanasiz? 5. Dezoksiribonukleotidlar qanday eritmalarda ham yaxshi eriydi? Download 194.39 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|