Техника приготовления мазка, окраска простым методом

ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЫ №15
«ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ (ИФА). ПРЯМЫЕ И КОСВЕННЫЕ (СЭНДВИЧ) МЕТОДЫ».
Цель лабораторной работы.
Ознакомление с методами серологической диагностики инфекционных заболеваний – иммунноферментный анализ (ИФА) – прямые и непрямые (сэндвич) методы.
Педагогические задачи
- Объяснить значение прямых и непрямых (сэндвич) методов ИФА реакций для диагностики инфекционных заболеваний;
-Объяснить сущность и механизм прямых и непрямых (сэндвич) методов ИФА.
Результаты лабораторной работы.
-студент должен знать:
- значение метода ИФА для диагностики инфекционных заболеваний;
- знать сущность и механизм прямых и непрямых (сэндвич) методов ИФА .
Студент должен выполнить:
- самостоятельно реакцию иммунноферментного анализа
-интерпретацию полученных результатов
- применение на практике результатов ИФА.
Лабораторная работа. Постановка твердофазной ИФА реакции (сэндвич) с сывороткой крови ВИЧ инфицированного новорожденного.
Цель: Знакомство со значением и механизмом реакции твердофазной ИФА
Необходимые ингредиенты: ИФА-анализатор, специальный набор для постановки ИФА, 96⁰ спирт, исследуемая сыворотка больного, шарики и тампоны.
Ход работы (по шагам)

№	Выполняемые задачи	Не выполнил (балл)	Выполнил (балл)
1	В иимуносорбентные лакуны планшета капаем 0,25мкл рабочего раствора конъюгата ВИЧ-1. Затем в лакуны планшета добавляем 0,75 мкл контрольного образца ( К+, К- ).	0	20
2	Ингредиенты в лакунах тщательно перемешивают (медленным постукиванием на край планшета).Закрываем крышку планшета и оставляем при температуре 37º С на 60 минут.	0	15
3	Ингредиенты в планшете выливаются в сосуд с дез.раствором с помощью вошера, планшет 4 раза промывают рабочим раствором моющей жидкости. Каждай раз придерживают в моющем растворе по 40 сек и выливают в дез раствор.	0	15
4	В каждые лакуны стрипа помещают 100 мкл СС (смесь субстрата, буферный раствор). Закрывают крышку планшета при температуре 37º С на 30 мин	0	15
5	Ингрдиенты из планшета при помоши вошера переносится в дезраствор, планшет промивается 4 раза	0	15
6	Для остановки реакции в лакуну планшета добавлается 100 мкл стоп реагента и результаты расматривается через 1-2 минуты.	0	20
Результат		0	100

Приложение-результаты ИФА реакции рссматриваются в лаборатории на 5 этаже, группы скускаются поочередно, результаты записываются в тетради.