Учебно-методическое пособие по биологической химии часть 2 Обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны

ВОРОТКЕ КРОВИ 
Цель работы: ознакомиться на практике с унифицированным методом 
количественного определения железа в биологических жидкостях. Знать 
клинико-диагностическое значение теста. 
Принцип метода основан на способности восстановленного железа 
(Fе
2+
) после осаждения белков давать со специальным реактивом устойчивый 
комплекс красного цвета. Интенсивность развивающегося окрашивания 
пропорциональна содержанию железа. 
Порядок выполнения работы: 
К 1 мл сыворотки крови добавить из бюретки 1 мл осадителя белков 
(смесь тиогликолевой, трихлоруксусной и соляной кислот. Смесь ядовита!). 
Содержимое пробирки перемешать и оставить на 5 минут для осаждения. 
Затем отцентрифугировать в течение 10 минут при 3 тыс. оборотов. Цен-
трифугат слить в чистую пробирку. В другую пробирку отмерить 20 капель 
центрифугата, добавить 20 капель реактива для определения железа и через 
10 минут фотометрировать против осадителя белков при толщине кюветы 0,5 
см при зеленом светофильтре. 
Параллельно опытной ставится проба с эталонный раствором железа: к 
10 каплям эталонного раствора добавить 10 капель осадителя белков и 20 ка-
пель реактива. 
Рассчитать содержание железа в сыворотке крови по формуле: 
А – оптическая плотность опытной пробы,
В – оптическая плотность стандартной пробы,
17,9 – коэффициент пересчета. 

---

61 
Клинико-диагностическое значение. В норме содержание железа со-
ставляет 11-25 мкмоль/л сыворотки крови. Повышение уровня железа (ги-
персидерия) имеет место при гемолитической анемии, острых и хрониче-
ских инфекциях, циррозе печени, злокачественных новообразованиях, ге-
молитической желтухе, уремии. 
Снижение уровня железа (гипосидерия) имеет место при недостаточ-
ном поступлении железа с пищей, острых и хронических кровопотерях, при 
беременности. 

---

62 
Работа 29. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧ-